CN113116956A - 一种中药预混剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及兽药的技术领域，具体公开了一种中药预混剂及其制备方法和应用。中药预混剂的制备方法包括以下步骤：准备中药原料和辅料，分别自所述中药原料中提取得到中药提取物，将所述中药提取物和辅料混合得到所述中药预混剂；所述中药原料包括以下重量份的组分：山银花50‑60份、黄芩20‑30份、党参10‑20份、炙甘草10‑20份；所述中药提取物包括山银花提取物、黄芩提取物、党参提取物、炙甘草提取物。本申请的中药预混剂可用于防治家禽坏死性肠炎，其具有安全、高效治疗家禽坏死性肠炎的优势。

Description

一种中药预混剂及其制备方法和应用
技术领域
本申请涉及兽药的技术领域，更具体地说，它涉及一种中药预混剂及其制备方法和应用。
背景技术
禽坏死性肠炎又称肠毒血症或糜烂性肠炎，其主要由产气荚膜梭菌引起，也被称为“烂肠病”，是集约化养鸡生产中最主要的肠道健康问题。近年来，其发病率和流行率在全球范围内均呈升高趋势，其主要的原因之一是饲料中抗菌药物的禁用或添加限制，使得肉鸡的肠胃疾病无法得到有效控制，由此导致坏死性肠炎。在肉鸡养殖行业中，由坏死性肠炎导致的死亡率高达2～10％，在极端情况下可能高达50％；而在蛋鸡养殖行业，由坏死性肠炎导致的死亡率也可以在6.5％以上。据统计，全世界每年因坏死性肠炎给养鸡业带来的经济损失至少为20亿美元。
产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌，在环境中广泛分布，也是鸡肠道内的一种“常驻菌”，而只有在某些因素的影响下，当产气荚膜梭菌的菌数急速增殖达到104～108cfu/g肠内容物以上时才导致疾病的发生。这些因素主要包括饲料、应激、球虫感染等因素，而球虫感染几乎是鸡坏死性肠炎发生所不可缺少的因素，因而在临床上，球虫感染总是与坏死性肠炎相伴而生。除具有典型症状和病理剖检特点的临床型坏死性肠炎外，生产实际中更为多见的是亚临床型坏死性肠炎，其临床症状不明显，除粪便异常(饲料粪、溏便、水性腹泻等)外，主要呈一过性的增重缓慢或下降、饲料转化率降低、死淘率增加等非特异性表现。亚临床型坏死性肠炎对肉鸡生产性能的影响可能要大于临床型坏死性肠炎。
目前针对坏死性肠炎主要采用特异的抗菌剂进行治疗，常用的抗产气荚膜梭菌药物有杆菌肽锌、林肯霉素、弗吉尼亚霉素等。利用抗生素来防治禽坏死性肠炎虽具有见效快的优点，但是也易造成药物残留，出现食品安全相关问题。同时因其有广谱抑菌和杀菌作用，除对肠道致病菌产生作用外，也会对有益菌产生影响，造成胃肠道微生态紊乱，干扰家禽正常的消化吸收功能。此外，抗生素的使用往往会导致耐药性菌株的出现，这是使用抗生素防治禽坏死性肠炎的最大潜在危害。同时，近年来大量抗生素的禁用，也使我国养殖业面临困境。因此寻找安全、高效、无残留的天然植物提取物来防治禽坏死性肠炎是防治该疾病的未来发展趋向。
发明内容
本申请提供一种中药预混剂及其制备方法和应用，本申请的中药预混剂具有安全、高效治疗家禽坏死性肠炎的优势。
中草药在防治相关疾病的过程中不仅能够产生相当于西药的抗病毒与抗细菌作用，还对机体的免疫功能及整体状况进行调节，而又不易产生耐药性。在临床应用当中，清热解毒、燥湿止泻类、补气健脾、健胃消食类中药单方及复方应用较多。其作用机理可能为：中药单方及复方能够直接抑制或杀灭导致禽坏死性肠炎的病原微生物；能够提高消化酶活性、促进胃肠道对营养物质的消化吸收；能够提高机体的免疫力；能够促进消化道内微生物群落的平衡。
第一方面，本申请提供一种中药预混剂，采用如下的技术方案：
一种中药预混剂，自多种中药原料中提取得到中药提取物后，将所述中药提取物和辅料混合后得到中药预混剂；所述中药原料包括以下重量份的组分：山银花50-60份、黄芩20-30份、党参10-20份、炙甘草10-20份；得到的中药提取物包括山银花提取物、黄芩提取物、党参提取物和炙甘草提取物。
山银花是忍冬科植物灰毡毛忍冬、红腺忍冬、华南忍冬或黄褐毛忍冬的干燥花蕾或带初开的花。生于溪边、旷野疏林下或灌木丛中。产于我国南方各地。山银花提取物中含有多种山银花多糖、绿原酸、总皂苷等。中医认为金银花性寒，味甘，略有酸味，其具有清热解毒、凉血、通经活络的作用，可用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热。
黄芩，中药名。其以根入药，味苦、性寒，有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩的临床抗菌性比黄连好，而且不产生抗药性。黄芩中主要含有黄酮类(黄芩苷等)成分,此外还含有挥发油、苯乙醇昔类、甾醇、氨基酸、生物碱和微量元素等,但种类最多、生物活性最显著的是黄酮类化合物。
党参味甘，性平。有补中益气、止渴、健脾益肺，养血生津。用于脾肺气虚，食少倦怠，咳嗽虚喘，气血不足，面色萎黄，心悸气短，津伤口渴，内热消渴；懒言短气、四肢无力、食欲不佳、气虚、气津两虚、气血双亏以及血虚萎黄等症。党参内含有丰富的甾醇、党参多糖、生物碱、挥发性油、萜类以及多种微量元素和氨基酸，具有优异的生物功效。
炙甘草可和中、缓急、润肺、解毒、调和诸药。炙甘草，味甘，性平，主要入肺经，心经，脾经，胃经。其具有补脾益气，止咳祛痰，缓急止痛，清热解毒的功效。
通过采用上述技术方案，其中山银花提取物和黄芩提取物为主要发挥防治坏死性肠炎效果的物质，而党参提取物和炙甘草提取物这两种物质辅助山银花提取物和黄芩提取物发挥更好的防治坏死性肠炎效果。在本申请中，仅仅将上述的四种中药提取物混合后即能够获得优异的防治家禽坏死性肠炎的效果；同时本申请的中药预混剂还能显著提高动物生长性能，并且能够提高饲料转化率，从而提高经济效益。
以添加有本申请的中药预混剂的动物饲料饲养家禽后，家禽的平均重量在(814.26±33.52)～(843.86±3.48)g的范围内，远高于阴性对照组(饲喂不添加本申请中药预混剂的饲料)762.35±35.35g的重量水平，说明本申请的中药预混剂能够显著促进家禽生长。在家禽患有坏死性肠炎后，以添加有本申请中药预混剂的动物饲料饲养家禽，家禽的平均重量在(2442.28±142.25)～(2614.71±0.5)g的范围内，远高于阴性对照组(饲喂不添加本申请中药预混剂的饲料)2443.25±132.25g的重量水平，说明本申请的中药预混剂能够显著防治家禽的坏死性肠炎。
优选的，所述中药原料包括以下重量份的组分：山银花50-55份、黄芩25-28份、党参10-15份、炙甘草10-15份。
优选的，自所述中药原料中以包括以下步骤的方法提取得到所述中药提取物：
Ⅰ、取中药原料，去杂，加入8-12倍体积的50％-80％乙醇溶液浸泡，随后在70-100℃的温度下提取，得到中药提取液；
Ⅱ、将所述中药提取液进行离心、微滤、减压浓缩、干燥后即得中药提取物。
优选的，所述山银花提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S11、取山银花药材，去杂，加入8-10倍体积的50％-80％乙醇溶液，浸泡2-3h，在70-100℃的温度下提取，得到山银花提取液；
S12、将所述山银花提取液以8000-12000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得山银花提取物。
通过采用上述技术方案提取山银花中的主要成分，其获得的山银花提取物中含有的有效物质的种类更加全面，而不是主要获取其中的某一成分。在获得的山银花提取物中，其中，含有葡萄糖、果糖、绿原酸、咖啡酸、赖氨酸、精氨酸等。此外，提取温度应控制在70-100℃的温度范围内，且在对提取出的山银花提取物进行分离提纯的过程中，浓缩时采用减压浓缩时，能够有效提高浓缩效率，同时降低浓缩温度，避免高温下使得山银花提取物中的有效成分如绿原酸等被分解。
优选的，所述黄芩提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S21、取黄芩药材，去杂、粉碎后，加入9-12倍体积的50％-80％乙醇溶液浸泡3-5h，在70-100℃的温度下提取，得到黄芩提取液；
S22、将所述黄芩提取液以7000-10000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得黄芩提取物。
通过采用上述技术方案提取黄芩中的主要成分，其获得的黄芩提取物中含有的有效物质的种类更加全面，而不是主要获取其中的某一成分。在获得的黄芩提取物中，其中，含有黄芩苷、黄芩素、白杨素、苯二酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸等。此外，提取温度应控制在70-100℃的温度范围内，且在对提取出的黄芩提取物进行分离提纯的过程中，浓缩时采用减压浓缩时，能够有效提高浓缩效率，同时降低浓缩温度，避免高温添加下使得黄芩提取物中的有效成分被分解。
优选的，所述党参提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S31、取党参药材，去杂、粉碎后，加入7-10倍体积的50％-80％乙醇溶液浸泡4-6h，在70-100℃的温度下提取，得到党参提取液；
S32、将所述党参提取液以9000-12000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得党参提取物。
通过采用上述技术方案提取党参中的主要成分，其获得的党参提取物中含有的有效物质的种类更加全面，而不是主要获取其中的某一成分。在获得的党参提取物中，其中，含有党参碱、党参苷、葡萄糖、鼠李糖、果糖等。此外，提取温度应控制在70-100℃的温度范围内，且在对提取出的党参提取物进行分离提纯的过程中，浓缩时采用减压浓缩时，能够有效提高浓缩效率，同时降低浓缩温度，避免高温添加下使得党参提取物中的有效成分被分解。
优选的，所述炙甘草提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S41、取炙甘草药材，去杂、粉碎后，加入8-12倍体积的50％-80％乙醇溶液浸泡2-4h，在70-100℃的温度下提取，得到炙甘草提取液；
S42、将所述炙甘草提取液以8000-10000rpm的转速离心，微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得炙甘草提取物。
通过采用上述技术方案来提取炙甘草中的主要成分，其获得的炙甘草提取物中含有的有效物质的种类更加全面，而不是主要获取其中的某一成分。在获得的炙甘草提取物中，其中，含有甘草黄酮、甘草酸、香豆素、甘草苷、铁、谷氨酸、苏氨酸、蛋氨酸等。此外，提取温度应控制在70-100℃的温度范围内，且在对提取出的炙甘草提取物进行分离提纯的过程中，浓缩时采用减压浓缩时，能够有效提高浓缩效率，同时降低浓缩温度，避免高温添加下使得炙甘草提取物中的有效成分被分解。
优选的，所述辅料为麦饭石、蒙脱石、碳酸钙中的一种或多种。
第二方面，本申请提供一种中药预混剂的制备方法，采用如下的技术方案：
—种中药预混剂的制备方法，将所述中药提取物和辅料混合后得到中药预混剂。
通过采用上述技术方案所得的中药预混剂，不仅可以直接防治家禽坏死性肠炎，同时也可补充动物身体所需的营养物质，提高免疫力，间接抵抗疾病。
第三方面，本申请提供一种上述中药预混剂的应用，采用如下的技术方案：
—种上述的中药预混剂的应用，所述中药预混剂用于防治家禽坏死性肠炎；将所述中药预混剂添加至家禽饲料中，添加量为饲料重量的0.01-0.1％。
通过采用上述技术方案，可使中药预混剂循序渐进的作用于动物机体，既可防病，也可治病，且对动物机体无毒副作用。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、本申请制备得到的中药预混剂，是以山银花提取物、党参提取物、黄芩提取物以及炙甘草提取物为原料制备得到；本申请的中药预混剂具有优异的促进家禽生长、防治家禽坏死性肠炎以及降低料肉比的效果；
2、由于本申请采用不同中药不同的提取工艺参数，从而提高了有效成分的提取率，使得分别自山银花、黄芩、党参和炙甘草中提取得到的物质为混合物，各提取物中的组分种类繁多，从而有效提高了中药预混剂的促进家禽生长、防治家禽坏死性肠炎以及降低料肉比的效果；
3、本申请中优选采用适宜的提取、浓缩温度，从而降低了有效成分的降解率，间接提高了有效成分的含量；
4、本申请的方法，通过优化制备中药预混剂的的中药原料配比来制备中药预混剂，以此配比来制备获得有效防治家禽坏死性肠炎、同时还具有促进动物生长效果的中药预混剂。
具体实施方式
以下结合不同实施例对本申请作进一步详细说明。
本申请中所用到的原料均为普通市售，其中，山银花、黄芩、炙甘草和党参均购自北京同仁堂。
山银花提取物制备例
山银花提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取山银花药材，去杂，加入8-10倍体积的50％-80％(v/v)乙醇溶液，浸泡2-3h，在70-100℃的温度下提取，得到山银花提取液；
其中，山银花提取物的提取可以是多次提取，如提取2-3次，每次的提取时间可以是1-2h，最后将所有的提取液合并后即为山银花提取液。
S12、将所述山银花提取液以8000-12000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得山银花提取物。
其中，微滤时可以用0.22～0.45μm的微孔滤膜进行滤过；干燥时可以采用喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥或微波干燥。当选择的是喷雾干燥的干燥方式时，减压浓缩时可以将溶液浓缩至相对密度为1.15-1.20，以便后期的喷雾干燥过程。
山银花提取物制备例1
山银花提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取山银花药材，去杂，加入9倍体积的60％乙醇溶液，浸泡2.5h，在85℃的温度下提取：提取过程分3次，每次提取1h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的60％乙醇溶液，最后将3次的提取液合并后，得到山银花提取液；
S12、将上述的山银花提取液以10000rpm的转速高速离心，随后过0.22μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在75℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得山银花提取物。
山银花提取物制备例2
山银花提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取山银花药材，去杂，加入8倍体积的50％乙醇溶液，浸泡3h，在100℃的温度下提取：提取过程分2次，每次提取2h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的50％乙醇溶液，最后将2次的提取液合并后，得到山银花提取液；
S12、将上述的山银花提取液以8000rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在80℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.15，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得山银花提取物。
山银花提取物制备例3
山银花提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取山银花药材，去杂，加入10倍体积的80％乙醇溶液，浸泡2h，在70℃的温度下提取：提取过程分2次，每次提取1.5h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的80％乙醇溶液，最后将2次的提取液合并后，得到山银花提取液；
S12、将上述的山银花提取液以12000rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在50℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得山银花提取物。
黄芩提取物制备例
黄芩提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取黄芩药材，去杂，加入9-12倍体积的50％-80％(v/v)乙醇溶液，浸泡3-5h，在70-100℃的温度下提取，得到黄芩提取液；
其中，黄芩提取物的提取可以是多次提取，如提取2-3次，每次的提取时间可以是2-3h，最后将所有的提取液合并后即为黄芩提取液。
S12、将所述黄芩提取液以7000-10000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得黄芩提取物。
其中，微滤时可以用0.22～0.45μm的微孔滤膜进行滤过；干燥时可以采用喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥或微波干燥。当选择的是喷雾干燥的干燥方式时，减压浓缩时可以将溶液浓缩至相对密度为1.15-1.20，以便后期的喷雾干燥过程。
黄芩提取物制备例1
黄芩提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取黄芩药材，去杂，加入10倍体积的70％乙醇溶液，浸泡4h，在90℃的温度下提取：提取过程分2次，每次提取2.5h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的60％乙醇溶液，最后将3次的提取液合并后，得到黄芩提取液；
S12、将上述的黄芩提取液以10000rpm的转速高速离心，随后过0.22μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在75℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得黄芩提取物。
黄芩提取物制备例2
黄芩提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取黄芩药材，去杂，加入9倍体积的80％乙醇溶液，浸泡3h，在100℃的温度下提取：提取过程分2次，每次提取3h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的80％乙醇溶液，最后将2次的提取液合并后，得到黄芩提取液；
S12、将上述的黄芩提取液以8500rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在50℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.15，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得黄芩提取物。
黄芩提取物制备例3
黄芩提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取黄芩药材，去杂，加入12倍体积的50％乙醇溶液，浸泡5h，在70℃的温度下提取：提取过程分3次，每次提取2h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的50％乙醇溶液，最后将3次的提取液合并后，得到黄芩提取液；
S12、将上述的黄芩提取液以7000rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在80℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.15，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得黄芩提取物。
党参提取物制备例
党参提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取党参药材，去杂，加入7-10倍体积的50％-80％乙醇溶液，浸泡4-6h，在70-100℃的温度下提取，得到党参提取液；
其中，党参提取物的提取可以是多次提取，如提取2-3次，每次的提取时间可以是2-4h，最后将所有的提取液合并后即为党参提取液。
S12、将所述党参提取液以9000-12000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得党参提取物。
其中，微滤时可以用0.22～0.45μm的微孔滤膜进行滤过；干燥时可以采用喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥或微波干燥。当选择的是喷雾干燥的干燥方式时，减压浓缩时可以将溶液浓缩至相对密度为1.15-1.20，以便后期的喷雾干燥过程。
党参提取物制备例1
党参提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取党参药材，去杂，加入9倍体积的75％乙醇溶液，浸泡5.5h，在95℃的温度下提取：提取过程分2次，每次提取3.5h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的75％乙醇溶液，最后将3次的提取液合并后，得到党参提取液；
S12、将上述的党参提取液以11000rpm的转速高速离心，随后过0.22μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在80℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得党参提取物。
党参提取物制备例2
党参提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取党参药材，去杂，加入10倍体积的80％乙醇溶液，浸泡4h，在100℃的温度下提取：提取过程分2次，每次提取4h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的80％乙醇溶液，最后将2次的提取液合并后，得到党参提取液；
S12、将上述的党参提取液以12000rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在50℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得党参提取物。
党参提取物制备例3
党参提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取党参药材，去杂，加入7倍体积的50％乙醇溶液，浸泡6h，在70℃的温度下提取：提取过程分3次，每次提取2h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的50％乙醇溶液，最后将3次的提取液合并后，得到党参提取液；
S12、将上述的党参提取液以9000rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在80℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.15，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得党参提取物。
炙甘草提取物制备例
炙甘草提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取炙甘草药材，去杂，加入8-12倍体积的50％-80％乙醇溶液，浸泡2-4h，在70-100℃的温度下提取，得到炙甘草提取液；
其中，炙甘草提取物的提取可以是多次提取，如提取2-3次，每次的提取时间可以是1-3h，最后将所有的提取液合并后即为炙甘草提取液。
S12、将所述炙甘草提取液以8000-10000rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得炙甘草提取物。
其中，微滤时可以用0.22～0.45μm的微孔滤膜进行滤过；干燥时可以采用喷雾干燥、冷冻干燥、真空干燥或微波干燥。当选择的是喷雾干燥的干燥方式时，减压浓缩时可以将溶液浓缩至相对密度为1.15-1.20，以便后期的喷雾干燥过程。
炙甘草提取物制备例1
炙甘草提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取炙甘草药材，去杂，加入10倍体积的60％乙醇溶液，浸泡3.5h，在75℃的温度下提取：提取过程分3次，每次提取1.5h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的60％乙醇溶液，最后将3次的提取液合并后，得到炙甘草提取液；
S12、将上述的炙甘草提取液以9000rpm的转速高速离心，随后过0.45μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在55℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得炙甘草提取物。
炙甘草提取物制备例2
炙甘草提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取炙甘草药材，去杂，加入8倍体积的80％乙醇溶液，浸泡2h，在70℃的温度下提取：提取过程分3次，每次提取1h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的80％乙醇溶液，最后将2次的提取液合并后，得到炙甘草提取液；
S12、将上述的炙甘草提取液以8000rpm的转速高速离心，随后过0.22μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在50℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.15，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得炙甘草提取物。
炙甘草提取物制备例3
炙甘草提取物的提取方法包括以下步骤：
S11、取炙甘草药材，去杂，加入12倍体积的50％乙醇溶液，浸泡4h，在100℃的温度下提取：提取过程分1次，每次提取3h，每提取一次便将当次的提取液转移，随后加入新的50％乙醇溶液，最后将2次的提取液合并后，得到炙甘草提取液；
S12、将上述的炙甘草提取液以10000rpm的转速高速离心，随后过0.22μm的微孔滤膜进行滤过操作，随后收集滤过液，将滤过液在80℃的温度下减压浓缩至溶液的相对密度为1.20，随后将浓缩液经喷雾干燥后即得炙甘草提取物。
实施例
实施例1
一种中药预混剂，其制备方法包括以下步骤：
准备中药原料和辅料，其中的中药原料及其用量为：山银花50kg、黄芩20kg、党参15kg、炙甘草10kg，分别自各中药原料中提取得到中药提取物，将得到的中药提取物和辅料混合后即得到中药预混剂。其中，辅料为麦饭石。
山银花提取物通过山银花提取物制备例1制备得到，黄芩提取物通过黄芩提取物制备例1制备得到，党参提取物通过党参提取物制备例1制备得到，炙甘草提取物通过炙甘草提取物制备例1制备得到。
实施例2
一种中药预混剂，其制备方法包括以下步骤：
准备中药原料和辅料，其中的中药原料及其用量为：山银花55kg、黄芩25kg、党参10kg、炙甘草10kg，分别自各中药原料中提取得到中药提取物，将得到的中药提取物和辅料混合后即得到中药预混剂。
其中，辅料的选择和添加量同实施例1，山银花提取物通过山银花提取物制备例2制备得到，黄芩提取物通过黄芩提取物制备例2制备得到，党参提取物通过党参提取物制备例2制备得到，炙甘草提取物通过炙甘草提取物制备例2制备得到。
实施例3
一种中药预混剂，其制备方法包括以下步骤：
准备中药原料和辅料，其中的中药原料及其用量为：山银花50kg、黄芩25kg、党参10kg、炙甘草20kg，分别自各中药原料中提取得到中药提取物，将得到的中药提取物和辅料混合后即得到中药预混剂。
其中，辅料的选择和添加量同实施例1，山银花提取物通过山银花提取物制备例3制备得到，黄芩提取物通过黄芩提取物制备例3制备得到，党参提取物通过党参提取物制备例3制备得到，炙甘草提取物通过炙甘草提取物制备例3制备得到。
实施例4-10
实施例4-10和实施例3的区别在于，制备中药预混剂的原料用量不同，具体见表1。
表1
Figure BDA0003020574350000121
Figure BDA0003020574350000131
对比例1-4
实施例1-4和实施例9的区别在于，制备中药预混剂的原料用量不同或制备中药预混剂的原料种类不同，具体见表2。
表2
实施方案 山银花/kg 黄芩/kg 党参/kg 炙甘草/kg
阴性对照组 - - - -
模型组 - - - -
对比例1 65 28 12 14
对比例2 53 35 12 14
对比例3 53 28 - 14
对比例4 53 28 12 -
(一)对中药提取物中所含成分的测定
1、检测方法
将得到的中药提取物进行紫外-可见光吸收光谱法(UV-VIS)，检测结果见表3-6。
表3
重量含量 山银花多糖％ 总皂苷％ 绿原酸类％ 总黄酮％
山银花提取物 9.52 13.34 6.71 13.22
在山银花提取物中，山银花多糖主要包括葡萄糖、果糖等；总黄酮主要包括槲皮素、木犀草素等；总皂苷主要包括齐墩果酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、忍冬苦苷A等；绿原酸类主要包括新绿原酸、隐绿原酸等。
表4
重量含量 黄芩多糖％ 总黄酮％
黄芩提取物 5.12 8.63
在黄芩提取物中，黄芩多糖主要包括葡萄糖、果糖等，黄芩总黄酮主要包括黄芩苷，黄芩苷元，汉黄芩素和汉黄芩苷等。
表5
Figure BDA0003020574350000132
Figure BDA0003020574350000141
在党参提取物中，党参多糖主要果糖、***糖、鼠李糖等，还主要包括等。
表6
重量含量 炙甘草多糖％ 炙甘草黄酮％ 赖氨酸％ 精氨酸％
炙甘草提取物 4.72 2.43 0.37 1.98
在炙甘草提取物中，炙甘草多糖主要包括葡萄糖、果糖、***糖等，炙甘草黄酮主要包括甘草素、异甘草素等。
总述：因为上述的提取物中含有黄酮类、皂苷类、多糖类物质，同时又含有一定量的促进动物生长的氨基酸如赖氨酸、精氨酸等，使得其具有优异的防治家禽坏死性肠炎的特性，同时也可促进动物健康生长。
(二)产品对鸡产气荚膜羧菌攻毒作用的临床试验
1、试验材料和方法
1.1、供试药品
实施例1-10和对比例1-4的中药预混剂，饲料中添加量0.05％。
1.2、试验动物
采用单因子随机区组设计，选取800只1日龄健康AA肉鸡(即艾拔益加肉鸡)，随机分为16个处理，每个处理5个重复，每个重复10只鸡。常规饲养管理，阴性对照组及模型组饲喂正常饲粮，不添加中药预混剂，试验组饲喂含实施例1-10、对比例1-4所示中药预混剂的饲粮。首先对试验组(实施例1-10、对比例1-4)、阴性对照组以及模型组的肉鸡均正常养殖21天，在第21天时，对其中的阴性对照组肉鸡不攻毒，模型组及试验组的肉鸡攻毒产气荚膜羧菌。
1.3、试验方法
除阴性对照组外，模型组及试验组每只肉鸡肌注约1ml产气荚膜梭菌菌液(1.2×109CFU/ml)；攻毒8h后，雏鸡开始出现精神不振、喜卧、食欲减弱，并出现下痢，病鸡剖检可见小肠肠道肿胀充血、肠内有泡沫状液体，肠黏膜有出血点等症状。
2、试验结果
表7
Figure BDA0003020574350000142
Figure BDA0003020574350000151
注意：在表7中，“平均日增重”、“平均日采食量”均记录的是在攻毒产气荚膜梭菌后的结果。
一、中药预混剂对AA肉鸡生长状况的影响
从表7的数据结果中看出，对AA肉鸡饲喂本申请的中药预混剂21天后，AA肉鸡在21天内的平均重量为(814.26±33.52)～(843.86±3.48)g的范围内，远高于对比例1-4的(751.94±2.10)～(772.25±33.51)g，也高于阴性对照组的(762.35±35.35g)和模型组的(761.52±42.52g)。这一结果充分说明了本申请的中药预混剂具有优异的促进AA肉鸡生长的效果，和对比例1-4相比，采用本申请的中药预混剂饲喂AA肉鸡，使得AA肉鸡的增重量提高了5.4％～12.2％。
其中，通过比较实施例3、实施例5-7的数据结果可以看出，山银花的用量对AA肉鸡在21天内的平均重量有影响：在制备中药预混剂时，山银花的用量在50-60Kg(即50-60重量份)的范围内时，AA肉鸡在21天内的平均重量维持在较高的水平(818.44±1.79～839.27±1.80g)；山银花的用量在50-55Kg(即50-55重量份)的范围内时，AA肉鸡的21天内的平均重量更高(822.82±1.54～839.27±1.80g)；且当山银花的用量为53Kg(即53重量份)时，AA肉鸡的21天内的平均重量最高(839.27±1.80g)。
通过比较实施例5、8-10的数据结果可以看出，黄芩的用量对AA肉鸡在21天内的平均重量有影响：在制备中药预混剂时，黄芩的用量在20-30Kg(即20-30重量份)的范围内时，AA肉鸡的21天内的平均重量维持在较高的水平(839.00±1.37～843.86±3.48g)；且当黄芩的用量为28Kg(即28重量份)时，AA肉鸡的21天内的平均重量最高(843.86±3.48g)。
此外，通过对比例1-2的数据结果看出，其中的山银花用量不建议超出50-60Kg(即50-60重量份)的范围，否则将导致AA肉鸡在21天内的平均重量降低至772.25±33.51g的水平(对比例1)；而和黄芩的用量不应超出20-30Kg(即20-30重量份)的范围内，否则也会显著降低AA肉鸡在21天内的平均重量(仅为769.85±37.25g)。本申请的中药预混剂中的山银花和黄芩通过适当添加比例能够较好地相互协配，共同发挥出中药预混剂的促进AA肉鸡生长的效果。
另外，对比例3-4的数据结果表明，对于AA肉鸡的生长来说：在制备中药预混剂时，其中的党参提取物和炙甘草提取物的添加(即制备原料中含有党参或者炙甘草)也是十分必要的，二者是缺一不可的，否则将导致AA肉鸡在21天内的平均重量降低至(751.94±2.10～764.51±3.06g)，远低于实施例的AA肉鸡的平均重量的水平。而且，将对比例3-4和模型组、阴性对照组中的AA肉鸡21天的平均重量相比，饲喂含有对比例3的中药预混剂的饲料、或饲喂含有对比例4中药预混剂的饲料、或饲喂不添加中药预混剂的饲料，AA肉鸡21天的平均重量基本在同一水平；这充分说明制备原料中没有党参或者炙甘草，其中药预混剂基本无法发挥其特有的促进家禽生长的效果。
由此可知，在制备中药预混剂的原料中，山银花提取物、黄芩提取物、党参提取物以及炙甘草提取物这四种原料之间以一定的添加比例混合后，四者相互协配后可发挥其优异的促进家禽生长的效果。
二、中药预混剂对AA肉鸡坏死性肠炎的防治效果
对AA肉鸡饲喂本申请的中药预混剂21天后，进行产气荚膜梭菌攻毒，随后AA肉鸡患有坏死性肠炎，随后测定AA肉鸡在42天时的平均重量。
从表7的数据结果中看出，当对AA肉鸡进行产气荚膜梭菌攻毒后，对攻毒的AA肉鸡饲喂常规饲料(即不添加中药预混剂，模型组)，AA肉鸡在42天的平均重量应该维持在2248.25±99.58g的水平，和阴性对照组的2443.25±132.25g的平均重量的水平相比，显著降低。该结果是由于对AA肉鸡进行了产气荚膜梭菌攻毒，使得原本正常的AA肉鸡患有坏死性肠炎，从而直接影响AA肉鸡的生长状况。
但是，对同样攻毒有产气荚膜梭菌的AA肉鸡，同时分别饲喂含有本申请实施例1-10的中药预混剂的饲料后，AA肉鸡在42天内的平均重量为(2442.28±142.25)～(2614.71±0.5)g的范围内。即，饲喂含有本申请中药预混剂的饲料后，AA肉鸡的42天的平均体重至少保持和阴性对照组相当的水平。这一数据结果充分说明，本申请的中药预混剂能够防治家禽坏死性肠炎，进而使得AA肉鸡在42天内的平均重量有增长，且本申请的中药预混剂能够促进家禽生长。
其中，通过比较实施例3、实施例5-7的数据结果可以看出，山银花的用量对中药预混剂防治坏死性肠炎的效果有影响：在制备中药预混剂时，山银花的用量在50-60Kg(即50-60重量份)的范围内时，AA肉鸡在42天内的平均重量维持在较高的水平(2472.87±122.10～2566.21±1.03g)；山银花的用量在53-60Kg(即53-60重量份)的范围内时，AA肉鸡在42天内的平均重量维持在更高的水平(2531.23±1.99～2566.21±1.03g)；且当山银花的用量为53Kg(即53重量份)时，AA肉鸡的42天内的平均重量最高(2566.21±1.03g)。这一数据结果表明，且当山银花的用量为53Kg(即53重量份)时，中药预混剂对AA肉鸡的坏死性肠炎的治疗效果优异。
通过比较实施例5、8-10的数据结果可以看出，黄芩的用量对AA肉鸡在42天内的平均重量有影响：在制备中药预混剂时，黄芩的用量在20-30Kg(即20-30重量份)的范围内时，AA肉鸡的42天内的平均重量维持在较高的水平(2537.89±3.15～2614.71±0.5g)；且当黄芩的用量为28Kg(即28重量份)时，AA肉鸡的42天内的平均重量最高(2614.71±0.5g)。
此外，通过对比例1-2的数据结果看出，其中的山银花用量不应超出50-60Kg(即50-60重量份)的范围，否则将导致AA肉鸡在42天内的平均重量显著降低至2179.38±125.27g的水平(对比例1)，甚至远低于模型组AA肉鸡在42天内的平均重量(2248.25±99.58g)。而和黄芩的用量不应超出20-30Kg(即20-30重量份)的范围内，否则也会显著降低AA肉鸡在42天内的平均重量(仅为2118.25±89.80g)。这一数据结果充分表明：当山银花或者黄芩的用量过多时，山银花、黄芩、党参和炙甘草之间的相互协配的作用结果将使得中药预混剂不具有防治AA肉鸡坏死性肠炎的效果，中药预混剂将对AA肉鸡的坏死性肠炎带来负面调控，加重病情。
另外，对比例3-4的数据结果表明，在制备中药预混剂时，其中的党参提取物和炙甘草提取物的添加(即制备原料中含有党参或者炙甘草)也是十分必要的，二者是缺一不可的，否则将导致AA肉鸡在42天内的平均重量降低至(2112.46±2.83～2122.35±4.25g)，远低于阴性对照组中的AA肉鸡的平均重量的水平。这充分说明制备原料中没有党参或者炙甘草，其中药预混剂中的其他三种成分也无法发挥其特有的治疗家禽坏死性肠炎的效果。
由此可知，在制备中药预混剂的原料中，山银花提取物、黄芩提取物、党参提取物以及炙甘草提取物这四种原料之间相互协配后可发挥其优异的防治家禽坏死性肠炎的效果。
三、中药预混剂对AA肉鸡在饲养过程中料肉比的效果
对AA肉鸡饲喂本申请的中药预混剂21天后，进行产气荚膜梭菌攻毒，随后AA肉鸡患有坏死性肠炎，然后测定AA肉鸡在42天时的平均日增重和平均日采食量，并计算料肉比。
从表7的数据结果中看出，模型组中，当对AA肉鸡进行产气荚膜梭菌攻毒后，对攻毒的AA肉鸡饲喂常规饲料(即不添加中药预混剂)时，AA肉鸡在42天的料肉比为1.71±0.22的水平，远高于阴性对照组1.68±0.12的料肉比。该结果是由于对AA肉鸡进行了产气荚膜梭菌攻毒，使得原本正常的AA肉鸡患有坏死性肠炎，从而直接影响后期AA肉鸡的生长状况，进而影响料肉比。
但是，对同样攻毒有产气荚膜梭菌的AA肉鸡，同时分别饲喂含有本申请实施例1-10的中药预混剂的饲料后，AA肉鸡在42天内的料肉比在(1.50±0.02)～(1.64±0.13)的范围内。即，饲喂含有本申请中药预混剂的饲料后，AA肉鸡的42天的料肉比优于阴性对照组；当对AA肉鸡饲喂同样重量的饲料时，实施例1-10的AA肉鸡在同样的时间内的增重更多。这一数据结果充分说明，本申请的中药预混剂能够使得AA肉鸡在42天内的平均重量有增长，并促使获得更低的料肉比，进而使得饲养家禽的饲料成本更低。
其中，通过比较实施例3、实施例5-7的数据结果可以看出，山银花的用量对中药预混剂的防治坏死性肠炎的效果有影响：在制备中药预混剂时，山银花的用量在50-60Kg(即50-60重量份)的范围内时，AA肉鸡在42天内的料肉比较低(1.52±0.02～1.55±0.01)；且当山银花的用量为53Kg(即53重量份)时，AA肉鸡的料肉比最低。
通过比较实施例5、8-10的数据结果可以看出，黄芩的用量对AA肉鸡在42天内的料肉比有影响：在制备中药预混剂时，黄芩的用量在20-30Kg(即20-30重量份)的范围内时，AA肉鸡的42天内的料肉比维持在较低的水平(1.50±0.02～1.60±0.01)；黄芩的用量在25-28Kg(即25-28重量份)的范围内时，AA肉鸡的42天内的料肉比更低(1.50±0.02～1.52±0.02)；且当黄芩的用量为28Kg(即28重量份)时，AA肉鸡的42天内的料肉比最低(1.50±0.02)。
此外，通过对比例1-2的数据结果看出，其中的山银花用量不应超出50-60Kg(即50-60重量份)的范围，否则将导致AA肉鸡在42天内的料肉比升高至1.70±0.18(对比例1)，相当于模型组AA肉鸡在42天内的料肉比(1.71±0.22)。而和黄芩的用量不应超出20-30Kg(即20-30重量份)的范围内，否则AA肉鸡在42天内的料肉比也将升高(达到1.67±0.16)。这一数据结果充分表明：当山银花或者黄芩的用量过多时，山银花、黄芩、党参和炙甘草之间的相互协配的作用结果将使得AA肉鸡对饲料的转化率不高，使得家禽饲养的成本变。
另外，对比例3-4的数据结果表明，在制备中药预混剂时，其中的党参提取物和炙甘草提取物的添加(即制备原料中含有党参或者炙甘草)，对于降低AA肉鸡饲养的料肉比的贡献并不是很大。制备中药预混剂的原料中没有党参提取物或者炙甘草提取物时，AA肉鸡的料肉比变化不大，基本维持在和实施例相当的水平。
综上，将本申请的中药预混剂用于家禽饲料时，其能够有效促进家禽的生长、并有效防治坏死性肠炎，同时饲喂含有本申请中药预混剂的饲料，能够有效降低料肉比，降低家禽饲养的成本。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (10)

1.一种中药预混剂，其特征在于，自多种中药原料中提取得到中药提取物后，将所述中药提取物和辅料混合后得到中药预混剂；所述中药原料包括以下重量份的组分：山银花50-60份、黄芩20-30份、党参10-20份、炙甘草10-20份；得到的中药提取物包括山银花提取物、黄芩提取物、党参提取物和炙甘草提取物。
2.根据权利要求1所述的一种中药预混剂，其特征在于，所述中药原料包括以下重量份的组分：山银花50-55份、黄芩25-28份、党参10-15份、炙甘草10-15份。
3.根据权利要求1-2任一所述的一种中药预混剂，其特征在于，自所述中药原料中以包括以下步骤的方法提取得到所述中药提取物：
Ⅰ、取中药原料，去杂，加入8-12倍体积的50%-80%乙醇溶液浸泡，随后在70-100℃的温度下提取，得到中药提取液；
Ⅱ、将所述中药提取液进行离心、微滤、减压浓缩、干燥后即得中药提取物。
4.根据权利要求3所述的一种中药预混剂，其特征在于，所述山银花提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S11、取山银花药材，去杂，加入8-10倍体积的50%-80%乙醇溶液，浸泡2-3 h，在70-100℃的温度下提取，得到山银花提取液；
S12、将所述山银花提取液以8000-12000 rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得山银花提取物。
5.根据权利要求3所述的一种中药预混剂，其特征在于，所述黄芩提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S21、取黄芩药材，去杂、粉碎后，加入9-12倍体积的50%-80%乙醇溶液浸泡3-5 h，在70-100℃的温度下提取，得到黄芩提取液；
S22、将所述黄芩提取液以7000-10000 rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得黄芩提取物。
6.根据权利要求3所述的一种中药预混剂，其特征在于，所述党参提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S31、取党参药材，去杂、粉碎后，加入7-10倍体积的50%-80%乙醇溶液浸泡4-6 h，在70-100℃的温度下提取，得到党参提取液；
S32、将所述党参提取液以9000-12000 rpm的转速离心，随后微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得党参提取物。
7.根据权利要求3所述的一种中药预混剂，其特征在于，所述炙甘草提取物以包括以下步骤的方法提得到：
S41、取炙甘草药材，去杂、粉碎后，加入8-12倍体积的50%-80%乙醇溶液浸泡2-4 h，在70-100℃的温度下提取，得到炙甘草提取液；
S42、将所述炙甘草提取液以8000-10000rpm的转速离心，微滤后收集滤过液，在50-80℃的温度下减压浓缩，干燥后即得炙甘草提取物。
8.根据权利要求1所述的—种中药预混剂的制备方法，其特征在于，所述辅料为麦饭石、蒙脱石、碳酸钙中的一种或多种。
9.一种权利要求1-8任一所述中药预混剂的制备方法，其特征在于，将所述中药提取物和辅料混合后得到中药预混剂。
10.一种权利要求1-8任一所述的中药预混剂的应用，其特征在于，所述中药预混剂用于防治家禽坏死性肠炎；将所述中药预混剂添加至家禽饲料中，添加量为饲料重量的0.01-0.1%。
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