CN113440570A - 一种降糖减肥中药组合物及其制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种降糖减肥中药组合物及其制剂，属于中药制剂技术领域。本发明的中药组合物原料包括以下重量份的组份：山药23‑27份、黑豆8‑12份、赤小豆8‑12份、苦瓜9‑11份、天花粉13‑16份、菊芋14‑16份和五加参13‑16份。本发明对中药组合物进行闪式提取，通过对提取过程中的工艺步骤及参数的有效调控，实现了有效成分的高效提取。本发明的中药组合物为安全、有效的中药降血糖药物，在有效控制血糖含量的基础上，还具有减肥的功效。

Description

一种降糖减肥中药组合物及其制剂
技术领域
本发明涉及中药制剂技术领域，特别是涉及一种降糖减肥中药组合物及其制剂。
背景技术
目前，随着生活节奏的加快和环境污染，高血糖疾病的发生率呈现上升趋势。
短时间、一次性的高血糖对人体无严重损害，如在应激状态下或情绪激动、高度紧张时，可出现短暂的高血糖；一次进食大量的糖类，也可出现短暂高血糖；随后，血糖水平逐渐恢复正常。然而长期的高血糖不仅会导致脏器肥大，引起肥胖，还会造成胰腺损伤和出现胰岛素抵挡的现象。高血糖疾病会使全身各个组织器官发生病变，导致急慢性并发症的发生，如失水、电解质紊乱、营养缺乏、抵抗力下降、肾功能受损、神经病变、眼底病变、心脑血管疾病、糖尿病足等。
目前临床所用降血糖的药物除胰岛素外还主要有双胍类(代表药物为二甲双胍)、磺脲类(代表药物为格列吡嗪、格列齐特等)、α－糖苷酶抑制剂(代表药物为阿卡波糖)、胰岛素增敏剂(代表药物为罗格列酮、吡格列酮等)。然而西药通常存在局限性和不良反应，如双胍类的降糖药对肠胃的伤害较大，磺脲类药物可能导致白细胞减少，α－糖苷酶抑制剂则会产生胃肠道反应，胰岛素增敏剂则有可能导致水潴留的发生等，因此，研发具有降糖功效的，安全、无副作用的中药降血糖药物，是目前国内外医药科技界和制药业急需攻克的难题。
发明内容
本发明的目的是提供一种降糖减肥中药组合物及其制剂，以解决上述现有技术存在的问题，使中药组合物具有显著的降糖效果，同时还能抑制高脂饮食导致的肥胖。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明的技术方案之一：提供一种降糖减肥中药组合物，原料包括以下重量份的组份：
山药23-27份、黑豆8-12份、赤小豆8-12份、苦瓜9-11份、天花粉13-16份、菊芋14-16份和五加参13-16份。
进一步地，原料包括以下重量份的组份：
山药25份、黑豆10份、赤小豆10份、苦瓜10份、天花粉15份、菊芋15份和五加参15份。
本发明的技术方案之二：提供一种降糖减肥中药制剂，包括上述中药组合物的提取物。
进一步地，所述中药组合物提取物的提取方法包括以下步骤：
(1)原料预处理：将原料于45-50℃条件下进行干燥处理；
(2)闪式提取：将预处理后的原料与提取溶剂混合进行闪式提取，提取完成后，过滤得滤液；
(3)滤液离心：将得到的滤液在10-12℃、2000-3000r/min条件下离心5-6min，收集上清液；
(4)浓缩：将上清液进行浓缩，得浸膏；
(5)提纯：将步骤(4)所得的浸膏加水混悬，用有机溶剂萃取后，弃去有机层，将水相浓缩后进行真空干燥，即得所述中药组合物提取物。
进一步地，步骤(1)中干燥处理前还包括将原料进行粉碎的步骤，干燥处理的时间为3-4h。
进一步地，闪式提取所用的提取溶剂为水，添加量为预处理后原料重量的12-16倍。
进一步地，，闪式提取的时间为1-1.5min，提取温度为55-65℃。
进一步地，步骤(4)和(5)中所述浓缩是在闪式浓缩器中进行，浓缩时的真空度为-0.7～-0.9MPa，温度为55-65℃，浓缩时间15-20s。
进一步地，步骤(5)中所述有机溶剂为正己烷，真空干燥的温度为45-55℃。
本发明公开了以下技术效果：
本发明的降糖减肥中药组合物配伍合理，利用闪式提取方式充分保留了药物的有效成分，是一种安全、有效的中药降血糖药物，在有效控制血糖含量的基础上，还具有减肥的功效。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为饲养12周后各组小鼠的形态图，其中a为Normal组，b为Control组，c为Sample组；
图2为各组小鼠0-12周的体重图；
图3为实验期间各组每只小鼠每周食物摄入量的平均值；
图4为各组小鼠体重增重图；
图5为各组的食物功效比图；
图6为第2、5、10周高脂饮食组和治疗组小鼠干粪中脂肪含量图；
图7为各组小鼠血清总胆固醇含量图；
图8为各组小鼠血清甘油三酯含量图；
图9为血清HDL以及血清LDL/VLDL图，其中a为血清HDL含量图，b为血清LDL/VLDL图；
图10为各组小鼠肝脏重量图；
图11为各组小鼠肝脏的实物图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组；
图12为各组小鼠白色脂肪组织、肾组织和脾组织重量图；其中a为白色脂肪组织重量图，b为肾组织重量图，c为脾组织重量图；
图13为各组小鼠肝组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图14为各组小鼠白色脂肪组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图15为各组小鼠肾组织放大10倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图16为各组小鼠肾组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图17为各组小鼠脾组织放大10倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图18为各组小鼠脾组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明中所述的“份”如无特别说明，均按质量份计。
实施例1
一种减肥降糖中药制剂，原料包括以下重量份的组份：
山药23份、黑豆8份、赤小豆12份、苦瓜11份、天花粉13份、菊芋16份和五加参16份。
制备方法包括以下步骤：
(1)原料预处理：按照上述重量份数配比称取各原料，粉碎至200目，然后于45℃条件下干燥3h；
(2)闪式提取：将预处理后的原料加入其重量12倍的水，混合均匀后，转移至闪式提取器中，在55℃条件下提取1min，过滤，收集滤液；将过滤后剩余的残渣进行同法提取，合并两次滤液；
(3)滤液离心：将得到的滤液在12℃、2500r/min条件下离心5min，收集上清液；
(4)浓缩：将上清液至于闪式浓缩器中，在真空度为-0.7MPa，温度为55℃条件下，浓缩15s，得到浸膏；
(5)提纯：将步骤(4)所得的浸膏加水混悬，用正己烷萃取后，弃去有机层，将水相至于闪式浓缩器中，在真空度为-0.7MPa，温度为55℃条件下，浓缩20s，将浓缩后的产物在55℃条件下进行真空干燥，即得粉末状产物。
实施例2
一种减肥降糖中药制剂，原料包括以下重量份的组份：
山药27份、黑豆12份、赤小豆8份、苦瓜9份、天花粉14份、菊芋14份和五加参13份。
制备方法包括以下步骤：
(1)原料预处理：按照上述重量份数配比称取各原料，粉碎至300目，然后于50℃条件下干燥4h；
(2)闪式提取：将预处理后的原料加入其重量16倍的水，混合均匀后，转移至闪式提取器中，在60℃条件下提取1.5min，过滤，收集滤液；将过滤后剩余的残渣进行同法提取，合并两次滤液；
(3)滤液离心：将得到的滤液在10℃、3000r/min条件下离心6min，收集上清液；
(4)浓缩：将上清液至于闪式浓缩器中，在真空度为-0.8MPa，温度为60℃条件下，浓缩20s，得到浸膏；
(5)提纯：将步骤(4)所得的浸膏加水混悬，用正己烷萃取后，弃去有机层，将水相至于闪式浓缩器中，在真空度为-0.9MPa，温度为60℃条件下，浓缩15s，将浓缩后的产物在45℃条件下进行真空干燥，即得粉末状产物。
实施例3
一种减肥降糖中药制剂，原料包括以下重量份的组份：
山药25份、黑豆10份、赤小豆10份、苦瓜10份、天花粉15份、菊芋15份和五加参15份。
制备方法包括以下步骤：
(1)原料预处理：按照上述重量份数配比称取各原料，粉碎至250目，然后于48℃条件下干燥3h；
(2)闪式提取：将预处理后的原料加入其重量15倍的水，混合均匀后，转移至闪式提取器中，在65℃条件下提取1min，过滤，收集滤液；将过滤后剩余的残渣进行同法提取，合并两次滤液；
(3)滤液离心：将得到的滤液在11℃、2000r/min条件下离心5min，收集上清液；
(4)浓缩：将上清液至于闪式浓缩器中，在真空度为-0.9MPa，温度为65℃条件下，浓缩18s，得到浸膏；
(5)提纯：将步骤(4)所得的浸膏加水混悬，用正己烷萃取后，弃去有机层，将水相至于闪式浓缩器中，在真空度为-0.8MPa，温度为65℃条件下，浓缩18s，将浓缩后的产物在50℃条件下进行真空干燥，即得粉末状产物。
一、体外实验
将实施例1制得的中药制剂配置成不同浓度的溶液，测定其抗氧化活性。
不同浓度中药制剂对DPPH自由基清除活性结果见表1；中药制剂对DPPH以及ABTS的半抑制浓度见表2。
表1DPPH自由基清除活性
Figure BDA0003128599760000061
表2DPPH自由基和ABTS自由基的半抑制浓度
Figure BDA0003128599760000062
二、体内实验
将16只相同生长期的健康C57BL/6品系小鼠分为3组，正常饮食组5只(Normal组)、高脂饮食组6只(Control组)和治疗组5只(Sample组)，在相同实验环境下进行饲养，饲养期间小鼠可随意获得食物和水。正常饮食组小鼠饲料成分组成见表3，治疗组与高脂饮食组小鼠均喂食高脂饮食饲料，饲料成分组成见表4，饲料的营养成分见表5。治疗组每天进行两次灌胃给药(实施例1的中药制剂)，剂量为500mg/kg。实验期间每周测量小鼠体重和食物摄入量，实验周期12周。
表3正常饮食组成分组成
Figure BDA0003128599760000071
表4高脂饮食组成分组成
Figure BDA0003128599760000072
Figure BDA0003128599760000081
表5饲料营养成分
Figure BDA0003128599760000082
(1)小鼠形态学
饲养12周后，观察各组小鼠的形态，结果见图1。
其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。从图1可以看出，本发明的降糖减肥中药制剂能够抑制小鼠发胖。
(2)小鼠体重
实验期间，每组小鼠各周体重见图2。注：数据显示相对平均值±标准差，采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。*P＜0.05；**P＜0.01，***P＜0.001vs Control。
从图2可以看出，相对于高脂饮食组，本发明的降糖减肥中药制剂能够控制小鼠体重增长。
(3)小鼠食物摄入量
实验期间各组每只小鼠每周食物摄入量的平均值见图3。
(4)小鼠增重和食物功效比
各组小鼠体重增重情况见图4、食物功效比见图5。
从图4可以看出，相比高脂饮食组，治疗组小鼠体重增长较慢；从图5可以看出，相比高脂饮食组，治疗组食物功效比相对较低。
注：数据显示相对平均值±标准差，采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。*P＜0.05；**P＜0.01，***P＜0.001vs Control。
(5)小鼠粪便脂肪***
实验方法：在小鼠饲养的第2、5、10周收集高脂饮食组和治疗组小鼠粪便，取干粪0.5-1g，加水3ml保湿，采用甲醇：氯仿＝1:2混合溶液提取粪便脂肪，计算干粪中脂肪含量，结果见图6。
从图6中可以看出，第2周和第5周，高脂饮食组与治疗组小鼠干粪中脂肪含量相差不大，在第10周，治疗组小鼠干粪中脂肪含量明显高于高脂饮食组，说明本发明的中药制剂能够抑制小鼠对饲料中脂肪的吸收。
(6)小鼠血糖水平
在实验第0、3、6、9、12周测定各组小鼠的血糖水平，结果见表6。
表6
Figure BDA0003128599760000091
注：数据显示相对平均值±标准差，采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001vs Control。
由表6可以看出，相比高脂饮食组，治疗组小鼠血糖得到有效控制。
(7)血清胰岛素和稳态模型评估(HOMA)-胰岛素抵抗(IR)的测定
实验方法：每隔3周用一触式血糖监测***，进行一次空腹血糖测试(
Figure BDA0003128599760000092
N,i-sens,Korea)。实验结束时，对采集的血液样本进行离心后制备血清样本(在4℃下以14000转/分离心20分钟)，在-70℃下储存用于生化分析。按照生产商的步骤，用小鼠胰岛素ELISA试剂盒测试小鼠胰岛素(Cat#638-01489,Shibayagi Co.Ltd,Japan)。根据稳态模型评价胰岛素抵抗(HOMA-IR)，以处死日空腹血糖为指标，计算HOMA-IR，如式(1)所示。
HOMA-IR＝[{空腹胰岛素(μIU/ml)}×{空腹血糖(mmol/l)}]/22.5 式(1)
结果见表7。
表7
Figure BDA0003128599760000101
注：数据显示相对平均值±标准差，采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。*P＜0.05；**P＜0.01，***P＜0.001vs Control。
(8)血脂谱分析
按照生产商的步骤，使用各自的生物测定试剂盒(BioVision,Milpitas,USA)测定血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、胆固醇和甘油三酯的水平。
图7为各组小鼠血清中总胆固醇含量；图8为血清甘油三酯含量；
图9为血清HDL以及血清LDL/VLDL图，其中a为血清HDL含量图，b为血清LDL/VLDL图。
图7、图8和图9中数据显示相对平均值±标准差，采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。*P＜0.05；***P＜0.001vs Control。
从图7-9可以看出，相比高脂饮食组，治疗组可显著降低血清总胆固醇，降低血清甘油三酯，升高血清高密度脂蛋白，降低血清LDL/VLDL，说明本发明的中药制剂具有降脂的作用。
(9)动脉粥样硬化指数和保护率
测定各组动脉粥样硬化指数和保护率，结果见表8。
表8
Figure BDA0003128599760000102
Figure BDA0003128599760000111
其中，动脉粥样硬化指数(AI)计算公式如式(2)所示：
Figure BDA0003128599760000112
保护率计算公式如式(3)所示：
Figure BDA0003128599760000113
从表8可以看出，相比高脂饮食组，治疗组可降低动脉粥样硬化指数，保护率为7.12％。
(10)各组小鼠肝脏、白色脂肪组织、肾组织和脾组织重量
各组小鼠肝脏重量见图10。数据显示相对平均值±标准差，采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。*P＜0.05；**P＜0.01vsControl。
图11为各组小鼠肝脏的实物图，其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
测定各组小鼠白色脂肪组织、肾组织和脾组织重量，测定结果见图12。
其中a为各组小鼠白色脂肪组织重量图，b为各组小鼠肾组织重量图，c为各组小鼠脾组织重量图。
采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验计算统计显著性。***P＜0.001vsControl。
三、采用伊红染色法对实验小鼠肝组织、白色脂肪组织、肾组织、脾组织进行染色
图13为各组小鼠肝组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图14为各组小鼠白色脂肪组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图15为各组小鼠肾组织放大10倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图16为各组小鼠肾组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图17为各组小鼠脾组织放大10倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
图18为各组小鼠脾组织放大20倍的显微镜图；其中，a为Normal组，b为Control组，c为Sample组。
从图13-图18中可以看出，药物组中小鼠肝脏、肾脏、脾脏中的脂质含量明显降低，脂肪细胞的大小显著减小，说明本发明的中药制剂可促进脂质代谢。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (9)

1.一种降糖减肥中药组合物，其特征在于，原料包括以下重量份的组份：
山药23-27份、黑豆8-12份、赤小豆8-12份、苦瓜9-11份、天花粉13-16份、菊芋14-16份和五加参13-16份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，原料包括以下重量份的组份：
山药25份、黑豆10份、赤小豆10份、苦瓜10份、天花粉15份、菊芋15份和五加参15份。
3.一种降糖减肥中药制剂，其特征在于，包括权利要求1或2所述中药组合物的提取物。
4.根据权利要求3所述的中药制剂，其特征在于，所述中药组合物提取物的提取方法包括以下步骤：
(1)原料预处理：将原料于45-50℃条件下进行干燥处理；
(2)闪式提取：将预处理后的原料与提取溶剂混合进行闪式提取，提取完成后，过滤得滤液；
(3)滤液离心：将得到的滤液在10-12℃、2000-3000r/min条件下离心5-6min，收集上清液；
(4)浓缩：将上清液进行浓缩，得浸膏；
(5)提纯：将步骤(4)所得的浸膏加水混悬，用有机溶剂萃取后，弃去有机层，将水相浓缩后进行真空干燥，即得所述中药组合物提取物。
5.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，步骤(1)中干燥处理前还包括将原料进行粉碎的步骤，干燥处理的时间为3-4h。
6.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，闪式提取所用的提取溶剂为水，添加量为预处理后原料重量的12-16倍。
7.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，闪式提取的时间为1-1.5min，提取温度为55-65℃。
8.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，步骤(4)和(5)中所述浓缩是在闪式浓缩器中进行，浓缩时的真空度为-0.7～-0.9MPa，温度为55-65℃，浓缩时间15-20s。
9.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，步骤(5)中所述有机溶剂为正己烷，真空干燥的温度为45-55℃。
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