CN113189250A - 一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，涉及兽药生产技术领域。该基于单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，包括检测性状、对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、鉴别、检查、色谱条件与***适用性试验和测定法。本发明结合禽类用药特点，结合传统的中医理论经验，更好的利用了现代制剂工艺进行全面***的管控，具有操作简便、重现性好、稳定性强等特点，更能准确地控制中兽药质量。

Description

一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术

技术领域

本发明涉及兽药生产技术领域，具体为一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术。

背景技术

散剂是我国重要的兽药剂型，药效迅速，给药方便，在我国现代养殖业特别是集约化养禽中发挥着重要作用。提高兽药散剂的质量，应严格管理兽药散剂的生产环节、加强散剂的质量检查、科学地进行处方设计。针对中兽药散剂自身特点，采用现代分析检测技术手段不断完善中兽药散剂的检测方法，建立能反映中兽药散剂整体性、有效性、稳定性、安全性的质量控制标准体系，使其定量化、准确化及科学化。

但由于工艺质量管控技术的不足导致目前兽药散剂仍存在混合均匀度差、粉末细度不合要求、易吸湿、装量不合格等问题。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，通过对中间产品一(青蒿粗粉)、中间产品二(青蒿浸膏)和成品青蒿散的产品质量进行了全面***的质量管控，解决了目前兽药散剂仍存在混合均匀度差、粉末细度不合要求、易吸湿、装量不合格的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，管控步骤为：

S1.设定管控标准，并制备青蒿素对照品储备液备用；

S2.对青蒿粗粉进行质量管控：

在进行青蒿粗粉的生产时，分别在生产初段，中段和尾段提取头样、中样和尾样进行抽查检测，通过检测方法快速对样品进行检测后，根据检测数据及时调整生产参数；

S3.对青蒿浸膏进行质量管控；

根据青蒿粗粉尾样数据调整青蒿浸膏的生产参数，分别在生产初段，中段和尾段提取头样、中样和尾样进行抽查检测，通过检测方法快速对样品进行检测后，根据检测数据及时调整生产参数；

S4.对青蒿散的产品质量进行质量管控：

根据青蒿浸膏的尾样数据调整青蒿散的生产参数，分别在生产初段，中段和尾段提取头样、中样和尾样进行抽查检测，通过检测方法快速对样品进行检测后，根据检测数据及时调整生产参数，并对总混和包装阶段进行抽样检测。

优选的，所述检测方法为：

S1.设定管控标准：

成品检测标准为水分＜9.0％，细菌总数≤200个/g，霉菌总数≤10个/g，大肠杆菌不得检出，每克含青蒿以青蒿素(C15H22O5)计,不得少于80mg；

S2.对照品溶液的制备：

精密称取青蒿素对照品10mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容，制备成1mg/ml的青蒿素对照品储备液或直接按1mg/ml的浓度比例直接制备两个生产批次总量的青蒿素对照品储备液，再进行试管分装，备用；

S3.供试品溶液的制备：

按青蒿散样品的标准比例精密称取含有青蒿素10mg的青蒿散样品于容量瓶中，加入少量流动相溶解，置于10ml棕色容量瓶中，超声溶解10min，再用流动相定容并混匀，即得；

S4.鉴别：

按青蒿散样品的标准比例精密称取含10mg青蒿素的样品0.1g，加入10ml甲醇，超声5min，使其充分溶解，过滤后取滤液，作为供试品溶液；取青蒿对照药材3g，加60-90℃石油醚50ml，加热回流1min，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷30ml使溶解，用20％乙腈溶液振摇提取3次，每次10ml，合并乙腈液后蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，加乙醇制成每1ml含l mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60-90℃石油醚与常温***按4:5混合为展开剂，依次进行展开，取出，晾干后，喷以2％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在青蒿素含量测定项下记录的色谱图中，供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰：

S5.检查：

水分，照水分测定法测定，不得过9.0％；外观均匀度，表面压平，在亮处观察，色泽均匀，无花纹色斑；装量，取本品，照散剂项下规定检查法检查，装量应为标示装量的95.0％-105.0％。含量测定，照高效液相色谱法附录0512测定；

S6.色谱条件与***适用性试验：

以十八烷基键合硅胶为填充剂；按50:50的比例以乙腈为流动相A，以0.1％乙酸为流动相B；进样量：10μl，柱温：35℃，检测波长为210nm；流速为每分钟1.0ml。理论板数按青蒿素峰应不低于3000；

S7.测定法：

分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl，高效液相色谱仪测定，计算，即得。

优选的，所述生产方法为：青蒿药材炮制完后，粉碎成过2号筛的粗粉，再投入到提取罐中，加60～90℃石油醚55℃以下温浸提取三次，第一次加6倍量，提取2h；第二次加4倍量，提取1.5h；第三次加4倍量，提取1h；合并提取液，进行过滤，然后滤液真空减压回收石油醚，浓缩成相对密度≥1.15,温度25℃的清膏；再加入等量的二氧化硅并混合均匀，再过12目筛制粒，最后在55℃下干燥，粉碎成100目细粉，进行总混，包装即得。

(三)有益效果

本发明提供了一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术。具备以下有益效果：

本发明结合禽类用药特点，结合传统的中医理论经验，更好的利用了现代制剂工艺进行全面***的管控，具有操作简便、重现性好、稳定性强等特点，更能准确地控制中兽药质量。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：

本发明实施例提供一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，检测步骤为：

设定管控标准，管控的标准设定根据《兽药注册管理办法》附件要求中的中兽药和天然药物制剂注册的有关规定，并参考《中兽药新药研究技术要求》进行设定，成品检测标准为水分＜9.0％，细菌总数≤200个/g，霉菌总数≤10个/g，大肠杆菌不得检出，每克含青蒿以青蒿素(C15H22O5)计,不得少于80mg；

对中间产品一青蒿粗粉进行质量管控：

P1、确定中间产品一青蒿粗粉的性状为棕黄色粉末，气香，味微苦；

P2、精密称取本品3g，加60～90℃石油醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷30ml使溶解，用20％乙腈溶液振摇提取3次，每次10ml，合并乙腈溶液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，加乙醇制成每1ml含l mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法附录43页进行试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚与***按4:5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均能显相同颜色的荧光斑点；阴性样品无干扰；

P3、青蒿粗粉水分＜14.0％，总灰分＜8.0％，青蒿粗粉粒度为全部过2号筛，用无水乙醇做溶剂浸出物不得少于1.9％；

P4、以4.6*250mm，5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％冰醋酸；检测波长为210nm；流速为1.0ml/min，柱温35℃；按下表流动相配比进行，理论板数按青蒿素峰计算不低于3000：

流动相配比表

时间(min)	流动相A(％)	流动相B(％)
			0	50	50
50	50	50

P5测定法精密称取适量青蒿粗粉，置10ml量瓶中，加流动相适量，超声使青蒿素溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液作为对照品溶液；

P6、线性方程为Y＝38787X+253.95，相关系数R＝0.999，对照品溶液在0.0998mg/ml～1.19759mg/ml范围内线性良好：本方法专属性强，重复性结果良好，可重复，中间精密度均符合要求；

P7、确定对照品在室温条件下，24h稳定，供试品室温条件下，24h稳定，准确度高，方法可行，通过对耐用性，采用不同流速、不同色谱柱温、不同波长选择、不同流动相比例等方面进行了研究，本方法耐用性良好，确定了青蒿浸膏含量测定的色谱条件；验证项目的结果表明方法可行、可靠，能有效对青蒿散中间产品一(青蒿粗粉)进行有效控制；

对中间产品二青蒿浸膏进行质量管控：

Q1、确定中间产品二青蒿浸膏的性状为棕褐色稠膏，气味特异，味微苦；

Q2、精密称取本品适量加正己烷30ml使溶解，用20％乙腈溶液振摇提取3次，每次10ml，合并乙腈溶液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，加乙醇制成每1ml含l mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法附录43页进行试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚和常温***按4:5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均能显相同颜色的荧光斑点；阴性样品无干扰，相对密度不得低于1.15；

Q3、以4.6*250mm，5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％冰醋酸；检测波长为210nm；流速为1.0ml/min，柱温35℃；按下表流动相配比进行，理论板数按青蒿素峰计算不低于3000。流动相配比见下表。

青蒿浸膏含量测定流动相配比

Q4、测定法精密称取适量青蒿浸膏，置10ml量瓶中，加流动相适量，超声使青蒿素溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液作为对照品溶液；精密量取上述供试品及对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；

Q5、对青蒿浸膏含量方法学进行***的验证；线性方程为Y＝38787X+253.95，相关系数R＝0.999，对照品溶液在0.0998mg/ml～1.19759mg/ml范围内线性良好；

Q6、本方法专属性强，重复性结果良好，可重复，中间精密度均符合要求；本方法准确度高，方法可行；对照品在2～8℃条件下，24h稳定，供试品室温条件下，24h稳定；通过耐用性研究，采用不同流速、不同色谱柱温、不同波长选择、不同流动相比例等方面进行了研究，本方法耐用性良好；最终确定了青蒿浸膏含量测定的色谱条件；

对成品青蒿散的产品质量进行质量管控：

S1、确定成品青蒿散为淡黄色粉末后，取样品适量，置光滑纸上，平铺约5cm2，将其表面压平，在明亮处观察，应色泽均匀，无花斑、色斑；气味特异，味微苦；

S2、精密称取样品适量，加入10ml乙醇，超声5min，使其充分溶解，滤过，取滤液，作为供试品溶液；另取青蒿对照药材3g，加60～90℃石油醚50ml，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷30ml使溶解，用20％乙腈溶液振摇提取3次，每次10ml，合并乙腈液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品对照溶液；另取青蒿素对照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法附录43页试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚与常温***按4:5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置与365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照溶液色谱和对照品色谱相应的位置上，均能显相同颜色的荧光斑点；阴性样品无干扰；

S3、鉴别在青蒿素含量测定项下记录的色谱图中，供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

S4、以4.6*250mm，5μm十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％冰醋酸；检测波长为210nm；流速为1.0ml/min，柱温35℃；测定法精密称取适量青蒿散，置10ml量瓶中，加流动相适量，超声使青蒿素溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液作为对照品溶液；精密量取上述供试品及对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (3)

1.一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，管控步骤为：

S1.设定管控标准，并制备青蒿素对照品储备液备用；

S2.对青蒿粗粉进行质量管控：

在进行青蒿粗粉的生产时，分别在生产初段，中段和尾段提取头样、中样和尾样进行抽查检测，通过检测方法快速对样品进行检测后，根据检测数据及时调整生产参数；

S3.对青蒿浸膏进行质量管控；

根据青蒿粗粉尾样数据调整青蒿浸膏的生产参数，分别在生产初段，中段和尾段提取头样、中样和尾样进行抽查检测，通过检测方法快速对样品进行检测后，根据检测数据及时调整生产参数；

S4.对青蒿散的产品质量进行质量管控：

根据青蒿浸膏的尾样数据调整青蒿散的生产参数，分别在生产初段，中段和尾段提取头样、中样和尾样进行抽查检测，通过检测方法快速对样品进行检测后，根据检测数据及时调整生产参数，并对总混和包装阶段进行抽样检测。

2.根据权利要求1所述的一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，其特征在于：所述检测方法为：

S1.设定管控标准：

成品检测标准为水分＜9.0％，细菌总数≤200个/g，霉菌总数≤10个/g，大肠杆菌不得检出，每克含青蒿以青蒿素(C15H22O5)计,不得少于80mg；

S2.对照品溶液的制备：

精密称取青蒿素对照品10mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容，制备成1mg/ml的青蒿素对照品储备液或直接按1mg/ml的浓度比例直接制备两个生产批次总量的青蒿素对照品储备液，再进行试管分装，备用；

S3.供试品溶液的制备：

按青蒿散样品的标准比例精密称取含有青蒿素10mg的青蒿散样品于容量瓶中，加入少量流动相溶解，置于10ml棕色容量瓶中，超声溶解10min，再用流动相定容并混匀，即得；

S4.鉴别：

按青蒿散样品的标准比例精密称取含10mg青蒿素的样品0.1g，加入10ml甲醇，超声5min，使其充分溶解，过滤后取滤液，作为供试品溶液；取青蒿对照药材3g，加60-90℃石油醚50ml，加热回流1min，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷30ml使溶解，用20％乙腈溶液振摇提取3次，每次10ml，合并乙腈液后蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取青蒿素对照品，加乙醇制成每1ml含l mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60-90℃石油醚与常温***按4:5混合为展开剂，依次进行展开，取出，晾干后，喷以2％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在青蒿素含量测定项下记录的色谱图中，供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰：

S5.检查：

水分，照水分测定法测定，不得过9.0％；外观均匀度，表面压平，在亮处观察，色泽均匀，无花纹色斑；装量，取本品，照散剂项下规定检查法检查，装量应为标示装量的95.0％-105.0％。含量测定，照高效液相色谱法附录0512测定；

S6.色谱条件与***适用性试验：

以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％乙酸为流动相B(50:50)；进样量：10μl，柱温：35℃，检测波长为210nm；流速为每分钟1.0ml。理论板数按青蒿素峰应不低于3000；

S7.测定法：

分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl，高效液相色谱仪测定，计算，即得。

3.根据权利要求1所述的一种单方型鸡用青蒿散的工艺质量管控技术，其特征在于：所述生产方法为：青蒿药材炮制完后，粉碎成过2号筛的粗粉，再投入到提取罐中，加60～90℃石油醚55℃以下温浸提取三次，第一次加6倍量，提取2h；第二次加4倍量，提取1.5h；第三次加4倍量，提取1h；合并提取液，进行过滤，然后滤液真空减压回收石油醚，浓缩成相对密度≥1.15,温度25℃的清膏；再加入等量的二氧化硅并混合均匀，再过12目筛制粒，最后在55℃下干燥，粉碎成100目细粉，进行总混，包装即得。