CN113563341B - 作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物 - Google Patents

作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN113563341B
CN113563341B CN202010388135.5A CN202010388135A CN113563341B CN 113563341 B CN113563341 B CN 113563341B CN 202010388135 A CN202010388135 A CN 202010388135A CN 113563341 B CN113563341 B CN 113563341B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cancer
compound
pharmaceutically acceptable
pain
compounds
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010388135.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113563341A (zh
Inventor
范文华
唐春雷
范为正
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Xuanshuo Medical Technology Co ltd
Original Assignee
Shandong Xuanshuo Medical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Xuanshuo Medical Technology Co ltd filed Critical Shandong Xuanshuo Medical Technology Co ltd
Publication of CN113563341A publication Critical patent/CN113563341A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113563341B publication Critical patent/CN113563341B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

本发明涉及一种具有通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、药物组合物以及用途。所述具有通式(I)结构的吡唑并[1,5‑a]嘧啶衍生物合成更为便捷且具有良好Trk家族蛋白酪氨酸激酶抑制活性。

Description

作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物
技术领域
本发明属于化学医药领域，本发明涉及一系列取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物、包含 该化合物的药物组合物和该化合物的用途。
背景技术
Trk(tropomyosin-related kinase)为由一组被称为神经营养蛋白(NT)的可溶性生长 因子活化的高亲和性受体酪氨酸激酶。Trk受体家族具有3个成员：TrkA,TrkB和TrkC。神经营养蛋白中有(i)活化TrkA的神经生长因子(NGF)；(ii)活化TrkB的脑衍生神经营养因子(BDNF)和NT-4/5；以及(iii)活化TrkC的NT3。Trk在神经元组织中广泛表达，并涉 及神经元细胞的保持、信号传递和存活(Current Opinion in Neurobiology,2001,11:272-280)。
Trk激酶最初被认为与神经元细胞的生长、分化、凋亡等相关，Trk/神经营养因子途 径的抑制剂在疼痛的多种临床前动物模式中有效。举例而言，已显示拮抗性TrkA/NGF途径抗体(例如，RN-624)在炎症性及神经性疼痛动物模式中及在人类临床试验中有效(Neuroscience,1994,62:327-331；J.Pain,2004,5:157-163；Nat.Med.1995,1:774-780；Neuroreport,1997,8:807-810)。另外，最近文献显示，发炎后，在背根神经节中BDNF含 量及TrkB信号传导会增加(Brain Research,1997,749:358)，且若干研究显示使借助 BDNF/TrkB途径的信号传导降低的抗体可抑制神经元过敏作用及有关疼痛(Molecular Pain,2008,4:27)。最近文献亦已显示Trk的过表现达、激活、扩增及/或突变与许多癌症有 关，这些癌症包括黑色素瘤(Journal of Investigative Dermatology,2008,128(8):2031-2040)， 非小细胞肺癌(Molecular and Cellular Biochemistry,2007,295(1&2):19-26)，甲状腺癌 (Neuroendocrinology Letters,2007,28(3):221-229)，急性骨髓白血病(Cancer Lett,2001, 169:107-14)，恶性胶质瘤(Journal of Neurochemistry,2007,103:259-275)，星形细胞瘤 与髓母细胞瘤(Brain Pathology,2006,16:304-310)，结肠癌(Science,2003,300:949)，神 经母细胞瘤(Nat.Rev.Cancer,2003,3:203-216)、卵巢癌(Clin.Cancer Res.2003,9: 2248-2259)、乳腺癌(Brain Pathology,2006,16:304-310)、***癌(Clin.Cancer Res.1998, 4(8):1887-1898)、胰腺癌(JournalofGastroenterology and Hepatology,2006,21(5):850-858)、 多发性骨髓瘤(CancerGenetics and Cytogenetics,2007,178:1-10)、及大细胞神经内分泌瘤 (HumanMutation,2008,29(5):609-616)。在癌症的临床前模式中，Trk A、B及C以及Trk/Fc 嵌合体的非选择性小分子抑制剂在抑制肿瘤生长与阻止肿瘤转移方面有效(Cancer Letters,2001,169:107-114；Cancer Letters,2006,232:90-98；Cancer Res,2008, 68:(2)346-351)。在癌症临床试验中，小分子Trk激酶抑制剂Larotrectinib(LOXO-101)对 LMNA-NTRK1基因融合型软组织肉瘤转移患者进行治疗，在四周时间内，肺部肉瘤体积 明显变小，癌细胞的转移和扩散减缓，同时患者呼吸困难有所缓解，四个月后，肺部肿 块基本消失，且在临床治疗期间并未发现明显不良反应(Cancer Discov,2015,5: 1049-1057)。LOXO-101在携带NTRK1/2/3融合阳性的成人/儿童癌症患者上具有显著的疗 效，如软组织恶性肿瘤、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠间质瘤、儿童纤维肉瘤、非小细胞 癌、胆管癌、肾癌、唾液腺癌、阑尾癌、胰腺癌、外周神经鞘瘤、梭形细胞瘤等，且该 药物副作用小(New England Journal ofMedicine,2018,378(8):731-739.)。Trk激酶抑制剂 Entrectinib(NMS-P626)在临床试验中对18名具有NTRK1/2/3、ROS1或ALK基因重 排的实体肿瘤患者进行临床试验研究，结果表明72％的患者对Entrectinib都有反应(J Target Ther Cancer,2015,12:34-37)。
另外，已显示抑制神经营养因子/Trk途径可在临床前模式中有效治疗炎症性疾病。举 例而言，抑制神经营养因子/Trk途径与下述疾病的临床前模式有关：包括哮喘在内的炎性 肺病(Pharmacology&Therapeutics,2008,117(1):52-76)、间质性膀胱炎(TheJournal of Urology,2005,173(3):1016-1021)、包括溃疡性结肠炎及克罗恩病(Crohn'sdisease)在内的 炎性肠病(Gut,2000,46(5):670-678)及炎性皮肤病，例如异位性皮炎(Archives of Dermatological Research,2006,298(1):31-37)、湿疹及干癣(Journal ofInvestigative Dermatology,2004,122(3):812-819)。
神经营养因子/Trk途径，具体而言BDNF/TrkB途径亦与神经变性疾病的病源学有关， 这些疾病包括多发性硬化、帕金森氏病(Parkinson's disease)及阿兹海默氏病(Alzheimer's disease)(Frontiers in Neuroendocrinology,2006,27(4):404-414)。调节神经营养因子/Trk途 径可用于治疗这些疾病及相关疾病。
研究表明TrkA受体对于克氏锥虫(Typanosoma cruzi)(查加斯氏病(Chagasdisease)) 在人类宿主中的寄生虫感染的感染中的疾病过程至关重要(CellHost&Microbe,2007,1(4): 251-261)。因此，抑制TrkA可用于治疗查加斯氏病及相关的原虫感染。
同时，Trk抑制剂亦可用于治疗与骨重建调节失衡有关的疾病，例如骨质疏松症、类 风湿性关节炎及骨转移。骨转移是癌症的频发性并发症，晚期乳腺癌或***癌患者中高达70％及肺癌、结肠癌、胃癌、膀胱癌、子宫癌、直肠癌、甲状腺癌或肾癌患者中约 15至30％可发生该并发症。溶骨性转移可造成重度疼痛、病理性骨折、危及生命的高血 钙症、脊髓压迫症及其它神经压迫症候群。因此，可诱发增殖性成骨细胞凋亡的药物将 极为有利。已在骨折小鼠模式的成骨区域中观察到TrkA受体及TrkC受体的表现(Bone, 2000,26(6):625-633)。另外，在几乎所有的成骨细胞中均观察到NGF的分布。pan-Trk抑 制剂可在人类hFOB成骨细胞中，抑制由神经营养因子与所有3个Trk受体结合后所激活的 酪胺酸信号传导。这些数据支持使用Trk抑制剂治疗骨重建疾病(例如癌症患者中的骨转 移)的理论。
已知数种可用于癌症或疼痛的Trk激酶的小分子抑制剂(ExpertOpin.Ther.Patents, 2009,19(3):305-319)。
国际专利申请WO2006115452及WO2006087538阐述了若干类据称为抑制剂或Trk激酶的小分子，其可用于治疗疼痛或癌症。国际专利申请WO2007025540揭示了某些经取代 的咪唑并[1,2-b]哒嗪，其在6位具有仲氨基或BOC-保护的哌嗪基。这些化合物是揭示为蛋 白激酶C(PKC)的抑制剂。国际专利申请WO2008052734揭示了(R)-4-(6-(2-(3-氟苯基) 吡咯啶-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)苄腈，即，咪唑并[1,2b]哒嗪化合物，其在6位具有芳基-取代的杂环基团且在3位具有苄腈基团。据称该化合物适于治疗由PI3K受体、JAK-2 受体及Trk受体介导的疾病。国际专利申请WO2007013673揭示了1-苯基-3-(6-(1-苯基乙基氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)脲及N-(6-(4-羟基环己基氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)苯甲 酰胺，即，咪唑并[1,2b]哒嗪化合物，其在6位具有氨基且在3位具有酰胺或脲部分。这些 化合物据称为Trk抑制剂。持续需要新颖且更加有效的治疗用以减轻疼痛、尤其慢性疼痛。 由于TrkA及其它Trk激酶可用作NGF驱动的生物反应的介体，故TrkA及其它Trk激酶的抑 制剂可为慢性疼痛状态提供有效治疗。
美国专利公开号US20110195948记载了作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化 合物。但是其通式结构中含有含氮五元环，合成相对复杂，反应条件苛刻，成本高昂。具体来说，制备此类结构通式的化合物通常需要先合成关键中间体(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷。而关于(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷的合成报道，主要有以下几种合成路线：
1)
Figure BDA0002484542170000031
该方法需要过低的温度(-78℃)，同时该方法还需要空气过于敏感的仲丁基锂，以及昂贵的醋酸钯和sparteine碱。
2)
Figure BDA0002484542170000032
该路线经过5步构建R构型吡咯环。制备过程中需要使用价格昂贵的格氏试剂异丙基 氯化镁，同时需要使用危险的三乙基硼氢化锂以及-78℃的低温反应。
3)
Figure BDA0002484542170000041
该路线使用空气敏感的正丁基锂乙基和-78℃的低温条件，另外总收率 相对偏低。
因此，如何提供一种合成相对便捷、成本低、宜产业化同时具有良好的药学性能和代谢稳定性的Trk激酶抑制剂的新型的取代吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物是目前的一个难题。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供一种具有通式(I)的化合物或其药 学上可接受的盐，药物组合物以及用途。
本发明首先提供了一种具有通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure BDA0002484542170000042
其中：
R1选自H或(1-3C)烷基；
R2选自NRaRb、(1-4C)烷基或(1-4C)羟基烷基；
Ra选自H或(1-6C)烷基；
Rb选自H、(1-4C)烷基、(1-4C)羟基烷基、NHMe或N(Me)2取代的(1-4C)烷基、杂 Ar或苯基，其中所述苯基任选地被独立选自羟基、卤素、CF3、CHF2、CH2F、CN的一 个或多个取代基取代；
或NRaRb形成具有环氮原子的4至6元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一 个或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；
杂Ar是5至6元杂芳环，其具有1-2个独立选自N和O的环杂原子且任选地被独立选自(1-4C)烷基的一个或多个取代基取代；
R3是(i)苯基，其任选地被独立选自卤素、(1-4C)烷氧基、CF3、CHF2、CHF2的一个 或多个取代基取代；或(ii)5至6元杂芳环，其具有选自N和S的杂环原子，其中所述 杂芳环任选地被一个或多个卤素原子取代；
R4选自氢、(1-3C)烷基、氘代(1-3C)烷基；
X选自
Figure BDA0002484542170000051
R5选自OH、CN、(CH2)nOH，其中n独立的表示为1、2或3；
Y选自NH。
优选地，R1选自H、CH3、CD3。优选地，R2选自NRaRb、(1-4C)烷基。进一步优 选地，R2选自NRaRb，其中所述NRaRb中Ra选自H或(1-6C)烷基，Rb选自(1-4C) 烷基、NHMe或N(Me)2取代的(1-4C)烷基或苯基，其中所述苯基任选地被独立选自羟 基、卤素、CF3的一个或多个取代基取代，或者所述NRaRb形成具有环氮原子的4至6 元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C) 烷基、(1-4C)烷氧基。更进一步优选地，所述NRaRb中Ra选自H、甲基、乙基、正丙 基或异丙基，Rb选自甲基、乙基、正丙基、异丙基或苯基，其中苯基任选地被羟基、卤 素、CF3的一个或多个取代基取代，或者所述NRaRb形成具有环氮原子的4至6元杂环， 其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C)烷 基。
优选地，R3选自苯基，其任选地被独立选自卤素、CF3、CHF2的一个或多个取代基 取代。更进一步优选地，R3选自被一个或两个氟原子或氯原子取代的苯基或被一个氟原 子和CF3取代的苯基。
优选地，R4选自氢、CH3或CD3。
在本发明的一些具体实施方案中，本发明的化合物是具有上述通式(I)的化合物或 其药学上可接受的盐，其中，
R1选自H或CH3；
R2选自NRaRb；其中，Ra选自H、甲基、乙基、正丙基或异丙基；Rb选自甲基、乙 基、正丙基、异丙基或苯基，所述苯基任选地被独立选自羟基、卤素、CF3、CHF2、CH2F 的一个或两个取代基取代；或NRaRb形成具有环氮原子的五元杂环，其中所述杂环任选 地被独立选自以下的一个或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C)烷基，优选地，NRaRb形成具有环氮原子的五元杂环，所述杂环被一个羟基取代；
R3是苯基，任选地被独立选自卤素、CF3、CHF2、CH2F的一个或两个取代基取代， 进一步优选地R3是被两个卤素原子取代的苯基；
R4选自H或CH3；
X选自
Figure BDA0002484542170000061
优选X选自
Figure BDA0002484542170000062
R5选自OH、CN；
Y选自NH。
进一步地，在一些优选的实施方案中，本发明的化合物是具有上述通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R1选自H或CH3；R2选自吡咯烷基，所述吡咯烷基任 选地被羟基取代，优选地所述吡咯烷基被一个羟基取代；
R3是任选地被两个卤素原子取代的苯基；R4选自H或CH3；
X选自
Figure BDA0002484542170000063
R5选自OH、CN；Y选自NH。
进一步地，本发明所述的药学上可接受的盐为无机盐或有机盐，无机盐包括盐酸盐、 氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、酸式磷酸盐；所述有机盐 选自乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、丙酮酸盐、羟乙酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、富马 酸盐、马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、以磺酸盐、苯 磺酸盐、水杨酸盐。
进一步地，本发明提供了如下结构的化合物：
Figure BDA0002484542170000071
本发明还提供了一种药物组合物，包括本发明上述的化合物或其药学上可接受的盐 以及药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂。
此外，本发明提供了本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗哺 乳动物的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病的药物中的用途。优选地，其中所述的癌症包括黑色素瘤、非小细胞肺癌、甲状腺癌、急性骨髓白血 病、恶性胶质瘤、星形细胞瘤与髓母细胞瘤、结肠癌、神经母细胞瘤、卵巢癌、乳腺癌、 ***癌、胰腺癌、多发性骨髓瘤、及大细胞神经内分泌瘤；其中所述的疼痛涉及癌症、 外科手术、骨折、由肿瘤转移引起的骨痛、骨关节炎、银屑病关节炎、类风湿性关节炎、 间质性膀胱炎、慢性胰腺炎、内脏痛、炎性痛、偏头痛、慢性腰背痛、膀胱疼痛综合征 和神经性疼痛；其中所述的炎症包括哮喘、间质性膀胱炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病、 异位性皮炎、湿疹及干癣。
发明的效果
本发明提供的具有通式(I)所示结构的取代吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物，在保证良好 的Trk抑制活性和代谢稳定性的情况下，结构更为简单，合成方法更为便捷。本发明反应过程避开-78℃低温、避免使用了空气敏感和价格昂贵的试剂，合成成本低，整体收率优 于构建商业化产品如larotrectinib中的(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷，更宜产业化。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行详细的描述。
在本发明中“(1-3C)烷基”是指分别为1至3个碳原子的饱和的支链或支链的单价烃基。实例包括，但不限于甲基、乙基、1-丙基、2-丙基。(1-6C)烷基可类推定义，具 体的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、 正戊基、正己基等。
在本发明中“氘代(1-3C)烷基”是指氢原子部分或全部被氘取代的1至3个碳原 子的饱和的支链或支链的单价烃基。
在本发明中“(1-4C)烷基”是指分别为1至4个碳原子的饱和的直链或支链的单价烃基。实例包括，但不限于甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基-1-丙基、2-丁 基和2-甲基-2-丙基。
在本发明中“烷氧基”是指通过氧原子与化合物的其余部分连接的烷基。在本发明中“(1-4C)烷氧基”是指分别为1至4个碳原子的饱和的直链或支链的单价基团，其中 该基团是在氧原子上。
在本发明中“(1-4C)羟基烷基”是指分别为1至4个碳原子的饱和的直链或支链的单价烷基团，其中1个氢原子被OH基团取代。
在本发明中“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
在本发明中“杂环”是指至少一个环成员为选自N、O和S的杂原子的脂肪族饱和 或部分饱和的不具有芳香特性的环。
在本发明中“药学上可接受的盐”是指表示保留母体化合物的生物有效性和性质的 那些盐。术语“盐”是指由无机或有机酸或碱和内部形成的盐制备的根据本发明的化合物的任何盐。通常，这种盐具有生理上可接受的阴离子或阳离子。
在本发明中“芳环”是指这样的部分，其中成分碳原子构成不饱和环系，环系中的所有原子是sp2杂化的，π-电子的总数等于4n+2，其中n是整数。在本发明中“杂芳环” 或“杂Ar”是指其中1-4个碳原子独立地被选自由氮，氧和硫组成的组的杂原子取代的 如上定义的芳环。杂芳环基团的非限制性实例是例如吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、 吡唑基等。
在本发明中“给药”或“给予”个体化合物是指向需要治疗的个体提供本发明的化合 物。
在本发明中“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，乙基“任选”被 卤素取代，指乙基可以是未被取代的(CH2CH3)、单取代的(如CH2CH2F)、多取代的(如 CHFCH2F、CH2CHF2等)或完全被取代的(CF2CF3)。本领域技术人员可理解，对于包 含一个或多个取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取 代或取代模式。
在整个本说明书中提到的“实施方式”或“实施方案”或“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”或“在本申请的部分实施方式中”意指在至少一实施方案中包括 与该实施方案所述的相关的具体参考要素、结构或特征。因此，在整个说明书中不同位 置出现的短语“在一实施方案中”或“在实施方案中”或“在另一实施方案中”或“在 某些实施方案中”或“在本申请的部分实施方式中”不必全部指同一实施方案。此外， 具体要素、结构或特征可以任何适当的方式在一个或多个实施方案中结合。
除非本申请中另外要求，在整个说明书和其后的权利要求书中，词语“包括(comprise)” 及其英文变体例如“包括(comprises)”和“包括(comprising)”应解释为开放式的、含括 式的意义，即“包括但不限于”。
应当理解，在本申请说明书和附加的权利要求书中用到的单数形式的冠词“一”(对 应于英文“a”、“an”和“the”)包括复数的对象，除非文中另外明确地规定。
<化合物或其药学上可接受的盐>
本发明提供了一类作为Trk激酶抑制剂的新型的取代吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物或其药 学上可接受的盐，其结构式如通式(I)所示：
Figure BDA0002484542170000091
其中：
R1选自H或(1-3C)烷基；
R2选自NRaRb、(1-4C)烷基或(1-4C)羟基烷基；
Ra选自H或(1-6C)烷基；
Rb是H、(1-4C)烷基、(1-4C)羟基烷基、NHMe或N(Me)2取代的(1-4C)烷基、杂 Ar或苯基，其中所述苯基任选地被独立选自羟基、卤素、CF3、CHF2、CH2F、CN的一 个或多个取代基取代；
或NRaRb形成具有环氮原子的4至6元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一 个或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；
杂Ar是5至6元杂芳环，其具有1-2个独立选自N和O的环杂原子且任选地被独立选自(1-4C)烷基的一个或多个取代基取代；
R3是(i)苯基，其任选地被独立选自卤素、(1-4C)烷氧基、CF3、CH2F、CHF2的一个 或多个取代基取代；或(ii)5至6元芳杂环，其具有选自N和S的杂环原子，其中所述 芳杂环任选地被一个或多个卤素原子取代；
R4选自氢、(1-3C)烷基或氘代(1-3C)烷基；
X选自
Figure BDA0002484542170000101
R5选自OH、CN、(CH2)nOH，其中n独立的表示为1、2或3；
Y选自NH。
在本发明的某些实施方式中，R1选自H或(1-3C)烷基。进一步地，R1选自H、甲 基或乙基。具体的实例，R1是H或甲基，本发明人发现此类基团因位阻小相对来说更有 利于其活性构象的形成。
优选地，R2选自NRaRb、(1-4C)烷基。在本发明的某些实施方式中，R2选自NRaRb， 进一步地所述NRaRb中Ra选自H或(1-6C)烷基，Rb选自(1-4C)烷基、NHMe或N(Me)2取代的(1-4C)烷基或苯基，其中所述苯基任选地被独立选自羟基、卤素、CF3的一个或 多个取代基取代，或者所述NRaRb形成具有环氮原子的4至6元杂环，其中所述杂环任 选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧 基。更进一步优选地，所述NRaRb中Ra选自H、甲基、乙基、正丙基或异丙基，Rb选自 甲基、乙基、正丙基、异丙基或苯基，其中苯基任选地被羟基、卤素、CF3的一个或多个 取代基取代，或者所述NRaRb形成具有环氮原子的五元杂环，其中所述杂环任选地被独 立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、OH、(1-4C)烷基，在某些实施方式中， 所述杂环任选地被羟基取代。
进一步优选地，R2选自NRaRb，NRaRb包括吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被羟基 取代，优选地所述吡咯烷基被一个羟基取代。
在具体的实施方式中，由NRaRb表示的基团包括以下结构：
Figure BDA0002484542170000102
在本发明的一些优选实施方式中，由NRaRb表示的基团是指以下结构：
Figure BDA0002484542170000111
在本发明的某些实施方式中，R3是(i)苯基，其任选地被独立选自卤素、CF3、CHF2的一个或多个取代基取代。进一步地，R3选自被一个或两个氟原子取代的苯基或被一个 氟原子和CF3取代的苯基。具体的实例，R3是
Figure BDA0002484542170000112
在本发明的某些实施方式中，R4选自氢、(1-3C)烷基、氘代(1-3C)烷基，进一步地，R4选自氢、甲基或氘代甲基，更进一步地，R4选自氢或甲基。
在本发明的某些实施方式中，X是
Figure BDA0002484542170000113
其中R5选自OH 或CN。
在本发明的某些实施方式中，Y选自NH以更好地提高化合物代谢稳定性和活性。
在本发明的一些优选的实施方案中，本发明的化合物是具有上述通式(I)的化合物 或其药学上可接受的盐，其中，R1选自H或CH3；R2选自吡咯烷基，所述吡咯烷基任选 地被羟基取代，优选地所述吡咯烷基被一个羟基取代；或者R2选自二烷基氨基，所述二 烷基分别为(1-4C)烷基；R3是任选地被两个卤素原子取代的苯基；R4选自H或CH3； X选自
Figure BDA0002484542170000114
R5选自OH、CN；Y选自NH。
在本发明的某些实施方式中，化合物具有如下结构和立体构型：
Figure BDA0002484542170000121
本发明的化合物骨架结构更为简单，部分化合物无手性中心，相对来说 合成便捷性得到显著提升，合成成本也相对更低。
为了获得更好的Trk抑制活性，在本发明的某些实施方式中，优选地，化合物具有如 下结构和立体构型：
Figure BDA0002484542170000122
Figure BDA0002484542170000131
通式(I)的化合物包括其药学上可接受的盐。本发明所述的药学上可接受的盐为无 机盐或有机盐，无机盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、 磷酸盐、酸式磷酸盐；所述有机盐选自乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、丙酮酸盐、羟乙 酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、酒 石酸盐、甲磺酸盐、以磺酸盐、苯磺酸盐、水杨酸盐。在本发明的某些实施方式中，本 发明所述的药学上可接受的盐包括盐酸盐和硫酸盐。
进一步地，式(I)的化合物或它们的盐可以溶剂合物的形式分离，且因此任何这种溶剂合物都属于本发明的范围。
通式(I)的化合物还包括仅在一种或多种同位素富集原子的存在方面不同的化合物。 例如，本发明的化合物包括其中一个或多个氢原子由氘或氚取代或一个或多个碳原子由 13C-或14C-富集的碳取代的化合物，其在本发明的范围内。
<化合物的制备方法>
本发明还提供通式(I)所述的化合物的制备方法，其包括：
中间体(式(II))的制备：
Figure BDA0002484542170000132
在本发明的一些具体实施方式中，中间体包括如下三种：化合物(A)、化合物(B)和化合物(C)，各自制备流程如下：
化合物(A)的制备流程(反应式1)：
Figure RE-GDA0002531024520000133
反应式1
如反应式1所示，原料2,5-二氟苯甲醛和甲胺经还原氨化得到中间体1；中间体1和5- 氯吡唑并[1,5-a]嘧啶在高温下发生亲核取代得到中间体2；中间体2用硝酸硝化得到中间体 3；中间体3经锌粉还原得到化合物(A)。
化合物(B)的制备流程(反应式2)：
Figure RE-GDA0002531024520000141
反应式2
如反应式2所示，原料2,5-二氟苯乙酮和R-(+)叔丁基亚磺酰胺脱水得到中间体4；中间体4在低温(-50℃)下经硼氢化钠还原得到中间体5；中间体5在酸性条件下水解 得到中间体6；中间体6和5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶在高温下发生亲核取代得到中间体7； 中间体7用硝酸硝化得到中间体8；中间体8经锌粉还原得到化合物(B)。
化合物(C)的制备流程(反应式3)：
Figure RE-GDA0002531024520000142
反应式3
如反应式3所示，中间体6和甲醛经还原氨化得到中间体9；中间体9和5-氯吡唑 并[1,5-a]嘧啶在高温下发生亲核取代得到中间体10；中间体10用硝酸硝化得到中间体11；中间体11经锌粉还原得到化合物(C)。
本发明的中间体制备过程中无需过低的温度(-78℃)并且避免使用了空气敏感和价 格昂贵的试剂，相对正丁基锂、仲丁基锂或格式试剂，本发明合成条件相对更安全。对于化合物A因其无手性中心，因此合成便捷度相对于现有技术来说得到了大幅度的提升。对于化合物B和化合物C来说，在合成成本和合成反应条件方面有一定的优化。
化合物的制备：
对于其中X为
Figure BDA0002484542170000151
的通式(I)的化合物，使式(II)的相应化合物与具有式(III) 的化合物在偶合剂和/或碱的存在下反应得到式(IVa)的化合物；
Figure BDA0002484542170000152
其中R6独立的选自卤素、羟基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、OTs、OMs等。
式IVa与式HNRaRb的化合物反应制备其中X为
Figure BDA0002484542170000153
的通式(I)的化合物。
若需要，添加或去除任何保护基团，且若需要，形成盐或溶剂化合物。
对于其中X为
Figure BDA0002484542170000154
的式(I)的化合物，使式(II)的相应化合物与HNRaRb的化 合物在偶合试剂存在下反应；或
(a)对于其中R2为NRaRb且Ra为H的式(I)的化合物，使式(II)的相应化合物 与具有式O＝C＝NRb的化合物反应；或
(b)对于其中R2为NRaRb且NRaRb形成具有环氮原子的4至6元杂环的式(I)的 化合物，使式(II)的相应化合物与取代的环氮原子的4至6元杂环在偶合试剂作用下， 在叔胺碱的存在下反应。
必要时，去除或添加任何保护基团，且若需要，形成盐或溶剂化合物。
对于其中X为
Figure BDA0002484542170000155
的式(I)的化合物，使式(II)的相应化合物与HNRaRb的化 合物生成脲或硫脲后再与氨基取代的R5反应得到X为
Figure BDA0002484542170000161
的通式(I)的化合物。
若需要，添加或去除任何保护基团，且若需要，形成盐或溶剂化合物。
在本发明中提及的偶合剂包括2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (HATU)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、O-苯并三氮唑 -N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)、N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)、1-(3-二甲基氨 基丙基)-3-乙基碳二亚胺(DIEC)和本领域技术人员所熟知的任何其他酰胺偶合剂。合 适的碱包括叔胺碱例如二异丙基乙胺(DIEA)和三乙胺等。
<药物组合物>
本发明还提供药物组合物，包含上述本发明通式(I)化合物或其药学上可接受的盐、 以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
本发明化合物或其药学上可接受的盐可以配制为用于口服给药的固体制剂，包括， 但不限于胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂等。在这些固体剂型中，本发明通式(I) 化合物作为活性成分与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，例如与柠檬酸钠或磷 酸二钙。或与下属成分混合：(1)填料或增溶剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、 甘露醇和硅酸等；(2)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷 酮、蔗糖、***胶等；(3)保湿剂，例如，甘油等；(4)崩解剂、例如琼脂、碳酸钙、 马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些符合硅酸盐和碳酸钠等；(5)缓溶剂，例如石蜡等； (6)吸收加速剂，例如季铵化合物等；(7)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯等； (8)吸附剂，例如，高岭土等；(9)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、固体聚乙二醇、 十二烷基硫酸钠等，或其混合物。胶囊剂、片剂、丸剂中也可包含缓冲剂。
所述固体剂型例如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材料如肠溶衣和其他本领域公知的材料晶型包衣或微囊化。他们可包含不透明剂，并且，这种组合 物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道的某一部分中释放。可采用的包埋组分的 实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性成分也可与上述赋形剂中的一种或者多种形 成微胶囊形式。
本发明化合物或其药学上可接受的盐可以配制为用于口服给药的液体剂型，包括， 但不限于药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆、酊剂等。除了作为活性成分的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，例如水和其他溶剂，增溶剂和乳化剂、例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、 丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油类，特别是棉籽油、花生油、玉米油、橄榄油、 蓖麻油、芝麻油等或这些物质的混合物等。除了这些惰性稀释剂外，本发明液体剂型也 可包括常规助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料等。
所述悬浮剂包括，例如，乙氧基化十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇、和脱水山梨醇、微晶纤维素、琼脂等或这些物质的混合物。
本发明化合物和其药学上可接受的盐可以配置为用于胃肠外注射的剂型，包括，但 不限于生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，以及用于重新溶解成无菌的可注射溶液和分散液的无菌粉末。适宜的载体、稀释剂、溶剂、赋形剂包括 水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
本发明化合物或其药学上可接受的盐可以配置为用于局部给药的剂型，包括如软膏 剂、散剂、栓剂、滴剂、喷射剂和吸入剂等。作为活性成分的本发明通式(I)化合物或 其药学上可接受的盐在无菌条件下和生理上可接受的载体及任选的防腐剂、缓冲剂，和 必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明的药物组合物包括通式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分，以 及药学上可接受载体、赋形剂、稀释剂。在制备药物组合物时，通常是将本发明通式(I)化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂混合。其中通式(I)化合物或其药学上可接受的盐的含量可以为0.01-1000mg，例如0.05-800mg、0.1-500mg、0.01-300mg、0.01-200mg、0.05-150mg、0.05-50mg等。
<用途>
本发明还提供通式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗哺乳 动物的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病的药 物中的用途。
通式(I)化合物或其药学上可接受的盐，通过抑制原肌球蛋白激酶(Trk)活性，用于治疗哺乳动物包括人的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾 病的方法，所述方法包括向所述哺乳动物包括人施用治疗有效量的上述式I的化合物或其 药学上可接受的盐。
“治疗有效量”为个体中有效产生生物或医学应答(例如降低或抑制酶活蛋白活性， 或者改善症状、减轻病况、减缓或延迟疾病进展或者预防疾病)的本发明的化合物的量。
本发明所提及的癌症，包括黑色素瘤、非小细胞肺癌、甲状腺癌、急性骨髓白血病、恶性胶质瘤、星形细胞瘤与髓母细胞瘤、结肠癌、神经母细胞瘤、卵巢癌、乳腺癌、前 列腺癌、胰腺癌、多发性骨髓瘤、及大细胞神经内分泌瘤。
本发明所提及的疼痛涉及癌症、外科手术、骨折、由肿瘤转移引起的骨痛、骨关节炎、银屑病关节炎、类风湿性关节炎、间质性膀胱炎、慢性胰腺炎、内脏痛、炎性痛、 偏头痛、慢性腰背痛、膀胱疼痛综合征和神经性疼痛。
本发明所提及的炎症包括哮喘、间质性膀胱炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病、异位性皮炎、湿疹及干癣。
本发明的化合物或其药学上可接受的盐可给药于哺乳动物包括人，可以口服、直肠、 胃肠外(静脉内、肌肉内或皮下)、局部给药(粉剂、软膏剂、滴剂)或瘤内给药。
本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐可以单独给药，或者与其他药学上可接 受的治疗剂联合给药，与其他抗肿瘤药物组合。此联合治疗可通过同时、顺序或分开使用治疗的各个组分来实现。所述治疗剂包括但不限于：作用于DNA化学结构的抗肿瘤药 物，如顺铂，影响核苷酸合成的抗肿瘤药物如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶等，影响核酸转录 的抗肿瘤药物如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素等，作用于微管蛋白合成的抗肿瘤药物 如紫杉醇、长春瑞滨等，芳香化酶抑制剂如氨鲁米特、来曲唑、瑞宁德等，细胞信号通 路抑制剂如表皮生长因子受体抑制剂伊马替尼(Imatinib)、吉非替尼(Gefitinib)、厄洛 替尼(Erlotinib)等。抗肿瘤单抗，免疫抑制剂PD-1、PD-L1等，待组合的各成分可同时 或顺序的给予，以单一制剂形式或者以不同制剂的形式给予。所述组合不仅包括本发明 化合物的一种或其他活性剂的组合，而且也包括本发明化合物的两种或更多的其他活性 剂的组合。
与其他相同或不同作用机制发挥作用的一种或多种其他药物组合使用。此联合治疗 可通过同时、顺序或分开使用治疗的各个组分来实现。所述治疗剂包括但不限于：甾体类的***、可的松、氟替卡松；镇痛药，阿司匹林、布洛芬、吲哚美辛和类阿片。
实施例
下列实施例用于说明而非限定通式(I)化合物的合成方法。温度均为摄氏度。如果没有另外说明，否则试剂是自商业供货商购得且未经进一步纯化即使用。终产物、中间 体和原料的结构通过标准分析方法确认，例如光谱特征分析、MS、NMR。使用的缩写是 本领域常规缩写。
中间体A
Figure BDA0002484542170000181
N5-(2,5-二氟苄基)-N5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(A)的制备方法
Figure BDA0002484542170000191
步骤a：1-(2,5-二氟苄基)-N-甲基甲胺的制备
将甲胺盐酸盐(632mg,9.1mmol)，K2CO3(646mg,4.69mmol)混悬于 甲醇20mL中，室温搅拌30分钟，滴加2,5-二氟苯甲醛(1g,7.0mmol)，反应 液搅拌过夜，然后将反应液降至0℃，分批加入NaBH4(453mg，12mmol)， 加完后搅拌1小时，移至室温搅拌反应2小时，TLC监测原料反应完毕，抽滤， 滤液水洗，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色油状液体(860mg，收率77％)。 MS(ESI)m/z 158.1(M+1)+。
步骤b：N-(2,5-二氟苄基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺的制备
将1-(2,5-二氟苄基)-N-甲基甲胺(816mg,5.2mmol,1eq)，5-氯吡唑[1,5-a] 嘧啶(874mg,5.7mmol,1.1eq)混悬于0.8mL正丁醇中，加入1.7mL DIPEA， 封管160℃搅拌反应4小时，TLC监测原料反应完毕，反应体系加水5mL，乙 酸乙酯萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩得棕黑色油状液体，柱层析纯化 得白色粉末状固体(722mg，51％)。MS(ESI)m/z 275.1(M+1)+。
步骤c：N-((2,5-二氟苄基)-N-甲基-3-硝基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺的制备
将N-(2,5-二氟苄基)-N-甲基吡唑[1,5-a]嘧啶-5-胺(712mg,2.6mmol)，溶于7.1mL TFA中，0.71mL硝酸的混合溶剂中，常温下搅拌20分钟，TLC监测原料反应完毕，将 反应液滴加入冰水中，白色固体析出，抽滤，烘干得类白色固体(590mg，收率71％)。 步骤d：N5-(2,5-二氟苄基)-N5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(A)的制备
将N-((2,5-二氟苄基)-N-甲基-3-硝基吡唑[1,5-a]嘧啶-5-胺(200mg,0.62mmol)溶于 2mL甲醇中和2mL二氯甲烷的混合溶剂中，加入锌粉(394mg,6mmol)，搅拌下加入饱 和氯化铵溶液2mL，室温剧烈搅拌3小时，TLC监测原料反应完毕，加5mL二氯甲烷， 过滤，滤液水洗，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩得红色固体N5-(2,5-二氟苄基)-N5-甲基吡 唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(150mg，收率82％)。MS(ESI)m/z 290.1(M+1)+。
中间体B
Figure BDA0002484542170000201
(R)-N5-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(B)的制备方法
Figure BDA0002484542170000202
步骤e：(R,E)-N-(1-(2,5-二氟苯基)亚乙基)-2-甲丙基-2-亚磺酰胺的制备
将2,5-二氟苯乙酮(2.93g,18.77mmol,1eq)，R-(+)叔丁基亚磺酰胺(2.71g,22.5mmol, 1.2eq)，Ti(OEt)4(5.14g,22.52mmol,1.2eq)溶于30mL四氢呋喃中，加热回流5小时， TLC监测反应完毕，加30mL饱和氯化铵溶液，30mL乙酸乙酯搅拌30分钟，抽滤后用 乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥浓缩得黄色油状液体(4.7g，收率96％)。 MS(ESI)m/z 260.1(M+1)+。
步骤f：(R)-N-((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲丙基-2-亚磺酰胺的制备
将(R,E)-N-(1-(2,5-二氟苯基)亚乙基)-2-甲丙基-2-亚磺酰胺(4.73g,18.12mmol,1eq)， 30mL四氢呋喃和0.6mL水加入反应瓶中，降温至-50℃，分批加入NaBH4(617mg, 16.31mmol,0.9eq)，加完之后搅拌30分钟，移至室温搅拌3小时，TLC监测原料反应完 毕，加20mL冰水淬灭，20mL乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠干燥浓缩得黄色油状液体(4.0g，收率84％)。MS(ESI)m/z 262.1(M+1)+。
步骤g：(R)-1-(2,5-二氟苯基)乙胺的制备
将(R)-N-((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲丙基-2-亚磺酰胺(4.0g,15.3mmol,1eq)，4mol/L的氯化氢的二氧六环溶液150mL，搅拌过夜，TLC监测反应结 束，旋蒸除去1,4-二氧六环，加50mL水，用乙酸乙酯萃取除杂质，水层用 2mol/L NaOH溶液调至碱性，用30mL乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠干燥浓 缩得无色透明液体(1.9g，收率79％)。MS(ESI)m/z158.1(M+1)+。
步骤h：(R)-N-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺的制备
参照步骤b的方法制备得到黄色油状液体化合物(R)-N-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-5-胺(301mg)。MS(ESI)m/z 275.1(M+1)+。
步骤i：(R)-N-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)3-硝基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺的制备
参照步骤c的方法制备得到淡黄色固体(R)-N-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)3-硝基吡唑并 [1,5-a]嘧啶-5-胺(177mg)。
步骤j：(R)-N5-(1-(2,5-苯基)乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(B)的制备
参照步骤d的方法制备得到淡红色固体(R)-N5-(1-(2,5-苯基)乙基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(B)(163mg)。MS(ESI)m/z 290.1(M+1)+。
中间体C
Figure BDA0002484542170000211
(R)-N5-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)-N5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(C)的制备方法
Figure BDA0002484542170000212
步骤k：(R)-1-(2,5-二氟苯基)-N-甲基乙胺的制备
将(R)-1-(2,5-二氟苯基)乙胺(500mg,3.18mmol,1eq)溶于10mL甲醇中，滴加甲醛(251mg,3.18mmol,1eq,38％w/w),室温搅拌20分钟，分批加入NaBH4(482mg,12.74mmol,4eq)，反应20分钟，TLC监测反应完毕，加5mL水淬灭，用10mL乙酸乙酯萃取3次， 饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥浓缩得黄色油状液体(475mg，收率87％)。MS(ESI)m/z 172.1(M+1)+。
步骤l：(R)-N-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺的制备参照步骤b的方法制备得到黄色油状液体化合物(R)-N-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺(155mg)。MS(ESI)m/z 289.1(M+1)+。
步骤m：(R)-N-(1-2,5-二氟苯基)乙基)-N-甲基-3-硝基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺的制备
参照步骤c的方法制备得到淡黄色固体(R)-N-(1-2,5-二氟苯基)乙基)-N-甲基 -3-硝基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-胺(136mg)。
步骤n：(R)-N5-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)-N5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(C)的制备
参照步骤d的方法制备得到淡红色固体(R)-N5-(1-(2,5-二氟苯基)乙基)-N5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,5-二胺(113mg)。MS(ESI)m/z 304.1(M+1)+。
实施例1
(S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3-羟基吡咯烷-1-基) 环丁-3-烯-1,2-二酮
结构式：
Figure BDA0002484542170000221
将中间体A(60mg,0.21mmol,1eq),(S)-3-乙氧基-4-(3-羟基吡咯烷-1-基)丁-3-烯-1,2- 二酮(购自盐城正驰生物科技有限公司)(53mg,0.25mmol,1.2eq)溶于乙醇5mL中，80 ℃回流反应12小时，冷却至室温，反应液浓缩得固体，粗品经柱层析纯化得棕褐色固体(S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3-羟基吡咯烷-1-基) 环丁-3-烯-1,2-二酮(30mg，收率32％)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：9.07(s,1H),8.64 (d,J＝8.0Hz,1H),7.87(s,1H),7.30–7.00(m,3H),6.66(d,J＝8.0Hz,1H),5.06(s,1H), 4.85(s,2H),4.26(s,1H),4.02-3.33(m,4H),3.17(s,3H),2.04–1.73(m,2H).MS(ESI)m/z 455.2[M+1]+。
实施例1A
(S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3-羟基吡咯烷 -1-基)环丁-3-烯-1,2-二酮硫酸盐
结构式：
Figure BDA0002484542170000222
在室温下，向(S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3- 羟基吡咯烷-1-基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.46g，1.0mmol，1eq)的甲醇(15mL)溶液中加 入在甲醇中的硫酸(5mL，1mmol,1eq)。所得溶液搅拌2小时，随后浓缩得到黄色固体 (S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3-羟 基吡咯烷-1-基)环丁-3-烯-1,2-二酮硫酸盐(0.41g，收率72％)。
实施例1B
(S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3-羟基吡咯烷 -1-基)环丁-3-烯-1,2-二酮盐酸盐
结构式：
Figure BDA0002484542170000231
在室温下，向(S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3- 羟基吡咯烷-1-基)环丁-3-烯-1,2-二酮(0.46g，1.0mmol，1eq)的甲醇(15mL)溶液中加 入在氯化氢甲醇溶液(5mL，1mmol)。所得溶液搅拌1小时，随后浓缩得到黄色固体 (S)-3-((5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)胺基)-4-(3-羟基吡咯烷-1-基) 环丁-3-烯-1,2-二酮盐酸盐(0.42g，收率86％)。
按照与实施例1基本操作相似的操作合成实施例2-3(参见表1)，从而得到期望的产 物。
表1实施例2-3的结构和质谱数据
Figure BDA0002484542170000232
实施例4
(S)-N-(5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1-甲酰胺 结构式：
Figure BDA0002484542170000241
将中间体A(64mg,0.22mmol,1eq)溶于2mL二氯甲烷中，室温下慢慢加入N,N'-羰基二咪唑(CDI)(71mg,0.44mmol,2eq)，室温搅拌0.5小时，将(S)-3-羟基吡咯烷盐 酸盐(56mg,0.44mmol,2eq)，三乙胺(56mg,0.55mmol,2.5eq)混悬于1mL二氯甲烷中， 并滴加至上述反应液中，室温搅拌1小时，TLC监测，加2mL水淬灭，用DCM/MeOH (v/v＝10/1)萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得棕红色固体(S)-N-(5-((2,5- 二氟苯基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1-甲酰胺(25mg，收率28％)。 1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.03(s,2H),7.36(s,2H),7.09(s,2H),5.35(t,J＝6.0Hz,2H), 4.61(s,1H),3.90(q,J＝8.0Hz,2H),3.82–3.69(m,4H),3.62(d,J＝12Hz,2H),2.01(d,J＝ 6.4Hz,2H).MS(ESI)m/z 403.2[M+1]+。
实施例4A
(S)-N-(5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1-甲酰胺硫酸 盐
结构式：
Figure BDA0002484542170000242
按照与实施例1A基本操作相似的操作以实施例4合成实施例4A。
实施例4B
(S)-N-(5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1-甲酰胺盐酸 盐
结构式：
Figure BDA0002484542170000243
按照与实施例1B基本操作相似的操作以实施例4合成实施例4B。
实施例5
(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1- 甲酰胺
结构式
Figure BDA0002484542170000251
将中间体B(40mg,0.14mmol,1eq)溶于二氯甲烷1.5mL中，分批加入N,N'-羰基二咪唑(CDI)(45mg,0.28mmol,2eq)，搅拌2小时，TLC监测，向上述体系中滴加(S)-3- 羟基吡咯烷盐酸盐(34.2mg,0.28mmol,2eq)，三乙胺(35mg,0.35mmol,2.5eq)的二氯甲烷 (1mL)溶液，室温下搅拌反应30分钟，TLC监测原料反应完毕，加5mL冰水淬灭， 5mL二氯甲烷萃取3次，经无水硫酸钠干燥浓缩得黄色油状液体，柱层析纯化得淡黄色 固体(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1- 甲酰胺(20mg,收率36％)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.25(s,1H),8.10(d,J＝7.5Hz, 1H),7.11–6.96(m,2H),6.93–6.86(m,1H),6.14(d,J＝7.6Hz,1H),5.95(d,J＝7.5Hz, 1H),5.27(d,J＝14.6Hz,2H),4.58(s,1H),3.71–3.51(m,4H),2.29–1.94(m,2H),1.57(d, J＝6.6Hz,3H).MS(ESI)m/z 403.2[M+1]+。
实施例5A
(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1- 甲酰胺硫酸盐
结构式
Figure BDA0002484542170000252
按照与实施例1A基本操作相似的操作以实施例5合成实施例5A。
实施例5B
(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯烷-1- 甲酰胺盐酸盐
结构式
Figure BDA0002484542170000253
按照与实施例1B基本操作相似的操作以实施例5合成实施例5B。
实施例6
(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯 烷-1-甲酰胺
结构式
Figure BDA0002484542170000261
将中间体C(50mg,0.16mmol,1eq)溶于二氯甲烷2mL中，分批加入N,N'-羰基二咪唑(CDI)(53mg,0.33mmol,2eq)，室温搅拌2小时，TLC监测，然后加入(S)-3-羟基 吡咯烷盐酸盐(59.3mg,0.48mmol,3eq)，三乙胺(41mg,0.41mmol,2.5eq)的二氯甲烷 (0.5mL)溶液，室温下搅拌30分钟，TLC监测原料反应完毕，加5mL冰水淬灭，5mL 二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥浓缩得黄色油状液体40mg，柱层析纯化得红褐色泡 固体(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯 烷-1-甲酰胺(20mg，收率29％)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.22(d,J＝3.4Hz,1H), 8.18(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.03–6.85(m,3H),6.24(d,J＝7.9Hz,1H),5.96(d,J＝7.4 Hz,1H),4.51(s,1H),3.65–3.54(m,5H),2.96(d,J＝4.6Hz,3H),1.81(s,2H),1.56(dd,J＝ 7.0,3.9Hz,3H).MS(ESI)m/z 417.2[M+1]+。
实施例6A
(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯 烷-1-甲酰胺硫酸盐
结构式
Figure BDA0002484542170000262
按照与实施例1A基本操作相似的操作以实施例6合成实施例6A。
实施例6B
(S)-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羟基吡咯 烷-1-甲酰胺盐酸盐
结构式
Figure BDA0002484542170000271
按照与实施例1B基本操作相似的操作以实施例6合成实施例6B。
利用相应的中间体或原料，按照与实施例4基本操作相似的操作合成实施例7-17(参 见表2)，从而得到期望的产物。
表2实施例7-17的结构和质谱数据
Figure BDA0002484542170000272
Figure BDA0002484542170000281
中间体D
Figure BDA0002484542170000291
(R,E)-甲基N'-(5-((1-(2,5-二氟苯基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-N-异氰基异 硫脲(D)的制备方法
Figure BDA0002484542170000292
步骤o：(R,E)-甲基N'-(5-((1-(2,5-二氟苯基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-N- 异氰基异硫脲(D)的制备
将中间体C(100mg,0.30mmol,1eq)溶于1mL DMF中，滴加氰亚氨基二硫代碳酸二甲酯(46.4mg,0.32mmol,1eq)的1mL DMF溶液，加入碳酸铯(155mg,0.448mmol,1.5eq), 100℃反应过夜。TLC监测显示反应完毕，加入10mL水，用10mL乙酸乙酯萃取3次， 饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩得粗品，经柱纯化得黄色固体(27mg,收率21％)。MS(ESI) m/z 402.1[M+1]+。
中间体E、F
Figure BDA0002484542170000293
依据步骤o的制备方法，制备得到：
(R,E)-甲基N'-(5-((1-(2,5-二氟苯基)乙基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-N-异氰基异 硫脲(E)31mg，MS(ESI)m/z 388.1[M+1]+。
(E)-methyl N'-(5-((2,5-二氟苄基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-N-异氰基异硫 脲(F)53mg，MS(ESI)m/z 388.1[M+1]+。
实施例18
(S,E)-N'-氰基-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2- 基)-3-羟基吡咯烷-1-甲脒
结构式
Figure BDA0002484542170000301
将中间体D(28mg,0.07mmol,1eq)溶于1mL乙醇中，加入(S)-3-羟基吡咯盐酸盐(41mg,0.35mmol,5eq)，吡啶(20mg,0.35mmol,5eq)，氮气保护，80℃回流过夜。TLC监 测原料反应完毕，减压蒸除乙醇，加水5mL，5mL二氯甲烷萃取3次，干燥，浓缩，经 柱纯化得黄色固体(12mg，收率41％)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.21(d,J＝8.0Hz, 1H),8.05(s,1H),7.03-6.91(m,3H),6.31(d,J＝8.0Hz,1H),6.03(s,1H),4.46(s,1H), 3.73-3.50(m,4H),3.11-2.48(m,4H),2.22-1.90(m,5H).MS(ESI)m/z 441.2[M+1]+。
利用中间体E或F，分别按照与实施例18基本操作相似的操作，合成实施例19-20(参 见表3)，从而得到期望的产物。
表3实施例19-20的结构和质谱数据
Figure BDA0002484542170000302
实施例21
(S,E)-N'-羟基-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2- 基)-3-羟基吡咯烷-1-甲脒
结构式
Figure BDA0002484542170000303
将中间体D(176mg,0.44mmol,1eq)溶于2mL乙醇中，加入盐酸羟胺(152mg,2.2mmol, 5eq)，吡啶(172mg,2.2mmol,5eq)，80℃回流过夜。TLC监测原料反应完毕，将乙醇蒸干， 加水5mL，5mL乙酸乙酯萃取3次，干燥，浓缩得黑棕色油状液体，柱纯化得棕黄色固体(S,E)-N'-羟基-N-(5-(((R)-1-(2,5-二氟苯基)乙基)(甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3- 羟基吡咯烷-1-甲脒(80mg，收率42％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.22(d,J＝8.0Hz, 1H),8.06(s,1H),7.03-6.90(m,3H),6.32(d,J＝8.0Hz,1H),6.04(s,1H),4.46(s,1H), 3.74-3.49(m,4H),3.12-2.48(m,4H),2.23-1.90(m,5H).MS(ESI)m/z 432.2[M+1]+。
利用中间体E或F，分别按照与实施例21基本操作相似的操作合成实施例22-23(参见 表4)，从而得到期望的产物。
表4实施例22-23的结构和质谱数据
Figure BDA0002484542170000311
实施例24
TrkA、TrkB、TrkC ELISA测定
在抑制剂存在下使用酶联免疫吸附测定(ELISA)评价TrkA、TrkB、TrkC激酶活性。以TrkA激酶活性测试为例：使用0.025mg/mL聚(Glu，Ala，Tyr；6:3:1；Sigma P3899) 溶液涂布Immulon4HBX384-孔微量滴定板(Thermo)。在涂布的板中在环境温度下将各 浓度的测试化合物，2.5nM TrkA(Invitrogen，组氨酸标记的重组人Trk，胞质结构域) 和500μmol ATP孵育25分钟，同时震荡。测定缓冲液由15mM MOPS pH7.5,0.005％(v/v) Triton X-100与5mM MgCl2组成。通过用含0.1％(v/v)吐温(Tween)20的PBS洗涤，从 板去除反应混合物。使用偶合辣根过氧化物酶的0.2μg/mL磷酸酪氨酸特异性单克隆抗体 (克隆PY20)结合TMB过氧化物酶物质***(KPL)检测磷酸化反产物。在添加1M磷酸 后，经由450nm下的吸光率定量显色物质颜色强度。使用4或5-参数对数(logistic)曲线 拟合计算IC50值。采用TrkA激酶活性测试基本操作相似的操作测定TrkB、TrkC激酶活性。
在以上的活性测定中，本发明的化合物具有低于1000nM的平均IC50。某些化合物具有低于100nM的平均IC50，本发明的化合物结构比商购化合物Larotrectinib(LOXO-101) 更为简单，本发明部分化合物可以达到或者低于商购化合物Larotrectinib(LOXO-101) 的平均IC50。表5提供本发明的化合物和商购化合物Larotrectinib(LOXO-101)在该测定 中测试的具体IC50值。
表5本发明的化合物和商购化合物的具体IC50值
Figure BDA0002484542170000321
实施例25
使用人体肝脏微粒体进行化合物稳定性的评价。
测定***：本发明化合物的代谢稳定性利用由男女混合的肝脏微粒体用1mMNADPH进行试验。样品使用质谱仪进行分析。将HRMS用于确定峰面积响应比率(对应 于试验化合物或对照物的峰面积除以分析内标的峰面积)而不运行标准曲线。为了检测 到所有的可能代谢物，在适当的m/z范围内进行HRMS扫描。
测定条件：该测定用一次孵育(N＝1)进行。将试验化合物在37℃下在含有0.5毫克/毫升肝脏微粒体蛋白的缓冲液中孵育。通过加入辅因子引发反应，并于0、2、4、8、 16、24、36、48小时取样，平行孵育阳性对照物(5μM***)并于0、2、4、8、16、 24、36、48小时取样。
测定质量控制：平行进行对照化合物***以证实(肝脏)微粒体的酶活性。最终时间点后，利用荧光测定法来确认NADPH添加到反应混合物中。对照物的T1/2满足可接 受的内标。
分析方法：
液相色谱柱：Thermo BDS Hypersil C18 30X2.0mm，3μm，具有保护柱M.P.，缓冲液:25mM甲酸接缓冲液，pH 3.5；
水相(A)：90％水，10％缓冲液；
有机相(B)：90％乙腈，10％缓冲液；
流速：300微升/分钟
自动进样器：注射体积10微升
梯度程序参见表6。
表6梯度程序
时间(分钟) ％A ％B
0.0 100 0
1.5 0 100
2.0 0 100
2.1 100 0
3.5 100 0
通过使用人体肝微粒体，如本发明中所述实施例4、5、6、9、10表现出大于30小时的代谢半衰期，实施例7、11、12、13、14、15、16、17表现出介于24-30小时的代谢半 衰期，高于Larotrectinib(LOXO-101)23小时的代谢半衰期。结果显示，相对较长的代 谢半衰期使得它们具有降低医疗剂量和扩大给药时间间隔的潜能。
尽管本发明通过之前的特定实施例说明，但不应将其解释为受此限制；而是本发明 涵盖之前公开的一般方面。可在不背离本发明的精神和范围下进行多种修饰并具有多种 实施方案。

Claims (5)

1.一种化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自：
Figure FDA0003679645940000011
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的药学上可接受的盐为无机盐或有机盐，所述无机盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、酸式磷酸盐；所述有机盐选自乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、丙酮酸盐、羟乙酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、水杨酸盐。
3.一种药物组合物，包括权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂。
4.权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗哺乳动物的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病的药物中的用途。
5.如权利要求4所述的用途，其中所述的癌症选自黑色素瘤、非小细胞肺癌、甲状腺癌、急性骨髓白血病、恶性胶质瘤、星形细胞瘤与髓母细胞瘤、结肠癌、神经母细胞瘤、卵巢癌、乳腺癌、***癌、胰腺癌、多发性骨髓瘤、及大细胞神经内分泌瘤；其中所述的疼痛选自癌症、外科手术、骨折、由肿瘤转移引起的骨痛、内脏痛、炎性痛、偏头痛、慢性腰背痛、膀胱疼痛综合征和神经性疼痛；其中所述的炎症选自哮喘、间质性膀胱炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病、异位性皮炎、湿疹及干癣。
CN202010388135.5A 2020-04-29 2020-05-09 作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物 Active CN113563341B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010353977 2020-04-29
CN2020103539777 2020-04-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113563341A CN113563341A (zh) 2021-10-29
CN113563341B true CN113563341B (zh) 2022-07-12

Family

ID=78158684

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010388135.5A Active CN113563341B (zh) 2020-04-29 2020-05-09 作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113563341B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019210835A1 (zh) * 2018-05-04 2019-11-07 正大天晴药业集团股份有限公司 作为蛋白激酶调节剂的二芳基大环化合物
WO2021042890A1 (zh) * 2019-09-04 2021-03-11 罗欣药业(上海)有限公司 杂环化合物及其作为Trk激酶抑制剂的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019210835A1 (zh) * 2018-05-04 2019-11-07 正大天晴药业集团股份有限公司 作为蛋白激酶调节剂的二芳基大环化合物
WO2021042890A1 (zh) * 2019-09-04 2021-03-11 罗欣药业(上海)有限公司 杂环化合物及其作为Trk激酶抑制剂的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN113563341A (zh) 2021-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111153901B (zh) 一类含氮稠杂环类shp2抑制剂化合物、制备方法和用途
EP3377482B1 (en) Modulators of ror-gamma
EP3205650B1 (en) Egfr inhibitor, and preparation and application thereof
CN112142735B (zh) 一类稠和氰基吡啶类化合物、制备方法和用途
CN110294761B (zh) 作为Trk激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物
WO2021037018A1 (zh) 二氢或四氢喹唑啉类化合物及其中间体、制备方法和应用
CN112552294B (zh) 含哌嗪杂环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用
CN111704611A (zh) 一类芳基螺环类shp2抑制剂化合物、制备方法和用途
WO2018045957A1 (zh) 一种cdk4/6抑制剂及其制备方法和应用
CN101917995A (zh) Polo样激酶抑制剂
JP7261752B2 (ja) 新規キノリノン化合物
CN113527299B (zh) 一类含氮稠环类化合物、制备方法和用途
WO2019011228A1 (zh) 咪唑并[1,2-b]嘧啶并[4,5-d]哒嗪-5(6H)-酮类化合物及其应用
KR20200090828A (ko) 피라졸로피리디논 화합물
CN112142747A (zh) 一种吡唑酮并嘧啶类化合物、其制备方法及应用
CN116768861A (zh) Sos1蛋白降解靶向嵌合体及其组合物、制剂和用途
WO2023125627A1 (en) Nitrogen-containing heterocyclic compound and application thereof
CN113563341B (zh) 作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物
CN113336774B (zh) 作为trk抑制剂的取代的手性二芳基大环化合物
CN115490671A (zh) Parp7抑制剂及其制备方法
TW202334167A (zh) 作為ｅｒｂｂ２抑制劑之稠合四環喹唑啉衍生物
CN114133394B (zh) 一种选择性针对细胞周期依赖性激酶12活性的化合物、制备方法及医药用途
CN115536660A (zh) 苄氨基取代的杂多环化合物及其组合物、制剂和用途
CN113004305B (zh) 大环化合物及其制备方法和用途
CN111808105A (zh) 含有并环基团的嘧啶酮并吡唑类化合物、其制备方法及用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20220415

Address after: 250000 411-40, building 17, SME industrialization base, biomedical park, 1777 Dazheng Road, high tech Zone, Jinan, Shandong Province

Applicant after: Shandong xuanshuo Medical Technology Co.,Ltd.

Address before: Room 2202, 22 / F, building B, phase I, Zhongdan Ecological Life Science Industrial Park, 3-1 xinjinhu Road, high tech Development Zone, Nanjing City, Jiangsu Province, 210061

Applicant before: Nanjing Leizheng Pharmaceutical Technology Co.,Ltd.

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant