CN110373358B - 玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途 - Google Patents
玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110373358B CN110373358B CN201910707928.6A CN201910707928A CN110373358B CN 110373358 B CN110373358 B CN 110373358B CN 201910707928 A CN201910707928 A CN 201910707928A CN 110373358 B CN110373358 B CN 110373358B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- strain
- streptomyces
- rice
- bacterial
- fermentation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000958215 Streptomyces filamentosus Species 0.000 title claims description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 48
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 43
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 43
- 241000187438 Streptomyces fradiae Species 0.000 claims abstract description 15
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 13
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims abstract 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 abstract description 33
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 7
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 abstract description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 51
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 51
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 41
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 20
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 18
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 18
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 10
- 241001272684 Xanthomonas campestris pv. oryzae Species 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 10
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 9
- 244000000005 bacterial plant pathogen Species 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 244000000004 fungal plant pathogen Species 0.000 description 9
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 9
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 8
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 8
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 8
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 7
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 6
- 241000427940 Fusarium solani Species 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 5
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 5
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 241000227653 Lycopersicon Species 0.000 description 4
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000010227 cup method (microbiological evaluation) Methods 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241000213004 Alternaria solani Species 0.000 description 3
- 241000221778 Fusarium fujikuroi Species 0.000 description 3
- 241000223195 Fusarium graminearum Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 3
- 241000589636 Xanthomonas campestris Species 0.000 description 3
- 241000626572 Xanthomonas oryzae pv. oryzicola Species 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 3
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 2
- 241000198596 Alternaria tomatophila Species 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000123650 Botrytis cinerea Species 0.000 description 2
- 241001529387 Colletotrichum gloeosporioides Species 0.000 description 2
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 2
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 2
- 241000223208 Curvularia Species 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 2
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 2
- 229930195210 Ophiopogon Natural products 0.000 description 2
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 2
- 108090001066 Racemases and epimerases Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- RSNWORHVUOZYLT-UHFFFAOYSA-N 5-[[(2-sulfanylidene-3h-1,3,4-thiadiazol-5-yl)amino]methylamino]-3h-1,3,4-thiadiazole-2-thione Chemical compound S1C(=S)NN=C1NCNC1=NNC(=S)S1 RSNWORHVUOZYLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 108700016167 Glutamate racemases Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001448424 Ophiopogon Species 0.000 description 1
- 241000659282 Ophiopogon bodinieri Species 0.000 description 1
- 244000248557 Ophiopogon japonicus Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000589623 Pseudomonas syringae pv. syringae Species 0.000 description 1
- 102000004879 Racemases and epimerases Human genes 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 241000995615 Streptomyces luteus Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001517731 Xanthomonas citri pv. glycines Species 0.000 description 1
- KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O Chemical compound [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L 0.000 description 1
- 238000001720 action spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003570 air Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003640 drug residue Substances 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 229910052564 epsomite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 230000028644 hyphal growth Effects 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003895 organic fertilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 229940063650 terramycin Drugs 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 239000001052 yellow pigment Substances 0.000 description 1
- 229930195727 α-lactose Natural products 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/28—Streptomyces
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于生物技术微生物领域,具体涉及一株拮抗水稻白叶枯病菌玫瑰轮丝链霉菌(Streptomyces roseoverticillatus)Sr‑63菌株及其在植物病害防冶中的应用。本发明公开了一种玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr‑63菌株,保藏编号为:CCTCC NO:M 2019261。本发明还同时公开了上述玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr‑63菌株的用途:用于防治水稻白叶枯病。
Description
技术领域
本发明属于生物技术微生物领域,具体涉及一株拮抗水稻白叶枯病菌玫瑰轮丝链霉菌(Streptomyces roseoverticillatus)Sr-63菌株及其在植物病害防冶中的应用。
背景技术
水稻白叶枯病在我国各稻区均有发生,为水稻主要病害。由水稻黄单胞菌致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起[1]。菌体短杆状,大小1.0~2.7×0.5~1.0μm,单生,单鞭毛,极生或亚极生,长约8.7μm,直径30nm,革兰氏染色阴性,无芽孢和荚膜,菌体外由粘质的胞外多糖包围。在人工培养基上菌落蜜黄色,产生非水溶性的黄色素,好气性,呼吸型代谢。病菌最适生长温度为25℃~30℃,适宜生长为pH 6.5~7.0。
目前,水稻白叶枯病主要是采用化学农药叶枯唑进行防冶,由于化学农药存在药物残留、环境污染、农产品质量安全等问题;而微生物农药具有安全、环境友好等特点,符合当下绿色环保的理念,故寻求具有拮抗水稻白叶枯病菌的微生物菌株,开发新型、高效的微生物农药具有较好的意义。
放线菌是一类极其重要的微生物资源。放线菌与人类的生产和生活关系极为密切,广泛应用的抗生素约70%是由各种放线菌所产生。
放线菌是具有丝状分枝细胞的***,因菌落呈放射状而得名;在自然界分布广泛,主要以孢子或菌丝状态存在于土壤、空气和水中,尤其是有机物丰富、呈中性或微碱性的土壤中数量最多。放线菌喜欢生活在有机质丰富的微碱性土壤中,泥土所特有的“泥腥味”就是由放线菌的代谢产物所致。放线菌与人类生活息息相关。目前常用的抗生素药物如链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素等都是放线菌产生的;至今从微生物中发现的几千种抗生素,其中2/3是由放线菌产生的,在医药工业上有重要意义。
玫瑰轮丝链霉菌(Streptomyces roseoverticillatus)目前已知的用途是:可用于生产冶疗耐酸菌如结核分枝杆菌的抗生素。
轮丝链霉菌目前已知的用途一般是:可用于拮抗多种植物病原真菌如胶孢炭疽菌、灰葡萄孢菌、尖孢镰刀菌、小麦赤霉菌和玉米弯孢菌,生产谷氨酸消旋酶等。
例如:
申请号:85102956的《抗生素DO-248-A和DO-248-B的制备过程》告知:培养玫瑰轮丝链霉菌属,可获得抗菌素DO-248-A或DO-248-B。该抗菌素对耐酸菌(包括核杆菌)具有抗菌活性。
2019100215449的《一种产谷氨酸消旋酶的重组菌及其构建方法和应用》告知:重组菌包含藤黄轮丝链霉菌HY61的谷氨酸消旋酶基因MurI,利用重组菌发酵的谷氨酸消旋酶催化L-谷氨酸消旋生产DL-谷氨酸
2018100327172的《一种藤黄轮丝链霉菌及其生物防治制剂和应用》告知:藤黄轮丝链霉菌菌株HY61具有产孢速度快、作用谱广防治多种植物病害、遗传稳定性强,与环境兼容性好、防病持效期长等优点。植物病害包括胶孢炭疽菌、灰葡萄孢菌、尖孢镰刀菌、小麦赤霉菌和玉米弯孢菌。
2018115899615的《一种微生物发酵法制备咔唑霉素B的方法》藤黄轮丝链霉菌菌株HY61种微生物发酵法制备咔唑霉素B。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途。
为了解决上述技术问题,本发明提供一种玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株,为玫瑰轮丝链霉菌Sr-63 Streptromycesroseoverticillatus Sr-63,保藏编号为:CCTCC NO:M 2019261。
本发明还同时提供了上述玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株的用途:用于防治水稻白叶枯病。
本发明的玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株的保藏信息如下:保藏名称:玫瑰轮丝链霉菌Sr-63Streptromyces roseoverticillatus Sr-63,保藏单位:中国典型培养物保藏中心,保藏地址:中国武汉武汉大学,保藏编号:CCTCC NO:M 2019261,保藏时间2019年4月15日。
本发明针对防治水稻白叶枯病的化学防治和农业防治日益暴露出来的问题,利用微生物及其次级代谢产物进行水稻白叶枯病的生物防治,从而提供1株对白叶枯病具有高拮抗作用的玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株。
本发明所涉及的链霉菌Sr-63菌株筛选自沿阶草(Ophiopogon bodinieri)根际土壤。依据形态特征、16S rRNA基因序列,鉴定为玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)。
玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株可以用来防治水稻白叶枯病;本发明所筛选的玫瑰轮丝链霉菌(Streptomyces roseoverticillatus)Sr-63菌株发酵滤液对水稻白叶枯病菌有显著抑制作用。在发酵培养基初始pH为6.5~7.5,培养温度为28℃条件下,液体发酵培养5d后,发酵滤液对水稻白叶枯病菌的抑菌圈直径可达45mm~55mm(图5)。
抗菌谱试验结果表明,链霉菌Sr-63菌株发酵滤液对4种代表性植物病原真菌:杨树枯萎病菌(Fusarium solani)、小麦赤霉病菌(Gibberella fujikuroi)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.momordicae)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)的菌丝生长抑制率分别为12.62%、11.02%、9.44%和7.43%;对4种代表性植物病原细菌:水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)、大豆细菌性斑疹病菌(Xanthomonascampestris pv.glycines)、番茄细菌性叶斑病菌(Xanthomonas campestrispv.vesicatoria)、大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)等也有一定的抑制作用。
链霉菌Sr-63菌株发酵滤液对水稻白叶枯病有显著防冶效果。在发酵培养基初始pH为6.5~7.5,培养温度为28℃条件下,液体发酵培养7d后,发酵滤液对水稻白叶枯病的防效可达80%~95%。链霉菌Sr-63菌株可为微生物源农药开发提供优良的菌株,在水稻白叶枯病等生物防冶上有很好的应用前景。而现有的玫瑰轮丝链霉菌,例如BNCC152383玫瑰轮丝链霉菌、玫瑰轮丝链霉菌S.roseoverticillatus AB 184715的发酵滤液却无法体现出对水稻白叶枯病的防效效果。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1是5株代表性放线菌纯菌株的菌落(高氏1号培养基,5d)示意图;
从左至右依次为Sr-4;Sr-15;Sr-32;Sr-38;Sr-63。
图2是链霉菌Sr-63菌株在高氏1号上培养5d的菌落(A)、基内菌丝(B)和孢子丝(C)
图3是链霉菌Sr-63菌株16S rRNA基因序列(1461bp);
图4是基于16S rRNA基因序列建立的链霉菌S-63菌株***发育树;
图5是链霉菌S-63菌株发酵滤液对白叶枯病原菌的抑制圈;
注:A为对照,加无菌水;B为S-63菌株发酵滤液;
图6是链霉菌S-63菌株发酵滤液对水稻白叶枯的防冶效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1、玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)菌株的分离、筛选和鉴定
1菌株
(1)放线菌菌株:来自不同生境的土壤(例如:水稻田、草坪、番茄、土豆、沿阶草等)中分离、纯化、筛选和鉴定,保藏鉴定的放线菌菌株。
(2)水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)P6小种。
2培养基
(1)高氏1号固体培养基:可溶性淀粉20g、KNO3 1g、K2HPO4 0.5g、MgSO4·7H2O0.5g、NaCl 0.5g、FeSO4·7H2O 0.01g、琼脂20g,水1000mL,pH 7.2~7.4。用于放线菌菌株的分离纯化和鉴定。
(2)高氏1号固体培养液:配方不加琼脂,其余同(1);用于放线菌菌株的液体发酵培养。
(3)水稻白叶枯病菌固体培养基(Xoo固体培养基):马铃薯300g、蔗糖15g、Ca(NO3)20.5g、NaH2PO4·12H2O 2.0g、胰蛋白胨5.0g、琼脂20g、水1000mL、pH 6.5。用于水稻白叶枯病菌的固体培养。
(4)水稻白叶枯病菌培养液(Xoo培养液):配方不加琼脂,其余同(3);用于白叶枯病原菌P6小种发酵培养。
3实验方法
3.1放线菌菌株的分离纯化和保藏
取1g自然风干土样(含水率≤3%)于99mL无菌水中,120r/min摇床上振荡30min。上清液进行梯度稀释(10-2~10-5),选择合适的浓度(10-3)取100μL均匀涂布于高氏1号培养基上,28℃恒温箱培养48h,直到出现菌落。挑取具有典型放线菌菌落特征的单菌落转接到另一高氏1号培养基上,经3次划线纯化,得纯菌株;将菌株编号,置于4℃冰箱中保存,备用。
3.2拮抗水稻白叶枯病的放线菌菌株的筛选
3.2.1共培养法初筛
将白叶枯病菌P6小种接种于Xoo培养液中,摇床活化培养(180r/min、28℃)。当菌密度达到OD600为0.6时,取100μL菌液均匀涂布于Xoo固体培养基上,将已活化的放线菌菌株菌饼(直径4mm)接种于Xoo固体培养基中间,28℃培养48h,观察抑菌圈。根据抑菌圈有无和大小初步筛选有拮抗作用的放线菌菌株,并将其用25%甘油保藏。
3.2.2牛津杯法复筛
(1)放线菌菌株的发酵培养:将有拮抗作用的放线菌菌株接种至高氏1号培养基平板中,于28℃培养箱中培养3d,用4mm打孔器取1菌饼接种到装有100mL高氏1号培养液的250mL锥形瓶中摇床振荡培养(160r/min、28℃)5d后,将发酵液置于50mL离心管中12000r/min离心10min,上清液用0.22μm有机滤膜过滤,除去残余孢子,得到发酵滤液。
(2)水稻白叶枯病菌P6小种的培养:将P6小种接种于Xoo培养液中,摇床活化培养(180r/min、28℃),当菌密度达到OD600为0.6时,取100μL菌液均匀涂布于Xoo固体培养基上。取200μL放线菌菌株的发酵滤液,用牛津杯法测定各放线菌菌株发酵液对P6小种的抑制作用。根据抑菌圈大小选择出拮抗作用较强的放线菌菌株。
3.3拮抗水稻白叶枯病菌放线菌目标菌株的鉴定
用镊子挑取少量放线菌目标菌株菌丝,转接于高氏1号培养基平板中,活化培养3d;取平皿中1菌饼(直径4mm)接种于新的高氏1号培养基平板上,28℃培养5d,显微镜观察目标菌株的基内菌丝、气生菌丝、孢子丝等的形态特征,并拍照。
提取目标菌株的基因组DNA,扩增16S rRNA基因,送上海生物工程公司测序。将测序得到的16S rRNA基因序列提交至GenBank并利用BLAST比对后进行分析,确定所属的放线菌种类。
4实验结果
4.1放线菌纯菌株的获得
通过分离纯化从不同生境土壤样品中分离纯化共获65株放线菌纯菌株,其中5株代表性放线菌纯菌株在高氏一号培养基培养5d的菌落如图1所示。
4.2拮抗水稻白叶枯病菌放线菌菌株的筛选
利用共培养法和牛津杯法对65株放线菌纯菌株进行水稻白叶枯病菌的抑制效果的初筛和复筛,结果不同放线菌菌株对白叶枯病菌抑制作用存在较大差异。经筛选获1株拮抗作用较强的放线菌菌株,编号为Sr-63菌株,发酵液抑菌圈直径达50mm,Sr-63菌株分离于沿阶草(Ophiopogon bodinieri)根际土壤。
4.3放线菌Sr-63菌株的鉴定结果
Sr-63菌株形态特征:高氏一号上28℃培养5d,菌落小、表面呈粉红色丝绒状;显微镜下观察基内菌丝和气生菌丝分枝、纤细,成熟的气生菌丝形成多孢子链,孢子丝呈开环状(图2)。生理生化试验结果表明:革兰氏染色阳性;利用葡萄糖,水解明胶和淀粉,好氧。葡萄糖、棉子糖、鼠李糖、甘露糖、甘露醇和α-乳糖等生可用为碳源,较好的氮源为蛋白胨和KNO3,适宜的NaCl浓度为0.5~1%、pH为6.5~7.5,培养温度为28℃。
16S rRNA基因序列分析:结果表明,其长度为1461bp(图3),与玫瑰轮丝链霉菌(Streptomyces roseoverticillatus)的进化距离最近(图4),相似性达99%。
根据Sr-63菌株的形态特征,结合链霉菌属(Streptomyces)分种检索表,将Sr-63菌株鉴定为玫瑰轮丝链霉菌(Streptomyces roseoverticillatus)。
将Sr-63菌株进行了保藏,保藏信息如下:保藏名称:玫瑰轮丝链霉菌Sr-63Streptromyces roseoverticillatus Sr-63,保藏单位:中国典型培养物保藏中心,保藏地址:中国武汉武汉大学,保藏编号:CCTCC NO:M 2019261,保藏时间2019年4月15日。
实施例2、玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株发酵液抗菌谱测定
1菌株
(1)玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株。
(2)4种代表性植物病原真菌:杨树枯萎病菌(Fusarium solani)、小麦赤霉病菌(Gibberella fujikuroi)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.momordicae)、番茄早疫病菌(Alternaria solani),用作Sr-63菌株发酵液对植物病原真菌抗菌谱测试。
(3)4种代表性植物病原细菌:水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzicola)、大豆细菌性斑疹病菌(Xanthomonas campestris pv.glycines)、番茄细菌性叶斑病菌(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria)、大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas suringae pv.glycinea),用作Sr-63菌株发酵液对植物病原细菌抗菌谱测试。
2培养基
(1)PDA培养基:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉20g、水1L、pH 6.0~6.5。用于4种抗菌谱测定植物病原真菌的培养。
(2)牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、加水至1000mL,pH调至7.5(牛肉膏蛋白胨琼脂培养基加琼脂粉18g)。用于4种抗菌谱测定植物病原细菌的培养。
(3)高氏1号培养基,用于链霉菌Sr-63菌株的发酵种子培养。
(4)高氏1号培养液,用于链霉菌Sr-63菌株的发酵培养。
3实验方法
3.1植物病原真菌的活化与培养
将保藏于4℃的4种病原真菌分别接种于PDA培养基中,于28℃活化培养2d。然后转接于新的PDA培养基上于28℃培养4d,用于真菌抗菌谱测定。
3.2植物病原细菌的活化与培养
将保藏于4℃的4种病原细菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,于28℃活化培养2d。然后转接于新的牛肉膏蛋白胨培养基上于28℃培养2d,用于细菌抗菌谱测定。
3.3链霉菌Sr-63菌株抗菌谱的测定
(1)链霉菌Sr-63菌株发酵滤液的制备
将Sr-63菌株接种至高氏1号培养基平板中,于28℃培养箱中培养4d,用4mm打孔器取1菌饼接种到装有40mL高氏1号培养液的250mL锥形瓶中摇床振荡培养(160r/min、28℃)5d后,将发酵液置于50mL离心管中12000r/min离心10min,上清液用0.22μm有机滤膜过滤,除去残余孢子,得到发酵滤液,备用。
(2)抗植物病原真菌谱的测定
将发酵滤液与处于熔化状态50℃的PDA固体培养基以1:9体积比例混合均匀,倒入培养皿中,制成含发酵滤液的平板。用打孔器移取带有待测4种植物病原真菌、直径为6mm的菌饼置于上述平板中央。28℃恒温培养72h。用十字交叉法测量4种植物病原真菌的菌落生长直径,设置3组平行重复,取平均值。按照下列抑制率计算公式计算菌丝生长抑制率。
抑制率%=(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-6)×100
(3)抗植物病原细菌谱的测定
将4种植物病原细菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养液中,摇床活化培养(180r/min、28℃),当菌密度达到OD600为0.6时,取100μL菌液涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基上。取200μL Sr-63菌株的发酵滤液,用牛津杯法测定Sr-63发酵液对4种植物病原细菌的抑制作用。
4实验结果
4.1链霉菌Sr-63菌株发酵液对4种植物病原真菌的抑制作用
测定结果表明:Sr-63菌株发酵液对4种植物病原真菌均一定的抑制作用。对杨树枯萎病菌(Fusarium solani)、小麦赤霉病菌(Gibberella fujikuroi)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.momordicae)和番茄早疫病菌(Alternaria solani)的菌丝生长抑制率分别为12.62%、11.02%、9.44%和7.43%(表1)。
表1、链霉菌Sr-63菌株发酵滤液对4种植物病原真菌的抑制效果
注:菌丝生长抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-6)×100
4.2链霉菌Sr-63菌株发酵液对4种植物病原真菌的抑制作用
测定结果表明:Sr-63菌株发酵液对4种代表性植物病原细菌也有一定的抑制作用,其中对水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)抑制效果相对较好(表2),抑制率为28%左右。
表2、链霉菌Sr-63菌株发酵滤液对4种植物病原细菌的抑制效果
实施例3、玫瑰轮丝链霉菌(S.roseoverticillatus)Sr-63菌株发酵液对水稻白叶枯病的防效研究
1病菌和水稻品系
病菌:水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)P6小种。
水稻品系:选用对白叶枯病菌生理小种P6感病的中花11水稻品系。
2实验方法
2.1链霉菌Sr-63菌株发酵滤液的制备:方法同实施例2。
2.2链霉菌Sr-63菌株发酵滤液对水稻白叶枯病的防效实验
参照文献[2,3]的方法,用Sr-63菌株发酵滤液处理中花11水稻品系叶片;参照文献[4,5]的方法接种P6小种和病情的统计。
(1)P6小种菌悬液的制备:用平板划线法接种P6小种于Xoo固体培养基上活化48h;用接种环刮取1环接种至Xoo培养液中,置于28℃、180r/min摇床培养48h。当菌液的OD值达到0.6时,备用。
(2)P6小种接种水稻叶片方法:待水稻长至分蘖期,用灭菌剪刀蘸取P6小种菌悬液,水平剪去水稻叶尖1.5cm[4,5]。
(3)对水稻白叶枯病的防效实验设计
实验设置P6小种菌悬液处理对照组(CK1)、蒸馏水空白对照组(CK2)、方法1处理组(处理1)和方法2处理组(处理2)、方法3处理组(处理3)。
①CK1:用灭菌剪刀蘸取蒸溜水后进行剪叶处理,并做好接种部位的保湿。
②CK2:用灭菌剪刀蘸取P6小种菌悬液后进行剪叶处理,并做好接种部位的保湿。
③处理1:先用喷壶喷洒Sr-63菌株的发酵滤液,按1mL/cm2发酵滤液量、每隔1h一次、共喷洒3次。12h后,按P6小种菌悬液处理对照组方法接种菌悬液,并做好接种部位的保湿。
④处理2:先剪叶接种P6小种菌悬液,6h之后再喷Sr-63菌株的发酵滤液;方法、发酵滤液用量、保湿等同处理1。
⑤处理3:先剪叶接种P6小种菌悬液,12h之后再喷Sr-63菌株的发酵滤液;方法、发酵滤液用量、保湿等同处理1。
待水稻叶片病斑的产生及发展趋于稳定后,记录并统计发病情况。并计算病斑抑制率。
病斑抑制率(%)=(CK2病斑长度-处理病斑长度)/CK2病斑长度×100
3不同处理方法对水稻白叶枯病的防效实验结果
不同处理方法水稻白叶枯病病斑长度测量结果见图6,蒸馏水空白对照组(CK1)无病斑;P6小种菌液处理对照组(CK2),病斑平均长度为118.5mm;处理1、2和3病斑平均长度分别为5.4mm、11.3mm和22.6mm。处理1、2和3对中花11水稻品系病斑抑制率分别达95.4%、90.5%和80.9%。
防效实验结果表明,Sr-63菌株的发酵滤液在水稻白叶枯病菌P6小种侵染中花11水稻叶片的过程中,有显著的防病效果。喷药越早,防病效果越好。
上文涉及的参考文献:
[1]Arshad H M I,Saleem K,Khan J A,et al.Pathogenic diversity ofXanthomonas oryzae pv.oryzae isolates collected form Punjab Province ofPakistan[J].European Journal of Plant Pathology,2017,147(3):639-651.(Arshad HM I,Saleem K,Khan J A,et al.从巴基斯坦旁遮普省收集的水稻黄单胞菌分离株的致病多样性[J].欧洲植物病理学杂志,2017,147(3):639-651);
[2]刘琴英,谢祥聪,齐育平,等.抗水稻白叶枯病菌植物内生真菌的筛选、鉴定[J].微生物学杂志,2013,33(4):4-8;
[3]田小卫,龙建友,白红进,等.一株放线菌次生代谢产物抗菌活性的初步研究植物保护[J],2004,30(2):51-54;
[4]赵显峰,翟文学,李平,等.不同Xa21转基因杂交稻组合的大田试验与分析[J].作物学报,2002,28(4):521-527;
[5]刘永锋,陆凡,陈志谊,等.江苏省水稻区试品种(系)对白叶枯病的抗性分析[J].植物保护,2001,5:3-6;
对比例、将在本发明过程中得到的其余玫瑰轮丝链霉菌,按照上述实施例3的处理1所述方式进行检测,所得结果与本发明Sr-63的对比,如下表3所述:
表3
菌株名称 | 来源 | 病斑长度(mm) |
Sr-63 | 本发明筛选而得 | 5.4 |
Sr-4 | 本发明筛选而得 | 40.8 |
Sr-38 | 本发明筛选而得 | 55.2 |
最后,还需要注意的是,以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然,本发明不限于以上实施例,还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形,均应认为是本发明的保护范围。
序列表
<110> 浙江师范大学
<120> 玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1461
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
ggctcaggac gaacgctggc ggcgtgctta acacatgcaa gtcgaacgat gaagcccttc 60
ggggtggatt agtggcgaac gggtgagtaa cacgtgggca atctgccctg cactctggga 120
caagccctgg aaacggggtc taataccgga tacgaccttc gagcgcatgc ttgaaggtgg 180
aaagctccgg cggtgcagga tgagcccgcg gcctatcagc ttgttggtgg ggtgatggcc 240
taccaaggcg acgacgggta gccggcctga gagggcgacc ggccacactg ggactgagac 300
acggcccaga ctcctacggg aggcagcagt ggggaatatt gcacaatggg cgaaagcctg 360
atgcagcgac gccgcgtgag ggatgacggc cttcgggttg taaacctctt tcagcaggga 420
agaagcgaaa gtgacggtac ctgcagaaga agcgccggct aactacgtgc cagcagccgc 480
ggtaatacgt agggcgcaag cgttgtccgg aattattggg cgtaaagagc tcgtaggcgg 540
cttgtcgcgt cggatgtgaa agcccggggc ttaaccccgg gtctgcattc gatacgggca 600
ggctagagtt cggtagggga gatcggaatt cctggtgtag cggtgaaatg cgcagatatc 660
aggaggaaca ccggtggcga aggcggatct ctgggccgat actgacgctg aggagcgaaa 720
gcgtggggag cgaacaggat tagataccct ggtagtccac gccgtaaacg ttgggaacta 780
ggtgtgggcg acattccacg tcgtccgtgc cgcagctaac gcattaagtt ccccgcctgg 840
ggagtacggc cgcaaggcta aaactcaaag gaattgacgg gggcccgcac aagcagcgga 900
gcatgtggct taattcgacg caacgcgaag aaccttacca aggcttgaca tacaccggaa 960
acggccagag atggtcgccc ccttgtggtc ggtgtacagg tggtgcatgg ctgtcgtcag 1020
ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg caacccttgt cctgtgttgc 1080
cagcatgccc ttcggggtga tggggactca caggagactg ccggggtcaa ctcggaggaa 1140
ggtggggacg acgtcaagtc atcatgcccc ttatgtcttg ggctgcacac gtgctacaat 1200
ggccggtaca atgagctgcg ataccgtgag gtggagcgaa tctcaaaaag ccggtctcag 1260
ttcggattgg ggtctgcaac tcgaccccat gaagttggag ttgctagtaa tcgcagatca 1320
gcattgctgc ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac gtcacgaaag 1380
tcggtaacac ccgaagccgg tggcccaacc cttgtggagg gagccgtcga aggtgggact 1440
ggcgattggg acgaagtcgt a 1461
Claims (2)
1.玫瑰轮丝链霉菌(Streptromyces roseoverticillatus)Sr-63菌株,其特征是:该菌株保藏编号为CCTCC NO:M 2019261。
2.如权利要求1所述的玫瑰轮丝链霉菌Sr-63菌株的用途,其特征是:用于防治水稻白叶枯病。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910707928.6A CN110373358B (zh) | 2019-08-01 | 2019-08-01 | 玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途 |
US16/937,322 US11457634B2 (en) | 2019-08-01 | 2020-07-23 | S. roseoverticillatus Sr-63 and its application |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910707928.6A CN110373358B (zh) | 2019-08-01 | 2019-08-01 | 玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN110373358A CN110373358A (zh) | 2019-10-25 |
CN110373358B true CN110373358B (zh) | 2021-07-13 |
Family
ID=68257648
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201910707928.6A Active CN110373358B (zh) | 2019-08-01 | 2019-08-01 | 玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11457634B2 (zh) |
CN (1) | CN110373358B (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112646757B (zh) * | 2021-01-25 | 2022-08-26 | 浙江师范大学 | 丁香链霉菌及其在植物病害防治中的应用 |
CN113234642B (zh) * | 2021-06-25 | 2022-12-27 | 浙江师范大学 | 硫藤黄链霉菌St-79及其用途 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN85102956A (zh) * | 1984-04-16 | 1987-01-21 | 盐野义制药株式会社 | 抗生素do-248-a和do-248-b的制备过程 |
CN1443843A (zh) * | 2002-03-08 | 2003-09-24 | 武汉东湖高新集团股份有限公司 | 玫瑰紫链霉菌玫瑰红变种及制备方法 |
CN102363753A (zh) * | 2011-03-07 | 2012-02-29 | 浙江师范大学 | 白蚁链霉菌(Streptomyces termitum)ACT-2菌株及其培养物和用途 |
CN102433281A (zh) * | 2011-12-16 | 2012-05-02 | 华南农业大学 | 卡特拉链霉菌nb20及其培养方法和应用 |
CN102618455A (zh) * | 2012-02-26 | 2012-08-01 | 三峡大学 | 一株弗氏链霉菌及其应用 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108192829B (zh) | 2018-01-13 | 2021-03-02 | 鲁东大学 | 一种藤黄轮丝链霉菌及其生物防治制剂和应用 |
CN109536543A (zh) | 2018-12-25 | 2019-03-29 | 鲁东大学 | 一种微生物发酵法制备咔唑霉素b的方法 |
CN109576200A (zh) | 2019-01-10 | 2019-04-05 | 鲁东大学 | 一种产谷氨酸消旋酶的重组菌及其构建方法和应用 |
-
2019
- 2019-08-01 CN CN201910707928.6A patent/CN110373358B/zh active Active
-
2020
- 2020-07-23 US US16/937,322 patent/US11457634B2/en active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN85102956A (zh) * | 1984-04-16 | 1987-01-21 | 盐野义制药株式会社 | 抗生素do-248-a和do-248-b的制备过程 |
CN1443843A (zh) * | 2002-03-08 | 2003-09-24 | 武汉东湖高新集团股份有限公司 | 玫瑰紫链霉菌玫瑰红变种及制备方法 |
CN102363753A (zh) * | 2011-03-07 | 2012-02-29 | 浙江师范大学 | 白蚁链霉菌(Streptomyces termitum)ACT-2菌株及其培养物和用途 |
CN102433281A (zh) * | 2011-12-16 | 2012-05-02 | 华南农业大学 | 卡特拉链霉菌nb20及其培养方法和应用 |
CN102618455A (zh) * | 2012-02-26 | 2012-08-01 | 三峡大学 | 一株弗氏链霉菌及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
"抗水稻白叶枯的菌株一白蚁链霉菌的筛选鉴定及发酵条件优化";宋迤明;《微生枷学杂志》;20110731;第3l卷(第4期);第52-57页 * |
"抗白叶枯病菌放线菌的筛选、鉴定和生物防治作用的初步研究";宋迤明;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》;20130315;第D046-101页尤其是正文第7页第2.2节、正文第18-19页第4节、正文第23-24页第3.1节、正文第38页第4节 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US11457634B2 (en) | 2022-10-04 |
CN110373358A (zh) | 2019-10-25 |
US20210030010A1 (en) | 2021-02-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108165498B (zh) | 拮抗水稻白叶枯病菌的灰黄青霉Pg-35菌株及其发酵滤液和在植物病害防冶中的应用 | |
CN112522145B (zh) | 抗氧化链霉菌及其在植物病害防冶中的应用 | |
CN112662585B (zh) | 一株萎缩芽孢杆菌dx-9及其应用 | |
CN110373358B (zh) | 玫瑰轮丝链霉菌Sr-63及其用途 | |
CN113789274A (zh) | 一株葡萄根际拮抗促生链霉菌f2及其应用 | |
CN113061551B (zh) | 一种生防链霉菌在防治植物病害病原菌中的应用 | |
CN113234642B (zh) | 硫藤黄链霉菌St-79及其用途 | |
CN111621435B (zh) | 一株粘细菌及其应用 | |
CN117683667A (zh) | 一株东湖假单胞菌及其在防治白菜细菌性软腐病中的应用 | |
CN114456973B (zh) | 一株烟草内生娄彻链霉菌及在烟草病害防控中的应用 | |
CN116376782A (zh) | 一种防治茶炭疽病的菌株及应用 | |
CN112646757B (zh) | 丁香链霉菌及其在植物病害防治中的应用 | |
CN115851553A (zh) | 一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 | |
CN114921365A (zh) | 一株娄彻氏链霉菌及其应用 | |
CN114032182A (zh) | 一株兼具拮抗大蒜根腐病病原菌和促生功能的真菌 | |
CN110684684A (zh) | 一株耐高温生防链霉菌及其应用 | |
CN115340961B (zh) | 拮抗水稻细菌性条斑病菌的沙阿霉素链霉菌及其应用 | |
CN110408559B (zh) | 一株玫瑰轮丝链霉菌及其应用 | |
CN115044512B (zh) | 一株捕食性原囊菌及其在植物病害生物防治中的应用 | |
CN113789288B (zh) | 一株链霉菌jxgz01及生物药剂、应用 | |
CN114149949B (zh) | 一株链霉菌jxja01及生物药剂、应用 | |
CN111748488B (zh) | 海洋放线菌hn60在制备抗真菌活性物质中的应用 | |
CN114703080B (zh) | 一株产褐灰色链霉菌及其应用 | |
CN117286075A (zh) | 一株昆虫来源的生防链霉菌itbb12006及其应用 | |
CN118374420A (zh) | 一种北里孢菌及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240411 Address after: No. 9 Tianchen Road, Lixia District, Jinan City, Shandong Province, 250000 Patentee after: Zhuofan (Jinan) Technology Innovation Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: 321004 No. 688 Yingbin Avenue, Wucheng District, Zhejiang, Jinhua Patentee before: ZHEJIANG NORMAL University Country or region before: China |