CN113773315A - 细胞周期蛋白依赖性激酶2（cdk2）高选择性氘代抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及通式(1)的化合物及其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物，或其多晶型物，其中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R11，R12，R13，R14，R15，R16如本文所定义，涉及包含这种化合物和盐的药物组合物，其作为细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)高选择性抑制剂，以及使用这种化合物治疗或预防由CDK2调节失调导致的病症，如乳腺癌，卵巢癌等。
Figure DSA0000211997280000011

Description

细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)高选择性氘代抑制剂
发明领域
本发明属于新医药技术领域，涉及式(1)至式(5)的化合物包含这种化合物和盐的药物组合物，以及它们的制备和应用。式(1)至式(5)的化合物，它们的盐和药物组合物表现为CDK2高选择性氘代抑制剂，可用于治疗异常细胞增殖性疾病，例如癌症。
背景
细胞周期失调是癌症的一项重要特点。正常细胞在DNA被破坏后经历细胞周期停滞的能力对于维持基因组完整性至关重要。响应细胞应激因素而停止细胞周期的生化途径称为检查点。检查点功能缺陷引起的遗传修饰会引发肿瘤。对与检查点信号通路调控有关的机制的理解，对于开发新型化学治疗剂以治疗与细胞周期活性失调有关的疾病或病症的策略具有重要的临床意义。当前，对于可用于治疗此类疾病和病症的方法和试剂的需求尚未得到满足。
概述
因此，在各个方面，本发明提供了对细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)具有抑制活性的氘代吡啶并嘧啶酮化合物以及此类化合物的药学上可接受的盐，药物组合物和使用此类化合物治疗与细胞周期失调相关的疾病的方法。
在一实施方案中，本发明提供了式(1)的化合物：
Figure RE-GDA0002742102170000011
或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，其中：
R1是5-6元碳环基，其中所述5-6元碳环基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟,羟基,和C1-C4碳烷基，其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,羟基,氰基,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-, 和C1-C4氟烷基，
R2是一个取代基选自氢,氘，氟，氯，溴，C1-C4碳烷基,或C1-C4氟烷基,其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN, Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，和C1-C4氟烷基；其中所述C1-C4氟烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl, -C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，C1-C2氟烷基，和C1-C2氟烷氧基；
R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R11,R12,R13,R14和R15分别独立选自氢或氘；
R10是一个取代基选自-NHR16；C1-C2氟烷基；环丙烷基；
Figure RE-GDA0002742102170000021
Figure RE-GDA0002742102170000022
和C1-C2碳烷基；其中所述C1-C2碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟，CH3-(CH2)n-O-，3-5元碳环基，和C1-C2氟烷氧基；
R16是一个取代基选自氢，甲烷基，C1-C3氟烷氧基，
Figure RE-GDA0002742102170000023
Figure RE-GDA0002742102170000024
n为0,1,2,或3；
式(1)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R1可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000025
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R1的结构可以选自下面取代基中的任意一个:
Figure RE-GDA0002742102170000026
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000027
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：H,D,F,Cl,CH3-,CH3-CH2-,-CH2-OH,-CH2-CN,-CH2-C(＝O)NH2,-CH2-CH2-OH, -CH2-CH2-OMe,-CF2H,-CFH2,-CF3,-CH2-CF2H,-CFD2,-CF2D,-CH2-CF2D,-CD2-CF2H, -CD2-CF2D,和-CD3。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,和CD3-。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：-NH2,-NHMe,-CH3,-CH2F,-CD3,乙烷基,环丙烷基,和-CH2-CH2-OMe。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,或CD3-。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝D。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R15＝D。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R1的结构选自四个结构式中的任意一
Figure RE-GDA0002742102170000031
R2的结构可以任选自下面取代基中的意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,或CD3-；R10的结构可以任选自下面取代基中的任意一个： -NH2,-NHMe,-CH3,-CH2F,-CD3,乙烷基,环丙烷基,和-CH2-CH2-OMe。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000032
R2的结构可以任选自CH3-,CF2H-,CF2D-，和CD3-；R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
在一些实施方案中，式(1)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000033
R2的结构可以任选自CH3-,和CD3-；R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
在一些实施方案中，式(1)化合物可以任选自表1中化合物7至213中的任意一个。
在一些实施方案中，本发明提供包含本文所述的任一氘代吡啶并嘧啶酮化合物或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物和药学上可接受的载体或赋型剂的组合物。
在一些实施方案中，本发明提供的药物组和物进一步包含至少一个另外的抗癌药物。
在一些实施方案中，本发明提供的另外的抗癌药物可以是下面选项中的任意一个：芳香酶抑制剂，荷尔蒙治疗剂，选择性***受体降解剂，细胞毒剂，PD-1拮抗剂，PD-L1拮抗剂，AR抑制剂，谷氨酰胺酶抑制剂，CDK4/6抑制剂，CDK9抑制剂，和Akt抑制剂.
在一些实施方案中，本发明提供的另外的抗癌药物可以是下面选项中的任意一个：他莫昔芬，多西他赛，紫杉醇，顺铂，卡培他滨，吉西他滨，异长春花碱，依西美坦,来曲唑，氟维司群，阿那曲唑,或曲妥珠单抗.
在一些实施方案中，本发明提供的药物组和物包含口服施用的剂型，其口服施用的剂型可以是下面选项中的任意一个：片剂，锭剂，丸剂，颗粒,多颗粒和纳米颗粒，液体制剂,乳化剂，凝胶，喷雾剂，或胶囊。
在一些实施方案中，本本发明提供的药物组和物，其口服施用的剂型是单次施用的单位剂型。
在一些实施方案中，本发明提供的药物组和物，式(1),式(2)和式(3)的化合物是含有等于或大于90％(-)-光学对映体和小于90％(+)-光学对映体的混合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的癌症的方法，包括向所述对象施用治疗有效剂量的本文所述的任一式的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述癌症是乳腺癌、三阴性乳腺癌、卵巢癌、成神经细胞瘤、胶质母细胞瘤、B细胞淋巴瘤、***癌、肝细胞癌、急性髓性白血病、或黑色素瘤。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述癌症是卵巢癌。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述卵巢癌是上皮性卵巢癌。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述癌症是乳腺癌。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述乳腺癌是三阴性乳腺癌。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述乳腺癌是HR+HER2-乳腺癌。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述乳腺癌是ER+HER2-乳腺癌。在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，其中所述乳腺癌是耐他莫昔芬乳腺癌。
在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法中，需要治疗的对象是患有ERα+ HER2-晚期或转移性乳腺癌的绝经后妇女或绝经前妇女。
在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，包括向所述对象进一步施用放射疗法，外科手术，化学治疗剂，靶向治疗法，免疫治疗法，或激素治疗法。
在一些实施方案中，本发明提供的的治疗癌症的方法，所用化合物的合适的施用方式可以是下面选项中任一种：静脉内注射，肌肉内注射，肿瘤内注射，真皮内注射，腹膜内注射，皮下注射，口服，局部送药，鞘内送药，吸入送药，经皮送药，或直肠送药。
在一些实施方案中，本发明提供的治疗癌症的方法中，所用化合物的合适的施用频率是一天一次。
在一些实施方案中，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐在需要治疗的对象中治疗CDK2或CDK2调度的细胞周期蛋白过量表达的病症的用途。
在一些实施方案中，在前述化合物，方法和用途的常见实施方案中，其中所述CDK2或CDK2调度的细胞周期蛋白过量表达的病症可以是下面选项中任一种：乳腺癌、三阴性乳腺癌、卵巢癌、成神经细胞瘤、胶质母细胞瘤、B细胞淋巴瘤、***癌、肝细胞癌、急性髓性白血病、和黑色素瘤等癌症。
在一些实施方案中，本发明提供的方法和用途产生以下作用的一种或多种：(1)抑制癌细胞增殖；(2)抑制癌细胞侵袭；或(3)抑制癌细胞转移。
以下描述的本发明化合物的每个实施方案可以与本文所述的本发明化合物的一个或多个其他实施方案组合，所述一个或多个其他实施方案组合与其组合的实施方案不矛盾。
此外，以下描述的本发明的每个实施方案在其范围内设想了本发明化合物的药学上可接受的盐。因此，短语“或其药学上可接受的盐”隐含在本文所述的化合物的描述中。
附图简述
图1显示细胞周期蛋白依赖性激酶和其调度的细胞周期蛋白和其介导的细胞周期。
图2显示实施例40的化合物Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp.163, andComp.164在HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中对肿瘤生长抑制的小鼠体重的表征。
图3显示显示实施例40的化合物Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp. 163,and Comp.164在HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中对肿瘤生长抑制的肿瘤体积的表征。
图4显示显示实施例40的化合物Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp. 163,and Comp.164在HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中对肿瘤生长抑制的相对肿瘤体积的表征。
图5显示显示实施例40的化合物Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp. 163,and Comp.164在HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中对肿瘤生长抑制的肿瘤重量的表征。
详述
定义
如前几个章节以及本说明书其余部分中所使用，除非另有定义，这里使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常所理解的相同的含义。本文引用的所有专利和出版物均通过引用全文纳入本文。
如本文所用，所有百分比，份数和比例均基于本发明化合物或组合物的总重量。与所列成分有关的所有权重均基于活性成分，因此，除非另有说明，不包括市售试剂中可能包含的溶剂或副产品。术语“重量百分比”可以表达为“wt.％”或“％w/w”。
如本文所用，术语“烷基”是指仅由碳和氢原子组成的直链或支链的饱和或不饱和的烃链基团，含有1-10个碳原子(比如，C1-C10烷基，(C1-10)烷基或C1-10烷基)。每当它出现在本文，任一给定数值范围比如“1到10”是指给定范围内的每个整数：“1到 10个碳原子”是指烃链基团可以包含1个碳原子，两个碳原子，三个碳原子，等等，直到并包括10个碳原子。虽然该定义也旨在涵盖术语“烷基”用于定义没有具体指定数值范围的烷基。常见的烷基包括，但不限于，甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，异丁基，异丁基，异丁基，叔丁基，戊基，异戊基，新戊基，己基，庚基，辛基，壬基和癸基。烷基部分可以通过单键与分子的其余部分链接，比如，甲基(-Me)，乙基(-Et), 丙基(-Pr),异丙基(iPr-),正丁基(n-Bu-),正戊基(CH3-(CH2)4-)，叔丁基(-t-Bu) 和3-甲基己基(CH3-(CH2)2-CH(CH3)(CH2)2-)。本文所用的烷基任选可以被一个或多个基团取代。除非另有说明，否则这些取代基是独立选择的。在这种取代具有化学意义的程度上，取代基的总数可以等于烷基部分上氢原子的总数。任选的被取代的烷基通常包含一个到六个任选取代基，有时一至五个任选的取代基，优选一至四个任选的取代基，或更优选一至三个任选的取代基。除非本文另有说明，否则烷基任选可以进一步被一个或多个基团取代，所述任选的基团独立地选自杂烷基，烯基，炔基，环烷基，杂环烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，羟基，硫醇，卤素，氰基(-CN)，氨基(-NH2)，氧代(＝O)，硫代(＝S)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基(-NO2)，三甲基硅烷基，-ORa, -SRa,-S(O)tRa(t＝1or 2),-OC(O)-Ra,-N(Ra)2,-C(O)Ra,-C(O)ORa,-OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(O)ORa,-N(Ra)C(O)Ra,-N(Ra)C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa(t＝1or2),-S(O)tORa(t＝1or 2),-S(O)tN(Ra)2(t＝1or 2),or -PO3(Ra)2,其中每个Ra独立地选自氢，氟烷基，环烷基，碳环基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基，或杂芳基烷基。在一些实施方案中，烷基是C1-C4烷基，所述C1-C4 烷基任选可以进一步被一个或多个氘或氟原子取代的。
烷基上的典型取代基包括羟基，卤素，C1-C4烷氧基，C6-C12芳基，五元环至十二元环的杂芳环，三元环至十二元环的杂环，三元至八元环环烷基，或-N(Ra)2,其中每个 Ra独立地选自氢，氟烷基，环烷基，碳环基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基，或杂芳基烷基。在一些实施方案中，否则烷基任选可以进一步被一个至三个基团取代，所述任选的基团独立地选自羟基，卤素，C1-C4烷氧基，C6-C12芳基，五元环至十二元环的杂芳环，三元环至十二元环的杂环，三元至八元环环烷基，或-N(Ra)2,其中每个Ra独立地选自氢，氟烷基，环烷基，碳环基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基，或杂芳基烷基。
在一些实施方案中，取代的烷基通过参考取代基来命名，例如，“卤代烷基”是指具有特定碳原子数的烷基，其被一个或多个卤素取代基取代，并且通常含有1-6个碳原子，或优选1-4个碳原子或1-2个碳原子和1、2、3个卤原子(例如，C1-C6卤代烷基， C1-C4卤代烷基或C1-C2卤代烷基)。更具体地说，氟化烷基可以具体地称为氟烷基，例如C1-C6，C1-C4或C1-C2氟烷基，它们通常被1、2或3个氟原子取代。因此，C1-C4 氟代烷基包括三氟甲基(-CF3)，二氟甲基(-CF2H)，氟甲基(-CFH2)，二氟乙基(-CH2-CF2H) 等。
如本文所用，术语“烯基”是指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的本文所定义的烷基。通常，烯基具有2至20个碳原子(“C2-C20烯基”)，优选2至12个碳原子(“C2-C12烯基”)，更优选2至8个碳原子(“C2-C8烯基”)，或2至6个碳原子(“C2-C6烯基”)或2至4个碳原子(“C2-C4烯基”)。代表性实例包括但不限于乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基，1-，2-或3-丁烯基等。烯基可以是未取代的或被本文所述适用于烷基的相同基团取代。
如本文所用，术语“炔基”是指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成的如本文所定义的烷基。炔基具有2至20个碳原子(C2-C20炔基)，优选2至12个碳原子 (C2-C12炔基)，更优选2至8个碳原子(C2-C8炔基)或2至6个碳原子(C2-C6炔基)或2-4个碳原子(C2-C4炔基)。炔基的实例包括但不限于乙炔基，1-丙炔基，1-， 2-或3-丁炔基等。炔基可以是未取代的或被适合于烷基的相同基团取代。
如本文所用，术语“酰基”是指一价基团-C(＝O)-烷基，其中烷基部分具有特定数目的碳原子(通常为C1-C8，优选为C1-C6或C1-C4)。任选地被适合于烷基的基团例如F，OH或烷氧基取代。酰基包括未取代的酰基，例如-C(＝O)-CH3(乙酰基)，以及取代的酰基，例如-C(＝O)CF3(三氟乙酰基)，-C(＝O)CH2-OH(羟基乙酰基)，-C (＝O)CH2-OCH3(甲氧基乙酰基)，-C(＝O)CF2H(二氟乙酰基)等。
如本文所用，术语“芳基”是指苯环或稠合苯环***，例如蒽，菲或萘环***。“芳基”基团的实例包括但不限于苯基，联苯基，萘基，茚基，蓝油烃基，芴基，蒽基，菲基，四氢萘基，茚满基，菲啶基等。除非另有说明，否则术语“芳基”还包括芳族烃基的每个可能的位置异构体，例如在1-萘基，2-萘基，5-四氢萘基，6-四氢萘基，1-菲啶基，2-菲啶基，3-菲基，4-菲基，7-菲基，8-菲基，9-菲基和10-菲基等。一种优选的芳基是苯基。芳基可以是未取代的或被如本文所述的适用于烷基或环烷基的那些取代基取代。
如本文所用，术语“芳基烷基”是指如本文所述的通过亚烷基或类似的连接基与基础分子连接的芳基。芳基基团通过环和连接基中碳原子的总数来描述。因此，苄基是C7- 芳基烷基，苯乙基是C8-芳基烷基。通常，芳基烷基具有7-16个碳原子(C7-C16 芳基烷基)，其中芳基部分具有6-12个碳原子并且亚烷基部分具有1-4个碳原子。这样的基团也可以表示为C1-C4亚烷基-C6-C12芳基。
如本文所用，术语“环烷基”是指仅包含碳和氢并且可以是饱和或部分不饱和的非芳族，单环，螺环，桥联或稠合的双环或多环环***，并且该环***为通过环烷基环的碳原子连接至基础分子。环烷基包括在环中具有3至10个碳原子的基团(即(C3-10) 环烷基或C3-10环烷基)。通常，本发明的环烷基含有3至12个碳原子，优选3至10 个碳原子，更优选3至8个碳原子。在本文中，无论何时出现，诸如“3至10”的数值范围是指给定范围内的每个整数，例如“3至10个碳原子”是指环烷基可以由3个碳原子等组成，直至最多，并包含10个碳原子。环烷基的代表性实例包括但不限于以下基团：环丙基，环丁基，环戊基，环戊烯基，环己基，环己烯基，环庚基，环辛基，环壬基，环癸基，降冰片基，环庚基，环庚烯基，八氢茚满基，八氢并环戊二烯基，金刚烷基，二环-[1,1,1]戊基，二环-[2,2,1]-庚基，二环-[2,2,2]-辛基等。除非在说明书中另外特别说明，否则环烷基任选地被一个或多个独立地被以下的取代基取代：烷基，杂烷基，烯基，炔基，环烷基，杂环烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，羟基，硫醇，卤素，氰基(-CN)，氨基(-NH2)，氧代(＝O)，硫代(＝S)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基(-NO2)，三甲基硅烷基，-ORa,-SRa,-S(O)tRa(t＝1or 2),-OC(O)-Ra, -N(Ra)2,-C(O)Ra,-C(O)ORa,-OC(O)N(Ra)2,-C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(O)ORa,-N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(NRa)N(Ra)2,-N(Ra)S(O)tRa(t＝1or 2),-S(O)tORa(t＝1 or 2),-S(O)tN(Ra)2(t＝1or 2),or-PO3(Ra)2，其中每个Ra独立地为氢，烷基，氟代烷基，环烷基，环烷基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基或杂芳基烷基。在一些实施方案中，环烷基未被取代或被如本文所述适用于烷基的相同基团取代。在一些实施方案中，本文使用的环烷基是未取代的或取代的环戊基或环己基。
如本文所用，术语“烷氧基”是指基团-O-烷基，包括1至8个具有直链，支链，环状构型的碳原子，以及通过氧与母体结构连接的组合。实例包括但不限于甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，环丙氧基和环己氧基。“低级烷氧基”是指含有1-6个碳的烷氧基。
如本文所用，术语“取代的烷氧基”是指其中烷基成分被取代的烷氧基(即，-O-(取代的烷基))。除非在说明书中另外具体说明，否则烷氧基的烷基部分任选地被一个或多个独立地选自烷基，杂烷基，烯基，炔基，环烷基，杂环烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基的取代基取代的取代基，羟基，硫醇，卤素，氰基(-CN)，氨基(-NH2)，氧代(＝O)，硫代(＝S)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基(-NO2)，三甲基硅烷基，-ORa, -SRa,-S(O)tRa(t＝1or2),-OC(O)-Ra,-N(Ra)2,-C(O)Ra,-C(O)ORa,-OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(O)ORa,-N(Ra)C(O)Ra,-N(Ra)C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa(t＝1or 2),-S(O)tORa(t＝1or 2),-S(O)tN(Ra)2(t＝1or 2),or -PO3(Ra)2，其中每个Ra独立地为氢，烷基，氟代烷基，环烷基，环烷基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基或杂芳基烷基。
如本文所用，术语“氨基”或“胺”是指-N(Ra)2基团，其中每个Ra独立地为氢，烷基，氟代烷基，环烷基，环烷基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基或杂芳基烷基，除非在说明书中另有特别说明。当-N(Ra)2基团具有除氢以外的两个Ra取代基时，它们可以与氮原子结合形成4、5、6或7元环。例如，-N(Ra)2旨在包括但不限于1-吡咯烷基和4-吗啉基。除非在说明书中另外具体说明，否则氨基任选地被一个或多个独立地为以下的取代基取代：烷基，杂烷基，烯基，炔基，环烷基，杂环烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，羟基，硫醇，卤素，氰基(-CN)，氨基(-NH2)，氧代(＝O)，硫代(＝S)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基(-NO2)，三甲基硅烷基，-ORa, -SRa,-S(O)tRa(t＝1or 2),-OC(O)-Ra,-N(Ra)2,-C(O)Ra,-C(O)ORa,-OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(O)ORa,-N(Ra)C(O)Ra,-N(Ra)C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(NRa)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa(t＝1or 2),-S(O)tORa(t＝1or 2),-S(O)tN(Ra)2(t＝1or 2),or -PO3(Ra)2，其中每个Ra独立地为氢，烷基，氟代烷基，环烷基，环烷基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基或杂芳基烷基。
如本文所用，术语“取代的氨基”还指分别如上所述的基团-NHRa和-NRaRa的N-氧化物。N-氧化物可通过用例如过氧化氢或间氯过氧苯甲酸处理相应的氨基来制备。
如本文所用，术语“酰胺”或“酰胺基”是指具有式-C(O)N(R)2或-NHC(O)R 的化学部分，其中R选自氢，烷基环烷基，芳基，杂芳基(通过环碳键合)和杂脂环族(通过环碳键合)，其中每个部分本身可以任选被取代。酰胺的-N(R)2的R可以任选地与其连接的氮一起形成4、5、6或7元环。除非在说明书中另外特别说明，否则酰胺或酰胺基任选地被一个或多个如本文所述的烷基，环烷基，芳基，杂芳基或杂环烷基所述的取代基独立地取代。酰胺可以是与本文公开的化合物连接的氨基酸或肽分子，从而形成前药。制备此类酰胺的方法和具体基团是本领域技术人员已知的，并且可以在精髓文献中容易找到，例如Greene andWuts,Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed.,John Wiley&Sons,NewYork,N.Y.,1999，其全部内容通过引用并入本文。
如本文所用，术语“氰基”是指-C≡N基团。
如本文所用，术语“氟代烷基”是指被一个或多个如上定义的氟代基团取代的如上定义的烷基基团，例如，三氟甲基，二氟甲基，2,2,2-三氟乙基，1-氟甲基-2-氟乙基， -CH2-CH2F，-CH2-CF3等。氟烷基的烷基部分可以如对烷基的上述定义那样被任选地取代。如本文所用，术语“取代的”是指所提及的基团可以具有独立地独立选自例如酰基，烷基，烷基芳基，环烷基，芳烷基，芳基的组的一个或多个另外的基团，基团或基团，碳水化合物，碳酸盐(Ra-OC(＝O)-O-Ra)，杂芳基，杂环烷基，羟基(-OH)，烷氧基(烷基-O-)，芳氧基(Ar-O-)，巯基(-SH)，烷硫基(烷基-S-)，芳硫基(Ar-S-)，氰基，卤素，羰基，酯，硫代羰基，异氰酸根，硫氰酸根，异硫氰酸根，硝基(-NO2)，氧代，全卤代烷基，全氟烷基，磷酸根，甲硅烷基，-S(O)tOwRa(其中t为1或2；w＝0 或1)，-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)或PO3(Ra)2，烷基亚磺酰基，烷基磺酰基，芳基亚磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基亚磺酰基，杂芳基磺酰基，磺酰胺基，亚磺酰基，磺酸根，脲和氨基，包括单取代和二取代的氨基，及其保护的衍生物；其中每个Ra独立地是氢，烷基，氟代烷基，环烷基，环烷基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基或杂芳基烷基。
如本文所用，术语“卤代”或卤素是指氟，氯，溴和碘(F，Cl，Br，I)。优选地，卤素是指氟或氯(F或Cl)。
如本文所用，术语“杂芳基”是指具有众所周知的芳香性特征的单环或稠合双环或多环环系，其包含特定数目的环原子并且包括选自N，O和S中的至少一个杂原子作为环。芳香环中的环成员。杂原子的包含允许5元环和6元环的芳香性。通常，杂芳基包含5至20个环原子(5-20元杂芳基)，优选5至14个环原子(5-14元杂芳基)，更优选5至12个环原子(5-12元杂芳基)。杂芳基环经由杂芳族环的环原子连接至基础分子，从而保持芳香性。因此，6元杂芳基环可以经由环C或N原子连接至基础分子。杂酰基也可与另一个芳基或杂芳基环稠合，或与饱和或部分不饱和的碳环或杂环稠合，条件是该稠合环***上与基本分子的连接点为该环的杂芳族部分的原子***。未取代的杂芳基的实例通常包括但不限于吡咯基，呋喃基，噻吩基，吡唑基，咪唑基，异恶唑基，恶唑基，异噻唑基，噻唑基，1,2,3-***基，1,3,4-***基，1-氧杂-2,3-二唑基，1-氧杂 -2,4-二唑基，1-氧杂-2,5-二唑基，1-氧杂-3,4-二唑基，1-硫杂-2,3-二唑基，1-硫杂 -2,4-二唑基，1-硫杂-2,5-二唑基，1-硫杂-3,4-二唑基，四唑基，吡啶基，哒嗪基，嘧啶基，吡嗪基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，吲哚基，苯并咪唑基，吲唑基，喹啉基，异喹啉基，磳啉基，氮杂喹唑啉基，喹喔啉基，酞嗪基,邻苯二甲酰基，1,5-萘啶基， 1,6-萘啶基，1,7-萘啶基，1,8-萘啶基，2,6-萘啶基，2,7-萘啶基，嘌呤基，三嗪基，萘啶基，咔唑基，苯并***基，吡咯并[2,3-b]吡啶基，吡咯并[2,3-c]吡啶基，吡咯并 [3,2-c]吡啶基，吡咯并[3,2-b]吡啶基，咪唑基[4,5-b]吡啶基，咪唑基[4,5-c]吡啶基，吡唑并[4,3-d]吡啶基，吡唑并[4,3-c]吡啶基，吡唑并[3,4-c]吡啶基，吡唑并[3,4-b] 吡啶基，异吲哚基，吲唑基，咪唑并[1,2-a]吡啶基，咪唑并[1,5-a]吡啶基，吡唑并 [[1,5-a]吡啶基，吡咯并[1,2-b]哒嗪基，咪唑并[1,2-c]嘧啶基，吡啶并[3,2-d]嘧啶基，吡啶并[4,3-d]嘧啶基，吡啶并[2,3-d]嘧啶基，吡啶并[2,3-b]吡嗪基，吡啶并[3,4-b] 吡嗪基，嘧啶并[5,4-d]嘧啶基，吡嗪并[2，3-b]吡嗪基，和嘧啶并[4,5-d]嘧啶基。在一些实施方案中，5元或6元杂芳基选自吡咯基，呋喃基，噻吩基，吡唑基，咪唑基基，异恶唑基，恶唑基，异噻唑基，噻唑基，***基，吡啶基，嘧啶基或哒嗪基环。如本文进一步所述，杂芳基是未取代的或被取代的。
除非另有说明，否则本文描述为任选取代的杂芳基部分可以被一个或多个独立选择的取代基取代。取代基的总数可以等于杂芳基部分上的氢原子的总数，在这种取代具有化学意义的范围内，并且在芳基和杂芳基环的情况下保持芳香性。任选取代的杂芳基基团通常具有1-5个任选取代基，优选1-4个任选取代基，优选1-3个任选取代基，或更优选1-2个任选取代基。适用于杂芳基环的任选基团包括但不限于：烷基，杂烷基，烯基，炔基，环烷基，杂环烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，羟基，硫醇，卤素，氰基(-CN)，氨基(-NH2)，氧代(＝O)，硫代(＝S)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基(-NO2)，三甲基硅烷基，-ORa,-SRa,-S(O)tRa(t＝1 or 2),-OC(O)-Ra,-N(Ra)2, -C(O)Ra,-C(O)ORa,-OC(O)N(Ra)2,-C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(O)ORa,-N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2,-N(Ra)C(NRa)N(Ra)2,-N(Ra)S(O)tRa(t＝1or 2),-S(O)tORa(t＝1 or 2),-S(O)tN(Ra)2(t＝1 or 2),or-PO3(Ra)2，其中每个Ra独立地为氢，烷基，氟代烷基，环烷基，环烷基烷基，芳基，芳烷基，杂环烷基，杂芳基或杂芳基烷基。在一些实施方案中，环烷基未被取代或被如本文所述适用于烷基的相同基团取代。
如本文所用，术语“杂芳基烷基”是指如本文所述的杂芳基，其通过亚烷基连接基连接至基础分子，并且与“芳基烷基”的不同之处在于芳族部分的至少一个环原子是杂原子。杂芳基烷基有时根据在环和连接基中结合的非氢原子总数(例如，C，N，S和O) (取代基除外)在本文中描述。例如，吡啶基甲基可以被称为“C7”-杂芳基烷基。通常，未取代的杂芳基烷基含有6-20个非氢原子(包括C，N，S和O)，其中杂芳基部分通常具有5-12个原子，亚烷基部分具有1-4个原子，并且可以表示为-C1-C4亚烷基 -5-12元杂芳基。在一些实施方案中，杂芳基烷基被描述为-L-杂芳基烷基，其中杂芳基烷基具有所示的环原子数，并且-L-是指亚烷基连接基。将理解的是，当-L-为键时，该基团为杂芳基。
如本文所用，术语“碳水化合物”是指碳，氢和氧的各种中性化合物中的任一种，例如糖，淀粉和纤维素。碳水化合物可包括单糖，二糖，多糖。碳水化合物的实例可以包括但不限于葡萄糖，乳糖，半乳糖，果糖，右旋糖，麦芽糖，麦芽三糖，麦芽低聚糖，蔗糖，α-D-葡萄糖，β-D-葡萄糖，淀粉和改性淀粉。
如本文所用，术语“环烷基烷基”是指通过亚烷基接头(通常为C1-C4亚烷基)连接至基础分子的环烷基(例如，C3-C8环烷基)。环烷基烷基有时用碳环和连接基中的碳原子总数来描述，通常包含4至12个碳原子(例如C4-C14环烷基烷基)，例如，环丙基甲基是C4-环烷基烷基，环己基乙基是C8-环烷基烷基。环烷基烷基未被取代或在环烷基和/或亚烷基部分上被本文描述为适用于烷基的相同基团取代。
如本文所用，术语“杂环基”，“杂环”或“杂酯环”在本文可互换使用，是指包含指定数目的环原子的非芳族，饱和或部分不饱和的环***，其包括至少一个选自以下的杂原子N，O和S为环成员，其中环S原子可选地被一个或两个氧代基团取代(例如S (＝O)x，x为0、1或2)，并且杂环通过环原子与基础分子连接，所述环原子可以是C 或N。杂环包括一个或多个其他杂环或碳环的螺环，桥连环或稠合环，其中在不饱和度或芳香性上具有化学意义，这种螺环，桥连环或稠合环本身可以是饱和的，部分不饱和的或芳族的，条件是与基础分子的连接点是环***的杂环部分的原子。优选地，杂环含 1-4个选自N，O和S(＝O)x的杂原子作为环成员，更优选1-2个环杂原子，条件是该杂环不含两个毗邻的氧原子。杂环基是未取代的或被合适的取代基取代，例如本文所述适合于烷基或环烷基的相同基团。这种取代基可以存在于与基础分子连接的杂环上或与其连接的螺环，桥连环或稠合环上。另外，环氮原子任选被适用于胺的基团取代，例如烷基，酰基，氨基甲酰基，磺酰基等。
在常见的实施方案中，杂环基团通常包括3-12元杂环基，优选3-10元杂环基，更优选5-6元杂环基，部分饱和杂环的非限制性实例包括：氧杂环丙基，硫杂环丙基，氮杂环丙基，氧杂环丁烷基，氮杂环丁烷基，四氢呋喃基，四氢噻吩基，吡咯烷基，四氢吡喃基，四氢硫吡喃基，哌啶基，1,4-二氧环己基，1,4-氧硫杂环己基，吗啉基，1,4- 二硫杂环己基，哌嗪基，硫代吗啉基，氧杂环庚基，硫杂环庚基，氮杂环庚基，1,4-二氧杂环庚基，1,4-氧硫杂环庚基，1,4-氧氮杂环庚基，1,4-硫氮环庚基，1,4-二氮杂环庚基或1,4-二硫杂环庚基。部分不饱和杂环的非限制性实例包括但不限于2H-吡喃基， 3,4-二氢-2H-吡喃基，5,6-二氢-2H-吡喃基，1,2,3,4-四氢吡啶基或1,2,5,6-四氢吡啶基。桥接，稠合和螺环杂环的非限制性实例包括：2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷，3- 氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷，3-氮杂双环[3.1.0]己烷，8-氮杂二环[2.2.1]辛烷，2-氮杂二环[2.2.1]庚烷，3-氧代八氢-吲哚嗪等。在一些实施方案中，杂环基通常是指含有3-12元环的杂环基，包括碳和非碳杂原子，优选4-7元环。在一些实施方案中，含有3-12元环的杂环基选自氮杂环丁烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，氮杂环戊烷基，二氮杂环戊烷基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，四氢噻吩基，四氢硫吡喃基，吗啉基和硫代吗啉基环，在这种取代具有化学意义程度上，其各自是任选取代，如对特定取代基所述的。
如本文所用，术语“杂环烷基”可用于描述特定大小的杂环基，通过特定长度的亚烷基与基础分子连接。通常，该基团通过C1-C4亚烷基连接基础分子和任选取代的3-12 元杂环。杂环烷基可以任选地被适合于杂环的基团取代。
如本文所用，术语“羟基”是指“-OH”基团。
如本文所用，术语“氧代”是指“＝O”部分。
取代基本身可以被取代，例如，环烷基取代基本身可以在其一个或多个环碳上具有卤化物取代基。术语“任选地被取代”是指被指定的基团，基团或部分取代。
当任何变量(例如，R1)在化合物的式的基团中出现多次以上时，其在每次出现时的定义独立于其在每次出现时的定义。例如，如果显示一个基团被最多0-2个R1取代，那么该基团可以可选地被最多两个R1取代，每个R1出现均独立于R1的定义进行选择。当列出的取代基没有指出该取代基通过其与给定式化合物的其余部分键合的原子时，则该取代基可以与该取代基中的任何原子键合。只有当取代基和/或变量的组合产生稳定的化合物时，这些组合才可行。
如本文所用，单数形式“一个”，“一种”和“所述”包括复数指代。
如本文所用，术语“约”通常是指包括由本领域的普通技术人员所确定的包括变化和可接受的误差范围内的特定数值，这将部分取决于该数值如何测量或确定，即测量***的局限性。例如，“约”可以表示零变化，和变化范围是给定数值的±20％，±10％或±5％。
如本文所用，术语“二线疗法”是指在初始治疗(一线疗法)无效或停止工作时进行的治疗。
如本文所用，“对映体纯度”(％ee)是指特定对映体相对于其他对映体的相对存在量，以百分比表示。例如，如果一个化合物(可能具有(R)-或(S)-异构体构型) 以消旋体存在，相对于(R)-或(S)-异构体，其对映体纯度约为50％。如果该化合物具有一种优先于另一种的异构体形式，例如80％(S)-异构体和20％(R)-异构体，则该化合物相对于(S)-异构体形式的对映体纯度为80％。化合物的对映体纯度可以通过本领域中已知的多种方法来确定，包括但不限于使用手性载体的色谱法，偏振光旋转的偏振测量，使用手性位移试剂的核磁共振波谱，包括但不限于：不限于含镧系元素的手性络合物或Pirkle试剂，或使用手性化合物如Mosher酸将化合物衍生化，然后进行色谱或核磁共振波谱分析。如本文所用，术语“对映体富集”和“非外消旋的”是指这样的组合物，其中一种对映体的重量百分比大于外消旋组合物的对照混合物中的一种对映体的重量百分比(例如，重量比大于1：1)。例如，(S)-对映体的对映体富集制剂是指相对于(R)-对映体具有大于50重量％的(S)-对映体的化合物的制剂，例如至少75％重量，或例如至少80重量％。在一些实施方案中，富集可以显着大于80重量％，从而提供“基本上对映体富集”或“基本上非外消旋”的制剂，其是指具有至少85重量％的一种对映体的组合物的制剂。相对于其他对映体，例如至少90重量％，或例如至少95重量％。术语“纯对映体”或“实质上纯对映体”是指包含至少98％的单一对映体和少于2％的相反对映体的组合物。在一些实施方案中，就每单位质量而言，对映体富集的组合物具有比该组合物的外消旋混合物更高的效力。对映异构体可以通过本领域技术人员已知的方法从混合物中分离，包括手性高压液相色谱法(HPLC)以及手性盐的形成和结晶。或对映异构体可以通过不对称合成制备。例如,Jacques et al. Enantiomers,Racemates andResolutions,Wiley Interscience,New York(1981)； E.L.Eliel,Stereochemistry ofCarbon Compounds,McGraw-Hill,New York(1962)； and E.L.Eliel and S.H.Wilen,Stereochemistry of Organic Compounds, Wiley-Interscience,New York(1994)。
如本文所用，给定化合物的“消除半衰期”(也称为半衰期，t1/2)测量血药物浓度的变化率。消除半衰期代表单剂量最终部分或多次给药后的身体残留物的代谢和***，但它受组织存储区域相对较慢的流出控制。从全身循环中快速去除并少量存在于组织中的化合物的半衰期较短，从而降低了产生副作用的可能性。消除半衰期由公式t1/ 2＝ln(2)/k≈0.693/k定义。这表明在一个消除半衰期后消除完成为50％，在两个消除半衰期后消除完成为75％，在七个消除半衰期后消除完成为约99％。由于消除代表了化合物从体内的最终去除，消除半衰期还充当了人体中最初吸收的化合物剩余量的决定因素，因此在消除一半化合物后，仍有50％的被吸收化合物保留了下来。两个消除半衰期后仍保留25％，七个消除半衰期后仅保留约1％。消除半衰期是药物手册中报道的半衰期值，表示化合物在体内保持活性的时间。对于高度脂溶性化合物，通常将其测量为血浆水平在很低水平下衰减的半衰期，该水平在单次给药后24-72小时内或在最后一次给药后大约相同的时间段内普遍存在一系列多次剂量的剂量。在单剂给药后任何最初的24小时内，通过任何给药途径，以及在长期治疗期间的几乎所有时间中，最近的剂量均处于化合物缓慢进入的组织与血浆之间达到分布平衡的过程中水。
如本文所用，术语“同位素变体”或“氘转换”是指通过用氘原子取代不包含氘原子的母体化合物中的一个或多个氢而获得的化合物。人们认识到，大多数合成化合物中的元素以天然同位素丰度存在，并导致氘的自然引入。但是，氢的同位素，例如氘的天然同位素丰度相对于本文所述化合物的稳定同位素取代程度并不重要(约0.015％)。因此，如本文所用，在一个位置上将原子指定为氘表明氘的丰度明显大于氘的自然丰度。对于本领域普通技术人员而言显而易见的是，未指定为特定同位素的任何原子是指该原子的稳定同位素。
术语“有此需要”是指有症状或无症状地使某一身体状况缓解，例如缓解乳腺癌，三阴性乳腺癌。有需要的受试者可以是正在接受或未接受治疗，例如与乳腺癌，三阴性乳腺癌有关的疾病的治疗。
如本文所用，术语“动力学同位素效应”是指由化合物中的一个或多个氢原子(H)被氘原子(D)的同位素取代所引起的同位素效应，其可能影响反应速度，例如当限速步骤中断裂或形成的化学键时，由同位素取代引起的化合物的代谢反应速度的变化。
如本文所用，术语“代谢转换”是指由于氘的引入而导致的特定药物的代谢谱的变化，因此与相同药物的非氘代类似物相比，导致产生观察得到的氘代化合物的不同代谢物。此新的代谢产物谱可能导致氘代化合物的独特毒理学谱。
如本文所用，术语“片段”是指分子的特定片段或官能团。化学片段通常是嵌入分子中或附加到分子上的公认化学基团。
如本文所用，术语“口服”(P.O.)是指药物通过口服用的药物途径施用。Per os 缩写为P.O.是指药物用口服的物途径施用。
如本文所使用的，术语“一级同位素效应”是指反应速度的变化，例如当限速步骤中断裂或形成的化学键时，由同位素取代引起的化合物的代谢反应速度的变化。
如本文所用，术语“受试者”是指任何动物(例如哺乳动物)，包括但不限于人类，非人类的灵长类，啮齿类动物等，其将成为特定治疗的接受者。通常，术语“受试者”和“患者”在本文中指的是人类受试者并可互换使用。
如本文所用，术语“***清除率”(CS)表示为每单位时间清除的液体量(L/h或 mL/min)，是各个器官清除的总和，主要是肝脏的大部分已清除。由于肝脏会迅速代谢药物，因此大多数CS(例如BUD和FP)的全身清除率(84和66至90L/hr)接近最大速率，由肝血流确定为90L/hr。但是，对于17-BMP和des-CIC，它们是转化的代谢产物，其表观清除率值更高，表明肝外代谢。全身清除速度越快，治疗指数越高，副作用可能性越低。
如本文所用，术语“互变异构体”是指通过互变异构化进行转换所形成的结构上不同的异构体。“互变异构”是异构化的一种形式，包括质子变质子转移，或质子转移互变异构，这被认为是酸碱化学的一个子集。“质子互变异构”或“质子转移互变异构”涉及质子的迁移，伴随键顺序的改变，通常是单键与相邻双键的互换。在可能存在互变异构的地方(例如在溶液中)，可以达到互变异构体的化学平衡。互变异构的一个例子是酮-烯醇互变异构。酮-烯醇互变异构体的一个具体实例是戊烷-2,4-二酮和4-羟基戊 -3-烯-2-酮互变异构体的相互转化。互变异构的另一个例子是苯酚-酮互变异构。苯酚 -酮互变异构的一个具体例子是吡啶4-4-醇和吡啶4(1R)-1互变异构体的相互转化。
如本文所用，术语“治疗有效量”或“有效量”是指足以实现有益或期望的疗效，包括临床疗效的化合物的量。因此，有效量可能足以，例如，减轻或改善疾病或病症或其一种或多种症状的严重性和/或持续时间，防止与疾病或病症有关的疾病的进展，预防疾病的发生，与疾病或病症相关的一种或多种症状的复发，发展或发作，或增强或改善另一种疗法的预防或治疗效果。有效量还包括避免或基本上减轻不希望的副作用的化合物的量。
如本文所用以及在本领域中众所周知的，“治疗”是一种用于获得有益的或期望的疗效，包括达到临床疗效的方法。有益或理想的临床结果可包括但不限于：减轻或改善一种或多种症状或状况，疾病程度的减轻，疾病状态的稳定(即不恶化)，预防疾病的传播，延缓或缓解，疾病进展的减慢，疾病状态的缓解或减轻以及缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。与未接受治疗的预期生存期相比，“治疗”还可能意味着生存期延长。
如本文所用，术语“分布容积”(Vd)是器官组织内药物的分布情况，并且与药物的亲脂性有关。较大的Vd不一定意味着具有更大的全身效应，因为CS主要以无活性的蛋白结合形式循环。自由的，未结合的形式独立于Vd；蛋白质结合的清除率和程度是更重要的决定因素。
1.基于细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的靶向肿瘤治疗法
蛋白激酶复合物驱动细胞周期转换并由细胞周期蛋白(Cyclin)和细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent Kinase，CDK)组成。真核生物的细胞周期由四个不同的阶段组成：S期(DNA合成期)、M期(***期，发生染色体分离和细胞分列为两个子细胞)，S期和M期被G1和G2两个间隙期隔开，G1期(first gap，合成前期，蛋白质和 RNA合成，合成DNA合成所需的细胞器，主要的细胞生长阶段)和G2期(second gap，合成后期，形成M期驱动染色体的微管)(图1)。当细胞失去有丝***信号或者完全分化时，则退出细胞周期，进入静止期(G0)(Schwartz,et al.,Targeting the Cell Cycle: A New Approach to CancerTherapy.J.Clin.Oncol.2005,23,9408-9421；Malumbres et al.,Milestones in CellDivision:To Cycle or Not To Cycle:A Critical Decision inCancer.Nat.Rev.Cancer 2001,1,222-231)。
大部分成熟的细胞处在G0期。G0期的E2F转录因子(E2F)的基因表达活性被成视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma，Rb)抑制。在需要时，这些细胞可以回到细胞***周期。在有丝***信号刺激下，细胞从G0期进入G1期。促有丝***信号(mitogenic signals)刺激CDK3与cyclin C形成复合物后驱动细胞从G0期进入G1期。(Ren et al., Cyclin C/CDK3promotes Rb-dependent G0 exit,Cell,2004,vol.117,pp.239-51)。而促有丝***信号刺激形成的复合物，cyclin D/CDK4，cyclin D/CDK6，cyclin E/CDK2， cyclin A/CDK2等驱动细胞从G1期进入S期。在G1期,促有丝***信号刺激cyclin D/CDK4和cyclin E/CDK2复合物的形成后，这些复合物磷酸化Rb，释放出E2F转录因子，起动Cyclin E和Cyclin A的转录。CDK2与Cyclin E结合后进一步磷酸化Rb蛋白，起动DNA复制，促使细胞从G1期进入S期。然而，次磷酸化的Rb与E2F转录因子的结合将细胞停滞在G0期。在S期的末期，CDK2与cyclin A结合并促使细胞从S期向G2 期的过渡。CDK1与cyclin A和cyclin B结合导致有丝***的开始。在G2期，Cyclin A被降解，Cyclin B蛋白生成并与CDK1结合，细胞进入M期。正常的细胞周期转换是由于Cyclin A/CDK2,cyclin A/CDK1,and cyclin B/CDK1复合物维持Rb的磷酸化。 Cyclin B的降解导致的Cyclin B/CDK1失活，Rb被两种磷酸酶PP1和PP2A去磷酸化，细胞离开M期回到G1期(See FIG.1；Malumbres,Physiological Relevance of Cell CycleKinases.Physiol.Rev.2011,91,973-1007)
细胞周期由检查点信号通路调控。DNA的完整性的评估发生在G1/S检查点。对染色体复制是否正确的评估发生在S和G2/M检查点(See FIG.1；Ren et al.,Cyclin C/CDK3Promotes Rb-dependent G0 Exit.Cell 2004,vol.117,pp.239-251)。
细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent Kinase，CDK)是一类重要的蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶(Serine/threonine-protein kinase)，是驱动细胞周期转换的关键酶。在细胞周期的不同阶段，CDK可以和相应的细胞周期蛋白(Cyclin)结合形成复合物，其中Cyclin作为调节基团，CDK作为催化基团，催化底物磷酸化，从而推进细胞周期时相的转换。受CDKs调控的细胞周期不同阶段的生化过程包括：细胞周期调控(CDKs 1,2,3,4and6),基因复制(CDKs 7,8,9,11,12,13and 20),DNA 缺陷修补(CDKs 1,3and 9),新陈代谢(CDKs 5and 8),和细胞分化调控(CDKs 1,2, 4and 16)(Malumbres,Cyclin-DependentKinases.Genome Biol.2014,vol.15,p. 122；Lim et al.,CDKs,cyclins and CKIs:rolesbeyond cell cycle regulation, Development,2013,vol.140,pp.3079-3093).
Cyclin E1 and E2(总称cyclin E)通过促进DNA复制的启动和激活CDK2来驱动细胞增殖。Cyclin E/CDK2,和cyclin D/CDK4通过磷酸酯化Rb蛋白来激活对E2F 有响应的基因表达并促进进入细胞S期(Desmedt et al.,Impact of cyclin E, neutrophilelastase and proteinase 3expression levels on clinical outcome in primarybreast cancer patients.Int.J.Cancer,2006,vol.119,pp.2539-2545； Sieuwerts etal.,Which cyclin E prevails as prognostic marker for breast cancer？ Resultsfrom a retrospective study involving 635lymph node-negative breast cancerpatients.Clin Cancer Res.,2006,vol.12,pp.3319-3328)。
CDK2作为驱动细胞进入S期和M期的关键酶，比CDK4/CDK6具有更广泛的底物，它能磷酸化与细胞周期进程相关的蛋白(如p27KIP1和RB)、DNA复制相关蛋白(如 replicationfactors A and C)、组蛋白合成相关蛋白(如NPAT)、中心体复制相关蛋白(如核仁磷酸蛋白(nucleophosmin，NPM))等，是多种致癌信号通路的关键调节剂，其活性对于肿瘤发生过程中增殖控制的丧失至关重要(Asghar et al.,The history and future of targetingcyclin-dependent kinases in cancer therapy,Nature Reviews Drug Discovery,2015,vol.14,pp.130-146)。CDK2还可以与cyclin A结合形成复合物。此复合物是促进S-期DNA复制的启动和激活cyclin B/CDK1并过度到G2-M的必要条件。
细胞周期失调是癌症的一项重要特点。人类肿瘤的产生和进展常常与CDK蛋白本身或其调节因子的异常有关。肿瘤抑制蛋白Rb对细胞周期的调节在预防人类肿瘤中起着不可缺的作用，因为细胞周期蛋白，CDK和Rb的其他上游调节剂的致癌性改变发生在包括乳腺癌在内的多种人类肿瘤中。比如，相对于周围正常的乳腺上皮，约50％的浸润性乳腺癌中出现cyclin D表达升高。在29％-58％的乳腺癌中鉴定出表达cyclin D1 的基因的增殖。Cyclin D1的表达被认为是驱动Rb异常磷酸化和失活的根原，主要在腔 A和腔B中。CyclinE过度表达被发现存在于对CDK 4/6抑制剂失活的肿瘤，卵巢癌和肺癌中(Sante et al.,Recent advances with cyclin-dependent kinase inhibitors: therapeutic agentsfor breast cancer and their role in immune-oncology,Expert Review ofAnticancer Therapy,2019,vol.19,pp.569-587)。
在许多国家，乳腺癌是女性中最常见的非皮肤恶性肿瘤。现有五种不同的乳腺癌分子亚型，分别称为管腔A，管腔B，富含HER2的，基底样和闭合蛋白低，以及类正常的乳腺癌(Prat,et al.,Deconstructing the molecular portraits of breast cancer,Molecular Oncology,2011,vol.5,pp.5-23)。潜在的治疗基因靶标包括***受体(ERα)，孕激素受体(PR)，和/或人类表皮生长因子受体2(HER2)。ERα， PR和HER2缺失的三阴性乳腺癌(TNBC)是最致命的乳腺癌形式(见上述Sante et al.)。
卵巢癌是一组异质性肿瘤。最近的发现表明，卵巢癌由多种不同的疾病组成。上皮性卵巢癌(EOC)仍然是美国最致命的妇科恶性肿瘤。尽管在不同类型的癌症中靶向治疗的最新进展，基于铂的疗法(例如顺铂)仍然是EOC患者的标准治疗方法。高度浆液性卵巢癌(HGSOC)是最常见的亚型(>70％的EOC病例)，占EOC相关死亡率的大部分(Cho et al.,Ovarian Caner,Annu.Rev.Pathol.,2009,vol.4,pp.287-313)。
开发用于三阴性乳腺癌和卵巢癌的新型治疗法仍然是要克服的主要障碍。
通过针对基因组编码区中鉴定出的特定异常，精准医疗被用来降低乳腺癌的死亡率。用抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗)治疗HER2阳性乳腺癌能显着改善该疾病的预后。但靶向治疗的主要挑战是原发性耐药性(Cheng et al.,Diagnostic Pathology, 2013,vol.8,pp.129-138)。他莫昔芬作为激素受体阳性乳腺癌的治疗方法的引用显着降低了过去30年乳腺癌的死亡率。但是，超过30％的患者对内分泌治疗产生抗药性，并导致疾病进展。他莫昔芬耐药性乳腺癌的普遍特征是与增殖相关的基因(cyclin D1) 以及由Myc原癌基因蛋白(MYC)，E2F和Rb调控的基因的表达增加，表明了参与细胞周期从G1相到S相的转变的基因特别重要性(Caldon et al.,Cyclin E2 overexpression is associated with endocrineresistance but not insensitivity to CDK2 inhibition in human breast cancercells,Mol.Cancer Ther.,2012,vol.11,pp.1488-1499)。但是，抗***药物通过下调cyclin D1导致cyclin D1/CDK4活性降低，MYC下调导致p21和p27上调来靶向这些途径。这导致同时抑制CDK2和CDK4活性以及G1-S期阻滞(García-Gutiérrez et al.,MYC OncogeneContributions to Release of Cell Cycle Brakes,Genes,2019,10(3),p.244；Doisneu-Sixou et al.,Estrogen and antiestrogen regulation of cell cycle progressionin breast cancer cells.Endocr Relat Cancer 2003；10,pp.179-186)。
使用CDK抑制剂治疗乳腺癌的最新进展集中于靶向cyclin D/CDK 4/6以治疗HR阳性和HER2阴性的乳腺癌。目前市场上有三种CDK 4/6抑制剂获批用于治疗激素受体阳性、HER2阴性转移性乳腺癌：palbociclib，ribociclib和abemaciclib。正在进行中的临床试验的CDK 4/6抑制剂包括lerociclib。虽然CDK 4/6抑制剂是某些形式的乳腺癌(BC)既定治疗方案的一部分，对CDK4/6抑制不敏感性可由原发性耐药性导致，例如三阴性乳腺癌(TNBC)，或由获得性耐药性导致，例如预先用CDK4/6抑制剂治疗的ER+Her2-乳腺癌。
抑制CDK2提供了使用CDK2抑制剂治疗做为治疗细胞周期失调的癌症的有前途的选项。Cyclin E2表达与ER阳性乳腺癌的不良预后相关。被Cyclin E2诱导的基因特征能预测其对他莫昔芬耐药的乳腺癌或转移性乳腺癌的预后。Cyclin E1过度表达可急性降低体外对***的敏感性.此外,CDK2的激活可能是导致CDK4抑制剂耐药性的机理。此机理可导致对ER+乳腺癌的抑制并能克服对他莫昔芬的获得性耐药性(Caldon et al.Cyclin E2Overexpression Is Associated with Endocrine Resistance but not Insensitivityto CDK2 Inhibition in Human Breast Cancer Cells.Molecular CancerTherapeutics,2012,vol.11,pp.1488-1499)。
但是，在Rb缺陷型的癌细胞中，CDK4/6信号是冗余的；在Rb阳性细胞中，Cyclin E的过度表达或CIP/KIP蛋白的丧失可能通过激活CDK2而绕过CDK4/6抑制。在三阴性乳腺癌(TNBC)中，肿瘤经常表现出Rb蛋白无表达或者Cyclin E的高表达，这都会导致其对于CDK4/6抑制剂不敏感，对CDK2抑制剂敏感(Pernas et al.CDK4/6 inhibition in breastcancer:current practice and future directions,Therapeutic Advances in MedicalOncology,2018,10:1758835918786451)。此外，在TNBC中， CDK2抑制与化学治疗剂和放射疗法具有协同作用，并在耐药病例中恢复其化学和放射敏感性。
目前已获批的以CDK2作为靶标的药物主要有Dinaciclib(SCH727965)，可抑制CDK2, CDK5,CDK1和CDK9，作为治疗慢性淋巴细胞性白血病(CLL)的孤儿药。AT7519(AT7519M, Astex Therapeutics Ltd)已经完成Ⅱ期临床实验，TG02(TragaraPharmaceuticals)Ⅱ期临床实验招募中，Roniciclib(BAY100394,Bayer)完成临床I期，CYC065(Cyclacel Pharmaceuticals)处于I期临床实验阶段。但是也有一些小分子已经从临床开发中停止，比如Milciclib(PHA-848125,Tiziana Life Sciences)和Seliciclib(CYC202， Cyclacel Pharmaceuticals)的Ⅱ期临床实验中止，AG-024322(Pfizer)的I期临床实验中止。(https://www.clinicaltrials.gov)。
CDK2除了在乳腺癌治疗中发挥作用之外，它在其它一些癌症类型中，如卵巢癌、成神经细胞瘤、胶质母细胞瘤、B细胞淋巴瘤、***癌、肝细胞癌、急性髓性白血病、黑色素瘤中都有重要的作用(Tadesse,et al.Cyclin Dependent Kinase 2Inhibitors in CancerTherapy:an Update,Journal of Medicinal Chemistry,2019,vol.62, 4233-4251)。因此，针对CDK2的靶向治疗可能可以在多种疾病中获得应用。除用于肿瘤治疗外，基于CDK2抑制剂的靶向治疗的潜在应用可以扩展到其他疾病，例如传染病，增生性疾病，慢性炎症性疾病，神经退行性疾病或听力下降。
CDK系列蛋白之间的氨基酸序列以及三维结构的高度相似性，使得开发高选择的CDK2的抑制剂很困难。因此，开发高选择性的CDK2抑制剂具有非常广阔的市场前景。
本发明涉及一种新颖的针对CDK2靶标设计的具有亚纳摩尔体外激酶抑制IC50值的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的制备及应用。
2.位置选择性氘取代
随着工业界对氘动力学同位素效应(DIE)以及如何以更先进的方式进行部署的更多了解，氘在药物设计和开发中的作用正在扩大。将氘策略性地引入分子中可以有效地影响构象(大小和形状)，物理性质(例如亲水性或疏水性)，代谢途径或药代动力学和药效学性质。
同位素标记的化合物长期以来一直用于机理研究和作为生化研究的工具。然而，仅在最近才将氘引入活性药物成分中成为改善药物的潜在途径。相反，由于氟的电子性质和相对较小的尺寸，氟化已在药物设计中被广泛研究用以调节给定药物的代谢或脱靶活性(例如，PF-06873600supra；also See Albericio et al.,The pharmaceutical industryin 2018,an analysis of FDA approvals from the perspective of molecules,Molecules,2019,vol.24,pii:E809)。在药物化学家的工具箱中，氟化是调节特定药物代谢的经典选择。例如，PF-06873600((-)-6-(二氟甲基)-8-(((1R，2R)-2- 羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基))氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-one，Comp.5)是1a/2临床研究期的用于治疗晚期乳腺癌的一种选择性且口服可生物利用的细胞周期蛋白依赖性激酶2/4/6(CDK2/4/6)抑制剂。该化合物描述于例如WO 2018033815，美国专利申请号20180044344和美国专利号10233188。引入吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-一个环***的6-位的二氟甲基以改善代谢稳定性(请参见表6的Comp.5的t1/2(t1/2＝2.76hr)与非氟化的Comp.4(t1/2＝2.24hr)。
从C-F键相对于C-H键的长度和大小来看，C-F键
Figure RE-GDA0002742102170000171
与C＝O键
Figure RE-GDA0002742102170000172
排列更紧密，并且比C-H
Figure RE-GDA0002742102170000173
或C-OH键
Figure RE-GDA0002742102170000174
短。氟的电负性更接近氧的电负性，这反映在C-F键的偶极矩更大且在C-H的相反方向上。氟比氢原子适度地具有更多的亲脂性，并且比O-H，C＝O取代基具有更高的亲脂性。预期氢被氟取代将适度增加分子的亲脂性并显着增加分子量(Meanwell,Fluorine and Fluorinated Motifs in the Design and Application ofBioisosteres for Drug Design,J.Med.Chem.,2018, vol.61,pp.5822-5880)。
氘取代是近几十年来出现的一种有吸引力的手段，可以改善药物分子的药代动力学，代谢稳定性。氘苯特那嗪是2017年第一个FDA批准的氘代化学新药(NCE)，用于治疗与亨廷顿病相关的chorea和迟发性运动障碍。目前有20多种氘化药物正在临床开发中，其中6种(BMS-986165，AVP-786，RT001，ALK-001，多纳非尼，HC-1119)已达到III 期临床试验(Cargnin et al.,A primer of deuterium in Drug Design,Future Med. Chem.,2019,vol.11,pp.2039-2042)。
给定药物分子上的策略性氘取代提供了一种能有效且加速开发具有显着差异化的新药的方法，以此满足重要的未满足的医疗需求。
氘可以用符号D或2H表示，也称为重氢。它是氢的稳定，非放射性和自然存在的同位素。氢的普通同位素H被称为Pro，另外两个同位素是氘(一个质子和一个中子)和Tri(一个质子和两个中子)。氢由一个电子和一个质子组成，原子质量约为1.0原子质量单位(AMU)。氘具有单个电子，原子核包含一个中子和一个质子，原子质量约为2.0AMU。关于分子的形状和大小，氘取代氢会生成氘代化合物，该化合物与全氢化合物非常相似 (空间相似)。但是，部分和完全氘代化合物的物理性质被观察到发生变化，例如疏水性降低(Turowski et al.,J.Am.Chem.Soc.,2003,vol.125,p.13836),降低羧酸和酚的酸度(Perrin et al.,J.Am.Chem.Soc.,2007,vol.129,p.4490),和增加胺的碱性(Perrin etal.,J.Am.Chem.Soc.,2005,vol.127,p.9641)。因此，氘代化合物中的氘与其氢原子具有相似的电子云和极性表面。
碳氢键的强度与键的基态振动能的绝对值成正比。该振动能量取决于形成键的原子的质量，并且随着形成键的一个或两个原子的质量增加而增加。C-D键比相应的C-H键具有更低的振动频率和更低的零点能量。由于氘的原子量较大，所以裂解碳-氘(C-D) 共价键所需的能量要大于碳-氢键。较低的零点能量会导致C-D键断裂的活化能较高，而速率(k)较低。该速率效应是主要的氘同位素效应(DIE)，并表示为CH键裂解速率与CD键裂解速率的比率(kH/kD范围约为1(无同位素效应)至50(非常大)同位素效应))。换句话说，当氢被氘代替时，为了观察到DIE，C-H键的裂解步骤必须至少是部分限速的。
为了消除诸如治疗剂之类的异物，动物体内会表达多种酶，例如细胞色素P450酶(CYP)，酯酶，蛋白酶，还原酶，脱氢酶，醛氧化酶(AO)和单胺氧化酶(MAO)，与这些异物发生反应并将其转化为极性更大的中间体或代谢物，以进行肾脏***。此类代谢反应经常涉及将碳氢键(C-H)氧化为碳氧(C-O)或碳-碳(C-C)π键。所产生的代谢物在生理条件下可能是稳定的或不稳定的，并且相对于母体化合物而言可能具有实质上不同的药代动力学，药效学以及急性和长期毒性。对于大多数药物而言，这种氧化通常很快，最终导致每日多次或多次高剂量给药。
对某些疾病最好的治疗是对患者进行全天候或长时间的服药。有充分的文献证明，半衰期较长的药物可能会产生更大的功效并节省成本。
氘取代对分子进行的可能的结构改变是最小的。用重同位素如氘(2H，D)取代具有更大的代谢稳定性，从而具有某些治疗优势，例如，体内半衰期增加，清除率降低，剂量要求降低，安全性提高或疗效提高(Harbeson et al.,Deuerium Medicinal Chemistry: A NewApproach to Drug Discovery and development,MEDCHEM News,2014,pp.8-22)。由于DIE，碳-氘键比适当氘代的药物分子的碳-氢键更稳定，当键断裂是限速步骤时，导致酶促代谢的动力学速率降低约6至10倍，例如，当代谢酶是CYP450酶家族或参与代谢的其他酶(例如单胺氧化酶(MAO)和醛氧化酶(AO))时。
已有某些种类的药物证明了药物的氘化可以改善药代动力学(PK)，药效学(PD)和毒性特征。例如，DIE可通过限制反应性物质(例如三氟乙酰氯)的产生来降低氟烷的肝毒性(参照上述Harbeson et al.)。
在大多数情况下，由氘引起的药理作用差异往往可以忽略不计，例如，非共价药物的氘化对相关药理学指标的生化效能或选择性的影响可忽略不计。氘对药物对CYP代谢稳定性的影响是复杂且不可预测的。许多药物以复杂的方式代谢。CYP催化是一个高度复杂的多步骤过程，其中许多步骤可能会部分或全部限制速率，从而“屏蔽”同位素效应。例如，某些药物上的同位素取代可能不会在代谢或清除中产生明显的同位素效应。缺乏动力学同位素效应可能是由于在药物的整体代谢中缺乏C-H键的作用，或者是由于代谢转换，这导致了其他代谢途径的增强。观察到的DIE(kH/kD)obs可能比kH/kD 小得多，或者在某些情况下完全不存在。
氘取代不能解决每个化合物和每个位置的问题。据报道，由于其化学结构或以氘化动力学同位素作用不明显的方式被代谢，所有FDA批准的药物中只有不到10％可以进行氘化。如果给定的药物分子中存在多个可氧化的软点，则必须对分子和氘代位点进行明智的选择，以利用给定化合物的代谢命运和酶学。对于某些药物，有许多代谢活性位点(软点)，并且在没有测试实际氘代化合物的代谢特性的情况下，很难预测氘代对药物代谢的影响。
此外，其他非CYP清除机制可能占主导地位和钝化所观察到的DIE，例如，已知醛氧化酶(AO)会氧化芳香氮杂环并导致药物快速代谢。据报道，氮杂环药物分子(如卡巴泽兰和唑尼泊利德)具有AO作为清除机制。氘代形式的巴西青霉烯(1-[2H]-咔唑) 和唑尼哌利特(2-[2H]-zoniporide)的体内PK研究表明，尽管体外DIE显着(高达5)，清除机制却很复杂，因此很难预测AO底物的氘化是否会导致体内药代动力学参数的改善(See Goodnow Ed.,Annual Reports In Medicinal Chemistry,vol.50,Academic Press Elsevier,Cambridge,United States,2017,Chapter 14.A decade of deuteration in medicinalchemistry,p.519-538)。
此外，在已知代谢位点用氘降低CYP代谢可将代谢“切换”到另一个位点，导致未观察到DIE(清除率无变化)，甚至没有DIS的逆转(清除率更快)。当被I相酶隔离的异种素在化学反应(例如氧化)之前短暂结合并以各种构象重新结合时，就会发生代谢转换。代谢转换可导致不同比例的已知代谢物以及新的代谢物。这种新的代谢模式可能会或多或少地产生毒性。这样的陷阱不是显而易见的，并且对于任何种类的药物都是不可预测的(Forster,Deuterium isotope effects in the metabolism of drugs and xenobiotic:implications for drug design,Adv.Drug Res.1985,vol.14,pp.1-40)。
此外，即使在已知的代谢位点引入氘，也对代谢物谱产生不可预测的影响。例如，用于治疗HIV的CCR5受体的负变构调节剂maraviroc
Figure RE-GDA0002742102170000191
在人体内具有两个主要的代谢位点(伪苄基甲基和N-烷基)。人类微粒体温育的稳定性研究表明，两个位点都需要氘化以减少体外微粒体清除率。出乎意料的是，与蛋白质药物相比，仅在伪苄基甲基上的氘化实际上加速了微粒体更新(See declaration filed on Nov.16,2010in the prosecutionhistory of US Patent No.7,932,235,2011)。
在某些情况下，药物分子上的氘具有超出仅仅增加代谢稳定性的影响，例如，氘代化合物BMS-986165(用于治疗牛皮癣的酪氨酸激酶2抑制剂)比母体药物更有效和更具选择性。
最后，在给定药物分子的选择性位置上合成氘代化合物绝非易事：一方面，氘代池策略受到范围狭窄和氘代底物成本较高的限制。另一方面，交换方法可能会受到选择性和氘含量低的困扰。
被屏蔽的DIE，代谢转换，CYP催化的代谢反应的复杂性，替代的药物清除机制或代谢位点，氘代氢对代谢反应的影响是高度不可预测的，并且将取决于特定的化合物和分子上的氘取代模式。表明氘掺入的缺乏可预测性的其他研究实例包括：美国专利号 6,332,335,7,678,914,10501427；Fisher et al.,Curr.Opin.Drug Discov.Devel., 2006,vol.9,p.101-109；J.Med.Chem.1991,vol.34,2871-2876；Adv.Drug Res., 1985,vol.14,pp.1-40；前述Harbeson et al.。
3.对细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)具有抑制活性的氘代吡啶并嘧啶酮化合物在一实施方案中，本发明提供了式(2)的化合物：
Figure RE-GDA0002742102170000201
或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
R1可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000202
R2是一个取代基选自氢,氘，氟，氯，溴，C1-C4碳烷基,或C1-C4氟烷基,其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN, Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，和C1-C4氟烷基；其中所述C1-C4氟烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl, -C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，C1-C2氟烷基，和C1-C2氟烷氧基；
R6,R7,R13,R14和R15分别独立选自氢或氘和R6＝R7＝R13＝R14；
R10是一个取代基选自-NHR16；C1-C2氟烷基；环丙烷基；
Figure RE-GDA0002742102170000211
Figure RE-GDA0002742102170000212
和C1-C2碳烷基；其中所述C1-C2碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟，CH3-(CH2)n-O-，3-5元碳环基，和C1-C2氟烷氧基；
R16是一个取代基选自氢，甲烷基，C1-C3氟烷氧基，
Figure RE-GDA0002742102170000213
Figure RE-GDA0002742102170000214
n为0,1,2,或3；
式(2)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000215
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,和CD3-。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R15＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,或CD3-。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-，和R15＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R6＝R7＝R13＝R14＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R15＝D。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-；R6＝R7＝R13＝R14＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(2)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-；R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-；R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-和 R15＝D。
在一实施方案中，本发明提供了式(3)的化合物：
Figure RE-GDA0002742102170000221
或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
R2是一个取代基选自氢,氘，氟，氯，溴，C1-C4碳烷基,或C1-C4氟烷基,其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN, Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，和C1-C4氟烷基；其中所述C1-C4氟烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl, -C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，C1-C2氟烷基，和C1-C2氟烷氧基；
R6,R7,R13,R14和R15分别独立选自氢或氘和R6＝R7＝R13＝R14；
R10是一个取代基选自-NHR16；C1-C2氟烷基；环丙烷基；
Figure RE-GDA0002742102170000222
Figure RE-GDA0002742102170000223
和C1-C2碳烷基；其中所述C1-C2碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟，CH3-(CH2)n-O-，3-5元碳环基，和C1-C2氟烷氧基；
R16是一个取代基选自氢，甲烷基，C1-C3氟烷氧基，
Figure RE-GDA0002742102170000224
Figure RE-GDA0002742102170000225
n为0,1,2,或3；
式(3)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,和CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R15＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,或CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-，和R15＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R6＝R7＝R13＝R14＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R15＝D。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-；R6＝R7＝R13＝R14＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-；R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D和R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-。
在一些实施方案中，式(3)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-；R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-或CD3-和 R15＝D。
在一实施方案中，本发明提供了式(4)的化合物：
Figure RE-GDA0002742102170000231
或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
R1可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000232
R2是一个取代基选自氢,氟，氯，溴,CH3-,-CD3,CF2H-,或CF2D-；
R17可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000233
Figure RE-GDA0002742102170000234
Figure RE-GDA0002742102170000241
式(4)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000242
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000243
和R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-。
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000244
和R2是CD3-。
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000245
和R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CF2H-和CF2D-。
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-GDA0002742102170000246
R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R17可以选自
Figure RE-GDA0002742102170000247
Figure RE-GDA0002742102170000248
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-，和R17可以选自
Figure RE-GDA0002742102170000249
在一些实施方案中，式(4)化合物结构式中，R2是CD3-。
在一实施方案中，本发明提供了式(5)的化合物：
Figure RE-GDA0002742102170000251
或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
R2是一个取代基选自氢,氟，氯，溴,CH3-,-CD3,CF2H-,或CF2D-；
R17可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000252
Figure RE-GDA0002742102170000253
式(5)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,和CD3-。在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中， R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-和CD3-。在一些实施方案中，式(5) 化合物结构式中，R2是CD3-。在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R2是CF2H-。
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R2是CD3-和R17可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000254
Figure RE-GDA0002742102170000255
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R2是CF2H-和R17可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000256
Figure RE-GDA0002742102170000257
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R2是CD3-和R17可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000261
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R2是CF2H-和R17可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-GDA0002742102170000262
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000263
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000264
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000265
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000266
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000267
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000268
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA0002742102170000269
在一些实施方案中，式(5)化合物结构式中，R17是
Figure RE-GDA00027421021700002610
在一些实施方案中，具有式(5)的氘代吡啶并嘧啶酮化合物以具有95％ee或更高的单一非对映异构体形式存在。在一些实施方案中，具有式(5)的氘代吡啶并嘧啶酮化合物的非对映异构体纯度可选自下面的任一选项：95％ee，96％ee，97％ee，98％ee，和99％ee或更高。在一些实施方案中，纯非对映体的氘代吡啶并嘧啶酮化合物不含其它异构体。在一些实施方案中，具有式(5)的氘代吡啶并嘧啶酮化合物非对映异构体以单一的(1R，2R)异构体存在。
在一些实施方案中，式(5)化合物可以任选自表1中化合物7至213中的任意一个或多个。
在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选可以任选自下面化合物中的任意一个：
(±)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶 -4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(±)-6-(氘代二氟甲基)-8-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶 -4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶 -4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基 -3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶 -4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(d二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(+)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(+)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基) 哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
或其药学可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物。
在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选可以任选自下面化合物中的任意一个：
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶 -4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶 -4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
或其药学可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物。
在本文所述的氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物中的任何原子未特别标记为同位素，均是指其具有天然同位素丰度。例如，H代表的天然丰度为99.985％的氢(1H)和0.015％的氘(2H)。尽管基于合成中使用的试剂，合成的化合物中天然同位素的丰度可能有所不同，但与本文公开的化合物中的稳定同位素取代的浓度相比，天然稳定氢同位素(如氘)的浓度可忽略不计。因此，当本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子时，该位置上的氘浓度实质上大于氘的自然丰度，其为0.015％。
在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子，该位置上的氘代率可以选自下面选项中的任何一项：至少1％，至少5％，至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少91％，至少92％，至少93％，至少94％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，或至少99％.在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子，该位置上的氘代率是大约1％至大约99％。在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子，该位置上的氘代率是大约95％至大约99％。在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子，该位置上的氘代率可以选自下面选项中的任何一项：大约1％，大约5％，大约10％，大约15％，大约20％，大约25％，大约30％，大约35％，大约40％，大约45％，大约50％，大约55％，大约60％，大约65％，大约70％，大约75％，大约80％，大约85％，大约90％，大约91％，大约92％，大约93％，大约94％，大约95％，大约96％，大约97％，大约98％，或大约 99％。在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子，该位置上的氘代率可以选自下面选项中的任何一项：大约90％，大约91％，大约92％，大约93％，大约94％，大约95％，大约96％，大约97％，大约98％，或大约99％。在一些实施方案中，式(1)至式(5)化合物任选的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置包含氘原子，该位置上的氘代率可以选自下面选项中的任何一项：大约95％，大约96％，大约97％，大约98％，或大约99％。
在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少50％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少60％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少67.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少72.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少75.0％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少75％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少77.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少80％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少82.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少85％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少87.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少90％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少92.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少95％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少97.5％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少 99％。在一些实施方案中，特定位置包含氘原子的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的氘代率是至少99.5％。
如本文所用，术语"氘富集"(氘代率或氘浓度)指的是氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特定位置的自然丰度的氢原子被氘原子取代的百分比。
在一些实施方案中，本文所述氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可包含一个或多个手性中心。除非本文另有说明，否则本文所述氘代嘧啶并嘧啶酮化合物包含所有手性化合物(对映体或非对映体)及其外消旋混合物。“异构体”指的是具有相同化学分子式的不同化合物。“立体异构体”指的是仅在原子在空间中排列方式不同的异构体，例如，具有不同的立体化学构型。“对映体”指的是一对彼此互不重叠的镜像的立体异构体。一对对映异构体的1：1混合物是“外消旋”混合物。符号“(±)”用于代表外消旋混合物。“非对映体”指的是具有至少两个手性中心的立体异构体，但彼此不是互不重叠的镜像。本文所述化合物的绝对立体化学是由Cahn-Ingold-Prelog R-S***来表征的。当本文所述化合物是纯对映体时，手性中心的立体化学可以标记为(R)或(S)。根据他们旋转钠D线波长的平面偏振光的方向(右旋或左旋)，已拆解的对映异构体可以标记为(-) 或(+)。有一些本文所述化合物包含有一个或多个手性中心，从而产生对映体，非对映体，或其它形式的能用(R)或(S)绝对立体化学来定义的立体异构体。本文所述化合物，药物组合物和使用方法意在包括所有这些可能的异构体，包括外消旋混合物，光学纯形式和中间混合物。具有旋光的(R)-和(S)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂合成，或使用常规技术拆分。当本文所述的化合物包含烯属双键或其他几何不对称中心时，除非另有说明，否则该化合物意图包括E和Z几何异构体。在一些实施方案中，本文所述氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以特定的几何或立体异构形式存在，包括互变异构体，顺式和反式异构体，R-和S-对映异构体，非对映异构体，(D)-异构体，(L)-异构体，其外消旋混合物及其其他混合物。
在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)中的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以非对映异构体的混合物或单一非对映异构体存在。在一些实施方案中，本文所述式(1) 至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以外消旋的非对映异构体的混合物存在。在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以主要的一种对映体异构体存在。在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物是大约90％(w/w)或更多的(-)对映异构体和10％(w/w)或更少的(+) 对映异构体的混合物。在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物是具有大约95％ee或更高对映体纯度的单一的非对映体。在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)中任选化合物的对映体纯度可以是下面选项中的任何一项：大约95％ee，大约96％ee，大约97％ee，大约98％ee，和大约99％ee.在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)中任选化合物是不包含任何其他异构体的纯对映异构体。在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)中任选化合物是单一的纯(-) -(1R，2R)对映异构体。在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)中任选化合物是单一的纯(+)-(1S，2S)对映异构体。
在一些实施方案中，本文所述式(1)至式(5)中的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物是至少60％摩尔的某一对映异构体富集的混合物。在一些实施方案中，本文所述式某一对映异构体富集的混合物含有的单一对映体的摩尔百分含量至少是75，90，95或99％。在一些实施方案中，本文所述式某一对映异构体富集的混合物主要包含有一个对映异构体，且一对手性对映体的另一个对映异构体的量基本测不到。在一些实施方案中，术语“基本上没有”指的是所涉对映异构体的摩尔百分含量(mol％)当于另一个对映异构体相比少于10％,少于5％,少于4％,少于3％,少于2％,或少于1％。在一些实施方案中，本文所述式某一对映异构体富集的混合物含有的单一对映体的％ee高于30％ee，高于40％ee，高于50％ee，高于60％ee，高于70％ee，高于80％ee，高于90％ ee，高于95％ee，高于97％ee，高于98％ee，或高于99％ee。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物还包括那些化合物的结晶型物和非结晶型物，包括，但不限于，多晶型物，类多晶型物，溶剂化物，水合物,非溶剂化的多晶型物(包含水合物)，构象多晶型，和非结晶型物。除非本文特别提及，“结晶型物”和“多晶型物”的混合物意在包括所有结晶型物和非结晶型物，例如，多晶型物，类多晶型物，溶剂化物，水合物,非溶剂化的多晶型物(包含水合物)，构象多晶型，和非结晶型物，以及混合物。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物还包括那些化合物的前药 (pro-drug)。如本文所述，术语“前药“指的是在体内转化的化合物并能产生本文所述化合物或该化合物的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的前药可以在服用时没有生物活性，但在体内能转化成具有生物活性的化合物，例如水解。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的前药与母体化合物相比具有改善的物理和/或递送性质。在一些实施方案中，相对于所述母体化合物，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的前药可以在施用于受试者时增加化合物的生物利用度(例如，通过在口服给药后允许增加的血液吸收)或增强向感兴趣的生物区室的递送(例如，脑或淋巴***)。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的前药可包括相对于母体化合物具有增强的水溶性或通过肠膜的主动转运的本文所述的化合物的衍生物(例如，氨基酸衍生的前药)。
前药化合物通常在哺乳动物中具有溶解性，组织相容性或延迟释放的优点(see,e.g.,Bundgard,H.,Design of Prodrugs(1985),pp.7-9,21-24(Elsevier, Amsterdam)。Adiscussion of prodrugs is provided in Higuchi,T.,et al., "Pro-drugs as NovelDelivery Systems,"A.C.S.Symposium Series,Vol.14,and in Bioreversible Carriersin Drug Design,ed.Edward B.Roche,American Pharmaceutical Association andPergamon Press,1987。两者均通过引用全文并入本文。前药的示例性优点可以包括但不限于其物理性质，例如与母体化合物相比，在生理pH下用于肠胃外给药的水溶性增强，或者可以增强从消化道的吸收，或者可以增强药物的吸收，以及长期储存的稳定性。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物还包括其溶剂化物。如本文所述，术语“溶剂化物“指的是与一种或多种与药学上可接受的溶剂分子物理结合的化合物(例如，水合物是水溶剂与化合物的物理结合物质)。溶剂化物还包括通过非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量的溶剂的化合物。溶剂化物可以是本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，如本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物可包括药学上可接受的溶剂化物和水合物。例如，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的溶剂化物或水合物可包括1至约100，或1至约10，或1至约2，约3或约4 的溶剂或水分子。可以理解的是，本文所用的术语“化合物”涵盖化合物和该化合物的溶剂化物以及它们的混合物。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物还包括其药学上可接受的盐。如本文所述，术语“药学上可接受的盐”指的是在合理的医学判断范围内，适合与受试者的组织接触而无过度毒性，刺激性，过敏反应等的盐，且具有合理的获益/风险比。药学上可接受的盐在本领域中是众所周知的(Berge et al.,J.Pharmaceutical Sciences,1977,vol.66,p.1-19)。本文提供的化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适的无机和有机酸和碱的那些盐。在一些实施方案中，盐可以在本文所述的化合物的分离和纯化过程中原位制备，或分别制备，例如通过使母体化合物的游离碱或游离酸分别与合适的碱或酸反应。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可具有足够碱性的官能团，其可与无机或有机酸反应，或羧基可与无机或有机碱反应，以形成药物学上可接受的盐(The Handbook of Pharmaceutical Salts；Properties,Selection,and Use.P.H. Stahland C.G.Wermuth(eds.),Verlag,Zurich(Switzerland)2002,which are herebyincorporated by reference in their entirety)。在一些实施方案中，本文所述的组合物包含药学上可接受的盐的形式。
在一些实施方案中，本文所述的吡啶并嘧啶酮化合物包含与无机酸形成的氨基的无毒酸加成盐，例如，盐酸，氢溴酸，磷酸，硫酸，硼酸和高氯酸，或者与有机酸(例如乙酸，草酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸，琥珀酸，丙二酸，2,2-二氯乙酸，酰化氨基酸，己二酸，藻酸，抗坏血酸，L-天冬氨酸，苯磺酸，苯甲酸，4-乙酰氨基苯甲酸，(+)- 樟脑酸，樟脑磺酸，(+)-(1S)-樟脑10磺酸，癸酸，己酸，辛酸，肉桂酸，柠檬酸，环酰胺酸，环己烷磺酸，十二烷基磺酸，乙烷1,2-二磺酸，乙磺酸，2-羟基乙磺酸，甲酸，富马酸，半乳糖酸，龙胆酸，葡萄糖庚酸，D-葡萄糖酸，D-葡萄糖醛酸，L-谷氨酸，α-氧代戊二酸，乙醇酸，马尿酸，氢溴酸，氢碘酸，(+)-L-乳酸，(±)-DL-乳酸，乳糖酸，月桂酸，马来酸，(-)-L-苹果酸id，丙二酸，(±)-DL-扁桃酸，甲磺酸，萘 -2-磺酸，萘-1,5-二磺酸，1-羟基-2-萘甲酸，烟酸，油酸或乳清酸，草酸，棕榈酸，棕榈酸，高氯酸，磷酸，L-焦谷氨酸，蔗糖，水杨酸，4-氨基-水杨酸，癸二酸，硬脂酸，琥珀酸，硫酸，鞣酸，(+)-L-酒石酸，硫氰酸，对甲苯磺酸，或十一碳烯酸或戊酸。
在一些实施方案中，本文所述的任何氘代吡啶并嘧啶酮化合物的药学上可接受的盐可包括己二酸，藻酸盐，抗坏血酸，天冬氨酸，苯磺酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，柠檬酸盐，环戊烷丙酸盐，二葡糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，甲酸盐，富马酸盐，葡糖庚酸葡萄糖酸盐，葡糖庚酸葡萄糖酸盐，，氢碘化物，2-羟基乙磺酸盐，乳糖酸，乳酸，月桂酸酯，月桂基硫酸盐，苹果酸，马来酸酯，丙二酸酯，甲磺酸酯，2-萘磺酸酯，烟酸酯，硝酸酯，油酸酯，草酸酯，棕榈酸酯，棕榈酸酯，果胶，过硫酸盐，3-苯基丙酸酯，磷酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸盐，硬脂酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，对甲苯磺酸盐，十一酸盐，戊酸盐等。在一些实施方案中，用于生成其衍生盐的有机酸包括，例如，乙酸，丙酸，乙醇酸，丙酮酸，草酸，乳酸，三氟乙酸，马来酸，丙二酸，琥珀酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，对甲苯磺酸，水杨酸等。在一些实施方案中，本文所述的任何氘代吡啶并嘧啶酮化合物的药学上可接受的酸加成盐可以是盐酸盐。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物包含的酸基与适当的碱例如碱金属，碱土金属，铵和N+(C 1-4烷基)4盐形成的无毒盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠，锂，钾，钙，镁，铁，锌，铜，锰，铝等。可以衍生盐的有机碱包括，例如伯，仲和叔胺，取代的胺，包括天然存在的取代胺，环胺，例如异丙胺，三甲胺，二乙胺，三乙胺，三丙胺，乙醇胺，L-精氨酸，苯乙胺，苄星，胆碱，脱醇，二乙醇胺，二乙胺，二甲胺，二丙胺，二异丙胺，2-(二乙氨基)-乙醇，乙醇胺，乙胺，乙二胺，异丙胺，N-甲基葡糖胺，肼苯甲胺，1H-咪唑，L-赖氨酸，吗啉，4-(2-羟乙基)-吗啉，甲胺，哌啶，哌嗪，丙胺，吡咯烷，1-(2-羟乙基)-吡咯烷，吡啶，喹啉，喹啉，异喹啉，三乙醇胺，N-甲基-D-葡萄糖胺，2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇和氨丁三醇。在一些实施方案中，本文所述的任何氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的药学上可接受的碱加成盐可以选自铵，钾，钠，钙和镁盐。
4.氘代吡啶并嘧啶酮化合物的用途
在一些实施方案中，本文提供了氘代吡啶并嘧啶酮化合物作为高选择性CDK2抑制剂。本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物调节细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白E，Rb 和E2F响应基因调节的细胞周期，包括基因转录。
在一些实施方案中，本文提供了氘代的嘧啶并嘧啶酮化合物，其中氢原子在分子的某些特定位置被氘原子取代。这种策略性的氘取代导致所选化合物的体内抗肿瘤活性，CDK亚型选择性和/或药代动力学特征增强。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50<1000nM。在一些实施方案中，氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50＜100nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的 IC50＜50nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的 CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC IC50＜25nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50＜10nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50＜1nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值为约0.5nM至约1000nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值为约0.6nM至约100nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值为约0.6 nM至约10nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的 CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值为约0.6nM至约5nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的 IC50值为约0.6nM至约4nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值为约0.6nM至约3nM。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在下文所述的CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值为约0.6nM至约2nM。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物相对于其他CDK家族酶(例如，CDK1，CDK4，CDK6，CDK7，CDK9)表现出对CDK2的高选择性。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物对CDK2的选择性比其他CDK家族酶(例如CDK1，CDK4，CDK6，CDK7，CDK9)至少高10倍：例如，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值比CDK4和/或CDK6低至少10倍。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值比CDK4和/或CDK6低至少25倍。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物在CDK2抑制剂体外激酶活性测定中的IC50值比CDK4和/或CDK6低至少50倍。
在一些实施方案中，本文所述的氘代的嘧啶并嘧啶酮化合物通过经由CDK2抑制作用于检查点信号传导途径，可用于治疗与细胞周期失调有关的疾病。在一些实施方案中，氘代的嘧啶并嘧啶酮化合物通过作用于CDK2来改变被处理细胞的细胞周期内的生长阶段或状态，可用于治疗与细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白E，Rb和E2F响应基因的调节有关的病症。在一些实施方案中，氘代吡啶并嘧啶酮化合物可用于治疗与细胞周期失调相关的疾病，例如增生性疾病，癌症，传染病，慢性炎症性疾病，神经退行性疾病或听力下降。
在一些实施方案中，氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可用于治疗癌症，例如乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，成胶质细胞瘤，B细胞淋巴瘤，***癌，肝癌，肺癌，急性髓细胞性白血病，神经胶质瘤，结直肠癌或黑色素瘤。在一些实施方案中，氘代吡啶并嘧啶酮化合物可用于治疗乳腺癌。在一些实施方案中，氘代吡啶并嘧啶酮化合物可用于治疗卵巢癌。
在一些实施方案中，本文提供了用作活性治疗剂的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物具有CDK2抑制活性，并且可以用于治疗或预防其中CDK2起积极作用的疾病。
在一些实施方案中，本发明提供了式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物用于治疗与调节细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白E，Rb和E2F响应基因改变有关的疾病并改变细胞的细胞周期内的生长阶段或状态。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗增生性疾病的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗慢性炎症疾病的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗感染的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗神经退行性疾病的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗癌症的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗乳腺癌和卵巢癌的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗晚期或转移性乳腺癌和卵巢癌的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗乳腺癌的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗卵巢癌的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一个实施方案中，本发明提供了一种治疗与细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白E，Rb和E2F反应性基因的调节相关的疾病的方法，该方法改变被治疗细胞的细胞周期内的生长阶段或状态，包括向治疗对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种用于治疗增生性疾病，慢性炎症性疾病，传染性疾病，神经退行性疾病或听力丧失的方法(或本文所述的本发明化合物在制备用于该疾病的药物中并用于这些疾病的治疗)，包括向治疗对象施用治疗有效剂量的式(1) 至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的癌症的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一个实施方案中，本发明提供了用于制备本发明化合物的方法和中间体。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗的化合物。在一个实施方案中，本发明提供了本文所述的化合物在治疗由CDK2诱导的疾病中的用途。在一些实施方案中，由CDK2诱导的疾病任选自如下选项：乳腺癌，三阴性乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，成胶质细胞瘤， B细胞淋巴瘤，***癌，肝癌，急性髓细胞性白血病或黑素瘤。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的疾病的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的疾病的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，其中所指的疾病可包括下面选项中的任一项：乳腺癌，三阴性乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，胶质母细胞瘤，B细胞淋巴瘤，慢性淋巴细胞性白血病(CLL)，***癌，肝癌，急性髓细胞性白血病，上皮性卵巢癌， HR阳性和HER2-乳腺癌，ER+HER2-乳腺癌，耐他莫昔芬的乳腺癌，肾癌，胃癌，肺癌，食道癌，非霍奇金淋巴瘤，***癌，结肠癌，***，结直肠癌，黑素瘤，非小细胞癌细胞肺癌(NSCLC)，多发性骨髓瘤，肉瘤，腺癌，肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤，5-FU 耐药菌落癌，紫杉醇耐药性***，库欣病，胸腺瘤，白血病，HIV感染，帕金森氏病，关节炎，单纯疱疹感染，HIV或囊性纤维化。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的细胞增生病疾病的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，其中所指的细胞增生病疾病可包括下面选项中的任一项：乳腺癌，卵巢癌，上皮性卵巢癌，三阴性乳腺癌，HR+和HER2- 乳腺癌，ER+HER2-乳腺癌，和耐他莫昔芬的乳腺癌。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的晚期或转移性乳腺癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，其中所指的晚期或转移性乳腺癌可包括下面选项中的任一项：三阴性乳腺癌，HR+和HER2-乳腺癌，ER+HER2-乳腺癌，和耐他莫昔芬的乳腺癌。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的卵巢癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，其中所指的卵巢癌可包括下面选项中的任一项：晚期或转移性卵巢癌，或上皮性卵巢癌。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的三阴性乳腺癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的HR+和HER2-乳腺癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的ER+HER2-乳腺癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的耐他莫昔芬的乳腺癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的上皮性卵巢癌的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的细胞周期失调相关疾病的方法 (或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1)至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的由周期调节酶细胞周期蛋白A (cyclin A)，细胞周期蛋白E(cyclin E)或Rb失调而引起的疾病的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1) 至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的由周期调节酶细胞周期蛋白A (cyclin A)，细胞周期蛋白E(cyclin E)或Rb失调而引起的疾病的方法(或使用本文所述的化合物制备的药物于治疗这些疾病)，包括向所述对象施用治疗有效剂量的式(1) 至式(5)中任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，其中所指的由周期调节酶细胞周期蛋白A (cyclinA)，细胞周期蛋白E(cyclin E)或Rb失调而引起的疾病可包括下面选项中的任一项：乳腺癌，卵巢癌，晚期或转移性乳腺癌，晚期或转移性卵巢癌，上皮性卵巢癌，三阴性乳腺癌，HR+和HER2-乳腺癌，ER+HER2-乳腺癌，或他莫昔芬耐药性乳腺癌。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的癌症的方法，包括向所述对象施用治疗有效剂量的表1中的Comps.7-213任选的一个或多个氘代吡啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本发明提供治疗需要治疗对象的表征为与健康细胞的正常表达水平相比时癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白(例如，cyclin A,cyclin E包括cyclin E1和cyclin E2)的癌症的方法，包括向所述对象施用治疗有效剂量的表1中的Comps.7-213任选的一个或多个氘代吡啶并嘧啶酮化合物。用于检测癌症患者中过表达的CDK2蛋白或CDK2调节的细胞周期蛋白的方法是本领域技术人员已知的，例如，检测过表达的CDK2的方法已在美国专利号 6,521,412中进行了描述，其全部内容通过引用并入本文。检测cyclin E1和cyclin E2 过表达的方法参照上述Santeet al.和Caldon et al.。
在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症可包括下面选项中的任一项：乳腺癌，转移性乳腺癌，三阴性乳腺癌，他莫昔芬耐药性乳腺癌，HR+和HER2 阴性乳腺癌，ER+HER2-乳腺癌，卵巢癌，上皮性卵巢癌，神经母细胞瘤，成胶质细胞瘤，B细胞淋巴瘤，***癌，肝癌，急性髓细胞性白血病，黑素瘤，淋巴瘤，食道鳞状细胞癌，和子宫癌。
在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症可包括乳腺癌或卵巢癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症是乳腺癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症是卵巢癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症可包括下面选项中的任一项：三阴性乳腺癌，他莫昔芬耐药性乳腺癌，HR+和HER2阴性乳腺癌，和ER+HER2-乳腺癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症是三阴性乳腺癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症是他莫昔芬耐药性乳腺癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症是HR+和HER2阴性乳腺癌。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法，其中表征为癌细胞过度表达细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)，或CDK2调控的细胞周期蛋白的癌症是ER+HER2-乳腺癌。
可以使用本领域已知的各种模型来测试本文所述的化合物和化合物的组合物在治疗，预防和/或治疗所指示的疾病或病症中的功效，所述模型为治疗人类疾病提供指导。例如，以下文献描述了确定卵巢癌治疗功效的模型：Mullany et al.Endocrinology 2012,153,1585-92；Fong et al.J.Ovarian Res.2009,2, 12.以下文献描述了确定乳腺癌治疗功效的模型：Fantozzi,Breast Cancer Res.2006,8,212.以下文献描述了用PiBCL1小鼠模型包括BALB/c(haplotype H-2d) 小鼠模型确定B细胞淋巴瘤，例如弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)治疗功效的方法： Illidge et al.Cancer Biother.&Radiopharm.2000,15,571-80。
在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法可被用作治疗乳腺癌的一线疗法。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法可被用作治疗绝经后妇女和绝经前妇女的ER+HER2-晚期或转移性乳腺癌的一线疗法。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法可被用作治疗先前未经治疗的ER+HER2-晚期或转移性乳腺癌的单一的一线疗法。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法可被用作治疗ER+HER2-晚期或转移性乳腺癌的单一的一线疗法。
在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法可被用作治疗卵巢癌的一线疗法。在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法可被用作治疗晚期或转移性卵巢癌的一线疗法。
在一些实施方案中，对于本文所述的用在任何方法中氘代吡啶并嘧啶酮化合物可被用于治疗先前未经治疗的ERα+HER2-晚期或转移性乳腺癌的组合疗法。在一些实施方案中，对于本文所述的用在任何方法中氘代吡啶并嘧啶酮化合物可被用于治疗经先前的内分泌治疗后的ERα+HER2-晚期或转移性乳腺癌的组合疗法。
在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法中使用的任选的式(1)至式(5)的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，这些化合物的施用可通过任何常规给药途径，包括但不限于口服，肺，腹膜内(ip)，静脉内(iv)，肌内(im)，皮下(sc)，透皮，颊，鼻，舌下，眼，直肠，鼻内等等。在一些实施方案中，对于本文所述的任何一种方法，药物可以制备成适合于口服给药，注射(例如静脉内注射)给药，或其他给药方式(例如肠胃外给药)的制剂。
在一些实施方案中，对于本文所述的任何方法中和用法中使用的给药方式导致将一个或多个氘代嘧啶嘧啶酮化合物输送到血液中(通过肠内或肠胃外给药)，或者直接将一个或多个氘代嘧啶嘧啶酮化合物输送到肿瘤部位。
在一些实施方案中，对于本文所述的一个或多个氘代嘧啶嘧啶酮化合物可以用静脉注射或静脉输液的方式输送。用于这些药物递送方法的装置和设备在本领域中是众所周知的。在一些实施方案中，对于本文所述的一个或多个氘代嘧啶嘧啶酮化合物可以用静脉注射或静脉输液的方式输送到血液中。
适用于肠胃外给药的剂型包括例如溶液剂，混悬剂，分散剂，乳剂等。它们也可以以无菌固体组合物(例如冻干组合物)的形式制造，其可以在使用前立即溶解或悬浮在无菌注射介质中。它们可以包含例如本领域已知的悬浮剂或分散剂。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的递送可以在囊泡中，特别是在脂质体中进行(参照Langer,1990,Science 249:1527-1533；Treat et al.,inLiposomes in Therapy of Infectious Disease and Cancer,Lopez-Berestein andFidler(eds.),Liss,New York,pp.353-365(1989)。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的递送可以通过控制释放或持续释放的方式或通过本领域普通技术人员众所周知的装置给药。示例包括，但不限于，美国专利号3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；4,008,719；5,674,533； 5,059,595；5,591,767；5,120,548；5,073,543；5,639,476；5,354,556；和5,733,556，每一个的全部内容均通过引用并入本文。这样的剂型可用于提供一种或多种活性成分的控释或缓释，例如，羟丙基甲基纤维素，其他聚合物基质，凝胶，渗透膜，渗透***，多层涂层，微粒，脂质体，微球，或它们的组合等和改变比例可被用来提供所需的药物释放形式。活性成分的控释或缓释可以被各种条件来刺激，包括但不限于pH值的变化，温度的变化，适当波长的光的刺激，酶的浓度或可用性，水的浓度或可用性，或其他生理条件或化合物。
在一些实施方案中，聚合材料被使用于送药(参照Medical Applications ofControlled Release,Langer and Wise(eds.),CRC Pres.,Boca Raton,Florida(1974)；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design and Performance,Smolenand Ball(eds.),Wiley,New York(1984)；Ranger and Peppas,1983,J.Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61；Levy et al.,1985,Science 228:190；During et al.,1989,Ann.Neurol.25:351；Howard et al.,1989,J.Neurosurg.71:105)。
在另一些实施方案中，药物控释***可以放置在要治疗的目标区域附近，例如肿瘤部位，因此只需要全身剂量的一小部分(参照Goodson,in Medical Applications ofControlled Release,supra,vol.2,pp.115-138(1984))。在Langer发表的综述中提及的其他药物控释***也可以被用来送药(Langer，Science，1990，249:1527-1533)。
本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的剂量方案可以根据多种因素来选择，所述多种因素包括受试者的类型，种类，年龄，体重，性别和医学状况；待治疗疾病的严重程度；给药途径；受试者的肾或肝功能；个人的药物基因组学组成；和使用的本发明的特定化合物的特性。
本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的剂量以及给药方案可以取决于各种参数和因素，包括但不限于特定的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的特性，所治疗的疾病，病情的严重性，采用治疗还是预防该疾病，受试者的年龄，体重和总体健康状况以及主治医生的判断。另外，有关特定受试者的药物基因组学信息(基因型对治疗药物的药代动力学，药效动力学或功效的影响)可能会影响所用剂量。此外，确切的个体剂量可以根据多种因素进行一些调整，包括所施用药剂的具体组合，施用时间，施用途径，制剂的性质，***速率，具体因素，被治疗的疾病，病症的严重程度，以及该病症的解剖位置。一定程度的剂量变化是可预期的。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约0.01mg/kg至大约30mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约1.0mg/kg至大约30mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约0.01mg/kg至大约20mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约1.0mg/kg至大约20 mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约0.01 mg/kg至大约7.5mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约0.01mg/kg至大约5.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约1.0mg/kg至大约2.5mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约1.0mg/kg至大约 2.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约0.5mg/kg至大约2.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约1.0mg/kg至大约5.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约2.0mg/kg至大约7.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约3.0mg/kg至大约8.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约4.0mg/kg至大约9.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约5.0mg/kg至大约10.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约6.0mg/kg至大约11.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约7.0mg/kg 至大约12.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约8.0mg/kg至大约13.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约9.0mg/kg至大约14.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约10.0mg/kg至大约15.0 mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约11.0 mg/kg至大约16.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约12.0mg/kg至大约17.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约13.0mg/kg至大约18.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约14.0mg/kg至大约19.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约15.0mg/kg至大约20.0mg/kg。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量可以是下面选项中的任一项：本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用剂量是大约0.01mg/kg，大约0.1mg/kg,大约0.5mg/kg,大约1.0mg/kg, 大约2.0mg/kg,大约3.0mg/kg,大约4.0mg/kg,大约5.0mg.kg,大约6.0mg/kg, 大约7.0mg/kg,大约8.0mg/kg,大约9.0mg/kg,大约10.0mg/kg,大约11.0 mg/kg,大约12.0mg/kg,大约13.0mg/kg,大约14.0mg/kg,大约15.0mg/kg,大约16.0mg/kg,大约17.0mg/kg,大约18.0mg/kg,大约19.0mg/kg,大约20.0 mg/kg,大约21.0mg/kg,大约22.0mg/kg,大约23.0mg/kg,大约24.0mg/kg,大约25.0mg/kg,大约26.0mg/kg,大约27.0mg/kg,大约28.0mg/kg,大约29.0 mg/kg,或大约30.0mg/kg。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用可以是每日剂量一日一次服用(QD，qd或q.d.)，或每日总剂量以每天两次的分剂量服用(BID，bid，或b.i.d.)，每日剂量一日三次服用(TID，tid，或t.i.d.)，或每日剂量一日四次服用(QID，qid，或q.i.d.)。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用可以是每日剂量一日一次服用。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的施用可以是每日剂量一日两次服用。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以在整个给药方案中连续或间歇地施用。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以在整个给药方案中连续地施用。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以在整个给药方案中间歇地施用。
在一个实施方案中，本文提供了一种测定癌细胞对如本文所述的式(1)至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的敏感性的方法，此方法包括如下步骤：(a)提供癌细胞； (b)使癌细胞与如本文所述的式(1)至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物接触；(c) 分析细胞的生长抑制状况；(d)比较在不存在如本文所述的式(1)-(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的情况下，步骤(c)中癌细胞的生长抑制与癌细胞中的生长抑制状况，其中生长抑制的存在表明所述癌细胞对本文所述的式(1)至式(5)的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物敏感。
在一些实施方案中，在本文所述的任何方法中使用的癌细胞可以包括人卵巢癌OVCAR3细胞(ATCC HTB-161TM)或人乳腺鳞状HCC1806细胞。在一些实施方案中，在本文所述的任何方法中使用的癌细胞可以包括人OVCAR3细胞。在一些实施方案中，在本文所述的任何方法中使用的癌细胞可以包括人***鳞状HCC1806细胞。
5.氘代吡啶并嘧啶酮化合物的药物组合物
在一个实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，其包含一种或多种本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物或其药学上可接受的盐，立体异构体，共晶体，前药，溶剂化物，水合物和多晶型物。在一个实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，其包含式 (1)至式(5)的任选的氘代吡啶并嘧啶酮化合物或其药学上可接受的盐，立体异构体，共晶体，前药，溶剂化物，水合物和多晶型物，和至少一种药学上可接受的载体，稀释剂或赋形剂。在一些实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，其包含一个或多个氘代吡啶并嘧啶酮化合物选自表1中公开的化合物Comps.7-213，或其药学上可接受的盐，立体异构体，共晶体，前药，溶剂化物，水合物和多晶型物，以及至少一种药学上可接受的载体，稀释剂或赋形剂。
在一个实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，可用于治疗与细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白E，Rb和E2F应答基因的调节有关的疾病并通过作用于CDK2来改变所治疗的细胞周期内的生长阶段或状态，其包含一种或多种本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物或其药学上可接受的盐，立体异构体，共晶体，前药，溶剂化物，水合物和多晶型物。
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物还包含另外的抗肿瘤剂。在一些实施方案中，所述另外的抗肿瘤剂选自芳香酶抑制剂，激素疗法，选择性***受体降解剂，细胞毒性剂，PD-1拮抗剂，PD-L1拮抗剂，AR抑制剂，谷氨酰胺酶抑制剂，CDK4/6 抑制剂，CDK9抑制剂或Akt抑制剂。在一些实施方案中，所述另外的抗肿瘤剂是他莫昔芬，多西他赛，紫杉醇，顺铂，卡培他滨，吉西他滨，长春瑞滨，依西美坦，来曲唑，氟维司群，阿那曲唑或曲妥珠单抗。
在一些实施方案中，药物组合物还包含另外的抗肿瘤剂并形成固定的组合剂量。在一些实施方案中，本文所述的任何药物制剂可以单位剂型存在，每单位剂量包含预定量的本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物中的任何一种。作为非限制性例子，这种单位剂型可包含0.5mg至2500mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物，剂量取决于所治疗的病症，给药途径以及患者的年龄，体重和状况。在一些实施方案中，单位剂型可包含 0.5mg至1000mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至750mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至500mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至250mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至200mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可以包含1.0mg至150mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至100mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至50mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg至25mg 的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含1.0mg 至10mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，单位剂型可包含 1.0mg至5mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，单位剂型可包含下面选项中的任一项：约0.5mg，约1.0mg，约5mg，约10mg，约15mg，约20mg，约25mg，约30mg，约35mg，约40mg，约45mg，约 50mg，约55mg，约60mg，约65mg，约70mg，约75mg，约80mg，约85mg，约 90mg，约95mg，约100mg，约110mg，约120mg，约130mg，约140mg，约150mg，约160mg，约170mg，约180mg，约190mg，约200mg，约210mg，约220mg，约230mg，约240mg，约250mg，约260mg，约270mg，约280mg，约290mg，约300mg，约 310mg，约320mg，约330mg，约340mg，约350mg，约360mg，约370mg，约380 mg，约390mg，约400mg，约410mg，约420mg，约430mg，约440mg，约450mg，约460mg，约470mg，约480mg，约490mg，约500mg，约510mg，约520mg，约530mg，约540mg，约550mg，约560mg，约570mg，约580mg，约590mg，约600 mg，约610mg，约620mg，约630mg，约640mg，约650mg，约660mg，约670mg，约680mg，约690mg，约700mg，约710mg，约720mg，约730mg，约740mg，约750mg，约760mg，约770mg，约780mg，约790mg，约800mg，约810mg，约820mg，约830mg，约840mg，约850mg，约860mg，约870mg，约880mg，约890mg，约900mg，约 910mg，约920mg，约930mg，约940mg，约950mg，约960mg，约970mg，约980 mg，约990mg，约1000mg，约1100mg，约1200mg，约1300mg，约1400mg，约1500 mg，约1600mg，约1700mg，约1800mg，约1900mg，约2000mg，约2100mg，约 2200mg，约2300mg，约2400mg或约2500mg本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物或其药学上可接受的盐，立体异构体，共晶体，前药，溶剂化物，水合物，和多晶型物。
在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约10mg本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约20mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约30mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约50mg本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约75mg 本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约 100mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约150mg的本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约200mg本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约250mg本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约350mg本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约500mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约750mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，本文所述的单位剂型包含约1000mg本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，本文描述的任何一种单位剂型包含本文描述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物或药学上可接受的盐，立体异构体，或其适当的分数，如本文所述，共晶，前药，溶剂化物，水合物及其多晶型物的日剂量或亚剂量。这样的药物制剂可以通过药学领域公知的任何方法来制备。
在一些实施方案中，本文所述的任何一种药物制剂可适于通过任何合适的途径施用，例如通过口服(包括颊或舌下)，直肠，鼻，局部(包括颊，舌下或经皮)给药)，***或肠胃外(包括皮下，肌肉内，静脉内或皮内)途径。这样的制剂可以通过药学领域中已知的任何方法来制备，例如通过将活性成分与一种或多种载体或赋形剂结合。
在一些实施方案中，药物制剂可以另外包含参与对动物，尤其是哺乳动物携带或递送生物活性物质的药学上可接受的赋形剂，载体，稀释剂或媒介物，例如液体或固体填充剂，稀释剂，赋形剂，溶剂或包囊材料。在一些实施方案中，药学上可接受的载体根据本领域普通技术人员能力范围内的许多因素配制。这些包括但不限于所配制的活性剂的类型和性质；所针对的对象是要施用的含药剂的组合物，该组合物的预期施用途径以及治疗适应症。在一些实施方案中，药学上可接受的载体包括水性和非水性液体介质以及各种固体和半固体剂型。除了生物活性物质之外，这样的载体可以包括许多不同的成分和添加剂。在与制剂的其他成分相容并且对患者无害的意义上，每种载体必须是“药学上可接受的”。
在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂可包括溶剂，分散介质，稀释剂或其他液体媒介物，分散或悬浮助剂，表面活性剂，等渗剂，增稠剂或乳化剂，防腐剂，固体粘合剂，润滑剂，抗微生物剂。防腐剂，抗氧化剂和其他赋形剂，例如分散剂，悬浮剂，增稠剂，乳化剂，缓冲剂，润湿剂，增溶剂，稳定剂，调味剂和甜味剂。液体介物可以包括PBS缓冲液，盐水，蔗糖或合适的一种或多种多元醇，并且任选地包含乙醇，酏，或凌特斯。
在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂可包括糖，例如乳糖，葡萄糖和蔗糖。淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和乙酸纤维素；黄芪粉麦芽；明胶；滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油，例如花生油，棉籽油，红花油，芝麻油，橄榄油，玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油，山梨糖醇，甘露糖醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸无热原水；等渗盐水林格的解决方案；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及药物制剂中使用的其他无毒相容性物质。在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂可以进一步包括润湿剂，乳化剂和润滑剂，例如月桂基硫酸钠，硬脂酸镁和聚环氧乙烷-聚环氧丙烷共聚物，以及着色剂，脱模剂，包衣剂，甜味剂，调味剂和芳香剂，防腐剂和抗氧化剂。
在一些实施方案中，本文描述的药物制剂可通过任何适当途径施用，其中的药物制剂可以是下面选项中的任一项：胶囊，片剂，口腔片剂，口腔崩解片剂，粘膜粘附片剂，液体制剂，分散剂，注射剂，注射用粉剂，和栓剂。
在一些实施方案中，本文描述的药物制剂是口服制剂，其中的口服制剂可以是下面选项中的任一项：片剂，胶囊剂，锭剂，丸剂，颗粒剂，散剂，溶液剂，糖浆剂，酏，悬浮剂，或分散剂。
在一些实施方案中，可用于制造固体口服剂的药学上可接受的赋形剂，包括但不限于惰性稀释剂，分散剂和/或制粒剂，表面活性剂和/或乳化剂，崩解剂，粘合剂，防腐剂，缓冲剂，润滑剂和/或油。这样的赋形剂可以任选地包含在药物制剂中。根据配方设计师的判断，可存在于组合物中的赋形剂，包括例如可可脂和栓剂蜡，着色剂，包衣剂，甜味剂和调味剂。示例性稀释剂包括但不限于碳酸钙，碳酸钠，磷酸钙，磷酸二钙，硫酸钙，磷酸氢钙，磷酸钠乳糖，蔗糖，纤维素，微晶纤维素，高岭土，甘露醇，山梨醇，肌醇，氯化钠，干淀粉，玉米淀粉，糖粉等，和/或其组合。
在一些实施方案中，适用于口服施用的本文所述的任何一种药物制剂可以以离散单位例如胶囊或片剂的形式存在；粉末或颗粒；分别为水性或非水性液体的溶液或悬浮液；可食用的泡沫或whips；或乳液，包括水包油乳液或油包水乳液。
例如，对于以片剂或胶囊剂形式的口服给药，可以将本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物与口服，无毒的药学上可接受的惰性载体例如乙醇，甘油，水等组合。通常，通过将氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物粉碎至合适的细小尺寸并与合适的药物载体例如可食用的碳水化合物，例如淀粉或甘露醇混合，来制备颗粒或粉末。调味剂，防腐剂，分散剂和着色剂也可以存在于药物制剂中。
在一些实施方案中，适于口服施用的本文描述的任何药物制剂可以是通过制备粉末，液体或悬浮液混合物并用明胶或一些其他合适的壳材料(例如支链淀粉多糖)包封而制成的胶囊。在包封之前，可以将助流剂和润滑剂例如胶体二氧化硅，滑石粉，硬脂酸镁，硬脂酸钙或固体聚乙二醇加入到混合物中。还可以加入崩解剂或增溶剂，例如琼脂，碳酸钙或碳酸钠，以提高胶囊摄入时药物的利用率。此外，当需要或必要时，也可以将合适的粘合剂，润滑剂，崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘合剂的实例包括淀粉，明胶，天然糖例如葡萄糖或β-乳糖，玉米甜味剂，天然和合成树胶例如***胶，黄琼脂，海藻酸钠，羧甲基纤维素，聚乙二醇，或蜡等。在这些胶囊剂型中有用的润滑剂包括，例如，油酸钠，硬脂酸钠，硬脂酸镁，苯甲酸钠，乙酸钠，氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉，甲基纤维素，琼脂，膨润土，黄原胶等。
在一些实施方案中，适于口服施用的本文所述的任何一种药物制剂可以是通过制备粉末混合物，制粒或压片，添加润滑剂和崩解剂并压制成片剂而制成的片剂。可以通过将如本文所述的氘代吡啶并嘧啶酮CDK2抑制剂(适当地粉碎)与一种或多种稀释剂或赋形剂混合来制备粉末混合物。在一些实施方案中，本文所述的片剂可以包含任选的成分，包括粘合剂，例如羧甲基纤维素，藻酸盐，明胶或聚乙烯吡咯烷酮，溶液抑制剂例如石蜡，吸收促进剂例如季盐和/或吸收剂例如膨润土，高岭土或磷酸二钙。在一些实施方案中，可将粉末混合物与粘合剂如糖浆，淀粉糊，***胶或纤维素或聚合物材料的溶液湿法制粒，并强制通过筛网。在一些实施方案中，可以通过添加硬脂酸，硬脂酸盐，滑石粉或矿物油对颗粒进行润滑以防止粘附到片剂形成模具上。然后将润滑的混合物压制成片剂。在一些实施方案中，本发明的化合物还可以与自由流动的惰性载体混合并直接压制成片剂，而无需经历制粒或压片步骤。在一些实施例中，可以提供由虫胶的密封涂层，糖或聚合物材料的涂层以及蜡的抛光涂层组成的透明或不透明的保护涂层。在一些实施方案中，可以将染料添加到这些涂层中以区分不同的单位制剂。
在一些实施方案中，用于口服和肠胃外施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳剂，微乳剂，溶液剂，混悬剂，糖浆剂和/或e剂。除活性成分外，液体剂型还可包含本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂，例如乙醇，异丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苄醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲酰胺，油类(特别是棉籽，花生，玉米，胚芽，橄榄油，蓖麻和芝麻油)，甘油，四氢糠醇，聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯，及其混合物。除惰性稀释剂外，口服组合物还可包含佐剂，例如湿润剂，乳化和悬浮剂，甜味剂，调味剂和/或加香剂。在用于肠胃外施用的某些实施方案中，将组合物与增溶剂混合，所述增溶剂例如是醇，油，改性油，二醇，聚山梨酯，环糊精，聚合物和/或其组合。
在一些实施方案中，用于口服施用的单位剂型可以被微囊化。在一些实施方案中，还可以制备制剂以延长或维持释放，例如通过将颗粒材料涂覆或包埋在聚合物，蜡等中。
在一些实施方案中，可以采用用于全身施用本文描述的药物制剂的静脉内注射或输注。在一些实施方案中，适合于液体制剂的药学上可接受的赋形剂包括溶剂，分散介质，稀释剂或其他液体媒介物，分散或悬浮助剂，表面活性剂，等渗剂，增稠剂或乳化剂，防腐剂，抗微生物防腐剂，抗氧化剂和其他赋形剂，例如分散剂，悬浮剂，增稠剂，乳化剂，缓冲剂，湿润剂或稳定剂。在一些实施方案中，液体载体可以包括PBS缓冲液，盐水，蔗糖或合适的一种或多种多元醇，并且其任选地包含乙醇，lix剂或林克特。
在一些实施方案中，用于肠胃外施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳剂，微乳剂，溶液剂，混悬剂，糖浆剂和/或酏。除活性成分外，液体剂型还可包含本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂，例如乙醇，异丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苄醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲酰胺，油类(特别是棉籽，花生，玉米，胚芽，橄榄油，蓖麻和芝麻油)，甘油，四氢糠醇，聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯，及其混合物。在用于肠胃外施用的某些实施方案中，将组合物与
Figure RE-GDA0002742102170000451
醇，油，改性油，二醇，聚山梨酯，环糊精，聚合物和/或它们的组合混合。
在一些实施方案中，可根据已知技术使用合适的分散剂，湿润剂和/或助悬剂配制可注射制剂，例如无菌可注射水性或油质悬浮液。无菌注射制剂可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂和/或溶剂中的无菌注射溶液，悬浮液和/或乳剂，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可以使用的药学上可接受的媒介物和溶剂是水，林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。无菌的不挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。脂肪酸如油酸可用于制备可注射组合物。
在一些实施方案中，本文描述的任何药物组合物中的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物包含按重量计约90％或更多的(-)-对映体和按重量计约10％或更少的(+)-对映体的混合物。
此外，本文公开的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以作为组合物例如包含药学上可接受的载体或媒介物的药物组合物的组分施用于受试者。这样的药物组合物可以任选地包含适当量的药学上可接受的赋形剂，以提供适当给药的形式。药物赋形剂可以是液体，例如水和油，包括石油，动物，植物或合成来源的油，例如花生油，大豆油，矿物油，芝麻油等。药物赋形剂可以是例如盐水，***胶，明胶，淀粉糊，滑石粉，角蛋白，胶体二氧化硅，尿素等。另外，可以使用辅助剂，稳定剂，增稠剂，润滑剂和着色剂。在一些实施方案中，当给予受试者时，药学上可接受的赋形剂是无菌的。当本文公开的任何药剂静脉内施用时，水是有用的赋形剂。盐溶液以及葡萄糖水溶液和甘油溶液也可以用作液体赋形剂，特别是用于注射溶液。合适的药物赋形剂还包括淀粉，葡萄糖，乳糖，蔗糖，明胶，麦芽，大米，面粉，白垩，硅胶，硬脂酸钠，单硬脂酸甘油酯，滑石粉，氯化钠，脱脂奶粉，甘油，丙烯，乙二醇，水，乙醇等等。如果需要，本文公开的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物也可以与润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂一起配制。其他合适的药物赋形剂的例子在Remington’s Pharmaceutical Sciences 1447-1676(Alfonso R. Gennaro eds.,19th ed.1995)有描述。
在一些实施方案中，将本文公开的组合物例如药物组合物悬浮在盐缓冲液(包括但不限于TBS，PBS等)中。
在一些实施方案中，本发明所述的包含氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的药物组合物可以采用溶液剂，混悬剂，乳剂，滴剂，片剂，丸剂，丸剂，胶囊剂，包含液体的胶囊剂，散剂，缓释制剂，乳剂，气雾剂的形式。喷雾剂，悬浮剂或其他适合使用的形式。必要时，包含本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的药物组合物还可包含增溶剂。而且，可以用本领域已知的合适的媒介物或递送装置来递送药剂。
在一些实施方案中，本文公开的用于氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的药物组合物可任选地包括局部麻醉剂，例如木尼卡因，以减轻注射部位的疼痛。
在一些实施方案中，本文描述的药物组合物是溶液剂，其中氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的质量百分比是下面选项中的任一项：约0.0001％(w/v)至约50％(w/v)，约0.01％(w/v)至约20％(w/v)的液体组合物，约0.01％至约10％(w/v)，约1％(w/v)至约3％(w/v)，约3％(w/v)至约5％(w/v)，约5％(w/v) 至约7％(w/v)，约5％(w/v)至约15％(w/v)，约7％(w/v)至约10％(w /v)v)，约10％(w/v)至约15％(w/v)，约15％(w/v)至约20％(w/v)，约20％(w/v)至约30％(w/v)，约30％(w/v)至约40％(w/v)，或约40％ (w/v)至约50％(w/v)。
在一些实施方案中，本文描述的药物组合物是溶液剂，其中氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的质量是下面选项中的任一项：约10mg至约2000mg，约10mg至约1500mg，约 10mg至约1000mg，约50mg至约1000mg，约10mg至约50mg，约50mg至约100mg，约40mg至约90mg，约200mg至约300mg，约70mg至约95mg，约100mg至约200 mg，约105mg至约200mg，约110mg至约140mg，约180mg至约220mg，约280mg 至约320mg，约200mg，约150mg或约300mg。
在一些实施方案中，本文描述的药物组合物是固体制剂，其中氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的质量百分比是下面选项中的任一项：至少约5％(w/w)，至少约10％(w/w)，至少约20％(w/w)，至少约50％(w/w)，至少约70％(w/w)w/w)，至少约 80％，约10％(w/w)至约30％(w/w)，约10％(w/w)至约20％(w/w)，约 20％(w/w)至约30％(w/w)，约30％(w/w)至约50％(w/w)，约30％(w /w)至约40％(w/w)大约40％(w/w)至大约50％(w/w)，大约50％(w/w) 至大约80％(w/w)，大约50％(w/w)至大约60％(w/w)，约70％(w/w) 至约80％(w/w)或约80％(w/w)至约90％(w/w)。
在一些实施方案中，本文描述的药物组合物是固体制剂，其中氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的质量是下面选项中的任一项：约10mg至约2000mg，约10mg至约1500mg，约10mg至约1000mg，约50mg至约1000mg，约10mg至约50mg，约50mg至约 100mg，约40mg至约90mg，约200mg至约300mg，约70mg至约95mg，约100mg 至约200mg，约105mg至约200mg，约110mg至约140mg，约180mg至约220mg，约280mg至约320mg，约200mg，约150mg或约300mg。
6.组合疗法
在一些实施方案中，如本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以用作单一疗法，用于通过作用于CDK2来治疗与由细胞周期蛋白A和/或细胞周期蛋白E引起的细胞周期失调有关的疾病。在一些实施方案中，如本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以用作一线的或二线的单药疗法，用于通过作用于CDK2来治疗与由细胞周期蛋白A和/或细胞周期蛋白E引起的细胞周期失调相关的疾病。在一些实施方案中，如本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物也可以与治疗剂组合或组合使用，所述治疗剂可用于通过作用于CDK2 而治疗与细胞周期蛋白失调相关的疾病，所述细胞周期失调是由细胞周期蛋白A和/或细胞周期蛋白E引起的。或者，仅通过举例的方式，可以通过施用佐剂来增强本文所述化合物之一的治疗效果(即，仅佐剂本身仅具有最小的治疗益处，但是与另一种治疗剂组合，总体对患者的治疗益处得到增强)。
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物还包含另外的抗肿瘤剂，其用于通过作用于CDK2来治疗与由细胞周期蛋白A和/或细胞周期蛋白E引起的细胞周期失调有关的疾病。在一些实施方案中，本文提供了一种药物组合物，其包含选自表1中任选的Comps.7-213的氘代吡啶并嘧啶酮化合物，或其药学上可接受的盐，立体异构体，共晶体，前药，溶剂化物，水合物和多晶型物，以及一种或多种其他抗肿瘤药；这儿所述的药物组合物可用于治疗选自乳腺癌，转移性乳腺癌，三阴性乳腺癌，三苯氧胺抗性乳腺癌，HR+和HER2阴性乳腺癌，ER+HER2-乳腺癌，卵巢癌的疾病或失调，上皮性卵巢癌，神经母细胞瘤，胶质母细胞瘤，B细胞淋巴瘤，***癌，肝癌，急性髓细胞性白血病，或黑色素瘤。如本文所用，术语“组合”或“药物组合”是指本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物与一种或多种其他抗肿瘤剂的联合给药。本文所述的组合疗法克服了与CDK4/6抑制剂单一疗法相关的耐药性问题。
在一些实施方案中，本文描述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物可以与放射，手术，其他抗肿瘤药，芳香酶抑制剂，有丝***抑制剂，激素疗法，选择性***受体降解剂 (SERD，例如氟维司汀)，细胞毒剂，微管稳定剂，烷化剂，拓扑异构酶抑制剂，靶向癌症治疗，癌症免疫治疗单克隆抗体，免疫调节剂，例如PD-1拮抗剂，沙利度胺，抗癌剂，内分泌治疗等。在一些实施方案中，在本文所述的任何联合疗法中使用的靶向疗法选自IMiD(免疫调节药物)，蛋白酶抑制剂，HDAC(组蛋白脱乙酰基酶)抑制剂，IKK (IκB激酶)抑制剂，PI3K抑制剂，mTOR抑制剂。，Akt抑制剂，聚(ADP-核糖)(PARP) 抑制剂，IDO(吲哚胺2,3-二加氧酶)抑制剂，TDO(色氨酸2,3双加氧酶)抑制剂，ALK (间变性淋巴瘤激酶)抑制剂，ROS(活性氧)抑制剂，MEK(促***原活化蛋白激酶) 抑制剂，VEGF(血管内皮生长因子)抑制剂，FLT3(FMS样受体酪氨酸激酶-3)抑制剂， AXL(AXL受体酪氨酸激酶)抑制剂，ROR2(孤儿受体酪氨酸激酶-像受体2)抑制剂， EGFR(表皮生长因子受体)抑制剂，FGFR(成纤维细胞生长因子受体)抑制剂，AR(雄激素受体)抑制剂，Src/Abl(原癌基因酪氨酸-蛋白激酶/Abelson酪氨酸激酶)抑制剂，PRK/拉斯(磷酸核糖激酶/Ras)抑制剂，Myc抑制剂，Raf抑制剂，PGDF(血小板衍生的生长因子受体)抑制剂，c-Kit(c-Kit受体酪氨酸激酶)抑制剂，ErbB2(HER2) 抑制剂，CDK4/6抑制剂，CDK5抑制剂，CDK7抑制剂，CDK9抑制剂，SMO(平滑的) 抑制剂，CXCR4抑制剂，GLS1抑制剂，EZH2(zeste同源物2的增强剂)抑制剂，Hsp90 抑制剂，免疫促凝剂，例如PD-1，PD-L1拮抗剂，OX40激动剂或4-1BB激动剂。
在一些实施方案中，在本文所述的任何联合疗法中使用的另外的抗肿瘤药选自芳香酶抑制剂，内分泌疗法，激素疗法，选择性***受体降解剂，细胞毒剂，PD-1 拮抗剂，PD-L1拮抗剂，AR抑制剂，谷氨酰胺酶抑制剂，CDK4/6抑制剂，CDK9抑制剂或Akt抑制剂。在一些实施方案中，所述另外的抗肿瘤药选自PI3K抑制剂，mTOR 抑制剂和Akt抑制剂。
在一些实施方案中，在本文所述的任何联合疗法中使用的另外的抗肿瘤药是他莫昔芬，多西他赛，紫杉醇，顺铂，卡培他滨，吉西他滨，长春瑞滨，依西美坦，来曲唑，氟维司群，阿那曲唑或曲妥珠单抗。
在一些实施方案中，本文描述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物可与外科手术切除癌症组合。在一些实施方案中，本文描述的氘代吡啶并嘧啶酮化合物可与放射疗法组合。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可与内分泌疗法组合。
在一些实施方案中，在本文所述的任何组合疗法中使用的另外的作用在细胞周期的非G2-M期的抗肿瘤剂选自胸苷酸合酶抑制剂，DNA交联剂，拓扑异构酶I或II抑制剂，DNA烷基化试剂，核糖核酸酶抑制剂，细胞毒剂，生长因子抑制剂及其组合。
在一些实施方案中，如本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以与一种或多种DNA烷基化剂组合，包括但不限于苯丁酸氮芥，氯次甲基，环磷酰胺，异环磷酰胺，美法仑，卡莫司汀，非特马汀，洛莫斯汀，链脲霉素，卡铂，顺铂，奥沙利铂，沙铂，白消安，达卡巴嗪，普卡巴嗪，替莫唑胺，thioTEPA，和尿嘧啶。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可与一种或多种有丝***抑制剂组合，所述有丝***抑制剂包括但不限于多西他赛，紫杉醇，长春碱，长春新碱，长春地辛和长春瑞滨。在一些实施方案中，本文所述的氘代化合物可以与一种或多种微管稳定剂组合，所述微管稳定剂包括但不限于多西紫杉醇，紫杉醇和埃坡霉素 A-F。
在一些实施方案中，如本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以与一种或多种拓扑异构酶I或II抑制剂组合，所述抑制剂包括但不限于依托泊苷，依托泊苷磷酸酯，替尼泊苷，喜树碱，托泊替康和伊立替康。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可与一种或多种癌症免疫疗法单克隆抗体组合，所述抗体包括但不限于利妥昔单抗，阿仑单抗，贝伐单抗，西妥昔单抗，吉妥珠单抗，帕尼单抗，托西单抗和曲妥珠单抗。
在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可与一种或多种抗癌剂组合，所述抗癌剂包括但不限于柔红霉素，阿霉素，表柔比星，伊达比星，米托蒽醌，戊柔比星，放线菌素，博来霉素，丝裂霉素，普卡霉素，硼替佐米羟基脲。
在一些实施方案中，在本文所述的联合疗法中使用的另外的抗肿瘤药包括免疫检查点抑制剂，AR抑制剂，谷氨酰胺酶抑制剂或Akt抑制剂。
在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中使用的另外的抗肿瘤药是选自双[(4-氟苯基)甲基]三硫化物(氟卡帕星)，5-乙炔基嘧啶-2,4(1H，3H)的小分子化合物。)-二酮(依尼尿嘧啶)，萨拉卡替尼(azd0530)，顺铂，多西紫杉醇，卡铂，阿霉素，依托泊苷，紫杉醇(紫杉醇)，西米替塞替尼(cx-4945)，lenvatinib，伊洛富芬，奥沙利铂，替塞紫杉醇，氢氯噻吩，氢氯贝普，，阿塞西替尼，伊曲康唑，他非替尼，briciclib，阿糖胞苷，帕尼西布，吡铂，绿原酸，吡罗替尼(kbp-5209)， ganetespib(sta 9090)，艾司洛莫尔钠，安布来明-x，伊立替康，达瑞那松，姜黄素，姜黄素，XL-418，依维莫司，硼替米布，吉非替尼，厄洛替尼，拉帕替尼，阿富来替尼，阿马斯坦，阿扎胞苷，布瓦尼丙氨酸盐，布帕尼西布，卡巴他赛，卡培他滨，克唑替尼，达布拉非尼，达沙替尼，N1,N11-bis(ethyl)norspermine(BENSM),依达拉西布来那度胺，泊马利度胺，米托蒽醌，莫洛替尼，莫替沙尼，那巴布星，那他替尼，索拉非尼，帕唑帕尼，培美曲塞，匹马塞替尼，抗坏血酸酰胺，瑞法替尼，egorafenib， ridaforolimus，头孢噻替尼，阿波替尼，托马替尼，托马来酸伏立诺他，lipotecan， GSK-461364及其组合。
在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中使用的另外的抗肿瘤剂是PI3K抑制剂，其选自渥曼青霉素，替西罗莫司，依维莫司，buparlisib(BMK-120)，5- (2,6-dimorpholinopyrimidin-4-yl)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺)，Pictilisib， gedatolisib，apitolisib，pilaralisib，copanlisib，alpelisib，taselisib，PX-866 (((1E，4S，4aR，5R，6aS，9aR)-5-(乙酰氧基)-1-[(二-2-丙烯-1-基氨基)亚甲基]-4,4a，5,6,6a，8,9,9a-八氢-11-羟基-4-(甲氧基甲基)-4a，6a-二甲基环戊[5,6] 萘[1,2-c]吡喃-2,7,10(1H)-三酮)，LY294002(2-吗啉-4-基-8-苯基铬-4-酮)， dactolisib(2-甲基-2-{4-[3-甲基-2-氧-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[4,5-c] 喹啉-1-苯基]丙腈)，omipalisib(2,4-二氟-N-(2-甲氧基-5-(4-(哒嗪-4-基)喹啉 -6-基)吡啶-3-基)苯磺酰胺)(5-(4,6-dimorpholin-4-yl-1,3,5-triazin-2-yl) -4-(trifluoromethyl)pyridin-2-amine)，serabelisib(5-(4-amino-1-支柱 an-2-ylpyrazolo[3,4-d]嘧啶-3-基)-1,3-苯并恶唑-2-胺)，GSK2636771(2-甲基-1- (2-甲基-3-(三氟甲基)苄基)-6-吗啉代-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酸)，AZD8186(8-[((R) -1-(3,5-二氟苯胺基)乙基]-N，N-二甲基-2-吗啉-4-基-4-氧代色烯-6-羧酰胺)， SAR260301(2-[2-[(2S)-2,3-dihydro-2-methyl-1H-indol-1-yl]-2-oxoethyl]-6 -(4-吗啉基)-4(3H)-嘧啶酮)，IPI-549((S)-2-氨基-N-(1-(8-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-1-氧代-2-苯基-1,2-二氢异喹啉-3-基)乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺)及其组合。
在一些实施方案中，本文所述的组合疗法中使用的一种或多种其他抗肿瘤药可包括他莫昔芬，多西他赛，紫杉醇，顺铂，卡培他滨，吉西他滨，长春瑞滨，依西美坦，来曲唑，氟维司群，阿那曲唑或曲妥珠单抗。
在一些实施方案中，可以将本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物与一种或多种其他抗肿瘤药的组合配制为固定剂量组合或共同包装的离散剂量。在一些实施方案中，本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的固定剂量组合疗法包括双层片剂，三层片剂，多层片剂或具有多个氘代吡啶并嘧啶酮颗粒的胶囊。在一些实施方案中，氘化的嘧啶嘧啶酮化合物与一种或多种另外的抗肿瘤药的组合可以例如有间隔地，同时地或顺序地施用于需要其的受试者。
在一些实施方案中，可以在另外的抗肿瘤剂之前静脉内施用如本文所述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。在一些实施方案中，在本文所述的组合疗法中的氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物包含单一的(R，R) -(-)光学纯异构体，可以在另外的抗肿瘤剂之后静脉内施用。在一些实施方案中，可以在另外的抗肿瘤剂之前口服施用如本文所述的联合治疗中的氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物，其包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体。在一些实施方案中，在本文所述的组合疗法中的氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物包含单一的(R，R)-(-)光学纯异构体，可以在另外的抗肿瘤剂之后口服施用。
在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代吡啶并嘧啶酮化合物可以在放射疗法之前静脉内施用。在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以在放射疗法之后静脉内施用。在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代吡啶并嘧啶酮化合物可以在放射疗法之前口服施用。在一些实施方案中，可以在放射疗法后口服施用如本文所述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物。
在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以在手术移除之前静脉内施用。在一些实施方案中，在本文所述的组合疗法中的氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物包含单一的(R，R)-(-) 光学纯异构体，可以在手术切除后静脉内施用。在一些实施方案中，在本文描述的组合疗法中的包含单个(R，R)-(-)光学纯异构体的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物可以在手术移除之前口服施用。在一些实施方案中，在本文所述的组合疗法中的氘化的嘧啶并嘧啶酮化合物包含单一的(R，R)-(-)光学纯异构体，可以在手术切除后口服施用。
在一些实施方案中，如本文所述的氘代嘧啶并嘧啶酮化合物的组合疗法在抑制受试者的肿瘤细胞增殖方面产生协同作用。如本文所用，术语“协同作用”或“协同作用”或“协同作用”通常是指这样的作用，使得组合物组合的一种或多种作用大于单独的每种组分的一种或多种作用，或它们可能大于每个成分单独一个或多个效果的总和。协同效应可以是大于约10％，20％，30％，40％，50％，60％，75％，100％，110％， 120％，150％，200％，250％，350％，或单独使用一种成分对受试者的效果达到500％或更高，或单独给药时每种成分的相加效果。该效果可以是本文所述的任何可测量的效果。有利地，当组合时，这些药剂之间的这种协同作用可以允许使用较小剂量的一种或两种药剂，可以在相同剂量下提供更大的功效，并且可以防止或延迟多药耐药性的建立。Chou和Talalay的组合指数(CI)方法可用于确定组合使用的药物的协同作用，加和或拮抗作用(Chou,Cancer Res.2010,vol.70,pp.440-446)。当CI值小于1时，在组合中使用的化合物之间存在协同作用。当CI值等于1时，在组合中使用的化合物之间具有加和作用；而当CI值大于1时，则具有拮抗作用。以通过共同配制药物组合的药剂来获得协同作用。协同作用可通过同时或依次施用两种或多种试剂作为分开的制剂来获得。
在不脱离本发明的精神或基本属性的情况下，本发明可以以其他特定形式实施。本发明包括本文描述的本发明的优选方面和/或实施方案的所有组合。应该理解的是，本发明的任何和所有实施例可以与任何一个或多个其他实施例结合以描述另外的更优选的实施例。还应当理解，优选实施例的每个单独的元件是其自己独立的优选实施例。此外，实施例的任何元件意在与来自任何实施例的任何和所有其他元件组合以描述另外的实施例。
实施例
在以下的实施例中将进一步举例说明本发明。这些实施例仅用于说明本发明，但不以任何方式限制本发明，以下合成方法均为优选方案。
如本文所用，这些方法，方案和实施例中使用的符号和惯例与当代科学文献中所使用的符号和惯例一致，例如，Journal of the American Chemical Society或Journalof Biological Chemistry.特别是在实施例和整个说明书中可以使用以下缩写：
缩写
g(克)； mg(毫克)；
L(升)； mL(毫升)；
μL(微升)； psi(磅每平方英寸)；
M(摩尔浓度)； mM(毫摩尔浓度)；
Hz(赫兹)； MHz(兆赫)；
mol(摩尔)； mmol(毫摩尔)；
RT/rt(室温)； min(分钟)；
h(小时)； TLC(薄板层析)；
CH2Cl2(二氯甲烷)； THF(四氢呋喃)；
CDCl3(氘代氯仿)； CD3OD(氘代甲醇)；
SiO2(二氧化硅)； DMSO(二甲基亚砜)；
EtOAc(乙酸乙酯)； atm(大气压)；
HCl(盐酸)； NaOMe(甲醇钠)；
DMF(N，N-二甲基甲酰胺)； Ac(乙酰基)；
Cs2CO3(碳酸铯)； Me(甲烷基)；
Et(乙烷基)； EtOH(乙醇)；
MeOH(甲醇)； t-Bu(叔丁烷基)；
Et2O(***)； NaBH4(硼氢化钠)；
Boc2O(二碳酸二叔丁酯)； PhthK(邻苯二甲酰亚胺钠)；
Ms(甲磺酰基)； MsCl(甲磺酰氯)；
Cbz(苄基)； DIPEA(二异丙基乙胺)；
D/d(氘)； TBHP(叔丁基过氧化氢)；
FeCl2(二氯化铁)； EDTA(乙二胺四乙酸四钠)；
Boc(叔丁氧羰基)； Zn(锌)；
DMA(N，N-二甲基乙酰胺)； ACN(乙腈).
CDK(细胞周期蛋白依赖性激酶) TNBC(三阴性乳腺癌)
除非另有说明，否则所有温度均以℃(摄氏度)表示。除非另有说明，否则所有反应均在室温惰性气氛下进行。无需合成细节即可使用的试剂可商购或根据文献程序制备。
中间体1. 1-甲磺酰基-4-氘-4-氨基哌啶盐酸盐
中间体1的合成路线如方案1所示：
Figure RE-GDA0002742102170000521
第一步：将1-(甲磺酰基)哌啶-4-酮(500mg，2.82mmol)溶于四氢呋喃50ml，加入叔丁基亚磺酰胺(348mg，2.87mmol)和四异丙氧基钛(800mg，2.8mmol)，加热到80℃反应过夜，冷却后加入氘代硼氢化钠(236mg，5.64mmol)，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到产物1a 660mg。[M+H]+＝284.1。
第二步：将2-甲基-N-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-氘-4-基)丙基-2-亚磺酰胺(300mg，1.06mmol)溶于二氯甲烷10ml，加入氯化氢乙酸乙酯溶液50ml，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到中间体1,1-(甲基磺酰基)哌啶-4-氘-4-氨盐酸盐165mg。 [M+H]+＝180.1。
中间体2. 1-(三氘代甲基磺酰基)-4-氨基哌啶
中间体2的合成路线如方案2所示：
Figure RE-GDA0002742102170000522
将1-(甲磺酰基)哌啶-4-胺(250mg，1.4mmol)溶于氘代甲醇5ml，加入甲醇钠(302mg，5.6mmol)，加热到50℃反应两天，浓缩后柱层析纯化得到中间体2,200 mg。[M+H]+＝182.1。
中间体3. 1-(甲基磺酰基)-3,3,5,5-四氘-4-氨基哌啶
中间体3的合成路线如方案3所示：
Figure RE-GDA0002742102170000531
第一步：将1-苄氧羰基-哌啶-4-酮(4.3g，18.4mmol)溶于氘代氯仿500ml，加入催化量1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯，室温反应1小时，旋干后处理得到 4.2g产物3a。[M+H]+＝238.1。
第二步：将3，3，5，5-四氘代-1-苄氧羰基-哌啶-4-酮(3a,4.2g，17.7mmol) 溶于四氢呋喃200ml，加入硼氢化钠(1.34g，35.4mmol)，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到4.1g产物3b。[M+H]+＝240.1。
第三步：将3，3，5，5-四氘代-1-苄氧羰基-哌啶-4-醇(3b,4g，16.7mmol) 溶于二氯甲烷200ml，加入二异丙基乙基胺(2.58g，20mmol)和甲磺酰氯(1.95g， 17mmol)，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到3.8g产物3c。[M+H]+＝318.1。
第四步：将3，3，5，5-四氘代-1-苄氧羰基-4-甲磺酰氧基哌啶(3c,3.5g，11mmol)溶于二甲基甲酰胺100ml，加入邻苯二甲酰亚胺钾(2.22g，12mmol)，加热到90℃反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到4.2g产物3d。[M+H]+＝369.2。
第五步：将3，3，5，5-四氘代-1-苄氧羰基-4-邻苯二甲酰亚胺基哌啶(3d,4.2g，11.4mmol)溶于水合肼200ml，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到产物3e 2.3g。 [M+H]+＝239.2。
第六步：将3，3，5，5-四氘代-1-苄氧羰基-4-胺基哌啶(3e,2.3g，9.6mmol) 溶于二氯甲烷100ml，加入二异丙基乙基胺(1.29g，10mmol)和Boc酸酐(2.18g， 10mmol)，室温反应过夜，浓缩后纯化得到700mg产物3f。[M+H]+＝339.2。
第七步：将3，3，5，5-四氘代-1-苄氧羰基-4-叔丁氧羰基胺基哌啶(3f,700mg，2mmol)溶于乙酸乙酯50ml，加入钯碳，氢气气氛下室温反应过夜，过滤后浓缩得到产物3g410mg。[M+H]+＝205.2。
第八步：将3,3,5,5-四氘代-4-叔丁氧羰基胺基哌啶(3g,410mg，1.45mmol)溶于二氯甲烷50ml，加入二异丙基乙基胺(258mg，2mmol)和甲磺酰氯(229mg，2mmol)，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到510mg产物3h。[M+H]+＝283.2。
第九步：将3,3,5,5-四氘代-1-甲磺酰基-4-叔丁氧羰基胺基哌啶(3h,510mg，1.8mmol)溶于乙酸乙酯10ml，加入氯化氢乙酸乙酯溶液50ml，室温反应过夜，浓缩后碱化得到390mg产物3。[M+H]+＝183.2。
中间体4. 1-((三氘代甲基)磺酰基)-4-氘-4-氨基哌啶
中间体4的合成路线如方案4所示：
Figure RE-GDA0002742102170000541
将1-甲磺酰基-4-氘-4-氨基哌啶盐酸盐(中间体1,600mg，2.78mmol)溶于氘代甲醇50ml，加入甲醇钠(162mg，3mmol)，室温反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到400mg中间体4,1-((三氘代甲基)磺酰基)-4-氘-4-氨基哌啶。[M+H]+＝183.1。
中间体5. 1-((三氘代甲基)磺酰基)-3,3,5,5-四氘代-4-氨基哌啶
中间体5的合成路线如方案5所示：
Figure RE-GDA0002742102170000542
中间体5的合成路线参照中间体4的合成。[M+H]+＝186.1。
中间体6. 1-(甲基磺酰基)-3,3,5,5-四氘代-4-氨基哌啶
Figure RE-GDA0002742102170000543
中间体6的合成路线参照中间体3的合成，在第二步用氘代硼氢化钠取代硼氢化钠作为还原剂。[M+H]+＝184.1。
中间体7. 1-((三氘代甲基)磺酰基)-3,3,4,5,5-五氘代-4-氨基哌啶
中间体7的合成路线如方案6所示：
Figure RE-GDA0002742102170000551
中间体7的合成路线参照中间体4的合成。[M+H]+＝187.1。
中间体8，9，10.trans-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-(甲基磺酰基) 吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮
中间体8，9，10的合成路线如方案7所示：
Figure RE-GDA0002742102170000552
第一步：将(+/-)4-((trans-2-羟基-2-甲基环戊基)氨基)-2-(甲巯基)嘧啶-5-醛(8a，200mg,0.75mmol,由WO2018033815中描述的方法合成)溶于干燥四氢呋喃8ml中，加入五氘代丙酸苄酯(8b，316mg,1.87mmol)，冷却到-5℃，滴加LiHMDS的 1M甲苯溶液(3.75ml,3.75mmol)然后缓慢升温至室温反应过夜。反应液中加入乙酸乙酯和水分层，有机相干燥后柱层析纯化得到210mg黄色油状物8c。[M+H]+＝309.1。
第二步：将(+/-)8-(trans-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-三氘代甲基-2-(甲巯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(8c，180mg,0.58mmol)溶于2-甲基四氢呋喃10ml和水2ml中，加入Oxone(900mg,1.46mmol)，室温搅拌过夜。反应液中加入乙酸乙酯和水分层，有机相干燥后柱层析纯化得到65mg类白色固体中间体8。[M+H]+＝341.1。
中间体9，10的合成路线参照中间体8相同的合成，其中外消旋混合物8a被纯光学对映体8a(参照WO2018033815中描述的方法合成)代替。
中间体11，12，13，trans-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮
Figure RE-GDA0002742102170000561
中间体11，12，13的合成路线参照中间体8，9，10相同的合成，其中五氘代丙酸苄酯8b被丙酸乙酯代替。[M+H]+＝338.1。
中间体14，15，16，trans-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2,3-d] 嘧啶-7(8H)-酮
Figure RE-GDA0002742102170000562
中间体14，15，16的合成路线参照中间体8，9，10相同的合成，其中的五氘代丙酸苄酯8b被乙酸乙酯代替。[M+H]+＝324.1。
实施例1.(±)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.1)
Figure RE-GDA0002742102170000563
Comp.1的合成参照WO2018033815中描述的方法.[M+H]+＝422.2。
实施例2.(±)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-二氟甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4- 基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.2)
Figure RE-GDA0002742102170000564
Comp.2的合成参照WO2018033815中描述的方法.[M+H]+＝472.2。
实施例3.(±)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.3)
Figure RE-GDA0002742102170000571
Comp.3的合成参照WO2018033815中描述的方法.[M+H]+＝436.2。
实施例4.(-)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.4)
Figure RE-GDA0002742102170000572
Comp.4的合成参照WO2018033815中描述的方法.[M+H]+＝436.2。
实施例5.(-)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-二氟甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4- 基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.5)
Figure RE-GDA0002742102170000573
Comp.5的合成参照WO2018033815中描述的方法.[M+H]+＝472.2。
实施例6.(-)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.6)
Figure RE-GDA0002742102170000574
Comp.6的合成参照WO2018033815中描述的方法.[M+H]+＝422.2。
实施例7.(±)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.11)
Figure RE-GDA0002742102170000575
化合物Comp.11的合成路线如方案8所示：
Figure RE-GDA0002742102170000581
将(+/-)8-(trans-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-三氘代甲基-2-(甲磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体8,65mg,0.19mmol)溶于二甲基亚砜5ml，加入1-(甲磺酰基)哌啶-4-胺(1a,68mg,0.38mmol)和二异丙基乙基胺(74mg,0.57mmol)，加热到70℃反应9小时。反应液用水稀释后，二氯甲烷甲醇(10:1)萃取，有机相旋干后柱层析纯化得到36mg白色固体Comp.11。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),7.35 (s,1H)，5.78-5.73(m,1H),5.46(brs,1H),4.01(brs,1H),3.86-3.80(m,1H), 2.98-2.85(m,6H),2.32-2.23(m，2H),2.06-1.84(m,4H),1.72-1.67(m,4H)； [M+H]+＝439.2。
实施例8.(±)-6-(氘代二氟甲基)-8-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.20)
Figure RE-GDA0002742102170000582
化合物Comp.20的合成路线如方案9所示：
Figure RE-GDA0002742102170000583
第一步：将2-((氘代二氟甲基)磺酰基)吡啶[2](6g,31mmol)溶于甲醇200ml和醋酸20ml中，加入锌粉(8g,124mmol)，室温搅拌4小时，过滤，滤饼用甲醇洗涤，有机相合并旋干得到粗产物7g，直接用于下一步。
第二步：将8-(trans-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲磺酰基)哌啶-4-基)氨基) 吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮[1](Comp.1,4.5g,10.7mmol)溶于二甲基亚砜100ml，加入三氟乙酸(1g,10.7mmol)，以及氘代二氟甲基亚磺酸锌粗产品(7g,23.5mmol) 和氯化亚铁(678mg,5.35mmol)的水溶液20ml。再向混合物中滴加70％水溶液的过氧叔丁醇(3.85g,42.8mmol)，室温反应过夜。将反应溶液倾倒入冷的10％乙二胺四乙酸钠水溶液，乙酸乙酯萃取，有机相再用10％乙二胺四乙酸钠水溶液洗涤，干燥浓缩后用柱层析和制备液相纯化得到700mg白色固体Comp.20。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.52 (s,1H),7.82(s,1H),5.78-5.50(m,2H),4.11-3.83(m,3H),2.96-2.88(m,2H), 2.83(s,3H),2.77(brs,1H),2.31-1.65(m,10H),1.17(s,3H)；[M+H]+＝473.2。
与非氘代化合物[1]的如下核磁对照，确认氘代率>95％。
Figure RE-GDA0002742102170000591
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s1H),7.85(s,1H),6.94-6.66(m,1H，即被氘代的氢),5.80-5.60(m,2H),4.14-4.00(m,1H),3.88-3.86(m,2H),2.96-2.86(m, 6H),2.45-1.84(m,10H),1.19(s,3H)；[M+H]+＝472.2。
注：[1]WO2018033815
[2]J.Am.Chem.Soc.2018,140,880-883.
实施例9.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-(2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.28)
Figure RE-GDA0002742102170000592
化合物Comp.28的合成路线参照Comp.20,实施例8第二步使用的Comp.1被 Comp.6代替：白色固体，1HNMR(400MHz,d6-DMSO)δ8.81-8.76(m，1H)，8.21-7.95 (m，2H)，5.89-5.85(m，1H)，4.43-4.38(m，1H)，4.08-3.90(m，1H)，3.63-3.55 (m，2H)，2.90-2.83(m，5H)，2.27-2.18(m，2H)，2.00-1.45(m，8H)，1.01(d， J＝13.2Hz，3H)。[M+H]+＝472.2。ee值＝99.75％。氘代率>95％。
实施例10.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.37)
Figure RE-GDA0002742102170000601
化合物Comp.37的合成路线参考Comp.11,实施例7使用的中间体8被中间体9取代：1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.35(s，1H)，5.78-5.74(m， 1H)，5.43(brs，1H)，4.01(brs，1H)，3.86-3.81(m，2H)，2.98-2.90(m，2H)， 2.85(s，4H)，2.32-2.23(m，3H)，2.09-1.84(m，4H)，1.71-1.62(m，3H)，1.18(s， 3H)。[M+H]+＝439.2。ee值＝99.75％。氘代率>95％。
实施例11.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基 -4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.47)
Figure RE-GDA0002742102170000602
化合物Comp.47的合成路线如方案10所示：
Figure RE-GDA0002742102170000603
将1-甲磺酰基-哌啶-4-氘-4-胺盐酸盐(中间体1，67mg，0.31mmol)溶于二甲基亚砜5ml，加入8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(甲基磺酰基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体15，50mg，0.15mmol)和二异丙基乙基胺(129mg，1mmol)，加热到80℃反应过夜，浓缩后制备板纯化得到28mg Comp.47。1HNMR(400MHz,CDCl3) δ8.45(s，1H)，7.47(d，J＝9.2Hz，1H)，6.38(d，J＝9.2Hz，1H)，5.77-5.73(m， 1H)，3.86-3.81(m，2H)，2.99-2.91(m，2H)，2.85(s，4H)，2.31-2.22(m，3H)， 2.05-1.84(m，4H)，1.75-1.68(m，2H)，1.20(s，3H)。[M+H]+＝423.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例12.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.55)
Figure RE-GDA0002742102170000611
化合物Comp.55的合成路线如方案11所示：
Figure RE-GDA0002742102170000612
将1-(三氘代甲基磺酰基)哌啶-4-胺(中间体2，200mg，1.1mmol)溶于二甲基亚砜5ml，加入8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(甲基磺酰基)吡啶[2,3-d]嘧啶 -7(8H)-酮(中间体15，356mg，1.1mmol)和二异丙基乙基胺(258mg，2mmol)，加热到60℃反应过夜，浓缩后制备板纯化得到180mg Comp.55。1HNMR(400MHz,CDCl3) δ8.44(s，1H)，7.47(d，J＝9.6Hz，1H)，6.37(d，J＝9.2Hz，1H)，5.77-5.72(m， 1H)，5.54(brs，1H)，4.02(brs，1H)，3.86-3.81(m，2H)，2.98-2.82(m，3H)， 2.30-2.23(m，3H)，2.03-1.87(m，4H)，1.70-1.63(m，2H)，1.19(s，3H)。[M+H]+＝425.2。 ee值＝99.7％。氘代率90％。
实施例13.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基 -3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.61)
Figure RE-GDA0002742102170000613
化合物Comp.61的合成路线如方案12所示：
Figure RE-GDA0002742102170000614
将3，3，5，5-四氘代-1-甲磺酰基-4-胺基哌啶(中间体3，244mg，1.34mmol) 溶于二甲基亚砜20ml，加入二异丙基乙基胺(258mg，2mmol)和8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(甲基磺酰基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体15，485mg， 1.5mmol)，加热到70℃反应过夜。浓缩后柱层析纯化得到112mg Comp.61。1HNMR(400MHz, CDCl3)δ8.45(s，1H)，7.47(d，J＝9.2Hz，1H)，6.37(d，J＝9.2Hz，1H)，5.77-5.73 (m，1H)，5.53(brs，1H)，4.00(brs，1H)，3.85-3.80(m，2H)，2.96-2.91(m， 2H)，2.85(s，4H)，2.30-2.22(m，2H)，2.05-1.84(m，4H)，1.19(s，3H)。[M+H]+＝426.2。 ee值＝99.7％。氘代率85％。
实施例14.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.67)
Figure RE-GDA0002742102170000621
化合物Comp.67的合成路线参考Comp.61，实施例13使用的中间体15被中间体12代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(s，1H)，7.35(s，1H)，5.78-5.73(m， 1H)，5.53(brs，1H)，3.99(brs，1H)，3.83-3.78(m，2H)，2.95-2.90(m，2H)， 2.84(s，4H)，2.31-2.19(m，2H)，2.16(s，3H)，2.08-1.88(m，4H)，1.17(s， 3H)。[M+H]+＝440.2。ee值＝99.7％。氘代率85％。
实施例15.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.74)
Figure RE-GDA0002742102170000622
化合物Comp.74的合成路线参考Comp.55，实施例12使用的中间体15被中间体12代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.35(s，1H)，5.78-5.74(m，1H)， 5.42(brs，1H)，4.00(brs，1H)，3.86-3.80(m，2H)，2.99-2.82(m，3H)，2.23-2.33 (m，3H)，2.17(s，3H)，2.09-1.84(m，4H)，1.72-1.62(m，3H)，1.18(s，3H)。 [M+H]+＝439.2。ee值＝99.7％。氘代率90％。
实施例16.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.80)
Figure RE-GDA0002742102170000631
化合物Comp.80的合成路线参考Comp.47，实施例11使用的中间体15被中间体12代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.4(s，1H)，7.35(s，1H)，5.78-5.74(m，1H)， 5.39(brs，1H)，3.85-3.80(m，2H)，2.99-2.91(m，2H)，2.85(s，4H)，2.34-2.21 (m，3H)，2.17(s，3H)，2.07-1.84(m，4H)，1.74-1.64(m，3H)，1.18(s，3H)。 [M+H]+＝437.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例17.(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.85)
Figure RE-GDA0002742102170000632
化合物Comp.85的合成路线参考Comp.20，实施例8第二步使用的Comp.1被Comp.55代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.85(s，1H)，6.93-6.66(m， 1H)，5.78-5.69(m，2H)，4.17-3.99(m，1H)，3.88-3.85(m，2H)，2.96-2.91(m， 2H)，2.83-2.75(m，1H)，2.33-2.14(m，3H)，2.07-1.82(m，4H)，1.19(s，3H)。 [M+H]+＝475.2。ee值＝99.7％。氘代率90％。
实施例18.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.92)
Figure RE-GDA0002742102170000633
化合物Comp.92的合成路线参考Comp.20，实施例8第二步使用的Comp.1 被Comp.55代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.85(s，1H)，6.22(brs， 0.5H)，5.80(s，1H)，5.65(brs，0.5H)，4.12-4.02(m，1H)，3.86-3.78(m，2H)， 3.01-2.95(m，2H)，2.83-2.74(m，1.5H)，2.35-2.21(m，3.5H)，2.09-1.94(m， 4H)，1.87-1.82(m，2H)，1.19(s，3H)。[M+H]+＝476.2。ee值＝99.7％。氘代率90％。
实施例19.(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.99)
Figure RE-GDA0002742102170000641
化合物Comp.92的合成路线参考Comp.20，实施例8第二步使用的Comp.1 被Comp.47代替。使用商业化的二氟甲亚磺酸锌代替氘代二氟甲基亚磺酸锌。1HNMR (400MHz,CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.84(s，1H)，6.93-6.66(m，1H)，5.80-5.62 (m，2H)，3.88-3.82(m，2H)，2.97-2.91(m，2H)，2.85(s，4H)，2.33-2.21(m， 3H)，2.09-1.91(m，3H)，1.87-1.82(m，1H)，1.78-1.69(m，2H)，1.19(s，3H)。 [M+H]+＝473.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例20.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.108)
Figure RE-GDA0002742102170000642
化合物Comp.108的合成路线参考Comp.20，实施例8第二步使用的Comp.1 被Comp.47代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.84(s，1H)，6.41(brs，0.5H)，5.80(brs，1.5H)，3.85-3.77(m，2H)，3.02-2.96(m，2H)，2.86(s，3H)， 2.79-2.74(m，1H)，2.30-2.20(m，4H)，2.07-2.02(m，3H)，1.86-1.82(m，2H)， 1.75-1.68(m，1H)，1.18(s，3H)。[M+H]+＝474.2。ee值＝99.7％。氘代率95％。
实施例21.(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基))吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.121)
Figure RE-GDA0002742102170000643
化合物Comp.121的合成路线如方案13所示：
Figure RE-GDA0002742102170000651
第一步：将1-三氘代甲磺酰基-4-氘-4-氨基哌啶(中间体4，400mg，2.2mmol) 溶于二甲基亚砜20ml，加入二异丙基乙基胺(517mg，4mmol)和8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(甲基磺酰基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体5，711mg， 2.2mmol)，加热到70℃反应过夜，浓缩后柱层析纯化得到产物300mg。[M+H]+＝426.2。
第二步：将8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(三氘代甲磺酰基)哌啶-4- 氘-4-基)氨基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(80mg，0.19mmol)溶于二甲基亚砜5ml，加入三氟乙酸(22mg,0.19mmol)，以及二氟甲亚磺酸锌(118mg,0.4mmol)和氯化亚铁(12.7mg,0.1mmol)的水溶液1ml。再向混合物中滴加70％水溶液的过氧叔丁醇(100mg,0.8mmol)，室温反应过夜。将反应溶液倾倒入冷的10％乙二胺四乙酸钠水溶液，乙酸乙酯萃取，有机相再用10％乙二胺四乙酸钠水溶液洗涤，干燥浓缩后用柱层析和制备板纯化得到38mgComp.121。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s，1H)， 7.85(s，1H)，6.93-6.66(m，1H)，5.81-5.63(m，2H)，3.87-3.81(m，2H)，2.97-2.91 (m，2H)，2.83-2.72(m，1H)，2.33-2.21(m，3H)，2.07-1.82(m，5H)，1.79-1.69 (m，2H)，1.19(s，3H)。[M+H]+＝476.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例22.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基))吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.127)
Figure RE-GDA0002742102170000652
化合物Comp.127的合成路线参考Comp.121，使用实施例8中的试剂2b代替二氟甲亚磺酸锌。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.85(s，1H)，6.34(brs， 0.5H)，5.80(brs，1.5H)，3.85-3.77(m，2H)，3.01-2.95(m，2H)，2.83-2.74(s，1H)，2.29-2.20(m，3H)，2.04-1.67(m，8H)，1.18(s，3H)。[M+H]+＝477.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例23. 6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基) 哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.143)
Figure RE-GDA0002742102170000661
化合物Comp.143的合成路线参考Comp.121,实施例121使用的中间体4被中间体1代替。使用商业化的二氟甲亚磺酸锌代替氘代二氟甲基亚磺酸锌。1HNMR(400MHz,CDCl3) δ8.55(s，1H)，7.84(s，1H)，6.93-6.66(m，1H)，5.79-5.68(m，2H)，4.14-3.96 (m，1H)，3.86-3.80(m，2H)，2.98-2.91(m，2H)，2.85(s，4H)，2.33-2.25(m， 1H)，2.07-1.82(m，5H)，1.19(s，3H)。[M+H]+＝476.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例24.(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp. 146)
Figure RE-GDA0002742102170000662
化合物Comp.146的合成路线参考Comp.121,实施例21使用的中间体4被中间体5代替。用商业化的二氟甲基亚磺酸锌代替氘代二氟甲基亚磺酸锌。1HNMR(400MHz,CDCl3) δ8.55(s，1H)，7.85(s，1H)，6.93-6.66(m，1H)，5.80-5.69(m，2H)，4.11-3.99 (m，1H)，3.86-3.80(m，2H)，2.94-2.91(m，2H)，2.83-2.71(m，1H)，2.33-2.25 (m，1H)，2.07-1.82(m，5H)，1.19(s，3H)。[M+H]+＝479.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例25.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.149)
Figure RE-GDA0002742102170000663
化合物Comp.149的合成路线参考Comp.20实施例8使用的Comp.1被Comp.61代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.85(s，1H)，5.79(brs，1H)，4.14-3.99 (m，2H)，3.86-3.79(m，2H)，2.95-2.92(m，2H)，2.86(s，4H)，2.34-2.26(m， 1H)，2.09-1.82(m，5H)，1.20(s，3H)。[M+H]+＝477.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例26.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.152)
Figure RE-GDA0002742102170000671
化合物Comp.152的合成路线如方案14所示：
Figure RE-GDA0002742102170000673
方案14
第一步：中间化合物Comp.194的合成路线参照Comp.11，8-((1R,2R)-2-羟基 -2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮。[M+H]+＝429.2。
第二步：合成路线参照实施例8Comp.12的第二步合成路线得到产物Comp.152。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.85(s，1H)，5.80(brs，2H)，4.11-3.98 (m，2H)，3.02-2.92(m，2H)，2.83-2.70(m，1H)，2.34-2.26(m，1H)，2.09-1.82 (m，5H)，1.20(s，3H)。[M+H]+＝480.2。ee值＝99.7％。氘代率80％。
实施例27.(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp. 156)
Figure RE-GDA0002742102170000672
化合物Comp.152的合成路线参考Comp.121，实施例21使用的中间体4被中间体7代替。用商业化的二氟甲基亚磺酸锌代替氘代二氟甲基亚磺酸锌。1HNMR(400MHz, CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.84(s，1H)，5.81-5.59(m，2H)，3.86-3.81(m，2H)， 2.96-2.91(m，2H)，2.83-2.71(m，1H)，2.33-2.26(m，1H)，2.09-1.82(m，5H)， 1.19(s，3H)。[M+H]+＝480.2。ee值＝99.7％。氘代率>95％。
实施例28.(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮 (Comp.159)
Figure RE-GDA0002742102170000681
化合物Comp.159的合成路线参考Comp.152，实施例26使用的中间体5被中间体7代替。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.84(s，1H)，6.03(brs，0.5H)， 5.78(brs，1.5H)，3.85-3.78(m，2H)，2.98-2.92(m，2H)，2.83-2.75(m，1H)， 2.31-2.25(m，1H)，2.08-2.01(m，3H)，1.86-1.82(m，2H)。[M+H]+＝481.2。ee值＝99.7％。氘代率88.8％。
实施例29.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮 (Comp.163)
Figure RE-GDA0002742102170000682
化合物Comp.163，白色固体，合成路线参考Comp.11，实施例7使用的1-(甲基磺酰基)-4-胺基哌啶被中间体7代替，使用的中间体8被中间体9代替。1HNMR(400MHz, CDCl3)δ8.39(s，1H)，7.35(s，1H)，5.77-5.73(m，1H)，3.84-3.79(m，2H)， 2.94-2.82(m，3H)，2.29-2.24(m，1H)，2.05-1.83(m，5H)，1.16(s，3H)。[M+H]+＝447.2。 ee值＝99.7％。氘代率83％。
实施例30.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.164)
Figure RE-GDA0002742102170000683
化合物Comp.164，淡黄色固体，合成路线参考Comp.11，实施例7使用的1-(甲基磺酰基)-4-胺基哌啶被中间体6代替，使用的中间体8被中间体9代替。1HNMR (400MHz,CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.35(s，1H)，5.78-5.74(m，1H)，5.48(brs， 1H)，3.84-3.79(m，2H)，2.95-2.90(m，2H)，2.84(s，4H)，2.32-2.24(m，1H)，2.06-1.84(m，5H)，1.17(s，3H)。[M+H]+＝444.2。ee值＝99.7％。氘代率85％。
实施例31.(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.169)
Figure RE-GDA0002742102170000691
化合物Comp.169的合成路线参考Comp.11，实施例7使用的1-(甲基磺酰基)-4- 胺基哌啶被中间体1代替，使用的中间体8被中间体9代替。1HNMR(400MHz,CDCl3) δ8.40(s，1H)，7.34(s，1H)，5.78-5.74(m，1H)，5.41(brs，1H)，3.85-3.80 (m，2H)，2.99-2.91(m，2H)，2.84(s，4H)，2.30-2.21(m，3H)，2.06-1.85(m， 4.5H)，1.74-1.64(m，5H)，1.18(s，3H)。[M+H]+＝440.2。ee值＝99.7％。氘代率99％。
实施例32.(+)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.182)
Figure RE-GDA0002742102170000692
化合物Comp.182的合成路线参考WO2018033815。[M+H]+＝436.2。
实施例33.(+)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.189)
化合物Comp.182的合成路线参考Comp.37。[M+H]+＝439.2。
实施例34.(+))-6-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.194)
Figure RE-GDA0002742102170000693
化合物Comp.194的合成路线参考WO2018033815。[M+H]+＝472.2。
实施例35.(+))-6-(氘代二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(Comp.205)
Figure RE-GDA0002742102170000701
化合物Comp.182的合成路线参考Comp.28。[M+H]+＝473.2。
所选高选择性CDK2抑制剂化合物及其表征数据列于下表1中(a.D％氘代率；ee％对映体纯度)
表1.高选择性CDK2抑制剂
Figure RE-GDA0002742102170000702
Figure RE-GDA0002742102170000711
Figure RE-GDA0002742102170000721
Figure RE-GDA0002742102170000731
Figure RE-GDA0002742102170000741
Figure RE-GDA0002742102170000751
Figure RE-GDA0002742102170000761
Figure RE-GDA0002742102170000771
Figure RE-GDA0002742102170000781
Figure RE-GDA0002742102170000791
Figure RE-GDA0002742102170000801
Figure RE-GDA0002742102170000811
Figure RE-GDA0002742102170000821
Figure RE-GDA0002742102170000831
Figure RE-GDA0002742102170000841
Figure RE-GDA0002742102170000851
Figure RE-GDA0002742102170000861
Figure RE-GDA0002742102170000871
Figure RE-GDA0002742102170000881
Figure RE-GDA0002742102170000891
Figure RE-GDA0002742102170000901
Figure RE-GDA0002742102170000911
Figure RE-GDA0002742102170000921
Figure RE-GDA0002742102170000931
Figure RE-GDA0002742102170000941
Figure RE-GDA0002742102170000951
Figure RE-GDA0002742102170000961
Figure RE-GDA0002742102170000971
Figure RE-GDA0002742102170000981
Figure RE-GDA0002742102170000991
Figure RE-GDA0002742102170001001
Figure RE-GDA0002742102170001011
Figure RE-GDA0002742102170001021
Figure RE-GDA0002742102170001031
Figure RE-GDA0002742102170001041
Figure RE-GDA0002742102170001051
Figure RE-GDA0002742102170001061
Figure RE-GDA0002742102170001071
实施例36：CDK2抑制剂体外激酶活性验证
为了验证CDK2抑制剂的高选择性，实验还检测了化合物与CDK1、CDK4、CDK6、CDK9的相互作用，同时将已公开的CDK2抑制剂加入实验中作为对比参照标准。所用CDK2抑制剂对比参照标准样本包括如下已公开的化合物：Comp.3,Comp.4,Comp.5and Comp. 6。
材料和试剂
(1).重组酶蛋白CDK1,CDK2,CDK4,CDK6,CDK9,cyclin B1,cyclin A2,cyclin D3,cyclin E1,cyclin T1由无锡佰翱得生物科学有限公司克隆和纯化所得.
(2).激酶缓冲液:50mM Tris HCl pH 8.0(SCR,Cat.30188360.)with 0.01％Tween 20(Sigma,P2287),50μg/mL BSA(Aladdin,A104912),and 5mM MgCl2(SCR,Cat.10012818).
(3).底部U型的384孔微孔板(Corning,cat.No.4512).
(4).ATP在4℃储藏(VWR,Cat.97061-226).
(5).MgCl2:(SCR,Cat.10012818).
(6).EDTA:(SCR,Cat.10009717).
(7)多肽底物-CDK1,CDK2,CDK4,CDK6 (5-FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPSKKKK-NH2,Scilight-Peptide,Cat.C2546704).
(8)多肽底物-CDK9(Ahx-GSRTPMY-NH2,Scilight-Peptide,Cat.C0769102).
下列实施例对上述合成的CDK2抑制剂进行激酶活性的验证及体外细胞实验认证。
1)CDK1/CyclinB1抑制剂体外激酶活性验证
在U形底384孔板(corning,4512#)中进行测定，最终测定体积是16ul，反应温度为27℃。CDK1/CyclinB1由无锡佰翱得生物科学有限公司制备。激酶的浓度由优化实验后结果决定，激酶稀释于测定缓冲液(50mM Tris.HCl PH8.0,0.01％Tween20,50ug/mL BSA,5mMMgCl2)中得到相应2.4×浓度的酶溶液。化合物以10mM的浓度溶于二甲基亚砜(DMSO)中，使用时，化合物用DMSO稀释成25nM到500uM的10个浓度梯度，分别 8.3倍稀释于测定缓冲液中，得到6×浓度的化合物溶液。多肽底物 (5-FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPSKKKK-NH2)及ATP稀释于测定缓冲液中，得到2.4×浓度的多肽底物及ATP混合溶液。将2ul测试化合物溶液与5ul酶溶液混合，孵育10min后，加入5ul多肽底物及ATP混合溶液，27℃孵育50min，然后通过向每种样品中加入4ul 浓度为120mM的EDTA来终止反应。以含有20uM星胞菌素的测定缓冲液代替化合物溶液作为100％抑制对照，以DMSO代替化合物溶液作为0％抑制对照，每个试验至少2个平行对照。
测定中试剂的最终浓度：ATP为2mM；Peptide为1uM；CDK1/CyclinB1为0.1nM。在Caliper EZ ReaderⅡ上通过荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。数据使用GraphPad Prism version 6.0进行计算，IC50值通过使用剂量反应曲线的非线性回归模型调整得到。
2)CDK2/CyclinA2抑制剂体外激酶活性验证
在U形底384孔板(corning,4512#)中进行测定，最终测定体积是16ul，反应温度为27℃。CDK2/CyclinA2由无锡佰翱得生物科学有限公司制备。激酶的浓度由优化实验后结果决定，激酶稀释于测定缓冲液(20mM MES PH6.75,0.01％Tween20,50ug/mL BSA, 2mMMgCl2)中得到相应2.4×浓度的酶溶液。化合物以10mM的浓度溶于二甲基亚砜(DMSO) 中，使用时，化合物用DMSO稀释成25nM到500uM的10个浓度梯度，分别8.3倍稀释于测定缓冲液中，得到6×浓度的化合物溶液。多肽底物 (5-FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPSKKKK-NH2)及ATP稀释于测定缓冲液中，得到2.4×浓度的多肽底物及ATP混合溶液。将2ul测试化合物溶液与5uL酶溶液混合，孵育10min后，加入5ul多肽底物及ATP混合溶液，27℃孵育20min，然后通过向每种样品中加入4ul 浓度为120mM的EDTA来终止反应。以含有20uM星胞菌素的测定缓冲液代替化合物溶液作为100％抑制对照，以DMSO代替化合物溶液作为0％抑制对照，每个试验至少2个平行对照。
测定中试剂的最终浓度：ATP为2mM；Peptide为1uM；CDK2/CyclinA2为0.05nM。在Caliper EZ ReaderⅡ上通过荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。数据使用GraphPad Prism version 6.0进行计算，IC50值通过使用剂量反应曲线的非线性回归模型调整得到。
3)CDK2/CyclinE1抑制剂体外激酶活性验证
在U形底384孔板(corning,4512#)中进行测定，最终测定体积是16ul，反应温度为27℃。CDK2/CyclinE1由无锡佰翱得生物科学有限公司制备。激酶的浓度由优化实验后结果决定，激酶稀释于测定缓冲液(20mM MES PH6.75,0.01％Tween20,50ug/mL BSA, 2mMMgCl2)中得到相应2.4×浓度的酶溶液。化合物以10mM的浓度溶于二甲基亚砜(DMSO) 中，使用时，化合物用DMSO稀释成25nM到500uM的10个浓度梯度，分别8.3倍稀释于测定缓冲液中，得到6×浓度的化合物溶液。多肽底物 5-FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPSKKKK-NH2)及ATP稀释于测定缓冲液中，得到2.4×浓度的多肽底物及ATP混合溶液。将2ul测试化合物溶液与5ul酶溶液混合，孵育10min后，加入5ul多肽底物及ATP混合溶液，27℃孵育20min，然后通过向每种样品中加入4ul 浓度为120mM的EDTA来终止反应。以含有20uM星胞菌素的测定缓冲液代替化合物溶液作为100％抑制对照，以DMSO代替化合物溶液作为0％抑制对照，每个试验至少2个平行对照。
测定中试剂的最终浓度：ATP为2mM；Peptide为1uM；CDK2/CyclinE2为0.5nM。在Caliper EZ ReaderⅡ上通过荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。数据使用GraphPad Prism version 6.0进行计算，IC50值通过使用剂量反应曲线的非线性回归模型调整得到。
4)CDK4/CyclinD3抑制剂体外激酶活性验证
在U形底384孔板(corning,4512#)中进行测定，最终测定体积是16ul，反应温度为27℃。CDK4/CyclinD3由无锡佰翱得生物科学有限公司制备。激酶的浓度由优化实验后结果决定，激酶稀释于测定缓冲液(50mM Tris.HCl PH8.0,0.01％Tween20,50ug/mL BSA,5mMMgCl2)中得到相应2.4×浓度的酶溶液。化合物以10mM的浓度溶于二甲基亚砜(DMSO)中，使用时，化合物用DMSO稀释成25nM到500uM的10个浓度梯度，分别 8.3倍稀释于测定缓冲液中，得到6×浓度的化合物溶液。多肽底物 5-FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPSKKKK-NH2)及ATP稀释于测定缓冲液中，得到2.4×浓度的多肽底物及ATP混合溶液。将2ul测试化合物溶液与5ul酶溶液混合，孵育10min后，加入5ul多肽底物及ATP混合溶液，27℃孵育180min，然后通过向每种样品中加入4ul 浓度为120mM的EDTA来终止反应。以含有20uM星胞菌素的测定缓冲液代替化合物溶液作为100％抑制对照，以DMSO代替化合物溶液作为0％抑制对照，每个试验至少2个平行对照。
测定中试剂的最终浓度：ATP为2mM；Peptide为1uM；CDK4/CyclinD3为20nM。在Caliper EZ ReaderⅡ上通过荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。数据使用GraphPad Prism version 6.0进行计算，IC50值通过使用剂量反应曲线的非线性回归模型调整得到。
5)CDK6/CyclinD3抑制剂体外激酶活性验证
在U形底384孔板(corning,4512#)中进行测定，最终测定体积是16ul，反应温度为27℃。CDK6/CyclinD3由无锡佰翱得生物科学有限公司制备。激酶的浓度由优化实验决定，激酶稀释于测定缓冲液(20mM MES PH6.75,0.01％Tween20,50ug/mL BSA,2mM MgCl2)中得到相应2.4×浓度的酶溶液。化合物以10mM的浓度溶于二甲基亚砜(DMSO) 中，使用时化合物用DMSO稀释至25nM到500uM的10个浓度梯度，分别8.3倍稀释于测定缓冲液中，得到6×浓度的化合物溶液。多肽底物 (5-FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPSKKKK-NH2)及ATP稀释于测定缓冲液中，得到2.4×浓度的多肽底物及ATP混合溶液。将2ul测试化合物溶液与5ul酶溶液混合，孵育10min 后，加入5ul多肽底物及ATP混合溶液，27℃孵育120min，然后通过向每种样品中加入 4ul浓度为120mM的EDTA来终止反应。以含有20uM星胞菌素的测定缓冲液代替化合物溶液作为100％抑制对照，以DMSO代替化合物溶液作为0％抑制对照。每个试验至少2个平行对照。
测定中试剂的最终浓度：ATP为2mM；Peptide为1uM；CDK6/CyclinD3为20nM。在Caliper EZ ReaderⅡ上通过荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。数据使用GraphPad Prism version 6.0进行计算，IC50值通过使用剂量反应曲线的非线性回归模型调整得到。
6)CDK9/CyclinT1抑制剂体外激酶活性验证
在U形底384孔板(corning，4512#)中进行测定，最终测定体积是16ul，反应温度为27℃。CDK9/CyclinT1由无锡佰翱得生物科学有限公司制备。激酶的浓度由优化实验决定，激酶稀释于测定缓冲液(20mM MES PH6.75，0.01％Tween20，50ug/mL BSA， 2mM MgCl2)中得到相应2.4×浓度的酶溶液。化合物以10mM的浓度溶于二甲基亚砜(DMSO) 中，使用时化合物用DMSO稀释至25nM到500uM的10个浓度梯度，分别8.3倍稀释于测定缓冲液中，得到6×浓度的化合物溶液。多肽底物(Ahx-GSRTPMY-NH2)及ATP稀释于测定缓冲液中，得到2.4×浓度的多肽底物及ATP混合溶液。将2ul测试化合物溶液与5ul酶溶液混合，孵育10min后，加入5ul多肽底物及ATP混合溶液，27℃孵育30min，然后通过向每种样品中加入4ul浓度为120mM的EDTA来终止反应。以含有20uM星胞菌素的测定缓冲液代替化合物溶液作为100％抑制对照，以DMSO代替化合物溶液作为0％抑制对照。每个试验至少2个平行对照。
测定中试剂的最终浓度：ATP为2mM；Peptide为1uM；CDK9/CyclinT1为8nM。在Caliper EZ ReaderⅡ上通过荧光底物和磷酸化产物进行电泳分离来对反应混合物进行分析。数据使用GraphPad Prism version 6.0进行计算，IC50值通过使用剂量反应曲线的非线性回归模型调整得到。
测试结果总结在下面的表格2中。
表格2
Figure RE-GDA0002742102170001111
Figure RE-GDA0002742102170001121
结果表明：上述合成的不同结构的CDK2抑制剂CDK-1700209、CDK-1700210、 CDK-1700216、CDK-1700222、CDK-1700223、CDK-1700226、CDK-1700227、CDK-1700237 对于CDK2都达到了nM级抑制率，对CDK2的IC50与对其他CDKs(CDK1、CDK4、CDK6、 CDK9)的IC50差别数十倍以上。
实施例37：化合物对体外培养的人体肿瘤细胞的生长抑制作用
受试药物：化合物
肿瘤株：人乳腺鳞状癌细胞HCC1806、人卵巢癌细胞OVCAR-3。
采用
Figure RE-GDA0002742102170001122
Direct Cell Proliferation Assay Kit(InvitrogenTM，目录号G35012)的方法，观察对体外培养的人肿瘤细胞HCC1806、OVCAR-3的生长抑制作用。人肿瘤细胞HCC1806、OVCAR-3均采购自美国ATCC细胞库。
Figure RE-GDA0002742102170001123
Direct Cell Proliferation Assay：弃去细胞老培养液，用PBS冲洗肿瘤细胞2次；加适当的胰酶(VWR目录号0458-25G)消化肿瘤细胞，消化至大部分细胞变圆从壁上掉落；加入含10％胎牛血清(Hyclone目录号SV30160.03)的RPMI-1640 (HCC1806；Gibco目录号A10491-01)、含20％胎牛血清和0.01mg/ml胰岛素的RPMI-1640 (OVCAR-3；Gibco目录号10370-021)培养液终止胰酶消化，用移液枪轻轻吹吸细胞，使肿瘤细胞完全悬浮起来；计数完后用完全培养基配制肿瘤细胞悬液至终浓度为 3.75×103个cells/mL(HCC1806)；3.75×104个cells/mL(OVCAR-3)，于384孔培养板内每孔接种40μL，完后置于37℃，5％CO2的培养箱中培养24h；加入药物，用安捷伦Bravo 自动移液工作站加药，每孔加样10μL，每组设三个平行孔，化合物用DMSO(BioRoYee，目录号AF0231)溶解后，用培养基稀释至10、3.33、1.11、0.37、0.123、0.041、0.0137、 0.0046、0.0015μM/L，DMSO浓度小于0.1％，对照孔加入含有0.1％DMSO的培养基)，置于5％CO2，37℃孵育7天；按照
Figure RE-GDA0002742102170001124
DirectCell Proliferation Assay Kit 的使用说明配制检测试剂，每孔加入50μL检测试剂，置于37℃孵育1小时，最后置于TECAN M1000中检测荧光值(激发光508nM，吸收光527nM)。Graphpad Prism 6.0 软件数据处理，绘制细胞的生长曲线图，计算药物对细胞的生长抑制率，求出药物的半数抑制浓度(IC50)。化合物对体外培养的人体肿瘤细胞的生长抑制作用如下表3所示。
表3
Figure RE-GDA0002742102170001125
Figure RE-GDA0002742102170001131
结果表明：CDK-1700222，CDK-1700227，CDK-1700209，CDK-1700216，CDK-1700226，CDK-1700237对人乳腺鳞状癌细胞HCC1806、人卵巢癌细胞OVCAR-3有抑制效果，尤其是我们新合成的CDK-1700222，其对于HCC1806和OVCAR-3的IC50与其他化合物 (CDK-1700227，CDK-1700209，CDK-1700216，CDK-1700226，CDK-1700237)相差2倍以上。
本发明的，在体外激酶活性验证及细胞试验中均有显著的抑制效果，且以 CDK-1700222的抑制效果最为显著。
本领域技术人员将认识到或能够仅仅使用常规的实验确定本文所述的具体实施方案和方法的许多等同物。这些等同物旨在包含在本申请的范围内。
实施例38：肝脏微粒体代谢稳定性试验
人肝微粒体和小鼠肝微粒体被用于式(1)至式(5)中的氘代吡啶并嘧啶酮化合物的代谢稳定性评估。
材料
人肝微粒体(cat.No.452161)和小鼠肝微粒体(cat.No.452701)购买于Corning。
液相色谱分析操作参数
使用LC-MS/MS和SCIEX API 4000质谱仪结合Agilent HPLC分析***分析样品。使用乙腈-水梯度色谱仪在ZORBAX XDB-C18色谱柱(5μm，50×2.1mm，色谱柱编号50-282) 上分离后，质谱(MS)分析使用Q1和Q3扫描模式的ESI电离法。
LC和MS均由Analyst软件控制。LC操作条件如下：流动相A：含0.1％甲酸的水溶液；流动相B：含0.1％甲酸的乙腈溶液；t＝0.5分钟，B相为25％，A相为75％； t＝1.10min，98％的B相和2％的A相；t＝1.90分钟，98％的B相和2％的A相； t＝1.91分钟，B相为25％，A相为75％。t＝3.0分钟，停止运行。
肝微粒体中的代谢稳定性测试
将肝微粒体与1.0μM的测试化合物在37℃下孵育。孵育混合物包含100mM磷酸缓冲液(pH＝7.4)，3mM MgCl2和1mM NADPH。孵育混合物中肝微粒体的浓度对于测试化合物为0.5mg/mL，对于MDZ为0.2mg/mL，总体积为0.2mL。在0分钟，5 分钟，15分钟，30分钟和60分钟的时间点取出等分试样以测试化合物。对于MDZ，在 0分钟，5分钟和20分钟的时间点取出等分试样。通过将等分试样转移到含有内标咪达***(MDZ)的甲醇溶液中进行分析定量，从而终止反应。通过LC-MS/MS分析淬灭的样品。一式两份进行孵育。人和小鼠的肝微粒体对测试化合物的代谢稳定性表示为消除半衰期(t1/2)。结果显示为重复测定的平均值±标准偏差。
下表4总结了测试化合物在肝微粒体中的代谢稳定性的测试结果。
表4.测试化合物在人肝微粒体和小鼠肝微粒体中的代谢稳定性的测试结果
Figure RE-GDA0002742102170001141
根据表4中的测试结果，与未氘代的Comp.4相比(R2＝-CH3,t1/2human＝462min,t1/2mouse＝16.5min)，氘代的Comp.37在人肝微粒体和小鼠肝微粒体孵育实验中的半衰期(t1/2分钟)增加了约4倍(R2＝-CD3 in Formula(3),t1/2human＝1732min, t1/2mouse＝72min)。
表4中的肝微粒体孵育实验测定数据令人惊讶地表明，对式(1)至式(5)化合物的不同位置的氘代并不总是导致氘代化合物的代谢稳定性的改善。例如，与未氘代的 Comp.6相比(t1/2human＝693min,t1/2mouse＝24.2min)，Comp.47(R15＝D)的肝微粒体孵育半衰期t1/2的加长(t1/2human＝990min,t1/2mouse＝24.5min)表明了在式(3)的R15位置的单一氘代改善了氘代化合物的代谢稳定性；然而，在式(3) 的R6,R7,R13,R14位置四氘代的Comp.61(t1/2human＝577.5min,t1/2mouse＝23.5min) 和在式(3)的R10位置三氘代的Comp.55(t1/ 2human＝346min,t1/2mouse＝21.4min) 的肝微粒体孵育半衰期t1/2的缩短表明了有些氘代反而降低了氘代化合物的代谢稳定性(参照表4)。
因此，本文公开的肝微粒体孵育测试的结果表明，在给定位置对式(1)-(5)的化合物的氘取代对代谢稳定性的影响是不可预测的。
实施例39：小鼠口服试验
材料和试剂
(1).
Figure RE-GDA0002742102170001151
HS 15(以前被视为
Figure RE-GDA0002742102170001152
HS 15)一种用在制备肠胃外制剂时作增溶剂的非离子表面活性剂；(2).DMA(N，N-二甲基乙酰胺)；(3).生理盐水；和(4). Tween80；(5)乙腈.CDK2抑制剂Comp.4,Comp.5,和Comp.37是由上述实施例 4,5and 10所述的制备方法制备。
测试样品配方的准备
1).静脉注射给药制剂的配制
用于静脉注射(iv)的Comp.4,Comp.5,和Comp.37的测试样品在含有10:10:80 (v/v/v)DMA：30％溶液HS 15：盐水的液体培养基中以1mg/mL的浓度制备。
向玻璃烧瓶中加入6.0μmol的测试化合物和0.265mL的DMA。将玻璃烧瓶涡旋振荡以使固体完全溶解。然后将0.265mL的30％溶液HS 15加入到DMA中的测试化合物溶液中并涡旋以允许均匀混合。最后，向玻璃烧瓶中的混合物中加入2.12mL盐水。将烧瓶涡旋振荡，混匀。用0.45μm的尼龙过滤膜(PALL TM)过滤，得无色澄清溶液。获得澄清的液体测试样品的静脉给药制剂。将等份的100μL测试样品静脉制剂放入1.5mL EP试管中，并保持在2-8℃，以备将来通过HPLC进行样品浓度定量。
吸取100μL×2过滤后的制剂，装入1.5-mL EP管，2-8℃保存，用于制剂浓度测定。
2)胃内(IG)给药制剂的配制
用于胃内(IG)给药的Comp.4,Comp.5,和Comp.37的测试样品在在含有0.5％甲基纤维素和0.1％Tween 80的水溶液中以3mg/mL的浓度制备。
向玻璃烧瓶中加入27μmol的测试化合物和4.047mL的具有01.％Tween 80的0.5％MC。将烧瓶和混合物涡旋，然后超声处理约15分钟，以使固体均匀分布。获得了文本样品的白色悬浮液。
吸取100μL×2过滤后的制剂，装入1.5-mL EP管，2-8℃保存，用于将来通过 HPLC进行样品浓度测定。
动物测试方案
总共有54只平均体重为19.7g至23.5g的雄性ICR小鼠购买于维通利华实验动物技术有限公司(动物质量合格证号：2003200024)。
给药前小鼠禁食过夜，给药当天，小鼠给药4h后恢复给食；实验过程中，小鼠可自由饮水。
每个测试化合物均以不同的给药途径一式两份进行测试：在一组测试中，小鼠通过静脉注射途径接受测试化合物，在另一组测试中，小鼠通过IG给药接受测试化合物。
下表5中说明了每只小鼠的测试方案。
表5.测试方案
Figure RE-GDA0002742102170001161
Figure RE-GDA0002742102170001171
样品收集和处理
实验当天，分别于各设定时间点经由眼眶静脉采血100μL，全血样品置于EDTA-K2抗凝管中。
全血样品于1500g条件下离心10min分离血浆，收集上层血浆样品至样品管中。
将10μL样品的等分试样加入100μL ACN，其中包含5ng/mL的维拉帕米，50ng /mL的格列本脲，200ng/mL的甲苯磺丁酰胺和200ng·mL-1的双氯芬酸，用于蛋白质沉淀。将该混合物涡旋振荡1分钟，然后以13000rpm离心8分钟。然后在70μL 的上清液中加入70μL的水，然后涡旋振荡10分钟。将等份的5μL混合物注射入LC-MS /MS***。
液相色谱分析操作参数
LC-MS/MS(API 4000：LC-MS-MS-001)，色谱柱：
Figure RE-GDA0002742102170001172
Xbridge-C18(5μm，50 ×2.1mm)(色谱柱编号50-223)，流动相A：0.1％甲酸水溶液；流动相B：0.1％甲酸乙腈溶液。液相色谱操作参数：t＝0.5分钟，B相为25％，A相为75％。t＝1.00 min，98％B相和2％A相；t＝1.90分钟，98％的B相和2％的A相；t＝1.91分钟，B相为25％，A相为75％。t＝3.0分钟，停止运行。进样量为5μL。流速为 0.8mL/min。检测波长设置为254nm。
小鼠的药代动力学测试结果总结在下表6中。
表6.小鼠的药代动力学测试结果
Figure RE-GDA0002742102170001181
备注:*F(生物利用度)通过使用AUC0-t计算。
实施例40：HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中肿瘤生长抑制试验
HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中肿瘤生长抑制试验被用于测试氘代嘧啶嘧啶酮化合物Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp.163,and Comp.164 对体内肿瘤生长抑制的效果。
材料和试剂
氘代嘧啶嘧啶酮化合物Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp.163,andComp.164由以上实施例中所述的合成路线制备。氘代嘧啶嘧啶酮化合物Comp.4,Comp. 37,Comp.5,Comp.28,Comp.163,and Comp.164的测试样品制剂被配制成含有0.1％ Tween-80(Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd,Lot No.20190322)的液体载体的液体制剂。
用于孵育HCC1806细胞的RPMI-1640培养液从Corning cellgro购买(Cat No.:10-040-CV)；FBS从GIBCOTM购买(Cat No.:10270-106)；磷酸缓冲液从Corning cellgro购买(Cat No.:21-040-CVR)；胰蛋白酶-EDTA从GIBCOTM购买(REF:25200-072)；青霉素-链霉素从GIBCOTM购买(REF:15140-122).
设备
离心机：Thermo Fisher,model:Thermo Fisher legend MACH 1.6；
倒置显微镜：Nikon,model:TS100；
生物安全柜：Thermo Fisher,model:Thermo MSC-Advantage；
二氧化碳培养箱：Thermo Fisher,model:Thermo HERA cell 150。
动物测试方案
从上海LC实验动物有限公司购买了42+8只雌性BALB/c裸鼠。这些动物是无特定病原体的，约有4-5周龄。这些动物的规格总结在下表7中。
裸鼠收到后，将它们放在笼子里。对每只裸鼠进行了健康检查，包括对皮毛，四肢和孔的评估。还检查每只裸鼠的姿势或运动是否有异常迹象。
将裸鼠饲养在透明聚碳酸酯塑料笼中(260mm x 160mm x 120mm)；每笼2-6只裸鼠。垫料是玉米芯垫料(经辐照，山东古德威生物技术有限公司，中国)，每周更换一次。在研究记录中详细列出了整个研究期间饲养裸鼠的房间号。向该房间供应的HEPA 过滤空气的速度为每小时15到25次换气。温度保持在20℃至26℃(68°F至79°F)，相对湿度为40％至70％。连续监测温度和湿度并进行记录。照明为荧光灯，持续12 小时(08:00-20:00)和黑暗12小时。
通过反渗透或用HCl将pH调节至2-3的高压灭菌器过滤市政供水中的水。水分析每年进行两次，其中包括重金属，硝酸盐，溶解的矿物质，总板数和大肠菌群的分析。
每只裸鼠都有一个独特的编号。在将裸鼠分配到接种组之前，将笼子用卡片标记，以标识研究编号，物种/株系，性别，笼子编号和动物编号。分配给接种组后，将笼子用卡片打上标签，并用颜色编码，并确定接种组以及上述信息。组分配记录在随机记录中。笼子在架子上分层，以减少任何环境影响对研究的影响。
表7.动物表征
Figure RE-GDA0002742102170001191
Figure RE-GDA0002742102170001201
测试方案
在5％CO2和37℃的条件下，将HCC1806细胞培养在添加了10％FBS的RPMI-1640 细胞培养液中，然后在培养进行10代后将其接种到裸鼠体内。
将约含有1×107个HCC1806细胞的PBS悬浮液经皮下注射到被3％至4％的异氟烷麻醉了每只动物的表皮内。当平均肿瘤体积达到80-120mm3时，将42只载瘤裸鼠根据肿瘤体积随机分为7组(每组6只裸鼠)。将分组日定义为第0天。在同一天将动物分组后立即进行处理。测试方案总结在下表8中。
表8.测试方案
分组 测试样品 N 剂量(mg/kg) 施用途径 给药方案
1 Vehicle 6 N/A P.O. BID,21天
2 Comp.4 6 30 P.O. BID,21天
3 Comp.37 6 30 P.O. BID,21天
4 Comp.5 6 30 P.O. BID,21天
5 Comp.28 6 30 P.O. BID,21天
6 Comp.163 6 30 P.O. BID,21天
7 Comp.164 6 30 P.O. BID,21天
N:每组动物数目；P.O.:口服；BID:每天两次
从接种之日起每天观察动物的健康状况和一般反应。在标准PharmaLegacy实验室临床观察表中记录并详细描述了正常健康外观和行为的所有例外情况。
分组后，每周两次测试动物的体重。用电卡尺测量以肿瘤的长度和宽度为单位的肿瘤体积，并如下计算肿瘤体积(V)：V＝(length x width2)/2。各个相对肿瘤体积(RTV)的计算如下：RTV＝Vt/V0，其中Vt是每天的体积，V0是治疗开始时的体积。
肿瘤生长抑制((TGI)＝(1-(Ti-T0)/(Ci-C0))×100％；Ti和Ci是测量日的治疗组和对照组的平均肿瘤体积；T0和C0是第0天治疗组和对照组的平均肿瘤体积。
如果体重减轻＞20％或肿瘤达到最大允许大小(2,000mm3)，则在预设实验终点之前处死裸鼠，并称重测量和计算对照载体和本文所述的本发明化合物治疗的裸鼠的存活率。
在第0天和第20天首次给药后的10分钟和6小时收集血浆。用2.0％至3.5％的异氟烷麻醉动物。每个时间点通过眼眶静脉收集约0.1mL血液。将血液收集到抗凝剂试管(EDTA-K2)中，并根据标准程序立即离心以产生血浆。立即将血浆在液氮中冷冻，并置于-70℃至-80℃进行保存。将血浆样品送至双良进行分析。
在实验结束时(第21天)收集肿瘤，处死裸鼠。收集肿瘤，称重，照相。
为了评估测试裸鼠的尸检结果，先通过二氧化碳窒息对动物实施安乐死，然后在体内研究结束时或当其符合以下任一条件时将其颈脱位：(1)肿瘤体积：某一组的平均肿瘤体积超过2000mm3。(2)肿瘤溃疡和坏死：肿瘤溃疡占肿瘤表面的约25％或更大，或者动物咀嚼病灶或过度注意溃疡。(3)动物功能受损：肿瘤干扰正常的动物功能(例如进食，饮水或移动)。(4)其他疾病症状。
实验结果
结果表示为平均值±S.E.M。两组之间通过相应的测试进行比较，p<0.05被认为是显着的。
i.体重
每只动物的体重每周两次记录。如表9和图2所示，与G1对照载体相比，G5 Comp.28组中的动物在第17天的体重显着降低，G2 Com.4组中的动物在第21天的体重显着上升。
表9.体重
Figure RE-GDA0002742102170001211
ii.肿瘤体积
每周两次测量和计算肿瘤体积，并在表10和图3中显示。与G1对照载体相比，用Comp.37(G3)治疗的动物从第3天到第21天显示出明显较小的肿瘤体积，用Comp.5 (G4)治疗的动物从第7天到第21天显示出明显较小的肿瘤体积，用Comp.163(G6) 治疗的动物在第7、17和21天显示出明显较小的肿瘤体积。
表10.肿瘤体积
Figure RE-GDA0002742102170001212
Figure RE-GDA0002742102170001221
iii.相对肿瘤体积
如表11和图4所示，在整个研究中，每组的相对肿瘤体积逐渐增加。与G1对照载体相比，Comp.37(G3)和Comp.5(G4)从第3天到第21天能够显着降低相对肿瘤体积。Comp.163(G6)可以在第3、7、10、17和21天以及降低肿瘤体积。Comp.28(G5) 和Comp.164(G7)能够在第21天降低相对肿瘤体积。
Table 11.相对肿瘤体积
Figure RE-GDA0002742102170001222
Figure RE-GDA0002742102170001231
iii.肿瘤重量
在研究结束时收集每只动物的肿瘤并称重。如表12和图5所示，与G1对照载体相比，用化合物Comp.37(G3),Comp.5(G4),Comp.163(G6)and Comp.164(G7) 治疗的动物显示肿瘤较轻。
Table 12.肿瘤重量
Figure RE-GDA0002742102170001232
v.肿瘤生长抑制
表13总结了与G1对照载体相比测试化合物的肿瘤生长抑制(TGI％)。
表13.肿瘤生长抑制(％)
Figure RE-GDA0002742102170001233
Figure RE-GDA0002742102170001241
在此实验中，HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型建立在BALB/c裸鼠中。此瘤异种移植模型用于测试Comp.4,Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp.163and Comp. 164对体内肿瘤生长抑制的有效性。
HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型在G1对照载体中生长良好。这证明了肿瘤异种移植模型成功地建立在BALB/c裸鼠中。
在治疗后第21天，小鼠的平均肿瘤大小在G1组达到2291.29mm3，在G2组达到1149.25mm3，在G3组达到1269.08mm3，在G4组达到1549.07mm3，在G6组达到1397.61 mm3，在G7组达到1610.30mm3。
在HCC806s.cBALB/c裸小鼠肿瘤异种移植模型中，与G1对照载相比，测试化合物Comp.37,Comp.5,Comp.28,Comp.163and Comp.164各自表现了肿瘤生长抑制的有效性(TGI％)：46.80％,44.10％,34.01％,40.94％and 31.27％。测试化合物Comp. 4对肿瘤生长抑制几乎无效(表13，G2，TGI％＝6.55％)。
鉴于以下事实：与化合物Comp.28在小鼠肝微粒体孵育中的代谢稳定性相比，化合物Comp.37在小鼠肝微粒体培养中具有较低的代谢稳定性(半衰期t1/2较短)(t1/2 mouse＝182.0min for Comp.28vs.t1/2mouse＝72min for Comp.37)(见实施例 38中的表5)，与在式(3)R2位置氘代的二氟甲基化合物Comp.28(R2＝-CF2D，第21 天的肿瘤负担减少了34.01％)相比较，在式(3)R2位置氘代的化合物Comp.37(R2＝-CD3, 第21天的肿瘤负担减少了46.8％)显示的优异的体内肿瘤抑制效果是不可预测的(上表 13)
另外，鉴于以下事实：与化合物Comp.5在小鼠肝微粒体孵育中的代谢稳定性相比较，化合物Comp.28在小鼠肝微粒体培养中具有较高的代谢稳定性(半衰期t1/2较长)(t1/ 2mouse＝182.0min for Comp.28vs.t1/2mouse＝22.0min for Comp.5)(见实施例38中的表5)，与非氘代的二氟甲基化合物Comp.5(R2＝-CF2H),第21天的肿瘤负担减少了44.1％)相比较，在式(3)R2位置氘代的二氟甲基化合物Comp.28(R2＝-CF2D) 显示了降低的肿瘤抑制效果是不可预测的(第21天的肿瘤负担减少34.01％(见上表13)
如本文所述的裸小鼠肿瘤异种移植模型的测试结果表明，在选择性位置氘代对式(1) -(5)的化合物对体内抗肿瘤生长抑制的功效的影响是不可预测的。此外，由在式(1) -(5)的分子的选择性位置上氘代引起的代谢稳定性的改善并不总能引起体内抗肿瘤生长抑制功效的增强。

Claims (70)

1.式(1)化合物：
Figure RE-FDA0002742102160000011
或其药学上可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
其中：
R1是5-6元碳环基，其中所述5-6元碳环基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟,羟基,和C1-C4碳烷基，其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,羟基,氰基,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,和C1-C4氟烷基，
R2是一个取代基选自氢,氘，氟，氯，溴，C1-C4碳烷基,或C1-C4氟烷基,其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，和C1-C4氟烷基；其中所述C1-C4氟烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，C1-C2氟烷基，和C1-C2氟烷氧基；
R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R11,R12,R13,R14和R15分别独立选自氢或氘；
R10是一个取代基选自-NHR16；C1-C2氟烷基；环丙烷基；
Figure RE-FDA0002742102160000012
Figure RE-FDA0002742102160000013
和C1-C2碳烷基；其中所述C1-C2碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟，CH3-(CH2)n-O-，3-5元碳环基，和C1-C2氟烷氧基；
R16为氢，甲烷基，C1-C3氟烷氧基，
Figure RE-FDA0002742102160000014
n为0,1,2,或3；
式(1)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
2.权利要求1所示的化合物结构式中，R1可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-FDA0002742102160000015
Figure RE-FDA0002742102160000021
3.权利要求1所示的化合物结构式中，R1的结构可以选自下面取代基中的任意一个:
Figure RE-FDA0002742102160000022
4.权利要求1所示的化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-FDA0002742102160000023
5.权利要求1所示的化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：H,D,F,Cl,CH3-,CH3-CH2-,-CH2-OH,-CH2-CN,-CH2-C(＝O)NH2,-CH2-CH2-OH,-CH2-CH2-OMe,-CF2H,-CFH2,-CF3,-CH2-CF2H,-CFD2,-CF2D,-CH2-CF2D,-CD2-CF2H,-CD2-CF2D,和-CD3。
6.权利要求1所示的化合物结构式中，R2的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,和CD3-。
7.权利要求1所示的化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：-NH2,-NHMe,-CH3,-CH2F,-CD3,乙烷基,环丙烷基,和-CH2-CH2-OMe。
8.权利要求1所示的化合物结构式中，R10的结构可以选自下面取代基中的任意一个：CH3-,或CD3-。
9.权利要求1所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝D。
10.权利要求1所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝D。
11.权利要求1所示的化合物结构式中，R15＝D。
12.权利要求1所示的化合物结构式中，R1的结构选自四个结构式中的任意一
Figure RE-FDA0002742102160000024
Figure RE-FDA0002742102160000025
R2的结构可以任选自下面取代基中的意一个：CH3-,CF2H-,CF2D-,或CD3-；R10的结构可以任选自下面取代基中的任意一个：-NH2,-NHMe,-CH3,-CH2F,-CD3,乙烷基,环丙烷基,和-CH2-CH2-OMe。
13.权利要求1所示的化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-FDA0002742102160000031
R2的结构可以任选自CH3-,CF2H-,CF2D-，和CD3-；R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
14.权利要求1所示的化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-FDA0002742102160000032
R2的结构可以任选自CH3-,和CD3-；R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
15.权利要求1所示的化合物，可以任选自表1中化合物7-213中的任意一个。
16.式(2)化合物：
Figure RE-FDA0002742102160000033
及其药学可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
其中：
R1可以选自下面取代基中的任意一个：
Figure RE-FDA0002742102160000034
R2是一个取代基选自氢,氘，氟，氯，溴，C1-C4碳烷基,或C1-C4氟烷基,其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，和C1-C4氟烷基；其中所述C1-C4氟烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，C1-C2氟烷基，和C1-C2氟烷氧基；
R6,R7,R13,R14和R15分别独立选自氢或氘，其中R6＝R7＝R13＝R14；
R10是一个取代基选自-NHR16；C1-C2氟烷基；环丙烷基；
Figure RE-FDA0002742102160000035
Figure RE-FDA0002742102160000036
和C1-C2碳烷基；其中所述C1-C2碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟，CH3-(CH2)n-O-，3-5元碳环基，和C1-C2氟烷氧基；
R16是一个取代基选自氢，甲烷基，C1-C3氟烷氧基，
Figure RE-FDA0002742102160000041
和
Figure RE-FDA0002742102160000042
n为0,1,2,或3；
式(2)的化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
17.权利要求16所示的化合物结构式中，R1的结构是
Figure RE-FDA0002742102160000043
18.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-,CF2H-,CF2D-，和CD3-。
19.权利要求16所示的化合物结构式中，R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
20.权利要求16所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝氘。
21.权利要求16所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘。
22.权利要求16所示的化合物结构式中，R15是氘。
23.权利要求16所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝氘并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
24.权利要求16所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
25.权利要求16所示的化合物结构式中，R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R15是氘。
26.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R6＝R7＝R13＝R14＝氘。
27.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘。
28.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R15是氘。
29.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，R6＝R7＝R13＝R14＝氘，并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
30.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘，并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
31.权利要求16所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R15是氘。
32.高对映体纯度的式(3)化合物：
Figure RE-FDA0002742102160000051
及其药学可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，
其中：
R2是一个取代基选自氢,氘，氟，氯，溴，C1-C4碳烷基,或C1-C4氟烷基,其中所述C1-C4碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，和C1-C4氟烷基；其中所述C1-C4氟烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自D,-OH,-CN,Cl,-C(＝O)-NH2,CH3-(CH2)n-O-,3-6元碳环基，C1-C2氟烷基，和C1-C2氟烷氧基；
R6,R7,R13,R14和R15分别独立选自氢或氘，其中R6＝R7＝R13＝R14；
R10是一个取代基选自-NHR16；C1-C2氟烷基；环丙烷基；
Figure RE-FDA0002742102160000052
Figure RE-FDA0002742102160000053
和C1-C2碳烷基；其中所述C1-C2碳烷基任选进一步被一个或多个取代基取代，这些取代基选自氘,氟，CH3-(CH2)n-O-，3-5元碳环基，和C1-C2氟烷氧基；
R16是一个取代基选自氢，甲烷基，C1-C3氟烷氧基，
Figure RE-FDA0002742102160000054
和
Figure RE-FDA0002742102160000055
n为0,1,2,或3；
式(3)化合物至少有一个氢原子被氘原子取代。
33.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-,CF2H-,CF2D-，和CD3-。
34.权利要求32所示的化合物结构式中，R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
35.权利要求32所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝氘。
36.权利要求32所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘。
37.权利要求32所示的化合物结构式中，R15是氘。
38.权利要求32所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝氘并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
39.权利要求32所示的化合物结构式中，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
40.权利要求32所示的化合物结构式中，R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R15是氘。
41.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R6＝R7＝R13＝R14＝氘。
42.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘。
43.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R15是氘。
44.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，R6＝R7＝R13＝R14＝氘，并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
45.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，R6＝R7＝R13＝R14＝R15＝氘，并且R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-。
46.权利要求32所示的化合物结构式中，R2的结构可以任选自CH3-，和CD3-，R10的结构可以任选自CH3-，和CD3-，并且R15是氘。
47.权利要求32-46中任一项的式(3)化合物以单一异构体存在并且对映体纯度为95％ee或更高。
48.权利要求1,16和32任选所示的化合物，可以选自下面化合物的结构可以选自下面化合物中的任意一个：
(±)-8-(2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(±)-6-(氘代二氟甲基)-8-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-甲基-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(d二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-4-氘)氨基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,5,5-四氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(-)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-((三氘代甲基)磺酰基)哌啶-4-基-3,3,4,5,5-五氘代)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(+)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基)-6-(三氘代甲基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
(+)-6-(氘代二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-((1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮；
或其药学可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物。
49.药物组和物，其包含权利要求1-48中任一项的化合物或其药学可接受的盐，或其溶剂化物、或其前药，或其异构体，或其水合物,或其多晶型物，和药学上可接受的载体，稀释剂，和赋形剂。
50.权利要求49所示的药物组和物，其进一步包含至少一个其他抗癌药物。
51.权利要求50所示的药物组和物，其进一步包含的其他抗癌药物可以是下面选项中的任意一个：芳香酶抑制剂，荷尔蒙治疗剂，选择性***受体降解剂，细胞毒剂，PD-1拮抗剂，PD-L1拮抗剂，AR抑制剂，谷氨酰胺酶抑制剂，CDK4/6抑制剂，CDK9抑制剂，和Akt抑制剂。
52.权利要求50所示的药物组和物，其进一步包含的其他抗癌药物可以是下面选项中的任意一个：他莫昔芬，多西他赛，紫杉醇，顺铂，卡培他滨，吉西他滨，异长春花碱，依西美坦,来曲唑，氟维司群，阿那曲唑,或曲妥珠单抗。
53.权利要求49-52所示的药物组和物包含口服施用的剂型，其中口服施用的剂型可以是下面选项中的任意一个：片剂，锭剂，丸剂，颗粒,多颗粒和纳米颗粒，液体制剂,乳化剂，凝胶，喷雾剂，或胶囊。
54.权利要求49-52所示的药物组和物，其中口服施用的剂型是单次施用的单位剂型。
55.权利要求49-52所示的药物组和物，式(1),式(2)和式(3)的化合物是含有等于或大于90％(-)光学对映体和小于90％(+)光学对映体的混合物。
56.治疗需要治疗对象的癌症的方法，包括向所述对象施用治疗有效剂量的权利要求1-55中任一项化合物或其药学上可接受的盐。
57.权利要求56的方法，其中所述癌症是乳腺癌、三阴性乳腺癌、卵巢癌、成神经细胞瘤、胶质母细胞瘤、B细胞淋巴瘤、***癌、肝细胞癌、急性髓性白血病、或黑色素瘤。
58.权利要求56的方法，其中所述癌症是卵巢癌。
59.权利要求58的方法，其中所述卵巢癌是上皮性卵巢癌。
60.权利要求56的方法，其中所述癌症是乳腺癌。
61.权利要求60的方法，其中所述乳腺癌是三阴性乳腺癌。
62.权利要求60的方法，其中所述乳腺癌是HR+HER2-乳腺癌。
63.权利要求60的方法，其中所述乳腺癌是ER+HER2-乳腺癌。
64.权利要求60的方法，其中所述乳腺癌是耐他莫昔芬乳腺癌。
65.权利要求56的方法，需要治疗的对象是患有ERα+HER2-晚期或转移性乳腺癌的绝经后妇女或绝经前妇女。
66.权利要求56的方法，包括向所述对象进一步施用放射疗法，外科手术，化学治疗剂，靶向治疗法，免疫治疗法，或激素治疗法。
67.权利要求56的方法，化合物的合适的施用方式可以是下面选项中任一种：静脉内注射，肌肉内注射，肿瘤内注射，真皮内注射，腹膜内注射，皮下注射，口服，局部送药，鞘内送药，吸入送药，经皮送药，或直肠送药。
68.权利要求56的方法，化合物的合适的施用频率是一天一次。
69.权利要求1-55中任一项的化合物或其药学上可接受的盐在需要治疗的对象中治疗CDK2或CDK2调度的细胞周期蛋白过量表达的病症的用途。
70.权利要求69的用途，其中所述CDK2或CDK2调度的细胞周期蛋白过量表达的病症可以是下面选项中任一种：乳腺癌、三阴性乳腺癌、卵巢癌、成神经细胞瘤、胶质母细胞瘤、B细胞淋巴瘤、***癌、肝细胞癌、急性髓性白血病、和黑色素瘤等癌症。
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