CN113999326A

CN113999326A - 一种羊栖菜多糖的高效提取方法

Info

Publication number: CN113999326A
Application number: CN202111417852.7A
Authority: CN
Inventors: 高战元; 李聪辉; 廖忠海; 池陈龙; 池胜
Original assignee: Wenzhou Bozhi Biotechnology Co ltd
Current assignee: Wenzhou Bozhi Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-11-26
Filing date: 2021-11-26
Publication date: 2022-02-01

Abstract

本发明涉及一种羊栖菜多糖的高效提取方法，所述方法包括以下步骤：羊栖菜脱砷处理：将清洗干净的新鲜羊栖菜放入超声波清洗机中并向超声波清洗机的浸泡液中添加过氧化氢进行脱砷处理；羊栖菜烘干粉碎步骤：将脱砷处理后的羊栖菜清洗干净，去除羊栖菜上残留的过氧化氢，将去除了过氧化氢的羊栖菜沥水后进行烘干处理，将烘干处理后的羊栖菜进行粉碎处理；羊栖菜脱脂步骤：羊栖菜水浴步骤；纤维素酶添加步骤：将纤维素酶添加至经过水浴处理的所述混合液中进行充分酶解形成酶解液，充分酶解后将所述酶解液进行灭活处理；细胞破碎步骤、酶解液浓缩步骤、离心处理步骤、脱色处理步骤、提取处理步骤、多糖干燥成型步骤。

Description

一种羊栖菜多糖的高效提取方法

技术领域

本发明涉及羊栖菜提取领域，特别是涉及一种羊栖菜多糖的高效提取方法。

背景技术

海洋藻类羊栖菜，属褐藻门马尾藻属，是一种多年生海藻，又称海大麦，是传统的食用海藻。羊栖菜在我国沿海北自辽东半岛，南至广东雷州半岛都有生长，其中在温州洞头有我国最大的人工养殖基地。羊栖菜营养丰富，含有多种活性物质，具有较高的开发和利用价值。已有研究表明羊栖菜具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、增强机体免疫力等功效，是一种高蛋白、低脂肪、富含多种活性成分的药食同源海藻。羊栖菜富含的多酚类物质、多糖和蛋白质是其生物活性成分的主要来源。其褐藻多酚和羊栖菜多糖具有抗氧化、抗菌、抗病毒以及抗肿瘤活性。

然而，从已有文献可以看出，关于羊栖菜的研究开发现多集中在其褐藻多糖和甾醇类化合物成分的提取及功能应用方面，但是传统的羊栖菜的多糖提取效率和提取量不高，导致羊栖菜的利用率过低。

发明内容

基于此，有必要针对传统的羊栖菜的多糖提取效率和提取量不高，导致羊栖菜的利用率过低的技术问题，提供一种羊栖菜多糖的高效提取方法。

一种羊栖菜多糖的高效提取方法，所述方法包括以下步骤：

羊栖菜脱砷处理：将清洗干净的新鲜羊栖菜放入超声波清洗机中并向超声波清洗机的浸泡液中添加过氧化氢进行脱砷处理；

羊栖菜烘干粉碎步骤：将脱砷处理后的羊栖菜清洗干净，去除羊栖菜上残留的过氧化氢，将去除了过氧化氢的羊栖菜沥水后进行烘干处理，将烘干处理后的羊栖菜进行粉碎处理；

羊栖菜脱脂步骤：将羊栖菜粉末中加入乙醇溶液中，混合搅拌进行充分脱脂处理；

羊栖菜水浴步骤：将脱脂后的羊栖菜碎渣和水进行混合搅拌均匀形成混合液，对所述混合液进行水浴处理；

纤维素酶添加步骤：将纤维素酶添加至经过水浴处理的所述混合液中进行充分酶解形成酶解液，充分酶解后将所述酶解液进行灭活处理；

细胞破碎步骤：将灭活处理后的所述酶解液放置在细胞粉碎仪中进行细胞破碎；

酶解液浓缩步骤：将细胞破碎处理后的所述酶解液进行浓缩处理；

离心处理步骤：将浓缩处理后的所述酶解液进行离心处理，取得上清液，并将所述上清液进行浓缩处理成为浓缩液；

脱色处理步骤：向浓缩液中加入双氧水进行脱色处理，脱色处理完成后进行过滤处理；

去蛋白处理步骤：去除脱色处理后的浓缩液中的蛋白，随后对去除蛋白的浓缩液进行离心处理，对离心处理后得到的上清液进行过滤得到提取液；

提取处理步骤：将所述提取液中加入乙醇溶液进行乙醇沉淀得到多糖沉淀物；

多糖干燥成型步骤：将所述多糖沉淀物进行减压干燥处理得到羊栖菜多糖。

在其中一个实施例中，在所述离心处理步骤中，对离心处理产生的沉淀物进行再次离心处理，重复三次以上，将沉淀物多次离心处理后产生的上清液混合在一起。

在其中一个实施例中，在所述羊栖菜烘干粉碎步骤中，将进行粉碎处理过60目筛至8 0目筛。

在其中一个实施例中，在所述羊栖菜烘干粉碎步骤中，所述烘干温度在55摄氏度至65摄氏度。

在其中一个实施例中，在所述羊栖菜脱砷处理中，每千克新鲜羊栖菜放置1升至3升的浓度为50%至70%的过氧化氢。

在其中一个实施例中，在所述羊栖菜脱砷处理中，超声波的频率调至45KHz至60KHz，时间条件为15分钟至30分钟。

在其中一个实施例中，在所述羊栖菜脱脂步骤中，羊栖菜粉末与浓度为80%以上的乙醇溶液按照1:10至1:20的质量体积比混合搅拌，脱脂时间5小时至10小时。

在其中一个实施例中，在羊栖菜水浴步骤中，水浴温度为45摄氏度至55摄氏度。

在其中一个实施例中，在所述纤维素酶添加步骤中，纤维素酶的添加量与烘干处理后的羊栖菜的质量比为3%至 6%。

在其中一个实施例中，在所述脱色处理步骤中，所述浓缩液中加入双氧水的体积比为10：1至15:1，双氧水的浓度为40%至50%，温度为45摄氏度至60摄氏度

上述羊栖菜多糖的高效提取方法步骤简练精妙、容易操控，对羊栖菜中的多糖的提取效率高、提取量大，极大地提高了羊栖菜的利用率，降低了生产成本。可以将羊栖菜中的多糖充分且高效地提取出来。

附图说明

图1为一个实施例中羊栖菜多糖的高效提取方法的流程示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

请参阅图1，本发明提供了一种羊栖菜多糖的高效提取方法，所述方法包括以下步骤：

步骤110：羊栖菜脱砷处理：将清洗干净的新鲜羊栖菜放入超声波清洗机中并向超声波清洗机的浸泡液中添加过氧化氢进行脱砷处理；

其中，在本实施例中，新鲜的羊栖菜指的是健壮的、无枯萎、无烂叶的在两天内采下的羊栖菜。

具体的，取新鲜的羊栖菜水洗干净并做沥水处理，将沥水后的羊栖菜放入超声波清洗机中并向超声波清洗机的浸泡液中添加过氧化氢进行脱砷处理。在本实施例中，每千克新鲜羊栖菜放置1升至3升的浓度为50%至70%的过氧化氢。进一步地，每千克新鲜羊栖菜放置1.5升至2.5升的浓度为56%至66%的过氧化氢。具体的，每千克新鲜羊栖菜放置2升的浓度为60%的过氧化氢。在其中一个实施例中，超声波的频率调至45KHz至60KHz，时间条件为15分钟至30分钟。进一步地，超声波的频率调至48KHz至54KHz，时间条件为18分钟至26分钟。具体的，超声波的频率调至50KHz，时间条件为22分钟。

步骤120：羊栖菜烘干粉碎步骤：将脱砷处理后的羊栖菜清洗干净，去除羊栖菜上残留的过氧化氢，将去除了过氧化氢的羊栖菜沥水后进行烘干处理，将烘干处理后的羊栖菜进行粉碎处理。

其中，在其中一个实施例中，将进行粉碎处理过60目筛至8 0目筛。所述烘干温度在55摄氏度至65摄氏度。

具体的，将脱砷处理后的羊栖菜清洗干净，去除羊栖菜上残留的过氧化氢，将去除了过氧化氢的羊栖菜沥水后进行烘干处理，烘干温度在55摄氏度至65摄氏度，进一步地，烘干温度在58摄氏度至62摄氏度。具体的，烘干温度在60摄氏度。将烘干处理后的羊栖菜进行粉碎处理。将进行粉碎处理过60目筛至8 0目筛。进一步地，将进行粉碎处理过65目筛至75目筛。具体的，将进行粉碎处理过70目筛。

步骤130：羊栖菜脱脂步骤：将羊栖菜粉末中加入乙醇溶液中，混合搅拌进行充分脱脂处理。

其中，脱脂步骤就是为了去除羊栖菜粉末中的脂类物质。

具体的，将羊栖菜粉末中加入乙醇溶液中，混合搅拌进行充分脱脂处理。在其中一个实施例中，羊栖菜粉末与浓度为80%以上的乙醇溶液按照1:10至1:20的质量体积比混合搅拌，脱脂时间5小时至10小时。进一步地，羊栖菜粉末与浓度为90%以上的乙醇溶液按照1:13至1:16的质量体积比混合搅拌，脱脂时间6小时至8小时。具体的，羊栖菜粉末与浓度为98%的乙醇溶液按照1:14的质量体积比混合搅拌，脱脂时间6小时。

步骤140：羊栖菜水浴步骤：将脱脂后的羊栖菜碎渣和水进行混合搅拌均匀形成混合液，对所述混合液进行水浴处理。

具体的，在其中一个实施例中，水浴温度为45摄氏度至55摄氏度。进一步地，在本实施例中，水浴温度为48摄氏度至52摄氏度。具体的，水浴温度为50摄氏度。50摄氏度的水浴温度，既可以保证纤维素酶具有较高的活性，以增加酶解速度，又可以避免将生物酶灭活，是本发明的一个核心发明点之一。

步骤150：纤维素酶添加步骤：将纤维素酶添加至经过水浴处理的所述混合液中进行充分酶解形成酶解液，充分酶解后将所述酶解液进行灭活处理。

具体的，将纤维素酶添加至经过水浴处理的所述混合液中进行充分酶解形成酶解液，在其中一个实施例中，纤维素酶的添加量与烘干处理后的羊栖菜的质量比为3%至 6%。具体的，纤维素酶的添加量与烘干处理后的羊栖菜的质量比为4.5%。充分酶解后将所述酶解液进行灭活处理。具体的，将所述酶解液在90摄氏度下加热10分钟，使得所述酶解液中的生物酶灭活。需要说明的是，90摄氏度下加热10分钟，一方面可以在较短时间内快速将所述酶解液中的生物酶灭活，另一方面，可以避免其他物质因高温变质。

步骤160：细胞破碎步骤：将灭活处理后的所述酶解液放置在细胞粉碎仪中进行细胞破碎；

具体的，将灭活处理后的所述酶解液放置在细胞粉碎仪中进行细胞破碎，以使得羊栖菜中的多糖被充分释放出来，以提高羊栖菜的利用率，增加羊栖菜多糖的提取量和提取效率。

步骤170：酶解液浓缩步骤：将细胞破碎处理后的所述酶解液进行浓缩处理。

具体的，将细胞破碎处理后的所述酶解液放置在浓缩器中进行浓缩处理，去除所述酶解液中过多的水分，以便于后期对所述酶解液进行离心处理。

步骤180：离心处理步骤：将浓缩处理后的所述酶解液进行离心处理，取得上清液，并将所述上清液进行浓缩处理成为浓缩液。

具体的，将浓缩处理后的所述酶解液进行离心处理，取得上清液，并将所述上清液进行浓缩处理成为浓缩液。为了进一步地提高羊栖菜多糖的提取量和提取效率，在其中一个实施例中，对离心处理产生的沉淀物进行再次离心处理，并重复上述操作三次以上，将沉淀物多次离心处理后产生的上清液混合在一起。

步骤190：脱色处理步骤：向浓缩液中加入双氧水进行脱色处理，脱色处理完成后进行过滤处理。

具体的，在其中一个实施例中，所述浓缩液中加入双氧水的体积比为10：1至15:1，双氧水的浓度为40%至50%，温度为45摄氏度至60摄氏度。进一步地，所述浓缩液中加入双氧水的体积比为12：1至14:1，双氧水的浓度为42%至46%，温度为50摄氏度至56摄氏度。具体的，所述浓缩液中加入双氧水的体积比为13:1，双氧水的浓度为44%，温度为54摄氏度。脱色处理去除浓缩液中的杂色。

步骤200：去蛋白处理步骤：去除脱色处理后的浓缩液中的蛋白，随后对去除蛋白的浓缩液进行离心处理，对离心处理后得到的上清液进行过滤得到提取液。

具体的，采用Sevage法除去浓缩液中的蛋白，随后对去除蛋白的浓缩液进行离心处理，在其中一个实施例中，对离心处理产生的沉淀物进行再次离心处理，并重复上述操作三次以上，将沉淀物多次离心处理后产生的上清液混合在一起，以进一步地提高羊栖菜多糖的提取量和提取效率。对离心处理后得到的上清液进行过滤得到提取液。

步骤210：提取处理步骤：将所述提取液中加入乙醇溶液进行乙醇沉淀得到多糖沉淀物。

具体的，将所述提取液中加入乙醇溶液进行乙醇沉淀得到多糖沉淀物，按照1：8至1:12的质量比进行提取液和乙醇溶液的混合，乙醇溶液的浓度为70%至90%。具体的，按照1：10的质量比进行提取液和乙醇溶液的混合，乙醇溶液的浓度为80%。

步骤220：多糖干燥成型步骤：将所述多糖沉淀物进行减压干燥处理得到羊栖菜多糖。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims

1.一种羊栖菜多糖的高效提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述离心处理步骤中，对离心处理产生的沉淀物进行再次离心处理，重复三次以上，将沉淀物多次离心处理后产生的上清液混合在一起。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述羊栖菜烘干粉碎步骤中，将进行粉碎处理过60目筛至8 0目筛。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述羊栖菜烘干粉碎步骤中，所述烘干温度在55摄氏度至65摄氏度。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述羊栖菜脱砷处理中，每千克新鲜羊栖菜放置1升至3升的浓度为50%至70%的过氧化氢。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述羊栖菜脱砷处理中，超声波的频率调至45KHz至60KHz，时间条件为15分钟至30分钟。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述羊栖菜脱脂步骤中，羊栖菜粉末与浓度为80%以上的乙醇溶液按照1:10至1:20的质量体积比混合搅拌，脱脂时间5小时至10小时。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在羊栖菜水浴步骤中，水浴温度为45摄氏度至55摄氏度。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在所述纤维素酶添加步骤中，纤维素酶的添加量与烘干处理后的羊栖菜的质量比为3%至 6%。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述脱色处理步骤中，所述浓缩液中加入双氧水的体积比为10：1至15:1，双氧水的浓度为40%至50%，温度为45摄氏度至60摄氏度。