CN110313476B - 一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法及其使用的趋避剂 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法及其使用的趋避剂，属于昆虫趋避剂技术领域。该防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法是向柳树上施用反‑3‑己烯醇或反‑3‑己烯醇的溶液。本发明采用固相微萃取头从三蕊柳树叶片萃取得到反‑3‑己烯醇，该制剂释放周期长，配制简单，对柳蓝叶甲成虫有明显的趋避效果。本发明中的功效成分反‑3‑己烯醇存在于自然界部分植物中，对人畜无害、对环境友好，具有广阔的应用前景。

Description

一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法及其使用的趋避剂
技术领域
本发明属于昆虫趋避剂技术领域，具体涉及一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法及其使用的趋避剂。
背景技术
柳树是我国城乡和园林绿化中应用最为广泛的树种，柳蓝叶甲(Plagioderaversicolora) 是对柳属树种危害范围最广、危害程度最严重的一种食叶害虫。柳蓝叶甲属于鞘翅目 (Coleoptera)叶甲科(Chrysomelidae)金花虫属(Plagiodera)，取食柳树的叶片和嫩梢，大部分柳属树种都受其危害，包括长柱柳、杞柳和垂柳等。在我国南方省区，该虫害每年发生 8-9代，危害程度严重时可造成苗木死亡，对柳树的苗木培育和生产有很大危害。
目前，柳蓝叶甲的防治方法主要依赖杀虫剂和人工捕杀，包括树冠喷雾、树干环阻、冬季翻土和震落捕杀等方法。但是，通常应用的广谱性杀虫剂成本较高，针对性较低，甚至会造成柳蓝叶甲天敌减少而产生负面效果，并且长期使用容易使昆虫产生抗药性。柳属植物广泛应用于园林造景，该虫主要发生在公园和风景区等地，使用广谱性杀虫剂会破坏环境并对人类健康造成威胁。同时，人工捕杀效率低，难以应用在实际的生产实践中。因此，开发针对性强、环境友好型的专一性农药是生产上急需解决的一个问题。大量研究表明：利用害虫的天然引诱剂或趋避剂防治害虫，不仅防治效率高，而且绿色环保。因此，寻找柳蓝叶甲的信息化合物就是研制专一性农药的关键。
发明内容
发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，具有环保无污染，对树木不产生伤害的优点。本发明的另一个目的是提供一种防治柳树柳蓝叶甲成虫使用的趋避剂，具有针对性强、环境友好型的特点。
技术方案：为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：
一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，向柳树上施用反-3-己烯醇或反-3-己烯醇溶液。
所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，所述的反-3-己烯醇溶液为反-3-己烯醇的石蜡油溶液，浓度为0.001-1mol/L。
所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，所述的反-3-己烯醇溶液的浓度为0.1mol/L。
一种防治柳树柳蓝叶甲成虫使用的趋避剂，为反-3-己烯醇或反-3-己烯醇溶液。
所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫使用的趋避剂，所述的反-3-己烯醇溶液为反-3-己烯醇的石蜡油溶液，浓度为0.001-1mol/L。
所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫使用的趋避剂，所述的反-3-己烯醇溶液的浓度为0.1mol/L。
所述的防治柳蓝叶甲成虫使用的趋避剂，所述的反-3-己烯醇从三蕊柳叶片中萃取得到。
反-3-己烯醇的制备方法，采摘新鲜三蕊柳树叶片，置于萃取瓶中，萃取瓶顶部用保鲜膜封住；使用固相微萃取头进行吸附，萃取瓶用40-50℃恒温水浴，时间为30-40min；固相微萃取头用200-250℃处理3-5min进行解吸附处理，得到反-3-己烯醇。
所述的反-3-己烯醇的制备方法，固相微萃取头为65μm的聚二甲基硅烷(PDMS)/二乙烯苯(DVB)手动固相微萃取头。
有益效果：与现有的技术相比，本发明的优点包括：
(1)本发明柳蓝叶甲成虫趋避剂释放周期长，作为野外的昆虫诱捕陷阱寿命可达到2-4 周。配制简单，对柳蓝叶甲成虫有明显的趋避效果，并且为植物中的天然成分，对人畜安全，对环境无污染。
(2)本发明为柳蓝叶甲成虫人工防治提供了重要的技术支撑，应用前景广阔，具有很好的实际应用价值，能够产生较好的经济效益和社会效益。
附图说明
图1为柳树叶片萃取物的GC-MS分析图谱，其中图a为簸箕柳叶片萃取物检测结果图，图b为三蕊柳叶片萃取物检测结果图；
图2为不加取食叶片条件下，反-3-己烯醇的石蜡油溶液对柳蓝叶甲成虫的趋避效果图；
图3为加入取食叶片条件下，反-3-己烯醇的石蜡油溶液对柳蓝叶甲成虫的趋避效果图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
GC-MS测试：采用Trace ISQ-LT气质联用仪，GC分析条件为 DB-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)弹性石英毛细管柱，载气为高纯氦气，流速为1mL/min，不分流进样。进样口温度250℃，柱温升温程序：初始温度40℃，保持2min，以6℃/min升至250℃，保持5min。MS分析条件：EI离子源，电子能量70eV，离子源温度250℃，扫描范围45-450U。
实施例1
采摘新鲜三蕊柳树叶片和簸箕柳树叶片各5g，分别放置于50mL萃取瓶中进行萃取。具体操作过程为：瓶顶均用保鲜膜封住，使用固相微萃取头65μm PDMS/DVB手动固相微萃取头(Supelco)进行吸附，萃取瓶在40℃恒温水浴，时间为40min。固相微萃取头用250℃处理 3min进行解吸附处理，得到的物质分别进行GC-MS分析。分析结果如图1所示。由图1可知，差异物质的保留时间为10.17min。通过比对化合物数据库，该峰代表的化合物为反-3-己烯醇。
实施例2
不加取食叶片条件下，柳蓝叶甲成虫对趋避剂和对照选择性测定：
所用趋避剂反-3-己烯醇的石蜡油溶液的浓度包括0.001、0.01、0.1和1mol/L。
上述溶液的配制方法：首先配制1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液：在空的50mL离心管中加入5mL的反-3-己烯醇，定容至50mL，振荡混匀。然后用移液枪将配好的1mol/L的反 -3-己烯醇的石蜡油溶液分别取出1mL、0.1mL和0.01mL加入上述空离心管，定容至10mL，制成0.1、0.01和0.001mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液。
测定方法：
1、Y形嗅觉仪的长臂长10cm，两短臂长6cm，两臂夹角75°，直径1cm，在两短臂5cm处设有终点线。气流流量控制在0.8L/min。已经羽化4天以上达到性成熟的柳蓝叶甲人工养殖群体用于该测试。
2、在一个味源瓶内加入10mL的避趋剂，另一味源瓶以10mL石蜡油作对照，每次接从长臂管口接入一头甲虫，观察5min，看其是否能到达某个短臂上的终点线，如果到达，记录选择结果；如果没有到达，视为未选择。
3、每组测试使用100头成虫，每做10头甲虫，更换Y形管，换下的Y形管先用无水乙醇清洗，再用蒸馏水冲洗后放入烘箱烘干。以排除环境和柳蓝叶甲自身信息素对实验结果的影响。
4、整个测定在有唯一光源的暗室内进行，以保证选择两臂时，光照均匀。
结果如图2，横轴数字所示为柳蓝叶甲成虫各味源的选择数量(头)，每个测试成虫头数为 100，减去上图中每个测试所列虫头数，剩余个体为每个测试中未做出选择的虫头数。由图2 可以看出，0.001、0.01、0.1和1mol/L的反-3-己醇的石蜡油溶液均可趋避柳蓝叶甲成虫，其中，0.1mol/L和1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液趋避效果较好，但是，二者趋避效果无明显区别。因此，实际操作中，选用浓度较低的溶液。结果显示：0.1mol/L和1mol/L的反-3- 己烯醇的石蜡油溶液对柳蓝叶甲成虫均表现出显著的趋避效果。
实施例3
加入取食叶片条件下，柳蓝叶甲成虫对趋避剂和对照选择性测定
柳蓝叶甲对簸箕柳叶片取食严重，对比实施例1，本实施例中在趋避剂和对照组分别添加柳蓝叶甲喜食的簸箕柳叶片，进行选择性测定。
所用趋避剂浓度包括：0.001、0.01、0.1和1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液。
上述溶液的配制方法：首先配制1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液：在空的有50mL离心管中加入5mL的反-3-己烯醇，定容至50mL，振荡混匀。然后用移液枪将配好的1mol/L 的反-3-己烯醇的石蜡油溶液分别取出1mL、0.1mL和0.01mL加入上述空离心管，定容至 10mL，制成0.1mol/L、0.01mol/L和0.001mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液。
测定方法：
1.在两无盖的培养皿内放置湿润的滤纸，并加盖一层纱布，纱布上分别放入生长状态相似的簸箕柳叶片。
2.在其中一端的培养皿湿润的滤纸中加入上述浓度反-3-己烯醇的石蜡油溶液，并注意不要滴加到叶片上。然后放入10头柳蓝叶甲成虫，选择时间为15min，记录2个培养皿内的甲虫头数，测试反-3-己烯醇的趋避效果。测试完成后，更换10头新的柳蓝叶甲成虫，每组测试共做100头虫，具体结果如图3，减去图3中每个测试所列虫头数，剩余个体为每个测试中未做出选择的虫头数。
3.按上述方法制成1、0.1、0.01和0.001mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液并依次对柳蓝叶甲成虫进行测定。
4.上述实验通过在滤纸上涂抹石蜡油作为对照，其他处理方法相同。
由图3可以看出：0.01、0.1和1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液对柳蓝叶甲成虫趋避效果显著，趋避效果分别为66头(石蜡油+簸箕柳叶片对照组)：34头(0.01mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液+簸箕柳叶片处理组)、77头(石蜡油+簸箕柳叶片对照组)：23头(0.1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液+簸箕柳叶片处理组)和81头(石蜡油+簸箕柳叶片对照组)：19头 (1mol/L的反-3-己烯醇的石蜡油溶液+簸箕柳叶片处理组)。综合考虑效果和成本，优先选择 0.1mol/L的反-3-己烯醇石蜡油溶液作为对柳蓝叶甲成虫避趋剂的适用浓度。

Claims (4)

1.一种防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，其特征在于，向柳树上施用反-3-己烯醇或反-3-己烯醇溶液；所述反-3-己烯醇的制备方法：采摘新鲜三蕊柳树叶片，置于萃取瓶中，萃取瓶顶部用保鲜膜封住；使用固相微萃取头进行吸附，萃取瓶用40-50℃恒温水浴，时间为30-40min；固相微萃取头用200-250℃处理3-5min进行解吸附处理，得到反-3-己烯醇。
2.根据权利要求1所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，其特征在于，所述的反-3-己烯醇溶液为反-3-己烯醇的石蜡油溶液，浓度为0.001-1mol/L。
3.根据权利要求1或2所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，其特征在于，所述的反-3-己烯醇溶液的浓度为0.1mol/L。
4.根据权利要求1所述的防治柳树柳蓝叶甲成虫的方法，其特征在于，固相微萃取头为65μm PDMS/DVB手动固相微萃取头。
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