CN113121487A - 从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，所述方法包括如下步骤：取显齿蛇葡萄叶和水，以料液比为1：(25～35)混合；采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液。与现有技术相比，本发明具备如下有益效果：采用传统方法从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素，提取率非常低本发明的发明人意外地发现，在从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的过程中，通过采用加热回流的方式并配合调整料液比以及加热回流条件，能够大幅度提升二氢杨梅素的提取率。
Description
技术领域
本发明涉及中药有效成分提取技术领域，特别是涉及一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法。
背景技术
显齿蛇葡萄叶，来源于葡萄科(Vitaceae)蛇葡萄属(Ampelopsis Michx.)的显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz)W.T.Wang)，产地众多，主要分布于我国湖北、湖南、重庆、贵州、广西、福建等长江以南地区，是近年来研究较多的药茶两用中药之一。将显齿蛇葡萄的嫩茎叶晒干后，茶叶色绿起白霜，俗称藤茶，开水冲泡后其味微苦甘长，民间已有近千年的饮用历史，常用于肝火过盛、咽喉炎、心脑血管疾病等的防治。其中，二氢杨梅素是其最主要的活性成分，含量可高达30％以上。现代科学研究表明，二氢杨梅素具有清除自由基、提升机体免疫力、抗肿瘤、保护神经、调节血脂以及保肝护肝等多种生物活性，是显齿蛇葡萄叶多种健康促进功能的物质基础。二氢杨梅素的药理功效显著，作用独特，具有很好的临床应用与产品开发的前景。
传统的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，例如：
一种快速提取显齿蛇葡萄叶中高纯度二氢杨梅素的方法，包括如下步骤：
(1)粉碎：干叶，粉碎至10目～20目；(2)浸洗：放入水中，料液质量体积比为1:100(g/mL)，常温浸泡6小时；(3)提取：重新加水，95℃提取60分钟，并趁热分离提取液；(4)结晶：室温或制冷冷却提取液，于4℃～10℃促进结晶，过滤获得粗品；(5)重结晶：加沸水至粗品全部溶解，重结晶，滤母液，获得产品。
一种提高显齿蛇葡萄中二氢杨梅素得率的方法，由以下步骤组成：(1)采摘重庆酉阳显齿蛇葡萄鲜叶，并将显齿蛇葡萄叶在温度为100℃条件下烘烤1h；
(2)将取烘干处理的显齿蛇葡萄粉碎，过40目筛，得到显齿蛇葡萄粉末，备用；
(3)称取100g的显齿蛇葡萄粉末加入到2000mL体积分数为95％的乙醇溶液中，超声提取30min，滤过得到二氢杨梅素提取液；(4)将步骤(3)制备得到二氢杨梅素提取液置于旋转蒸发仪中，温度为50℃水浴中减压浓缩，回收乙醇至无醇味，加1000mL沸水溶解，置于4℃低温环境下放冷析晶，滤过，60℃烘干滤饼即为二氢杨梅素提取物。
一种从显齿蛇葡萄叶中分离纯化二氢杨梅素的方法，依照以下步骤：(1)显齿蛇葡萄干叶粉碎后过20目筛，加入浓度为40％～80％乙醇水溶液，料液比为显齿蛇葡萄叶(重量kg)：乙醇水溶液(体积L)＝1:20，在室温条件下搅拌提取60min，经常规过滤获得提取液；(2)提取液依次通过微滤一级膜和超滤二级膜，得到纯化提取液；(3)将步骤(2)所得纯化提取液经温度为60℃真空浓缩，回收乙醇，得到浓缩液；(4)将步骤(3)所得浓缩液用盐酸调节pH至2～3，置于室温条件下静置48h，过滤收集沉淀；(5)将步骤(4)所得沉淀用95％乙醇加热溶解后经微滤一级膜除去不溶杂质，往滤液中加入4倍～10倍体积的水后，用盐酸调节pH至2～3并置于室温条件下静置48h，过滤收集沉淀；(6)将步骤(5)所得沉淀用90℃热水充分搅拌后溶解，保温静置2h～4h，上层清液经常规过滤后，用盐酸调节pH至2～3并置于室温条件下静置48h，过滤收集沉淀，干燥后即得到二氢杨梅素纯品。
一种从显齿蛇葡萄中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：(1)以显齿蛇葡萄叶、茎为原料，用水或乙醇水溶液提取，提取温度50℃～90℃，趁热过滤，重复提取2次～3次，得粗提液；将粗提液浓缩至原料重量的3倍～8倍，冷却至0℃～20℃，静置，倒出溶液，下层固体以常温水清洗2次～3次，固体用乙醇水溶液溶解，得溶液；(2)分离纯化：调节步骤(1)所得溶液的pH值为5～7，上分子筛层析柱，以0.5mL/min～1.0mL/min流速吸附，先用水洗脱除去糖类等水溶性杂质及大分子成分，再用乙醇水溶液对分子筛层析柱进行洗脱，收集二氢杨梅素含量高洗脱液，浓缩得二氢杨梅素。
采用如上例举的传统方式从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素，提取率非常低。
发明内容
基于此，有必要针对二氢杨梅素提取率低的问题，本发明的主要目的是提供一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，采用该方法从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素，二氢杨梅素的提取率高。
本发明的目的主要是通过如下技术方案实现的：
一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，所述方法包括如下步骤：
取显齿蛇葡萄叶和水，以料液比为1：(25～35)混合；
采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液。
在其中一个实施例中，所述方法还包括对所述提取液进行浓缩的步骤，浓缩的步骤包括对所述提取液进行微滤，并对微滤所得清液进行真空浓缩。
在其中一个实施例中，微滤所采用的滤膜的孔径为400nm～600nm，或/和微滤所采用的滤膜为陶瓷膜。
在其中一个实施例中，微滤所采用的流速为1.2L/min～1.5L/min，微滤的过程中控制所述提取液的温度为60℃～75℃。
在其中一个实施例中，真空浓缩所采用的条件包括：温度为40℃～80℃，真空度为-0.07MPa～-0.08MPa。
在其中一个实施例中，真空浓缩所得产物的含固量为20wt％～60wt％。
在其中一个实施例中，所述方法还包括对真空浓缩所得产物进行干燥的步骤。
在其中一个实施例中，干燥的方式为喷雾干燥或/和真空冷冻干燥。
在其中一个实施例中，加热回流提取的次数不低于2次。
在其中一个实施例中，收集提取液所采用的方式为离心。
在其中一个实施例中，离心的转速为3500r/min～6500r/min。
在其中一个实施例中，所述显齿蛇葡萄叶为新鲜的或者经过干燥处理的显齿蛇葡萄叶。
与现有技术相比，本发明具备如下有益效果：
采用传统方法从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素，提取率非常低(通常在8％～31％)。本发明的发明人意外地发现，在从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的过程中，通过采用加热回流的方式并配合调整料液比以及加热回流条件，能够大幅度提升二氢杨梅素的提取率(提取率可达95％以上)。并且，通过多批次试验，证明本发明工艺的稳定性和重现性好。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本发明实施例所述的“料液比”，指固态的“料”的质量与作为浸提液的“液”的体积的比。“料”的单位用g、mg等，“液”的单位用L、mL等，于是“料液比”的单位有g/L、mg/L、g/mL、mg/mL等。以下以实施例“料液比”的单位为g/mL对本发明的技术方案进行解释说明。
本发明实施例所述的“含固量”，是某物质在规定条件下烘干后剩余部分占该物质总量的质量百分数，也叫“不挥发份含量”。
本发明实施例提供一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，所述方法包括如下步骤：
取显齿蛇葡萄叶和水，以料液比为1：(25～35)混合；
采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液。
在其中一个示例中，所述方法还包括对所述提取液进行浓缩的步骤，浓缩的步骤包括对所述提取液进行微滤，并对微滤所得清液进行真空浓缩。
其中一个示例中，微滤所采用的滤膜的孔径为400nm～600nm。
其中一个示例中，微滤所采用的滤膜为陶瓷膜。
其中一个示例中，微滤所采用的流速为1.2L/min～1.5L/min，微滤的过程中控制所述提取液的温度为60℃～75℃。
基于上述滤膜的选择以及微滤流速控制的需求，本发明实施例需要相应地控制微滤过程中的设备压力，一般实现上述需求条件，进料泵的压力需要控制在145kPa～190kPa，循环泵的压力需要控制在280kPa～420kPa。
本发明实施例在微滤的过程中，优选地控制提取液的温度为60℃～75℃。温度低于50℃，微滤时温度低可能会导致二氢杨梅素析出被截留，影响二氢杨梅素的转移率，当温度高于100℃，二氢杨梅素会发生不可逆氧化反应。为了实现提取液温度的准确控制，可以对提取液进行实时监测，监测的频率例如可以控制在每15min检测1次。
在其中一个示例中，真空浓缩所采用的条件包括：温度为40℃～80℃，真空度为-0.07至-0.08MPa a。
在其中一个示例中，真空浓缩所得产物的含固量为20wt％～60wt％。
在其中一个示例中，所述方法还包括对真空浓缩所得产物进行干燥的步骤。
在其中一个示例中，干燥的方式为喷雾干燥或/和真空冷冻干燥。喷雾干燥可以为低温喷雾干燥，也可以为冷冻喷雾干燥。本发明实施例中，低温喷雾干燥的条件包括：进风温度40℃～100℃，出风温度40℃～60℃；冷冻喷雾干燥的条件包括：冷冻温度是-15℃，冷阱温度-70℃，冷风量5.5m3/min。真空冷冻干燥的条件包括：采用程度控温：第一时段：-30℃～-20℃预冷，10h～12h；第二时段：-80℃，24h～48h。
真空浓缩所得产物的含固量为20wt％～30wt％的情况下可以采用冷冻喷雾干燥，真空浓缩所得产物的含固量为30wt％～60wt％的情况下可以采用真空冷冻干燥。
在其中一个示例中，加热回流提取的次数不低于2次。优选地，为兼顾成本和得率，可以提取2次。以加热回流提取的次数为2次为例，本发明实施例提供的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法包括如下步骤：
取显齿蛇葡萄叶和水，以料液比为1：(25～35)混合，采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液I和提取渣；
取所述提取渣和水，以料液比为1：(25～35)混合，采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液Ⅱ；
混合所述提取液I和所述提取液Ⅱ。
在其中一个示例中，收集提取液所采用的方式为离心。
在其中一个示例中，离心的转速为3500r/min～6500r/min。可以理解的是，本发明实施例所述的离心，可以是一个连续离心的过程，不会涉及多长时间，中试和生产规模的是边离心边出料。
在其中一个示例中，所述显齿蛇葡萄叶可以是经过干燥处理的显齿蛇葡萄叶，也可以是新鲜的未经经过干燥处理的显齿蛇葡萄叶。可以理解的是，为便于提取，本发明实施例的显齿蛇葡萄叶可以选择经过粉碎处理的显齿蛇葡萄叶细碎品，例如可以是经过高效涡轮式粉碎机粉碎且过3mm筛网的细碎品。
实施例1
本实施例提供一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：将干燥过的显齿蛇葡萄叶原料置于装有3mm筛网的高效涡轮式粉碎机中粉碎，得到显齿蛇葡萄叶细碎品。
(2)提取、离心：
将步骤(1)中得到的所述显齿蛇葡萄叶细碎品，按照料液比(单位为g/mL)为1︰30将所述显齿蛇葡萄叶细碎品与纯化水混合均匀，温度控制在80℃，热回流提取0.5h，离心，得一次离心液和一次离心渣；
所述一次离心渣与纯化水以料液比为1:30混合，采用80℃的温度加热回流提取0.5h，离心，得二次离心液和二次离心渣。
其中离心采用三足和高速离心机中趁热离心，转速为4000r/min，离心时长为3min。
(3)微滤：将步骤(2)获得的一次离心液和二次离心液合并(得到含有二氢杨梅素102.26％的离心液)，趁热进行陶瓷膜微滤(500nm)，控制流速1.3L/min，进料泵的压力为170kPa，循环泵的压力为360Kpa，监测微滤浓液温度15min/次，控制温度在70℃，得到微滤清液。
(4)真空浓缩：将步骤(4)中所得微滤清液进行真空浓缩，真空浓缩温度70℃，真空度为-0.07MPa，含固量控制在20％～60％之间，得到浓缩液。
(5)干燥：将步骤(4)所得浓缩液进行冷冻喷雾干燥(条件包括喷雾冷冻温度是-15℃，冷阱温度-70℃，冷风量5.5m3/min)，得到干燥物，二氢杨梅素含量＝95％。
二氢杨梅素的含量测定过程及含量计算公式如下：
(1)色谱条件的选择
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05％磷酸(55︰45)为流动相；流动相流速1mL/min；检测波长291nm；柱温25℃；
(2)对照品溶液的制备
精密称取二氢杨梅素对照品20mg，置25mL量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，制成0.8mg/mL贮备液，测定时从贮备液中吸取1.0mL至10mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，制得0.08mg/mL二氢杨梅素对照溶液，备用。
(3)供试品溶液的制备
样品取干燥显齿蛇葡萄叶待检样品(粉碎，过60目筛)粉末0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入甲醇20mL，超声(频率25KHz)30min，放置室温，用甲醇定容至25mL，摇匀，精密量取1.0mL，置100mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，备用。
(4)测定
分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定。
(5)结果计算
采用外标法计算供试品溶液中二氢杨梅素含量，样品中二氢杨梅素含量W计算公式为：
W＝A1·C·25mL·100mL·100/(AS·1000·m)＝A1·C·250/(AS·m)，..........式中：
A1——样品溶液中二氢杨梅素的峰面积；
AS——对照品溶液中二氢杨梅素的峰面积；
C——对照品溶液中的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；
m——试样的质量，单位为克(g)。
二氢杨梅素含量(％)＝干燥物中二氢杨梅素含量/W×100％。
实施例2
本实施例提供一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：将干燥过的显齿蛇葡萄叶原料置于装有3mm筛网的高效涡轮式粉碎机中粉碎，得到显齿蛇葡萄叶细碎品。
(2)提取、离心：
将步骤(1)中得到的所述显齿蛇葡萄叶细碎品，按照料液比(单位为g/mL)为1︰25将所述显齿蛇葡萄叶细碎品与纯化水混合均匀，温度控制在80℃，热回流提取0.4h，离心，得一次离心液和一次离心渣；
所述一次离心渣与纯化水以料液比为1:25混合，采用80℃的温度加热回流提取0.4h，离心，得二次离心液和二次离心渣。
其中离心采用三足和高速离心机中趁热离心，转速为3800r/min，离心时长为2.5min。
(3)微滤：将步骤(2)获得的一次离心液和二次离心液合并(得到含有二氢杨梅素100.3％的离心液)，趁热进行陶瓷膜微滤(400nm)，控制流速1.2L/min，进料泵的压力为145kPa，循环泵的压力为280kPa，监测微滤浓液温度15min/次，控制温度在60℃，得到微滤清液。
(4)真空浓缩：将(4)中所得微滤清液进行真空浓缩，真空浓缩温度55℃，真空度为-0.08MPa，含固量控制在20％～60％之间，得到浓缩液。
(5)干燥：将(4)所得浓缩液进行真空冷冻干燥(条件包括：第一时段：-25℃预冷，10h；第二时段：-80℃，30h)，得到干燥物，二氢杨梅素含量为92.5％。
实施例3
本实施例提供一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：将显齿蛇葡萄叶原料置于装有3mm筛网的高效涡轮式粉碎机中粉碎，得到显齿蛇葡萄叶细碎品。
(2)提取、离心：
将步骤(1)中得到的所述显齿蛇葡萄叶细碎品，按照料液比(单位为g/mL)为1︰35将所述显齿蛇葡萄叶细碎品与纯化水混合均匀，温度控制在98℃，热回流提取0.6h，离心，得一次离心液和一次离心渣；
所述一次离心渣与纯化水以料液比为1:35混合，采用98℃的温度加热回流提取0.6h，离心，得二次离心液和二次离心渣。
其中离心采用三足和高速离心机中趁热离心，转速为6500r/min，离心时长为3.5min，得到含有二氢杨梅素102.26％的离心液和离心渣。
(3)微滤：将步骤(2)获得的一次离心液和二次离心液合并(得到含有二氢杨梅素100.15％的离心液)，趁热进行陶瓷膜微滤(600nm)，控制流速1.5L/min，进料泵的压力为190kPa，循环泵的压力为420kPa，监测微滤浓液温度15min/次，控制温度在75℃，得到微滤清液。
(4)真空浓缩：将(4)中所得微滤清液进行真空浓缩，真空浓缩温度80℃，含固量控制在20％～60％之间，得到浓缩液。
(5)干燥：将(4)所得浓缩液进行冷冻喷雾干燥(条件包括：喷雾冷冻温度是-15℃，冷阱温度-70℃，冷风量5.5m3/min)，得到干燥物，二氢杨梅素含量为96.2％。
对比例1
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别为采用浸提的方式代替加热回流提取。具体地，本对比例提供的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：将显齿蛇葡萄叶原料置于装有3mm筛网的高效涡轮式粉碎机中粉碎，得到显齿蛇葡萄叶细碎品。
(2)提取、离心：
将步骤(1)中得到的所述显齿蛇葡萄叶细碎品，按照料液比(单位为g/mL)为1︰30将所述显齿蛇葡萄叶细碎品与纯化水混合均匀，温度控制在80℃，浸提1h，离心，得一次离心液和一次离心渣；
所述一次离心渣与纯化水以料液比为1:30混合，采用80℃的温度浸提1h，离心，得二次离心液和二次离心渣。
其中离心采用三足和高速离心机中趁热离心，转速为4000r/min，离心时长为3min。
(3)微滤：将步骤(2)获得的一次离心液和二次离心液合并(得到含有二氢杨梅素75.5％的离心液)，趁热进行陶瓷膜微滤(500nm)，控制流速1.3L/min，进料泵的压力为170kPa，循环泵的压力为360Kpa，监测微滤浓液温度15min/次，控制温度在70℃，得到微滤清液。
(4)真空浓缩：将步骤(4)中所得微滤清液进行真空浓缩，真空浓缩温度70℃，真空度为-0.07MPa，含固量控制在20％～60％之间，得到浓缩液。
(5)干燥：将步骤(4)所得浓缩液进行冷冻喷雾干燥(条件包括：喷雾冷冻温度是-15℃，冷阱温度-70℃，冷风量5.5m3/min)，得到干燥物，二氢杨梅素含量为65％。
对比例2
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别为料液比不同。具体地，本对比例提供的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：将显齿蛇葡萄叶原料置于装有3mm筛网的高效涡轮式粉碎机中粉碎，得到显齿蛇葡萄叶细碎品。
(2)提取、离心：
将步骤(1)中得到的所述显齿蛇葡萄叶细碎品，按照料液比(单位为g/mL)为1︰50将所述显齿蛇葡萄叶细碎品与纯化水混合均匀，温度控制在90℃，热回流提取0.5h，离心，得一次离心液和一次离心渣；
所述一次离心渣与纯化水以料液比为1︰50混合，采用90℃的温度加热回流提取0.5h，离心，得二次离心液和二次离心渣。
其中离心采用三足和高速离心机中趁热离心，转速为4000r/min，离心时长为3min。
(3)微滤：将步骤(2)获得的一次离心液和二次离心液合并(得到含有二氢杨梅素79.5％的离心液)，趁热进行陶瓷膜微滤(500nm)，控制流速1.3L/min，进料泵的压力为170kPa，循环泵的压力为360Kpa，监测微滤浓液温度15min/次，控制温度在70℃，得到微滤清液。
(4)真空浓缩：将步骤(4)中所得微滤清液进行真空浓缩，真空浓缩温度70℃，真空度为-0.07MPa，含固量控制在20％～60％之间，得到浓缩液。
(5)干燥：将步骤(4)所得浓缩液进行冷冻喷雾干燥(条件包括：喷雾冷冻温度是-15℃，冷阱温度-70℃，冷风量5.5m3/min)，得到干燥物，二氢杨梅素含量为70％。
对比例3
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别为提取温度和时长。具体地，本对比例提供的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
(1)粉碎：将显齿蛇葡萄叶原料置于装有3mm筛网的高效涡轮式粉碎机中粉碎，得到显齿蛇葡萄叶细碎品。
(2)提取、离心：
将步骤(1)中得到的所述显齿蛇葡萄叶细碎品，按照料液比(单位为g/mL_)为1︰30将所述显齿蛇葡萄叶细碎品与纯化水混合均匀，温度控制在75℃，热回流提取0.7h，离心，得一次离心液和一次离心渣；
所述一次离心渣与纯化水以料液比为1:30混合，采用75℃的温度加热回流提取0.7h，离心，得二次离心液和二次离心渣。
其中离心采用三足和高速离心机中趁热离心，转速为4000r/min，离心时长为3min。
(3)微滤：将步骤(2)获得的一次离心液和二次离心液合并(得到含有二氢杨梅素60％的离心液)，趁热进行陶瓷膜微滤(500nm)，控制流速1.3L/min，进料泵的压力为170kPa，循环泵的压力为360Kpa，监测微滤浓液温度15min/次，控制温度在70℃，得到微滤清液。
(4)真空浓缩：将步骤(4)中所得微滤清液进行真空浓缩，真空浓缩温度70℃，真空度为-0.07MPa，含固量控制在20％～60％之间，得到浓缩液。
(5)干燥：将步骤(4)所得浓缩液进行冷冻喷雾干燥(条件包括：喷雾冷冻温度是-15℃，冷阱温度-70℃，冷风量5.5m3/min)，得到干燥物，二氢杨梅素得率为54％。
多批次稳定性和重复性试验：按照实施例1得技术条件，重复提取10批，每批次投料量100kg，测定干燥物中二氢杨梅素含量均值为94.8％，RSD＝3.5％。表明工艺条件稳定，且重复性良好。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
取显齿蛇葡萄叶和水，以料液比为1：(25～35)混合；
采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液。
2.根据权利要求1所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，所述方法还包括对所述提取液进行浓缩的步骤，浓缩的步骤包括对所述提取液进行微滤，并对微滤所得清液进行真空浓缩。
3.根据权利要求2所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，微滤所采用的滤膜的孔径为400nm～600nm，或/和微滤所采用的滤膜为陶瓷膜。
4.根据权利要求2所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，微滤所采用的流速为1.2L/min～1.5L/min，微滤的过程中控制所述提取液的温度为60℃～75℃。
5.根据权利要求2至4任一项所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，真空浓缩所采用的条件包括：温度为40℃～80℃，真空度为-0.07～-0.08MPa。
6.根据权利要求2至4任一项所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，真空浓缩所得产物的含固量为20wt％～60wt％。
7.根据权利要求2至4任一项所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，所述方法还包括对真空浓缩所得产物进行干燥的步骤。
8.根据权利要求7所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，干燥的方式为喷雾干燥或/和真空冷冻干燥。
9.根据权利要求1至4以及8任一项所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，加热回流提取的次数不低于2次；或/和收集提取液所采用的方式为离心；或/和所述显齿蛇葡萄叶为新鲜或者经过干燥处理的显齿蛇葡萄叶。
10.根据权利要求9所述的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，其特征在于，离心的转速为3500r/min～6500r/min。
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|---|---|---|---|---|
| CN114099523A (zh) * | 2021-12-13 | 2022-03-01 | 怀化学院 | 一种降血糖药物及其制备方法与应用 |
Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
| CN106518829A (zh) * | 2016-11-10 | 2017-03-22 | 张清峰 | 一种从显齿蛇葡萄叶中分离纯化二氢杨梅素的方法 |
| CN109305954A (zh) * | 2018-11-21 | 2019-02-05 | 中南民族大学 | 一种从藤茶中分离纯化二氢杨梅素的方法 |
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| CN106518829A (zh) * | 2016-11-10 | 2017-03-22 | 张清峰 | 一种从显齿蛇葡萄叶中分离纯化二氢杨梅素的方法 |
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| CN114099523A (zh) * | 2021-12-13 | 2022-03-01 | 怀化学院 | 一种降血糖药物及其制备方法与应用 |
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