CN110305921A - 一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，秸秆通过浸泡、酸碱处理可提高秸秆中的木聚糖溶出量；纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶能够将处理液中的木聚糖、纤维素、半纤维素降解，提高低聚木糖的收率；通过采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜对酶解液进行分离过滤，大孔吸附树脂脱色，离子交换柱洗脱除盐，可有效提高低聚木糖的纯度，且产品均一性好、质量稳定。本发明制备工艺简单，反应条件温和，便于工业化生产。

Description

一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法

技术领域

本发明涉及低聚木糖领域，尤其是一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法。

背景技术

人体肠道及体表栖息着数以亿计的细菌，其种类多达400余种，重达两公斤，这当中有对人有害的，被人们称为有害菌，有对人有益的，被称为益生菌，也有介于二者之间的条件致病菌，即在一定条件下会导致人体生病的细菌，人体内的益生菌主要有乳酸菌、双歧杆菌等。

科学研究证实，益生菌在肠道的大量繁殖，可以治疗因大量使用抗生素而导致的伪膜性肠炎；治疗便秘和慢性腹泻；保护肝脏；防治高血压和动脉硬化以及抗衰老、降低血清胆固醇、预防癌症和抑制肿瘤生长的作用。

低聚木糖是聚合糖类中增殖双歧杆菌功能最强的品种之一，它的功效性是其他聚合糖类的近20倍，人体胃肠道内没有水解低聚木糖的酶，所以其可直接进入大肠内优先为双歧杆菌所利用，促进双歧杆菌增殖同时产生多种有机酸。降低肠道PH值，抑制有害菌生长，使益生菌在肠道大量增殖，达到上述的保健功效，这就是低聚木糖的保健奥秘所在。

目前低聚木糖常用的制备方法有酶解法、酸水解法与水热法。水热法是目前低聚木糖生产中最常用的一种方法。即将含有半纤维素的农业纤维废料在高温高压下水解，水解液进一步过滤、浓缩、纯化、结晶、烘干后得到低聚木糖产品。但该法需要耐温、耐压设备，耗能大，产物得率低。酸水解法是将含有半纤维素的农业纤维废料酸解，常用的酸有盐酸、硫酸、三氟乙酸等。酸解液进一步中和、过滤、浓缩、离心、结晶、烘干得到低聚木糖产品。但该方法工艺流程长，消耗水、电、汽、酸、碱等辅料较多，生产成本较高；且对设备、技术要求较高；反应后分离困难、对环境污染严重。酶解法即使用微生物产生的内切型木聚糖酶分解木聚糖，然后经分离得到低聚木糖。此法存在转化率低，后续的分离困难等问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，具有高的纯度，且产品均一性好、质量稳定。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，包括以下步骤：

1)将秸秆粉碎后加入水在50～80℃下浸泡处理3～4h，再加入酸或碱处理15～20h，得到处理液；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6～7，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在35～50℃下酶解处理12～15h，得到酶解液；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液中依次采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经大孔吸附树脂脱色，再经离子交换柱洗脱除盐，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

优选地，步骤1)中，所述酸为硫酸或盐酸，所述碱为氢氧化钠或氢氧化钾；所述过滤液中酸或碱的浓度为0.1～0.15mol/L。

优选地，所述纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为50～70U的纤维素酶，所述半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60～80U的半纤维素酶，所述木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为80～100U的木聚糖酶。

优选地，步骤4)具体为，将酶解液稀释10～15倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1000～1500Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；

向一级过滤液中加入去离子水后通入截留分子量为600～800Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；

向二级过滤液中加入去离子水后通入截留分子量为200～300Da的纳滤膜，分离得到过滤液。

优选地，步骤5)具体为经大孔吸附树脂在室温下以0.5～2.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经阳离子交换柱和阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为0.5～2.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液。

优选地，所述大孔吸附树脂的型号为D-101、D3520、DM301或DM130。

优选地，所述阳离子交换柱的型号为MAbPac SCX-10或HPD200B。

优选地，所述阴离子交换柱的型号为D301。

本发明提供的一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，秸秆通过浸泡、酸碱处理可提高秸秆中的木聚糖溶出量；纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶能够将处理液中的木聚糖、纤维素、半纤维素降解，提高低聚木糖的收率；通过采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜对酶解液进行分离过滤，大孔吸附树脂脱色，离子交换柱洗脱除盐，可有效提高低聚木糖的纯度，且产品均一性好、质量稳定。本发明制备工艺简单，反应条件温和，便于工业化生产。

具体实施方式

本发明提供的一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，包括以下步骤：

1)将秸秆粉碎后加入水在50～80℃下浸泡处理3～4h，再加入酸或碱处理15～20h，得到处理液；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6～7，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在35～50℃下酶解处理12～15h，得到酶解液；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液中依次采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经大孔吸附树脂脱色，再经离子交换柱洗脱除盐，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

本发明中，将秸秆粉碎后加入水在50～80℃下浸泡处理3～4h，再加入酸或碱处理15～20h，得到处理液；在本发明的实施例中，秸秆粉碎粒度为1～2cm。上述步骤中，碎粉后的秸秆在50～80℃的水中浸泡3～4h可提高秸秆的软化效果，利于低聚木糖的溶出，同时也利于后续酸碱对其水解。

需要说明的是，酸为硫酸或盐酸，碱为氢氧化钠或氢氧化钾；过滤液中酸或碱的浓度为0.1～0.15mol/L。

将得到的过滤液的pH值调节至6～7，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在35～50℃下酶解处理12～15h，得到酶解液；上述步骤中，采用纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶对过滤液进行酶解，可提高低聚木糖的收率和纯度。

在本发明的实施例中，纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为50～70U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60～80U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为80～100U的木聚糖酶。

将得到的酶解液在100℃下灭火15min；为了避免纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶影响后续步骤，需要对纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶进行灭活，提高低聚木糖的品质。

将灭活后的酶解液中依次采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜分离得到过滤液；上述步骤可有效分离提纯低聚木糖，提高低聚木糖的纯度。

在本发明的实施例中，将酶解液稀释10～15倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1000～1500Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水后通入截留分子量为600～800Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水后通入截留分子量为200～300Da的纳滤膜，分离得到过滤液。需要说明的是，为了提高分离效果，提高低聚木糖的纯度，在采用不同截留分子量的纳滤膜分离前，稀释液的体积相同，也就是说一级过滤液与加入的去离子水的总体积、二级过滤液与加入的去离子水的总体积等于稀释液的体积。

将得到的过滤液经大孔吸附树脂脱色，再经离子交换柱洗脱除盐，得到洗脱液；上述步骤能够提高低聚木糖的品质。在本发明的实施例中，过滤液经大孔吸附树脂在室温下以0.5～2.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经阳离子交换柱和阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为0.5～2.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液。

在本发明的实施例中，大孔吸附树脂的型号为D-101、D3520、DM301或DM130；阳离子交换柱的型号为MAbPac SCX-10或HPD200B；阴离子交换柱的型号为D301。

上述方案中，秸秆通过浸泡、酸碱处理可提高秸秆中的木聚糖溶出量；纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶能够将处理液中的木聚糖、纤维素、半纤维素降解，提高低聚木糖的收率；通过采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜对酶解液进行分离过滤，大孔吸附树脂脱色，离子交换柱洗脱除盐，可有效提高低聚木糖的纯度，且产品均一性好、质量稳定。本发明制备工艺简单，反应条件温和，便于工业化生产。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

1)将秸秆粉碎后加入水在50℃下浸泡处理3h，再加入酸或碱处理15h，得到处理液；酸为盐酸，过滤液中酸的浓度为0.1mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在35℃下酶解处理15h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为50U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为80U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释10～15倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1000Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为600Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为200Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为D-101的大孔吸附树脂在室温下以0.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为MAbPac SCX-10的阳离子交换柱和型号为D301阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为0.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

实施例2

1)将秸秆粉碎后加入水在80℃下浸泡处理4h，再加入酸或碱处理20h，得到处理液；碱为氢氧化钾；过滤液中碱的浓度为0.15mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至7，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在50℃下酶解处理15h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为70U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为80U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为100U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释15倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1500Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为800Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为300Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为DM301的大孔吸附树脂在室温下以2.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为HPD200B的阳离子交换柱和型号为D301的阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为2.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

实施例3

1)将秸秆粉碎后加入水在60℃下浸泡处理3.5h，再加入酸或碱处理18h，得到处理液；碱为氢氧化钠；过滤液中碱的浓度为0.12mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在40℃下酶解处理14h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为70U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为90U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释12倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1200Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为700Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为200Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为DM130的大孔吸附树脂在室温下以1.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为HPD200B的阳离子交换柱和型号为D301的阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

对比例1

1)将秸秆粉碎后加入水在60℃下浸泡处理3.5h，再加入酸或碱处理18h，得到处理液；碱为氢氧化钠；过滤液中碱的浓度为0.12mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在40℃下酶解处理14h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为70U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为90U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释12倍后得到稀释液，稀释液依次通入截留分子量为1200Da的纳滤膜、截留分子量为700Da的纳滤膜、截留分子量为200Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为DM130的大孔吸附树脂在室温下以1.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为HPD200B的阳离子交换柱和型号为D301的阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

对比例2

1)将秸秆粉碎后加入水在60℃下浸泡处理3.5h，再加入酸或碱处理18h，得到处理液；碱为氢氧化钠；过滤液中碱的浓度为0.12mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在40℃下酶解处理14h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为40U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为70U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为90U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释12倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1200Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为700Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为200Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为DM130的大孔吸附树脂在室温下以1.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为HPD200B的阳离子交换柱和型号为D301的阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

对比例3

1)将秸秆粉碎后加入水在60℃下浸泡处理3.5h，再加入酸或碱处理18h，得到处理液；碱为氢氧化钠；过滤液中碱的浓度为0.12mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在40℃下酶解处理14h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为50U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为90U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释12倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1200Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为700Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为200Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为DM130的大孔吸附树脂在室温下以1.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为HPD200B的阳离子交换柱和型号为D301的阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

对比例4

1)将秸秆粉碎后加入水在60℃下浸泡处理3.5h，再加入酸或碱处理18h，得到处理液；碱为氢氧化钠；过滤液中碱的浓度为0.12mol/L；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在40℃下酶解处理14h，得到酶解液；纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为70U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60U的木聚糖酶；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液稀释12倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1200Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；向一级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为700Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；向二级过滤液中加入去离子水，加入去离子水后的体积与稀释液的体积相同，再通入截留分子量为200Da的纳滤膜，分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经型号为DM130的大孔吸附树脂在室温下以1.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经型号为HPD200B的阳离子交换柱和型号为D301的阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

测量实施例1～3和对比例1～4得到的低聚木糖的收率和纯度，结果见表1。

表1实施例1～3和对比例1～4的实验结果

从表1可以看出，实施例1～3相比于对比例1～4，本发明提供的制备方法可同时提高低聚木糖的收率和纯度；且根据实施例3与对比例1相比，在采用不同截留分子量的纳滤膜过滤前先进行稀释，可以显著低聚木糖的收率；实施例3与对比例2相比，纤维素酶的加入量低，会显著降低低聚木糖的收率；实施例3与对比例3相比，半纤维素酶的加入量低，会显著降低低聚木糖的收率；实施例3与对比例4相比，木聚糖酶的加入量低，会对低聚木糖的收率产生影响。

上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖性特点相一致的最宽的范围。

Claims (8)

1.一种以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将秸秆粉碎后加入水在50～80℃下浸泡处理3～4h，再加入酸或碱处理15～20h，得到处理液；

2)将步骤1)得到的过滤液的pH值调节至6～7，加入纤维素酶、半纤维素酶和木聚糖酶，在35～50℃下酶解处理12～15h，得到酶解液；

3)将步骤2)得到的酶解液在100℃下灭火15min；

4)将步骤3)得到的灭活后的酶解液中依次采用截留分子量为1000～1500Da、600～800Da、200～400Da的纳滤膜分离得到过滤液；

5)将步骤4)得到的过滤液经大孔吸附树脂脱色，再经离子交换柱洗脱除盐，得到洗脱液；

6)将步骤5)得到的洗脱液浓缩、干燥，即得低聚木糖。

2.如权利要求1所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，步骤1)中，酸为硫酸或盐酸，碱为氢氧化钠或氢氧化钾；过滤液中酸或碱的浓度为0.1～0.15mol/L。

3.如权利要求1所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为50～70U的纤维素酶，半纤维素酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为60～80U的半纤维素酶，木聚糖酶的加入量为每100g秸秆中加入活性单位为80～100U的木聚糖酶。

4.如权利要求1所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，步骤4)具体为，将酶解液稀释10～15倍后得到稀释液，稀释液通入截留分子量为1000～1500Da的纳滤膜，分离得到一级过滤液；

向一级过滤液中加入去离子水后通入截留分子量为600～800Da的纳滤膜，分离得到二级过滤液；

向二级过滤液中加入去离子水后通入截留分子量为200～300Da的纳滤膜，分离得到过滤液。

5.如权利要求1所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，步骤5)具体为经大孔吸附树脂在室温下以0.5～2.5ml/min的流速洗脱脱色，流动相为水，收集洗脱液；将大孔吸附树脂洗脱处理的洗脱液依次经阳离子交换柱和阴离子交换柱洗脱除盐，洗脱流速均为0.5～2.5ml/min，流动相为水，得到洗脱液。

6.如权利要求5所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，大孔吸附树脂的型号为D-101、D3520、DM301或DM130。

7.如权利要求5所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，阳离子交换柱的型号为MAbPac SCX-10或HPD200B。

8.如权利要求5所述的以秸秆为原料制得低聚木糖的方法，其特征在于，阴离子交换柱的型号为D301。