CN112063557A - 易腐垃圾低温相变制水降解菌剂及微生物菌液制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种降解菌剂,尤其涉及一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂及微生物菌液制备方法,属于微生物技术领域。包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌5~6份、不规则麻黄菌5~6份、土孢杆属9~11份、醋杆菌属9~11份、梭状芽孢杆菌属34~40份、产硫梭菌24~30份、拟杆菌5~6份。按以下步骤进行:单独制备微生物发酵液→冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备。处理后的废水达到排放标准,起到了垃圾减量,保护环境的功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种降解菌剂,尤其涉及一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂及微生物菌液制备方法,属于微生物技术领域。
背景技术
随着我国社会经济的快速发展以及城市化的加快,城市生活垃圾的产量持续增加,生活垃圾中易腐垃圾约占一半。易腐垃圾,也可称湿垃圾或餐厨垃圾,一般是指餐饮经营者、单位食堂等生产过程中产生的餐厨废弃物,以及家庭生活中产生的易腐性垃圾,主要包括:剩菜剩饭、菜梗菜叶、肉食内脏、果壳瓜皮等等。易腐垃圾中含有大量的淀粉、蛋白质、油脂、植物纤维等,营养极其丰富,如果处理不好,容易导致病菌、蚊虫等有害生物的大量繁殖,对人类健康和城市生态环境构成威胁。目前对于易腐垃圾的处理,主要有填埋法、焚烧法、堆肥法及高温厌氧消化法。填埋法,焚烧法和堆肥法虽然处理起来较为简单,但是容易对土壤、水体和空气造成二次污染。高温厌氧消化法是一种较为先进的处理方式,但是该方法具有技术门槛高,设备资金投入大以及运行能耗成本过高的缺点,并不适用于所有情形。
发明内容
本发明主要是解决现有技术中存在的不足,提供一种通过将易腐垃圾粉碎后投入餐厨垃圾处理设备中,然后再加入低温耗氧菌剂,过程中的泔水携带菌剂进入污水处理***转变为达标排放的废水,在微生物的分解作用下使易腐垃圾转变成无害的水和二氧化碳的方式的易腐垃圾低温相变制水降解菌剂及微生物菌液制备方法。
本发明的上述技术问题主要是通过下述技术方案得以解决的:
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:
不规则梭菌5~6份、不规则麻黄菌5~6份、土孢杆属9~11份、醋杆菌属9~11份、梭状芽孢杆菌属34~40份、产硫梭菌24~30份、拟杆菌5~6份。
作为优选,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌5份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属9份、醋杆菌属11份、梭状芽孢杆菌属34份、产硫梭菌30份和拟杆菌6份。
作为优选,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌5份、不规则麻黄菌6份、土孢杆属10份、醋杆菌属10份、梭状芽孢杆菌属35份、产硫梭菌28份和拟杆菌6份。
作为优选,复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌6份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属11份、醋杆菌属9份、梭状芽孢杆菌属38份、产硫梭菌26份和拟杆菌5份。
作为优选,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌6份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属10份、醋杆菌属10份、梭状芽孢杆菌属40份、产硫梭菌24份和拟杆菌5份。
作为优选,所述的复合微生物以冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的形式存在。
作为优选,所述的固体辅料与复合微生物的重量比为4:1。
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,按以下步骤进行:
(一)、单独制备微生物发酵液:
1)不规则梭菌微生物发酵液制备方法:
不规则梭菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到1-2×108个/mL;
2)不规则麻黄菌微生物发酵液制备方法:
不规则麻黄菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到1-2×108个/mL;
3)土孢杆属微生物发酵液制备方法:
土孢杆属在营养肉汤培养基上,28-30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
4)醋杆菌属微生物发酵液制备方法:醋杆菌属在醋酸菌培养基上,30-32℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1-2×108个/mL;
5)梭状芽孢杆菌属微生物发酵液制备方法:
梭状芽孢杆菌属在营养肉汤培养基上,28-30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
6)产硫梭菌微生物发酵液制备方法:
产硫梭菌在梭菌增菌培养基上,36-38℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
7)拟杆菌微生物发酵液制备方法:
拟杆菌在硫乙醇酸盐流体培养基上,30-35℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1-2×108个/mL;
(二)、冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
1)冻干粉制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,按照本领域常规方法制成冻干粉即可;
2)微生物菌液制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,即制成复合微生物菌液。
3)微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束后按照质量百分比比例混合即制成复合微生物菌液,用上述1份复合微生物菌液与4份固体辅料混合均匀即制成微生物菌液与固体辅料混合物。
作为优选,所述的固体辅料由蛋白胨和β糊精按1:1混合而成。
作为优选,所述的强化梭菌培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨10.0g,牛肉粉10.0g,酵母粉3.0g,葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8±0.1;
将上述配方进行混合操作,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述营养肉汤培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨5g,牛肉膏30g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.0-7.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.0-7.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述醋酸菌培养基由以下原料混合而成:
葡萄糖100g,酵母膏10g,碳酸钙20g,蒸馏水1000mL,pH6.8;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述梭菌增菌培养基由以下原料混合而成:
牛肉粉10.0g,月示胨10.0g,酵母粉3.0g葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,琼脂0.5g,调节pH值为6.8±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述硫乙醇酸盐流体培养基由以下原料混合而成:
胰酶消化酪蛋白胨15.0g,L-胱氨酸0.5g,无水葡萄糖5.0g,酵母膏5.0g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,浓度为0.1%的刃天青1.0ml,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用。
不规则梭菌的英文商品名称为:Clostridium irregular;
不规则麻黄菌的英文商品名称为:Asaccharospora irregular;
土孢杆属的英文商品名称为:Terrisporobacter petrolearius;
醋杆菌属的英文商品名称为:Acetobacter sp.;
梭状芽孢杆菌属的英文商品名称为:Clostridium sp.;
产硫梭菌的英文商品名称为:Clostridium sulfidigenes;
拟杆菌的英文商品名称为:Bacteroiides xylanolyticus sp.;
强化梭菌培养基的英文商品简称为:RCM;
硫乙醇酸盐流体培养基的英文商品简称为:FT;
刃天青的英文商品名称为:Resazurin;
有益菌群进行科学合理的整合,通过发酵而成的所述菌剂,具有特殊发酵气味,状态稳定,协同共生,不含致病菌,施用添加量少,安全环保等特点。投入易腐垃圾处理设备料仓中能在低温耗氧的环境中快速发挥作用,垃圾减量率超过90%,将高脂高盐高热量的易腐垃圾转变成对环境友好的二氧化碳和水。使用所述菌剂能大大节省设备能耗且运行中无二次污染。
本发明提供易腐垃圾低温相变制水降解菌剂及微生物菌液制备方法,处理后的废水达到排放标准,起到了垃圾减量,保护环境的功能。
具体实施方式
下面通过实施例,对本发明的技术方案作进一步具体的说明。
实施例1:一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:
不规则梭菌5份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属9份、醋杆菌属11份、梭状芽孢杆菌属34份、产硫梭菌30份和拟杆菌6份。
所述的复合微生物以冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的形式存在。
所述的固体辅料与复合微生物的重量比为4:1。
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,按以下步骤进行:
(一)、单独制备微生物发酵液:
1)不规则梭菌微生物发酵液制备方法:
不规则梭菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到1×108个/mL;
2)不规则麻黄菌微生物发酵液制备方法:
不规则麻黄菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到1×108个/mL;
3)土孢杆属微生物发酵液制备方法:
土孢杆属在营养肉汤培养基上,28℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3×108个/mL;
4)醋杆菌属微生物发酵液制备方法:醋杆菌属在醋酸菌培养基上,30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1×108个/mL;
5)梭状芽孢杆菌属微生物发酵液制备方法:
梭状芽孢杆菌属在营养肉汤培养基上,28℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3×108个/mL;
7)产硫梭菌微生物发酵液制备方法:
产硫梭菌在梭菌增菌培养基上,36℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3×108个/mL;
8)拟杆菌微生物发酵液制备方法:
拟杆菌在硫乙醇酸盐流体培养基上,30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1×108个/mL;
(二)、冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
1)冻干粉制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,按照本领域常规方法制成冻干粉即可;
2)微生物菌液制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,即制成复合微生物菌液。
3)微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束后按照质量百分比比例混合即制成复合微生物菌液,用上述1份复合微生物菌液与4份固体辅料混合均匀即制成微生物菌液与固体辅料混合物。
所述的固体辅料由蛋白胨和β糊精按1:1混合而成。
所述的强化梭菌培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨10.0g,牛肉粉10.0g,酵母粉3.0g,葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8±0.1;
将上述配方进行混合操作,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述营养肉汤培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨5g,牛肉膏30g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.0;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.0,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述醋酸菌培养基由以下原料混合而成:
葡萄糖100g,酵母膏10g,碳酸钙20g,蒸馏水1000mL,pH6.8;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述梭菌增菌培养基由以下原料混合而成:
牛肉粉10.0g,月示胨10.0g,酵母粉3.0g葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,琼脂0.5g,调节pH值为6.8±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述硫乙醇酸盐流体培养基由以下原料混合而成:
胰酶消化酪蛋白胨15.0g,L-胱氨酸0.5g,无水葡萄糖5.0g,酵母膏5.0g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,浓度为0.1%的刃天青1.0ml,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用。
实施例2:
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:
不规则梭菌5份、不规则麻黄菌6份、土孢杆属10份、醋杆菌属10份、梭状芽孢杆菌属35份、产硫梭菌28份和拟杆菌6份。
所述的复合微生物以冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的形式存在。
所述的固体辅料与复合微生物的重量比为4:1。
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,按以下步骤进行:
(一)、单独制备微生物发酵液:
1)不规则梭菌微生物发酵液制备方法:
不规则梭菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到2×108个/mL;
2)不规则麻黄菌微生物发酵液制备方法:
不规则麻黄菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到2×108个/mL;
3)土孢杆属微生物发酵液制备方法:
土孢杆属在营养肉汤培养基上,29℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
4)醋杆菌属微生物发酵液制备方法:醋杆菌属在醋酸菌培养基上,31℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到2×108个/mL;
5)梭状芽孢杆菌属微生物发酵液制备方法:
梭状芽孢杆菌属在营养肉汤培养基上,29℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
8)产硫梭菌微生物发酵液制备方法:
产硫梭菌在梭菌增菌培养基上,37℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
9)拟杆菌微生物发酵液制备方法:
拟杆菌在硫乙醇酸盐流体培养基上,33℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到2×108个/mL;
(二)、冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
1)冻干粉制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,按照本领域常规方法制成冻干粉即可;
2)微生物菌液制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,即制成复合微生物菌液。
3)微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束后按照质量百分比比例混合即制成复合微生物菌液,用上述1份复合微生物菌液与4份固体辅料混合均匀即制成微生物菌液与固体辅料混合物。
所述的固体辅料由蛋白胨和β糊精按1:1混合而成。
所述的强化梭菌培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨10.0g,牛肉粉10.0g,酵母粉3.0g,葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8±0.1;
将上述配方进行混合操作,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述营养肉汤培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨5g,牛肉膏30g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述醋酸菌培养基由以下原料混合而成:
葡萄糖100g,酵母膏10g,碳酸钙20g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述梭菌增菌培养基由以下原料混合而成:
牛肉粉10.0g,月示胨10.0g,酵母粉3.0g葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,琼脂0.5g,调节pH值为6.8±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述硫乙醇酸盐流体培养基由以下原料混合而成:
胰酶消化酪蛋白胨15.0g,L-胱氨酸0.5g,无水葡萄糖5.0g,酵母膏5.0g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,浓度为0.1%的刃天青1.0ml,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用。
实施例3:
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:
不规则梭菌6份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属11份、醋杆菌属9份、梭状芽孢杆菌属38份、产硫梭菌26份和拟杆菌5份。
所述的复合微生物以冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的形式存在。
所述的固体辅料与复合微生物的重量比为4:1。
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,按以下步骤进行:
(一)、单独制备微生物发酵液:
1)不规则梭菌微生物发酵液制备方法:
不规则梭菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到2×108个/mL;
2)不规则麻黄菌微生物发酵液制备方法:
不规则麻黄菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到2×108个/mL;
3)土孢杆属微生物发酵液制备方法:
土孢杆属在营养肉汤培养基上,30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
4)醋杆菌属微生物发酵液制备方法:醋杆菌属在醋酸菌培养基上,32℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到2×108个/mL;
5)梭状芽孢杆菌属微生物发酵液制备方法:
梭状芽孢杆菌属在营养肉汤培养基上,30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
9)产硫梭菌微生物发酵液制备方法:
产硫梭菌在梭菌增菌培养基上,38℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
10)拟杆菌微生物发酵液制备方法:
拟杆菌在硫乙醇酸盐流体培养基上,35℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到2×108个/mL;
(二)、冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
1)冻干粉制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,按照本领域常规方法制成冻干粉即可;
2)微生物菌液制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,即制成复合微生物菌液。
3)微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束后按照质量百分比比例混合即制成复合微生物菌液,用上述1份复合微生物菌液与4份固体辅料混合均匀即制成微生物菌液与固体辅料混合物。
所述的固体辅料由蛋白胨和β糊精按1:1混合而成。
所述的强化梭菌培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨10.0g,牛肉粉10.0g,酵母粉3.0g,葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8±0.1;
将上述配方进行混合操作,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述营养肉汤培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨5g,牛肉膏30g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述醋酸菌培养基由以下原料混合而成:
葡萄糖100g,酵母膏10g,碳酸钙20g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述梭菌增菌培养基由以下原料混合而成:
牛肉粉10.0g,月示胨10.0g,酵母粉3.0g葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,琼脂0.5g,调节pH值为6.8±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述硫乙醇酸盐流体培养基由以下原料混合而成:
胰酶消化酪蛋白胨15.0g,L-胱氨酸0.5g,无水葡萄糖5.0g,酵母膏5.0g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,浓度为0.1%的刃天青1.0ml,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用。
实施例4:
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:
不规则梭菌6份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属10份、醋杆菌属10份、梭状芽孢杆菌属40份、产硫梭菌24份和拟杆菌5份。
所述的复合微生物以冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的形式存在。
所述的固体辅料与复合微生物的重量比为4:1。
一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,按以下步骤进行:
(一)、单独制备微生物发酵液:
1)不规则梭菌微生物发酵液制备方法:
不规则梭菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到2×108个/mL;
2)不规则麻黄菌微生物发酵液制备方法:
不规则麻黄菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到2×108个/mL;
3)土孢杆属微生物发酵液制备方法:
土孢杆属在营养肉汤培养基上,30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
4)醋杆菌属微生物发酵液制备方法:醋杆菌属在醋酸菌培养基上,31℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1-2×108个/mL;
5)梭状芽孢杆菌属微生物发酵液制备方法:
梭状芽孢杆菌属在营养肉汤培养基上,29℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
10)产硫梭菌微生物发酵液制备方法:
产硫梭菌在梭菌增菌培养基上,36℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到4×108个/mL;
11)拟杆菌微生物发酵液制备方法:
拟杆菌在硫乙醇酸盐流体培养基上,35℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1×108个/mL;
(二)、冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
1)冻干粉制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,按照本领域常规方法制成冻干粉即可;
2)微生物菌液制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,即制成复合微生物菌液。
3)微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束后按照质量百分比比例混合即制成复合微生物菌液,用上述1份复合微生物菌液与4份固体辅料混合均匀即制成微生物菌液与固体辅料混合物。
所述的固体辅料由蛋白胨和β糊精按1:1混合而成。
所述的强化梭菌培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨10.0g,牛肉粉10.0g,酵母粉3.0g,葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为6.8±0.1;
将上述配方进行混合操作,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述营养肉汤培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨5g,牛肉膏30g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述醋酸菌培养基由以下原料混合而成:
葡萄糖100g,酵母膏10g,碳酸钙20g,蒸馏水1000mL,pH6.8;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述梭菌增菌培养基由以下原料混合而成:
牛肉粉10.0g,月示胨10.0g,酵母粉3.0g葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,琼脂0.5g,调节pH值为6.8±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述硫乙醇酸盐流体培养基由以下原料混合而成:
胰酶消化酪蛋白胨15.0g,L-胱氨酸0.5g,无水葡萄糖5.0g,酵母膏5.0g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,浓度为0.1%的刃天青1.0ml,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用。
Claims (10)
1.一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:包括复合微生物,所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:
不规则梭菌5~6份、不规则麻黄菌5~6份、土孢杆属9~11份、醋杆菌属9~11份、梭状芽孢杆菌属34~40份、产硫梭菌24~30份、拟杆菌5~6份。
2.根据权利要求1所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌5份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属9份、醋杆菌属11份、梭状芽孢杆菌属34份、产硫梭菌30份和拟杆菌6份。
3.根据权利要求1所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌5份、不规则麻黄菌6份、土孢杆属10份、醋杆菌属10份、梭状芽孢杆菌属35份、产硫梭菌28份和拟杆菌6份。
4.根据权利要求1所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌6份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属11份、醋杆菌属9份、梭状芽孢杆菌属38份、产硫梭菌26份和拟杆菌5份。
5.根据权利要求1所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:所述的复合微生物按如下质量份的原料组成:不规则梭菌6份、不规则麻黄菌5份、土孢杆属10份、醋杆菌属10份、梭状芽孢杆菌属40份、产硫梭菌24份和拟杆菌5份。
6.根据权利要求1所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:所述的复合微生物以冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的形式存在。
7.根据权利要求6所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂,其特征在于:所述的固体辅料与复合微生物的重量比为4:1。
8.根据权利要求1或7所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,其特征在于按以下步骤进行:
(一)、单独制备微生物发酵液:
1)不规则梭菌微生物发酵液制备方法:
不规则梭菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到1-2×108个/mL;
2)不规则麻黄菌微生物发酵液制备方法:
不规则麻黄菌在强化梭菌培养基上,25℃的环境温度下,首先斜面培养,然后二级种子液培养,发酵培养至菌浓度达到1-2×108个/mL;
3)土孢杆属微生物发酵液制备方法:
土孢杆属在营养肉汤培养基上,28-30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
4)醋杆菌属微生物发酵液制备方法:醋杆菌属在醋酸菌培养基上,30-32℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1-2×108个/mL;
5)梭状芽孢杆菌属微生物发酵液制备方法:
梭状芽孢杆菌属在营养肉汤培养基上,28-30℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
6)产硫梭菌微生物发酵液制备方法:
产硫梭菌在梭菌增菌培养基上,36-38℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到3-4×108个/mL;
7)拟杆菌微生物发酵液制备方法:
拟杆菌在硫乙醇酸盐流体培养基上,30-35℃的环境温度下,做一级斜面培养,然后接种到三角瓶做振荡二级液体培养,至菌数达到1-2×108个/mL;
(二)、冻干粉、微生物菌液或微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
1)冻干粉制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,按照本领域常规方法制成冻干粉即可;
2)微生物菌液制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束按照所述权利要求1所述的质量比例混合后,即制成复合微生物菌液。
3)微生物菌液与固体辅料混合物的制备:
将步骤(一)中所制备的各种复合微生物发酵液,发酵结束后按照质量百分比比例混合即制成复合微生物菌液,用上述1份复合微生物菌液与4份固体辅料混合均匀即制成微生物菌液与固体辅料混合物。
9.根据权利要求8所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,其特征在于:所述的固体辅料由蛋白胨和β糊精按1:1混合而成。
10.根据权利要求8所述的一种易腐垃圾低温相变制水降解菌剂的制备方法,其特征在于:
所述的强化梭菌培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨10.0g,牛肉粉10.0g,酵母粉3.0g,葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,蒸馏水1000mL,pH6.8±0.1;
将上述配方进行混合操作,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.1,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述营养肉汤培养基由以下原料混合而成:
蛋白胨5g,牛肉膏30g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.0-7.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.0-7.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述醋酸菌培养基由以下原料混合而成:
葡萄糖100g,酵母膏10g,碳酸钙20g,蒸馏水1000mL,pH6.8;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述梭菌增菌培养基由以下原料混合而成:
牛肉粉10.0g,月示胨10.0g,酵母粉3.0g葡萄糖5.0g,可溶性淀粉1.0g,氯化钠5.0g,醋酸钠3.0g,L-半胱氨酸盐酸盐0.5g,琼脂0.5g,调节pH值为6.8±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为6.8±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用;
所述硫乙醇酸盐流体培养基由以下原料混合而成:
胰酶消化酪蛋白胨15.0g,L-胱氨酸0.5g,无水葡萄糖5.0g,酵母膏5.0g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,浓度为0.1%的刃天青1.0ml,蒸馏水1000mL,调节pH值为7.1±0.2;
将上述配方混合,加入蒸馏水溶解混合均匀,调节pH值为7.1±0.2,放入高压灭菌锅0.12MPa灭菌20分钟,冷却后待用。
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