CN112029006A - 一种银耳多糖及其制备方法和应用 - Google Patents

一种银耳多糖及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112029006A
CN112029006A CN202010948173.1A CN202010948173A CN112029006A CN 112029006 A CN112029006 A CN 112029006A CN 202010948173 A CN202010948173 A CN 202010948173A CN 112029006 A CN112029006 A CN 112029006A
Authority
CN
China
Prior art keywords
tremella
polysaccharide
tremella polysaccharide
time
enzymolysis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010948173.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112029006B (zh
Inventor
陈云波
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Good Chemical Co ltd
Original Assignee
Guangzhou Good Chemical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Good Chemical Co ltd filed Critical Guangzhou Good Chemical Co ltd
Priority to CN202010948173.1A priority Critical patent/CN112029006B/zh
Publication of CN112029006A publication Critical patent/CN112029006A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112029006B publication Critical patent/CN112029006B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明公开了一种银耳多糖及其制备方法和应用，所述制备方法包括：(1)采用中性缓冲溶液对银耳粉进行浸提，得到浸提料液；(2)向浸提料液中加入果胶纤维素复合酶，进行酶解，所述果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1；(3)酶解后过滤，取滤液进行离心，静置取上清液；(4)对上清液进行醇沉，离心，得到的沉淀为银耳多糖。本发明的制备方法成本低、效率高且银耳多糖收率高于40％，适合应用于大规模商业化生产，用所述方法制备的银耳多糖，分子量在10000Da以下的多糖占总多糖95％以上，总糖含量大于92％，在食品、药品、保健品和化妆品制备领域具有广阔的应用前景。

Description

一种银耳多糖及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于银耳多糖制备技术领域，涉及一种银耳多糖及其制备方法和应用。
背景技术
银耳多糖是银耳的主要活性成分，包括酸性多糖、中性多糖、中性杂多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖等，具有强心、延缓衰老、抗血栓、抗肿瘤、提高免疫力以及祛除黄褐斑等功效，在食品、保健品及化妆品领域中应用广泛。大分子量的银耳多糖具有良好的保湿能力和优越的成膜性，并具有抗氧化、抗敏消炎作用。但是存在溶解度低、不易被皮肤吸收和在配方中应用会带来黏腻感的缺点，在化妆品中应用存在一定的缺陷。而较低分子量的银耳多糖，溶解度高，容易被皮肤吸收且具备良好的保湿能力，给皮肤提供深层保湿的作用，故低分子量的银耳多糖更适合应用于化妆品领域。
低分子量银耳多糖的制备一般经过提取、降解、纯化和干燥四个步骤。提取低分子量银耳多糖后，一般通过化学降解法和/或酶解法进行降解，再通过分级醇沉、离心干燥或分子膜过滤进行纯化，最后干燥得到低分子量银耳多糖。
CN106117387A公开了一种低分子量银耳多糖的制备方法，通过将银耳粉末和水混合，再调节pH至碱性，提取，得到粗提液；调节粗提液的温度和pH值，加入酶进行酶解；将酶解后得到的产物进行固液分离，取滤液，浓缩，得到膏状物；在膏状物中加入乙醇和H2O2进行多糖降解，静置沉淀，离心，洗涤，干燥，得到分子量在10000道尔顿以下的多糖占总多糖95％以上的低分子量银耳多糖，但是其糖收率较低。
CN102161710A公开了一种低分子量银耳多糖的制备方法，所述制备方法是将银耳净制、匀浆后加入酸水溶液，在一定的温度和压力下提取1～3小时，然后用碱水将酸水提取液中和至中性，离心，取上清液浓缩至适当体积，最后采取过超滤膜方法获得低分子量银耳多糖，但是过超滤膜工艺使得多糖损耗大，工艺效率低。
综上所述，如何提供一种低成本、高效率的低分子量银耳多糖制备方法，能够获得高收率和高纯度的低分子量银耳多糖，已成为银耳多糖制备领域亟待解决的问题之一。
发明内容
针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了一种银耳多糖及其制备方法和应用，所述银耳多糖为低分子量银耳多糖，分子量在10000Da以下的多糖占总多糖95％以上，所述制备方法成本低、效率高且多糖收率高。
为达上述目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种银耳多糖的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)采用中性缓冲溶液对银耳粉进行浸提，得到浸提料液；
(2)向浸提料液中加入果胶纤维素复合酶，进行酶解，所述果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1；
(3)酶解后过滤，取滤液进行离心，静置取上清液；
(4)对上清液进行醇沉，离心，得到的沉淀为银耳多糖。
本发明中，在银耳多糖的制备方法中将中性缓冲溶液浸提和酶解相结合，且酶解采用的果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1，不仅能够获得高品质低分子量银耳多糖，而且能够提高银耳多糖的收率。
本发明中，所述果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1，其中典型但非限制性的质量比为：1.6:1、1.7:1、1.8:1或1.9:1。
优选地，步骤(1)所述浸提在加热条件下进行。
优选地，所述加热的方式为水浴加热。
优选地，所述水浴加热的温度为60～80℃，如61℃、62℃、63℃、64℃、68℃、70℃、75℃、76℃、77℃、78℃或79℃，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，所述水浴加热的时间为2～4h，如2.5h、3h或3.5h，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(1)所述中性缓冲溶液包括磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液。
优选地，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液的浓度为0.1～0.18mol/L，如0.11mol/L、0.12mol/L、0.13mol/L、0.14mol/L、0.15mol/L、0.16mol/L、或0.17mol/L，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(1)所述银耳粉和所述中性缓冲溶液的料液比为1:40～1:60g/mL，如1:41g/mL、1:42g/mL、1:43g/mL、1:45g/mL、1:50g/mL、1:51g/mL、1:53g/mL、1:55g/mL、1:56g/mL、1:57g/mL或1:58g/mL，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
本发明中，当所述银耳粉和所述中性缓冲溶液的料液比低于1:40g/mL时，浸提效果差，升高料液比能够提高浸提效果，但达到一定值后，浸提效果不再明显变化，较高的料液比，会使得酶解体系的体积变大，影响酶解效果，因此，本发明通过对料液比进行优化，将其控制在1:40～1:60g/mL，不仅使得银耳多糖收率高，而且能够避免无意义过量使用中性缓冲溶液而造成的浪费。
优选地，步骤(2)所述果胶纤维素复合酶的添加量为银耳粉质量的0.2％～0.8％，如0.3％、0.4％、0.5％、0.6％或0.7％，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(2)所述酶解的pH为4.2～5.2，如4.3、4.4、4.5、4.6、4.9、5.0或5.1，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(2)所述酶解的温度为40～60℃，如42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、52℃、54℃、56℃或58℃，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(2)所述酶解的时间为2～6h，如2.5h、3h、3.5h、4h、4.5、5h或5.5h，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(3)所述过滤为采用滤布进行过滤。
优选地，步骤(3)所述过滤的次数为3～5次，优选为3次。
优选地，所述滤布的目数为100～700目，如200目、300目、400目、500目或600目，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，3次过滤中，第1次使用100～200目的滤布，第2次使用200～300目的滤布，第3次使用500～700目的滤布。
优选地，步骤(3)所述离心的时间为5～8min，如6min或7min，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(3)所述离心的转速为7000～8000rpm/min，如7100rpm/min、7200rpm/min、7500rpm/min、7600rpm/min或7900rpm/min，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(3)所述静置的时间为12～36h，如14h、16h、18h、20h、24h、28h、30h或34h，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(3)所述静置在无菌条件下进行。
优选地，步骤(4)所述醇沉使用乙醇溶液。
优选地，所述乙醇溶液的体积浓度为90％～95％，如91％、92％、93％或94％，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，所述上清液和乙醇溶液的体积比为1:(2～3)，如1:2.2、1:2.4、1:2.6、或1:2.8，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(4)所述醇沉的时间为6～12h，如7h、8h、9h、10h或11h，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(4)所述离心的转速为8500～10000rpm/min，如8700rpm/min、8900rpm/min、9100rpm/min、9500rpm/min、9700rpm/min或9900rpm/min，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
优选地，步骤(4)所述离心的时间为6～9min，如7min或8min，但不限于所列举值，所述数值范围内数值均适用。
本发明中，作为优选的制备方法，所述方法包括以下步骤：
(1)采用磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液对银耳粉进行浸提，缓冲溶液浓度为0.1～0.18mol/L，浸提料液比为1:40～1:60g/mL，浸提在水浴加热条件下进行，水浴温度为60～80℃，水浴时间为2～4h；
(2)调节浸提料液的温度至40～60℃以及pH至4.2～5.2，加入果胶纤维素复合酶进行酶解，所述果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1，所述果胶纤维素复合酶的添加量为银耳粉质量的0.2％～0.8％，酶解时间为2～6小时；
(3)酶解后使用滤布进行3次过滤，第1次使用100～200目的滤布，第2次使用200～300目的滤布，第3次使用500～700目的滤布，取滤液，7000～8000rpm/min离心5～8min，无菌条件下进行静置沉淀12～36h；
(4)取上清液，加入体积浓度为90％～95％的乙醇溶液进行醇沉，乙醇溶液与上清液的体积比为(2～3):1，醇沉6～12h，8500～10000rpm/min离心6～9min，取沉淀，即获得银耳多糖。
第二方面，本发明提供一种银耳多糖，所述银耳多糖采用第一方面所述制备方法制得。
优选地，所述银耳多糖的分子量不高于50000Da。
优选地，所述银耳多糖中分子量在10000Da以下的多糖占总多糖95％以上。
优选地，所述银耳多糖中，分子量为10000～50000Da的银耳多糖的百分比为2.89％～4.59％、分子量为5000～10000Da的银耳多糖的百分比为40.47％～76.77％、分子量为1000～5000Da的银耳多糖的百分比为15.62％～42.98％、分子量小于1000Da的银耳多糖的百分比为2.93％～12.66％。
优选地，所述银耳多糖中总糖含量大于92％。
第三方面，本发明提供第二方面所述的银耳多糖在制备食品、药品、保健品或化妆品中的应用。
第四方面，本发明提供一种化妆品，所述化妆品包含第二方面所述的银耳多糖。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明的银耳多糖制备方法，将中性缓冲溶液浸提和酶解相结合，酶解采用果胶纤维素复合酶，果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比设置为(1.5～2):1，使得银耳多糖收率高于40％，最高为45.2％，所述制备方法成本低、效率高，适合应用于大规模商业化生产；
(2)本发明的银耳多糖，分子量在10000Da以下的多糖占总多糖95％以上，总糖含量大于92％，最高为94.3％，在食品、药品、保健品和化妆品制备领域均具有广阔的应用前景。
具体实施方式
为进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合实施例对本发明作进一步地说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅仅用于解释本发明，而非对本发明的限定。
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
本发明中，所使用的的果胶酶和纤维素酶分别为果胶酶(SPE-010)和纤维素酶(SPE-017)，均购买于盛夏集团。
实施例1
本实施例提供一种银耳多糖的制备方法，具体过程如下：
(1)将市售银耳晒干，取银耳干品，去除杂质，粉碎过80目筛，取100g银耳粉，向银耳粉中以料液比1:50g/mL加入0.15mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，然后水浴加热，水浴温度为70℃，加热3h，得到粗提液；
(2)将粗提液降温至50℃，并调节pH至4.7，加入果胶纤维素复合酶(果胶酶与纤维素酶的质量比为1.75:1)，添加量为银耳粉质量的0.5％，酶解反应4h；
(3)酶解后使用滤布过滤3次，1次使用200目的滤布，第2次使用200目的滤布，第三次用700目的滤布，取滤液，7500rpm/min离心6min，静置沉淀24h；
(4)取上清液，加入乙醇溶液进行醇沉，乙醇溶液的体积浓度为95％，乙醇溶液与上清液的体积比为1:2.5，醇沉6h，10000rpm/min离心9min，取沉淀，即获得银耳多糖。
实施例2
本实施例提供一种银耳多糖的制备方法，具体过程如下：
(1)将市售银耳晒干，取银耳干品，去除杂质，粉碎过80目筛，取100g银耳粉，向银耳粉中以料液比1:60g/mL加入0.2mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，然后水浴加热，水浴温度为80℃，加热2h，得到粗提液；
(2)将粗提液降温至40℃，并调节pH至5.2，加入果胶纤维素复合酶(果胶酶与纤维素酶的质量比为1.5:1)，添加量为银耳粉质量的0.2％，酶解反应6h；
(3)酶解后使用滤布过滤3次，1次使用100目的滤布，第2次使用300目的滤布，第三次用500目的滤布，取滤液，8000rpm/min离心5min，静置沉淀36h；
(4)取上清液，加入乙醇溶液进行醇沉，乙醇溶液的体积浓度为90％，乙醇溶液与上清液的体积比为1:2，醇沉12h，8500rpm/min离心6min，取沉淀，即获得银耳多糖。
实施例3
本实施例提供一种银耳多糖的制备方法，具体过程如下：
(1)将市售银耳晒干，取银耳干品粉，去除杂质，粉碎过80目筛，取100g银耳粉，向银耳粉中以料液比1:40g/mL加入0.1mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，然后水浴加热，水浴温度为60℃，加热4h，得到粗提液；
(2)将粗提液降温至60℃，并调节pH至4.2，加入果胶纤维素复合酶(果胶酶与纤维素酶的质量比为2:1)，添加量为银耳粉质量的0.8％，酶解反应2h；
(3)酶解后使用滤布过滤3次，1次使用150目的滤布，第2次使用250目的滤布，第三次用600目的滤布，取滤液，7000rpm/min离心8min，静置沉淀12h，取上清液，冷冻干燥，得到银耳多糖；
(4)取上清液，加入乙醇溶液进行醇沉，乙醇溶液的体积浓度为92％，乙醇溶液与上清液的体积比为1:3，醇沉9h，9500rpm/min离心8min，取沉淀，即获得银耳多糖。
实施例4
本实施例与实施例1相比，区别仅在于步骤(2)加入的果胶纤维素复合酶中，果胶酶和纤维素酶的质量比为1.5:1，其它与实施例1相同。
实施例5
本实施例与实施例1相比，区别仅在于步骤(2)加入的果胶纤维素复合酶中，果胶酶和纤维素酶的质量比为2:1，其它与实施例1相同。
实施例6
本实施例与实施例1相比，区别仅在于步骤(1)中以料液比1:40g/mL加入0.15mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，其它与实施例1相同。
实施例7
本实施例与实施例1相比，区别仅在于步骤(1)中以料液比1:60g/mL加入0.15mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，其它与实施例1相同。
实施例8
本实施例与实施例1相比，区别仅在于步骤(1)中以料液比1:20g/mL加入0.15mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，其它与实施例1相同。
实施例9
本实施例与实施例1相比，区别仅在于步骤(1)中以料液比1:80g/mL加入0.15mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，其它与实施例1相同。
对比例1
本对比例与实施例1相比，区别仅在于步骤(2)加入果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为1:1，其它与实施例1相同。
对比例2
本对比例与实施例1相比，区别仅在于步骤(2)加入果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为3:1，其它与实施例1相同。
对比例3
本对比例与实施例1相比，区别仅在于步骤(2)加入的酶为果胶酶，即省略了纤维素酶的加入，果胶酶的加入量与实施例1中果胶纤维素复合酶的加入量相同，其它与实施例1也相同。
对比例4
本对比例与实施例1相比，区别仅在于步骤(2)加入的酶为纤维素酶，即省略了果胶酶的加入，纤维素酶的加入量与实施例1中果胶纤维素复合酶的加入量相同，其它与实施例1也相同。
试验例1总糖含量和收率
取实施例1-9和对比例1-4所制备的银耳多糖，制备成0.5％(w/w)水溶液，参考国标GB/T 15672～2009《食用菌中总糖含量的测定》测定它们的总糖含量，并根据公式(1)计算银耳多糖收率，结果如表1所示。
Figure BDA0002676014400000111
表1
编号 总糖含量(％) 银耳多糖收率(％)
实施例1 94.3 45.2
实施例2 93.6 44.4
实施例3 93.9 43.6
实施例4 94.0 44.1
实施例5 93.1 43.8
实施例6 93.5 44.2
实施例7 93.2 43.7
实施例8 92.3 41.1
实施例9 92.1 41.8
对比例1 90.1 30.3
对比例2 89.5 29.8
对比例3 89.3 29.5
对比例4 88.9 31.2
如表1所示，实施例1-9所制备的银耳多糖的总糖含量和收率均高于对比例1-4所制备的银耳多糖的总糖含量和收率，说明酶的种类和用量对于银耳多糖的酶解至关重要，本发明通过研究酶的种类及用量对银耳多糖收率和总糖含量的影响，提高了银耳多糖的总糖含量和收率，此外，实施例1-7制备的银耳多糖的总糖含量和收率均高于实施例8和实施例9制备的银耳多糖的总糖含量和收率，说明银耳粉和中性缓冲溶液的料液比对银耳多糖的粗提有一定的影响，本发明通过控制料液比提高了银耳多糖的总糖含量和收率。
试验例2分子量分布的检测
通过高效凝胶渗透色谱法对本发明实施例1-9制备的银耳多糖的分子量分布进行测定，测定方法参照刘芹等的研究(刘芹，宁嘉玲，丁侃。基于高效凝胶渗透色谱法的银耳多糖质量控制研究[J]。中草药，2011，42(009):1732-1735。)，结果如表2所示。
表2
编号 ＜1000Da 1000～5000Da 5000～10000Da 10000～50000Da
实施例1 3.17％ 32.71％ 61.23％ 2.89％
实施例2 2.93％ 33.56％ 59.87％ 3.64％
实施例3 12.66％ 42.98％ 40.47％ 3.89％
实施例4 3.21％ 31.95％ 60.79％ 4.05％
实施例5 3.11％ 32.31％ 59.99％ 4.59％
实施例6 5.69％ 33.36％ 56.98％ 3.97％
实施例7 8.59％ 26.12％ 61.27％ 4.02％
实施例8 3.67％ 15.62％ 76.77％ 3.94％
实施例9 4.17％ 34.26％ 58.36％ 3.21％
如表2所示，实施例1-9制备的银耳多糖中，分子量分布情况为：分子量为10000～50000Da的银耳多糖的百分比为2.89％～4.59％、分子量为5000～10000Da的银耳多糖的百分比为40.47％～76.77％、分子量为1000～5000Da的银耳多糖的百分比为15.62％～42.98％、分子量小于1000Da的银耳多糖的百分比为2.93％～12.66％，可见本发明制备的银耳多糖中分子量小于10000Da的多糖均占总多糖的95％以上，最高占97.11％，表明本发明的制备方法能够制备低分子量银耳多糖。
综上所述，本发明银耳多糖的制备方法成本低、效率高且银耳多糖收率高于40％，最高为45.2％适合应用于大规模商业化生产。本发明的银耳多糖，分子量在10000Da以下的多糖占总多糖95％以上，总糖含量大于92％，最高为94.3％，在食品、药品、保健品和化妆品制备领域具有广阔的应用前景。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种银耳多糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)采用中性缓冲溶液对银耳粉进行浸提，得到浸提料液；
(2)向浸提料液中加入果胶纤维素复合酶，进行酶解，所述果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1；
(3)酶解后过滤，取滤液进行离心，静置取上清液；
(4)对上清液进行醇沉，离心，得到的沉淀为银耳多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述浸提在加热条件下进行；
优选地，所述加热的方式为水浴加热；
优选地，所述水浴加热的温度为60～80℃；
优选地，所述水浴加热的时间为2～4h；
优选地，步骤(1)所述中性缓冲溶液包括磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液；
优选地，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液的浓度为0.1～0.18mol/L；
优选地，步骤(1)所述银耳粉和所述中性缓冲溶液的料液比为1:40～1:60g/mL。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述果胶纤维素复合酶的添加量为银耳粉质量的0.2％～0.8％；
优选地，步骤(2)所述酶解的pH为4.2～5.2；
优选地，步骤(2)所述酶解的温度为40～60℃；
优选地，步骤(2)所述酶解的时间为2～6h。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述过滤的次数为3～5次，优选为3次；
优选地，3次过滤中，第1次使用100～200目的滤布，第2次使用200～300目的滤布，第3次使用500～700目的滤布；
优选地，步骤(3)所述过滤为采用滤布进行过滤；
优选地，所述滤布的目数为100～700目；
优选地，步骤(3)所述离心的时间为5～8min；
优选地，步骤(3)所述离心的转速为7000～8000rpm/min；
优选地，步骤(3)所述静置的时间为12～36h；
优选地，步骤(3)所述静置在无菌条件下进行；
优选地，步骤(4)所述醇沉使用乙醇溶液；
优选地，所述乙醇溶液的体积浓度为90％～95％；
优选地，所述上清液和乙醇溶液的体积比为1:(2～3)；
优选地，步骤(4)所述醇沉的时间为6～12h；
优选地，步骤(4)所述离心的转速为8500～10000rpm/min；
优选地，步骤(4)所述离心的时间为6～9min。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)在水浴加热条件下，采用磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液对银耳粉进行浸提，所述缓冲溶液的浓度为0.1～0.18mol/L，浸提料液比为1:40～1:60g/mL，所述水浴加热的温度为60～80℃，所述水浴加热的时间为2～4h；
(2)调节浸提料液的温度至40～60℃以及pH至4.2～5.2，加入果胶纤维素复合酶进行酶解，所述果胶纤维素复合酶中果胶酶和纤维素酶的质量比为(1.5～2):1，所述果胶纤维素复合酶的添加量为银耳粉质量的0.2％～0.8％，酶解时间为2～6h；
(3)酶解后使用滤布进行3次过滤，第1次使用100～200目的滤布，第2次使用200～300目的滤布，第3次使用500～700目的滤布，取滤液，7000～8000rpm/min离心5～8min，无菌条件下进行静置沉淀12～36h；
(4)取上清液，加入体积浓度为90％～95％的乙醇溶液进行醇沉，乙醇溶液与上清液的体积比为(2～3):1，醇沉6～12h，8500～10000rpm/min离心6～9min，取沉淀，即获得银耳多糖。
6.一种银耳多糖，其特征在于，所述银耳多糖采用权利要求1-5任一项所述的制备方法制得。
7.根据权利要求6所述的银耳多糖，其特征在于，所述银耳多糖的分子量不高于50000Da；
优选地，所述银耳多糖中分子量在10000Da以下的多糖占总多糖95％以上。
8.根据权利要求6或7所述的银耳多糖，其特征在于，所述银耳多糖中，分子量为10000～50000Da的银耳多糖的百分比为2.89％～4.59％、分子量为5000～10000Da的银耳多糖的百分比为40.47％～76.77％、分子量为1000～5000Da的银耳多糖的百分比为15.62％～42.98％、分子量小于1000Da的银耳多糖的百分比为2.93％～12.66％；
优选地，所述银耳多糖中总糖含量大于92％。
9.权利要求6-8任一项所述的银耳多糖在制备食品、药品、保健品或化妆品中的应用。
10.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品包含权利要求6-8任一项所述的银耳多糖。
CN202010948173.1A 2020-09-10 2020-09-10 一种银耳多糖及其制备方法和应用 Active CN112029006B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010948173.1A CN112029006B (zh) 2020-09-10 2020-09-10 一种银耳多糖及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010948173.1A CN112029006B (zh) 2020-09-10 2020-09-10 一种银耳多糖及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112029006A true CN112029006A (zh) 2020-12-04
CN112029006B CN112029006B (zh) 2021-05-18

Family

ID=73585311

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010948173.1A Active CN112029006B (zh) 2020-09-10 2020-09-10 一种银耳多糖及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112029006B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112778434A (zh) * 2021-03-11 2021-05-11 上海辉文生物技术股份有限公司 一种银耳多糖及其提取方法
CN112941128A (zh) * 2021-02-24 2021-06-11 青岛农业大学 一种从银耳中提取银耳多糖的方法
CN113201079A (zh) * 2021-05-13 2021-08-03 襄阳嘉达生物科技有限公司 一种从银耳中提取多糖的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102835653A (zh) * 2012-09-20 2012-12-26 中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 金耳颗粒的生产方法
CN106117387A (zh) * 2016-08-19 2016-11-16 广州潮徽化工科技有限公司 一种低分子量银耳多糖及其制备方法与应用
CN107365394A (zh) * 2017-09-27 2017-11-21 姚莉 一种用于从银耳中提取多糖的酶解提取方法
CN107586349A (zh) * 2017-10-27 2018-01-16 福州大学 中性缓冲溶液提取银耳多糖的方法
CN108148147A (zh) * 2018-01-25 2018-06-12 安徽诚亚生物科技有限公司 一种银耳多糖的提取方法
CN110367424A (zh) * 2019-08-29 2019-10-25 安徽宜康食品有限公司 一种即冲型银耳芝麻复合饮品及其制备方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102835653A (zh) * 2012-09-20 2012-12-26 中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 金耳颗粒的生产方法
CN106117387A (zh) * 2016-08-19 2016-11-16 广州潮徽化工科技有限公司 一种低分子量银耳多糖及其制备方法与应用
CN107365394A (zh) * 2017-09-27 2017-11-21 姚莉 一种用于从银耳中提取多糖的酶解提取方法
CN107586349A (zh) * 2017-10-27 2018-01-16 福州大学 中性缓冲溶液提取银耳多糖的方法
CN108148147A (zh) * 2018-01-25 2018-06-12 安徽诚亚生物科技有限公司 一种银耳多糖的提取方法
CN110367424A (zh) * 2019-08-29 2019-10-25 安徽宜康食品有限公司 一种即冲型银耳芝麻复合饮品及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
祝妍等: ""参脑清咀嚼片的工艺研究"", 《现代食品》 *
黄锁义主编: "《桂西少数民族地区中药材研究》", 30 September 2015, 广西科学技术出版社 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112941128A (zh) * 2021-02-24 2021-06-11 青岛农业大学 一种从银耳中提取银耳多糖的方法
CN112778434A (zh) * 2021-03-11 2021-05-11 上海辉文生物技术股份有限公司 一种银耳多糖及其提取方法
CN112778434B (zh) * 2021-03-11 2022-11-25 上海辉文生物技术股份有限公司 一种银耳多糖及其提取方法
CN113201079A (zh) * 2021-05-13 2021-08-03 襄阳嘉达生物科技有限公司 一种从银耳中提取多糖的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN112029006B (zh) 2021-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112029006A (zh) 一种银耳多糖及其制备方法和应用
CN101544999B (zh) 高纯度低分子量肝素钠的生产纯化方法
CN108299570A (zh) 一种枸杞多糖的制备方法
CN102229681A (zh) 一种利用猪小肠生产肝素钠的制备方法
CN113402625B (zh) 一种桦褐孔菌多糖及其提取方法
CN115260334B (zh) 一种桑叶多糖的复合提取工艺
CN104498564A (zh) 一种低分子量硫酸软骨素的制备方法
CN105061633A (zh) 一种利用马尾藻制取褐藻糖胶的方法
CN107722132B (zh) 一种从海藻中联产海藻多糖和海藻蛋白的方法
CN107936129A (zh) 一种全系列分子量银耳多糖的制备工艺
CN110916198A (zh) 一种利用黄秋葵发酵酒酒渣同时制备果胶多糖和黏性糖蛋白的方法
CN113980153B (zh) 一种高粘度桃胶多糖的提取方法
CN113244657A (zh) 一种紫青稞麸皮功能成分的梯次提取方法
CN114369564B (zh) 一种枳雀来源外泌体的制备方法和应用
CN106632725B (zh) 一种从果胶原料漂洗液中分离水溶性果胶的方法
CN112390847A (zh) 一种从川楝果实中提取川楝素的方法
CN115594775B (zh) 一种银耳多糖的制备方法及应用
CN112442136A (zh) 一种银耳功能性成分的提取方法
CN109517084A (zh) 一种黄芪多糖的提取纯化工艺
CN103289969A (zh) 一种从植物茎叶中提取超氧化物歧化酶的方法
CN115820778A (zh) 工业化生产富含海参多糖的海参多肽的方法
CN110484577B (zh) 一种从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法
CN106349315A (zh) 一种罗汉果提取方法
CN106832044B (zh) 一种小核菌多糖高效提取纯化方法及其应用
CN108059686B (zh) 一种以化橘红为基础制备多糖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant