CN113142196A - 一种解淀粉芽孢杆菌干悬浮剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌干悬浮剂及其制备方法，包括有效活性成分、助剂和辅料，其特征在于所述有效活性成分为解淀粉芽孢杆菌Jt84，所述助剂包括润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂，所述干悬浮剂中解淀粉芽孢杆菌Jt84活菌量为0.6×1010～1.0×1010cfu/g。制备方法：将解淀粉芽孢杆菌Jt84菌株活化，移入种子罐中发酵培养，发酵罐中发酵培养，获得发酵液；将所述助剂中的润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂以及辅料混合后与发酵液按一定比例混合0.15～0.20∶1的重量/体积比搅拌混合均匀，将混合物高速剪切研磨后喷雾干燥得到解淀粉芽孢杆菌的干悬浮剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌干悬浮剂及其制备方法。
技术背景
解淀粉芽孢杆菌是一类产生芽孢、抗逆性强，生长速度快、在土壤和水体中广泛存在的环境友好型微生物；解淀粉芽孢杆菌防治植物病害机制包括营养和空间竞争、分泌多种抗菌物质、诱导植株产生抗性病等，目前被广泛用来防治多种植物病害。目前，已经成功开发并投入生产的解淀粉芽孢杆菌制剂对水稻稻瘟病、水稻细菌性条斑病和白叶枯病、番茄枯萎病等真菌和细菌病害具有良好的防治效果。
目前市场上解淀粉芽孢杆菌剂型以水剂和可湿性粉剂等传统剂型为主。其中水剂在贮存中易沉淀分层，不易远距离运输；可湿性粉剂加工时粉尘污染较大，对生产者有害，在田间应该过程中可湿性粉剂易产生沉降引起药液浓度前后不一致，上述不利因素都严重制约着解淀粉芽孢杆菌杀菌剂的推广和应用。
干悬浮剂是一种高效、环保的农药新剂型，在化学农药上应用较广，而在微生物农药中开发利用较少，是微生物农药剂型重要的发展方向。与传统的微生物农药剂型相比，干悬浮剂具有良好的悬浮性和分散性；其有效成份的颗粒细，单位质量的药剂在植物表面的覆盖面广，具有良好的药效；加工和田间应用过程中无粉尘污染，对环境和操作者的危害较小，同时能加工成浓度更高的产品，减少贮运成本，更大范围的推广应用。
江苏省农业科学院筛选获得的一株解淀粉芽孢杆菌菌株Jt84对水稻稻曲病具有良好防效，该菌株已于2017年6月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14368。目前，将解淀粉芽孢杆菌制备成干悬浮剂鲜有报道。随着国家对粮食安全需求越来越重视，为了更有效防治水稻后期真菌病害，迫切需要研究开发该菌株的新型微生物杀菌剂。
发明内容
本发明的目的在于：提供一种贮存、运输和田间应用都便利的解淀粉芽孢杆菌干悬浮剂，以及这种干悬浮剂的制备方法。
本发明的目的是这样实现的：
一种解淀粉芽孢杆菌的干悬浮剂，包括有效活性成分、助剂和填料，其特征在于，所述有效活性成分为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Jt84，所述助剂包括润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂，所述干悬浮剂中解淀粉芽孢杆菌Jt84活菌量为0.6×1010～1.0×1010cfu/g。
在本发明中，所述润湿剂为脂肪醇聚氧乙烯醚或有机硅Silwet 625中的一种；所述分散剂为萘磺酸钠甲醛缩合物钠盐；所述粘结剂为聚乙二醇200或羧甲基纤维素钠中的一种；所述崩解剂为硫酸铵或尿素或硫酸钠中的一种。
在本发明中，所述填料为高岭土或轻质碳酸钙或膨润土中的一种或两种。
制备上述干悬浮剂的具体步骤如下：
a)将解淀粉芽孢杆菌Jt84菌株活化后进行培养，按接种量1∶100～1∶300将培养好的菌株移入种子罐中发酵培养12～24h，再按接种量1∶10～1∶20将种子罐中的发酵液移入大型发酵罐中发酵18～36h，获得发酵液；
b)将所述助剂中的润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂以及填料按比例混合后与步骤a中发酵液按0.15～0.20∶1的重量/体积比搅拌混合均匀；混匀后采用高速剪切机进行初粉碎；然后转入连续化砂磨机中进行研磨处理，然后经过喷雾干燥塔进行喷雾干燥，最后进行筛分得干悬浮剂合格产品。
在本发明中，所述b步骤中润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂按质量比0.5～1.0∶4.0～6.0∶0.5～1.0∶4.0～5.0与填料混合，使得混合物中助剂占混合物总量的10.0～12.0％。
本发明提供了一种所述的含有解淀粉芽孢杆菌Jt84的干悬浮剂在防治水稻稻曲病中的应用。
由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有如下优势：
本发明将解淀粉芽孢杆菌制成干悬浮剂剂型，与现有芽孢杆菌制剂产品，如水剂、可湿性粉剂、悬浮剂、水分散粒剂等剂型做比较，本发明的解淀粉芽孢杆菌干悬浮剂在运输方面比水剂、悬浮剂更便捷，在粉尘方面比可湿性粉剂对施药者更安全，减少粉尘污染，粒径方面比水分散粒剂更小，有利于提高解淀粉芽孢杆菌的药效。本发明的剂型为干悬浮剂，是一种环境友好型剂型，符合国家产业政策发展方向。
具体实施方式
实施例1
将解淀粉芽孢杆菌Jt84菌株活化后进行培养，按接种量1∶100～1∶300将培养好的菌株移入种子罐中发酵培养12～24h，再按接种量1∶10～1∶20将种子罐中的发酵液移入大型发酵罐中发酵18～36h，获得发酵液；发酵罐中的发酵培养基为玉米淀粉-黄豆粉-酵母膏培养基。
实施例2
一种含有解淀粉芽孢杆菌Jt84的干悬浮剂，按重量百分比将润湿剂(脂肪醇聚氧乙烯醚)、分散剂(萘磺酸钠甲醛缩合物钠盐)、粘结剂(聚乙二醇200)、崩解剂(硫酸铵)按质量比1.0∶5.0∶0.5∶5.0与填料(高岭土)混合，使得混合物中助剂占混合物总量的12％。
将所述助剂中的润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂以及填料按比例混合后与发酵液按0.16∶1的重量/体积比搅拌混合均匀；混匀后采用高速剪切机进行初粉碎；然后转入连续化砂磨机中进行研磨处理，然后经过喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥参数为：进风温度183.0℃，出风温度73℃，压力1.5MPa，流速23.5L/min，最后进行筛分得干悬浮剂合格产品，解淀粉芽孢杆菌Jt84干悬浮剂含量为1.0×1010cfu/g。
实施例3
20亿芽孢/克解淀粉芽孢杆菌Jt84干悬浮剂防治水稻稻曲病的田间小区效果
被测药剂：由实施例2制备提供的20亿芽孢/克解淀粉芽孢杆菌Jt84干悬浮剂
对比药剂：2.5％井冈霉素，江苏苏滨生物农化有限公司。
在水稻破口前5～7天施药，间隔7～10d左右进行第二次防治。调查方法：参照农业部药检所“NY/T 1464.54-2014农药田间药效试验准则第54部分：杀菌剂防治水稻稻曲病”的规定进行。每小区5点取样，每点选取200穗。根据稻穗为害症状成都分级，记录。调查分级标准如下：
0级：无病；
1级：每穗1个稻曲球；
3级：每穗2个稻曲球；
5级：每穗3～5个稻曲球；
7级：每穗6～9个稻曲球；
9级：每穗10个或10个以上个稻曲球。
药效计算方法
根据调查结果，按照下面a)、b)公式计算病情指数和防数，试验数据采用邓肯式新复极差法(DMRT)进行统计分析。
a)病情指数＝∑(各级发病数×各级代表值)/(调查总穗数×最高级代表值)×100；
b)防治效果％＝[(对照区病情指数-处理区药后病情指数)/对照区病情指数)]×100％。
地点：江苏镇江 时间：2019年(结果参见表1)。
表1 20亿芽孢/克解淀粉芽孢杆菌Jt84干悬浮剂田间小区试验效果
以上各实施例不是对本发明的具体限制，只要根据权利要求限定的范围，在本专利的启示下，结合本领域的基本常识，将所述干悬浮剂用于水稻稻曲病的防治中，都属于本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种解淀粉芽孢杆菌干悬浮剂，包括有效活性成分、助剂和填料，其特征在于，所述有效活性成分为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Jt84，所述助剂包括润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂，所述干悬浮剂中解淀粉芽孢杆菌Jt84活菌量为0.6×1010～1.0×1010cfu/g；
所述润湿剂为脂肪醇聚氧乙烯醚或有机硅Silwet 625中的一种；
所述分散剂为萘磺酸钠甲醛缩合物钠盐；
所述粘结剂为聚乙二醇200或羧甲基纤维素钠中的一种；
所述崩解剂为硫酸铵或尿素或硫酸钠中的一种。
2.根据权利要求1所述的一种解淀粉芽孢杆菌的干悬浮剂，其特征在于，所述填料为高岭土或轻质碳酸钙或膨润土中的一种或两种。
3.一种如权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌的干悬浮剂的制备方法，其特征在于：
a)将解淀粉芽孢杆菌Jt84菌株活化后进行培养，按接种量1∶100～1∶300将培养好的菌株移入种子罐中发酵培养12～24h，再按接种量1∶10～1∶20将种子罐中的发酵液移入大型发酵罐中发酵18～36h，获得发酵液；
b)将所述助剂中的润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂以及填料按比例混合后与步骤a中发酵液按0.15～0.20∶1的重量/体积比搅拌混合均匀；混匀后采用高速剪切机进行初粉碎；然后转入连续化砂磨机中进行研磨处理，然后经过喷雾干燥塔进行喷雾干燥，最后进行筛分得干悬浮剂合格产品。
4.根据权利要求3所述的一种解淀粉芽孢杆菌的干悬浮剂的制备方法，其特征在于，所述b步骤中润湿剂、分散剂、粘结剂、崩解剂按质量比0.5～1.0∶4.0～6.0∶0.5～1.0∶4.0～5.0与填料混合，使得混合物中助剂占混合物总量的10.0～12.0％。
5.一种如权利要求1至4中任一项所述的含有解淀粉芽孢杆菌Jt84干悬浮剂在防治水稻稻曲病中的应用。
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| WO1998047374A1 (en) * | 1997-04-18 | 1998-10-29 | Ganeden Biotech, Inc. | Topical use of probiotic bacillus spores to prevent or control microbial infections |
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| Title |
|---|
| 张荣胜 等: ""生防菌解淀粉芽胞杆菌Jt84干悬浮剂加工及田间评价"", 《中国生物防治学报》 * |
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