CN112890194A - 一种大同黄花菜营养元浆及其制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种大同黄花菜营养元浆及其制备工艺。本发明提供了一种制备大同黄花菜提取物的液态产品的方法，包括如下步骤：A)用木瓜蛋白酶酶解由蛹虫草、黄花菜和黄米组成的原料，得到的酶解产物，即为大同黄花菜提取物；B)收集所述大同黄花菜提取物的液体成分，用所述大同黄花菜提取物的液体成分制备大同黄花菜提取物的液态产品。本发明中产品含18种常见氨基酸，其中8种人体必需氨基酸含量为120.46‑218.71mg/100mL，虫草素含量为13.64‑20.46mg/100g，为一种富含虫草素的零脂肪、低热量、含人体8种必需氨基酸的全面均衡营养功能型饮品。

Description

一种大同黄花菜营养元浆及其制备工艺
技术领域
本发明涉及食品及制备工艺，具体涉及一种大同黄花菜营养元浆及其制备工艺。
背景技术
黄花菜(Hemerocallis citrina)，别名萱草，又名金针菜、忘忧草，属白合科(Liliaceae)多年生草本植物，在中国有三千多年的栽培与食用历史。黄花菜指6-8月份萱草盛产花期采取的大花蕾或刚开的鲜花，其鲜甜味美，荤素俱佳，是中国的一种独具特色的蔬菜。黄花菜营养丰富，含有糖类、蛋白质、维生素、无机盐及多种人体必需的氨基酸，属于典型的高蛋白、低热量、富含维生素及矿物质的保健蔬菜，与香菇、木耳、冬笋一起被誉为中国干菜中的四大珍品。与其他蔬菜相比，黄花菜在Ca、P、Fe、Zn和Se等矿物元素以及粗纤维的含量方面较为突出。作为一种可食花卉，黄花菜中常见挥发性成分有多种，其中大量的醇和酯类香气物质赋予其独特的怡人风味。在中国，黄花菜的食疗保健应用历史悠久，《本草纲目》记载黄花菜利胸膈、安五脏、轻身明目、治小便赤涩、解烦热、除酒瘟、令人好欢无忧；《滇南本草》记载黄花菜补阴血、止腰痛、治崩漏和乳汁不通。黄花菜的主要成分卵磷脂，素有“细胞保护神”和“血管清道夫”的美称。现代科学研究证明，黄花菜在生物学上具有抑制纤维原细胞增生、阻止癌细胞增殖、口服抗抑郁活性、腹腔注射促睡眠活性等多种保健功能，于医药、饮食领域具有广泛应用前景。但目前黄花菜多以汤吃、炒食，鲜食、干制，或制作调味菜，其他开发利用形式鲜见研究报道。
蛹虫草(Cordyceps militaris)，又称北冬虫夏草，属子囊菌亚门、核菌纲、球壳目、麦角菌科、虫草属，与冬虫夏草同属异种，其活性成分和药理作用与冬虫夏草相似，具有补肺益肾、滋补强身、抗癌、抗疲劳、抗衰老、提高免疫力等功效，其中尤以虫草素、虫草酸和虫草多糖的药用价值最为显著。目前，以蛹虫草为原料的产品多以酒类、保健品形式呈现，形式较为单一不利于所有人群食用。
黄米(Panicum miliaceum)，又称黄小米、糜子、黍，是禾本科黍属一类籽型小的谷物和饲料作物，主要分布于干旱、半干旱、土壤肥力低的地区，具有生长期短，耐寒耐旱耐贫瘠的特性，是山西省产量丰富的小杂粮之一。黄米是由糜子籽实去皮后得到的，其胚乳部分含有丰富的碳水化合物、脂肪、蛋白质、维生素和矿质元素，其常量元素及微量元素的含量都高于大米、小麦和玉米，且含有较多的人体可利用有机硒。是高铁、高锌、高钙和富含纤维素的天然绿色食品，富含各种生理功能的活性物质，是一种营养价值很高的植物源。在我国北方有黄米油馒、黄米馒、黄米稠酒等，黄米无论煮饭、熬粥、包粽子、作枣糕都别具风味，尤其是用黄米面作的炸糕、切糕更受人欢迎。还可以医用，在中医中被列为“补中益气”的具有食疗价值的食品。经常食用黄米食品，可以有效防治胃肠道肿瘤和冠心病。在我国北方的干旱地区，黄米及其加工制品一直以来是其产区的主要口粮和保健食品。然而现有产品加工技术简单，导致产品口感不好、适口性差，是影响黄米产品开发推广的一个重要因素，就连应用最广的风味小吃，也多停留在农家餐桌上。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种制备大同黄花菜提取物的液态产品的方法。
本发明提供的方法，包括如下步骤：
A)用木瓜蛋白酶酶解由蛹虫草、黄花菜和黄米组成的原料，得到的酶解产物，即为大同黄花菜提取物；
B)收集所述大同黄花菜提取物的液体成分，用所述大同黄花菜提取物的液体成分制备大同黄花菜提取物的液态产品。
上述方法中，步骤A中，所述木瓜蛋白酶与所述原料的配比为1600U/1g-3200U/1g。
上述方法中，步骤A中，所述木瓜蛋白酶的酶解温度为55℃-60℃，酶解时间为2h-3h，
上述方法中，步骤A中，
所述黄花菜、所述蛹虫草和所述黄米的质量份数比为1-2：1-2：1-2。
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为2：1：1；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为1：1：2；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为1：2：1；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为2：2：1；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为2：1：2。
上述方法中，步骤A中，
所述蛹虫草为蚕蛹虫草；本发明所使用的蛹虫草是以新鲜活体蚕蛹，采用微量注射器于腹部接入蛹虫草菌种，在一定的温度、湿度和光照下，经人工培育获得的蚕蛹虫草。
上述方法中，所述黄花菜为冻干黄花菜。本发明所使用的黄花菜，原料黄花菜产自山西省大同市。大同市属温带半干旱气候，日照充足，昼夜温差大，特别适宜黄花菜生长。火山喷发形成的的富锌富硒土壤条件，所产大同黄花菜品质在全国名列几大产区榜首，具有色泽金黄、蕾长肉厚、味道清香、脆嫩可口的特征。大同黄花营养丰富，富含蛋白质、碳水化合物，特别是钙、磷、铁、胡萝卜素、硫胺素、尼克酸含量很高；大同黄花营养丰富，富含蛋白质(13.5～15.2g/100g)、氨基酸(8.43～9.12g/100g)、富硒(0.0092～0.015mg/kg)、富锌(36～40mg/kg)，特别是钙(2.62×103～4.76×103mg/kg)、铁(54～98mg/kg)含量很高，膳食纤维含量大于7.7g/100g。
所述黄米为熟化黄米。本发明所使用的黄米是由黄色糜子脱壳后获得，属糥性黄米，又称软黄米、粘黄米，多种植于我国包头、东胜、榆林、延安一线以东地区，种植土质深厚疏松、排水良好，生育期95天，千粒重7.9g，米黄色，米粒粉质、不透明，黏性大，适口性好，用途较广，常将其磨面作糕点，也用于酿酒。
上述方法中，所述步骤B中，所述用所述大同黄花菜提取物的液体成分制备大同黄花菜提取物的液态产品包括如下步骤：将所述大同黄花菜提取物的液体依次经过蜂蜜调制、胶体磨、过滤、均质、灭菌，得到大同黄花菜提取物的液态产品。
本发明蜂蜜具体采用槐花蜜购自山西神露蜂产品有限公司，富含葡萄糖、果糖、维生素、矿物质和氨基酸等多种营养成分。
由上述方法制备的大同黄花菜提取物的产品也是本发明保护的范围。
本发明另一个目的是提供一种制备大同黄花菜提取物的方法。
本发明提供的方法，其包括上述方法中的步骤A。
本发明针对目前黄花菜、蛹虫草及黄米深加工工艺的短缺及相关深加工产品的空白，基于蛹虫草的独特功效，并赋予其更高利用和功能的黄花菜和黄米，通过将传统工艺与现代生物酶解技术相结合，首次以黄花菜、蛹虫草和黄米为主要原料，研制出一种大同黄花菜营养元浆，以达到黄花菜、蛹虫草和黄米的三重利用，充分利用我省黄花产业及黄米杂粮资源优势，提升附加值，对打造出具有区域资源特色功能产品，延伸相关产业链、保障相关价值链，让农民增收有保障。
本发明基于黄花菜、蛹虫草和黄米的营养特性及保健价值，旨在将区域性美食拓展为全民族美食，通过精深加工开发具有高附加值的功能产品，尚属首次。
本发明物料经粉碎、酶解、离心后，得到的上清液经调配、均质、灭菌、灌装后制得大同黄花菜营养元浆，沉淀另做他用，最大限度地实现了原材料的全部利用，杜绝了生产废弃物对环境的污染，具有以下优点：
(1)本发明方法独特，工艺流程简单，操作方便，物料经粉碎、酶解、离心后，得到的上清液经调配、均质、灭菌、灌装后制得大同黄花菜营养元浆，沉淀另做他用，最大限度地实现了原材料的全部利用，杜绝了生产废弃物对环境的污染。
(2)本发明制备的大同黄花菜营养元浆具有黄花菜、蛹虫草和黄米的特有的风味，无异味，且产品均匀度更好，感官品质稳定；口感为酸甜适宜，清润爽口，组织状态为不分层，色泽为浅棕色，具有较好的感官特性。
(3)本发明通过科学合理膳食搭配技术，选取高蛋白低热量富含维生素及矿物质的黄花菜、膳食纤维含量高的黄米和含有虫草素和虫草多糖等多种生物活性物质的蛹虫草，作为制作大同黄花菜营养元浆的主要原料，可增强单一品种的功效，使大同黄花菜营养元浆同时含有黄花菜、蛹虫草和黄米的营养、生理活性及功效成分，兼具三者的营养和药用保健功能，营养全面、膳食纤维含量高、蛋白质含量高，以此来满足人们对健康营养保健的功能食品的需求。
(4)本发明中产品含18种常见氨基酸，其中8种人体必需氨基酸含量为120.46-218.71mg/100mL，虫草素含量为13.64-20.46mg/100g，为一种富含虫草素的零脂肪、低热量、含人体8种必需氨基酸的全面均衡营养功能型饮品。
(5)本发明制备的大同黄花菜营养元浆具有调节免疫、促进睡眠、抗氧化、促进胃肠蠕动、维持心血管***正常结构和功能等功效，适于所有人群饮用。通过本发明制得的大同黄花菜营养元浆具有营养丰富，酸甜适口等特点。
下面结合实施例对本发明作进一步地说明。
附图说明
图1为不同木瓜蛋白酶用量对蛋白质水解度(DH％)的影响。
图2为不同温度下酶解产物中蛋白质水解度的变化情况。
图3为不同酶解时间下酶解产物中蛋白质水解度的变化情况。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
在以下的叙述中，为了使更好地理解本申请而提出了许多技术细节。但是,本领域的普通技术人员可以理解，即使没有这些技术细节和基于以下各实施方式的种种变化和修改，也可以实现本申请的技术方案。
下述实施例中的制备方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中的黄花菜如无特殊说明，均为冻干黄花菜，购自大同冰华食品有限公司，该公司的黄花菜均是山西大同云州区有机黄花菜生产基地新鲜采摘的黄花菜冻干而成，其黄花菜的膳食纤维含量大于7.7g/100g。
下述实施例中面粉为市售小麦面粉(华龙农庄特精小麦粉)；酵母为安琪高活性干酵母(活菌数≥200亿/克)。
下述实施例中的桑蚕(Bombyx mori Linnaeus)蛹记载在如下文献：郭尚,徐莉娜,李艳婷,周伟,陈楠,张生万,李银生.桑蚕蛹虫草高效栽培技术.食用菌,2019,41(3):46-48。
下述实施例中采用的蛹虫草菌种为如下文献中的8号蛹虫草菌株：郭尚,徐莉娜,李艳婷,周伟,陈楠,张生万,李银生.蛹虫草优良菌株的筛选[J].山西农业大学学报(自然科学版),2020,40(01):17-21。
下述实施例中蛹虫草液体培养基：马铃薯20g，葡萄糖20g，蛋白陈20g，KH2PO41g，MgSO4 0.5g，蒸馏水1 000mL，pH值自然，121℃灭菌30min。
下述实施例中蛹虫草液体菌种(浓度30％的孢子液)：蛹虫草在蛹虫草液体培养基培养得到的蛹虫草液体菌种，其中浓度30％的孢子液。
下述实施例中如无特殊说明，感官检测均为单盲，选取100名实验者进行尝试，对其口感进行打分，满分100分。以平均分作为测试结果，所述实验者为本领域的相关专业人员。
实施例1、大同黄花菜提取物的制备
一、提取物配方：
黄花菜粉 2.0重量份
蛹虫草粉 1.0重量份
黄米粉 1.0重量份
二、提取物的制备
1、提取物原料的制备
精选冻干黄花菜、蚕蛹虫草、黄米；
1)蛹虫草粉按照如下方法制备：
新鲜活体桑蚕(Bombyx mori Linnaeus)蛹，采用微量注射器于腹部接种蛹虫草液体菌种(浓度30％的孢子液)，接种后，立即封严瓶口；
菌丝培养：接种完成后逐一排放在床架上发菌，发菌持续20d左右，温度保持15℃～18℃遮光，直至蛹体与基质表面布满白色点即进入子座培养期。
子座培养：菌丝成熟后，由白色逐渐转成橘黄色时，表明菌丝营养生长已经完成。子座生长最适温度10℃～25℃。此时，增加光照同时给予10℃左右的温差刺激，促进大转色。当蛹体四周与基质表面伴有大小不一的圆丘状橘黄色***物时，为子座开始形成。此时室内温度保持18℃～23℃，空气相对湿度80％～90％。湿度太大容易产生气生菌丝，对子实体生长不利；湿度太低容易使培养基失水而影响产量。在子座形成之后，应根据实际情况适当调整光源方向，保证受光均匀。
整个培养期间要适当通风，但不可揭掉封口塑料薄膜，可在薄膜上用针穿刺小孔，以利于气体交换。
在管理正常的情况下，从接种到子囊成熟需要40d左右，菌丝扭结到子实体成熟需要20d左右，每个虫体可生长子座2～7支，但只有3支左右商品性状最好，生物效率在30％左右。当子座呈橘红色或橘黄色棒状，高度达5～8cm，头部出现龟裂状花纹，表面可见黄色粉末状物，采收时蛹体和子实体不分离，即蚕蛹虫草；
将所采收蚕蛹虫草室温(25℃)自然干燥，然后粉碎，过60目筛，得到蛹虫草粉。
2)黄花菜粉
黄花菜粉为将冻干黄花菜粉碎，过60目筛，得到黄花菜粉(粒径小于250μm)；
3)黄米粉
黄米粉为将熟化黄米粉碎，过60目筛，得到黄米粉。
熟化黄米：将商购黄米文火加热，翻炒至表面显微黄火色，逸出固有香气，得到熟化黄米；具体条件为文火(160-170℃)炒制微黄色，使失水率约为1.5％。
2、酶解
将上述1获得的黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉按照上述一的配方(分别为500g、250g、250g)混合，得到原料；再向原料中加入去离子水，原料和水的配比为1：15(W/V；g/ml)，得到悬浊液；再将上述悬浊液置于酶解罐中，加入0.2％(质量百分比，具体为木瓜蛋白酶质量g/原料质量g)木瓜蛋白酶(Solarbio公司，Lot No.1014K025，80万u/g，酶活与原料的配比1600U/1g)60℃酶解反应3h，得到酶解产物。在酶解反应过程中间断搅拌，使酶解充分。
3、调配
将上述2得到的15L酶解产物经板式离心(转鼓转速2500r/min,转股直径300mm)，收集液体；再将上述液体打入调配罐，加热至55℃；再搅拌加入1％槐花蜜(槐花蜜质量g/液体体积ml，购自山西神露蜂产品有限公司)，进行调配；再过胶体磨后依次经钢丝网过滤器(孔径大小0.2mm)、精密过滤器(截留孔径0.2μm)过滤，收集滤液。
4、均质
将上述3得到的滤液在60℃、压力40Mpa下均质1min，得到混合液。
通过均质化操作，使混合液中的悬浮粒子进一步破碎，大小均一、不分层沉淀，均匀稳定的分散在混合液中，保持混合液的均匀浑浊度。
5、灭菌
将上述4得到的混合液进行超高温瞬时灭菌，140℃灭菌4s，出口温度50℃；
6、灌装
将上述5得到的灭菌后混合液在无菌条件下，铝塑软包装进行分装，成品即为所制备得到提取物，命名为大同黄花菜营养元浆。
实施例2、大同黄花菜提取物的制备
一、提取物配方：
黄花菜粉 1.0重量份
蛹虫草粉 1.0重量份
黄米粉 2.0重量份
二、提取物的制备方法
1、提取物原料的制备
与实施例1的制备方法相同，得到黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉。
2、酶解
将上述1获得的黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉按照上述一的配方(分别为250g、250g、500g)混合，得到原料；再向原料中加入去离子水，原料和水的配比为1：20(W/V；g/ml)，得到悬浊液；再将上述悬浊液置于酶解罐中，加入0.3％(质量百分比，具体为木瓜蛋白酶质量g/原料质量g)木瓜蛋白酶(Solarbio公司，Lot No.1014K025，80万u/g，酶活与原料的配比2400U/1g)55℃酶解反应2h，得到酶解产物。在酶解反应过程中间断搅拌，使酶解充分。
3、调配
将上述2得到的20L酶解产物经板式离心(转鼓转速2500r/min,转股直径300mm)，收集液体；再将上述液体打入调配罐，加热至50℃；再搅拌加入2％槐花蜜(槐花蜜质量g/液体体积ml)，进行调配，过胶体磨后依次经钢丝网过滤器(孔径大小0.2mm)、精密过滤器(截留孔径0.2μm)过滤，收集滤液。
4、均质
将上述3得到的滤液在70℃、压力30Mpa下均质1min，得到混合液。
通过均质化操作，使混合液中的悬浮粒子进一步破碎，大小均一、不分层沉淀，均匀稳定的分散在混合液中，保持混合液的均匀浑浊度。
5、灭菌
将上述4得到的混合液进行超高温瞬时灭菌，140℃灭菌4s，出口温度50℃；
6、灌装
将上述5得到的灭菌后混合液在无菌条件下，铝塑软包装进行分装，成品即为所制备得到提取物，命名为大同黄花菜营养元浆。
实施例3、大同黄花菜提取物的制备
一、提取物配方：
黄花菜粉 1.0重量份
蛹虫草粉 2.0重量份
黄米粉 1.0重量份
二、提取物的制备方法
1、提取物原料的制备
与实施例1的制备方法相同，得到黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉。
2、酶解
将上述1获得的黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉按照上述一的配方(分别为250g、500g、250g)混合，得到原料；再向原料中加入去离子水，原料和水的配比为1：10(W/V；g/ml)，得到悬浊液；再将上述悬浊液置于酶解罐中，加入0.4％(质量百分比，具体为木瓜蛋白酶质量g/原料质量g)木瓜蛋白酶(Solarbio公司，Lot No.1014K025，80万u/g，酶活与原料的配比3200U/1g)58℃酶解反应3h，得到酶解产物。在酶解反应过程中间断搅拌，使酶解充分。
3、调配
将上述2得到的9L酶解产物经板式离心(转鼓转速2500r/min,转股直径300mm)，收集液体；再将上述液体打入调配罐，加热至60℃；再搅拌加入1％槐花蜜(槐花蜜质量g/液体体积ml)，进行调配，过胶体磨后依次经钢丝网过滤器(孔径大小0.2mm)、精密过滤器(截留孔径0.2μm)过滤，收集滤液。
4、均质
将上述3得到的滤液在80℃、压力40Mpa下均质1min，得到混合液。
通过均质化操作，使混合液中的悬浮粒子进一步破碎，大小均一、不分层沉淀，均匀稳定的分散在混合液中，保持混合液的均匀浑浊度。
5、灭菌
将上述4得到的混合液进行超高温瞬时灭菌，140℃灭菌4s，出口温度50℃；
6、灌装
将上述5得到的灭菌后混合液在无菌条件下，铝塑软包装进行分装，成品即为所制备得到提取物，命名为大同黄花菜营养元浆。
实施例4、大同黄花菜提取物的制备
一、提取物配方：
黄花菜粉 2.0重量份
蛹虫草粉 2.0重量份
黄米粉 1.0重量份
二、提取物的制备方法
1、提取物原料的制备
与实施例1的制备方法相同，得到黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉。
2、酶解
将上述1获得的黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉按照上述一的配方(分别为500g、500g、250g)混合，得到原料；再向原料中加入去离子水，原料和水的配比为1：15(W/V；g/ml)，得到悬浊液；再将上述悬浊液置于酶解罐中，加入0.2％(质量百分比，具体为木瓜蛋白酶质量g/原料质量g)木瓜蛋白酶(Solarbio公司，Lot No.1014K025，80万u/g，酶活与原料的配比1600U/1g)60℃酶解反应2h，得到酶解产物。在酶解反应过程中间断搅拌，使酶解充分。
3、调配
将上述2得到的15L酶解产物经板式离心(转鼓转速2500r/min,转股直径300mm)，收集液体；再将上述液体打入调配罐，加热至55℃；再搅拌加入2％槐花蜜(槐花蜜质量g/液体体积ml)，进行调配，过胶体磨后依次经钢丝网过滤器(孔径大小0.2mm)、精密过滤器(截留孔径0.2μm)过滤，收集滤液。
4、均质
将上述3得到的滤液在80℃、压力30Mpa下均质1min，得到混合液。
通过均质化操作，使混合液中的悬浮粒子进一步破碎，大小均一、不分层沉淀，均匀稳定的分散在混合液中，保持混合液的均匀浑浊度。
5、灭菌
将上述4得到的混合液进行超高温瞬时灭菌，140℃灭菌4s，出口温度50℃；
6、灌装
将上述5得到的灭菌后混合液在无菌条件下，铝塑软包装进行分装，成品即为所制备得到提取物，命名为大同黄花菜营养元浆。
实施例5、大同黄花菜提取物的制备
一、提取物配方：
蛹虫草粉 1.0重量份
黄花菜粉 1.0重量份
黄米粉 1.0重量份
二、提取物的制备方法
1、提取物原料的制备
与实施例1的制备方法相同，得到黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉。
2、酶解
将上述1获得的黄花菜粉、蛹虫草粉和黄米粉按照上述一的配方(分别为500g、250g、500g)混合，得到原料；再向原料中加入去离子水，原料和水的配比为1：20(W/V；g/ml)，得到悬浊液；再将上述悬浊液置于酶解罐中，加入0.4％(质量百分比，具体为木瓜蛋白酶质量g/原料质量g)木瓜蛋白酶(Solarbio公司，Lot No.1014K025，80万u/g，酶活与原料的配比3200U/1g)55℃酶解反应3h，得到酶解产物。在酶解反应过程中间断搅拌，使酶解充分。
3、调配
将上述2得到的20L酶解产物经板式离心(转鼓转速2500r/min,转股直径300mm)，收集液体；再将上述液体打入调配罐，加热至60℃；再搅拌加入2％槐花蜜(槐花蜜质量g/液体体积ml)，进行调配，过胶体磨后依次经钢丝网过滤器(孔径大小0.2mm)、精密过滤器(截留孔径0.2μm)过滤，收集滤液。
4、均质
将上述3得到的滤液在60℃、压力50Mpa下均质1min，得到混合液。
通过均质化操作，使混合液中的悬浮粒子进一步破碎，大小均一、不分层沉淀，均匀稳定的分散在混合液中，保持混合液的均匀浑浊度。
5、灭菌
将上述4得到的混合液进行超高温瞬时灭菌，140℃灭菌4s，出口温度50℃；
6、灌装
将上述5得到的灭菌后混合液在无菌条件下，铝塑软包装进行分装，成品即为所制备得到提取物，命名为大同黄花菜营养元浆。
实施例6、提取物的制备方法中各参数的优化摸索
(一)、木瓜蛋白酶酶解工艺参数的确定试验
1、单因素实验
(1)对木瓜蛋白酶用量(C)的考察
木瓜蛋白酶用量对于蛋白质水解度的影响是在一定范围内的，适当的增加木瓜蛋白酶用量，可以有效提高蛋白质水解度。
采用实施例1中的提取方法，不同的是将木瓜蛋白酶用量设置为0.1％≤C<0.2％、0.2％≤C≤0.4％、0.4％<C≤0.6％，其余步骤一致。C为木瓜蛋白酶质量g/原料质量g的百分比。
检测酶解产物中蛋白质水解度的变化情况(方法参考：邓桂兰，李军平，南瓜绿豆复合饮料的研制，饮料工业，2017,20(4)：28-34.)，结果如图1所示。
Figure BDA0002935615860000101
对不同木瓜蛋白酶用量得到的提取物(大同黄花菜营养元浆)的感官评价，结果如表1所示。
表1为不同木瓜蛋白酶用量的大同黄花菜营养元浆的感官评价
Figure BDA0002935615860000102
Figure BDA0002935615860000111
根据图1和表1可知，木瓜蛋白酶用量在0.1％-0.4％范围内时，蛋白质水解度随酶用量的增加而明显增加，当木瓜蛋白酶用量达到0.4％后，蛋白质水解度变化平缓，而当酶用量为0.4％<C≤0.6％时，大同黄花菜营养元浆呈棕色，口感一般，带有苦涩味，故选择酶用量为0.2％≤C≤0.4％较合适，即酶活与原料的配比1600U/g-3200U/g。
(2)对酶解温度(t)对考察
木瓜蛋白酶一般最适温度为50-60℃左右，酶解温度会对大同黄花菜营养元浆的蛋白质水解度及产品风味产生较大影响。
采用实施例1中的提取方法，不同的是将酶解温度(t)设置为50℃≤t<55℃、55℃≤t≤60℃、60℃<t≤65℃，其余步骤一致。
检测酶解产物中蛋白质水解度的变化情况，结果如图2所示。
对不同酶解温度得到的提取物(大同黄花菜营养元浆)的感官评价，结果如表2所示。
表2为酶解温度的大同黄花菜营养元浆的感官评价
Figure BDA0002935615860000112
根据图2和表2可知，在温度50-60℃范围内，蛋白质水解度随着温度的升高而逐渐提高，至温度为55℃≤t≤60℃时水解度达到最大值，当温度继续上升，水解度下降。当酶解温度为50℃≤t<55℃时，大同黄花菜营养元浆稍微分层、香气不足、带少许杂味，而当酶解温度为60℃<t≤65℃时，大同黄花菜营养元浆口感一般，带有苦涩味，降低了其感官评价。故选择55℃≤t≤60℃为较适酶解温度。
(3)对酶解时间(t)对考察
采用实施例1中的提取方法，不同的是将酶解时间(t)设置为1h≤t<2h、2h≤t≤3h、3h<t≤4h，其余步骤一致。
检测酶解产物中蛋白质水解度的变化情况，结果如图3所示。
对不同酶解时间得到的提取物(大同黄花菜营养元浆)的感官评价，结果如表3所示。
表3为酶解时间(t)的大同黄花菜营养元浆的感官评价
Figure BDA0002935615860000121
根据图3和表3可知，酶解时间在1-3h范围内，随着时间的延长蛋白水解度较快上升，在2h≤t≤3h时蛋白水解速率已较大，继续延长酶解时间蛋白水解度增长趋势减弱趋于平缓，且酶解时间为3h<t≤4h时，大同黄花菜营养元浆呈棕色，口感降低，故选择水解时间为2h≤t≤3h较好。
2、正交试验
以木瓜蛋白酶用量、酶解温度、酶解时间3因素为因素，选用采用L9(34)正交表，做正交试验，以蛋白质水解度作为指标，确定木瓜蛋白酶酶解最优条件，每个实验组合重复三次，结果取其平均值，正交试验因素水平表见表4，正交试验结果见表5，方差分析结果见表6。
表4为正交试验因素水平表
因素\水平 A木瓜蛋白酶用量C/％ B酶解温度t/℃ C酶解时间t/h
1 0.1％≤C<0.2％ 50℃≤t<55℃ 1h≤t<2h
2 0.2％≤C≤0.4％ 55℃≤t≤60℃ 2h≤t≤3h
3 0.4％<C≤0.6％ 60℃<t≤65℃ 3h<t≤4h
表5为木瓜蛋白酶酶解最优条件正交试验结果
Figure BDA0002935615860000131
表6为木瓜蛋白酶酶解最优条件正交试验方差分析表
Figure BDA0002935615860000132
Figure BDA0002935615860000141
由表5、表6实验数据分析可知，影响木瓜蛋白酶酶解效果的因素由大到小排列依次为木瓜蛋白酶用量＞酶解温度＞酶解时间。最优酶解条件为A2B2C2，即木瓜蛋白酶用量为0.2％-0.4％，即酶活与原料的配比1600U/g-3200U/g，酶解温度为55℃-60℃，酶解时间为2h-3h，在该条件下蛋白质水解度为16.144％左右。
(二)、黄花菜不同处理方式下的营养成分比较
试验材料采摘于山西大同云州区有机黄花菜生产基地。材料包括新鲜黄花菜，烘干黄花菜，冻干黄花菜。
1、材料预处理
烘干黄花菜：山西大同云州区有机黄花菜生产基地新鲜采摘的黄花菜实验室模拟自然烘干环境：105℃杀青15分钟，40℃烘8个小时，100g新鲜黄花菜烘干得到16.2g样品。
冻干黄花菜：山西大同云州区有机黄花菜生产基地新鲜采摘的黄花菜按照如下方式进行冻干，具体操作程序如下表7，从阶段2开始启动真空泵。
表7为操作程序
Figure BDA0002935615860000142
Figure BDA0002935615860000151
2、试验方法
将上述1的各种处理材料按照如下方法检测，可溶性蛋白含量按照考马斯亮蓝G-250染色法(BRADFORD M M.A rapid and sensitive method for the quantitation ofmicrogram quantities of protein utilizing the principle of protein-dyebinding.Anal.Biochem.1976,(72):248–254.)，总糖含量采用NDS法(AURISANO N,BERTANIA,REGGIANI R.Involvement of calcium and calmodulin in protein and amino acidmetabolism in rice roots under anoxia.Plant Cell Physiol,1995,36:1087-1088.DOI:10.1080/11263509509440949.)，黄酮含量用亚硝酸钠硝酸铝比色法[耿琳琳.超声协调静电场提取黄花菜中总黄酮的研究[D].2017,华南理工大学,硕士学位论文.)，抗坏血酸采用钼蓝比色法(高俊凤.植物生理学实验指导[M].北京:高等教育出版社,2006,211-219)。新鲜黄花菜经干燥处理后，得知1g烘干样品相当于6.17g新鲜样品，1g冻干样品相当于5.66g新鲜样品，换算得等质量条件下，不同处理样品中营养物质含量(表8)结果如下：
由表8可以看出，新鲜黄花菜中可溶性蛋白含量为2.17mg g-1，与新鲜样品相比，将黄花菜冻干处理后，可溶性蛋白含量为1.99mg g-1，无显著变化；而将黄花菜烘干处理后，其可溶性蛋白含量为0.24mg g-1，差异显著。
由表8可以看出，新鲜黄花菜中总糖含量为8.9％，而烘干处理、冻干处理总糖含量分别为10.21％、10.23％，与新鲜样品相比，其总糖含量均显著增加。
由表8可以看出，新鲜黄花菜中黄酮含量为20.53mg 100g-1，而烘干处理和冻干处理黄酮含量分别为8.06和18.66mg g-1。
由表8可以看出，新鲜黄花菜中抗坏血酸含量为0.81mg 100g-1，冻干处理类抗坏血酸含量为0.76mg g-1，而烘干处理样品中含量为0.24mg 100g-1，与鲜样、冻干相变化显著。
表8为等质量条件下营养物质含量
Figure BDA0002935615860000161
由表8可知，冻干黄花菜样品中总糖含量均高于新鲜样品，同时与烘干样品相比，冻干样品中可溶性蛋白、总黄酮、抗坏血酸成分的含量与新鲜样品均无显著差异。所以，在黄花菜采摘期短，无法周年性生产的先天不足下，本发明使用冻干样品作为原料来源，弥补了制约黄花菜无法周年加工的不足。
(三)、黄米不同处理方式下的营养成分比较
1、对黄米进行预处理：
(1)炒黄米(熟化黄米)：黄米文火加热，翻炒至变色7-8成熟，逸出固有香气，得到熟化黄米；具体条件为文火(160-170℃)炒制微黄色，失水率为1.5％，将其磨粉；
(2)生黄米：商购黄米直接磨粉；
(3)泡黄米：商购黄米在水(米：水的质量比＝1：1)中浸泡12h，磨浆。
2、试验方法
淀粉含量测定用酶水解法(参考《GB 5009.9-2016食品中淀粉含量的测定》)；慢消化淀粉含量测定用酶水解法(参考文献缪铭等的慢消化淀粉体外测定方法的探讨)；可溶性蛋白含量测定用考马斯亮蓝法；脂肪含量测定用酸水解法；膳食纤维含量测定用酶解法(参考《GB 5009.88-2014食品中膳食纤维含量的测定》)；总黄酮含量测定用分光光度法(参考文献刘艳芳等的药用真菌桑黄总黄酮测定方法研究)。
结果如下：
表9为黄米不同处理方式下的营养成分比较
Figure BDA0002935615860000162
Figure BDA0002935615860000171
表10不同处理黄米单盲实验的感官评价
Figure BDA0002935615860000172
由表9可知，炒黄米与干黄米的各项营养成分含量相近，均高于浸泡黄米，且由表10可知，炒黄米感官评价高于干黄米，故选择炒黄米。
(四)、不同培养基对北虫草子实体营养的影响
菌种：蛹虫草(Cordyceps militaris)8号蛹虫草菌株。
培养基质：蚕蛹、大米、小麦。
蛹虫草液体培养基：马铃薯20g，葡萄糖20g，蛋白陈20g，KH2PO4 1g，MgSO40.5g，蒸馏水1 000mL，pH值自然，121℃灭菌30min。
固体培养基：将培养基质(大米或小麦)30g放入培养瓶中，加入30mL蛹虫草液体培养基，121℃灭菌30min。
1、子实体培育方法
1)接种
接种工具、菌种瓶外壁、操作人员双手等，用75％酒精擦拭或浸沾消毒。接种前用优质气雾消毒剂或常规方法对接种室密闭消毒30min，即可穿戴消毒衣服进入接种室接种。
蚕蛹基质接种：接种时选用新鲜活体家蚕蛹，采用微量注射器于腹部接种蛹虫草液体菌种(浓度30％的孢子液)，接种量以蛹体饱满不破裂为宜(每只约0.5mL)，接种后，立即封严瓶口；
大米或小麦固体基质接种：采用消毒的微型喷雾器将蛹虫草液体菌种均匀喷洒在基质(大米或小麦)表面，每瓶接液体种3mL～5mL，接种后，立即封严瓶口。
2)发菌管理
菌丝培养：接种完成后逐一排放在床架上发菌，发菌持续20d左右，温度保持15℃～18℃遮光，直至蛹体与基质表面布满白色点即进入子座培养期。
子座培养：菌丝成熟后，由白色逐渐转成橘黄色时，表明菌丝营养生长已经完成。子座生长最适温度10℃～25℃。此时，增加光照同时给予10℃左右的温差刺激，促进大转色。当蛹体四周与基质表面伴有大小不一的圆丘状橘黄色***物时，为子座开始形成。此时室内温度保持18℃～23℃，空气相对湿度80％～90％。湿度太大容易产生气生菌丝，对子实体生长不利；湿度太低容易使培养基失水而影响产量。在子座形成之后，应根据实际情况适当调整光源方向，保证受光均匀。整个培养期间要适当通风，但不可揭掉封口塑料薄膜，可在薄膜上用针穿刺小孔，以利于气体交换。
3)采收
在管理正常的情况下，从接种到子囊成熟需要40d左右，菌丝扭结到子实体成熟需要20d左右，每个虫体可生长子座2～7支，但只有3支左右商品性状最好，生物效率在30％左右。当子座呈橘红色或橘黄色棒状，高度达5～8cm，头部出现龟裂状花纹，表面可见黄色粉末状物，此时应及时采收，采收时蛹体和子实体不分离，即获得的蚕蛹虫草。
2、生物活性成分检测
1)虫草多糖含量测定
检测方法参考文献：邵波,刘伯言,陈刘欣,温元元,王效琰,翟晓天,周正,李英,赵亚南,司艳红,秦树存.蛹虫草多糖降胆固醇作用的机制探讨[J].中国动脉硬化杂志,2020,28(10):861-866.
葡萄糖标准曲线的制作：取105℃烘干至恒重的葡萄糖20mg放人小烧杯中，加蒸馏水溶解，然后转至500mL容量瓶中，加水定容，即为40ug/mL的葡萄糖标准液。分别取40ug/mL的葡萄糖溶液0,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6,1.8mL至编号为0-8的9支20mL具塞试管中，各加蒸馏水1.8mL,6％的苯酚溶液1.6mL以及浓硫酸7.5mL，摇匀，静置10min，再摇匀，(23士2)℃放置20min后，每组设3个平行样品，用紫外分光光度计在490nm波长测定样品吸光度。横坐标为葡萄糖微克数，纵坐标为吸光度，用excel软件制作葡萄糖标准曲线。
样品多糖含量的测定：分别从50mL的容量瓶中用移液枪取0.2mL提取液至10支20mL具塞试管中，另准备一支20mL具塞试管作为对照，向11支具塞试管中加蒸馏水补至1.8mL。分别加1.6mL的6％的苯酚溶液和7.5mL的浓硫酸至20mL具塞试管中，摇匀，静置10min；再次摇匀，(23士2)℃放置20min后，于490nm测定吸光度。
样品多糖含量//(mg/g)_[提取液的多糖含量(ug)x稀释倍数x 100]/[样品干重(g)x1 000]
2)虫草素含量测定
检测方法参见参考文献：李建平,张铁,曾文波,马小双.不同来源蛹虫草核苷类成分分析[J].中国食用菌,2018,37(05):49-56.
称取2.00g粉碎的样品于离心管中，加人15mL的蒸馏水，在50℃水浴中超声60min，离心取上清液；再向离心管中加人5mL的蒸馏水，混合均匀，水浴超声30min，离心取上清液；然后再加人5mL蒸馏水，混匀水浴超声30min，离心取上清液，将3次离心的上清液合并，用蒸馏水定容25mL，过滤膜进样测定，若浑浊再次离心后过滤膜。采用超高液相色谱法进行检测。
3)虫草酸含量测定
检测方法参见参考文献：李建平,张铁,曾文波,马小双.不同来源蛹虫草核苷类成分分析[J].中国食用菌,2018,37(05):49-56.
提取过程与虫草素测定相同。采用超高液相色谱法进行检测。
4)腺苷含量测定
检测方法参见朱丽娜,刘艳芳,张红霞,周帅,张忠,李传华,高新华,唐庆九.不同来源的蛹虫草子实体活性成分的比较[J].菌物学报,2018,37(12):1695-1706.
采用液相色谱法进行检测。
蛹虫草里主要的生物活性物质是虫草素、虫草酸、腺苷、虫草多糖。不同栽培基质会对蛹虫草的主要活性物质含量产生影响，故采用这四个指标作为评价依据，对三种不同基质栽培的蛹虫草子实体活性成分进行了比较分析，最终确定蚕蛹虫草为最佳添加原料。检测结果如下：
表11为不同培养基对北虫草子实体营养的影响
Figure BDA0002935615860000191
由表11可知，培养基成分对北虫草子实体中生物活性成分影响较大，采用蚕蛹接种，其营养成分远高于大米与小麦基质。
综上所述，冻干黄花、蚕蛹虫草与炒黄米营养成分最佳，故此项目中采用这三者为主要原料进行下一步研究。
实施例7、大同黄花菜营养元浆的感官评定
本实施例选取100名本领域的相关专业人员作为实验者分别对本发明实施例1-5所制备大同黄花菜营养元浆进行尝试，对其口感进行打分，满分100分，评定标准如表12所示。以平均分作为测试结果，评定测试结果表13所示。
表12为测试评定标准
Figure BDA0002935615860000201
表13为评定测试结果
平均分/分
实施例1 94
实施例2 90
实施例3 93
实施例4 97
实施例5 93
由此可见，本发明制备的大同黄花菜营养元浆呈浅棕色，色泽纯正,均匀度好，不分层，具有黄花菜、蛹虫草和黄米独特的滋味和气味，无异味，口感酸甜适宜，具有较好的感官特性。
实施例8、大同黄花菜营养元浆的理化指标测定
对本发明制备方法实施例1-5制备得到的大同黄花菜营养元浆进行成品理化指标检测，检测结果均为：
(1)含18种常见氨基酸，其中8种必需氨基酸含量(mg/100mL)：120.46-218.71，色氨酸含量测定依据GB/T 15400-2018，其余7种必需氨基酸含量测定依据GB5009.124-2016。8种必需氨基酸含量分别为：缬氨酸含量(mg/100mL)：18.9-35.64、异亮氨酸含量(mg/100mL)：7.9-13.41、亮氨酸含量(mg/100mL)：14.6-26.51、苯丙氨酸含量(mg/100mL)：7.31-13.72、赖氨酸含量(mg/100mL)：16.4-29.68、蛋氨酸含量(mg/100mL)：3.75-7.32、苏氨酸含量(mg/100mL)：20.5-35.22、色氨酸含量(mg/100mL)：31.1-57.21。
(2)虫草素(mg/100g)：13.64-20.46，测定依据NY/T 2116-2012。
(3)可溶性固形物：5-10.2％，测定依据GB/T12143。
实施例9、大同黄花菜营养元浆的营养成分测定
对本发明制备方法实施例1-5制备得到的大同黄花菜营养元浆进行营养成分检测，结果为：
(1)能量(kJ/100g)：69-88，测定依据计算法。
(2)蛋白质(g/100g)：0.5-1.1，测定依据GB5009.5-2016第一法。
(3)脂肪(g/100g)：0，测定依据GB5009.5-2016第二法。
(4)碳水化合物(g/100g)：3.5-4.2，测定依据计算法。
(5)钠(mg/100g)：0，测定依据GB5009.91-2017第四法。
以上检测结果符合国家食品相关标准。
由此可见，本发明制备得到的大同黄花菜营养元浆是一种富含虫草素的零脂肪、低热量、含人体8种必需氨基酸的全面均衡营养功能型饮品。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，在不脱离本发明原理的前提下，本技术领域的普通技术人员可以做出若干改进和润饰，均应视本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种制备大同黄花菜提取物的液态产品的方法，包括如下步骤：
A)用木瓜蛋白酶酶解由蛹虫草、黄花菜和黄米组成的原料，得到的酶解产物，即为大同黄花菜提取物；
B)收集所述大同黄花菜提取物的液体成分，用所述大同黄花菜提取物的液体成分制备大同黄花菜提取物的液态产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
步骤A中，所述木瓜蛋白酶与所述原料的配比为1600U/1g-3200U/1g。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
步骤A中，所述木瓜蛋白酶的酶解温度为55℃-60℃，酶解时间为2h-3h。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：
步骤A中，
所述黄花菜、所述蛹虫草和所述黄米的质量份数比为1-2：1-2：1-2；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为2：1：1；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为1：1：2；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为1：2：1；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为2：2：1；
或，所述黄花菜、蛹虫草和黄米的质量份数比为2：1：2。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：
步骤A中，
所述蛹虫草为蚕蛹虫草；
所述黄花菜为冻干黄花菜；
所述黄米为熟化黄米。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：
所述步骤B中，所述用所述大同黄花菜提取物的液体成分制备大同黄花菜提取物的液态产品包括如下步骤：将所述大同黄花菜提取物的液体依次经过蜂蜜调制、胶体磨、过滤、均质、灭菌，得到大同黄花菜提取物的液态产品。
7.由权利要求1-6任一方法制备的大同黄花菜提取物的产品。
8.一种制备大同黄花菜提取物的方法，其包括权利要求1-6任一方法的步骤A。
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