CN110804058B - 一种伊布替尼新晶型及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药化工领域，涉及一种伊布替尼的晶型M及其制备方法，该晶型的X‑射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°处有特征衍射峰。该晶型物纯度高，稳定性好，制备方法简单，易于操作，适合工业化生产。

Description

一种伊布替尼新晶型及其制备方法

技术领域

本发明属于医药化工领域，具体涉及一种伊布替尼新晶型及其制备方法。

背景技术

伊布替尼(Ibrutinib,依鲁替尼)是由Pharmacyclics公司和强生公司联合研制开发，2013年11月经美国食品药品管理局加速批准上市，商品名为Imbruvica，通用名为Ibrutinib。它是一种口服的名为布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂的首创新药，主要用于治疗一种罕见的侵袭性血癌——套细胞淋巴瘤(MCL)。早先有分析师已预测Ibrutinib所有适应症的年销售峰值将会达到大约50亿美元，其最大销售份额可能来自慢性淋巴细胞性白血病适应症(CLL)，而目前该适应症也正在等待FDA批准，结构式X如下所示：

WO2013184572A1公开了1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4D]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2-丙烯-1-酮的无水合物晶型A、晶型B、晶型C以及溶剂合物晶型D、晶型E、晶型F。晶型A的X射线衍射图在2-Theta值为5.7±0.1°、13.6±0.1°、16.1±0.1°、18.9±0.1°、21.3±0.1°和21.6±0.1°处具有特征峰；晶型B的X射线衍射图在2-Theta值为5.2±0.1°、10.2±0.1°、16.5±0.1°、18.5±0.1°和20.8±0.1°处具有特征峰；晶型C的X射线衍射图在2-Theta值为7.0±0.1°、14.0±0.1°、15.7±0.1°、18.2±0.1°、19.1±0.1°、19.5±0.1°、20.3±0.1°、22.1±0.1°和22.9±0.1°处具有特征峰；晶型D为甲基异丁基酮溶剂合物；晶型E为甲苯溶剂合物；晶型F为甲醇溶剂合物，溶剂合物不符合制药需求，只有晶型A适合药用制剂。其报道的晶型A有三种制备方法，都存在操作不易控制，不适合工业化生产的缺陷；同时CN201510980745.3也公开了此晶型A的制备方法和谱图数据。

CN201510952168.7公开了一种制备依鲁替尼无定型物的方法。并与WO2013184572公开的方法得到的无定形物进行了稳定性考察。

苏州晶云CN201410542609.1和CN201610156820.9公开了另外一种晶型A(下面称为晶型A′)，其报道的制备方法有三种：方法一，将依鲁替尼粗品溶解在异丙醇和正庚烷的混合溶液中，在室温下以每分钟750转的速度搅拌得到晶型A′，如此高转速的搅拌工业化实施很困难；方法二，将依鲁替尼粗品溶解在异丙醇和正庚烷的混合溶剂中，并以0.1℃/min的降温速度从50℃降到5℃得到晶型A，这样精密的降温速度很难控制；方法三，将依鲁替尼粗品溶解在丙酮中，再缓慢加入正庚烷，并在每分钟1000转的转速下搅拌一天得到晶型A，这个方法比方法一要求的转速更高，工业化更难实现。发明人在重复这些方法时，发现重现性差，稍微控制不好就会得到WO2013/184572公开的晶型A。

CN201410043636.4公开了依鲁替尼的晶型：无水晶型Ⅱ和晶型Ⅷ，水合物晶型Ⅲ，晶型Ⅳ为四氢呋喃(THF)溶剂合物，晶型Ⅴ、晶型Ⅵ、晶型Ⅶ均为三氯甲烷溶剂合物；CN201610347177.8和CN201610347787.8为其分案。

CN201510246220.7公开了依鲁替尼新晶型A2和新晶型A3的XRPD数据和制备方法，并对两种晶型进行了引湿性考察和稳定性考察。

CN201510808526.7公开了依鲁替尼晶型I和II的制备方法以及两种晶型之间的转换制备方法；CN201610497395.X公开了依鲁替尼晶型III，两篇专利对其晶型进行了稳定性和吸湿性考察。

CN201610114026.8、CN201610114027.2及CN201610114028.7分别公开了依鲁替尼晶型B、晶型F和晶型G的XRPD数据和制备方法，并对晶型进行了稳定性、溶解度和溶出度的测定及引湿性进行了考察，除晶型B的引湿性在0.1％外，经研究，三种晶型各方面考察数据相当。

CN201610191829.3公开了依鲁替尼晶型1的XRPD数据和制备方法，并对晶型进行了溶解、引湿性和稳定性的考察。

CN201680025850.4公开了依鲁替尼的多晶型物，其特点为：无水晶型：形式D1、形式D1a、形式D2、形式D2a、形式D9；形式D3是苯乙酮溶剂合物、形式D4是甲酰胺溶剂合物、形式D5是丙酮溶剂合物、形式D6是氯苯溶剂合物、形式D7是二甲基乙酰胺溶剂合物、形式D8是丙酮溶剂合物、形式D10是1,2-二甲氧基乙烷溶剂合物、形式D11是苯甲醚溶剂合物、形式D12是碳酸二甲酯溶剂合物和形式D13是1,4-二氧杂环己烷溶剂合物。

CN201680026436.5-公开了依鲁替尼的溶剂化形式：形式1是丁腈溶剂化物、形式2是1,2-二甲氧基乙烷溶剂化物、形式3是六氟苯溶剂化物、形式4是六氟苯溶剂化物、形式5是苯乙酮溶剂化物、形式6是氯苯溶剂化物、形式7是苯乙酮溶剂化物、形式8是二甲基乙酰胺溶剂化物、形式9是乙酸苯甲酯溶剂化物、形式10是1,1,2-三氯乙烷溶剂化物。

WO2015145415A2公开了依鲁替尼的晶型为：晶型III是1,4-二恶烷溶剂化物、晶型IV是1,2-二甲氧基乙烷溶剂化物、晶型V是甲醇溶剂化物、晶型VI是无水晶型、晶型VII是苯甲醚溶剂化物、晶型VIII是氯苯溶剂化物、晶型IX是苯甲醚化物；其中晶型VI是晶型IV1,2-二甲氧基乙烷溶剂化物转化而来，晶型VI是非溶剂化物晶型，而晶型VI由晶型IV在严格控制在温度40℃、相对湿度75％的环境下，放置足够长的时间可转化晶型为VI，此方法容易得到晶型IV和晶型VI的混晶，尤其工业化大生产中转晶效果会更差。

WO2016025720A1公开了依鲁替尼的晶型：晶型G是醋酸溶剂化物、晶型J是苯甲醚化物、晶型K。

WO2016079216A1公开了依鲁替尼的晶型：晶型苯甲醚溶剂化物、晶型氯苯溶剂化物、晶型二氯甲烷溶剂化物、晶型1,4二氧六环溶剂化物、晶型吡啶溶剂化物等形式。

CN201510984875.4也公开了依鲁替尼的纯化方法，依鲁替尼成品纯度均提升至99.8％及以上。其工艺与WO2013184572A晶型制备的工艺相同。

WO2017029586A1也公开了晶型S1，S2，S3，S4和无定型A1的晶型形式。公开了其制备方法和晶型之间的转换等。

多晶型现象在药物中广泛存在。同一药物的不同晶型在溶解度、熔点、密度、热稳定性等方面有显著的差异，从而不同程度地影响药物的稳定性、均一性、生物利用度、疗效和安全性。目前伊布替尼已经研发出众多的晶型和溶剂化物，但是溶剂化物不满足制药需求，而且溶剂化物不稳定；无水晶型和水合物晶型能用在医药上的晶型也甚少。

因此，仍然需要替代的伊布替尼的多晶型形式及其制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2-丙烯-1-酮(伊布替尼)的新晶型，本发明中命名为晶型M。其晶型制备工艺简便、化学稳定性优良，适合工业化生产。

本发明所提供的一种伊布替尼的晶型M，所述晶型的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、处有特征衍射峰。

进一步，该晶型M的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、25.4±0.2°处有特征衍射峰。

进一步，该晶型M的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、13.2±0.2°、13.4±0.2°、13.6±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、21.9±0.2°、22.3±0.2°、25.4±0.2°、30.7±0.2°处有特征衍射峰。

更进一步，该晶型M的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、10.6±0.2°、10.8±0.2°、12.2±0.2°、12.4±0.2°、13.2±0.2°、13.4±0.2°、13.6±0.2°、15.2±0.2°、16.1±0.2°、18.9±0.2°、19.7±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、21.9±0.2°、22.3±0.2°、25.1±0.2°、25.4±0.2°、30.7±0.2°处有特征衍射峰。

所述晶型M具有如图1所示的X-射线粉末衍射图谱和如图2所示的X-射线粉末衍射图积分图。

所述晶型M其差示扫描量热法(DSC)分析有起始温度75.39℃，峰值为83.17℃的第一个吸热峰，有起始温度152.74℃，峰值156.38℃的第二个吸热峰；其具有图3所示的TGA和DSC分析图；所述晶型为非溶剂合物或非水合物。

本发明第二方面，提供一种制备所述晶型M的制备方法，包括如下步骤：

(1)将伊布替尼粗品加入N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃；

(2)将步骤(1)所得伊布替尼溶液，加入活性炭脱色，过滤，滤液中加入溶剂B，再加热至回流；

(3)将步骤(2)所得溶液搅拌并以20～30℃/h的速度降温至-5～10℃，保持此温度下搅拌析晶4～8h；

(4)过滤、冷乙醇水混合液洗涤、真空干燥，即得伊布替尼晶型M；

其中，所述的伊布替尼粗品选自下组：现有技术中制备方法得到的粗品，也包括现有技术中无定型或晶型产品。

另，20～30℃/h的速度降温通过冰水浴、冰盐浴或者制冷设备实现，非自然降温所能实现。

所述的步骤中，溶剂B为环己烷、正己烷、正庚烷、石油醚、甲基叔丁基醚、水、乙酸乙酯中的一种或组合；伊布替尼粗品与N,N-二甲基甲酰胺、溶剂B的质量体积比为1:0.5～3:3～20，其中伊布替尼粗品的质量以g计，N,N-二甲基甲酰胺、溶剂B的体积以ml计；优选比为1:1:15。

所述的步骤中，溶剂B优选为正庚烷，伊布替尼粗品与N,N-二甲基甲酰胺、正庚烷的质量体积比优选为1:1:15，其中质量以g计，体积以ml计。

所述步骤(4)中冷乙醇水混合液的温度为，乙醇与水的体积比为1:1～9，优选1:5；干燥温度为50～65℃。

所述的晶型M的用途，用于制备预防和/或治疗癌症的药物、或用于制备抑制肿瘤细胞的药物；其中所述癌症是选自慢性淋巴细胞性白血病(CLL)/小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和多发性骨髓瘤的B细胞恶性疾病。

一种医药组合物，所述的组合物包含(a)权利要求1-5任一项所述的晶型M，以及(b)药学上可接受的载体。

本发明还提供了一种药物组合物，它包含安全有效量范围内的活性成分晶型M，以及药学上可接受的载体。

“安全有效量”指的是：活性成分的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg活性成分/剂，更佳地，含有10-200mg活性成分/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个药片。

“药学上可以接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

本发明的活性成分或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)等。本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。

现有技术中得到很多溶剂化物，如三类溶剂的溶剂化物，现有技术中公开了伊布替尼的苯乙酮、氯苯、乙酸苯甲酯、丙酮、甲醇、甲苯、苯甲醚、二氯甲烷、吡啶等等溶剂化物晶型。研究发现低沸点溶剂的伊布替尼溶剂化物很不稳定，温度不合适就容易发生转晶失去溶剂化；沸点高的溶剂，又有引湿或杂质产生等问题。而且，溶剂化物的制备方法要求高，很难重复出现有技术提供的溶剂化晶型。所以，本发明重点研究了无水晶型和水合物晶型。

本发明的有益效果为：

本发明提供的伊布替尼晶型M溶解性好，在生物介质中溶解度高，有利于提高药物的生物利用度，有较好的临床应用价值。

本发明提供的伊布替尼晶型M具有良好的稳定性，并且几乎无吸湿性，有利于药物的储存和运输，确保临床应用中的安全性。

本发明提供的伊布替尼晶型M的制备方法操作简单，除杂能力强，产品纯度高，收率能达到96％以上，纯度达到99.8以上；适合工业化生产，同时也提供了一种伊布替尼的纯化方法。

附图说明

图1：伊布替尼晶型M的X-射线粉末衍射图。

图2：伊布替尼晶型M的X-射线粉末衍射图积分图。

图3：伊布替尼晶型M的TGA和DSC分析图。

具体实施方式

下面通过实施例来进一步说明本发明。应该正确理解的是：本发明的实施例仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。

原料和通用方法：

实施例中所用原料伊布替尼现有技术提供制备方法得到的产品，或者现有技术中所得的晶型或者无定型，亦或者是市售渠道可获得。

X-射线粉末衍射测试仪器及测试条件为：帕纳科Empyrean X-射线粉末衍射仪；光源铜靶、平板样品台、BBHD入射光路、PZXCEL衍射光路，电压45kv、电流40mA，发散狭缝为1/4°、防散射狭缝为1°、索拉狭缝为0.04rad，每步计数时间0.5s、扫描范围3～50°。

TGA/DSC分析：在TGA/DSC3+上采集，分析的方法参数如下：温度范围：室温30-200℃；扫描速率：10℃/min；保护气体：氮气50mL/min。

伊布替尼纯度检测HPLC条件和方法：色谱柱(waters symmetry shield RP-C184.6*150mm 3.5μm研分170)，λ＝260nm，流速：1.0ml/min，柱温：40℃，样品：0.6mg/ml(40％乙腈)，进样：10μL，MPA＝0.1％TFA水，MPB＝0.1％TFA乙腈。伊布替尼HPLC检测洗脱梯度见表1。

表1伊布替尼HPLC检测洗脱梯度表

t/min	A％	B％
			0	75	25
12	65	35
			35	50	50
40	10	90
			44	10	90
45	75	25
			50	75	25

下述实施例中，除非另有说明，所述的试验方法通常按照常规条件或制造厂商建议的条件实施；所用的实验器材、试剂均可通过市售购买的方式获得。

实施例1伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到50ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入正庚烷750ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至-5～0℃，保持此温度下搅拌析晶5～6h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:5)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M，；收率98.3％，HPLC：99.98％。

实施例2伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到150ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入正庚烷1000ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至-5～0℃，保持此温度下搅拌析晶5～6h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:5)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率97.0％，HPLC：99.97％。

实施例3伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到25ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入正庚烷750ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至-5～0℃，保持此温度下搅拌析晶5～6h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:5)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率98.50％，HPLC：99.87％。

实施例4伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到50ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入石油醚750ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至-5～0℃，保持此温度下搅拌析晶7～8h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:5)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率97.8％，HPLC：99.96％。

实施例5伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到50ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入甲基叔丁基醚150ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至0～5℃，保持此温度下搅拌析晶4～5h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:5)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率97.8％，HPLC：99.92％。

实施例6伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到50ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入水750ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至5～10℃，保持此温度下搅拌析晶5～6h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:1)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率97.1％，HPLC：99.97％。

实施例7伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到50ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入乙酸乙酯与环己烷的混合溶液750ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至0～5℃，保持此温度下搅拌析晶5～6h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:2)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率96.5％，HPLC：99.96％。

实施例8伊布替尼晶型M的制备

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到50ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃溶清；加入2g活性炭脱色，过滤，滤液中加入正己烷与正庚烷的混合溶液750ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以20～30℃/h的速度降温至-5～0℃，保持此温度下搅拌析晶5～6h；过滤，以0～5℃乙醇水溶液(乙醇与水体积比1:5)洗涤、真空条件下以50～65℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M；收率98.0％，HPLC：99.94％。

对比实施例1

将513mg伊布替尼(PCI-32765)固体粉末溶解于15mL异丙醇和正庚烷体积比为2:3的混合溶剂中，得到的溶液。在室温条件下，将所得溶液以750转/分的速率搅拌24h，收集固体即得伊布替尼晶型物。

对比实施例2

反应瓶中加入伊布替尼0.20g，正丙醇10mL，搅拌，加热至90℃，溶解后将反应移至室温(25℃)搅拌，缓慢加入水6mL，析出固体，过滤，所得产品在真空下35℃干燥6h，得伊布替尼晶型物。

对比实施例3

反应瓶中加入伊布替尼0.20g，加入乙醇10mL，搅拌，升温至70℃溶解，然后将溶液滴加至室温(20℃～25℃)下的20mL的水中，析出固体后搅拌0.5h，过滤，所得产物在真空下35℃干燥5h，得到伊布替尼晶型物。

对比实施例4

在干净的圆底烧瓶中，12.0g伊布替尼通过在磁力搅拌下加热至45℃而溶解在120ml甲醇中。经45min将72ml水加入至溶解的伊布替尼的温溶液中，保持内部温度为45℃。该溶液缓慢变为浆液，并且在升高的温度下搅拌3h。吸出浆液样品，过滤并干燥。使浆液冷却至室温并搅拌至少16h。吸出另外一份浆液样品，过滤并干燥。将该固体过滤，用50ml的甲醇：水的3:2混合物洗涤，并在过滤器上干燥40h。得到所需的伊布替尼晶型物。

对比实施例5

称量对比实施例4得到伊布替尼晶型(约500mg)至容器中并溶解于50℃的甲醇(4ml)中。将该溶液冷却至25℃，仍为溶液。加入水(一次加入500μl的水，总共2ml)直到该溶液变浑浊。将浆液搅拌10min。用移液管移出分量试样以通过XRPD评估该材料，同时该样品在25℃下搅拌1h；然而材料具有极低的结晶度。在25℃搅拌1h后，将样品置于5℃下3天。这一时间后，用移液管移出另一分量试样用于XRPD分析。真空过滤浆液的剩余物并在25℃下真空干燥过夜以提供所需的伊布替尼晶型物。

对比实施例6

在干净的圆底烧瓶中，将2.0g伊布替尼悬浮于25ml甲醇中并加热至50℃。将溶解的伊布替尼的温溶液滤入干净的圆底烧瓶中。在磁力搅拌下使精炼的溶液冷却至室温。溶液缓慢变成浆液并搅拌超过14h。过滤固体，用5ml甲醇洗涤，并在过滤器上干燥20h，然后在50℃真空炉中干燥8h；得到所需的伊布替尼晶型物。

对比实施例7

将伊布替尼无定型物(10.0g，参考WO2008/039218制备)加入50ml异丙醇中，加热至回流使溶解。待溶清后继续搅拌30min。停止加热，以约1℃/分钟的速度降温，有固体逐渐析出。待冷却到室温后，保温搅拌2h，过滤，滤液用丙酮淋洗，滤饼于50℃真空干燥得伊布替尼晶型物。

对比实施例8

将对比实施例4得到伊布替尼晶型(10.0g)加入50ml乙酸乙酯中，加热回流溶解，溶清后以1℃/分钟的速度冷却到室温，并在室温搅拌4h，过滤，滤饼用乙酸乙酯混合溶剂淋洗，50℃下真空干燥得晶型物。

对比实施例9

伊布替尼无定型物10g加入100ml异丙醇和甲醇的混合溶液(异丙醇和甲醇的体积比为2:1)中，加热至回流使溶解，溶解后搅拌10h，加水100ml，搅拌2h，过滤，40℃真空干燥得伊布替尼晶型物。

对比实施例10

伊布替尼无定型物10g加入100ml乙酸乙酯和甲醇的混合溶液(乙酸乙酯和甲醇的体积比为2:1)中，加热至回流使溶解，溶解后搅拌10h，加水100ml，搅拌2h，过滤，加热干燥的同时进行研磨得伊布替尼晶型物。

对比实施例11

伊布替尼粉末500mg加入4ml甲醇中，加热至60℃搅拌1h，得到澄清溶液。将该溶液冷却至25℃，滴加2ml水，在25℃下搅拌1h后，在1h内降温到5℃并继续搅拌48h，过滤，收集固体并50℃真空18h，得到伊布替尼晶型物。

对比实施例12

将伊布替尼粗品50g(HPLC：99.5％)加入到200ml N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至50-55℃溶清；加入3g活性炭脱色，过滤，滤液中加入正辛烷1500ml，再加热至回流；所得溶液搅拌并用冰盐浴以10～15℃/h的速度降温至-15～-12℃，保持此温度下搅拌析晶2～3h；过滤，以0～5℃甲醇溶液洗涤、真空条件下以70～80℃温度干燥至恒重，即得伊布替尼晶型M，；收率91.25％，HPLC：99.87％。

对比实施例13

将99.9mg伊布替尼粉末溶于0.6mL体积比为2:1的甲醇/水的混合溶剂中，得到悬浮液，室温条件下搅拌5h即可得到伊布替尼晶型物。

对比实施例14

将101.1mg伊布替尼的粉末溶解于1mL的体积比为1:1的乙醇/水混合溶剂中，室温在条件下搅拌24h至固体析出，收集固体取4mg溶解于1mL体积比为2:1的甲醇/水混合溶剂中，得到悬浮液，将所得悬浮液先升温至50℃，再以0.1℃/分钟的速率缓慢降温至5℃，得到伊布替尼晶型物。

对比实施例15

将伊布替尼无定形物(5.0g)加入50ml正丙醇中，加热至回流使溶解。待溶清后继续搅拌30min。停止加热，以约1℃/分钟的速度降温，冷却到50℃，有固体析出，保温搅拌2h，过滤，滤液用乙酸乙酯淋洗，滤饼于50℃真空干燥得伊布替尼晶型物。

对比实施例16

在25-30℃下将5.0g的伊布替尼装入圆底烧瓶中。将200mL的甲醇装入烧瓶中，并将内容物加热至50-60℃。将溶液制成无颗粒并冷却至5-10℃。将200mL的预冷至2-10℃的去矿质水缓慢添加至以上烧瓶中。在5-15℃下将***内容物保持1-3小时，并使用真空泵过滤以获得未干燥的结晶物。在50-60℃下在真空下将结晶物干燥4-6小时以得到伊布替尼晶型物。

对比实施例17

在25-30℃下将1.5g的伊布替尼装入圆底烧瓶中并冷却至-18℃。在-18℃下将4.6mL的乙醇-水混合物(80:20)装入以上烧瓶中。在-15至-20℃下保持内容物15-18h。在减压下在0℃下将内容物蒸馏2-4h。在52℃下在减压下将蒸馏的化合物干燥4-6h以获得伊布替尼晶型物。

对比实施例18

将对比实施例4伊布替尼晶型物1.0g溶解在5ml乙二醇二甲醚中，80℃左右回流，然后5h内降温至10℃，过滤，40℃真空干燥16h，得到晶型物；将该晶型物放置在敞口的小反应瓶中置于温度40℃，RH为75％的培养箱中48h。收集固体得到伊布替尼晶型物。

对比实施例19

室温下，将10g伊布替尼无定型物溶解到50ml甲苯和30ml二甲基甲酰胺(DMA)的混合液中，溶液加热至50℃，然后滴加30ml水；进行分相，将30ml甲基叔丁基醚(MTBE)滴加到有机相中；用冰浴降温并加入无定型的伊布替尼晶种，继续搅拌，析晶，过滤真空干燥，得伊布替尼晶型物。

根据中国药典2015版第四部通则9015药品晶型研究及晶型质置控制指导原则。对本发明的晶型和现有技术中涉及的与本发明相近的晶型进行如下考察研究：

1.稳定性试验

具体的稳定性考察的方法可以参照中国药典2015版第四部通则9001原料药物与制剂稳定性试验指导原则；纯度检测用HPLC法:可运通用方法中所述伊布替尼纯度检测HPLC条件和方法，也可参照中国药典2015版通则0512高效液相色谱法。

影响因素试验：将实施1所得的晶型M和各对比实施例得到或累积得到的各种晶型放置在培养皿中，摊成≤10mm厚的薄层，进行如下实验：

1)高温试验，供试品开口置适宜的洁净容器中，60℃温度下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目纯度进行检测。

2)高湿试验，供试品开口置恒湿密闭容器中，在25℃分别于相对湿度90％士5％条件下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目纯度进行检测。

3)强光照射试验，供试品开口放在装有日光灯的光照箱或其他适宜的光照装置内，于照度为4500lx士500lx的条件下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目纯度进行检测，特别要注意供试品的外观变化。稳定性考察结果见表2。

表2稳定性考察结果

与现有技术相比，本发明提供的晶型M具有良好的稳定性。能更好地避免药物储存以及开发过程中发生转晶和杂质产生，从而避免生物利用度以及药效的改变。

2.引湿性试验

引湿性试验方法和条件参照中国药典2015版第四部通则9103药物引湿性试验指导原则：

其中，引湿性特征描述与引湿性增重的界定：

潮解：吸收足量水分形成液体。

极具引湿性：引湿增重不小于15％。

有引湿性：引湿增重小于15％但不小于2％。

略有引湿性：引湿增重小于2％但不小于0.2％。

无或几乎无引湿性：引湿增重小于0.2％。

引湿性考察结果见表3。

表3引湿性考察结果

结论：本发明得到的晶型M无或几乎无引湿性，不易受高湿度影响而潮解，方便药物的长期贮存放置。

3.溶解度测定

以实施例1得到的晶型M产品为例，和现有技术中涉及的晶型或非晶态样品进行溶解度的测定和比较。

在室温条件下将本发明的晶型M与现有技术制备得到的样品分别用pH5.0的FeSSIF(进食状态下的人工肠液)、pH1.8的SGF(人工胃液)、水、0.01mol/L HCl溶液进行溶解，24个小时后采用高效液相色谱(HPLC)测定溶液中伊布替尼的浓度。实验结果如表4所示。

表4溶解度的测定

经过24小时后计算，实施例1、实施例2和实施例3制备得到的晶型M在25℃下，在pH5.0的FeSSIF(进食状态下的人工肠液)、pH1.8的SGF(人工胃液)、水、0.01mol/L HCl溶液的溶解度都优于对比实施例所得到的晶型在此条件下的溶解度，有利于药物在人体内的吸收，便于临床广泛运用。取得了意料不到的结果，本发明的晶型溶解度比现有技术的晶型溶解度要高。

Claims (8)

1.一种伊布替尼的晶型M，其特征在于，该晶型的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°处有特征衍射峰。

2.一种伊布替尼的晶型M，其特征在于，该晶型的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、25.4±0.2°处有特征衍射峰。

3.根据权利要求1所述晶型M，其特征在于，该晶型的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、12.2±0.2°、13.2±0.2°、13.4±0.2°、13.6±0.2°、15.2±0.2°、18.9±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、21.9±0.2°、22.3±0.2°、25.4±0.2°、30.7±0.2°处有特征衍射峰。

4.根据权利要求1所述晶型M，其特征在于，该晶型的X-射线粉末衍射2θ值在5.1±0.2°、5.7±0.2°、10.6±0.2°、10.8±0.2°、12.2±0.2°、12.4±0.2°、13.2±0.2°、13.4±0.2°、13.6±0.2°、15.2±0.2°、16.1±0.2°、18.9±0.2°、19.7±0.2°、20.3±0.2°、21.3±0.2°、21.7±0.2°、21.9±0.2°、22.3±0.2°、25.1±0.2°、25.4±0.2°、30.7±0.2°处有特征衍射峰。

5.根据权利要求1所述晶型M，其特征在于，所述晶型M具有如图1所示的X-射线粉末衍射图谱；所述晶型M其具有图3所示的TGA和DSC分析图。

6.一种权利要求1～5任一项所述晶型M的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将伊布替尼粗品加入N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，加热至60-65℃；

(2)将步骤(1)所得伊布替尼溶液，加入活性炭脱色，过滤，滤液中加入溶剂B，再加热至回流；

(3)将步骤(2)所得溶液搅拌并以20～30℃/h的速度降温至-5～10℃，保持此温度下搅拌析晶4～8h；

(4)过滤、用冷乙醇水混合液洗涤、真空干燥，即得伊布替尼晶型M；

其中，所述的伊布替尼粗品选自下组：无定型或已有晶型产品。

7.一种权利要求6所述晶型M的制备方法，其特征在于，所述的步骤中，溶剂B为环己烷、正己烷、正庚烷、石油醚、甲基叔丁基醚、水、乙酸乙酯中的一种或组合；伊布替尼粗品与N ,N-二甲基甲酰胺、溶剂B的质量体积比为1:0.5～3:3～20，其中质量以g计，体积以ml计。

8.一种权利要求7所述晶型M的制备方法，其特征在于，所述的步骤中，溶剂B为正庚烷；伊布替尼粗品与N,N-二甲基甲酰胺、正庚烷的质量体积比为1:1:15，其中质量以g计，体积以ml计。

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