CN110184188A - 一种微生物复合菌剂的生产工艺 - Google Patents

一种微生物复合菌剂的生产工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN110184188A
CN110184188A CN201910531634.2A CN201910531634A CN110184188A CN 110184188 A CN110184188 A CN 110184188A CN 201910531634 A CN201910531634 A CN 201910531634A CN 110184188 A CN110184188 A CN 110184188A
Authority
CN
China
Prior art keywords
strain
microbial inoculum
complex microbial
fermentation
tank
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201910531634.2A
Other languages
English (en)
Inventor
徐双贵
胡培
李少海
严志恒
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ANHUI WANSHI BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO LTD
Original Assignee
ANHUI WANSHI BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO LTD
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ANHUI WANSHI BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO LTD filed Critical ANHUI WANSHI BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO LTD
Priority to CN201910531634.2A priority Critical patent/CN110184188A/zh
Publication of CN110184188A publication Critical patent/CN110184188A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种微生物复合菌剂的生产工艺，涉及微生物复合剂技术领域。本发明包括以下步骤：S001，对生产用菌种进行鉴定；对已发生功能性改变或被杂菌污染的菌种进行菌种的纯化或复壮；S002，在对菌种进行大规模生产前，对菌种进行实验室中试，确定菌种合适的生长温度和生长PH以及发酵培养基的合适成分与比例；并确定菌种合适的培养时间，绘制菌种的生长曲线。本发明通过在生产前对菌种进行鉴定和生长环境测试；然后进行斜面活化和菌种培养分别制成种子液和摇瓶菌种，最后分别通过种子罐发酵和发酵罐发酵，制成微生物复合菌剂，此微生物复合菌剂制作过程简单、制作成本低；提高了微生物菌剂的品质，有效的保证了家畜的肉质。

Description

一种微生物复合菌剂的生产工艺
技术领域
本发明属于微生物复合剂技术领域，特别是涉及一种微生物复合菌剂的生产工艺。
背景技术
随着外出劳动力的流动性增大，个体家畜散养户越来越少，而个体型的养殖大户越来越多，在家畜的养殖过程中，以喂养饲料或其他方式来实现家畜微生物的补充对家畜的生长至关重要，这直接关乎着家畜的健康状态以及家畜的肉质。
而现有的微生物复合菌剂制作过程繁琐，且微生物复合菌剂的活性等品质无法保证，不能够为家畜的良好体质提供辅助作用；因此有待研究一种微生物复合菌剂的生产工艺来简化微生物复合菌剂的工艺过程，并保证微生物复合菌剂品质。
发明内容
本发明的目的在于提供一种微生物复合菌剂的生产工艺，通过在生产前对菌种进行鉴定和生长环境测试；然后进行斜面活化和菌种培养分别制成种子液和摇瓶菌种，最后分别通过种子罐发酵和发酵罐发酵，制成微生物复合菌剂；解决了现有微生物复合菌剂制作过程繁琐，且微生物复合菌剂质量无法保证的问题。
为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明为一种微生物复合菌剂的生产工艺，包括以下步骤：
S001，对生产用菌种进行鉴定；对已发生功能性改变或被杂菌污染的菌种进行菌种的纯化或复壮；
S002，在对菌种进行大规模生产前，对菌种进行实验室中试，确定菌种合适的生长温度和生长PH以及发酵培养基的合适成分与比例；并确定菌种合适的培养时间，绘制菌种的生长曲线；
S003，将冷冻保藏管中的菌种在斜面中活化，并在平板中进行纯化，最后得到斜面菌种或菌种斜面；
S004，取一环纯化后的菌种，接入装有种子培养基的三角瓶中，并置于摇床中进行培养，制成种子液；
S005，取一定量种子液，接入装有发酵培养基的三角瓶中，并将此三角瓶置于摇床中培养，制成摇瓶菌种；
S006，利用无菌蒸汽对菌种发酵设备进行灭菌，并向种子罐中加入一定量的种子罐培养基；对种子罐进行PH值检测、灭菌和降温；并将摇瓶菌种接入种子罐中，通入灭菌空气和消泡剂进行发酵，得到种子罐发酵液；
S007，向发酵罐中填入发酵罐培养基，并对发酵罐进行PH值检测、灭菌和降温；向发酵罐内接入种子罐发酵液，并通入灭菌空气和消泡剂，得到微生物复合菌剂。
进一步地，所述S001中的所述菌种鉴定包括菌种纯度鉴定、菌种的生产性能检查、菌种的活性。
进一步地，所述S003中的斜面培养基成分为：葡萄糖0.1％、牛肉膏1％、蛋白胨1％、Nacl0.5％、琼脂2-2.5％；斜面培养基的PH值为7-7.2。
进一步地，所述S004和S005中的三角瓶内的培养基成分为：葡萄糖2.5％、尿素0.5％、硫酸镁0.04％、磷酸氢二钾0.1％、玉米浆2.5-3.5％、硫酸亚铁2ppm、硫酸锰2PPm；三角瓶内的培养基PH值为7。
进一步地，所述S005中的接入三角瓶中的种子液的接种量为三角瓶实际培养基装量的4-5％。
进一步地，所述S006中的所述摇瓶菌种占种子罐实际装料量的1-6％。
进一步地，所述S006中的所述种子罐培养基成分为：水解糖2.6％、玉米浆3％、硫酸镁0.05％、磷酸氢二钾0.2％、尿素0.5ppm、铁元素2ppm、锰元素2ppm；所述种子罐培养基的PH值为6.9。
进一步地，所述S007中的所述发酵罐培养基的成分为：水解糖13％、甘蔗蜜糖0.15％、尿素0.6％、磷酸氢二钾0.17％、尿素0.05ppm、硫酸亚铁2ppm、硫酸锰2ppm、水80-90％；所述发酵罐培养基的PH值为7。
本发明具有以下有益效果：
本发明通过在生产前对菌种进行鉴定和生长环境测试；然后进行斜面活化和菌种培养分别制成种子液和摇瓶菌种，最后分别通过种子罐发酵和发酵罐发酵，制成微生物复合菌剂，此微生物复合菌剂制作过程简单、制作成本低；提高了微生物菌剂的品质，有效的保证了家畜的肉质。
当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明一种微生物复合菌剂的生产工艺流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
如图1所示，本发明为一种微生物复合菌剂的生产工艺，包括以下步骤：
S001，对生产用菌种进行鉴定；对已发生功能性改变或被杂菌污染的菌种进行菌种的纯化或复壮；
S002，在对菌种进行大规模生产前，对菌种进行实验室中试，确定菌种最适的生长温度和生长PH以及发酵培养基的最适成分与比例；并确定菌种合适的培养时间，绘制菌种的生长曲线；我们一般选取对数生长期的菌体作为生产发酵用的菌种；S001和S002属于微生物复合菌剂的生产前准备；
S003，将冷冻保藏管中的菌种在斜面中活化，活化的温度为37°，时间为24h；并在平板中进行纯化，纯化的温度和时间分别为37°和24h，最后得到斜面菌种或菌种斜面；
S004，取一环纯化后的菌种，接入装量为20ml种子培养基的250ml三角瓶中，并置于180r/min摇床中进行培养，在摇床中的培养温度和时间分别为37°和18h，制成种子液；
S005，取1ml的种子液，接入装有20ml发酵培养基的250ml三角瓶中，并将此三角瓶置于180r/min摇床中培养，在摇床中的培养温度和时间分别为37°和24h，制成摇瓶菌种；
S006，利用无菌蒸汽对菌种发酵设备进行灭菌，对菌种发酵设备灭菌的温度为121℃～125℃，压力为0.103MPa～0168MPa，时间为0.5h～1.0h，并向种子罐中加入一定量的种子罐培养基，种子罐培养基占种子罐体积的55-65％；对种子罐进行PH值检测，并控制种子罐的PH值在7、灭菌和降温，通入灭菌空气，使种子罐温度降到20℃～30℃；并将摇瓶菌种接入种子罐中，通入灭菌空气和消泡剂进行发酵，得到种子罐发酵液，通过显微镜检查种子罐发酵液的形态密度，以及芽孢率；
S007，向发酵罐中填入发酵罐培养基，发酵罐培养基占发酵罐体积的50％～60％，并对发酵罐进行PH值检测、灭菌和降温，PH值保证在7，发酵罐灭菌的温度为121℃～125℃，压力为0.103MPa～0168MPa，时间为0.5h～1.0h，温度保持在25℃～30℃；向发酵罐内接入种子罐发酵液，并通入灭菌空气和消泡剂，将种子罐发酵液在25℃～30℃温度下放置25-35h，得到微生物复合菌剂，对微生物复合菌剂进行储罐，而液态菌剂固形物含量10～20℃。
其中，S001中的所述菌种鉴定包括菌种纯度鉴定、菌种的生产性能检查、菌种的活性、有无杂菌污染，相关性能是否退化。
其中，S003中的斜面培养基成分为：葡萄糖0.1％、牛肉膏1％、蛋白胨1％、Nacl0.5％、琼脂2-2.5％；斜面培养基的PH值为7-7.2。
其中，S004和S005中的三角瓶内的培养基成分为：葡萄糖2.5％、尿素0.5％、硫酸镁0.04％、磷酸氢二钾0.1％、玉米浆2.5-3.5％、硫酸亚铁2ppm、硫酸锰2PPm；三角瓶内的培养基的PH值为7。
其中，S005中的接入三角瓶中的种子液的接种量为三角瓶实际培养基装量的4-5％。
其中，S006中的摇瓶菌种占种子罐实际装料量的1-6％。
其中，S006中的种子罐培养基成分为：水解糖2.6％、玉米浆3％、硫酸镁0.05％、磷酸氢二钾0.2％、尿素0.5ppm、铁元素2ppm、锰元素2ppm；种子罐培养基的PH值为6.9。
其中，S007中的发酵罐培养基的成分为：水解糖13％、甘蔗蜜糖0.15％、尿素0.6％、磷酸氢二钾0.17％、尿素0.05ppm、硫酸亚铁2ppm、硫酸锰2ppm、水80-90％；发酵罐培养基的PH值为7。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。

Claims (8)

1.一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：
S001，对生产用菌种进行鉴定；对已发生功能性改变或被杂菌污染的菌种进行菌种的纯化或复壮；
S002，在对菌种进行大规模生产前，对菌种进行实验室中试，确定菌种合适的生长温度和生长PH以及发酵培养基的合适成分与比例；并确定菌种合适的培养时间，绘制菌种的生长曲线；
S003，将冷冻保藏管中的菌种在斜面中活化，并在平板中进行纯化，最后得到斜面菌种或菌种斜面；
S004，取一环纯化后的菌种，接入装有种子培养基的三角瓶中，并置于摇床中进行培养，制成种子液；
S005，取一定量种子液，接入装有发酵培养基的三角瓶中，并将此三角瓶置于摇床中培养，制成摇瓶菌种；
S006，利用无菌蒸汽对菌种发酵设备进行灭菌，并向种子罐中加入一定量的种子罐培养基；对种子罐进行PH值检测、灭菌和降温；并将摇瓶菌种接入种子罐中，通入灭菌空气和消泡剂进行发酵，得到种子罐发酵液；
S007，向发酵罐中填入发酵罐培养基，并对发酵罐进行PH值检测、灭菌和降温；向发酵罐内接入种子罐发酵液，并通入灭菌空气和消泡剂，得到微生物复合菌剂。
2.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S001中的所述菌种鉴定包括菌种纯度鉴定、菌种的生产性能检查、菌种的活性。
3.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S003中的斜面培养基成分为：葡萄糖0.1％、牛肉膏1％、蛋白胨1％、Nacl0.5％、琼脂2-2.5％；斜面培养基的PH值为7-7.2。
4.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S004和S005中的三角瓶内的培养基成分为：葡萄糖2.5％、尿素0.5％、硫酸镁0.04％、磷酸氢二钾0.1％、玉米浆2.5-3.5％、硫酸亚铁2ppm、硫酸锰2PPm；三角瓶内的培养基PH值为7。
5.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S005中的接入三角瓶中的种子液的接种量为三角瓶实际培养基装量的4-5％。
6.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S006中的所述摇瓶菌种占种子罐实际装料量的1-6％。
7.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S006中的所述种子罐培养基成分为：水解糖2.6％、玉米浆3％、硫酸镁0.05％、磷酸氢二钾0.2％、尿素0.5ppm、铁元素2ppm、锰元素2ppm；所述种子罐培养基的PH值为6.9。
8.根据权利要求1所述的一种微生物复合菌剂的生产工艺，其特征在于，所述S007中的所述发酵罐培养基的成分为：水解糖13％、甘蔗蜜糖0.15％、尿素0.6％、磷酸氢二钾0.17％、尿素0.05ppm、硫酸亚铁2ppm、硫酸锰2ppm、水80-90％；所述发酵罐培养基的PH值为7。
CN201910531634.2A 2019-06-19 2019-06-19 一种微生物复合菌剂的生产工艺 Withdrawn CN110184188A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910531634.2A CN110184188A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种微生物复合菌剂的生产工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910531634.2A CN110184188A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种微生物复合菌剂的生产工艺

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110184188A true CN110184188A (zh) 2019-08-30

Family

ID=67722403

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910531634.2A Withdrawn CN110184188A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种微生物复合菌剂的生产工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110184188A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110922975A (zh) * 2019-12-23 2020-03-27 南京朴厚生态科技有限公司 一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法及其应用
CN114149929A (zh) * 2021-12-15 2022-03-08 乌拉特前旗尚鸿林果科技有限公司 一种苹果种植使用的复合微生物菌剂的工艺技术
CN115340950A (zh) * 2022-09-09 2022-11-15 漯河市田润宝生物科技有限公司 一种营养促生长的微生物发酵工艺

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110922975A (zh) * 2019-12-23 2020-03-27 南京朴厚生态科技有限公司 一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法及其应用
CN114149929A (zh) * 2021-12-15 2022-03-08 乌拉特前旗尚鸿林果科技有限公司 一种苹果种植使用的复合微生物菌剂的工艺技术
CN115340950A (zh) * 2022-09-09 2022-11-15 漯河市田润宝生物科技有限公司 一种营养促生长的微生物发酵工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110184188A (zh) 一种微生物复合菌剂的生产工艺
CN101401587A (zh) 防治土传病害的枯草芽孢杆菌制剂及其制备方法
CN102599451A (zh) 一种新型酸菜复合发酵剂的制备
CN104593303B (zh) 一种液态复合微生物菌剂及其生产方法
CN101575580B (zh) 一种富锌酵母及其生产方法
CN101407761B (zh) 酵母融合菌、白地霉菌和根霉菌液体菌剂及其制备方法和应用
CN103710286A (zh) 一种丁酸梭菌活菌制剂加工方法及培养基组合物
CN109825447A (zh) 一种高产丁酸梭菌的发酵生产工艺
CN101100660A (zh) 一种微生物混合发酵生产纤维素酶的方法
CN102994405A (zh) 一种酿酒酵母及其应用
CN101451107B (zh) 一种大量制备粘帚霉厚垣孢子的方法
CN103724058A (zh) 微生物发酵功能性有机复合肥及其生产方法
CN105925495A (zh) 一种高活性粉状毕赤酵母菌粉及其制备方法
CN109055264A (zh) 一种用于海参养殖的微生物菌剂及其制备方法
CN101575579B (zh) 一种富铁酵母及其生产方法
CN101525584B (zh) 一种氟磺胺草醚农药残留降解菌及其生产的菌剂
CN101560482B (zh) 一种噻嗪酮农药残留降解菌及其生产的菌剂
CN114854664B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌yh-18高效产孢的工业化发酵方法
CN100396772C (zh) 一种久效磷农药残留降解菌及其生产的菌剂
CN108179130A (zh) 一种高活性粪肠球菌微生物制剂干粉的制备方法
CN108239602A (zh) 一种微生物复合菌剂的生产工艺
CN101486985B (zh) 一种烟嘧磺隆农药残留降解菌及其生产的菌剂
CN101691555B (zh) 游离细胞或固定化细胞微生物转化生产l-鸟氨酸的方法
CN103289931A (zh) 一种花域芽孢杆菌菌株sj及其在制备烟草抗病毒制剂和促生剂中的应用
CN105502679B (zh) 高活性海洋酵母干粉的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20190830