CN113004983A - 清洗液、清洗液的制备方法以及血细胞分析仪 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及生物样品检测技术领域,具体公开了一种清洗液、清洗液的制备方法以及血细胞分析仪,该清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***,包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水;该清洗液的pH为7.5‑9.0。通过上述方式,本申请能够提供稳定高效的用于血细胞分析仪清洗的清洗液。
Description
技术领域
本申请涉及生物样品检测技术领域,特别是涉及一种清洗液、清洗液的制备方法以及血细胞分析仪。
背景技术
清洗液是血液分析仪中最常用的试剂之一,其作用是清洁管道中的血污和纤维蛋白,确保检测结果的准确性。以血细胞分析为例:血液经稀释液稀释后通过吸样针采样到红细胞和白细胞计数池中,仪器将自动加入溶血剂,经过一定时间后仪器自动计数,计数完毕,由仪器中的吸样泵自动吸取一定量的清洗液冲洗血液经过的管路和计数池及各通道。重复以上工作环节,目地是确保质检结果的准确性。
发明内容
本申请提供一种清洗液、清洗液的制备方法以及血细胞分析仪,目的在于提供稳定高效的用于血细胞分析仪清洗的清洗液。
一方面,本申请提供一种清洗液,所述清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***,包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水;所述清洗液的pH为7.5-9.0。
另一方面,本申请提供一种清洗液的制备方法,用于制备如前述的清洗液,所述方法包括:将缓冲剂、次氯酸钠、无机稳定剂充分溶于去离子水中形成混合溶液;将生物酶、表面活性剂、有机稳定剂充分溶于混合溶液中;加入去离子水定容,然后加入酸碱调节剂,得到pH为7.5-9.0的清洗液。
又一方面,本申请提供一种血细胞分析仪,至少包括采样针、红细胞检测装置、红细胞与血小板计数池、血红蛋白检测装置、白细胞计数池、检测装置、排放装置、清洗装置以及分配装置;所述清洗装置连接所述采样针,所述分配装置还用于将清洗液加入所述清洗装置,以使所述清洗装置清洗吸取样本后的采样针上的血液残留;所述分配装置还用于将清洗液加入所述红细胞检测装置、所述红细胞与血小板计数池、所述血红蛋白检测装置、所述白细胞计数池、所述检测装置进行清洗;所述排放装置用于将所述清洗液排出;所述清洗液为前述的清洗液。
本申请的有益效果是:区别于现有技术的情况,本申请提供一种清洗液,该清洗液包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水,且清洗液的pH为7.5-9.0。该清洗液通过添加复合稳定剂(即有机稳定剂以及无机稳定剂),能够提高清洁液的稳定性(有效氯含量提高),可有效地克服现有技术中生产的次氯酸钠制品只有在高pH值(pH>12)的环境下才适合存放和使用的局限性,使含有次氯酸钠的清洗液的适用范围拓展了许多。由于本申请的方法可使清洁液的pH值降至7.5-9.0,也使得清洗液碱性降低,副作用变小,更适用于采样针或血细胞分析仪的测量***的清洗,而且其稳定性和有效保存期也比现有技术制得的次氯酸钠制品有明显的延长。同时,本申请的清洗液含有生物酶,在该清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***时,能够保证除去血细胞分析仪中残存的血液样本,解决了携带污染的问题,提高计数准确度,进而减少次氯酸钠的用量,从而达到提高清洗液的稳定性及加强清洁能力的作用。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。其中:
图1是实施例1-3清洗液的有效氯含量测定;
图2是不同pH下实施例1清洗液的有效氯含量测定结果。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例中的附图,对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例,而不是全部实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性的劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本申请保护的范围。
传统血液学常规检查方法是借助于显微镜进行人工血液红细胞、白细胞技术和血涂片染色后显微镜进行肉眼人工白细胞分类,这样操作效率低,费时费力,无发满足市场的需求。随着科技的发展,自血细胞分析仪问世改变了以上的情况。
随着科学技术日新月异的发展,血细胞分析的技术有了很大的进步,能够准确提供27项检测参数,为临床检查提供了更为准确有效的方法。血细胞五分类技术是当前最为先进的分析技术,五分类自动血细胞分析仪可以检测红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板和平均红细胞体积的等等的参数,它通过检测人体的血液细胞的数目对各种疾病进行诊断,可及时监测人体的身体状况,减少发病机率或控制病情,是目前临床检查的重要手段之一。
五分类全自动血细胞分析仪检测血液细胞数目时需要与配套试剂一起使用,血细胞分析以配套试剂的清洗液主要是清洗管道,避免标本之间的污染。但是,该五分类细胞分析仪原厂试剂的成本高,供货周期长的缺陷,无法满足市场的需求。
鉴于上述现有技术的不足,本申请提供一种清洗液。
该清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***,包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水;清洗液的pH为7.5-9.0。
次氯酸钠是清洗液的主要成分,本申请次氯酸钠可以用于抑制周边液体内的细菌生长。缓冲剂用来调节清洗液的pH值,保证不同pH值的样品加入到其中时,仍能保持体系pH值的稳定。本申请缓冲剂的pH缓冲范围为7.5-9.0,优选地,缓冲剂的pH缓冲范围为7.5-8.5,用于为测试体系提供适宜的pH值,清洗液的pH为7.5-9.0,优选地,清洗液的pH为7.5-8.5,进而使次氯酸钠在相对稳定的弱碱性环境中储存和使用。其中,上述生物酶能快速、有效的消化贴壁的血细胞,除去血细胞分析仪中残存的血液样本,增强清洁能力。酸碱调节剂用于调节清洗液的pH值。无机稳定剂和有机稳定剂用于稳定次氯酸钠,本申请中的生物酶优选以冻干粉的形式加入上述清洗液中,以提高稀释后检测样本的准确度和精密度。
本申请的清洗液是申请人经过大量研究实验后,采用常规原料进行特定组合而形成的,本申请的清洗液可通用于不同的临床免疫诊断项目中,可针对不同的血液样本提供稳定适宜的渗透压,且不会对不同的检测项目(即不同的血液样本)造成干扰,因此具有很高的通用性。
本申请提供的清洗液包括缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水,其中,无机稳定剂、有机稳定剂、表面活性剂的配合使用使得次氯酸钠、生物酶不仅能够稳定存在,而且提高了清洗液的清洗效果,有效清洗采样针或血细胞分析仪的测量***管路,提高检测结果的准确性。
区别于现有技术的情况,本申请提供一种清洗液,该清洗液包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水,且清洗液的pH为7.5-9.0。该清洗液通过添加复合稳定剂(即有机稳定剂以及无机稳定剂),能够提高清洁液的稳定性(有效氯含量提高),可有效地克服现有技术中生产的次氯酸钠制品只有在高pH值(pH>12)的环境下才适合存放和使用的局限性,使含有次氯酸钠的清洗液的适用范围拓展了许多。由于本申请的方法可使清洁液的pH值降至7.5-9.0,也使得清洗液碱性降低,副作用变小,更适用于采样针或血细胞分析仪的测量***的清洗,而且其稳定性和有效保存期也比现有技术制得的次氯酸钠制品有明显的延长。同时,本申请的清洗液含有生物酶,在该清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***时,能够保证除去血细胞分析仪中残存的血液样本,解决了携带污染的问题,提高计数准确度,进而减少次氯酸钠的用量,从而达到提高清洗液的稳定性及加强清洁能力的作用。
在一实施例中,缓冲剂选自:盐类缓冲剂或酸类缓冲剂中的至少一种,酸碱调节剂选自:氢氧化钠或碳酸钠中的至少一种,表面活性剂选自:甜菜碱型两性表面活性剂。
其中,盐类缓冲剂为醋酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、碳酸盐、焦磷酸盐、铵盐、硼酸盐中的至少一种;酸类缓冲剂为柠檬酸、磷酸、醋酸中的至少一种;甜菜碱型两性表面活性剂包括:羧酸基甜菜碱、磺基甜菜碱或磷酸酯甜菜碱中的至少一种。
缓冲剂优选为不含钙离子和镁离子的缓冲剂。
甜菜碱型表面活性剂是由季铵盐型阳离子部分和羧酸盐型阴离子部分所构成,其性能较氨基酸型两性表面活性剂为优良,通过动物安全试验表明:甜菜碱型两性表面活性剂的刺激性小、去污能力强,并具有一定的杀菌作用,适应性好。
在一实施例中,生物酶选自:脂肪酶或蛋白酶中的至少一种。
其中,蛋白酶包括:胰蛋白酶,上述生物酶选自:胰蛋白酶、中性水解蛋白酶、淀粉酶或纤维素酶中的至少一种。
优选地,蛋白酶为胰蛋白酶,胰蛋白酶是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。胰脏制造的前体胰蛋白酶原分泌到小肠后,肠肽酶使其活化,成为胰蛋白酶。胰蛋白酶是肽链内切酶,它能选择性地水解多肽链的赖氨酸和精氨酸残基中的羧基。胰蛋白酶不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。胰蛋白酶能快速、有效的消化贴壁的血细胞,除去血细胞分析仪中残存的血液样本,增强清洁能力。
本申请发明人在试验过程中发现,添加少量无机稳定剂与有机稳定剂后,次氯酸钠水溶液的稳定性均大大增强了,其中碳酸氢钠的效果最好,可以保持次氯酸钠水溶液的有效氯浓度在5天内相对稳定。
其中,无机稳定剂选自:氯酸钠、碳酸钠、硅酸钠、碳酸氢钠、焦磷酸钠、氮化钠、邻苯二甲酸氢钾、磷酸盐及其衍生物、硅酸钠、碳酸氢钠或氯化钠中的至少一种;有机稳定剂选自:1,10-菲罗啉和8-羟基喹啉、半乳糖醇、甘露糖醇、山梨醇或六羟基环已烷中的至少一种。
磷酸盐、磷酸一氢盐作为缓蚀剂加入次氯酸钠水溶液,磷酸三钠和磷酸氢二钠配合使用能够增加次氯酸钠溶液的稳定性。有机磷试剂被用做螯合剂使用,如果这种有机磷化合物稳定性好,不易被氧化是可以加入次氯酸钠溶液中起到一定的增稳效果。
1,10-菲罗啉和8-羟基喹啉是两种常见的螯合剂,8-羟基喹啉本身有弱酸性从理论上是会引起次氯酸钠加速分解。但是1,10-菲罗啉或8-羟基喹啉或两者的混合物加入,作为稳定剂或称保护剂在次氯酸钠浓度较低时可以增加其稳定性,并且可以让低浓度的次氯酸钠溶液在中性,甚至弱酸性条件下保存。
本申请提供的清洗液中,缓冲剂的含量为2.3-5.6g/L;次氯酸钠的含量为3.5-8.5g/L。生物酶的含量为3.6-10.2g/L。表面活性剂的含量为1.6-5.1g/L。无机稳定剂的含量为2.2-4.1g/L。有机稳定剂的含量为1.7-3.1g/L。
具体地,由于缓冲剂的过酸或过碱以及浓度大小都会对反应体系中的荧光产生不利影响,导致检测结果不准确。因此上述缓冲剂的含量为2.3-5.6g/L,例如,2.3g/L、2.5g/L、3.5g/L、4.5g/L、5.0g/L或5.6g/L。优选地,上述缓冲剂的含量为2.5-3.5g/L。
次氯酸钠的含量为3.5-8.5g/L,例如,3.5g/L、4.5g/L、5.0g/L、5.5g/L、6.5g/L、7.5g/L或8.5g/L。优选地,上述次氯酸钠的含量为5.0-6.5g/L。
进一步地,合适的生物酶浓度是影响清洗液清洁能力的主要因素之一,上述生物酶的含量为3.6-10.2g/L,例如,3.6g/L、4.5g/L、6.5g/L、8.6g/L或10.2g/L。优选地,上述生物酶的含量为4.5g/L-5.5g/L。
表面活性剂的含量为1.6-5.1g/L,例如,1.6g/L、2.0g/L、3.0g/L、4.0g/L、或5.1g/L。优选地,上述表面活性剂的含量为2.5-3.5g/L。
无机稳定剂的含量为2.2-4.1g/L,例如,2.2g/L、2.5g/L、2.7g/L、3.0g/L、3.5g/L、3.8g/L或4.1g/L。优选地,上述无机稳定剂的含量为2.5-3.5g/L。
有机稳定剂的含量为1.7-3.1g/L,例如,1.7g/L、1.9g/L、2.3g/L、2.7g/L、或3.1g/L。优选地,上述有机稳定剂的含量为1.7-2.5/L。
本申请的清洗液是申请人经过大量研究实验后,通过配比特定浓度的缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂,从而使得次氯酸钠、生物酶不仅能够稳定存在,而且提高了清洗液的清洗效果,有效清洗采样针或血细胞分析仪的测量***管路,提高检测结果的准确性。
在一实施例中,清洗液进一步包括防腐剂。
其中,防腐剂的含量为1.5-3.6g/L,例如,1.5g/L、2.0g/L、2.5g/L、3.0g/L或3.6g/L。优选地,上述防腐剂的含量为0.1g/L-0.2g/L。
防腐剂包括:乳酸钠、双乙酸钠或溶菌酶中的至少一种。乳酸钠、双乙酸钠或溶菌酶替代了常用的抗菌防腐剂叠氮钠,无毒、使用安全,避免了对试剂生产人员和环境的损害。
上述清洗液的渗透压为280~320mOsm/kg,例如280mOsm/kg、300mOsm/kg、310mOsm/kg或320mOsm/kg,与血细胞分析仪Sysmex XN-1000专用清洗液(以下称为原厂清洗液)的渗透压接近。
本申请还提供一种清洗液的制备方法,用于制备如前述的清洗液,该方法包括以下步骤:
S10:将缓冲剂、次氯酸钠、无机稳定剂充分溶于去离子水中形成混合溶液。
具体地,上述各组分的添加顺序并无特别要求,只需充分混合溶解于去离子水即可。将缓冲剂、次氯酸钠、无机稳定剂加入去离子水中,并以160转/分钟的转速搅拌均匀。
S20:将生物酶、表面活性剂、有机稳定剂充分溶于混合溶液中。
具体地,上述各组分的添加顺序并无特别要求,只需充分混合溶解于混合溶液即可。将生物酶、表面活性剂、有机稳定剂加入混合溶液中,并以160转/分钟的转速搅拌均匀。
S30:加入去离子水定容,然后加入酸碱调节剂,得到pH为7.5-9.0的清洗液。
具体地,清洗液用0.22μm滤膜过滤后,室温保存。
本申请提供一种血细胞分析仪,至少包括采样针、红细胞检测装置、红细胞与血小板计数池、血红蛋白检测装置、白细胞计数池、检测装置、排放装置、清洗装置以及分配装置;清洗装置连接采样针,分配装置还用于将清洗液加入清洗装置,以使清洗装置清洗吸取样本后的采样针上的血液残留;分配装置还用于将清洗液加入红细胞检测装置、红细胞与血小板计数池、血红蛋白检测装置、白细胞计数池、检测装置进行清洗;排放装置用于将清洗液排出;其中,清洗液为上述实施方式中的清洗液。
具体地,采样针用来吸取需要检测的血液样本,血细胞分析仪的工作流程如下:
S1:通过分血装置从机外吸取样本;
S2:排空白细胞计数池,通过试剂分配装置往白细胞计数池加入第一溶血剂;
S3:通过分血装置将吸取的部分样本加入白细胞计数池与第一溶血剂进行反应;
S4:将反应后的样本混合液通过输送装置送入五分类检测装置进行白细胞四分类计数,同时可对白细胞总数计数;
S5:再次排空白细胞计数池,然后通过清洗液对白细胞计数池进行清洗;
S6:通过试剂分配装置往白细胞计数池加入清洗液,然后再通过分血装置将吸取的部分样本加入白细胞计数池,形成混合液;
S7:通过分血装置从白细胞计数池吸取部分混合液,然后将混合液加入红细胞与血小板计数池;
S8:吸取完部分混合液后,通过试剂分配装置往白细胞计数池再加入第二溶血剂进行反应;将反应后的溶液通过输送装置送入血红蛋白检测装置和五分类检测装置;
S9:并行进行三个计数:通过红细胞检测装置进行红细胞与血小板计数、通过血红蛋白检测装置在白细胞计数池进行血红蛋白测量和通过五分类检测装置进行嗜碱性细胞计数,同时可对白细胞总数计数;
S10:最后将所有结果进行计算,并输出各血细胞计数结果。
具体地,采样针用来吸取需要检测的血液样本,然后通过分配装置将血液分配到相应的反应池进行反应,的分配装置由注射器、电磁定量泵或气动定量泵等可以定量分配的装置组成来完成定量分配的功能。清洗装置用来清洗吸取样本后的采样针上的血液残留,保证不通过采样针携带交叉污染而影响测试结果。
通过分配装置将血液、至少一种溶血剂和清洗液加入到白细胞反应池进行反应,反应完后,通过白细胞测量装置对白细胞进行测量。白细胞五分类和白细胞三分群两种不同测量模式均共用了白细胞反应池和白细胞测量***,并且五分类使用的溶血剂包含了三分群所用的溶血剂。白细胞三分群模式只使用一种溶血剂,白细胞五分类使用两种以上的溶血剂,因此白细胞三分群测试模式测量成本低。
通过分配装置将血液、清洗液加入到RBC/PLT反应池,混匀结束后再通过RBC/PLT测量***完成RBC(红细胞)和PLT(血小板)的测量。
本申请的有益效果是:区别于现有技术的情况,本申请提供一种血细胞分析仪,至少包括采样针、红细胞检测装置、红细胞与血小板计数池、血红蛋白检测装置、白细胞计数池、检测装置、排放装置、清洗装置以及分配装置;采样针连接输送装置,通过输送装置配合完成样本取样和分配。该清洗液通过添加复合稳定剂(即有机稳定剂以及无机稳定剂),能够提高清洁液的稳定性(有效氯含量提高),可有效地克服现有技术中生产的次氯酸钠制品只有在高pH值(pH>12)的环境下才适合存放和使用的局限性,使含有次氯酸钠的清洗液的适用范围拓展了许多。由于本申请的方法可使清洁液的pH值降至7.5-9.0,也使得清洗液碱性降低,副作用变小,更适用于采样针或血细胞分析仪的测量***的清洗,而且其稳定性和有效保存期也比现有技术制得的次氯酸钠制品有明显的延长。同时,本申请的清洗液含有生物酶,在该清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***时,能够保证除去血细胞分析仪中残存的血液样本,解决了携带污染的问题,提高计数准确度,进而减少次氯酸钠的用量,从而达到提高清洗液的稳定性及加强清洁能力的作用。
下面结合具体实施例,进一步阐述本申请。应理解,这些实施例仅用于说明本申请而不用于限制本申请的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
除非另行定义,文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外,任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本申请方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实施例1
清洗液中各组分与含量如表1所示:
表1
去离子水 | 1L |
次氯酸钠 | 6.2g |
羧酸基甜菜碱 | 3.1g |
碳酸氢钠 | 3.2g |
双乙酸钠 | 2.6g |
胰蛋白酶 | 5.1g |
碳酸钠 | 2.8g |
8-羟基喹啉 | 2.2g |
pH | 7.7 |
实施例2
清洗液中各组分与含量如表2所示:
表2
去离子水 | 1L |
次氯酸钠 | 5.1g |
磺基甜菜碱 | 2.5g |
磷酸氢二钠 | 2.8g |
乳酸钠 | 2.1g |
液体脂肪酶 | 4.9g |
碳酸钠 | 2.6g |
1,10-菲罗啉 | 1.9g |
pH | 7.7 |
实施例3
清洗液中各组分与含量如表3所示:
表3
去离子水 | 1L |
次氯酸钠 | 5.3g |
磷酸酯甜菜碱 | 3.1g |
碳酸氢钠 | 3.3g |
乳酸钠 | 2.4g |
液体脂肪酶 | 4.6g |
碳酸钠 | 2.6g |
六羟基环已烷 | 1.9g |
pH | 7.7 |
实施例4
实施例1-3清洗液的有效氯含量测定
有效氯含量的测定方法是采用国家标准GB/T 19106-2003次氯酸钠溶液中有效氯含量的测定方法进行测定和计算。
1)原理
在酸性介质中,次氯酸根与碘化钾反应,析出碘,以淀粉为指示液,用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定,至蓝色消失为终点。反应式如下:
2H++OCl-+2I-=I2+Cl-+H2O;
I2+2S2O3 2-=S4O6 2-+2I-。
2)试剂
称取100g碘化钾,溶于水中,稀释到1000mL,摇匀,配置得到100g/L碘化钾溶液;
量取15mL硫酸,缓缓注入500mL水中,冷却,摇匀,配置得到硫酸溶液;
硫代硫酸钠标准滴定溶液:c(Na2S2O3)=0.1mol/L;
10g/L淀粉指示液。
对比例的清洗液为原厂。
3)分析步骤
分别将上述实施例1-3放置5天、10天、15天、20天、25天、30天。量取放置5天、10天、15天、20天、25天、30天后的上述实施例1-3制得的清洗液样品各20mL,置于内装20mL水并已称量(精确到0.01g)的100mL烧杯中,称量(精确到0.01g)。然后全部移入500mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,得到待测样品溶液。
量取待测样品溶液10.00mL,置于内装50mL水的250mL碘量瓶中,加入10mL碘化钾溶液和10mL硫酸溶液,迅速盖紧瓶塞后水封,于暗处静置5min,用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至浅黄色,加2mL淀粉指示液继续滴定至蓝色消失即为终点。
4)结果计算
有效氯以氯的质量百分含量X/%表示,按式(1)计算:
X=[c·M·(V/1000)]/(m·10.0/500)×100=177.25c·V/m
式中:
V-硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积的数值,单位为毫升(mL);
c-硫代硫酸钠标准滴定溶液浓度的准确的数值,单位为摩尔每升(mol/L);
m-试料的质量的数值,单位为克(g);
M-氯的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/mol)(m=35.453)。
其中,平行测定结果之差的绝对值不超过0.2%;取平行测定结果的算术平均值为报告结果。
实施例1-3有效氯含量检测数据如表4和图1所示,放置5-15天时,实施例1-3的清洗液与原厂清洗液的有效氯含量相当,在放置超过15天后,原厂清洗液的有效氯含量急速下降,但实施例1-3的清洗液的有效氯含量仍大于10%,说明本申请清洗液的稳定性优于原厂清洗液的稳定性。
表4
实施例5
不同pH下实施例1清洗液的有效氯含量测定
分别通过氢氧化钠将实施例1清洗液的pH值调至7.5、7.7、7.9、8.1、8.3、8.5、9.0、10.0。分别测定放置5天、10天、15天、20天、25天、30天后的上述实施例1清洗液的有效氯含量。
实施例1清洗液的有效氯含量检测数据如表5和图2所示,pH值为7.5-9.0时,在放置超过15天后,实施例1清洗液的有效氯含量均优于原厂清洗液;pH值为10.0时,在放置超过5天后,实施例1清洗液的有效氯含量急速下降,且有效氯含量与原厂清洗液相比并无优势。pH值为7.7时,实施例1清洗液的稳定性最好,但随着pH值减小或增加,实施例1清洗液的有效氯含量也随之下降。
表5
实施例6
实施例1-3清洗液的清洗效果实验
1、实验材料
本申请实施例1-3清洗液、原厂清洗液(即对比例)、手术剪刀210把、人全血、杰力测试纸等。
2、评价方法
目测法:清洗合格为到规定时间后实验样品的表面光亮如初,无残留物质、无血迹;不合格为到规定时间后实验样品表面发污或肉眼可见斑点状污痕或有较明显片状污迹(肉眼裸视只能观察到粒径>50μm的污染物质)。
隐血试验:杰力试纸测试法
在已清洗后的手术剪刀表面用蘸上水的无菌棉签来回擦拭,将棉签的水蘸在杰力试纸上,数秒后开始变色,表示残留血污量多,为强阳性;若在15min内变色,表示残留血污量少,为弱阳性;蘸上水的试纸不变色,为残留血阴性,表示清洗效果合格。
3、实验步骤
(1)试样制备
取210把手术剪刀,用人全血浸泡污染后,在室温放置10小时,晾干备用;
(2)设置组别
设置本申请实施例1-3清洗液样品、原厂清洗液组;
210把手术剪刀随机分成7组,每组30把。
(3)清洗
清洗液与水按1:270的比例将各清洗液配成工作溶液,装入超声波清洗器中,将污染的手术剪刀装篮,浸泡在40℃的各清洗液中5分钟,然后用超声波清洗5分钟,之后换成40℃的清水超声清洗3分钟,再换一次40℃的清水超声清洗2分钟,最后将手术剪刀快速浸入装有清水的容器池中,10秒钟后拿出,放入105℃烘箱中烘干10分钟。
(4)隐血试验
在已清洗后的手术剪刀表面用蘸上水的无菌棉签来回擦拭,将棉签的水蘸在杰力试纸上,根据杰力试纸的变色情况判断清洗效果。
4、实验结果
目测法:清洗时,原厂清洗液处理的手术剪刀上的污物成片状脱落,而实施例1-3的清洗液处理的手术剪刀上的污物成絮状脱落,说明原厂清洗液中的生物酶作用能力不足,对污物的分解能力不够。实施例1的清洗液处理的手术剪刀上的污物脱落速度比原厂清洗液的快,清洗效果也较好。
隐血试验:
本申请实施例1-3的清洗液样品、原厂清洗液的隐血试验结果见表6。
表6
本申请的清洗液包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水,且清洗液的pH为7.5-9.0。该清洗液通过添加复合稳定剂(即有机稳定剂以及无机稳定剂),能够提高清洁液的稳定性(有效氯含量提高),可有效地克服现有技术中生产的次氯酸钠制品只有在高pH值(pH>12)的环境下才适合存放和使用的局限性,使含有次氯酸钠的清洗液的适用范围拓展了许多。由于本申请的方法可使清洁液的pH值降至7.5-9.0,也使得清洗液碱性降低,副作用变小,更适用于采样针或血细胞分析仪的测量***的清洗,而且其稳定性和有效保存期也比现有技术制得的次氯酸钠制品有明显的延长。同时,本申请的清洗液含有生物酶,在该清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***时,能够保证除去血细胞分析仪中残存的血液样本,解决了携带污染的问题,提高计数准确度,进而减少次氯酸钠的用量,从而达到提高清洗液的稳定性及加强清洁能力的作用。
以上所述仅为本申请的实施方式,并非因此限制本申请的专利范围,凡是利用本申请说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本申请的专利保护范围内。
Claims (13)
1.一种清洗液,其特征在于,所述清洗液用于清洗采样针或血细胞分析仪的测量***,包括:缓冲剂、次氯酸钠、生物酶、表面活性剂、无机稳定剂、有机稳定剂、酸碱调节剂以及去离子水;
所述清洗液的pH为7.5-9.0。
2.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述缓冲剂选自:盐类缓冲剂或酸类缓冲剂中的至少一种。
所述酸碱调节剂选自:氢氧化钠或碳酸钠中的至少一种。
所述表面活性剂选自:甜菜碱型两性表面活性剂。
3.根据权利要求2所述的清洗液,其特征在于,
所述盐类缓冲剂为醋酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、碳酸盐、焦磷酸盐、铵盐、硼酸盐中的至少一种,所述酸类缓冲剂为柠檬酸、磷酸、醋酸中的至少一种;
所述甜菜碱型两性表面活性剂包括:羧酸基甜菜碱、磺基甜菜碱或磷酸酯甜菜碱中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述生物酶选自:脂肪酶或蛋白酶中的至少一种。
5.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述无机稳定剂选自:氯酸钠、碳酸钠、硅酸钠、碳酸氢钠、焦磷酸钠、氮化钠、邻苯二甲酸氢钾、磷酸盐及其衍生物、硅酸钠、碳酸氢钠或氯化钠中的至少一种;
所述有机稳定剂选自:1,10-菲罗啉和8-羟基喹啉、半乳糖醇、甘露糖醇、山梨醇或六羟基环已烷中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述次氯酸钠的含量为3.5-8.5g/L。
7.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述缓冲剂的含量为2.3-5.6g/L;
所述表面活性剂的含量为1.6-5.1g/L。
8.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
生物酶的含量为3.6-10.2g/L。
9.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述无机稳定剂的含量为2.2-4.1g/L;
所述有机稳定剂的含量为1.7-3.1g/L。
10.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,所述清洗液进一步包括防腐剂,所述防腐剂的含量为1.5-3.6g/L。
11.根据权利要求1所述的清洗液,其特征在于,
所述清洗液的渗透压为280~320mol/kg。
12.一种清洗液的制备方法,其特征在于,用于制备如权利要求1-11任一项所述的清洗液,所述方法包括:
将缓冲剂、次氯酸钠、无机稳定剂充分溶于去离子水中形成混合溶液;
将生物酶、表面活性剂、有机稳定剂充分溶于混合溶液中;
加入去离子水定容,然后加入酸碱调节剂,得到pH为7.5-9.0的清洗液。
13.一种血细胞分析仪,其特征在于,至少包括采样针、红细胞检测装置、红细胞与血小板计数池、血红蛋白检测装置、白细胞计数池、检测装置、排放装置、清洗装置以及分配装置;
所述清洗装置连接所述采样针,所述分配装置还用于将清洗液加入所述清洗装置,以使所述清洗装置清洗吸取样本后的采样针上的血液残留;所述分配装置还用于将清洗液加入所述红细胞检测装置、所述红细胞与血小板计数池、所述血红蛋白检测装置、所述白细胞计数池、所述检测装置进行清洗;所述排放装置用于将所述清洗液排出;
所述清洗液为权利要求1-11任一项所述的清洗液。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210622 |
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