CN111518715A

CN111518715A - 磺胺类抗生素协同降解细菌及其应用

Info

Publication number: CN111518715A
Application number: CN202010253735.0A
Authority: CN
Inventors: 梁斌; 王爱杰; 漆梦媛; 韩京龙; 马晓丹; 孔德勇
Original assignee: Shenzhen Graduate School Harbin Institute of Technology
Current assignee: Shenzhen Graduate School Harbin Institute of Technology
Priority date: 2020-04-02
Filing date: 2020-04-02
Publication date: 2020-08-11
Anticipated expiration: 2040-04-02
Also published as: CN111518715B

Abstract

本发明提供了一种磺胺类抗生素协同降解细菌及其应用，所述磺胺类抗生素协同降解细菌包括类节杆菌P27，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年12月03日；保藏编号：CGMCC No.19070；类诺卡氏菌N27，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年12月03日；保藏编号：CGMCC No.19071。本发明技术方案的两株细菌的复配能够协同完成磺胺甲噁唑及氮杂环产物3‑氨基‑5‑甲基异噁唑的完全降解，另外菌株P27还可以降解多种磺胺类抗生素苯环一侧，降解底物谱广，为磺胺类抗生素的深度去除提供新思路和新菌种资源。

Description

磺胺类抗生素协同降解细菌及其应用

技术领域

本发明涉及微生物及其生物降解应用领域，尤其涉及一种磺胺类抗生素协同降解细菌及其应用。

背景技术

磺胺类抗生素是与人们日常生活联系较为密切的新型污染物，其抗菌活性主要依赖于其结构与对氨基苯甲酸相似，二者竞争二氢叶酸合成酶，抑制细菌二氢叶酸的合成，影响细菌核酸的合成，进而阻止了细菌的生长繁殖。磺胺类抗生素在水体环境中虽然主要以痕量形式存在，但因其可通过各种途径向环境持续输入，并且磺胺类抗生素与其他药物相比较具有降解速率慢、亲水性强和挥发性低等特点，使其呈现出一种“持久”存在的状态；重要的是，磺胺类抗生素在畜禽养殖行业使用量巨大。环境中残留抗生素通过不断积累进而可能对生态***和人类健康产生严重危害。有学者认为，长期低剂量的抗生素残留会迫使微生物进化产生抗生素抗性基因，而多重耐药细菌的进化，将对人类健康和生态环境带来极大风险。因此从源头（污水处理厂）有效去除抗生素，防止或尽可能减少其环境排放成为近年来学者们研究的热点，也是环境生物技术领域的难点。

关于磺胺类抗生素的去除研究主要集中在物化方法（光催化、吸附、高级氧化）和生物降解。其中，物理方法存在普适性较低，催化剂回收困难，成本高昂，可能存在二次污染等缺点。相比之下，利用微生物降解去除磺胺类抗生素是一种经济有效的绿色可持续途径，对减少其引起的环境污染与降低其导致的生态风险具有重要意义。

目前，有关磺胺类抗生素的降解菌筛选报道较多，Microbacterium，Rhodococcus，Achromobacter，Ralstonia，Brevundimonas，Pseudomonas，Acinetobacter，Variovorax，Alcaligenes和Ochrobactrum等细菌菌属均报道过具备磺胺类抗生素的降解能力，但普遍存在降解深度不足的问题，降解过程伴随着氮杂环产物的稳定积累，含氮有机物排放也务必将对环境造成一定的损害。因此，筛选高效的磺胺类抗生素降解菌，完全去除磺胺类抗生素，将为其污染环境的生物修复提供微生物技术支持。

发明内容

针对以上技术问题，本发明公开了一种磺胺类抗生素协同降解细菌及其应用，两株菌的复配能够协同完成SMX（sulfamethoxazole，磺胺甲噁唑）及氮杂环产物3-氨基-5-甲基异噁唑（3A5MI）的完全降解，实现以磺胺甲噁唑为目标污染物，为磺胺类抗生素的深度去除提供新思路和新菌种资源，弥补了目前生物法处理磺胺类抗生素降解深度低、降解过程稳定积累氮杂环产物的不足，为SMX等广泛使用的磺胺类抗生素的生物修复提供了高效降解菌种资源，具有非常重要的理论和应用价值。

对此，本发明采用的技术方案为：

磺胺类抗生素协同降解菌，其包括：

类节杆菌（Paenarthrobacter sp.）P27，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年12月03日；保藏编号：CGMCC No. 19070；

类诺卡氏菌（Nocardioides sp.）N27，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年12月03日；保藏编号：CGMCC No. 19071；

保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

其中，P27为SMX苯环侧降解菌，鉴定为类节杆菌（Paenarthrobactersp.）；N27为SMX氮杂环侧产物3A5MI降解菌，鉴定为类诺卡氏菌（Nocardioides sp.）。

P27及N27的主要生物学特征为：均为革兰氏阳性，菌体均呈短杆状，在R2A培养基上，前者菌落呈乳白色、边缘呈不规则锯齿状，后者则呈现淡黄色、边缘规则光滑的圆形菌落。

P27和N27作为SMX协同降解菌，起到协同降解的作用，主要体现为：在好氧条件下，于以SMX为唯一碳源的无机盐培养基中，P27能够降解SMX苯环一侧，同时生成降解产物3A5MI，为菌株N27的生长繁殖提供碳源及能源物质，从而达成SMX的协同完全降解。

进一步的，所述P27在好氧条件下以SMX作为唯一碳源及能源，通过同化SMX苯环一侧用于自身的生长繁殖，同时稳定积累氮杂环产物3A5MI，所述N27以SMX降解产物3A5MI为唯一碳源及能源进行自身的生长繁殖。

本发明通过两株活性污泥细菌实现了磺胺类抗生素的高效完全去除，弥补了目前生物法处理磺胺类抗生素降解深度低、降解过程稳定积累氮杂环产物的不足，为SMX等广泛使用的磺胺类抗生素的生物修复提供了高效降解菌种资源，具有非常重要的理论和应用价值。

本发明所提供的P27及N27的16S rRNA基因序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示。

所述P27不仅能作用于SMX的苯环一侧，其对多种磺胺类抗生素也具备降解能力，在50 mg/L的初始浓度下，能够在30-54 h内完成苯环侧的降解，同时稳定积累对应的氮杂环产物。其中，所述磺胺类抗生素包括磺胺甲噁唑（SMX）、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺氯哒嗪、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺-5-甲氧嘧啶、磺胺嘧啶以及磺胺间甲氧嘧啶中的至少一种。

进一步的，所述类节杆菌P27和类诺卡氏菌N27均从污水处理厂的活性污泥中分离得到。

本发明公开了如上所述的磺胺类抗生素协同降解菌的应用，所述磺胺类抗生素协同降解细菌用于磺胺类抗生素的协同降解中。进一步的，所述磺胺类抗生素协同降解细菌应用于污水、废水、底质、土壤中残留的磺胺类抗生素的降解中。

进一步的，所述的磺胺类抗生素协同降解细菌的降解环境为：在无机盐环境中，温度15-40℃，初始pH值为5-9，好氧情况下。

进一步优选的，温度28~32℃，初始pH值为6.8-7.0，好氧情况下。

进一步的，将类节杆菌P27和类诺卡氏菌N27同时加入以SMX为唯一碳源及能源的无机盐培养基进行SMX的协同降解，所述SMX的初始浓度为1.04 mg/L~53.02 mg/L。

本发明所提供的两株SMX协同降解菌P27和N27，在最适温度为30℃，最适初始pH为6.8-7.0的好氧无机盐培养基中分别进行单独培养和碳源供给，菌株P27可以在 20 h内完全降解50 mg/L的SMX，并稳定生成等摩尔当量的氮杂环产物3A5MI。而菌株N27则能够在40h内完全降解50 mg/L的3A5MI，无产物积累。

若将其同时加入以SMX为唯一碳源及能源的无机盐培养基，考察其对SMX的协同降解情况，可以发现在1.04 mg/L、5.88 mg/L以及53.02 mg/L这三个初始浓度下，原本伴随SMX降解出现的3A5MI积累现象消失，尤其是在中低浓度下，降解过程中从未检测到3A5MI，并且分别能够于8 h、14 h和19 h达到87%、100%和100%的SMX去除率。该结果说明两株细菌能够通过协同互作方式将中低浓度、高浓度磺胺类抗生素高效去除，为磺胺类抗生素的生物修复提供了新降解菌种资源，具有良好的应用前景。

上述所述无机盐培养基的配方优选为：NaCl 1 g，NH₄NO₃ 1 g， K₂HPO₄•3H₂O1.5 g，KH₂PO₄ 0.5 g，MgSO₄•7H₂O 0.2 g，补足蒸馏水至1000 mL，pH调节至6.8-7.0。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

第一，本发明技术方案公开的类节杆菌（Paenarthrobacter sp. P27）能够降解10种磺胺类抗生素，具有广谱的磺胺类抗生素脱毒降解能力，降解效率显著高于已报到菌株，生物修复潜力巨大。而现有技术目前未见类节杆菌（Paenarthrobactersp.）能够同时降解多种磺胺类抗生素，且本发明公开的降解细菌的***分类地位、降解底物谱以及磺胺类抗生素降解效率均不同。

第二，本发明公开的类诺卡氏菌（Nocardioides sp. N27）能够在40 h内完全降解50 mg/L的3A5MI，降解效率高，为保障含氮磺胺类抗生素中总氮的有效消减提供了重要降解菌资源。而目前未见类诺卡氏菌（Nocardioides sp.）能够降解磺胺类抗生素的氮杂环产物，3-氨基-5-甲基异噁唑（3A5MI）。

第三，本发明公开的菌株（Paenarthrobactersp. P27）和（Nocardioidessp. N27）可以在中性好氧条件下，在20 h内取得100%的SMX去除率，完成不同SMX浓度的高效协同降解。两株降解菌均分离于污水处理厂的活性污泥，可以较好的适应自然条件下的工程应用，与物化方法相比，成本大幅度降低，绿色无有毒副产物生成，对污废水和土壤等环境中磺胺类抗生素的生物强化修复具有重要意义。而目前未见活性污泥细菌通过协同互作的降解方式，实现磺胺类抗生素的完全降解，包括含氮杂环产物的高效完全降解。

附图说明

图1为本发明的磺胺类抗生素协同降解菌的菌落照片；其中，①为菌株Paenarthrobactersp. P27在R₂A平板上的菌落照片，②为菌株Nocardioides sp. N27在R₂A平板上的菌落照片。

图2为本发明的磺胺类抗生素协同降解菌的透射电镜照片，其中，①为菌株Paenarthrobactersp. P27的透射电镜照片；②为菌株Nocardioides sp. N27的透射电镜照片。

图3为本发明的基于16S rRNA基因构建的菌株Paenarthrobactersp. P27的***发育树。

图4为本发明的基于16S rRNA基因构建的菌株Nocardioides sp. N27的***发育树。

图5为本发明单独培养条件下菌株P27对磺胺甲噁唑的降解效果图。

图6为本发明单独培养条件下菌株N27对3-氨基-5-甲基异噁唑的降解效果图。

图7为本发明菌株P27对九种磺胺类抗生素的降解底物谱图。

图8为本发明菌株P27及N27协同降解不同浓度的磺胺甲噁唑的效果图，其中（1）浓度为1.04 mg/L，（2）浓度为5.88 mg/L，（3）浓度为53.02 mg/L。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明进行说明，在不背离本发明精神和实质的前提下对本发明中部分方法、参数所作的调整视为属于本发明的范围。

本实例实施中所用的化学试剂均为市售分析纯及以上，磺胺甲噁唑（SMX），3-氨基-5-甲基异噁唑（3A5MI）等标准品购自阿拉丁试剂公司（上海），西格玛（Sigma-Aldrich，美国）等。磺胺类抗生素及3-氨基-5-甲基异噁唑分别采用0.1 M NaOH溶液和超纯水配制为高浓度母液（20 g/L）使用。

无机盐培养基的组分如发明内容所述，采用高温高压灭菌处理。

实施例1

SMX苯环一侧降解菌P27及产物降解菌N27的分离与鉴定

1.1菌株P27的分离纯化

菌源采自哈尔滨某污水处理厂的剩余污泥，50 mg/L的SMX以母液加入到250 mL的锥形瓶中（内含100 mL灭菌的无机盐培养基），分别接入大约5 g的泥水混合样，置于30℃恒温摇床培养，转速150 rpm。培养7-8天后，以相同的方法准备培养基，分别转接10%体积的富集液到新鲜的培养基中。连续转接多次，直至富集液内无明显污泥颗粒，呈现均匀的乳白色悬浊液后，测定富集液的SMX降解效果。以含50 mg/L的SMX-无机盐（SMX-MM）平板，拟采用稀释涂布法、划线分离法分离和纯化菌株。结果表明，于不同稀释倍数下，稀释涂布的SMX-MM平板中总能观察到两种形态迥异的菌落。而从两种菌落中分别挑选有代表性的菌落进行划线分离时，仅能在某一菌源的平板上观察到菌落的生长，命名为P27。重复多次划线操作，将纯化后的菌株P27于无机盐培养基中确定其磺胺甲噁唑的降解能力，并用甘油保存于-80℃冰箱中。

1.2菌株N27的分离纯化

通过对菌株P27进行磺胺甲噁唑降解能力的验证，发现菌株P27并未将SMX完全降解，伴随着SMX的降解，有等摩尔当量的氮杂环产物3A5MI积累，即使延长培养时间也未发现该产物的继续降解。而与菌株P27相比，富集液具有稳定高效的SMX完全降解能力，且没有中间产物3A5MI残留。由此可判断富集液中存在中间产物3A5MI的降解菌。将碳源由SMX切换为3A5MI，重复之前的稀释涂布法、划线分离法对菌株进行分离和纯化，命名为菌株N27。重复多次划线操作，将纯化后的菌株N27于无机盐培养基中确定其3A5MI的降解能力，并用甘油保存于-80℃冰箱中。

1.3菌株P27和N27的***分类地位鉴定

于富集液中共分离出两株参与磺胺类抗生素降解过程的细菌，将分离纯化的菌株进行简单生理生化分析和16S rRNA基因测序鉴定。菌落形态及透射电镜观察结果如附图1和图2所示，菌株P27主要生物学特征为：革兰氏染色反应阳性，菌体呈短杆状，在R₂A平板上菌落呈乳白色、边缘呈不规则锯齿状。其序列高度相似于Paenarthrobacter菌属，其16S rRNA基因序列如序列表NO.1所示，***发育树如附图3所示。结合其生理生化特征，该菌被鉴定为Paenarthrobacter sp.，命名为Paenarthrobacter sp. P27。菌株N27主要生物学特征为：革兰氏染色反应阳性，菌体呈短杆状，在R₂A平板上形成淡黄色、边缘光滑的圆形菌落。其序列高度相似于Nocardioides菌属，其16S rRNA基因序列如序列表NO.2所示，***发育树如附图4所示。结合其生理生化特征，该菌被鉴定为Nocardioides sp.，命名为Nocardioidessp. N27。两株菌均已交送中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所），保藏日期为2019年12月03日，保藏编号分别为CGMCC No. 19070和CGMCC No. 19071。

实施例2

单独培养SMX苯环一侧降解菌P27及氮杂环产物降解菌N27的降解效能解析

2.1纯菌菌悬液的制备

将纯化的菌株于添加额外碳源（菌株P27采用SMX，菌株N27采用3A5MI）的R₂A固体培养基（蛋白胨 0.5 g，酵母浸出粉 0.5 g，酪蛋白水解物0.5 g，葡萄糖0.5 g，可溶性淀粉0.5g，磷酸氢二钾0.3 g，无水硫酸镁0.024 g，丙酮酸钠0.3 g，琼脂 15.0 g，蒸馏水1000 mL）中进行活化，分别挑取单菌落至灭菌无机盐培养基，并加入对应碳源，于摇床30℃，150 rpm培养。菌液浑浊后，以10%的转接量转入新鲜无机培养基中，重复以上操作，获得的具有稳定降解能力及生长周期的纯菌种子液即可用于后续降解效能的解析。

2.2单独培养菌株P27和N27分别对SMX及3A5MI的降解效能解析

菌株P27对SMX的降解：于250 mL的锥形瓶中（含灭菌无机盐培养基100 mL）以母液的形式加入底物SMX 50 mg/L，再以10%的转接量接入准备好的纯菌悬浊液，于250 mL的锥形瓶中（含灭菌无机盐培养基100 mL）以母液的形式加入底物SMX 50 mg/L，再以10%的转接量接入准备好的纯菌种子液， 30℃恒温震荡培养，每个处理设3个重复，以不加菌的培养基为对照。菌株P27对SMX的生物降解情况如附图5所示（非生物对照无效果），测定结果表明，菌株P27于20 h内完全降解50 mg/L的SMX，并稳定生成等摩尔当量的氮杂环产物3A5MI。

菌株N27对3A5MI的降解：于250 mL的锥形瓶中（含灭菌无机盐培养基100 mL）以母液的形式加入底物3A5MI 50 mg/L，再以10%的转接量接入准备好的纯菌悬浊液， 30℃恒温震荡培养，每个处理设3个重复，以不加菌的培养基为对照。菌株N27对3A5MI的生物降解情况如附图6所示（非生物对照无效果），测定结果表明，菌株N27可于40 h内完全降解50 mg/L的3A5MI，无产物积累。

实施例3

菌株P27对磺胺类抗生素的降解底物谱解析

菌株P27的底物谱解析：接种源采用2.1中制备的纯菌菌悬液。本阶段考察了菌株P27对除SMX外的9种被广泛使用的其它磺胺类抗生素是否同样具备苯环侧降解能力，包括磺胺吡啶，磺胺甲基嘧啶，磺胺甲二唑，磺胺氯哒嗪，磺胺二甲氧嘧啶，磺胺二甲基嘧啶，磺胺-5-甲氧嘧啶，磺胺嘧啶以及磺胺间甲氧嘧啶。于50 mL的锥形瓶中（含灭菌无机盐培养基20 mL）以母液的形式加入相应底物，至终浓度为50 mg/L，再以10%的转接量分别接入准备好的菌株P27种子液，30℃恒温震荡培养，每个处理设3个重复，以不加菌的培养基为对照。结果表明如图7所示（非生物对照无效果），在30.0 h、39.8 h、30.0 h、30.0 h、53.8 h、34.8 h、30.0 h、39.8 h、30.0 h内，菌株P27能够分别完全降解磺胺吡啶，磺胺甲基嘧啶，磺胺甲二唑，磺胺氯哒嗪，磺胺二甲氧嘧啶，磺胺二甲基嘧啶，磺胺-5-甲氧嘧啶，磺胺嘧啶以及磺胺间甲氧嘧啶，生成对应的氮杂环产物，且伴随明显的生物量增加。这些结果表明菌株P27具有极为广泛的底物谱，能够有效应对环境中各种磺胺类抗生素的去除，生物修复潜力大。

实施例4

双培养SMX苯环一侧降解菌P27及氮杂环产物降解菌N27的降解效能解析

菌株P27及N27协同降解SMX的降解效能解析：接种源采用2.1中制备的纯菌种子液。本阶段共考察了高中低三个浓度梯度下，两株菌的SMX协同降解效能。于250 mL的锥形瓶中（含灭菌无机盐培养基100 mL）以母液的形式加入底物SMX，至终浓度分别为1.04 mg/L、5.88 mg/L以及53.02 mg/L，再以5%的转接量分别接入准备好的纯菌种子液，30℃恒温震荡培养，每个处理设3个重复，以不加菌的培养基为对照。结果如图8所示（非生物对照无效果），在1.04 mg/L、5.88 mg/L以及53.02 mg/L这三个初始浓度下，原本伴随SMX降解出现的3A5MI积累现象消失，尤其是在中低浓度下，降解过程中从未检测到3A5MI，并且分别能够于8 h、14 h和19 h达到87%、100%和100%的SMX去除率。可见，无论在较高或较低的SMX初始浓度下，两菌均能通过协同互作方式，完成对SMX的彻底去除。与已有的相关生物降解报导相比，本研究极大地提高了磺胺类抗生素的降解深度（完全矿化），分离获得的2株降解菌为磺胺类抗生素的生物修复提供了重要的菌种资源，具有良好的生物修复应用前景。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

序列表

<110> 哈尔滨工业大学（深圳）（哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院）

<120> 磺胺类抗生素协同降解细菌及其应用

<141> 2020-03-17

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1490

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 1

agagtttgat cctggctcag gatgaacgct ggcggcgtgc ttaacacatg caagtcgaac 60

gatgatccgg tgcttgcgcc ggggattagt ggcgaacggg tgagtaacac gtgagtaacc 120

tgcccttgac tctgggataa gcctgggaaa ctgggtctaa taccggatat gactcctcat 180

cgcatggtgg ggggtggaaa gctttttgtg gttttggatg gactcgcggc ctatcagctt 240

gttggtgggg taatggccta ccaaggcgac gacgggtagc cggcctgaga gggtgaccgg 300

ccacactggg actgagacac ggcccagact cctacgggag gcagcagtgg ggaatattgc 360

acaatgggcg aaagcctgat gcagcgacgc cgcgtgaggg atgacggcct tcgggttgta 420

aacctctttc agtagggaag aagccctctt tgggggtgac ggtacttgca gaagaagcgc 480

cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtagggc gcaagcgtta tccggaatta 540

ttgggcgtaa agagctcgta ggcggtttgt cgcgtctgct gtgaaagacc ggggctcaac 600

tccggttctg cagtgggtac gggcagacta gagtgcagta ggggagactg gaattcctgg 660

tgtagcggtg aaatgcgcag atatcaggag gaacaccgat ggcgaaggca ggtctctggg 720

ctgtaactga cgctgaggag cgaaagcatg gggagcgaac aggattagat accctggtag 780

tccatgccgt aaacgttggg cactaggtgt gggggacatt ccacgttttc cgcgccgtag 840

ctaacgcatt aagtgccccg cctggggagt acggccgcaa ggctaaaact caaaggaatt 900

gacgggggcc cgcacaagcg gcggagcatg cggattaatt cgatgcaacg cgaagaacct 960

taccaaggct tgacatggac cggaaagacc tggaaacagg tgccccgctt gcggccggtt 1020

tacaggtggt gcatggttgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa 1080

cgagcgcaac cctcgttcta tgttgccagc ggttcggccg gggactcata ggagactgcc 1140

ggggtcaact cggaggaagg tggggacgac gtcaaatcat catgcccctt atgtcttggg 1200

cttcacgcat gctacaatgg ccggtacaaa gggttgcgat actgtgaggt ggagctaatc 1260

ccaaaaagcc ggtctcagtt cggattgggg tctgcaactc gaccccatga agtcggagtc 1320

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<210> 2

<211> 1480

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 2

agagtttgat cctggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ttaacacatg caagtcgagc 60

ggaaaggccc tttcgggggt actcgagcgg cgaacgggtg agtaacacgt gagtaatctg 120

ccctggactc tgggatagcc accggaaacg gtgattaata ccggatatga ccactctagg 180

catctagtgg tggtggaaag tttttcggtc caggatgtgc tcgcggccta tcagcttgtt 240

ggtgaggtaa tggctcacca aggctttgac gggtagccgg cctgagaggg tgaccggtca 300

cactgggact gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtgggga atattggaca 360

atgggcggaa gcctgatcca gcaacgccgc gtgagggatg acggccttcg ggttgtaaac 420

ctctttcagt accgacgaag cgaaagtgac ggtaggtaca gaagaaggac cggccaacta 480

cgtgccagca gccgcggtaa tacgtagggt ccgagcgttg tccggaatta ttgggcgtaa 540

agggctcgta ggcggtttgt cgcgtcggga gtgaaaacag cgggcttaac tcgttgcttg 600

ctttcgatac gggcagacta gaggtatgca ggggagaatg gaattcctgg tgtagcggtg 660

aaatgcgcag atatcaggag gaacaccggt ggcgaaggcg gttctctggg cattacctga 720

cgctgaggag cgaaagtgtg gggagcgaac aggattagat accctggtag tccacaccgt 780

aaacgttggg cgctaggtgt ggggtccttt ccacggattc cgtgccgtag ctaacgcatt 840

aagcgccccg cctggggagt acggccgcaa ggctaaaact caaaggaatt gacgggggcc 900

cgcgcaagcg gcggagcatg cggattaatt cgatgcaacg cgaagaacct tacctgggtt 960

tgacatacac cggaagcccc tagagatagg ggtctctttg atactggtgt acaggtggtg 1020

catggctgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc 1080

ctcgttccat gttgccagcg ggttatgccg ggggctcatg ggagactgcc ggggtcaact 1140

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gcagatcagc aacgctgcgg tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacgt 1380

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Claims

1.磺胺类抗生素协同降解细菌，其特征在于，其包括：

类节杆菌P27，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年12月03日；保藏编号：CGMCC No. 19070；

类诺卡氏菌N27，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年12月03日；保藏编号：CGMCC No. 19071。

2.根据权利要求1所述的磺胺类抗生素协同降解细菌，其特征在于：所述类节杆菌P27和类诺卡氏菌N27均从污水处理厂的活性污泥中分离得到。

3.根据权利要求1所述的磺胺类抗生素协同降解细菌，其特征在于：所述类节杆菌P27在好氧条件下以SMX作为唯一碳源及能源，通过同化SMX苯环一侧用于自身的生长繁殖，同时稳定积累氮杂环产物3A5MI，所述类诺卡氏菌N27以SMX降解产物3A5MI为唯一碳源及能源进行自身的生长繁殖。

4.根据权利要求1所述的磺胺类抗生素协同降解细菌，其特征在于：所述磺胺类抗生素包括磺胺甲噁唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺氯哒嗪、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺-5-甲氧嘧啶、磺胺嘧啶以及磺胺间甲氧嘧啶中的至少一种。

5.如权利要求1所述的磺胺类抗生素协同降解细菌的应用，其特征在于：所述磺胺类抗生素协同降解细菌用于磺胺类抗生素的协同降解中。

6.根据权利要求5所述的磺胺类抗生素协同降解细菌的应用，其特征在于：所述磺胺类抗生素协同降解细菌应用于污水、废水、底质、土壤中残留的磺胺类抗生素的降解中。

7.根据权利要求5所述的磺胺类抗生素协同降解细菌的应用，其特征在于：其降解的环境为：在无机盐的环境中，温度15-40℃，初始pH为5-9，好氧情况下。