NO308545B1 - FremgangsmÕte ved hurtig pÕvisning av soppinfeksjoner, samt et sett for bruk ved en slik fremgangsmÕte - Google Patents
FremgangsmÕte ved hurtig pÕvisning av soppinfeksjoner, samt et sett for bruk ved en slik fremgangsmÕte Download PDFInfo
- Publication number
- NO308545B1 NO308545B1 NO920993A NO920993A NO308545B1 NO 308545 B1 NO308545 B1 NO 308545B1 NO 920993 A NO920993 A NO 920993A NO 920993 A NO920993 A NO 920993A NO 308545 B1 NO308545 B1 NO 308545B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- peroxide
- color
- hydrogen peroxide
- component
- heavy metal
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 34
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims description 5
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 title description 10
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 title description 10
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 21
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 20
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 14
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 14
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 claims description 14
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 13
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 12
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 11
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 10
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 7
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 claims description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 7
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 claims description 7
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical group [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical group [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 5
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 claims description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 3
- POECFFCNUXZPJT-UHFFFAOYSA-M sodium;carbonic acid;hydrogen carbonate Chemical compound [Na+].OC(O)=O.OC([O-])=O POECFFCNUXZPJT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 claims description 2
- 229960002163 hydrogen peroxide Drugs 0.000 claims 6
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 claims 3
- AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N urea hydrogen peroxide Chemical compound OO.NC(N)=O AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 8
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 4
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 4
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003896 Myeloperoxidases Human genes 0.000 description 2
- 108090000235 Myeloperoxidases Proteins 0.000 description 2
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 2
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 150000003668 tyrosines Chemical class 0.000 description 2
- ZGPHAZHLWWSPMV-UHFFFAOYSA-N 1-amino-3,4,5-trihydroxypentan-2-one Chemical compound NCC(=O)C(O)C(O)CO ZGPHAZHLWWSPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDOYKFSQFYNPKF-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;sodium Chemical compound [Na].[Na].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O BDOYKFSQFYNPKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000008940 Alkaline Phosphatase assay kit Methods 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102100038609 Lactoperoxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- 206010061372 Streptococcal infection Diseases 0.000 description 1
- 241001255854 Teras Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- BFPJYWDBBLZXOM-UHFFFAOYSA-L potassium tellurite Chemical compound [K+].[K+].[O-][Te]([O-])=O BFPJYWDBBLZXOM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046901 vaginal discharge Diseases 0.000 description 1
- 208000010484 vulvovaginitis Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse angår en meget rask fremgangsmåte
for påvisning av soppinfeksjoner samt et sett for bruk ved en slik fremgangsmåte.
Bakgrunn for oppfinnelsen
I gynekologisk praksis er vaginitis en av hovedgrunnene for besøk av pasienter hos doktorer, vaginitis forårsaket av sopp spesielt av Candida Albicans, kan opptre hos 4-40 % av dé kvinner som besøker doktorer eller klinikker. Sopp-inf eks joner av denne natur blir fremmet av enhver forandring i den normale vaginale flora og slike forandringer kan i sin tur bli knyttet til slike faktorer som variasjon i ovarisk hormonell aktivitet og individuell bredspektret antibiotisk terapi. Diagnosen og behandlingen av slike infeksjoner er i stor grad basert på kliniske symptomer og det mikroskopiske utseende av vaginal utflod hvor de mest vanlige symptomer på vulvo-vaginitis, spesielt er intens kløe og svie fulgt av hudavskallinger og enkelte ganger omgivende utslett.
Kliniske indikasjoner kan bli bekreftet ved tungvinte og tidkrevende dyrkningsteknikker.
1 U.S. patent nr. 4.874.695, som ble utstedt 17. oktober 1989 til Pincus, er det beskrevet en fremgangsmåte for identifisering av soppmikro-organismer som erkarakterisertsom "rask" og innbefatter å dyrke mikro-organismene i 2 til 3 dager, fremstille et inokulum fra kulturen, blande inokulumet med et kromogent substrat (eller separat med mere et slikt substrat) for å påvise tilstedeværelse eller fravær av en eller flere acetateteraser, leucylglyserinamino-peptidase og glycilglyserinaminopeptidase ved dannelse av et farget produkt eller et produkt som kan omdannes til et farget produkt og inkubere inokulum/substratblandingen(e) i 2 til 6 timer, hvorved den ukjente mikro-organisme identi-fiseres ved å sammenligne enzymaktiviteten til kjente slektninger og arter. Således tar den totale fremgangsmåte 2 til 3 dager pluss 2 til 6 timer. Det fullstendige innhold av U.S. patent nr. 4.874.695. innbefattende litteratur, og
patentreferansene deri er uttrykt innbefattet heri per referanse. En fremgangsmåte for påvisning av Candida sopp, Saccharmyces cerevisiae, Torulopsis qlabrata og Aspergillus niger, hvor mikro-organismen det er tale om dyrkes i et medium inneholdende nitrogen og karbonkilder og kloramfenicol og kaliumtellurit (for å hemme veksten av gram-positive og gram-negative organismer) , så vel som en biologisk pH indikator som forandrer farge ettersom mediet blir surere fra metabolsk aktivitet av mikro-organismene er beskrevet i U.S patent 4.140.580, som ble utstedt 20. februar 1979 til Gibson et al. Det fullstendige innhold av dette U.S patent er uttrykkelig innbefattet heri per referanse. I U.S. patent 4.140.480, er det angitt at hele testen kan bli utført på 12 - 18 timer sammenlignet med de da vanlige 37 - 48 timer.
Andre kjente metoder er den såkalte gullstandard diagnose som anvender dyrkning i forskjellige medier samt en metode som bruker monoklonale antistoff pluss latex agglutinering. I en vel etablert metode blir en kaliumhydroksy-oppløsning påført en utstrekningsprøve på en glassplate hvorved alle celler blir ødelagt bortsett fra Candida hyphae og sporer, hvorpå en mikroskopisk undersøkelse blir utført for å identifisere organismen. Denne (KOH) metode er imidlertid underkastet og krever stor laboratoriedyktighet.
Oppsummering av oppfinnelsen
Det er følgelig et mål for foreliggende oppfinnelse å fremskaffe en meget rask metode for påvisning av soppinfeksjoner og det er et ytterligere mål for oppfinnelsen å fremskaffe et kit for bruk i en slik metode. Andre mål for oppfinnelsen vil bli anskueliggjort fra den følgende beskrivelse.
Uttrykket "meget rask" i foreliggende sammenheng betyr høyst innen 1 til 2 timer.
Således, i henhold til foreliggende oppfinnelse er det fremskaffet en fremgangsmåte for påvisning av perokydaseinneholdende sopp som kjennetegnes ved trinnene: (a) å sette en prøve som er mistenkt for å inneholde en peroksydase-inneholdende sopp i kontakt med en blanding som omfatter (i) et peroksyd valgt fra hydrogenperoksyd og addisjonsforbindelser derav inneholdende latent hydrogenperoksyd; (ii) en fjernende middel som er effektiv for å fjerne tungmetaller som potensielt kan nedbryte nevnte peroksyd katalytisk; (iii) en alkaliske bufferoppløsning med kapasitet til å opprettholde pH ved en verdi i området 9,5 til 14;
og (iv) et oksiderbart substrat som omfatter minst en forbindelse valgt fra (3-(3,4-dihydroksyfenyl)-a-alamin (DOPA), koffeinsyre og salter derav, bortsett fra tungmetallsalter, og (b) observere hvorvidt innen 2 timer fra det kontaktdannende trinn en intens farge utvikler seg, noe som indikerer tilstedeværelse av peroksydase-inneholdende sopp i prøven. Fortrinnsvis omfatter metoden ifølge oppfinnelsen også de etterfølgende trinn; (c) å stabilisere fargen ved å senke pH til området 2,4 til 3,0, og (d) å sammenligne intensiteten av den stabiliserte farge med en på forhånd bestemt skala for vurdering av tilstedeværelse og konsentrasjon av sopp i prøven. Foreliggende oppfinnelse fremskaffer videre et forsøkssett for bruk i en metode for påvisning av soppinfeksjon grunnet tilstedeværelsen i soppen av en perokydase som er reaktiv ved høy alkalisk pH og hvilken omfatter de følgende komponenter i en beholder; (A) et peroksyd valgt fra hydrogenperoksyd og addisjonsforbindelser derav inneholdende latent hydrogenperoksyd; (B) en fjernende forbindelse som er effektiv for å fjerne tungmetaller som potensielt kan nedbryte nevnte peroksyd katalytisk; (C) en alkalisk bufferoppløsning med kapasitet til å opprettholde pH ved en verdi innen området 9,5 til 14; og (D) et oksyderbart substrat, som omfatter minst en forbindelse valgt fra DOPA, koffeinsyre og salter derav; bortsett fra tungmetallsalter.
og som et eventuelt tillegg minst en ytterligere komponent valgt fra (E) , (F) , (G.) og (H), nemlig.: (E) en i hovedsak tungmetallfri syrekomponent som er effektiv for å senke pH av forsøksblandingen som innbefatter komponentene (A), (B), (C) og (D), samt en forsøksprøve til området 2,4 til 3,0; (F) en frageskala for å sammenligne enhver farge som kan være stabilisert farge og som kan erholdes i en forsøksblanding som innbefatter komponentene (A), (B), (C) og (E); (G) en steril tørkeinnretning for å samle opp forsøks-prøven; og (H) en forsøksbeholder tilpasset for å blande minst komponentene (A) , (B), (C), (D) og forsøksprøven.
Det fargeløse oksiderbare substrat omfatter fortrinnsvis minst en forbindelse valgt fra tyrosin, DOPA, koffeinsyre, ring-substituert derivater av tyrosin, DOPA og koffeinsyre, funksjonelle derivater av tyrosin, DOPA og koffeinsyre, og salter av enhver av disse forbindelser bortsett fra tungmetallsalter.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen
Grunnlaget for undersøkelsen i henhold til en spesiell utførelsesform av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er dannelsen av melanin fra L-DOPA og oksygen. Fagmannen vil forstå at i sitt brede aspekt innbefatter oppfinnelsen å bruke et fargeløst oksyderbart substrat som er forskjellig fra L-DOPA og som er istand til å gi opphav til et synlig farget produkt under reaksjonsbetingelsene hvilket farget produkt kan, men ikke behøver å innbefatte melaniner. Oksygenet dannes fra hydrogenperoksyd (H202) eller en hydrogenperoksyd addisjonsforbindelse såsom urea/hydrogenperoksyd addisjonsforbindelse ved tilsetning av peroksydase som er tilstede i soppen ved en sterkt alkalisk pH som pH
10. Fargedybden av sterkt farget, melanin som dannes er proporsjonal med mengden av sopp som er tilstede i prøven som undergår forsøket. For å øke følsomheten og stabiliteten av forsøket og redusere dets kostnader var det nødvendig med løsning av tre problemer nemlig: (i) ikke-enzymatisk nedbrytning av hydrogenperoksyd av tungmetaller hvilket ville tilføre falske positive resultater; (ii) falske negative resultater grunnet bleking av fargen av overskytende hydrogenperoksyd som er tilbake etter at fargen har utviklet seg; (iii) behovet for en buffer med en signifikant kapasitet til å opprettholde en pH (f.eks. 10) iløpet av reaksjonen og forbli stabil under sterilisering.
Disse problemer ble løst som følger. Tungmetallkatalysert nedbrytning av hydrogenperoksyd ble forhindret ved bruk av et fjernende middel, såsom EDTA eller egnet salt derav, f.eks. natriumsaltet. Bleking av overskytende hydrogenperoksyd ble unngått ved å tilsette en passende syre (f.eks. sitronsyre) til blandingen etter f.eks. 5 min farge-utvikling, noe som reduserer pH av blandingen til 2,4 til 3,0. Med hensyn til ønskeligheten med å opprettholde en høy pH ble det funnet at en 0,1M natriumkarbonat-bikarbonat-buffer, som blir mye brukt for assayet ved alkalisk fosfatase og er billigere enn enkelte eksisterende alter-nativer, kunne bli brukt for dette formål. Det fjernende middel såsom EDTA eller et passende salt derav kan bli tilsatt til bufferoppløsningen, f.eks. kan 9 volumdeler av 0,1M bufferen bli blandet med 1 volumdel 0,02M EDTA dinatriumsalt for å opprettholde pH 10 og for å fjerne tungmetaller.
Siden hydrogenperoksyd er høyst effektiyt som et blekemiddel i alkalisk pH, senkning av pH av blandingen til 2,4 til 3,0 etter at fargen hadde utviklet seg fullstendig, forhindret bleking fra å inntreffe selvom den ble oppbevart i flere dager. Sitronsyre kan f.eks. bli brukt ved 2M konsentrasjon for å redusere pH, og det ble funnet at sitronsyre i seg selv ikke endret fargeintensiteten av melaninet som var dannet under reaksjonen.
Jo mer peroksidase-inneholdende sopp som er tilstede i prøven desto dypere er fargen. Pigmentet (i dette eksempel melanin) hadde et absorbsjonsmaksimum ved 272 nanometer og absorbsjonsminium ved 240 nanometer.
For å bestemme følsomheten av forsøket for soppinfeksjoner beskrevet heri, viste dyrkning av en prøve fra en pasient (infisert med Candida Alicans) på et "Easy-Cult" medium etter 48 timer 10,000 organismer. Koloniene ble skrapet fra overflaten av kulturmediet og resuspangdert i 1 c.c. vann hvilket således inneholdt 10,000 organismer. Seriell fortynning av sistnevnte ga 1 c.c. prøver inneholdende henholdsvis 4000, 3000, 1000, 100, 20 og 10 organismer. Det å utføre forsøket beskrevet heri ved å bruke L-DOPA som fargeløst oksyderbart substrat og disse forskjellige konsentrasjoner av organismer viste at 4000 eller flere organismer ga en sort farge, 3000 en brun farge, 2000 en mørk gul farge og 1000 og under en gul farge eller ingen farge.
For å vise spesifisiteten av reaksjonen heri ble flere kontrollforsøk utført ved å bruke L-DOPA som fargeløst oksiderbart substrat. Det følgende ga negative resultater under de høye alkaliske pH betingelser ifølge den opp-finner iske metode: leukocytter erholdt fra en normal bomullstuppet munntørking;
en normal klinisk negativ tørking av vagianalhulen;
en tørking fra en normal uinfisert munnhule; og
et tørk fra en munnhule diagnoisert til å ha en strepto-kokk infeksjon.
Disse kontrollresultater støtter påstanden at reaksjonen brukt heri er spesifikk for soppinfeksjoner og gir ikke en positiv reaksjon, med normale celler eller med bakterier. På den annen side viste tørkingen tatt fra pasienter med klinisk diagnostiserte soppinfeksjoner (i henhold til KOH metoden) uniformt positive resultater i henhold til foreliggende oppfinneriske metoder i en tid på 5 til15minutter og gav en mørk brun farge. I tillegg ble disse positive resultater erholdt kun ved en høy alkalisk pH, f.eks. pH 10, og kontrollforsøk ved pH 4 og 7 gav ingen reaksjon. Videre er pepperrot-peroksydase en sur peroksydase som ga enten en minimal respons eller ingen respons ved pH 10, men leukocytt-myeloperoksydase også er en sur peroksydase som gir negative resultater under foreliggende betingelser.
Som et eksempel peroksyd anvendt i henhold til foreliggende oppfinnelse, fast urea/hydrogenperoksyd addukt ble funnet å fremdeles og være fargeløst etter 12 måneders lagring ved romtemperatur, i nærvær av luft, og opprettholdt et til-strekkelig aktivitetsnivå til å være brukbart i foreliggende oppfinnelse. Under disse betingelser oppviste tørr-fat L-DOPA enten alene, eller blandet med urea/hydrogenperoksyd addukt, heller ingen fargeendring. Således kan adduktet og tørr L-DOPA i form av en forpulvret blanding bli brukt en komponent i et forsøkssett hvor en annen komponent er bufferoppløsningen inneholdende den tungmetall-fjernende forbindelse hvor de to komponenter vil bli blandet umiddel-bart før innføring av forsøksmaterialet i blandingen. Forsøkssettet i henhold til oppfinnelsen kan innlysende inneholde en steril tørkeinnretning som en tredje komponent til å bli brukt til å tørke munn eller vagianalhulen etter behov.
Eksempel
Materialer
Ved fremstilling av Na2C03/NaHC03bufferoppløsningen kan komponentene enten bli blandet sammen, eller alternativt omsettes NaOH med NaHC03for å omdanne deler av sistnevnte til Na2C03i henhold til ligningen
NaOH + NaHC03= Na2C03+ H20.
NaHC03(0,84 g.) oppløses i vann for å danne 100 ml. av 0,1M oppløsning. pH av denne oppløsning justeres til 10 ved omrøring M NaOH oppløsning (fremstilt ved å oppløse 4,0 g NaOH i vann, fortynnet til 100 ml.) og kontinuerlig undersøke pH. En omtrentlig 0,1M oppløsning av dinatrium-etylendiamin-tetraeddiksyre, dinatriumsalt, (MW 336.21), fremstilles ved å oppløse denne forbindelse (0,34 g) i vann og fortynne til 100 ml, og derpå justere pH til 10 med M NaOH oppløsning. Forsøksoppløsningen ("A") av alkalisk buffer også inneholdende EDTA dinatriumsalt som tungmetall-fjernende middel fremstilles ved å blande 9 volumdeler 0.1M Na2C03/NaHC03oppløsning med 1 volumdel EDTA dinatrium-saltoppløsning fremstilt som beskrevet ovenfor. Substrat/- peroksydoppløsningen ("B") anvendes som et pulver fremstilt av de tørre bestanddeler, nemlig 20 mg urea/hydrogenperoksyd addukt og 1.5 g L-DOPA. En oppløsning ("C" omtrent 0,2 M) av 4 g sitronsyre i vann, fortynnet til 100 ml, og en steril tørkeinnretning danner også en del av settet.
Fremgangsmåte
Oppløsning A og pulver B blandes sammen og tørkeinnretningen inneholdende forsøksprøven tilsettes, det hele blandes og tillates å stå 5-20 minutter ved romtemperatur; fargen sammenlignes med et prekalibrert fargekart. For å forhindre overskytende hydrogenperoksyd og ammoniakk fra å ble fargen blir en mengde oppløsnings C inneholdende 12 mg. sitronsyre tilsatt for å redusere pH til 2,5 til 3,0. Fagmannen vil være klar over muligheten for å bruke forskjellige reagenser enn sitronsyre for dette formål.
Resultater
20 pasienter kjent for å ha enten en sopp eller bakteriell infeksjon ble undersøkt i henhold til ovennevnte fremgangsmåte som ble funnet å ha en spesifisitet på 90,9 % for s oppinfeksjoner så vel som en følsomhet på 90,9 %.Nøy-aktigheten av disse forsøk i henhold til oppfinnelsen ble bekreftet ved andre forsøk foretatt på tilfeldige pasienter som kom til "the Emergency Department of Swedish Medical Center (DENVER, COLORADO)." Spesifisiteten av disse forsøk synes å være på grunn av det faktum at sopp-peroksydaser er meget aktive ved høy alkalisk pH i motsetning til andre paroksydaser f.eks. myeloperoksydase, lactoperoksydase og
forskjellige bakterielle peroksydaser.
Selvom foreliggende oppfinnelse er blitt spesielt beskrevet i henhold til visse utførelsesformer derav, vil det være innlysende for fagmannen at variasjoner og modifikasjoner kan bli foretatt. Følgelig er oppfinnelsen ikke å bli betraktet til å være begrenset til slike spesielt beskrevete utførelsesformer, men heller kan dets konsept ånd og omfang bli forstått under henvisning til kravene som følger.
Claims (15)
1. Fremgangsmåte ved påvisning av peroksydase-inneholdende sopp,
karakterisert vedat den omfatter trinnene: (a) å sette en prøve som er mistenkt for å inneholde en peroksydase-inneholdende sopp i kontakt med en blanding som omfatter (i) et peroksyd valgt fra hydrogenperoksyd og addisjonsforbindelser derav inneholdende latent hydrogen-
peroksyd; (ii) et fjernende middel som er effektivt for å fjerne tungmetaller som potensielt kan nedbryte nevnte peroksyd katalytisk; (iii) en alkalisk bufferoppløsning med kapasitet til å opprettholde pH ved en verdi i området 9,5 til 14; og (iv) et oksiderbart substrat som omfatter minst en forbindelse valgt fra P- (3 ,4-dihydroksyfenyl) -cx-alanin (DOPA), koffeinsyre og salter derav, bortsett fra tungmetallsalter; og (b) observere hvorvidt innen 2 timer fra det kontaktdannende trinn en intens farge utvikler seg, noe som indikerer tilstedeværelse av peroksydase-inneholdende sopp i prøven.
2. Fremgangsmåte ifølge krav l,karakterisert vedat peroksydet er valgt fra hydrogenperoksyd og urea-hydrogenperoksyd addisjonsforbindelse.
3. Fremgangsmåte ifølge enten krav 1 eller 2,karakterisert vedat den tungmetall-fjernende forbindelse er etylendiamin-tetraeddiksyre (EDTA) eller et salt derav.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 3,karakterisert vedat det tungmetall-fjernende salt er EDTA dinatriumsalt.
5. Fremgangsmåte ifølge et hvert av de foregående krav,karakterisert vedat den alkalisk buffer er en natriumkarbonat/natriumbikarbonatbuffer og nevnte pH i området 9,5 til 14 er i hovedsak pH 10.
6. Fremgangsmåte ifølge et hvert av de foregående krav,karakterisert vedat den alkaliske buffer-oppløsning er 0,1 M natrium karbonat-bikarbonat buffer-oppløsning.
7. Fremgangsmåte ifølge et hvert av de foregående krav,karakterisert vedat det anvendes en blanding på 9 volumdeler 0,1 M natriumkarbonat-bikarbonat bufferoppløsning som den alkaliske bufferoppløsning med 1 volumdel 0,01 M EDTA dinatriumsalt oppløsning som tungmetall-fjernende forbindelse.
8. Fremgangsmåte ifølge et hvert av de foregående krav,karakterisert vedi det tilfellet en farge utvikler seg i trinn (b), et ytterligere trinn (c) utføres for å stabilisere fargen ved å senke pH til området 2,4 til 3,0.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 8,karakterisert vedat den også omfatter et etterfølgende trinn (d) og sammenligne intensiteten av den stabiliserte farge med en på forhånd bestemt skala for beregning av tilstedeværelse og konsentrasjon av sopp i prøven.
10. Fremgangsmåte ifølge et hvert av de foregående krav,karakterisert vedat bestanddelene (ii) og (iii) blir brukt sammen.
11. Fremgangsmåte ifølge et hvert av de foregående krav,karakterisert vedat det i trinn (b) blir foretatt observasjon iløpet av 5 til 15 minutter fra det kontaktdannende trinn.
12. Undersøkelses-sett for bruk i en fremgangsmåte for påvisning av sopp grunnet tilstedeværelse deri av en peroksydase som er reaktiv ved høy alkalisk pH,karakterisert vedat det omfatter de følgende enkelte komponenter i en beholder; (A) et peroksyd valgt fra hydrogenperoksyd og addisjons-forbindelser derav inneholdende latent hydrogenperoksyd; (B) en fjernende forbindelse som er effektiv for å fjerne tungmetaller som potensielt kan nedbryte nevnte peroksyd katalytisk; (C) en alkalisk bufferoppløsning med kapasitet til å opprettholde pH ved en verdi innenfor området 9,5 til14; og (D) et oksyderbart substrat som omfatter minst en forbindelse valgt fra DOPA, koffeinsyre og salter derav bortsett fra tungmetallsalter.
13. Forsøkssett ifølge krav 12,karakterisert vedat det i tillegg omfatter minst 1 ytterligere komponent valgt fra punkt (E), (F) , (G) og (H), nemlig: (E) en i hovedsak tungmetall fri syrekomponent som er effektiv for å senke pH av en forsøksblanding som innbefatter komponentene (A), (B), (C) og (D) , samt en forsøksprøve til området 2,4 til 3,0: (F) en fargeskala for å sammenligne enhver farge som kan være en stabilisert farge og som kan erholdes i en forsøks-blanding som innbefatter komponentene (A), (B), (C), (D) og (E) ; (G) en steril tørkeinnretning for å samle opp forsøks-prøven; og (H) en forsøksbeholder tilpasset for å blande minst komponentene (A), (B), (C), (D) og forsøksprøven.
14. Forsøkssett ifølge enten krav 12 eller 13,karakterisert vedat minst en av de følgende betingelser gjelder, nemlig: komponent (A) er et peroksyd valgt fra hydrogenperoksyd og urea-hydrogenperoksyd addisjonsforbindelse; komponent (B) er en EDTA basert tungmetall-fjernende forbindelse som er effektiv for å fjerne tungmetaller som potensielt kan nedbryte nevnte peroksyd katalytisk; komponent (C) er en natriumkarbonat/natriumbikarbonat bufferoppløsning med kapasitet til å opprettholde pH ved en verdi i området 9,5 til 14; og/eller når komponent (E) er tilstede omfatter denne sitronsyre.
15. Forsøkssett ifølge et hvert av kravene 12 til 14,karakterisert vedat minst en av beting-elsene (cx) og (P) gjelder, nemlig: (cx) komponent (B) og (C) er tilstede i form av en flytende faseblanding med hverandre; (P) komponent (A) og (B) er tilstede i form av en fastfaseblanding med hverandre.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/554,003 US5098830A (en) | 1990-07-16 | 1990-07-16 | Very rapid detection of fungal infections |
| PCT/US1991/004741 WO1992001373A1 (en) | 1990-07-16 | 1991-07-03 | Very rapid detection of fungal infections |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO920993D0 NO920993D0 (no) | 1992-03-13 |
| NO920993L NO920993L (no) | 1992-05-15 |
| NO308545B1 true NO308545B1 (no) | 2000-09-25 |
Family
ID=24211666
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO920993A NO308545B1 (no) | 1990-07-16 | 1992-03-13 | FremgangsmÕte ved hurtig pÕvisning av soppinfeksjoner, samt et sett for bruk ved en slik fremgangsmÕte |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5098830A (no) |
| EP (1) | EP0491936B1 (no) |
| AU (1) | AU655594B2 (no) |
| CA (1) | CA2065401C (no) |
| DE (1) | DE69114457T2 (no) |
| ES (1) | ES2078538T3 (no) |
| MX (1) | MX9100216A (no) |
| NO (1) | NO308545B1 (no) |
| WO (1) | WO1992001373A1 (no) |
| ZA (1) | ZA915312B (no) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9315440D0 (en) * | 1993-07-26 | 1993-09-08 | Cambridge Res & Innovation | An amine tester for diagnosing bacterial vaginosis and vaginitus |
| GB9510513D0 (en) * | 1994-12-16 | 1995-07-19 | Ind Gmbh | Determining the organic content of a fluid |
| EP0781850A3 (en) * | 1995-12-28 | 1998-08-12 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | Assay utilizing hydrogen peroxide adduct |
| GB9717209D0 (en) * | 1997-08-14 | 1997-10-22 | Aromascan Plc | Condition detector |
| GB9918945D0 (en) | 1999-08-12 | 1999-10-13 | Biocatalysts Ltd | Hydrogen peroxide monitoring |
| US6583722B2 (en) | 2000-12-12 | 2003-06-24 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wetness signaling device |
| US6603403B2 (en) | 2000-12-12 | 2003-08-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Remote, wetness signaling system |
| US6494833B1 (en) | 2001-06-19 | 2002-12-17 | Welch Allyn, Inc. | Conditioning apparatus for a chemical sensing instrument |
| WO2003063693A2 (en) * | 2002-01-31 | 2003-08-07 | Expressive Constructs, Inc. | Method for detecting microorganisms |
| AU2003291135A1 (en) * | 2002-11-26 | 2004-06-18 | Expressive Constructs, Inc. | Methods, biosensors and kits for detecting and identifying fungi |
| US20050042711A1 (en) * | 2003-08-11 | 2005-02-24 | George Mason University | Field test for fungi |
| ATE417126T1 (de) * | 2004-03-22 | 2008-12-15 | Evonik Goldschmidt Gmbh | Verfahren und testkit zum nachweis und zur quantifizierung von organismen |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4021538A (en) * | 1975-09-29 | 1977-05-03 | Yu Ruey J | Method for producing pigmentation in hair or skin |
| US4140580A (en) * | 1976-05-03 | 1979-02-20 | Mcdonnell Douglas Corporation | Broth for indicating presence of candida yeast and other yeasts and fungi |
| US4874695A (en) * | 1983-03-08 | 1989-10-17 | American Home Products Corp. | Rapid indentification of yeast and other fungal microorganisms by enzyme detection |
| US4847128A (en) * | 1984-03-22 | 1989-07-11 | Wadley Technologies, Inc. | Miniaturized yeast identification system |
| US4728607A (en) * | 1984-03-22 | 1988-03-01 | J. K. And Susie L. Wadley Research Institute And Blood Bank | Miniaturized yeast identification system |
| EP0213156A1 (en) * | 1985-02-11 | 1987-03-11 | Travenol-Genentech Diagnostics | Stabilized enzyme substrate solutions |
-
1990
- 1990-07-16 US US07/554,003 patent/US5098830A/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-07-03 EP EP91914292A patent/EP0491936B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-07-03 CA CA002065401A patent/CA2065401C/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-07-03 WO PCT/US1991/004741 patent/WO1992001373A1/en active IP Right Grant
- 1991-07-03 DE DE69114457T patent/DE69114457T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-07-03 ES ES91914292T patent/ES2078538T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-07-03 AU AU83280/91A patent/AU655594B2/en not_active Ceased
- 1991-07-09 ZA ZA915312A patent/ZA915312B/xx unknown
- 1991-07-15 MX MX9100216A patent/MX9100216A/es unknown
-
1992
- 1992-03-13 NO NO920993A patent/NO308545B1/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5098830A (en) | 1992-03-24 |
| DE69114457D1 (de) | 1995-12-14 |
| NO920993L (no) | 1992-05-15 |
| AU655594B2 (en) | 1995-01-05 |
| CA2065401A1 (en) | 1992-01-17 |
| MX9100216A (es) | 1992-02-28 |
| NO920993D0 (no) | 1992-03-13 |
| ES2078538T3 (es) | 1995-12-16 |
| CA2065401C (en) | 2003-06-10 |
| EP0491936A1 (en) | 1992-07-01 |
| WO1992001373A1 (en) | 1992-02-06 |
| EP0491936B1 (en) | 1995-11-08 |
| DE69114457T2 (de) | 1996-03-21 |
| AU8328091A (en) | 1992-02-18 |
| ZA915312B (en) | 1992-03-25 |
| EP0491936A4 (en) | 1992-08-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lilley et al. | Criteria of intactness and the photosynthetic activity of spinach chloroplast preparations | |
| CN102203588B (zh) | 利用光谱分离,表征和/或标识微生物的方法 | |
| JP2763635B2 (ja) | 生体液中のジアミンの検出 | |
| JP3043063B2 (ja) | 微生物のための沈澱テスト | |
| Fairbridge et al. | The direct colorimetric estimation of reducing sugars and other reducing substances with tetrazolium salts | |
| JPS624120B2 (no) | ||
| NO308545B1 (no) | FremgangsmÕte ved hurtig pÕvisning av soppinfeksjoner, samt et sett for bruk ved en slik fremgangsmÕte | |
| CN107607719B (zh) | 一种测定样品中β-内酰胺酶方法 | |
| Al-Mushrif et al. | A study of the prevalence of hydrogen peroxide generating Lactobacilli in bacterial vaginosis: the determination of H2O2 concentrations generated, in vitro, by isolated strains and the levels found in vaginal secretions of women with and without infection | |
| US5702911A (en) | Diagnostic test composition | |
| US9410179B2 (en) | Diagnostic method for the determination of Helicobacter pylori | |
| WO1999051769A1 (en) | Composition, kit, and method for detecting helicobacter pylori in biopsy | |
| Von Dach | Respiration of a colorless flagellate, Astasia klebsii | |
| US5372935A (en) | Detection of candida | |
| FI91888C (fi) | Menetelmä mykoplasmabakteerien laskemiseksi ja toteamiseksi | |
| CN111307775A (zh) | 一种应用刃天青试剂检测体外3d培养条件下pbmc活性的方法 | |
| Christiaens et al. | Disappointing specificity of the leucocyte-esterase test for the diagnosis of urinary tract infection in general practice | |
| CN117701674B (zh) | 抗黄芩素干扰的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其应用 | |
| US5369013A (en) | Method, reagent mixture and kit for determining the presence of bacterial or somatic cells in urine | |
| CN115372350A (zh) | 一种游离血红素单检双判方法 | |
| Murthy et al. | A simple spectrophotometric assay for urinary leukocyte esterase activity | |
| EP0369041B1 (en) | Method, reagent mixture and kit for determining the presence of bacterial or somatic cells in urine | |
| JONES | A study of the prevalence of hydrogen peroxide generating Lactobacilli in bacterial vaginosis: the determination of H2O2 concentrations generated, in vitro, by isolated strains and the levels found in vaginal secretions of women with and without infection | |
| Hunter | Enzyme Systems in Stylonychia pusulata. I. Cytochemical Studies on the Oxidation of the Dicarboxylic Acid Substrates | |
| Yermak | Evaluation and development of a new diagnostic tool for early and reliable diagnostic of prosthetic joint infection |