CN111419760A - 一种黑老虎鲜叶提取液及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从黑老虎鲜叶中提取的具有嫩肤、抗皱及美白等多功效的提取液。黑老虎号称“第三代养生奇果”,价格不菲;其鲜叶肥厚多汁,富含多种护肤成分,捣碎后所得的浆汁即为我国西南的苗,侗等少数民族妇女间口口相传的洗浴佳品,但这种浆汁粘度大,难以采用过滤等工艺进行加工应用。本发明公开了一种在室温下灭菌、打浆、酶解,益生菌发酵,萃取、沉淀等多步骤的破胶工艺,该破胶过程能将其含有的植物蛋白、纤维素等大分子分解为具有美容功效的小分子肽和酵素,最后得到一种清透的黑老虎鲜叶提取液。以该提取液为主要成分,配以水、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钠、甘油等组分、即可制得具有洁面、润肤、抗皱祛斑的清香型洗面奶。
Description
技术领域
本发明涉及黑老虎资源的综合利用技术领域,具体涉及一种黑老虎鲜叶提取液及其制备方法和应用。
背景技术
黑老虎为五味子科南五味子属常绿藤本植物,其叶呈扁舟形,硕大而肥厚,气味清香怡人,富含多种胶质、植物精油、植物蛋白、天然乳化剂和表面活性剂,采下后稍作揉搓、挤出鲜汁即为我国西南的苗、侗等少数民族妇女间口口相传的,具有洁面、嫩肤、祛斑、祛皱及强大的美白与抗氧化功效的洗浴佳品,常用能使皮肤变得通透白皙。但是目前由于受到种种条件的限制,把它规模化地应用于化妆或洗浴品原料的制备,还鲜有报道。
黑老虎的果实,在苗语中又称“布福娜”,意思是美容长寿之果。研究发现其富含多种氨基酸、维生素、花青素、多酚、果胶和木脂素等,对人体颇有益处,被称为极有开发价值的“第三代养生奇果”。现在已有学者将黑老虎果实的提取物用作化妆品的原料,但目前黑老虎果实的市场价格比较高,供应难以保障。其实对皮肤而言,果实中所含的许多有益的活性成分也大多存在于鲜叶之中,而鲜叶的价格常常不及黑老虎果实的二十分之一、甚至百分之一,而且一年四季都可采摘,不像鲜果的采摘要受到季节限制,因此对与化妆品产业来说,采用黑老虎鲜叶做原料显然比采用鲜果具有更大的经济效益和可实用性。
黑老虎的根茎俗称大血藤,是一种重要的中药材,其功效见《陆川本草》有接骨、散瘀、消肿、解毒的功效,常用于治疗跌打骨折、风湿骨痛、疮疖、伤口感染等。显然若将其提取物用于化妆品也会有一定的活血养颜的功效。但是,黑老虎中最具特色、也是最为精华的部分,包括挥发性植物精油,以及其他天然具有洁面、润肤及养颜功能的小分子活性成分在干燥后的黑老虎根茎中已经基本上不存在了。反之,黑老虎根茎中含有的具有活血养颜功效的木脂素类、三萜类及氨基酸等有效成分在黑老虎鲜叶中也同样存在。换句话说,黑老虎鲜叶若是用作化妆和洗浴用品的原料,相对根茎来说显然具有更大的优越性,因为它含有更多的包含植物精油在内的众多的功效显著的活性成分。此外,黑老虎鲜叶与黑老虎根茎相比,具有另外一大优越性是,挖取黑老虎的根茎,常常会导致宝贵的黑老虎自然资源的破坏性开采,进而引起其价格的不断上涨。相比之下,黑老虎鲜叶的采摘,只要稍作留意,就不会破坏植株的正常生长,而且可根据生产的需要,一年四季随要随采,既经济又环保,形成一种绿色的、可持续的黑老虎自然资源的开发模式。
然而事实证明,若要从黑老虎鲜叶中提取一种清香怡人、晶莹剔透的提取液并不是一件容易的事,而这些特征正是用于较高档的洗浴液或化妆品原料的基本要求。这是因为黑老虎鲜叶中存在大量的胶质、植物精油、植物蛋白及多糖等活性成分导致的,所以当黑老虎鲜叶一经破碎,既形成包裹着大量细小植物纤维悬浮物的胶体溶液,胶体溶液中的胶体颗粒有极高的粘度,可以粘住各种不同滤具,使过滤无法进行。退一步说,即使可以过滤,由于这些粘稠的胶体颗粒中包裹了许多有价值的活性成分,若是都作为滤渣抛弃,就损失掉了大量的有效活性成分。黑老虎鲜叶的提取工作说起来容易,真正操作起来难度极大。因此,提供一种低粘度、高澄清且有效成分不受提取破坏的黑老虎鲜叶提取液并把其应用在高档化妆品上就显得非常重要。
发明内容
本发明的第一个目的在于充分利用一种物美价廉的自然资源—黑老虎鲜叶,并设计出一套技术方案,能有效的破除鲜叶粉碎后自然形成的胶体溶液的稳定性,进而提取出一种清香怡人、晶莹剔透,并具有嫩肤、抗皱、抗氧化、祛斑及美白等多种功效的提取液,变废为宝,实现自然资源的可持续利用。
本发明的第二个目的是提供一种采用该提取液制备一种清香型洗面奶;及其他具有较高档次的洗浴或化妆品的方法。
本发明所提技术方按的基本原则是,最大限度的提取黑老虎鲜叶中的有效成分,并尽可能保证这些有效成分不在提取过程中受到破坏。因此必须有严格的温度控制,必须使全部的提取过程都保持在摄氏40度的温度以下。
为实现第一个目的,本发明采用的技术方按包括以下的操作步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料;黑老虎鲜叶硕大而肥厚,只需几十片就够一公斤了。最好清晨按计划采够当日的加工量,不多采。并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,但凡需要保留的,都应保留一定量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:若鲜叶上沾有泥沙可简单地用清水洗去,在荫凉通风处自然吹干,然后于密封袋中通臭氧约5~10min,做简单的灭菌消毒处理,为后续的发酵和酶解工序做好准备;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,投入破壁机,加水,打碎成浆,得黑老虎鲜叶原浆;鲜叶破碎不能用中草药常用的烘干后粉碎的方法,只能用湿法打浆才能保持低温,保留有效成分不被破坏。具体操作为首先将灭菌后的鲜叶切成几段,然后投入果蔬破壁机;加入叶重一至两倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆;注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失;
S4、一次破胶:加入复合酶进行一次破胶,搅拌,在35~38℃下进行酶解反应,反应3~7h,静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A。
黑老虎鲜叶因含有大量的胶质成分、果胶与木脂素等,一经加水破碎即形成有一定粘稠度的胶体溶液;若要将其中的有效成分提出来,并把大量无用的植物纤维分离弃去,首先必须破除胶体溶液的稳定性。为此本发明设计了三次破胶的特殊工艺;其中第一次破胶采用的是生物酶解的手段,即在胶体溶液中加入专门设计的复合酶进行酶解反应。进行一次破胶所加入的复合酶的组成为:纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶,它们的质量比为2:1:1;加入的量为胶体溶液总量的0.1~0.3%,加入后充分搅拌,酶解反应的温度控制在35~38℃之间。酶解反应的时间为3~7小时。酶解的主要功效是将胶体中所含的大量的植物蛋白及纤维素分解成活性高、美容效果好的小分子肽与其他小分子成分。同时也破坏了胶体颗粒的结构,使原来极度浑浊的溶液明显的获得一定程度的澄清,特别是溶液的上半部分。这时可使用虹吸管或将盛溶液的容器倾斜,将上部三分之一至二分之一的较为澄清的溶液转入另一容器,随即密封低温保存,标注为初级提取液A;
S5、二次破胶:取下层胶体溶液,加入益生菌,搅拌,得发酵液,在20℃下发酵3~7天,过滤,得初级提取液B和固体滤饼。
二次破胶前的溶液虽然仍显浑浊,但经过复合酶的作用,许多原来与植物纤维粘连在一起的有效成分已经获得有效的分离,有些纤维素和淀粉已经被分解为糖分,而有些蛋白质也被蛋白酶分解为小肽和氨基酸,这些正好为发酵微生物的生长提供了可靠的能源、炭源与氮源。所以本发明的二次破胶采用了加入益生菌进行发酵的办法,使溶液中大量复杂的大分子化合物在益生菌及其分泌的多种新鲜蛋白酶的作用下,分解成分子量较小的能直接透入皮肤的有益成分,并在此同时改变了胶体颗粒的结构,破坏了胶体的稳定性。当然,这时的溶液里也包含了一定量的由益生菌产生的酵素,即多种的能促进皮肤细胞的生长及化瘀排毒等多项生理功能的酶,因此我们最后的提取液在名称上也可以被称之为“黑老虎酵素”;
S6、醇提:根据本发明,以上二次破胶过程中分离出的固体滤饼里还是会含有一些亲水性较差,但对皮肤仍然有益的成分,如花青素等,为充分回收这些成分,将步骤S5中的固体滤饼碾碎,投入95%的乙醇溶液进行提取,在30~35℃下搅拌1~2h,过滤,得初级提取液C;
S7、三次破胶:用以上方法获得的‘初级提取液A和初级提取液B仍然含有许多细小的胶粒,它们由许多极小的植物纤维、植物蛋白碎片及氨基酸等组成,表面带有许多胺基、羧基与羟基等亲水极性基团;因而易于发生水合作用,并形成一层较厚的水化层;使颗粒相互隔开、不能聚集而形成沉淀。所以要破除这类胶体溶液的稳定性,首先就要破坏这些胶体颗粒周围的水化层。申请人发现,调整溶液的pH可以改变水化层的厚度;而有机萃取剂乙醇有很强的亲水能力,可作为脱水剂用来破坏胶体颗粒***的水化层。这样双管齐下,即可达到破除胶体稳定性的目的。因此,申请人通过将初级提取液A和初级提取液B混合,调节pH至6.5~7.5后,加入初级提取液C,搅拌,静置,待沉淀析出后取上清液;
S8、超微膜过滤:将所述步骤S7中的上清液进行超微膜过滤,即得黑老虎鲜叶提取液。根据本发明,以上经过3次破胶后分出的上清液虽然还是不够清亮,但已经和处理之前完全不同了,已经不会堵塞各种过滤的网或膜了。这时我们就可以很方便的使用国产的超微滤膜除菌过滤器来过滤以上获取的上清液;从而一举获得一种完全无菌的,外观晶莹剔透、清香怡人的黑老虎鲜叶提取液;
进一步地,在所述步骤S3中,所述消毒灭菌后的黑老虎鲜叶与水的重量比为1:1~2。
进一步地,在所述步骤S4中,所述复合酶的质量为所述黑老虎鲜叶原浆质量的0.1~0.3%,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:0.5~2:0.5~2的质量比组成。
优选地,在所述步骤S4中,所述复合酶的质量为所述黑老虎鲜叶原浆质量的0.2%,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:1:1的质量比组成。
进一步地,在所述步骤S5中,所述益生菌选自安琪葡萄酒果酒专用酵母,所述益生菌的质量为所述下层胶体溶液质量的0.05~0.2%。
优选地,在所述步骤S5中,所述益生菌选自安琪葡萄酒果酒专用酵母,所述益生菌的质量为所述下层胶体溶液质量的0.12%。
进一步地,在所述步骤S5中,在发酵开始后的第二天,往发酵液中加入白砂糖,所述白砂糖的加入量为所述发酵液总重量的0.2~0.5%。
优选地,在所述步骤S5中,在发酵开始后的第二天,往发酵液中加入白砂糖,所述白砂糖的加入量为所述发酵液总重量的0.3%。
进一步地,在所述步骤S6中,所述固体滤饼与所述95%的乙醇溶液的重量比为1:1~2。
优选地,进一步地,在所述步骤S6中,所述固体滤饼与所述95%的乙醇溶液的重量比为1:2。
本发明的黑老虎鲜叶提取液能用在制备具有美白、祛斑功能的化妆品,所述化妆品包括有膏剂、乳剂、膜剂、喷雾剂、凝胶剂或皂剂。
本发明还提供了一种黑老虎鲜叶提取液洗面奶,包括以下重量份的组分:黑老虎鲜叶提取液15~30份、去离子水20~25份、椰油酰胺丙基甜菜碱3~5份、椰油酰甘氨酸钠2~4份、甘油8~10份、甲基椰油酰基牛磺酸钠25~30份、PEG-250二硬脂酸酯1~1.5份、氯化钠1.5~2份、EDTA二钠0.03~0.05份、舒缓保湿提取液0.05~0.1份、辛酰羟肟酸0.3~0.5份、甘油辛酸酯0.2~0.3份、丙二醇0.1~0.2份和香精0.05~0.1份。
进一步地,所述舒缓保湿提取液为芦荟提取液或金缕梅提取液。
优选地,所述黑老虎鲜叶提取液洗面奶,包括以下重量份的组分:黑老虎鲜叶提取液20份、去离子水30份、椰油酰胺丙基甜菜碱4份、椰油酰甘氨酸钠4份、甘油8份、甲基椰油酰基牛磺酸钠30份、PEG-250二硬脂酸酯1.5份、氯化钠2份、EDTA二钠0.05份、金缕梅提取液0.1份、辛酰羟肟酸0.4份、甘油辛酸酯0.25份、丙二醇0.15份和花样年华香精0.05份,所述花样年华香精来源于广州优然生物科技有限公司。
本发明还提供了一种黑老虎鲜叶提取液洗面奶的制备方法,包括以下步骤:
A1、将配方量的去离子水、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钠、甘油、甲基椰油酰基牛磺酸钠与EDTA二钠混合,在80~85℃下搅拌至透明;
A2、降温至60℃,加入配方量的PEG-250二硬脂酸酯,搅拌均匀;
A3、降温至50℃,加入氯化钠溶液,搅拌;其中,所述氯化钠溶液为预先溶解好的氯化钠饱和水溶液;
A4、降温至45℃,加入配方量的黑老虎鲜叶提取液、舒缓保湿提取液、香精及预先分散好的辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯与丙二醇;搅拌均匀,冷却静置,即得。
本发明的黑老虎鲜叶提取液及其制备方法具有以下有益效果:
(1)本发明采用黑老虎鲜叶作为黑老虎鲜叶提取液的原材料,保留了鲜果和藤茎,只间隔、间歇地采集鲜叶,实现了可持续发展地利用黑老虎资源的道路。
(2)本发明采用了先进的生物酶解与发酵技术,将黑老虎鲜叶中所含的大量的植物蛋白、胶质、纤维素等成分成功的分解转化为对皮肤有益且极易吸收的多种小分子肽及多种酵素,同时也破坏了胶体颗粒的结构,使原来极度浑浊的溶液明显的获得一定程度的澄清,极大的扩展了黑老虎的药用功效;此外,由于本发明制备得到黑老虎鲜叶提取液所采用的工艺都在室温下操作,保留了许多甚至连传统的黑老虎中药材都无法保留的黑老虎精油、花青素、维生素等有效成分,同时也保留了黑老虎特有的清香,应用在制备化妆品中,具有清香怡人的味道、晶莹剔透的外观,以及嫩肤、祛斑及美白等多种有益皮肤的功效。
(3)本发明在三次破胶工艺步骤中,通过调节初级提取液A和初级提取液B混合液的pH值以及在混合液中加入含有乙醇溶液的初级提取液C,破坏了混合溶液中由许多极小的植物纤维、植物蛋白碎片及氨基酸等组成的胶体颗粒周围的水化层的厚度,达到破除胶体稳定性的目的,更好地得到澄清透明的黑老虎鲜叶提取液,拓宽了其用于高档的洗浴液或化妆品原料用途。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明,但这并非是对本发明的限制,本领域技术人员根据本发明的基本思想,可以作出各种修改或改进,但是只要不脱离本发明的基本思想,均在本发明的范围之内。
下面实施例中未注明具体条件者,按照常规条件进行,所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。其中,超微滤膜除菌过滤器由浙江绍兴的绍兴海纳膜技术有限公司生产的,型号为SY-1,截留孔径为0.2μm,在实际操作过程中由于换了滤芯,实际孔径为0.1μm。
实施例1
实施例1的一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料,最好在清晨按计划采够当日的加工量,并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,都应保留一定数量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧5min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,然后投入果蔬破壁机,加入黑老虎鲜叶重2倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆,注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失,打碎成浆后得黑老虎鲜叶原浆;
S4、一次破胶:加入黑老虎鲜叶原浆质量0.1%的复合酶进行一次破胶,搅拌,在35℃下进行酶解反应,反应时间为7h,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:0.5:0.5的质量比组成;静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A;
S5、二次破胶:取下层胶体溶液,加入益生菌进行二次破胶,所加入的益生菌为市场采购的“安琪葡萄酒果酒专用酵母”,加入质量为下层胶体溶液质量的0.05%,搅拌,得发酵液,发酵罐的温度控制在20℃。发酵的时间为3天,为促进发酵过程更为完全,在发酵开始后的第二天往发酵液中加入一定量的白砂糖,加入的量可控制在发酵液总量的0.3%左右;发酵结束后胶体溶液的粘稠度已经大为降低,这时在200目滤网下进行过滤,得初级提取液B和固体滤饼;
S6、醇提:将步骤S5中的固体滤饼碾碎,投入1倍重量含量为95%的乙醇溶液(体积分数)进行提取,在30℃下搅拌2h,过滤,得初级提取液C;
S7、三次破胶:将初级提取液A和初级提取液B混合,用0.05M的柠檬酸或0.05M的碳酸钠把pH调节至6.5后,加入初级提取液C,搅拌,静置,即有细细的沉淀析出,并慢慢沉入底部,吸出上清液,同时弃去底部的沉淀;
S8、超微膜过滤:将所述步骤S7中的上清液用超微滤膜除菌过滤器进行超微膜过滤,即得黑老虎鲜叶提取液。
实施例1的黑老虎鲜叶提取液洗面奶,由以下重量份的组分组成:黑老虎鲜叶提取液15份、去离子水20份、椰油酰胺丙基甜菜碱3份、椰油酰甘氨酸钠4份、甘油10份、甲基椰油酰基牛磺酸钠25份、PEG-250二硬脂酸酯1份、氯化钠1.5份、EDTA二钠0.03份、芦荟提取液0.05份、辛酰羟肟酸0.3份、甘油辛酸酯0.2份、丙二醇0.1份和花样年华香精0.05份。
实施例1的黑老虎鲜叶提取液洗面奶的制备方法,包括以下步骤:
A1、将配方量的去离子水、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钠、甘油、甲基椰油酰基牛磺酸钠与EDTA二钠混合,在80℃下搅拌至透明;
A2、降温至60℃,加入配方量的PEG-250二硬脂酸酯,搅拌均匀;
A3、降温至50℃,加入氯化钠溶液,搅拌;其中,所述氯化钠溶液为预先溶解好的氯化钠饱和水溶液;
A4、降温至45℃,加入配方量的黑老虎鲜叶提取液、芦荟提取液、香精及预先分散好的辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯与丙二醇;搅拌均匀,冷却静置,即得。
实施例1的含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂,由以下重量份的组分组成:黑老虎鲜叶提取液,35份;纯净水,65份;其制备方法如下:混合搅拌均匀,在无菌环境下用10毫升喷雾瓶封装,即得。
实施例2
实施例2的一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料,最好在清晨按计划采够当日的加工量,并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,都应保留一定数量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧10min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,然后投入果蔬破壁机,加入黑老虎鲜叶重1倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆,注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失,打碎成浆后得黑老虎鲜叶原浆;
S4、一次破胶:加入黑老虎鲜叶原浆质量0.3%的复合酶进行一次破胶,搅拌,在38℃下进行酶解反应,反应时间为3h,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以1:1:1的质量比组成;静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A;
S5、二次破胶:取下层胶体溶液,加入益生菌进行二次破胶所,加入的益生菌为市场采购的“安琪葡萄酒果酒专用酵母”,加入质量为下层胶体溶液质量的0.2%,搅拌,得发酵液,发酵罐的温度控制在20℃。发酵的时间为7天,为促进发酵过程更为完全,可于发酵开始后的第二天往发酵液中加入一定量的白砂糖,加入的量控制在发酵液总量的0.5%左右;发酵结束后胶体溶液的粘稠度已经大为降低,这时在200目滤网下进行过滤,得初级提取液B和固体滤饼;
S6、醇提:将步骤S5中的固体滤饼碾碎,投入2倍重量含量为95%的乙醇溶液进行提取,在35℃下搅拌1h,过滤,得初级提取液C;
S7、三次破胶:将初级提取液A和初级提取液B混合,用0.05M的柠檬酸或0.05M的碳酸钠把pH调节至7.5后,加入初级提取液C,搅拌,静置,即有细细的沉淀析出,并慢慢沉入底部,吸出上清液,同时弃去底部的沉淀;
S8、超微膜过滤:将所述步骤S7中的上清液用超微滤膜除菌过滤器进行超微膜过滤,即得黑老虎鲜叶提取液。
实施例2的黑老虎鲜叶提取液洗面奶,由以下重量份的组分组成:黑老虎鲜叶提取液30份、去离子水25份、椰油酰胺丙基甜菜碱5份、椰油酰甘氨酸钠2份、甘油8份、甲基椰油酰基牛磺酸钠30份、PEG-250二硬脂酸酯1.5份、氯化钠2份、EDTA二钠0.05份、金缕梅提取液0.1份、辛酰羟肟酸0.5份、甘油辛酸酯0.3份、丙二醇0.2份和花样年华香精0.1份。
实施例2的黑老虎鲜叶提取液的洗面奶的制备方法,包括以下步骤:
A1、将配方量的去离子水、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钠、甘油、甲基椰油酰基牛磺酸钠与EDTA二钠混合,在85℃下搅拌至透明;
A2、降温至60℃,加入配方量的PEG-250二硬脂酸酯,搅拌均匀;
A3、降温至50℃,加入氯化钠溶液,搅拌;其中,所述氯化钠溶液为预先溶解好的氯化钠饱和水溶液;
A4、降温至45℃,加入配方量的黑老虎鲜叶提取液、金缕梅提取液、香精及预先分散好的辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯与丙二醇;搅拌均匀,冷却静置,即得。
实施例2的含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂,由以下重量份的组分组成:黑老虎鲜叶提取液,35份;纯净水,65份;其制备方法如下:混合搅拌均匀,在无菌环境下用10毫升喷雾瓶封装,即得。
实施例3
实施例3的一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料,最好在清晨按计划采够当日的加工量,并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,都应保留一定数量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧8min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,然后投入果蔬破壁机,加入黑老虎鲜叶重1.5倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆,注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失,打碎成浆后得黑老虎鲜叶原浆;
S4、一次破胶:加入黑老虎鲜叶原浆质量0.2%的复合酶进行一次破胶,搅拌,在35℃下进行酶解反应,反应时间为7h,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:1:1的质量比组成;静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A;
S5、二次破胶:取下层胶体溶液,加入益生菌进行二次破胶,加入的益生菌为市场采购的“安琪葡萄酒果酒专用酵母”,加入质量为下层胶体溶液质量的0.12%,搅拌,得发酵液,发酵罐的温度控制在20℃。发酵的时间为7天,为促进发酵过程更为完全,在发酵开始后的第二天往发酵液中加入一定量的白砂糖,加入的量可控制在发酵液总量的0.3%左右;发酵结束后胶体溶液的粘稠度已经大为降低,这时可以在200目滤网下进行过滤,得初级提取液B和固体滤饼;
S6、醇提:将步骤S5中的固体滤饼碾碎,投入2倍重量含量为95%的乙醇溶液进行提取,在30℃下搅拌2h,过滤,得初级提取液C;
S7、三次破胶:将初级提取液A和初级提取液B混合,用0.05M的柠檬酸或0.05M的碳酸钠把pH调节至6.5后,加入初级提取液C,搅拌,静置,即有细细的沉淀析出,并慢慢沉入底部,吸出上清液,同时弃去底部的沉淀;
S8、超微膜过滤:将所述步骤S7中的上清液用超微滤膜除菌过滤器进行超微膜过滤,即得黑老虎鲜叶提取液。
实施例3的黑老虎鲜叶提取液洗面奶,由以下重量份的组分组成:黑老虎鲜叶提取液20份、去离子水30份、椰油酰胺丙基甜菜碱4份、椰油酰甘氨酸钠4份、甘油8份、甲基椰油酰基牛磺酸钠30份、PEG-250二硬脂酸酯1.5份、氯化钠2份、EDTA二钠0.05份、金缕梅提取液0.1份、辛酰羟肟酸0.4份、甘油辛酸酯0.25份、丙二醇0.15份和花样年华香精0.05份。
实施例3的黑老虎鲜叶提取液的洗面奶的制备方法,包括以下步骤:
A1、将配方量的去离子水、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钠、甘油、甲基椰油酰基牛磺酸钠与EDTA二钠混合,在80℃下搅拌至透明;
A2、降温至60℃,加入配方量的PEG-250二硬脂酸酯,搅拌均匀;
A3、降温至50℃,加入氯化钠溶液,搅拌;其中,所述氯化钠溶液为预先溶解好的氯化钠饱和水溶液;
A4、降温至45℃,加入配方量的黑老虎鲜叶提取液、金缕梅提取液、香精及预先分散好的辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯与丙二醇;搅拌均匀,冷却静置,即得。
实施例3的含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂,由以下重量份的组分组成:黑老虎鲜叶提取液,35份;纯净水,65份;其制备方法如下:混合搅拌均匀,在无菌环境下用10毫升喷雾瓶封装,即得。
对比例1
对比例1的一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料,最好在清晨按计划采够当日的加工量,并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,都应保留一定数量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧8min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,然后投入果蔬破壁机,加入黑老虎鲜叶重1.5倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆,注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失,打碎成浆后得黑老虎鲜叶原浆;
S4、滤网过滤:在600目滤网下进行过滤,得到对比例1的黑老虎鲜叶提取液。
对比例1的黑老虎鲜叶提取液洗面奶及其制备方法与实施例3相同。
对比例2
对比例2的一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料,最好在清晨按计划采够当日的加工量,并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,都应保留一定数量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧8min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,然后投入果蔬破壁机,加入黑老虎鲜叶重1.5倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆,注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失,打碎成浆后得黑老虎鲜叶原浆;
S4、一次破胶:加入黑老虎鲜叶原浆质量0.2%的复合酶进行一次破胶,搅拌,在35℃下进行酶解反应,反应时间为7h,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:1:1的质量比组成;静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A;
S5、醇提:取步骤S4中的下层胶体溶液,投入2倍重量含量为95%的乙醇溶液进行提取,在30℃下搅拌2h,过滤,得初级提取液C;
S6、二次破胶:将初级提取液A用0.05M的柠檬酸或0.05M的碳酸钠把pH调节至6.5后,加入初级提取液C,搅拌,静置,吸出上清液,同时弃去底部的沉淀;
S7、超微膜过滤:将步骤S6中的上清液用0.1μ超滤膜进行过滤,即得对比例2的黑老虎鲜叶提取液。
对比例2的黑老虎鲜叶提取液洗面奶及其制备方法以及含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂及其制备方法均与实施例3相同。
对比例3
对比例3的一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料,最好在清晨按计划采够当日的加工量,并注意保护黑老虎植株的可持续生长,每条藤曼,都应保留一定数量的鲜叶;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧8min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,然后投入果蔬破壁机,加入黑老虎鲜叶重1.5倍的纯净水,开启破壁机将鲜叶打碎成浆,注意控制破壁机高速档的开启时间,每次不超过20秒钟,以免产生局部的高温,造成有效成分的损失,打碎成浆后得黑老虎鲜叶原浆;
S4、一次破胶:加入黑老虎鲜叶原浆质量0.2%的复合酶进行一次破胶,搅拌,在35℃下进行酶解反应,反应时间为7h,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:1:1的质量比组成;静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A;
S5、二次破胶:取下层胶体溶液,加入益生菌进行二次破胶,加入的益生菌为市场采购的“安琪葡萄酒果酒专用酵母”,加入质量为下层胶体溶液质量的0.12%,搅拌,得发酵液,发酵罐的温度控制在20℃,发酵的时间为7天,为促进发酵过程更为完全,在发酵开始后的第二天往发酵液中加入一定量的白砂糖,加入的量可控制在发酵液总量的1%左右;发酵结束后胶体溶液的粘稠度已经大为降低,这时可以在200目滤网下进行过滤,得初级提取液B和固体滤饼,弃去固体滤饼;
S6、三次破胶:将初级提取液A和初级提取液B混合,用0.05M的柠檬酸或0.05M的碳酸钠把pH调节至6.5后,静置,吸出上清液,同时弃去底部的沉淀;
S8、超微膜过滤:取步骤S6中的上清液,即得对比例3的黑老虎鲜叶提取液。
对比例3的黑老虎鲜叶提取液洗面奶及其制备方法以及含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂及其制备方法均与实施例3相同。
对比例4
对比例4除了在一次破胶工艺步骤中,仅采用0.3%质量分数的纤维素酶作为酶解反应的单一酶,不采用复合酶(纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:1:1)进行酶解反应外,其余制备黑老虎鲜叶提取液的操作条件参数、黑老虎鲜叶提取液的洗面奶及其制备方法以及含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂及其制备方法均与实施例3相同。
试验例1、不同工艺提取得到的黑老虎提取液的外观表现评价
黑老虎提取液的外观表现评价包括粘度评价、沉淀物评价和外观澄清度评价。其中评价测试方法如下:取实施例1~3以及对比例1制备得到的黑老虎提取液50mL,放入100mL透明具塞比色管后盖上塞子,放入振荡器中在20±0.5℃下振荡5min后,取出,静置10min后,在20±0.5℃的环境下用旋转粘度计测定其粘度并记录读数,重复测量三次,结果用均值表示,粘度单位用厘泊(cP)表示;再静置2h,用肉眼观察并记录装有提取液的比色管底部沉淀生成状况以及提取液的澄清程度。实验结果如表1所示:
表1不同工艺提取得到的黑老虎提取液的外观表现评价
从表1结果可得,使用本发明方法制备得到的黑老虎鲜叶提取液粘度在1.19-1.23cP之间,粘度较低,具有较好的流动性;且制备得到的提取液澄清,无沉淀或絮状物产生,能够满足作为化妆品原料的基本要求,其中实施例3为本发明的最佳实施例。
对比例1的黑老虎鲜叶提取液是在破碎打浆后直接进行过滤制得的,与本发明实施例3相比,对比例1制备得到的黑老虎鲜叶提取液非常浑浊且在过滤时大量的粘稠状胶体把滤网给堵住,得到的黑老虎鲜叶提取液在静置后,比色管中的提取液呈悬浮液状态且底部出现大量的浑浊。
试验例2、本发明黑老虎提取液对小鼠皮肤水分、pH、黑色素和血红素的影响
取SPF级雌性小鼠100只,体重为20±2g,随机分成10组,每组10只,其中,8组为试验组,1组为模型组,1组为空白对照组。先用剪刀把小鼠背上的粗毛剪掉,再用剃须刀将剩余的绒毛剔除干净,使背部皮肤充分暴露,剃毛面积为3cm×3cm,每周脱毛1次,脱毛后用温清水洗净。实验过程中,每天分别定时用实施例1~3、对比例1~4的黑老虎鲜叶提取液涂抹至小鼠背部的皮肤上,涂抹应当厚度均匀且能够覆盖背部暴露的皮肤,将涂抹好的背部实验部位置于SS-04B型紫外光疗仪灯下照射10min,照射距离40cm,每天照射一次,连续照射两周;模型组不进行任何涂抹,直接在紫外光疗仪灯下照射10min;空白组不进行任何涂抹,也不在紫外光疗仪灯进行照射。两周后采用皮肤测试仪(德国CK,型号为CK-MPA10)对小鼠背部皮肤进行测试,分别采用该皮肤测试仪中的水分测试探头(Corneometer CM825)、酸碱度测试探头(Skin-pH-Meter PH905)、黑色素和血红素测试探头(Mexameter MX18)对小鼠背部皮肤的水分、pH值、黑色素以及血红素进行测量,分别记录各组试验组、模型组、对照组中小鼠背部皮肤的水分值、pH值、黑色素值和血红素值。每组试验结果用统计软件进行统计分析,结果用表示,表示每组里面10例试验结果的平均值,s表示标准差,其中以P<0.05为差异有统计学意义,试验结果如表1所示:
表2本发明黑老虎鲜叶提取液对小鼠皮肤水分、pH、黑色素和血红素的影响
注与空白对照组比较*P<0.05
从表2的试验结果可知,与模型组对比,本发明黑老虎鲜叶提取液涂覆与小鼠背部皮肤后,其水分含量有所提高,pH值有所降低,表明本发明的黑老虎鲜叶提取液具有很好的补水滋润效果,而且黑色素和血红素值也低于模型组,表明本发明的黑老虎鲜叶提取液在应激环境下能有效抑制皮肤中黑色素和血红素的生成。
对比例1与实施例3相比,对比例1的黑老虎鲜叶提取液是在破碎打浆后直接进行过滤制得的,从表2结果可知,在紫外光疗仪灯的照射下,小鼠背部皮肤的水分值虽然高于空白对照组,但明显低于实施例3,黑色素和血红素的沉积均大于实施例3,说明直接破浆过滤得到的黑老虎提取液中大部分的抑制色素(美白祛斑)的有效成分已经损失,因此其抑制色素生成及滋润的效果大大降低,这主要是因为黑老虎鲜叶直接破浆过滤后的溶液粘度非常大,大部分有效成分被这些粘稠的胶状物所包裹住,使得有效成分损失。
对比例2的黑老虎鲜叶提取液在一次破胶酶解后,过滤得到的下层胶体溶液不加入益生菌进行发酵,而是直接将下层胶体溶液进行醇提,过滤后,合并滤液即得对比例2的黑老虎鲜叶提取液。其制备得到的黑老虎鲜叶提取液抑制色素的能力有所降低,且小鼠背部皮肤的水分含量也相应降低,这可能是因为缺少了益生菌发酵步骤,会减少了发酵过程中产生的多种酵素精华,而这些酵素的产生对于皮肤的美白、滋润以及去除黑色素有一定的效果。
对比例3的黑老虎鲜叶提取液不进行醇提步骤,与本发明实施例3相比,由于醇提过程中需要加入2倍重量的含量为95%的乙醇溶液,对比例3缺少这一步骤,其提取液的粘度要明显高于实施例3。从表2实验数据可得,其去除色素的性能比实施例3要差,这可能是因为对比例3没有加入乙醇溶剂进行提取,导致最终得到的黑老虎鲜叶提取液中的有效成分减少,所以涂敷于相同面积小鼠背部抑制色素的有效成分也相应减少,进而得出该实验结果。
对比例4的黑老虎鲜叶提取液在一次破胶工艺步骤中,仅采用0.3%质量分数的纤维素酶作为酶解反应的单一酶,不采用复合酶(纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:1:1)进行酶解反应,其抑制色素的效果也比实施例3要差,这是因为复合酶的使用可以将黑老虎鲜叶原浆酶解得更充分,得到更多能够用于抑制色素和美白的有效成分。
试验例3、本发明的含黑老虎鲜叶提取液的洗面奶和喷雾剂的性能评价试验
性能评价方法:挑选60例不同年龄的,皮肤明显干涩,颜色发暗、有一些色斑或色素沉着的试用者,进行了为期一个月试验。60例试用者分为两组,其中一组为试验组,一组为对照组。试验组为让其中一半的试用者使用黑老虎鲜叶提取液的洗面奶并配上一小瓶(10毫升)含黑老虎鲜叶提取液的喷雾剂(试验组所使用的洗面奶和喷雾剂按照本发明实施例3的配比和方法制备得到,洗面奶和喷雾剂中均含有黑老虎鲜叶提取液),在使用完洗面奶洁面后采用喷雾剂喷脸部;另一半的试用者则作为对照组(对照组的洗面奶和喷雾剂也采用本发明实施例3的配比和制备方法制得,但配方中不加入黑老虎鲜叶提取液,其余相同),每周使用5天,试验周期为4周,仔细观察每位试用者的使用效果,注意是否有副作用或不良反应。
疗效评定标准:显效:使用洗面奶与喷雾剂4周以后,色斑明显褪色,肤色提亮,不再暗黄,与之前相比肌肤变得水嫩有光泽,皱纹变淡;
有效:使用洗面奶与喷雾剂4周以后,色斑有所减褪,肤色提亮,与之前相比肌肤变得较有光泽,皱纹变淡;
无效:使洗面奶与喷雾剂4周以后,色斑无明显变化,皮肤依旧显干涩、暗黄、无光泽。
表3本发明的黑老虎鲜叶提取液洗面奶和喷雾剂的性能评价试验
从表3中数据可以看出,使用黑老虎鲜叶提取液洗面奶与喷雾剂4周以后的试用者的总的有效率要远远高出对照组。评价试验结果可以证明含黑老虎鲜叶提取液的洗面奶与喷雾剂的配合使用确实具有补水、美白光泽以及祛斑等诸多方面的功效,并且经观察后未发现任何副作用或不良反应,因此可用于日常皮肤的护理。
本行业的技术人员应该了解,上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效,而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (10)
1.一种黑老虎鲜叶提取液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、采集:选取黑老虎鲜叶作为原材料;
S2、消毒灭菌:清洗,自然风干,将黑老虎鲜叶置于密封袋中通臭氧5~10min;
S3、破碎打浆:将消毒灭菌后的黑老虎鲜叶切碎,投入破壁机,加水,打碎成浆,得黑老虎鲜叶原浆;
S4、一次破胶:加入复合酶进行一次破胶,搅拌,在35~38℃下进行酶解反应,反应3~7h,静置,分离上层清液和下层胶体溶液,其中,将上层清液在4~8℃下保存,即得初级提取液A;
S5、二次破胶:取下层胶体溶液,加入益生菌,搅拌,得发酵液,在20℃下发酵3~7天,过滤,得初级提取液B和固体滤饼;
S6、醇提:将步骤S5中的固体滤饼碾碎,投入95%的乙醇溶液进行提取,在30~35℃下搅拌1~2h,过滤,得初级提取液C;
S7、三次破胶:将初级提取液A和初级提取液B混合,调节pH至6.5~7.5后,加入初级提取液C,搅拌,静置,待沉淀析出后取上清液;
S8、超微膜过滤:将所述步骤S7中的上清液进行超微膜过滤,即得黑老虎鲜叶提取液。
2.根据权利要求1所述的黑老虎鲜叶提取液的制备方法,其特征在于,在所述步骤S4中,所述复合酶的质量为所述黑老虎鲜叶原浆质量的0.1~0.3%,所述复合酶由纤维素酶、果胶酶与木瓜蛋白酶以2:0.5~2:0.5~2的质量比组成。
3.根据权利要求1所述的黑老虎鲜叶提取液的制备方法,其特征在于,在所述步骤S5中,所述益生菌选自安琪葡萄酒果酒专用酵母,所述益生菌的质量为所述下层胶体溶液质量的0.05~0.2%。
4.根据权利要求1所述的黑老虎鲜叶提取液的制备方法,其特征在于,在所述步骤S5中,在发酵开始后的第二天,往发酵液中加入白砂糖,所述白砂糖的加入量为所述发酵液总重量的0.2~0.5%。
5.根据权利要求1所述的黑老虎鲜叶提取液的制备方法,其特征在于,在所述步骤S6中,所述固体滤饼与所述95%的乙醇溶液的重量比为1:1~2。
6.权利要求1~5任意一项所述的黑老虎鲜叶提取液的制备方法得到的黑老虎鲜叶提取液。
7.根据权利要求6所述的黑老虎鲜叶提取液在制备具有美白、祛斑功效的化妆品中的用途,其特征在于,所述化妆品包括膏剂、乳剂、膜剂、喷雾剂、凝胶剂或皂剂。
8.一种含权利要求6所述的黑老虎鲜叶提取液洗面奶,其特征在于,包括以下重量份的组分:黑老虎鲜叶提取液15~30份、去离子水20~25份、椰油酰胺丙基甜菜碱3~5份、椰油酰甘氨酸钠2~4份、甘油8~10份、甲基椰油酰基牛磺酸钠25~30份、PEG-250二硬脂酸酯1~1.5份、氯化钠1.5~2份、EDTA二钠0.03~0.05份、舒缓保湿提取液0.05~0.1份、辛酰羟肟酸0.3~0.5份、甘油辛酸酯0.2~0.3份、丙二醇0.1~0.2份和香精0.05~0.1份。
9.根据权利要求8所述的黑老虎鲜叶提取液洗面奶,其特征在于,所述舒缓保湿提取液为芦荟提取液或金缕梅提取液。
10.根据权利要求8所述的黑老虎鲜叶提取液洗面奶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
A1、将配方量的去离子水、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰甘氨酸钠、甘油、甲基椰油酰基牛磺酸钠与EDTA二钠混合,在80~85℃下搅拌至透明;
A2、降温至60℃,加入配方量的PEG-250二硬脂酸酯,搅拌均匀;
A3、降温至50℃,加入氯化钠溶液,搅拌;其中,所述氯化钠溶液为预先溶解好的氯化钠饱和水溶液;
A4、降温至45℃,加入配方量的黑老虎鲜叶提取液、舒缓保湿提取液、香精及预先分散好的辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯与丙二醇;搅拌均匀,冷却静置,即得。
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