CN112493482A - 一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉及其制备方法 - Google Patents
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述复合营养粉由蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉、红枣粉和低聚半乳糖制得，其中，所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按重量份，由菊苣10‑15份、山楂0.5‑5份和蓝靛果多酚提取液制得，所述蓝靛果多酚提取液是由40‑55份的蓝靛果提取而成，所述红枣粉是由6‑15重量份的红枣制得；所述低聚半乳糖为0.3‑1.5重量份。本发明一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉及其制备方法，主要解决现代配餐粉难于满足调节小肠菌群及屏障，未能调节营养物质消化吸收的问题。
Description
技术领域
本发明涉及食品技术领域，具体涉及一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉及其制备方法。
背景技术
在当代社会较大压力的环境下，人们普遍存在肠道菌群失衡的情况。据研究表明，小肠菌群的种类、丰度及小肠屏障与营养物质特别是脂肪的消化吸收直接相关。目前，因脂肪等一些营养物质过量吸收引发的肥胖、高脂血症、Ⅱ型糖尿病等代谢综合症已成为威胁民众健康的主要问题。因此，在我国饮食结构高脂化的趋势下，能够有效调控脂肪的消化吸收对指导国民营养膳食和提高国民健康水平具有重要意义。
市面上抑制脂肪吸收的产品主要通过作用于胃肠***的胃脂肪酶和胰脂肪酶，抑制脂肪消化吸收，但是抑制脂肪消化吸收的同时破坏了胃肠***内酶平衡，具有一定的副作用，而且无法保证购买渠道的安全性。
在当前快速的生活节奏下，方便携带、食用、营养的配餐粉等备受上班族的喜爱。目前，市场上缺乏一种能过够调节小肠菌群和屏障的营养配餐粉。因此，研制一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉及其制备方法是非常重要的。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提出一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉及其制备方法，主要解决现代配餐粉难于满足调节小肠菌群及屏障，未能调节营养物质消化吸收的问题。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，所述复合营养粉由蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉、红枣粉和低聚半乳糖制得，其中，
所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按重量份，由菊苣10-15份、山楂0.5-5份和蓝靛果多酚提取液制得，所述蓝靛果多酚提取液是由40-55份的蓝靛果提取而成，
所述红枣粉是由6-15重量份的红枣制得；
所述低聚半乳糖为0.3-1.5重量份。
优选地，所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按重量份，由菊苣12份、山楂3份和蓝靛果多酚提取液制得，所述蓝靛果多酚提取液是由53份的蓝靛果提取而成；所述红枣粉是由8重量份的红枣制得；所述低聚半乳糖为0.8重量份。
优选地，所述蓝靛果多酚提取液与菊苣山楂的料液比为3mL:1mg。
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉的制备方法，具体步骤如下：
所述复合营养粉按下述方法制得：将所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉、红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，紫外杀菌，再次过100目筛网、即得到产品。
所述红枣粉按下述方法制得：将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过80-100目筛网，得到红枣粉。
所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按下述方法制得：将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到80-100目的混合乳状液，再对所述混合乳状液进行均质、干燥，过筛，得到80-100目的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉。所述山楂去皮方式为：将清洗的山楂去核后，蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮。采用30兆帕的均质机，温度控制为45～50℃，对混合乳状液进行3～5次均质；均质后，混合乳状液的固形物浓度为45％～50％；对混合乳状液的干燥方式为冷冻干燥15-17h。
所述蓝靛果多酚提取液按下述方法制得：将蓝靛果用乙醇溶液浸提后，浓缩至无乙醇残留，乙酸乙酯萃取后用D101大孔树脂纯化，乙醇洗脱，收集到的液体再次浓缩除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液。
优选地，所述蓝靛果多酚提取液按下述方法制得：
(1)称取蓝靛果，用经3-5℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度3-5℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚80-100min，超声波功率450-550W；在温度3-5℃进行离心8-12min，离心速度为11000-13000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在40-50℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；
(2)将步骤(1)的蓝靛果多酚粗提物在35-45℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于25-35℃温度下避光静置7-9h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在40-50℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液。
本发明具有以下有益效果：
本发明针对小肠菌群及屏障的调节选择了合理的原料，并通过各项工艺优化将其制备成粉状物质，采用冷冻干燥技术，最大限度地保留了原料的营养成分和色香味；利用蓝靛果多酚提取液浸泡菊苣和山楂，避免了其用水浸泡后在浓缩带来的营养物质及色香味的损失；本发明营养配餐粉富含蓝靛果多酚，对小肠菌群及屏障具有很好的调节作用，有利于调控营养物质特别是脂肪的消化吸收，与菊苣、山楂、红枣等的营养物质产生协同作用，对维持机体健康具有重要的食疗功效。
附图说明
图1为本发明菌群多样性指数图；其中，图1(a)为Chao1指数，图1(b)为Simpson指数，图1(c)为Shannon指数，图1(d)为Observed species指数。
图2表示本发明蓝靛果多酚干预对大鼠小肠菌群组成的影响(门水平上)。
图3表示本发明蓝靛果多酚干预对大鼠小肠菌群组成的影响(属水平上)。
图4为本发明HE染色法分析蓝靛果多酚干预对大鼠小肠组织结构的影响图smallintestine(x200)；其中，图4(a)为对照组(NC)，图4(b)为模型组(MG)，图4(c)为对阳性对照组(Vc)，图4(d)为蓝靛果多酚组(LCP)。
图5为本发明蓝靛本发明果多酚干预对大鼠小肠组织GLP-2活性的影响图。
图6为本发明蓝靛果多酚干预对大鼠小肠组织Claudin-2蛋白表达的影响图。
图7为本发明蓝靛果多酚干预对大鼠小肠组织Occludin蛋白表达的影响图。
附图中A-对照组(NC)；B-模型组(MG)；C-阳性对照组(Vc)；D-蓝靛果多酚组(LCP)；a、b、c、d均代表显著性差异P<0.05。
具体实施方式
为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现结合具体实施例对本发明的技术方案进行以下详细说明，应理解这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，由以下重量份数的原料制备而成：蓝靛果40份、菊苣15份、红枣6份、山楂5份、低聚半乳糖0.3份。
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉的制备方法，具体步骤如下：
(1)蓝靛果多酚提取液
称取蓝靛果，用经3℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度5℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚80min，超声波功率500W；在温度5℃进行离心8min，离心速度为13000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在40-50℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；将蓝靛果多酚粗提物在35-45℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于25℃温度下避光静置9h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在40℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液；
(2)蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉
将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到80目的混合乳状液，再将所述混合乳状液放入30兆帕的均质机中，温度控制为50℃，进行3次均质后，乳状液的固形物浓度为50％，再对混合乳状液冷冻干燥15h，过100目筛网，得到蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉；
(3)红枣粉
将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过80目筛，得到红枣粉；
(4)复合营养粉
将步骤(2)制备的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉和步骤(3)制备的红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，再次过100目筛网、过筛率为99.4％，紫外杀菌，即得到产品。
实施例2
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，由以下重量份数的原料制备而成：蓝靛果53份、菊苣12份、红枣8份、山楂3份、低聚半乳糖0.8份。
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉的制备方法，具体步骤如下：
(1)蓝靛果多酚提取液
称取蓝靛果，用经4℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度4℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚90min，超声波功率450W；在温度4℃进行离心10min，离心速度为12000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在45℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；将蓝靛果多酚粗提物在40℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于30℃温度下避光静置8h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在40-50℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液；
(2)蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉
将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到90目的混合乳状液，再将所述混合乳状液放入30兆帕的均质机中，温度控制为48℃，进行4次均质后，乳状液的固形物浓度为48％，再对混合乳状液冷冻干燥16h，过90目筛网，得到蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉；
(3)红枣粉
将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过90目筛，得到红枣粉；
(4)复合营养粉
将步骤(2)制备的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉和步骤(3)制备的红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，再次过100目筛网、过筛率为99.6％，紫外杀菌，即得到产品。
实施例3
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，由以下重量份数的原料制备而成：蓝靛果55份、菊苣10份、红枣15份、山楂0.5份、低聚半乳糖1.5份。
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉的制备方法，具体步骤如下：
(1)蓝靛果多酚提取液
称取蓝靛果，用经5℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度3℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚100min，超声波功率550W；在温度3℃进行离心12min，离心速度为11000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在50℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；将蓝靛果多酚粗提物在35℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于35℃温度下避光静置7h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在50℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液；
(2)蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉
将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到100目的混合乳状液，再将所述混合乳状液放入30兆帕的均质机中，温度控制为45℃，进行5次均质后，乳状液的固形物浓度为45％，再对混合乳状液冷冻干燥17h，过80目筛网，得到蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉；
(3)红枣粉
将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过100目筛，得到红枣粉；
(4)复合营养粉
将步骤(2)制备的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉和步骤(3)制备的红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，再次过100目筛网、过筛率为99.5％，紫外杀菌，即得到产品。
实施例4
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，由以下重量份数的原料制备而成：蓝靛果46份、菊苣14份、红枣12份、山楂2份、低聚半乳糖1.0份。
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉的制备方法，具体步骤如下：
(1)蓝靛果多酚提取液
称取蓝靛果，用经4℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度4℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚90min，超声波功率500W；在温度4℃进行离心10min，离心速度为12000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在45℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；将蓝靛果多酚粗提物在40℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于30℃温度下避光静置8h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在40-50℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液；
(2)蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉
将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到90目的混合乳状液，再将所述混合乳状液放入30兆帕的均质机中，温度控制为48℃，进行4次均质后，乳状液的固形物浓度为48％，再对混合乳状液冷冻干燥16h，过90目筛网，得到蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉；
(3)红枣粉
将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过90目筛，得到红枣粉；
(4)复合营养粉
将步骤(2)制备的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉和步骤(3)制备的红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，再次过100目筛网、过筛率为99.6％，紫外杀菌，即得到产品。
实施例5
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，由以下重量份数的原料制备而成：蓝靛果55份、菊苣10份、红枣14份、山楂4份、低聚半乳糖1.5份.
一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉的制备方法，具体步骤如下：
(1)蓝靛果多酚提取液
称取蓝靛果，用经4℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度4℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚90min，超声波功率500W；在温度4℃进行离心10min，离心速度为12000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在45℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；将蓝靛果多酚粗提物在40℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于30℃温度下避光静置8h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在40-50℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液；
(2)蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉
将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到90目的混合乳状液，再将所述混合乳状液放入30兆帕的均质机中，温度控制为48℃，进行4次均质后，乳状液的固形物浓度为48％，再对混合乳状液冷冻干燥16h，过90目筛网，得到蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉；
(3)红枣粉
将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过90目筛，得到红枣粉；
(4)复合营养粉
将步骤(2)制备的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉和步骤(3)制备的红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，再次过100目筛网、过筛率为99.6％，紫外杀菌，即得到产品。
一、蓝靛果多酚对高脂膳食大鼠小肠菌群及屏障的影响。
为评价蓝靛果多酚对改善高脂膳食大鼠小肠菌群组成及小肠屏障的效果，具体步骤如下：
(1)取24只6周龄的SD大鼠，自由饮食无菌水和正常标准饲料，适应新环境一周后用于实验。本实验采用实施例1的成品进行实验。
(2)大鼠随机分成四组，分别为对照组(NC)：基础饲料喂养，每天给予相同体积的生理盐水灌胃；模型组(MG)：高脂饲料喂养，每天给予相同体积的生理盐水灌胃；阳性对照组(Vc)：高脂饲料喂养，每天给予100mg/kg/bw Vc(溶于生理盐水)灌胃；蓝靛果多酚组(LCP)：高脂饲料喂养，每天给予250mg/kg/bw LCP(溶于生理盐水)灌胃。饲养温度为25±2℃，相对湿度为55±5％。实验期间12小时光暗周期，自由饮食饮水(无菌)，喂养8周。
动物饲养结束后，颈椎脱臼处死。
取小肠组织，纵向切开，分别收集小肠内容物，分装无菌离心管中，利用高通量测序检测分析在门、科、属分类水平上菌群的丰度变化情况小肠菌群分布情况进行分析。
小肠组织用PBS冲洗干净，用吸水纸擦干，液氮速冻，利用HE染色方法分析小肠组织结构变化情况；利用酶联免疫法和Western blot方法分别检测小肠屏障相关指标GLP-2活性，Claudin-2和Occludin蛋白表达变化。
LCP对高脂膳食诱导肠道菌群失衡的调节作用如图1(a-d)、图2和图3所示。经Chao1、Observed species指数(表征丰富度)和Shannon、Simpson指数(表征多样性)分析得出，与MG组大鼠相比，LCP干预增加了大鼠小肠菌群的丰富度和多样性如图1(a-d)。比较四个类群在门(图2)和属(图3)水平上的优势类群的相对丰度。各组间小肠微生物群在各分类水平上的组成均存在显著差异。在门分类水平上，MG组OD1和Proteobacteria丰度显著高于NC组，而厚壁菌丰度显著低于NC组(P<0.05)。与MG组相比，添加VC可显著增加厚壁菌的丰度，降低Proteobacteria的丰度(P<0.05)，LCP组厚硬壁菌相对丰度增加，OD1和Proteobacteria的相对丰度较低。在属分类水平上，与NC相比，MG组Brevibacterium,Corynebacterium,Dietzia,Leucobacter,Rhodococcus,Yaniella,Hymenobacter,Sediminibacterium,Vagococcus,[Eubacterium],Asticcacaulis,Mycoplana,Bradyrhizobium,Ochrobactrum,Agrobacterium,Sphingomonas,Alcaligenes,Oligella,Leptothrix,Acinetobacter,Psychrobacter,Pseudomonas,and Luteimonas的丰度显著增加(P<0.05)，Lactobacillus丰度显著降低(P<0.05)。与MG相比，补充VC显著增加(P<0.05)Lactobacillus的丰度，显著降低Brevibacterium,Dietzia,Rhodococcus,Hymenobacter,[Eubacterium],Bradyrhizobium,Ochrobactrum,Sphingomonas,Alcaligenes,Oligella,Leptothrix,Psychrobacter,and Pseudomonas的丰度(P<0.05)。但是，与MG组相比，补充LCP显著增加(P<0.05)Bifidobacterium and Natronobacillus的丰度，显著降低Brevibacterium,Rhodococcus,[Eubacterium],Alcaligenes,Oligella,andPsychrobacter的丰度(P<0.05)。说明250mg/kg/bw LCP对MG喂养大鼠小肠微生物群有显著的调节作用。
LCP对高脂膳食诱导肠道屏障的影响结果见图4(a-d)，NC组小肠病理形态正常，无损伤和炎症；MG组小肠杯状细胞和浅表上皮细胞消失，出现炎性细胞浸润，组织损伤明显；VC组半数杯状细胞受损，浅表上皮细胞未恢复，少量炎性细胞浸润；而LCP组杯状细胞和浅表上皮细胞基本恢复正常，基本无炎性细胞浸润。说明250mg/kg/bw LCP可抑制高脂膳食诱导的小肠组织的损伤。
GLP-2活性、Claudin-2和Occludin蛋白表达水平如图5-7所示。与NC组相比，MG组GLP-2表达水平显著降低(P<0.05)，而VC和LCP的加入明显减轻了GLP-2的表达水平(P<0.05)(图5)；MG组Claudin-2蛋白表达水平显著高于NC组(P<0.05)，VC和LCP的补充显著抑制了(P<0.05)Claudin-2的蛋白表达水平(图6)；MG喂养显著降低了Occludin蛋白的表达，与MG组相比，补充VC和LCP显著提高了Occludin蛋白的表达水平(P<0.05)(图7)。因此，250mg/kg/bw LCP可以通过调节肠道通透性关键因子GLP-2、Claudin-2和Occludin表达，降低肠道通透性，保护小肠粘膜受损。
乳酸杆菌是肠道益生菌，也是胆汁酸调节菌，可显著抑制脂肪消化吸收；双歧杆菌主要位于在宿主肠道粘液层并能降解劲蛋白；GLP-2是一种由肠道产生的激素，可以改善消化吸收、屏障功能和血液循环；Claudin-2和Occlutdin是重要的紧密连接蛋白。上述结果表明，蓝靛果多酚能够改善高脂饮食诱导的小肠菌群和屏障失衡，有效增加乳酸杆菌、双歧杆菌等有益菌，对维持机体摄入的营养素，特别是脂肪的正常消化、吸收和促进身体健康具有积极的作用。
以上实施例对本发明的产品及方法进行了详细介绍，本文中应用了具体例对本发明的主要步骤及实施方式进行了阐述，上述实施例只是帮助理解本发明的方法及核心原理。对于本领域的技术人员，依据本发明的核心原理，在具体实施中会对各条件和参数根据需要而变动，综上所述，本说明书不应理解为对本发明的限制。
Claims (10)
1.一种具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述复合营养粉由蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉、红枣粉和低聚半乳糖制得，其中，
所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按重量份，由菊苣10-15份、山楂0.5-5份和蓝靛果多酚提取液制得，所述蓝靛果多酚提取液是由40-55份的蓝靛果提取而成，
所述红枣粉是由6-15重量份的红枣制得；
所述低聚半乳糖为0.3-1.5重量份。
2.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按重量份，由菊苣12份、山楂3份和蓝靛果多酚提取液制得，所述蓝靛果多酚提取液是由53份的蓝靛果提取而成；所述红枣粉是由8重量份的红枣制得；所述低聚半乳糖为0.8重量份。
3.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述蓝靛果多酚提取液与菊苣山楂的料液比为3mL:1mg。
4.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述复合营养粉按下述方法制得：将所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉、红枣粉与低聚半乳糖混合均匀，紫外杀菌，再次过100目筛网，即得到产品。
5.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉按下述方法制得：将菊苣清洗、切片；山楂清洗、去核、去皮；再将处理后的菊苣和山楂与蓝靛果多酚提取液混合磨浆并筛选得到80-100目的混合乳状液，再对所述混合乳状液进行均质、干燥，过筛，得到80-100目的蓝靛果多酚菊苣山楂混合粉。
6.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述蓝靛果多酚提取液按下述方法制得：将蓝靛果用乙醇溶液浸提后，浓缩至无乙醇残留，乙酸乙酯萃取后用D101大孔树脂纯化，乙醇洗脱，收集到的液体再次浓缩除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液。
7.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述蓝靛果多酚提取液按下述方法制得：
(1)称取蓝靛果，用经3-5℃预冷的60％的乙醇溶液作为提取溶剂，所述蓝靛果和所述乙醇溶液的料液比为1g:15mL，混合均匀后在温度3-5℃进行超声辅助提取蓝靛果多酚80-100min，超声波功率450-550W；在温度3-5℃进行离心8-12min，离心速度为11000-13000rpm，收集上清液，用相同方法将果渣沉淀重复提取一次，合并两次上清液，并用旋转蒸发仪在40-50℃温度下进行浓缩至无乙醇残留，得蓝靛果多酚粗提物；
(2)将步骤(1)的蓝靛果多酚粗提物在35-45℃温度下减压浓缩得浓缩液，取浓缩液倒入分液漏斗，之后再缓慢加入相同体积的乙酸乙酯，摇匀，于25-35℃温度下避光静置7-9h。流出下层水相，从上方出口倒出乙酸乙酯，再用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次；然后用400mL装有D101大孔树脂的玻璃柱纯化；当上样量为1/2柱体积时停止上样，静止吸附6h，用2倍柱体积的蒸馏水除去杂质，乙醇作为洗脱剂，收集洗脱液；将收集到的液体在40-50℃温度下再次旋转蒸发除去乙醇，得到蓝靛果多酚提取液。
8.根据权利要求5所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述山楂去皮方式为：将清洗的山楂去核后，蒸汽软化至表皮变色，取出后放入冷水中，轻轻搓洗去皮。
9.根据权利要求5所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：采用30兆帕的均质机，温度控制为45～50℃，对混合乳状液进行3～5次均质；均质后，混合乳状液的固形物浓度为45％～50％；对混合乳状液的干燥方式为冷冻干燥15-17h。
10.根据权利要求1所述的具有调节小肠菌群和屏障功能的复合营养粉，其特征在于：所述红枣粉按下述方法制得：将红枣清洗、去核、切片，所述切片厚度为2mm，热风干燥使其产生浓厚的焦糖味，再粉碎，过80～100目筛网，得到红枣粉。
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