CN112143665B

CN112143665B - 一种高效降解甲醛的微生物菌剂及其制备方法

Info

Publication number: CN112143665B
Application number: CN202010889017.2A
Authority: CN
Inventors: 于兴军
Original assignee: Beijing Shoucheng Garden Technology Development Co ltd
Current assignee: Beijing Shoucheng Garden Technology Development Co ltd
Priority date: 2020-08-28
Filing date: 2020-08-28
Publication date: 2022-07-12
Anticipated expiration: 2040-08-28
Also published as: CN112143665A

Abstract

本申请公开了一种高效降解甲醛的微生物菌剂及其制备方法，属于室内空气净化的技术领域，解决了现有的单一微生物菌剂无法高效降解低浓度甲醛的技术问题。微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：S1、活化甲基杆菌、假单胞菌和沼泽红假单胞菌，备用；S2、将活化的甲基杆菌和活化的假单胞菌接种至液体培养基A中培养12‑18 h后，再将活化的沼泽红假单胞菌接种至液体培养基A，并在黑暗且甲醛存在的环境中培养；S3、将微生物培养液离心，将菌体经细胞破碎、过膜并干燥，即得微生物菌剂。本申请的微生物菌剂用于室内甲醛降解，其具有高效降解室内低浓度甲醛的优点。

Description

一种高效降解甲醛的微生物菌剂及其制备方法

技术领域

本申请涉及室内空气净化的技术领域，更具体地说，它涉及一种高效降解甲醛的微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

甲醛是一种常见的极易挥发的有机物(Volatile Organic Compounds，VOCs)，其作为基础的化工原料，在树脂、皮革、油漆、涂料和塑料等领域有较为广泛的应用。随着家具制造业、室内建材等行业的发展，家具以及装修材料中会使用含有甲醛的有机原料制成的胶黏剂和涂料，而其中的甲醛也会不断释放至室内环境中，造成室内的甲醛含量过高。除此以外，家具、室内装修材料中的甲醛会在很长的一段时间内(长达3-15年)持续释放至室内环境中，造成室内空气中的甲醛含量持续超标(国家标准限值：0.1mg/m³)，长期危害人体健康。

针对上述问题，现有的解决方案是采用物理法吸附法、化学法或者生物法。物理法中常采用活性氧化铝、活性炭和分子筛吸附等方式对室内的甲醛进行吸附处理，但是上述的处理方式存在需要频繁更换吸附剂的不足，且当达到吸附平衡时，容易脱附，所以整体的吸附效率也不高。而化学法也存在化学试剂消耗过多或者二次污染严重的不足。生物法，则是利用以甲醛作为碳源或者唯一碳源的微生物，将甲醛降解为简单、稳定的小分子化合物，从而达到降低甲醛含量的目的。和物理法、化学法相比，生物法脱除甲醛的方法，对环境的污染小且能够较长时间地维持去除甲醛的功能。

授权公告号为CN 103087952 B的申请专利公开了一种甲醛降解菌及其用途，该申请专利中主要涉及的是耐受高浓度甲醛的耶氏副球菌(Paracoccus yeei)，其能够高效降解甲醛。

授权公告号为CN 102181385 B的申请专利公开了一种甲醛生物降解剂及其制备方法，该专利提供的是一株假单胞菌IOFA1，主要利用假单胞菌IOFA1的代谢产物(甲醛降解酶)来进行甲醛处理。

室内的甲醛来源于装修家具内，而家具中的甲醛释放并不是一次性全部释放，而是在长达3-15年的时间里逐渐释放的，因此需要对室内甲醛进行持续的降解。一般情况下，室内甲醛的浓度不高于0.08mg/m³时适宜人类居住，但是家具中释放于室内的甲醛含量一般会超标2-4倍，即甲醛含量为0.16-0.32mg/m³，其甲醛浓度并不高。上述的发明专利中均涉及了能够降解甲醛的微生物菌剂，但是将上述单一的微生物菌剂用于降解室内甲醛时，往往无法实现高效降解低浓度的甲醛。

因此目前急需的是一种能够高效降解室内低浓度甲醛的微生物菌剂。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本申请的第一个目的在于提供一种高效降解甲醛的微生物菌剂，本申请的第二个目的在于提供一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，通过本申请的方法制备得到的微生物菌剂，其具有高效降解低甲醛浓度的优势。

为实现上述第一个目的，本申请提供了如下技术方案：一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

S1、活化甲基杆菌后得到活化的甲基杆菌，活化假单胞菌后得到活化的假单胞菌，活化沼泽红假单胞菌后得到活化的沼泽红假单胞菌，备用；

S2、配置液体培养基A，将步骤S1中得到的活化的甲基杆菌和活化的假单胞菌接种至液体培养基A中，在32-38℃下培养12-18h后，再将活化的沼泽红假单胞菌接种至液体培养基A，并在黑暗中培养至总活菌数达到(2-6)×10⁹个/mL，得到微生物培养液；其中，步骤S2均在甲醛存在的环境中进行；

S3、将得到的所述微生物培养液离心，随后将得到的菌体经超声破碎后过超滤膜并干燥后，即得微生物菌剂；

其中，所述液体培养基A的配方为：牛肉膏2.5-3.5g/L，蛋白胨9-12g/L，氯化钠4-6.5g/L，磷酸二氢钾0.5-0.7g/L，磷酸氢二钾0.7-0.85g/L，以及微量元素溶液500-600μL/L。

进一步地，所述甲基杆菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCM 2017322的甲基杆菌MR1；所述假单孢杆菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2010280的假单胞菌IOFA1；所述沼泽红假单胞菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2014525的沼泽红假单胞菌LY-6。

进一步地，步骤S2中，以所述液体培养基A的体积计，甲醛浓度为10-20mg/L。

通过采用上述技术方案，将甲基杆菌、假单胞菌以及沼泽红假单胞菌联合培养，获得能够高效降解甲醛的微生物菌剂。当甲醛浓度不高于0.24mg/m³时，得到的微生物菌剂在两小时内的甲醛降解率高达91.7％。

甲基杆菌和假单胞菌均为具有降解甲醛的能力。将甲基杆菌、假单胞菌和沼泽红假单胞菌这三者进行联合培养，其中，除了甲基杆菌和假单胞菌在逐渐产生甲醛降解酶，同时沼泽红假单胞菌也具有促进其代谢过程中产生具有降解甲醛功能的代谢物，使得最终制备得到的微生物菌剂的甲醛降解率有所提高：甲醛浓度为0.12-0.24mg/m³时，投加微生物菌剂2h后，甲醛降解率自8.33％-16.7％提高至83.3％-91.7％。

在步骤S2中，首先接种甲基杆菌和假单胞菌，当这两种菌生长至12-18h时，两种微生物逐渐进入生长繁殖的对数期；随后接种沼泽红假单胞菌，此时，沼泽红假单胞菌的生长繁殖处于弱势地位，而甲基杆菌和假单胞菌处于生长繁殖的主要地位。随着培养时间的延长，甲基杆菌和假单胞菌进入生长稳定期，甲基杆菌不断通过细胞内的丝氨酸途径和乙醛酸途径将甲醛分解为丝氨酸、甘氨酸、苹果酸、乙醛酸、柠檬酸等无毒害作用的有机酸和氨基酸，假单胞菌；沼泽红假单胞菌的生长逐渐进入对数期，其产生的代谢产物促使甲基杆菌和假单胞菌细胞内甲醛降解途经的进行。最终，经上述的方法制备得到的微生物菌剂能够对低浓度的甲醛有较好的降解效果，投加本申请的微生物菌剂于室内5h后，基本实现了室内甲醛的完全降解(甲醛降解率为91.7％-100％)。

进一步地，所述微量元素溶液包括以下原料：硼酸5-7g/L，氯化铜0.1-0.3g/L，氯化钴3-5g/L，氯化镍0.3-0.5g/L，硫酸锌1.5-2.5g/L，氯化锰0.4-0.8g/L。

通过采用上述技术方案，在上述的微量元素溶液中，甲基杆菌和假单胞菌均能更好地生长繁殖，进而能够获得更多的降解甲醛所需要的酶。

进一步地，将甲基杆菌活化的方法包括以下步骤：配置固体培养基A，将甲基杆菌接种于所述固体培养基A中，在32-38℃下培养28-40h，得到活化的甲基杆菌；其中，所述固体培养基A是于所述液体培养基A内添加18-22g/L的琼脂后制备得到。

进一步地，将假单孢杆菌活化的方法包括以下步骤：将假单胞菌接种于固体LB培养基中，在25-32℃下培养3-4天，得到活化的假单胞菌。

进一步地，沼泽红假单胞菌活化的方法包括以下步骤：将沼泽红假单胞菌接种于液体培养基B中，在黑暗中培养2-3天，得到活化的沼泽红假单胞菌。

通过采用上述技术方案，能够有效活化微生物，使得在后期培养中获得更高生物量的微生物菌液；微生物菌液中的微生物生长繁殖较好，则能够产生更多的降解甲醛的代谢产物，从而使得最终获得的微生物菌剂获得更高的甲醛降解效率。

进一步地，所述固体培养基B的配方为：苹果酸钠0.8-1.3g/L，乙酸钠0.8-1.3g/L，氯化铵0.8-1.3g/L，磷酸二氢钾0.8-1.3g/L，氯化钙0.08-0.13g/L，碳酸氢钠2.8-3.0g/L，氯化镁0.3-0.5g/L，琼脂18-22g/L，所述微量元素溶液0.9-1.1g/L，维生素溶液0.9-1.1g/L，酵母提取物0.3-0.5g/L。

通过采用上述技术方案，使得沼泽红假单胞菌生长繁殖的更好，以达到更好的促进甲基杆菌和假单胞菌降解甲醛的目的。

进一步地，步骤S3中，所述离心的步骤包括将微生物培养液在3000-7000rpm的转速下离心5-30min；所述超声破碎的条件为：超声80-120次，每次的超声时间为3-5s，间歇时间3-5s，超声功率250-350w；随后将超声后的细胞过膜孔径为0.22μm的超滤膜。

进一步地，步骤S3中，采用冷冻干燥的方式实现对所述固体进行干燥。

通过采用上述技术方案，能够实现细胞破碎的同时不破坏胞内物质，使得胞内物质具有较好的生物学功能，进而保证了制备得到的微生物菌剂具有较好的降解甲醛的功能。

为实现上述第二个目的，本申请提供了如下技术方案：一种高效降解甲醛的微生物菌剂，所述微生物菌剂由上述的制备方法制备得到。

通过采用上述技术方案，制备得到的微生物菌剂具有较好的降解低浓度甲醛的效果。

综上所述，本申请具有以下有益效果：

第一、由于本申请采用将甲基杆菌、假单胞菌和沼泽红假单胞菌联合培养，首先在培养基内接种甲基杆菌和假单胞菌，培养后再接种沼泽红假单胞菌进行联合培养，最终制备得到能够高效降解低浓度甲醛的微生物菌剂。当室内甲醛浓度为0.24mg/m³时，投加微生物菌剂2h后其甲醛降解率高达87.5％，5h内其甲醛降解率高达100％；当室内甲醛浓度为0.12mg/m³时，2h内其甲醛降解率高达91.7％。

第二、本申请中优选采用有氧暗培养的方式对沼泽红假单胞菌进行活化，和采用无氧光照条件下培养沼泽红假单胞菌的方式相比，使得制备得到的微生物的甲醛降解率有所提高。当室内甲醛浓度为0.24mg/m³时，投加微生物菌剂2h后其甲醛降解率自50.0％提高至87.5％，5h后其甲醛降解率自66.7％提高至100％；当室内甲醛浓度为0.12mg/m³时，投加微生物菌剂2h后其甲醛降解率自41.7％提高至91.7％，5h后其甲醛降解率自58.3％提高至100％。

具体实施方式

以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。

本申请中的甲基杆菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M2017322的甲基杆菌MR1；假单孢杆菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2010280的假单胞菌IOFA1；沼泽红假单胞菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2014525的沼泽红假单胞菌LY-6。

本申请的配置固体培养基A、固体培养基B、LB培养基以及液体培养基A的原料为普通市售即可。其中，酵母提取物又称酵母浸粉，酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨、胰蛋白胨、琼脂均购自麦克林。

实施例

本申请提供的是一种高效降解甲醛的微生物菌剂及其制备方法在使用本申请的微生物菌剂时，可以将本申请制备得到的微生物菌剂碾磨至粉末后置于敞口的容器内，或者溶解于水中喷洒在空气中均可。溶解于水中时，水中微生物菌剂的含量为2-6g/L。

实施例1

本申请提供了一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：S1、配置固体培养基A，其配方为：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，磷酸氢二钾0.85g/L，琼脂20g/L，以及微量元素溶液550μL/L。微量元素溶液由以下原料溶于去离子水后配置得到：硼酸6g/L，氯化铜0.2g/L，氯化钴4g/L，氯化镍0.4g/L，硫酸锌2g/L，氯化锰0.6g/L。

配置固体LB培养基，其配方为：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L。

配置固体培养基B，其配方为：苹果酸钠1.0g/L，乙酸钠1.0g/L，氯化铵1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，氯化钙0.1g/L，碳酸氢钠2.9g/L，氯化镁0.4g/L，微量元素溶液1.0g/L，维生素溶液1.0g/L，酵母提取物0.5g/L，琼脂20g/L。微量元素溶液由以下原料溶于去离子水后配置得到：硼酸6g/L，氯化铜0.2g/L，氯化钴4g/L，氯化镍0.4g/L，硫酸锌2g/L，氯化锰0.6g/L。

将甲基杆菌MR1在无菌操作台中接种于固体培养基A中，在32℃下培养34h，得到活化的甲基杆菌MR1，备用。

将假单孢杆菌在无菌操作台中接种于固体LB培养基中，在28℃下培养3天，得到活化的假单胞菌IOFA1，备用。

将沼泽红假单胞菌LY-6接种于固体培养基B中，在黑暗中30℃的条件下培养3天，得到活化的沼泽红假单胞菌LY-6。

S2、配置液体培养基A，其配方为：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，磷酸氢二钾0.85g/L，以及微量元素溶液550μL/L。微量元素溶液由以下原料溶于去离子水后配置得到：硼酸6g/L，氯化铜0.2g/L，氯化钴4g/L，氯化镍0.4g/L，硫酸锌2g/L，氯化锰0.6g/L。将步骤S1中得到的活化的甲基杆菌MR1和活化的假单胞菌IOFA1接种至液体培养基A中，在35℃下培养15h后，再将活化的沼泽红假单胞菌LY-6接种至液体培养基A，并在黑暗中培养至总活菌数达到6×10⁹个/mL，得到微生物培养液；其中，于液体培养基A中添加20mg/L的甲醛，以保证步骤S2在甲醛存在的环境中进行。

S3、将得到的微生物培养液在5000rpm的转速下离心15min，得到菌体；随后于菌体内加入水，获得菌液，菌液中菌体含量为4g/L，然后将菌液置于超声破碎仪中进行超声破碎，超声破碎的条件为：超声100次，每次的超声时间为4s，间歇时间4s，超声功率300w；随后将超声后的菌体细胞过膜孔径为0.22μm的超滤膜，冷冻干燥后得到微生物菌剂。

一种高效降解甲醛的微生物菌剂，由上述的制备方法制备得到。

实施例2

本实施例和实施例1的区别在于，本实施例中，步骤S2中将甲基杆菌MR1、假单胞菌IOFA1和沼泽红假单胞菌LY-6这三种菌株接种在液体培养基A中后，在黑暗中培养至总活菌数达到2×10⁹个/mL，得到微生物培养液。

对比实施例

本对比实施例和实施例1的区别在于，本对比实施例的沼泽红假单胞菌LY-6的活化方法不同，具体为：将沼泽红假单胞菌LY-6接种于固体培养基B中，在3000lux的光照下缺氧培养4天，得到活化的沼泽红假单胞菌LY-6。

对比例1

本对比例和实施例1的区别在于，本对比例中，在制备微生物菌剂时不使用沼泽红假单胞菌LY-6，具体包括以下步骤：

S1、活化甲基杆菌MR1后得到活化的甲基杆菌MR1，活化假单胞菌IOFA1后得到活化的假单胞菌IOFA1，备用；

S2、配置液体培养基A，将步骤S1中得到的活化的甲基杆菌MR1和活化的假单胞菌IOFA1接种至液体培养基A中，在35℃下培养至总活菌数达到6×10⁹个/mL，得到微生物培养液。

其它同实施例1。

对比例2

本对比例和实施例1的区别在于，本对比例的步骤S2中，甲基杆菌MR1、假单胞菌IOFA1和沼泽红假单胞菌LY-6这三种菌株接种在液体培养基A上的时间不同，具体为：将步骤S1中得到的活化的甲基杆菌、活化的假单胞菌IOFA1和活化的沼泽红假单胞菌LY-6同时接种在液体培养基A中，在35℃下培养至总活菌数达到6×10⁹个/mL，得到微生物培养液。

其它同实施例1。

结果检测

通过实施例1-2、对比实施例以及对比例1-2制备得到5种不同的微生物菌剂，将5中不同的微生物菌剂分别溶解于水中，得到5种微生物菌剂水溶液，每种微生物菌剂水溶液中微生物菌剂的含量为4g/L。

根据QB/T 2761-2006《室内空气净化产品效果测定方法》，检测本申请微生物菌剂对室内空气中甲醛的降解效果。

检测方法具体步骤为：

本申请的试验在密闭的容积为1.5m³的测试舱中进行，将本申请的实施例1制备得到的微生物菌剂解于水中，得到的微生物菌剂水溶液700mL倒入加湿器内，然后将加湿器放在测试舱内。

随后将甲醛一次性投放进测试舱内，甲醛浓度为0.12～0.24mg/m³，开启风扇，使得甲醛与舱内空气混合均匀后，关闭风扇。

最后开启装有本申请的微生物菌剂水溶液的加湿器电源，使其在工作状态下正常运行，分别于2h，5h后采样并测定测试舱内空气中的甲醛浓度值，检测设备为分光光度计，随后计算甲醛的降解率。

其中，甲醛降解率(％)＝(甲醛初始投放浓度-一段时间后的甲醛浓度)/甲醛初始投放浓度×100％。

当投放至测试舱内的甲醛浓度为0.24mg/m³时，将实施例2、对比实施例1以及对比例1-2制备得到的微生物菌剂均做上述的检测，其检测结果见表1。

表1实施例1-2、对比实施例以及对比例1-2制备得到的微生物菌剂在不同时间的甲醛降解情况

当投放至测试舱内的甲醛浓度为0.12mg/m³时，将实施例2、对比实施例1以及对比例1-2制备得到的微生物菌剂均做上述的检测，其检测结果见表2。

表2实施例1-2、对比实施例以及对比例1-2制备得到的微生物菌剂在不同时间的甲醛降解情况

从表1和表2的数据结果看出，本申请实施例1-2以及对比实施例中制备得到的微生物菌剂和对比例1-2制备得到的微生物菌剂相比，实施例1-2以及对比实施例中制备得到的微生物菌剂对室内低浓度甲醛的降解率较高。当室内甲醛的初始浓度为0.24mg/m³时，于室内投加实施例1、或实施例2、或对比实施例的微生物菌剂2h后，甲醛的降解率为50.0％-87.5％，远高于对比例1-2的微生物菌剂对室内低浓度甲醛的降解率(对比例1-2的微生物菌剂仅为16.7％-25.5％)。当投加实施例1、或实施例2、或对比实施例的微生物菌剂5h后，对室内甲醛的降解率不低于66.7％，最高可达100％(实施例1的微生物菌剂)。

表2中的数据结果也表明，实施例1-2制备得到的微生物菌剂对低浓度甲醛的降解率较高(2h的甲醛降解率高达91.7％)，能够高效降解低浓度甲醛。

通过比较实施例1和对比实施例的数据结果看出，当将甲基杆菌MR1、假单胞菌IOFA1和沼泽红假单胞菌LY-6混合培养时，三者的培养方法以及对沼泽红假单胞菌LY-6的活化培养方法均对最终制备得到的微生物菌剂的甲醛降解能力有影响。当采用有氧暗培养对沼泽红假单胞菌LY-6活化，并在后期的混合培养时，先将甲基杆菌MR1和假单胞菌IOFA1接种培养后再接种沼泽红假单胞菌LY-6进行联合培养，在最终制备得到的微生物菌剂的甲醛降解率更高。

将本申请的微生物菌剂用于室内的甲醛降解时，于室内每24h喷洒一次本申请的微生物菌剂即可。

本具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims

1.一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S2、配置液体培养基A，将步骤S1中得到的活化的甲基杆菌和活化的假单胞菌接种至液体培养基A中，在32-38℃下培养12-18 h后，再将活化的沼泽红假单胞菌接种至液体培养基A，并在黑暗中培养至总活菌数达到（2-6）×10⁹个/mL，得到微生物培养液；其中，步骤S2均在甲醛存在的环境中进行；

S3、将得到的所述微生物培养液离心，随后将得到的菌体经超声破碎后过超滤膜并干燥，即得微生物菌剂；

其中，沼泽红假单胞菌活化的方法包括以下步骤：将沼泽红假单胞菌接种于固体培养基B中，在黑暗中培养2-3天，得到活化的沼泽红假单胞菌；

其中，所述液体培养基A的配方为：牛肉膏2.5-3.5 g/L，蛋白胨9-12 g/L，氯化钠4-6.5g/L，磷酸二氢钾0.5-0.7 g/L，磷酸氢二钾0.7-0.85 g/L，以及微量元素溶液500-600 μL/L；所述固体培养基B的配方为：苹果酸钠0.8-1.3 g/L，乙酸钠0.8-1.3 g/L，氯化铵 0.8-1.3 g/L，磷酸二氢钾0.8-1.3 g/L，氯化钙0.08-0.13 g/L，碳酸氢钠2.8-3.0 g/L，氯化镁0.3-0.5 g/L，琼脂18-22 g/L，所述微量元素溶液0.9-1.1 g/L，维生素溶液0.9-1.1 g/L，酵母提取物0.3-0.5 g/L；

其中，甲基杆菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2017322的甲基杆菌MR1；假单孢杆菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M2010280的假单胞菌IOFA1；沼泽红假单胞菌为保藏于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2014525的沼泽红假单胞菌LY-6。

2.根据权利要求1所述的一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述微量元素溶液包括以下原料：硼酸5-7 g/L，氯化铜0.1-0.3 g/L，氯化钴3-5 g/L，氯化镍0.3-0.5 g/L，硫酸锌1.5-2.5 g/L，氯化锰0.4-0.8 g/L。

3.根据权利要求1所述的一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，将甲基杆菌活化的方法包括以下步骤：配置固体培养基A，将甲基杆菌接种于所述固体培养基A中，在32-38℃下培养28-40 h，得到活化的甲基杆菌；其中，所述固体培养基A是于所述液体培养基A内添加18-22 g/L的琼脂后制备得到。

4.根据权利要求1所述的一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，将假单孢杆菌活化的方法包括以下步骤：将假单胞菌接种于固体LB培养基中，在25-32℃下培养3-4天，得到活化的假单胞菌。

5.根据权利要求1所述的一种高效降解甲醛的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述离心的步骤包括将微生物培养液在3000-7000 rpm的转速下离心5-30 min；所述超声破碎的条件为：超声80-120次，每次的超声时间为3-5 s，间歇时间3-5 s，超声功率250-350 w；随后将超声后的细胞过膜孔径为0.22 μm的超滤膜。

6.一种高效降解甲醛的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂由权利要求1-5任一所述的制备方法制备得到。