CN110669038B - 一种嘧啶类fgfr4v550l抑制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种嘧啶类fgfr4v550l抑制剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种嘧啶类FGFR4V550L抑制剂及其制备和应用，嘧啶类FGFR4V550L抑制剂的结构如式(I)所示，Ar为取代或者未取代的芳基，所述的芳基上的取代基为烷基、烷氧基、卤素或4‑甲基哌嗪‑1‑基。试验结果表明，该2‑N‑芳基‑4‑N‑芳基‑5‑三氟甲基嘧啶类化合物能够高效地抑制FGFR4V550L，可以作为一种潜在的高抑制活性的FGFR4V550潜力化合物。

Description

一种嘧啶类FGFR4V550L抑制剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一种2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
成纤维生长因子受体(FGFR)是一类穿膜的受体酪氨酸激酶，目前已知的FGFR主要包括4种类型，即FGFR1、FGFR2、FGFR3及FGFR4，FGFR 家族成员在控制细胞增殖和分化的信号通路中发挥着重要作用。在FGFR 的4个成员中，FGFR4与FGFR1～3在结构和功能上均有较大差异。在结构上，FGFR4与其它三种同源性最少，蛋白结构域差异较大，而且FGFR4 的膜外部分的D3域结构也与FGFR1～3不同。在功能上，FGFR1基因高表达常见于鳞状非小细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌等，FGFR2和3 的高表达则与胃癌、乳腺癌、膀胱癌有关，而FGFR4高表达与肝癌***密切。此外，FGFR4的敲除不会导致早期胚胎致死，不像FGFR1～3 那样参与调节骨骼的发育。因此，选择性靶向FGFR4的小分子抑制剂来***将不会带来重大的副作用，相对更有优势。
已有部分FGFR4抑制剂陆续被报道或进入临床试验。目前，已知重要的FGFR4抑制剂化合物有：吡唑类，如AZD454714和CH518328415 等；嘧啶类衍生物，如NVP-BGJ39816；吲唑类化合物LY287445517以及以咪唑并[1,2-b]哒嗪为主要药效团的化合物Ponatinib。这些抑制剂针对 FGFR4及其同家族激酶成员显示了不同程度的抑制活性和选择性。英国Blueprint医药公司公布了首个FGFR4选择性抑制剂BLU9931，该化合物以喹唑啉为母核，在体内、外试验中均体现了良好的FGFR4选择性抑制作用。然而，BLU9931最终因物化参数不合理、水溶性差等成药性缺陷未能进入临床研究阶段(HAGEL M,MIDUTURU C,SHEETS M,etal.First selective small molecule inhibitor of FGFR4 for the treatment ofhepatocellular carcinomas with an activated FGFR4 signaling pathway[J].CancerDiscov,2015,5,424-437.)。化学结构经修饰后的BLU554相对于BLU9931 具有更好的溶解性，目前已经作为肝癌治疗药物进入临床I期研究阶段(Lin X,Yosaatmadja Y,KalyukinaM,et al.Rotational freedom,steric hindrance, and protein dynamics explainBLU554 selectivity for the hinge cysteine of FGFR4[J].ACS Med ChemLett,2019,10(8):1180-1186.)。
FGFR4抑制剂虽然发展迅速，除了大部分抑制剂的抑制能力和选择性不够高以外，现有的几个较好的抑制剂往往因药代缺陷、代谢或“脱靶效应”等问题，最终只有极少数能进入临床研究。此外，继发性耐药是限制 FGFR4抑制剂临床应用的另一重要原因(GALLOLH,NELSON KN, MEYER AN,et al.Functions of fibroblast growth factor receptorsin cancer defined by novel translocations and mutations[J].Cytokine GrowthFactor Rev,2015,26(4):425-449.)。第一代FGFR4抑制剂或一些多靶点抑制剂(如索拉非尼等)，在经过9～12个月的临床用药后通常会发生明显的继发性耐药(如V550L残基错位突变)，极大限制了肿瘤患者生存时间的延长(GAO L,WANG X,TANG Y,et al.FGF19/FGFR4signaling contributes to the resistance of hepatocellular carcinoma tosorafenib[J].J ExpClin Cancer Res,2017,36(1):8.)。但截至目前，仍未见可用于逆转FGFR4V550L耐药的小分子抑制剂的文献报道。
发明内容
本发明提供了一种嘧啶类FGFR4V550L抑制剂及其制备和应用，该嘧啶类FGFR4V550L抑制剂可以作为一种有潜力的抗癌药。
本发明的技术方案如下：
一种嘧啶类FGFR4V550L抑制剂，为化合物2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物，结构如式(I)所示：
Figure BDA0002210147660000021
式(I)中，Ar为取代或者未取代的芳基；
R为CF3、-COOC2H5、H或NO2；R优选为CF3；
所述的芳基上的取代基为烷基、烷氧基、卤素或4-甲基哌嗪-1-基。
作为优选，所述的嘧啶类FGFR4V550L抑制剂为下式所示的化合物：
Figure BDA0002210147660000031
体外激酶抑制活性测试结果表明，该化合物对FGFR4V550L激酶有较强的抑制活性，其IC50值为45.8nM，高于其他类似的化合物
本发明还提供了一种所述的2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)在N,N-二甲基甲酰胺和碱的作用下，2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶与6-氨基吲唑进行反应，得到中间体；
(2)在甲醇和酸的作用下，步骤(1)得到的中间体与芳胺进行反应，得到所述的2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物。
作为优选，步骤(1)中，所述的碱为N,N-二异丙基乙胺。
作为优选，步骤(2)中，所述的酸为三氟乙酸。
作为优选，步骤(2)中，所述的芳胺为4-(4-甲基哌嗪)苯胺。
本发明还提供了一种所述的2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物的制备方法，所述的药物用于治疗或预防肿瘤。
作为优选，所述的药物用于选择性抑制FGFR4。
作为优选，所述的药物用于抑制肝癌细胞。
本发明所合成的2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物为新化合物，同时，体外抗肿瘤激酶抑制评价结果表明，该化合物对FGFR4V550L激酶具有最强的抑制活性，相对于先导化合物D3抑制活性提高30％左右。
具体实施方式
实施例1
化合物的合成
熔点采用X-4显微熔点仪测定(温度未经校正)；质谱采用Agilent 1100 系列单四级杆液质联用仪测定。1H-NMR、13C-NMR采用BrukerAVANCE III 500核磁共振仪测定(DMSO-d6为溶剂，TMS为内标)；薄层色谱用GF254硅胶板和柱色谱用硅胶粉(200～300目)分别购于阿拉丁试剂公司(aladdin，上海晶纯生化科技股份有限公司)和国药集团化学试剂有限公司；其他所用试剂和溶剂均为市售分析纯商品，根据需要经无水干燥处理后使用。
合成路线如下：
Figure BDA0002210147660000041
1.1中间体3a～3j合成通法(以3a为例)
将333.94mg(2.0mmol)2,4-二氯-5-氟嘧啶和516.96mg(4.0mmol) N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)溶解于5mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺(DMF) 中。冰浴搅拌条件下，缓缓加入溶于2mL DMF中的6-氨基吲唑(266.3mg， 2mmol)。1小时后，将反应液缓慢升温至室温，并用TLC监测反应。反应结束后向反应液中加入大量冷超纯水，析出沉淀后。抽滤，乙醇洗涤，滤饼烘干后得到淡黄色固体(3a)55.8mg，收率70.2％。3b～3j收率 10％～95.1％。
1.2 4-(4-甲基哌嗪)硝基苯(6)的合成
将1.0g(7.1mmol)对氟硝基苯(4)和1.42g(14.17mmol)N-甲基哌嗪(5)共同溶解于10mL干燥的二甲基亚砜(DMSO)中，再向混合溶液中加入1.96g(14.17mmol)碳酸钾。常温搅拌反应5h后，向反应液中加入冰水，析出沉淀后，抽滤，滤饼烘干后得到黄色产物(6)1.18g，收率75.25％。
1.3 4-(4-甲基哌嗪)苯胺(7)的合成
将1.0g 4-(4-甲基哌嗪)硝基苯(6)溶解于10mL甲醇中，搅拌下缓慢加入催化量的10％Pd/C(质量分数)并通入氢气，常温反应5h。反应液抽滤并用甲醇洗涤滤饼。滤液减压旋干除去甲醇，残渣经硅胶柱色谱分离后，得灰白色固体4-(4-甲基哌嗪)苯胺(7)0.72g，收率83.7％。
目标化合物8a～8j合成通法(以8a为例)
将263.66mg(1.0mmol)中间体3a和191.27mg(1.0mmol)4-(4-甲基哌嗪)苯胺(7)溶于5mL甲醇中，搅拌条件下缓慢滴入0.20mL三氟乙酸(TFA)，反应液在80℃下加热回流2h。反应结束后，冷却到室温，反应液依次用饱和碳酸氢钠溶液调pH至中性，乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩滤液，硅胶柱色谱分离后，得棕黄色目标产物8a112.4 mg，收率95.1％。合成的9个目标化合物的收率、理化性质及波谱数据详见表1。
表1
Figure BDA0002210147660000051
Figure BDA0002210147660000061
实施例2
实施例2对FGFR4V550L蛋白激酶的抑制活性测试
采用Caliper EZ Reader药物筛选平台测试目标化合物8a～8j对 FGFR4V550L蛋白激酶的抑制活性。实验步骤：配置1.25x激酶反应缓冲液 (62.5mmol/L HEPES，pH 7.5；0.001875％Brij-35；12.5mmol/LMgCl2； 2.5mM DTT)和激酶反应终止液(100mmol/LHEPES，pH 7.5；0.015％ Brij-35；0.2％Coating Reagent#3)；在5μl的5x浓度的化合物溶液中(用 DMSO溶解，用水稀释10倍)加入10μl的2.5x的FGFR4V550L激酶溶液 (在1.25x激酶反应缓冲液中加激酶)，室温孵育10min后再加入10μl 的2.5x底物肽溶液(在1.25x激酶反应缓冲液中加FAM标记肽和ATP)，在28℃下反应特定的时间后加入25μl激酶反应终止液。在Caliper上测试收集数据，对激酶活性的抑制率＝(max-conversion)/(max-min)*100。“max”为未加化合物的DMSO对照，“min”为低对照。测定IC50时样品设5个稀释度各2个复孔，3次重复，实验结果见表2。
表2
Figure BDA0002210147660000062
其中，化合物D3的结构如下式：
Figure BDA0002210147660000071
实验结果表明，大部分目标化合物对FGFR4V550L激酶抑制活性较差，特别是优化后嘧啶或吡啶母核上具有较大体积取代基的化合物，如酯基 (8a、8i)、甲硫基(8h)和噻吩(8j)取代的化合物，对FGFR4V550L蛋白激酶几乎无抑制活性。此外，4,6-二取代氨基嘧啶系列化合物8f-8h基本无抑制活性，而2,4-二取代氨基嘧啶系列化合物8a-8e中，6-位有取代基的化合物(8e)和5-位有较大体积的取代基不利于抑制活性的提高，而具有三氟甲基(8d)可以极大提高化合物对FGFR4V550L的抑制剂，对FGFR4V550L抑制的IC50值为45.8nM，活性最高的化合物8d抑制活性比先导化合物 D3提高了近5倍。

Claims (4)

1.一种嘧啶类FGFR4V550L抑制剂，其特征在于，其特征在于，为下式所示的化合物：
Figure FDA0002530619070000011
2.一种如权利要求1所述的嘧啶类FGFR4V550L抑制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在N,N-二甲基甲酰胺和碱的作用下，2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶与6-氨基吲唑进行反应，得到中间体；
(2)在甲醇和酸的作用下，步骤(1)得到的中间体与芳胺进行反应，得到所述的2-N-芳基-4-N-芳基-5-三氟甲基嘧啶类化合物；
步骤(1)中，所述的碱为N,N-二异丙基乙胺；
步骤(2)中，所述的酸为三氟乙酸；
步骤(2)中，所述的芳胺为4-(4-甲基哌嗪)苯胺。
3.一种如权利要求1所述的嘧啶类FGFR4V550L抑制剂在药物制备中的应用，其特征在于，所述的药物用于治疗或预防肿瘤。
4.根据权利要求3所述的嘧啶类FGFR4V550L抑制剂在药物制备中的应用，其特征在于，所述的药物用于抑制肝癌细胞。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CA2400447C (en) * 2000-02-17 2008-04-22 Amgen Inc. Kinase inhibitors
WO2003030909A1 (en) * 2001-09-25 2003-04-17 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2- and 4-aminopyrimidines n-substtituded by a bicyclic ring for use as kinase inhibitors in the treatment of cancer
US20070105839A1 (en) * 2003-09-18 2007-05-10 Patricia Imbach 2, 4-Di (phenylamino) pyrimidines useful in the treatment of proliferative disorders
CN106831730B (zh) * 2017-01-11 2019-11-26 温州医科大学 一种取代的二氨基嘧啶类化合物及其在制备抗恶性肿瘤药物中的用途

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