CN111610271A

CN111610271A - 一种正品球药隔重楼的鉴别方法

Info

Publication number: CN111610271A
Application number: CN202010501827.6A
Authority: CN
Inventors: 尹鸿翔; 饶文霞
Original assignee: Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
Current assignee: Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
Priority date: 2020-06-04
Filing date: 2020-06-04
Publication date: 2020-09-01

Abstract

本发明提供了一种正品球药隔重楼的鉴别方法，它是采用高效液相色谱法检测重楼皂苷，其中，正品球药隔重楼含有重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，球药隔重楼伪品只含重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，或不含重楼皂苷。本发明还提供了一种球药隔重楼正品与伪品或混伪品的鉴别方法，它包括如下步骤：a、观察花期的待测样品性状；b、观察待测样品显微特征，其中，正品球药隔重楼淀粉粒中无脐点，球药隔重楼伪品或混伪品淀粉粒中有脐点；c、按照高效液相色谱法检测重楼皂苷。本发明提供的鉴别方法，可以准确、有效的鉴别市场上常见的正品球药隔重楼及同属近缘易混种，操作简单、高效快速、重现性好、成本低，应用前景良好。

Description

一种正品球药隔重楼的鉴别方法

技术领域

本发明属于中药材鉴别技术领域，具体涉及一种正品球药隔重楼的鉴别方法。

背景技术

中药重楼，以“蚤休”之名始载于《神农本草经》，具有清热解毒，消肿止痛，凉肝定惊之功效，药用价值显著，药用历史悠久，历版《中国药典》收载为云南重楼Parispolyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.和七叶一枝花P.polyphyllaSmith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎。随着重楼资源的进一步开发和利用，球药隔重楼被《四川省藏药材标准》2014年版收载，是四川省的法定重楼基原。由于其药材生长快、合格率高，比云南重楼更适应低海拔的湿热环境，海拔下限可达600m，深受广大药农青睐，近年来的种植面积迅速扩大。球药隔重楼广泛分布于我国西南及华中地区，在《中国植物志》和《Flora of China》的分类***中，球药隔重楼种下含1变种，即具柄重楼Parisfargesii var.petiolata，而在李恒分类***中，球药隔重楼含2个变种：宽瓣球药隔重楼P.faresii var.latipetala H.Li et V.G.Soukup、短瓣球药隔重楼P.fargesiivar.brevipetalata(Huang et Yang)H.Li，2者和原变种共同组成了球药隔组Sect.Fargesianae H.Li。虽然具柄重楼形态上近似于球药隔重楼，但在李恒分类***中被置于金线重楼P.delavayi Franch.种下的变种，异名为卵叶重楼Paris delavayiFranch.var.petiolata，这表明《中国植物志》***与李恒***在关于球药隔重楼的种下分类，以及具柄重楼的***位置上存在不同意见。

2017～2019年通过在主产区调查球药隔重楼人工种植业时，很多种植户介绍，在引种的球药隔重楼中不但混有具柄重楼，而且还混有另一种重楼属植物，形态上和球药隔重楼也十分相似，未开花的幼小植株更容易混淆，甚至有商贩用其冒充球药隔重楼种苗出售。但是其成熟植株的叶片较之球药隔重楼更为光亮，呈现金属光泽，经鉴定，为2017年胡光万等人发表的重楼属一新种：亮叶重楼P.nitida GWHu,ZWang&QFWang。显然，在球药隔重楼的野生变家种过程中，种源混乱已经成为制约种植规范化和药材品质稳定的一个突出问题，但是关于球药隔重楼的研究，目前只集中于化学成分的鉴定和分析，生理活性成分的筛选，关于其品种整理和混伪品的鉴定技术仍然缺乏报道，阻碍了球药隔重楼的进一步开发利用和产业的健康发展。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种正品球药隔重楼的鉴别方法，它是采用高效液相色谱法检测重楼皂苷，其中，正品球药隔重楼含有重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，球药隔重楼伪品只含重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，或不含重楼皂苷。

进一步地，所述正品球药隔重楼为球药隔重楼原变种、宽瓣球药隔重楼、短瓣球药隔重楼。

进一步地，所述球药隔重楼伪品为具柄重楼、亮叶重楼。

更进一步地，所述具柄重楼只含重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H。

更进一步地，所述亮叶重楼不含重楼皂苷。

进一步地，所述高效液相色谱法检测重楼皂苷，包括如下步骤：

1)对照品溶液的制备：分别取重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H对照品，加甲醇溶解，制成对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：取球药隔重楼，粉碎过筛，加乙醇回流提取，提取液过滤，取续滤液作为供试品溶液；

3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以胆固醇基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A；以水为流动相B；梯度洗脱程序如下：

进一步地，步骤(1)中，所述重楼皂苷为重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、重楼皂苷I、重楼皂苷II和/或重楼皂苷V；所述对照品溶液每1ml含各重楼皂苷0.1～1mg。

进一步地，步骤(2)中，所述待测样品与乙醇溶液的质量体积比为0.2～0.8g：25ml，优选0.5g：25ml；所述乙醇溶液浓度为80～90％v/v，优选95％v/v，所述回流提取温度82℃，时间30min。

进一步地，所述色谱柱为COSMOSIL Cholester，规格4.6mm I D×250mm。

进一步地，步骤(3)中，所述色谱条件中检测波长203nm，柱温30℃，流速1.0mL·min^-1，进样量10μL。

本发明还提供了一种球药隔重楼正品与伪品或混伪品的鉴别方法，它包括如下步骤：

a、取花期的待测样品，观察性状，其中，正品球药隔重楼药凸呈球形，叶片呈蜡样光泽，伪品具柄重楼药凸呈棒状，伪品亮叶重楼叶片呈金属光泽；

b、取待测样品，粉碎，观察显微特征，其中，正品球药隔重楼淀粉粒中无脐点，球药隔重楼伪品或混伪品淀粉粒中有脐点；

c、取待测样品，按照前述高效液相色谱方法检测，重楼皂苷，其中，正品球药隔重楼含有重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，球药隔重楼伪品只含重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，或不含重楼皂苷。

进一步地，步骤b所述伪品为亮叶重楼，其脐点位置偏向一端；伪品为具柄重楼，其脐点位置居中。

利用本发明提供的鉴别方法可以准确、有效的鉴别市场上常见的正品球药隔重楼及同属近缘易混种，其中正品球药隔重楼为球药隔重楼原变种、宽瓣球药隔重楼、短瓣球药隔重楼，同属近缘易混种为具柄重楼、亮叶重楼；本发明方法通过高效液相色谱法分析比对球药隔重楼中甾体皂苷成分——重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H的有无，达到鉴别球药隔重楼的目的，该方法操作简单、高效快速、重现性好、成本低。高效液相色谱法与球药隔重楼外规特征及显微特征结合，能完全区别球药隔重楼正品、近缘易混种伪品和混伪品，实现正品球药隔重楼的质量控制，为球药隔重楼药材的鉴别及利用提供可靠依据，应用前景良好。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1混合对照品色谱图(1-重楼皂苷VII，2-重楼皂苷H，3-重楼皂苷VI，4-重楼皂苷II，5-重楼皂苷I，6-重楼皂苷V)

图2 6种对照品标准曲线图

图3球药隔组、亮叶重楼、具柄重楼的原植物(A球药隔重楼、B宽瓣球药隔重楼、C短瓣球药隔重楼、D亮叶重楼、E具柄重楼)

图4球药隔组与亮叶重楼、卵叶重楼根茎对比图(1.短瓣球药隔重楼；2.宽瓣球药隔重楼；3.球药隔重楼原变种；4.亮叶重楼；5.卵叶重楼)

图5粉末显微特征图

具体实施方式

下面以实施例作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。

实施例1本发明正品球药隔重楼的鉴别

1)对照品溶液的制备：取重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、重楼皂苷I、重楼皂苷II、重楼皂苷V，精密称定，溶于10mL甲醇，得到质量浓度分别为重楼皂苷VII0.3971mg/mL、重楼皂苷H 0.4109mg/mL、重楼皂苷VI0.3971 mg/mL、重楼皂苷I0.3928 mg/mL、重楼皂苷II 0.3848mg/mL、重楼皂苷V0.3914 mg/mL的混合对照品母液；

2)供试品溶液的制备：取重楼样品粉末0.5g，精密称定，加入25mL95％乙醇溶液，称重，82℃水浴锅加热回流30min，冷却，95％乙醇补充回流失去的重量，摇匀后滤过，取续滤液用0.20μm微孔滤膜滤过，即得；

3)分别吸取10μL对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：COSMOSIL Cholester(4.6mm ID×250mm)；检测波长203nm，柱温30℃，流速1.0mL·min^-1，流动相：以水为流动相A；以乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：

4)供试品含有重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H为正品球药隔重楼；含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H为具柄重楼；不含重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H为亮叶重楼。

实施例2本发明正品球药隔重楼的鉴别

a、取花期球药隔重楼，观察性状，其中，正品球药隔重楼药凸呈球形，叶片呈蜡样光泽，伪品具柄重楼药凸呈棒状，伪品亮叶重楼叶片呈金属光泽；

b、取待测样品，粉碎，观察显微特征，其中，正品球药隔重楼淀粉粒中无脐点，球药隔重楼伪品或混伪品淀粉粒中有脐点，进一步地，伪品或混伪品为亮叶重楼，其脐点位置偏向一端；伪品或混伪品为具柄重楼，其脐点位置居中；

c、取待测样品，按照实施例1方法鉴别。

以下通过试验例具体说明本发明的有益效果：

1实验材料

采集了球药隔组重楼、亮叶重楼、具柄重楼共5个类群，每个类群4批样品，共计20份样品，均为花期的成熟植株，采集地点等信息见表1。所有样品材料经成都中医药大学尹鸿翔副教授做基原鉴定，凭证标本藏于成都中医药大学中药标本馆(CDCM)。

表1样品信息表

注：编号中“Ⅰ”表示球药隔重楼原变种；“Ⅱ”表示宽瓣球药隔重楼；“Ⅲ”表示短瓣球药隔重楼；“Ⅳ”表示亮叶重楼样品，“Ⅴ”表示卵叶重楼。

化学特征分析所用6种重楼皂苷对照品分别为：重楼皂苷Ⅵ(纯度97.26％)、重楼皂苷Ⅶ(纯度96.54％)、重楼皂苷H(纯度98.31％)、重楼皂苷Ⅰ(纯度93.74％)、重楼皂苷Ⅴ(纯度97.13％)，均由本实验室制备；重楼皂苷Ⅱ购自中国食品药品检定研究院(批号111591-201103)。实验所用仪器信息详见表2。

表2实验仪器

试验例1球药隔重楼鉴别

1实验方法

甾体皂苷化学特征分析，基于HPLC-ELSD法检测样品中6种甾体皂苷类成分的构成，进行化学特征的定性定量对比分析；

1.1色谱条件

流动相：B相为乙腈，A相为超纯水；

色谱柱：COSMOSIL Cholester(4.6ID×250mm)；

流速：1.0mL/min，柱温：30℃，进样量10uL，检测波长：203nm，检测时间：35min。理论塔板数按重楼皂苷I峰计不低于4000，梯度洗脱条件：

1.2对照品溶液制备

分别取重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、重楼皂苷I、重楼皂苷II、重楼皂苷V适量，精密称定，溶于10mL甲醇，得到质量浓度分别为重楼皂苷VII 0.3971mg/mL、重楼皂苷H 0.4109mg/mL、重楼皂苷VI0.3971mg/mL、重楼皂苷I0.3928 mg/mL、重楼皂苷II0.3848mg/mL、重楼皂苷V0.3914 mg/mL的混合对照品母液；

1.3、供试品溶液的制备

取重楼样品粉末0.5g，精密称定，加入25mL95％乙醇溶液，称重，82℃水浴锅加热回流30min，冷却，95％乙醇补充回流失去的重量，摇匀后滤过，取续滤液用0.20μm微孔滤膜滤过，即得。

2、实验结果

HPLC-ELSD法测定6种甾体皂苷，即重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H，计算其含量，结果见表3。

表3样品中6种甾体皂苷类成分测定结果(n＝3)

注:“－”示其含量低于检测下限

从表3可以看出，球药隔重楼原变种含重楼皂苷Ⅵ、Ⅶ、H，宽瓣球药隔重楼含重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H，短瓣球药隔重楼含重楼皂苷Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H；而具柄重楼只含重楼皂苷Ⅶ、H，亮叶重楼均不含，与球药隔组区别明显。另外，来自不同产地的球药隔重楼各变种，均达到《中国药典》的含量标准(0.6％)，合格率达100％，而具柄重楼皂苷含量未达到《中国药典》标准，亮叶重楼皂苷含量极低，未检测出。

试验例2本发明高效液相检测方法学考察

1、对照品溶液制备

分别取重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、重楼皂苷I、重楼皂苷II、重楼皂苷V适量，精密称定，溶于10mL甲醇，得到质量浓度分别为重楼皂苷VII 0.3971mg/mL、重楼皂苷H 0.4109mg/mL、重楼皂苷VI0.3971mg/mL、重楼皂苷I0.3928 mg/mL、重楼皂苷II0.3848mg/mL、重楼皂苷V0.3914 mg/mL的混合对照品母液。

2、供试品溶液的制备

取重楼样品粉末约0.5g，精密称定，加入25mL95％乙醇溶液，称重，82℃水浴锅加热回流30min，冷却，95％乙醇补充回流失去的重量，摇匀后滤过，取续滤液用0.20μm微孔滤膜滤过，即得。

3、色谱条件

基于前期滇重楼实验条件基础，调整色谱条件如下：

流动相：C相为乙腈，A相为超纯水；

色谱柱：COSMOSIL Cholester(4.6ID×250mm)；

梯度洗脱条件如下：

流速：1.0mL/min，柱温：30℃，进样量10uL，检测波长：203nm，检测时间：35min。理论塔板数按重楼皂苷I峰计不低于4000。混合对照品色谱图见图1。

4、线性关系的考察

取混合对照品溶液母液，将母液逐级稀释，每个浓度混合对照品取样10μL，注入高效液相色谱仪，按照“3”中所述色谱条件进行色谱分析，测定各皂苷色谱峰峰面积。以对照品各皂苷进样量(μg)为横坐标，色谱峰峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，结果见表4，图2。

重楼皂苷VII回归方程：y＝263.55x-24.929 R²＝0.9997

重楼皂苷H回归方程：y＝325.6x+18.173 R²＝0.9991

重楼皂苷VI回归方程：y＝380.41x-25.025 R²＝0.9998

重楼皂苷II回归方程：y＝287.72x+8.4924 R²＝0.9994

重楼皂苷I回归方程：y＝289.27x+5.5016 R²＝0.9992

重楼皂苷V回归方程：y＝381.62x-17.998 R²＝0.9998

5精密度试验

精密吸取混合对照品溶液10μL，按照“3”中所述色谱条件重复进样6次，测定色谱峰的峰面积，考察峰面积的一致性。结果见表5。

表5精密度试验结果

由表5可知，对照品溶液中,重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、重楼皂苷II、重楼皂苷I、重楼皂苷V的色谱峰面积的RSD(n＝6)分别为1.62％、0.69％、1.07％、2.11％、2.99％、0.72％，显示仪器精密度良好，符合测定要求。

6重复性试验

取供试品(III-4)粉末，平行5份，按照“2”项下方法分别制备供试品溶液，精密吸取10μL样品溶液，按照“3”项下条件，测定峰面积，计算各皂苷含量，结果见表6。

表6重复性试验结果

由表6可知，重楼皂苷VII的RSD为2.29％，重楼皂苷H的RSD为1.70％，重楼皂苷VI的RSD为2.25％。表明该方法重复性良好。

7稳定性试验

取供试品(III-4)溶液，按照”3“项下条件在0、2、4、8、16、24、48小时，精密吸取样品溶液10μL注入高效液相色谱仪，考察供试品峰面积的变化情况，结果见表7。

表7稳定性试验结果

供试品(III-4)采用HPLC法测定仅含重楼皂苷VII、H、VI，稳定性结果中仅检测到以上三种皂苷。以上结果表明，对照品溶液和供试品溶液在48小时内基本稳定。

8加样回收试验

取已知含量的供试品(III-4)(重楼皂苷VII含量为8.983mg/g；重楼皂苷H含量为13.412mg/g；重楼皂苷VI含量为4.882mg/g粉末6份，每份约0.25g，精密称定，按照与原药材中重楼皂苷1：1的比例加入混合对照品溶液，依据“2”项下方法制备供试品溶液，按“3”项下色谱条件测定峰面积，计算重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI的回收率，回收率＝(C-A)/B×100％，A为所用供试品中含被测成分的量，B为加入对照品量，C为混样的实际测量值，结果见表8。

表8加样回收试验结果

由以上实验结果表明，该方法回收率良好。

综上：本发明通过高效液相色谱法分析比对球药隔重楼中甾体皂苷成分——重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H的有无，能达到鉴别球药隔重楼的目的，该方法操作简单、高效快速、重现性好、成本低，为球药隔重楼药材的鉴别及利用提供可靠依据，应用前景良好。

试验例3球药隔重楼形态鉴别

1、实验方法

1.1、基于植物分类学方法，参考《中国植物志》、Flora of China、《重楼属植物》开展球药隔重楼及其混用种的基原鉴定，并描述原植物形态学特征；

1.2、基于《中药鉴定学实验指导》的显微鉴定方法制作药材样品的粉末装片，观察显微鉴别特征，做定性和定量描述；

2、实验结果

2.1球药隔重楼常见混用种的构成及原植物性状鉴别特征

根据产区田间调查、参考《中国植物志》、Flora of China、《重楼属植物》的分类***，球药隔重楼基原包括球药隔重楼原变种、短瓣球药隔重楼、宽瓣球药隔重楼等3个变种，目前种植规模以短瓣球药隔重楼为主。球药隔重楼常见混用种包括具柄重楼、亮叶重楼等两个类群。在花期，经过对球药隔组、亮叶重楼、具柄重楼的原植物性状进行观察记录，归纳出其异同点，见表9，图3、图4。

表9球药隔组、亮叶重楼、具柄重楼的原植物性状特征对比

从表9及图3、图4可以看出，亮叶重楼与球药隔组重楼叶片均具有光泽，但后者为蜡样光泽，而前者为金属光泽，且叶片质地为革质，根茎普遍细小，可辨认；2者花期形态区别更加明显，易于辨认。具柄重楼药凸长4-6mm，棒状，而球药隔组的药凸均膨大呈球形，可以区别。

2.2根茎粉末显微特征

(1)球药隔重楼

粉末：浅棕色，淀粉粒众多，多数为单粒，呈椭圆形、类圆形，直径约为3.86～16.72μm。未见草酸钙针晶，草酸钙柱晶较少，多散在，长度约为25.72～54.01μm，单个宽约6.43μm。薄壁细胞不规则或类圆形，内富含淀粉粒。可见螺纹、网纹导管，直径约为19.29～28.29μm。球药隔重楼显微特征图如图5A所示。

(2)宽瓣球药隔重楼

粉末：浅灰白色，淀粉粒众多，多数为单粒，呈椭圆形、类圆形，直径约为3.86～18.00μm。草酸钙针晶多散在，长度为28.29～74.59μm，单个宽约3.86μm；草酸钙柱晶多散在，长度约为32.15～64.3μm，单个宽约7.62μm。薄壁细胞不规则形，内富含淀粉粒。可见环纹、梯纹、螺纹、网纹导管，直径约为12.86～42.44μm。如图5B所示。

(3)短瓣球药隔重楼

粉末：浅灰白色，淀粉粒众多，多数为单粒，呈椭圆形、类圆形，直径约为3.75～16.25μm。草酸钙柱晶常见，长度约为15～66.25μm，单个宽约4.18μm；草酸钙针晶多散在，偶有束簇状分布，长度约为50～215μm，单个宽约8.75μm。薄壁细胞不规则形，内富含淀粉粒。可见螺纹、网纹导管，直径约为11.25～30.00μm。球药隔重楼显微特征图如图5C所示。

(4)亮叶重楼

粉末呈浅黄色。淀粉粒极多，呈球形、长圆形，大小差异显著，基本为单粒，脐点多为人字形，直径约为3.86～25.72μm；草酸钙针晶极多，半透明，束簇状排列或单个散在，长度约为65.59～106.74μm，单个宽约5.4μm；草酸钙柱晶较常见，长度约为32.15～75.87μm，单个宽约6.95μm；导管较常见，主要为螺纹及网纹导管，直径约为12.86～32.15μm，薄壁细胞不规则破碎散在，富含淀粉粒。亮叶重楼根茎粉末显微特征见图5D。

(5)具柄重楼

粉末：浅褐色。淀粉粒极多，呈球形、长圆形，大小差异显著，基本为单粒，脐点明显，多为点状、人字形，直径约为5.00～20.00μm；草酸钙针晶极多，半透明，束簇状排列或单个散在，长度约为78.75～233.75μm，单个宽约5.5μm；草酸钙柱晶较常见，长度约为24.09～77.35μm，单个宽约5.88μm；导管较常见，主要为梯纹及螺纹导管，直径约为5.00～25.00μm。薄壁细胞棕黄色，不规则破碎散在，富含淀粉粒。卵叶重楼显微粉末特征见图5E。

上述显微特征总结比较见表10。

表10球药隔组与具柄重楼、亮叶重楼的显微特征对比

综上，本发明方法通过高效液相色谱法分析比对球药隔重楼中甾体皂苷成分——重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H的有无，达到鉴别球药隔重楼的目的，该方法操作简单、高效快速、重现性好、成本低，为球药隔重楼药材的鉴别及利用提供可靠依据，应用前景良好。高效液相色谱法与球药隔重楼外规特征及显微特征结合，能完全区别球药隔重楼正品、伪品和混伪品，有效的鉴别市场上常见的正品球药隔重楼，实现正品球药隔重楼的质量控制。

Claims

1.一种正品球药隔重楼的鉴别方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测重楼皂苷，其中，正品球药隔重楼含有重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，球药隔重楼伪品只含重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H，或不含重楼皂苷。

2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述正品球药隔重楼为球药隔重楼原变种、宽瓣球药隔重楼、短瓣球药隔重楼。

3.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述球药隔重楼伪品为具柄重楼、亮叶重楼。

4.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于：所述具柄重楼只含重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H。

5.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于：所述亮叶重楼不含重楼皂苷。

6.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述高效液相色谱法检测重楼皂苷，包括如下步骤：

1)对照品溶液的制备：取重楼皂苷对照品，加甲醇溶解，制成对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：取待测样品，粉碎，加乙醇溶液回流提取，提取液过滤，取续滤液作为供试品溶液；

色谱柱：以胆固醇基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以水为流动相A；以乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：

7.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于：步骤(1)中，所述重楼皂苷为重楼皂苷VII、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、重楼皂苷I、重楼皂苷II和/或重楼皂苷V；所述对照品溶液每1ml含各重楼皂苷0.1～1mg。

8.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于：步骤(2)中，所述待测样品与乙醇溶液的质量体积比为0.2～0.8g：25ml，优选0.5g：25ml；所述乙醇溶液浓度为80～90％v/v，优选95％v/v，所述回流提取温度82℃，时间30min。

9.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于：步骤(3)中，所述色谱柱为COSMOSILCholester，规格4.6mm ID×250mm。

10.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于：步骤(3)中，所述色谱条件中检测波长203nm，柱温30℃，流速1.0mL·min^-1，进样量10μL。

11.一种球药隔重楼正品与伪品或混伪品的鉴别方法，其特征在于：它包括如下步骤：

c、取待测样品，按照权利要求1～10的方法检测。

12.根据权利要求11所述的鉴别方法，其特征在于：步骤b所述伪品为亮叶重楼，其脐点位置偏向一端；伪品为具柄重楼，其脐点位置居中。