CN111624074B - 一种用于血清中维生素b12含量检测的释放剂、制备及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用；其能解决现有产品释放不完全、重复性差的技术问题。一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，包括稳定剂、变性剂、中和剂；稳定剂为含有0.27%2‑氯乙酰胺、0.25%%二水乙二胺四乙酸二钠的水溶液；变性剂为含有4.78%氢氧化钠、2.94%硼酸、0.005%***的水溶液；中和剂为含有13.61%磷酸二氢钾水溶液。本发明的维生素B12释放剂释放完全、重复性好，并能够达到国际一线品牌的水平。
Description
技术领域
本发明属于医疗器械生物类免疫体外诊断领域，具体涉及一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用。
背景技术
维生素B12是一种含有3价钴的多环系化合物，4个还原的吡咯环连在一起形成1个钴啉大环，是维生素B12分子的核心，分子量为1355。
人体吸收维生素B12的过程约需3小时，并且需要借助一种胃肠道分泌物（内因子），如人体缺乏该内因子，即使膳食中来源充足仍然会导致缺乏。人体缺乏维生素B12时易造成神经***不可逆损害，引起烦躁不安、记忆衰退等症状，而且也会导致恶性贫血、老年痴呆及精神抑郁等疾病。并且过量的摄入可能会出现哮喘、荨麻疹、湿疹、面部浮肿、寒颤等过敏反应，也可能引发神经兴奋、心前区痛和心悸；也有报道认为过量可能会促进肿瘤发生。因此临床上建议对该类维生素做到先检测再补充，不缺乏不补充。
在人的血清或血浆中，维生素B12通常与内因子结合以复合物的形式存在。因此在检测前也需对样本进行预处理，以保证其以游离的形式存在。同时，维生素B12在体内有多个异构体形式，不同形式的分子与内因子的结合力有一定的差异，这种情况可能会导致检测结果不准确。向释放液中加入一定量的***可将样本中的羟钴胺素转化至氰钴胺素，以降低异构体之间的结合力差异导致的检测结果不准确的情况。本发明旨在阐述一种高效、简单、快速的血清中维生素B12释放剂，并应用于相应的免疫检测方法中。
发明内容
针对上述问题，本发明提供了一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用；其能解决现有产品释放不完全、重复性差的技术问题。
一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，包括稳定剂、变性剂、中和剂；
所述稳定剂为含有0.27% 2-氯乙酰胺、0.25%%二水乙二胺四乙酸二钠的水溶液；
所述变性剂为含有4.78% 氢氧化钠、2.94%硼酸、0.005%***的水溶液；
所述中和剂为含有13.61% 磷酸二氢钾水溶液。
上述释放剂的制备方法，其特征在于：所述稳定剂、所述变性剂、所述中和剂分别按量称取原料后、混匀。
上述释放剂在血清中维生素B12含量检测中的应用，包括以下步骤：
（1）将30μL的样本、27μL的稳定剂和63μL的变性剂先后加入至样本处理管中，混匀并反应，得到第一溶液；
（2）向所述第一溶液中加入90μL中和剂混匀并反应。
进一步的，步骤（1）中所述反应的条件为37℃下反应10分钟；
步骤（2）中所述反应的条件为37℃下反应1分钟。
本发明的维生素B12释放剂释放完全、重复性好、简单快速，采用该方法可较大程度改善现有产品释放不完全、重复性差、操作复杂、耗时长等诸多缺点。
附图说明
图1为本发明的释放剂与贝克曼公司试剂盒检测结果线性回归图。
图2为本发明的释放剂与贝克曼公司试剂盒检测结果的相对偏差图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
以下实施例中，所使用的标准品、链霉亲和素包被板、生物素化捕获蛋白、酶结合物、洗液、底物均为江苏拜明生物技术有限公司提供的维生素B12检测试剂盒（苏械注准20172400542号）中的组分。对照的样本释放剂由江苏拜明生物技术有限公司提供（苏盐械备20150021号）、购自贝克曼库尔特公司的维生素B12检测试剂，注册证号：国械注进20172400054。
本发明下述高中低血清样本均来自无锡市第一人民医院，浓度已由贝克曼的维生素B12检测试剂（国械注进20172400011）检测浓度。
实施例1
（1）一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂，包括稳定剂、变性剂、中和剂；
稳定剂为含有0.27% 2-氯乙酰胺、0.25%%二水乙二胺四乙酸二钠的水溶液；
变性剂为含有4.78% 氢氧化钠、2.94%硼酸、0.005%的***水溶液；
中和剂为含有13.61% 磷酸二氢钾水溶液。
（2）释放剂的制备
稳定剂：称取1440g纯化水，加入3.86g 2-氯乙酰胺、3.6g 二水乙二胺四乙酸二钠，混合均匀。
变性剂：称取1440g纯化水，加入75.33g 氢氧化钠、46.41g 硼酸、78.9mg ***，混合均匀。
中和剂：称取1440g纯化水，加入226.84g 磷酸二氢钾，混合均匀。
（3）***浓度分析实验
检测组1：采用江苏拜明生物技术有限公司提供的维生素B 12检测试剂盒的标准品、链霉亲和素包被板、生物素化捕获蛋白、酶结合物、洗液、底物以及本发明上述释放剂。
检测组2、3、4：与检测组1的区别仅在于***的含量不同，分别为：0%，0.0025%，0.01%。
对照组1：采用克曼库尔特公司的维生素B12检测试剂。
取中值样本一份，用贝克曼产品对血清样本中的维生素B12浓度进行测定。然后检测组1-4按照以下方法对样本中维生素B12浓度进行检测，重复10次。
检测组检测方法：取30μL血清样本或标准品，加入27μL的稳定剂和63μL的变性剂，混匀后于37℃孵育10分钟，再加入90μL的中和剂，混合均匀，于37℃孵育1分钟。取50μL经过预处理的样本或标准品，加入至链霉亲和素包被孔中，再加入50μL的生物素化捕获蛋白溶液于37℃反应10分钟；孵育完成后，加入50μL的酶结合物溶液于37℃再反应10分钟，用300μL洗液洗涤5次后加入100μL发光底物，反应1分钟后用化学发光仪读取光信号值。
实验结果见表1所示，变性剂中不添加***时，样本检测的变异系数较大，达到20%以上，当浓度增加到0.005%或更高时，变异系数明显变小。考虑到***的毒性，确定其使用浓度为0.005%。
表1
（4）重复性实验1
检测组1：采用江苏拜明生物技术有限公司提供的维生素B 12检测试剂盒的标准品、链霉亲和素包被板、生物素化捕获蛋白、酶结合物、洗液、底物以及本发明上述释放剂。
对照组2：采用江苏拜明生物技术有限公司提供的维生素B 12检测试剂盒的标准品、链霉亲和素包被板、生物素化捕获蛋白、酶结合物、洗液、底物以及江苏拜明生物技术有限公司提供的释放剂（苏盐械备20150021号）。
取高中低三份血清，用检测组1、对照组2分别按照上述检测组检测方法对样本中维生素 12浓度进行检测，各浓度样本重复10次。结果如表2所示，本经本发明的方法处理后，高中低值血清样本重复性结果均优于市售产品。
表2. 高中低值样本释放结果对比
（4）重复性实验2
检测组1：采用江苏拜明生物技术有限公司提供的维生素B 12检测试剂盒的标准品、链霉亲和素包被板、生物素化捕获蛋白、酶结合物、洗液、底物以及本发明上述释放剂。
对照组1：采用克曼库尔特公司的维生素B12检测试剂。
取高中低三份血清，用贝克曼产品对样本浓度进行测定。然后检测组1按照上述检测组检测方法进行检测，各浓度样本重复10次。
实验结果如表3所示，本发明的维生素B12释放剂与对应的实验方法可有效、完全释放样本中的维生素B12，检测结果准确度高，重复性好，性能达到国际一线产品水平。
表3. 高中低值样本释放结果对比
（5）一致性实验
检测组1：采用江苏拜明生物技术有限公司提供的维生素B 12检测试剂盒的标准品、链霉亲和素包被板、生物素化捕获蛋白、酶结合物、洗液、底物以及本发明上述释放剂。
对照组1：采用克曼库尔特公司的维生素B12检测试剂。
无锡第一人民医院收集118份临床血清样本，检测组1按照按照上述检测组检测方法对样本进行检测，对照组使用贝克曼的维生素B12检测试剂及配套的化学发光仪器进行检测。
如图1所示，贝克曼公司产品的检测结果（x）与本发明所述的方法检测结果（y）的线性回归方程为y=0.9903*x+9.6191, r2=0.9309。相对偏倚结果如图2所示，超过90%以上的样本的偏差在其95%置信区间内，相对偏倚的95%置信区间为73.56%%~131.57%。结果表明采用本发明的维生素B12释放剂的检测结果与进口一流品牌产品一致性较好，能够应用于血清样品的维生素B12含量检测，该方法具有广泛的应用前景。
Claims (2)
1.一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，包括稳定剂、变性剂、中和剂；
所述稳定剂为含有0.27% 2-氯乙酰胺、0.25%%二水乙二胺四乙酸二钠的水溶液；
所述变性剂为含有4.78% 氢氧化钠、2.94%硼酸、0.005%***的水溶液；
所述中和剂为含有13.61% 磷酸二氢钾水溶液。
2.如权利要求1所述的释放剂的制备方法，其特征在于，所述稳定剂、所述变性剂、所述中和剂分别按量称取原料后、混匀。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4300907A (en) * | 1980-02-04 | 1981-11-17 | Becton, Dickinson And Company | Serum vitamin B12 assay and kit therefor |
| DE3137668A1 (de) * | 1980-09-22 | 1982-05-27 | Amersham International Ltd., Amersham, Buckinghamshire | Verfahren zum testen auf vitamin b(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts) und testsatz zu seiner durchfuehrung |
| US5187107A (en) * | 1991-06-27 | 1993-02-16 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | B12 enzyme imunoassay and sample pretreatment |
| CN107219373A (zh) * | 2016-03-22 | 2017-09-29 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 维生素b12检测试剂盒和方法及其样本前处理方法 |
| CN109709253A (zh) * | 2019-01-31 | 2019-05-03 | 杭州度安医学检验实验室有限公司 | 液相色谱串联质谱测定维生素b12的方法及试剂盒 |
-
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4300907A (en) * | 1980-02-04 | 1981-11-17 | Becton, Dickinson And Company | Serum vitamin B12 assay and kit therefor |
| DE3137668A1 (de) * | 1980-09-22 | 1982-05-27 | Amersham International Ltd., Amersham, Buckinghamshire | Verfahren zum testen auf vitamin b(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts) und testsatz zu seiner durchfuehrung |
| US5187107A (en) * | 1991-06-27 | 1993-02-16 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | B12 enzyme imunoassay and sample pretreatment |
| CN107219373A (zh) * | 2016-03-22 | 2017-09-29 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 维生素b12检测试剂盒和方法及其样本前处理方法 |
| CN109709253A (zh) * | 2019-01-31 | 2019-05-03 | 杭州度安医学检验实验室有限公司 | 液相色谱串联质谱测定维生素b12的方法及试剂盒 |
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