CN110114673A - 尿检测装置及尿检测方法 - Google Patents

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Abstract

提供能够使尿中维生素稳定数天、提高检测的正确性和受检者的采尿检测的便利性的尿检测装置及尿检测方法。本尿检测装置在尿样的收纳容器内壁上涂布有柠檬酸水溶液等作为尿的稳定剂。或者，将作为尿的稳定剂的柠檬酸水溶液等干燥或冷冻干燥后收容于尿样的收纳容器内。另一方面，就本发明的尿检测方法而言，通过向采集的尿中添加柠檬酸水溶液等作为尿的稳定剂，从而使采尿后至少7天的维生素浓度稳定化，通过使尿中维生素稳定数天，可提高受检者的采尿检测的便利性，并且，特别地，通过使B族维生素的尿中浓度稳定，可正确地检测受检者的体内不足的营养素。

Description

尿检测装置及尿检测方法
技术领域
本发明涉及使用了随机尿(spot urine)的尿检测装置及尿检测方法。
背景技术
一直以来，在医院、检测中心实施了大量的尿检测，其大多为24小时尿。然而，为了蓄集24小时尿，耗费时间、成本，存在繁杂的问题。
因此，由采集的多次随机尿的尿中成分算出1天的尿中所含有的成分的总量即尿中成分日***量的测定方法是已知的(参见专利文献1)。
根据上述专利文献1中公开的测定方法，能够在不蓄集24小时尿的情况下简单地采尿，测定尿中成分。然而，为了测定尿中成分，必须使尿成为酸性以实现尿成分的稳定化，因此，即使使用上述专利文献1中公开的测定方法，该问题也未得到解决。
迄今为止，使用24小时尿作为检体的情况下，为了实现尿成分的稳定化，通常使用盐酸作为用于使尿成为酸性的添加剂。然而，盐酸属于有害物质，在安全性、管理的容易程度方面存在问题。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2010-230618号公报
发明内容
发明所要解决的课题
鉴于上述情况，本发明的目的在于，提供能够使尿中维生素、尿中葡萄糖稳定数天、提高检测的正确性和受检者的采尿检测的便利性的尿检测装置及尿检测方法。
用于解决课题的手段
鉴于上述情况，本发明的尿检测装置的特征在于，将选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液干燥或冷冻干燥而得到的制剂作为尿的稳定剂收容于尿样的收纳容器内。
根据本发明的尿检测装置，能够使尿中维生素稳定数天，提高受检者的采尿检测的便利性。尿中维生素具体而言为B族维生素，有维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸及生物素这6种。已知B族维生素是动物产生能量不可缺少的营养素，在碳水化合物、脂肪、蛋白质的代谢中发挥作用，彼此具备协同关系，并且参与各种物质代谢。因此，通过对B族维生素的尿中浓度进行检测，能够明确受检者的体内不足的营养素。
所收容的稳定剂使用将用作稳定剂的水溶液干燥或冷冻干燥而成的制剂，从而实现操作的便利性。
另外，作为使用本发明的尿检测装置的尿检测的检测项目，不限于B族维生素，也可针对维生素C、矿物质、蛋白质等进行检测。通过含有草酸作为稳定剂，能够使维生素C稳定。
另外，本发明的尿检测装置的特征在于，在尿样的收纳容器内，作为尿的稳定剂，在尿样的收纳容器内壁涂布有选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液。
同样地，能够使尿中维生素稳定数天，提高受检者的采尿检测的便利性，特别地，通过对B族维生素的尿中浓度进行检测，能够明确受检者的体内不足的营养素。
本发明的尿检测装置的特征在于，其具备尿样的收纳容器和填充有选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂的容器。
通过将稳定剂设置于与尿样的收纳容器不同的容器而制成试剂盒，能够提高检测的便利性·效率性。
本发明的尿检测装置的特征在于，其具备介质和尿样的收纳容器，所述介质含浸有选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂。
作为本发明的尿检测装置中的稳定剂，可合适地使用柠檬酸水溶液、草酸水溶液、或者、柠檬酸水溶液和草酸水溶液的混合液。
本发明的尿检测装置中，稳定剂和尿的混合液中的柠檬酸的浓度优选为0.005～0.24mol/L，更优选为0.01～0.1mol/L。通过设为该范围，能够充分地发挥稳定剂的效果。
另外，稳定剂使用例如1mL左右。
接下来，对本发明的尿检测方法进行说明。
本发明的尿检测方法是对下述尿进行检测的方法，所述尿是通过向采集的尿中添加选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种、或、任一组合混合而成的水溶液作为尿的稳定剂从而使采尿后至少7天的尿中维生素浓度、矿物质浓度、或、蛋白质浓度稳定化而得到的尿。通过使尿中维生素稳定数天，可提高受检者的采尿检测的便利性，并且，特别地，通过使B族维生素的尿中浓度稳定，能够正确地检测受检者的体内不足的营养素。
此处，维生素为维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸及生物素这样的B族维生素。另外，矿物质为钠、钙、钾、磷及镁。另外，通过含有草酸作为稳定剂，能够使维生素C稳定。
作为本发明的尿检测方法中的稳定剂，可合适地使用柠檬酸水溶液、柠檬酸水溶液和草酸水溶液的混合溶液。此处，作为柠檬酸水溶液和草酸水溶液的混合比例，优选设为3∶7～7∶3的范围内的比例。更优选设为4∶6～6∶4的范围内的比例。
本发明的尿检测方法中，通过添加上述的稳定剂从而能够在37℃的条件下使采尿后至少7天的尿中维生素浓度稳定化。
本发明的尿检测方法是对下述尿进行检测的方法，所述尿是通过向采集的尿中添加选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种、或、任一组合混合而成的水溶液作为尿的稳定剂从而使采尿后至少7天的尿中葡萄糖浓度稳定化而得到的尿。通常，认为尿糖(葡萄糖：Glu)于常温阴性化，但通过使用本发明的尿检测方法，能够使尿中葡萄糖浓度稳定化。
作为本发明的尿检测方法中的稳定剂，可合适地使用柠檬酸水溶液、柠檬酸水溶液和草酸水溶液的混合溶液。此处，作为柠檬酸水溶液和草酸水溶液的混合比例，优选设为3∶7～7∶3的范围内的比例。更优选设为4∶6～6∶4的范围内的比例。
本发明的尿检测方法是对下述尿进行检测的方法，所述尿是通过向采集的尿中添加草酸、或者选自柠檬酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种和草酸的组合的水溶液作为尿的稳定剂从而使采尿后至少3天的尿中维生素C浓度稳定化而得到的尿。
即，对于不包含于前述维生素的维生素C而言，通过使用草酸、或者草酸和选自柠檬酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种的组合的水溶液，能够使采尿后3天浓度稳定化。由此，能够高效地实施尿检测。
本发明的尿检测方法是使用上述本发明的尿检测装置采集尿、对使采尿后至少7天的尿中维生素浓度稳定化的尿进行检测的方法。另外，本发明的尿检测方法是使用上述本发明的尿检测装置采集尿、对使采尿后至少7天的尿中矿物质浓度稳定化的尿进行检测的方法。另外，本发明的尿检测方法是使用上述本发明的尿检测装置采集尿、对使采尿后至少7天的尿中蛋白质浓度稳定化的尿进行检测的方法。另外，本发明的尿检测方法是使用上述的本发明的尿检测装置采集尿、对使采尿后至少3天的尿中维生素C浓度稳定化的尿进行检测的方法。通过使用本发明的尿检测装置采集尿，可提高受检者的采尿检测的便利性，并且，特别地，通过使B族维生素的尿中浓度稳定，能够正确地检测受检者的体内不足的营养素。另外，本发明的尿检测方法是使用上述本发明的尿检测装置采集尿、对使采尿后至少7天的尿中葡萄糖浓度稳定化的尿进行检测的方法。
发明效果
根据本发明的尿检测装置及尿检测方法，具有能够使尿中维生素、尿中矿物质、尿中蛋白质、或尿中葡萄糖稳定数天、提高检测的正确性和受检者的采尿检测的便利性的效果。
附图说明
[图1]尿检测流程图
[图2]表示尿中B族维生素的稳定化的图(实施例1)
[图3]表示叶酸的稳定化的图(实施例1)
[图4]表示尿中B族维生素的稳定化的图(实施例2)
[图5]表示叶酸的稳定化的图(实施例2)
[图6]尿中B族维生素***量的ROC曲线
[图7]叶酸***量的ROC曲线
[图8]表示尿中水溶性维生素的稳定化的图1(实施例4)
[图9]表示尿中水溶性维生素的稳定化的图2(实施例4)
[图10]表示尿中水溶性维生素的稳定化的图3(实施例4)
[图11]表示尿中水溶性维生素的稳定化的图1(实施例5)
[图12]表示尿中水溶性维生素的稳定化的图2(实施例5)
[图13]表示尿中水溶性维生素的稳定化的图3(实施例5)
具体实施方式
以下，参考附图对本发明的实施方式的一例进行详细说明。需要说明的是，本发明的范围不限于以下的实施例、图示例，可进行多种变更及变形。
使用本发明的尿检测方法进行的检测通过例如以下这样的方式实施。
图1示出了尿检测流程图。如图1如所示，首先，向采集的尿中添加稳定剂(柠檬酸水溶液等)(S01)。采尿后，使7天的维生素浓度稳定化(S02)。在7天以内实施尿检测(S03)。
因此，在实施尿检测时，必需以使尿中的维生素浓度稳定数天的方式保存。因此，在以下的实施例中，对针对作为稳定剂有效的物质的种类·浓度等进行验证的结果进行说明。
实施例1
参考图2、3，对柠檬酸水溶液对于尿中B族维生素的稳定性造成的影响进行说明。
尿中B族维生素在盐酸酸性下保存时是稳定的，将柠檬酸水溶液作为代替盐酸的稳定剂与采集的尿混合、保存1～7天后的B族维生素浓度的变化示于图2、3。
图2(1)～(6)分别表示维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、生物素的浓度变化。另外，图3表示叶酸的浓度变化。
首先，从3名健康的年轻成人采集随机尿。将上述随机尿9ml与1ml的浓度为1mol/L的柠檬酸水溶液混合，于22℃保存0、1、3、7天。关于保存后的尿中的B族维生素，测定维生素浓度。具体而言，如下测定各维生素浓度：针对维生素B1，利用高效液相色谱法(HPLC法)测定硫胺素，针对维生素B2，利用HPLC法测定核黄素，针对维生素B6，利用HPLC法测定维生素B6代谢产物4-吡哆酸。另外，针对烟酸，使用HPLC法测定作为烟酸代谢产物的N1-甲基烟酰胺、N1-甲基-2-吡啶酮-5-甲酰胺、N1-甲基-4-吡啶酮-3-甲酰胺，将它们的总量作为测定结果。并且，针对泛酸、生物素、叶酸，通过微生物学定量法测定各维生素浓度。
需要说明的是，作为比较用途，将随机尿9ml与浓度1mol/L的盐酸混合，测定于22℃保存0、1、3、7天后的尿中的B族维生素。
图2、3的浓度变化的图示出了以在刚刚采尿后与盐酸混合(以下称为盐酸处理)的尿中的B族维生素浓度作为基准的、与柠檬酸水溶液混合(以下称为柠檬酸处理)的尿中B族维生素浓度的相对值。如图2(1)～(6)的图所示，维生素B1(VB1)、维生素B2(VB2)、维生素B6(VB6)、烟酸(Niacin)、泛酸(Pantothenic acid)、生物素(Biotin)中，盐酸处理及柠檬酸处理中均未观察到因保存1～7天而导致的显著变化。另一方面，如图3的图所示，就叶酸(folate)而言，盐酸处理及柠檬酸处理中，尿中的叶酸浓度均由于保存7天而减少至约60％。
由以上的结果可知，通过对尿进行柠檬酸处理，尿中B族维生素得以稳定地保存7天，可代替盐酸作为稳定剂进行利用。
实施例2
参考图4、5，对柠檬酸粉末对于尿中B族维生素的稳定性造成的影响进行说明。
普通人操作装有液体的管时，存在洒落液体的可能性。为了明确使管内的柠檬酸水溶液冷冻干燥、使用该管是否仍然能够稳定地保存尿中B族维生素，将柠檬酸粉末与采集的尿混合，保存3天后的B族维生素浓度示于图4、5。
图4(1)～(6)分别表示尿与盐酸、柠檬酸水溶液或柠檬酸粉末混合的情况下的、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸或生物素的浓度。另外，图5表示尿与盐酸、柠檬酸水溶液或柠檬酸粉末混合的情况下的的叶酸的浓度。
首先，向10ml用塑料管中加入1ml的1mol/L柠檬酸水溶液，将管内的柠檬酸水溶液冷冻干燥。从3名健康的年轻成人采集随机尿，将该随机尿9ml装入管中，于22℃保存3天。
关于保存后的尿中的B族维生素，测定维生素浓度。具体而言，如下测定各维生素浓度：针对维生素B1，利用HPLC法测定硫胺素，针对维生素B2，利用HPLC法测定核黄素，针对维生素B6，利用HPLC法测定维生素B6代谢产物4-吡哆酸。另外，针对烟酸，使用HPLC法测定作为烟酸代谢产物的N1-甲基烟酰胺、N1-甲基-2-吡啶酮-5-甲酰胺、N1-甲基-4-吡啶酮-3-甲酰胺，将它们的总量作为测定结果。并且，针对泛酸、生物素、叶酸，通过微生物学定量法测定各维生素浓度。
需要说明的是，作为比较用途，将随机尿9ml与浓度1mol/L的柠檬酸水溶液或盐酸混合，测定于22℃保存3天后的尿中的B族维生素。
图4、5的图示出了以盐酸处理后、保存3天后的各人的尿中B族维生素浓度作为基准的、使用柠檬酸水溶液或经冷冻干燥的柠檬酸进行处理后的尿中B族维生素浓度的相对值。
如图4(1)～(6)及图5的图所示，在维生素B1(VB1)、维生素B2(VB2)、维生素B6(VB6)、烟酸(Niacin)、泛酸(Pantothenic acid)、生物素(Biotin)或叶酸(folate)的全部情况下，使用柠檬酸水溶液或经冷冻干燥的柠檬酸的处理中的任一种处理中，均显示了与盐酸处理相同的值。
由以上的结果可知，使用使柠檬酸水溶液冷冻干燥后的管，能够将尿中B族维生素稳定地保存3天。
实施例3
参考图6、7，对与24小时尿中B族维生素***量的基准值对应的随机尿中的尿中B族维生素***量的基准值的设定进行说明。
图6、7表示各尿中B族维生素***量的受试者工作特性曲线(receiver operatingcharacteristic curve)(ROC曲线)。
作为测定方法，使用了对24小时尿和随机尿的尿中水溶性维生素***量进行了测定的86名女学生的数据。使用图6、7中所示的ROC曲线，确定能够满足(clear)24小时尿中的各维生素的基准值的随机尿中***量的临界值。
如上所述，确定能够满足24小时尿中水溶性维生素***量的基准值的随机尿中水溶性维生素***量的临界值的结果示于下述表1。
[表1]
如上述表1所示，使用各临界值时，对于灵敏度而言，叶酸以外的B族维生素中，能够检测到24小时尿中***量呈现基准值以上的对象者之中的65～84％。另外，特异度基于以下式1求出，因此，检测到呈现基准值以下的对象者的假阳性率为10～33％。
(数式1)
特异度＝1-假阳性率...(式1)
如上述表1所示，ROC曲线下面积(AUC)为0.8左右，能够得到被划分为0.7～0.9的中等水平的精度。但是，叶酸中，24小时尿中***量呈现基准值以下的对象者较少(86名中为7名)，因此灵敏度较之其他B族维生素而言更低，为0.44，AUC也为0.58，是被划分为0.5～0.7的低精度结果。
根据以上可知，本实施例中确定的随机尿的基准值在简便地评价除了叶酸以外的6种B族维生素的营养状态方面是有效的。
实施例4
参考图8，对柠檬酸的浓度的差异对于尿中水溶性维生素的稳定性造成的影响进行说明。
尿中水溶性维生素以100mmol/L柠檬酸进行保存时是稳定的。为了明确发挥柠檬酸的稳定化作用的浓度，以柠檬酸的最终浓度成为1～1000mmol/L的方式将柠檬酸水溶液与尿混合，调查了保存0、3、7天后的维生素的浓度变化。结果示于图8～10。需要说明的是，所谓放置0天，是指混合后立刻进行冷冻干燥。
对于图8而言，(1)及(2)表示维生素B1的浓度变化，(3)表示维生素B2的浓度变化，(4)表示维生素B6的浓度变化。另外，对于图9而言，(1)表示烟酸的浓度变化，(2)表示泛酸的浓度变化，(3)及(4)表示叶酸的浓度变化，对于图10而言，(1)表示生物素的浓度变化，(2)表示维生素C的浓度变化。
此处，图8(1)和(2)、图9(3)和(4)分别示出了变更纵轴刻度后的结果。
首先，从3名健康的年轻成人采集随机尿。将上述随机尿9ml与1ml的浓度为10mmol/L～10mol/L的柠檬酸水溶液混合，于37℃放置0、3、7天后冷冻。柠檬酸的最终浓度设为1、10、100、250、500、1000mmol/L。在上述条件下，关于冷冻后的尿中的水溶性维生素，测定维生素浓度。具体而言，如下测定各维生素浓度：针对维生素B1，利用HPLC法测定硫胺素，针对维生素B2，利用HPLC法测定核黄素，针对维生素B6，利用HPLC法测定维生素B6代谢产物4-吡哆酸。另外，针对烟酸，使用HPLC法测定作为烟酸代谢产物的N1-甲基烟酰胺、N1-甲基-2-吡啶酮-5-甲酰胺，将它们的总量作为测定结果。并且，针对泛酸、生物素、叶酸，通过微生物学定量法测定各维生素浓度。针对维生素C，使用HPLC法测定抗坏血酸、脱氢抗坏血酸、2，3-二酮古洛糖酸的总量。
图8～10的浓度变化的图示出了以在刚刚采尿后进行盐酸处理后的尿中的水溶性维生素浓度作为基准的、使用各浓度的柠檬酸水溶液处理后的尿中水溶性维生素浓度的相对值。需要说明的是，图中的值表示为相对于刚刚采尿后的盐酸处理样品而言的相对值的平均±标准偏差(n＝3，但维生素C为n＝2)。
如图8(1)(2)的图所示，对于维生素B1而言，10～250mmol/L的情况下，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。1mmol/L处理后，尿中硫胺素浓度由于3天以上的保存而增加至2倍以上。另外，500mmol/L以上的浓度下，尿中硫胺素浓度降低至约50％。
如图8(3)的图所示，对于维生素B2而言，10～1000mmol/L的浓度下，直到第3天为止的保存中未观察到较大变动，但尿中核黄素浓度由于7天的保存而增加至约1.5倍。1mmol/L的情况下，水处理后，尿中核黄素浓度增加至1.8倍。
如图8(4)的图所示，对于维生素B6而言，在任一浓度下均未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图9(1)的图所示，对于烟酸而言，500mmol/L以下的浓度下，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。1000mmol/L的情况下，尿中烟酰胺代谢产物浓度降低至60～70％。
如图9(2)的图所示，对于泛酸而言，为100mmol/L以下时，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。250mmol/L以上的情况下，尿中泛酸浓度以浓度依赖性的方式降低。
如图9(3)(4)的图所示，对于叶酸而言，10mmol/L的情况下，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。100mmol/L的情况下，尿中叶酸浓度由于3天以上的保存而降低至约60％。250mmol/L以上的情况下，降低至约50％。1000mmol/L的情况下，在测定时未观察到微生物的增殖，无法进行测定。
如图10(1)的图所示，对于生物素而言，在任一浓度下均未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图10(2)的图所示，对于维生素C而言，在任一浓度下，尿中总抗坏血酸浓度均由于3天的保存而降低至30％以下，由于7天的保存而降低至几乎为0％。
将柠檬酸水溶液的浓度的差异对于尿中水溶性维生素浓度造成的影响总结示于下述表2。表2以盐酸处理0天的值作为基准，相对值的平均处于75～150％的范围则为○，处于50～75％或150～200％的范围则为Δ，小于50％或为200％以上则为×。
[表2]
由以上可知，对于除了维生素C以外的7种水溶性维生素而言，发挥了与盐酸同等的稳定性的酸中的柠檬酸的浓度为最终浓度10～100mmol/L。250mmol/L的情况下，叶酸的稳定化差，500mmol/L以上的情况下，维生素B1、泛酸、叶酸的稳定化差。
实施例5
参考图11～13，对各种酸性溶液对于尿中水溶性维生素的稳定性造成的影响进行说明。
尿中水溶性维生素在盐酸酸性下保存时是稳定的。实施例1～4中，针对柠檬酸水溶液进行了实验，本实施例中，就是否可考虑柠檬酸以外的代替盐酸的候选稳定剂进行了实验。作为代替盐酸的候选稳定剂，将各种酸性溶液与尿混合，调查保存0、3、7天后的维生素的浓度变化。结果示于图11～13。需要说明的是，为了进行比较，也示出了关于盐酸及柠檬酸的数据。
对于图11而言，(1)及(2)表示维生素B1的浓度变化，(3)表示维生素B2的浓度变化，(4)表示维生素B6的浓度变化。另外，对于图12而言，(1)表示烟酸的浓度变化，(2)表示泛酸的浓度变化，(3)及(4)表示叶酸的浓度变化，对于图13而言，(1)表示生物素的浓度变化，(2)表示维生素C的浓度变化。
此处，图11(1)和(2)、图12(3)和(4)分别表示将纵轴的刻度变更后的结果。
首先，从3名健康的年轻成人采集随机尿。将上述随机尿9ml与1ml的浓度为1mol/L的各种酸性溶液混合，于37℃放置0、3、7天后冷冻。但是，对于偏磷酸而言，将10％溶液1mL与尿混合。混合的溶液使用了水、盐酸、抗坏血酸、草酸、磺基水杨酸、酒石酸、乙酸、偏磷酸、柠檬酸。在上述条件下，关于冷冻后的尿中的水溶性维生素，测定维生素浓度。具体而言，如下测定各维生素浓度：针对维生素B1，利用HPLC法测定硫胺素，针对维生素B2，利用HPLC法测定核黄素，针对维生素B6，利用HPLC法测定维生素B6代谢产物4-吡哆酸。另外，针对烟酸，使用HPLC法测定作为烟酸代谢产物的N1-甲基烟酰胺、N1-甲基-2-吡啶酮-5-甲酰胺，将它们的总量作为测定结果。并且，针对泛酸、叶酸、生物素，通过微生物学定量法测定各维生素浓度。针对维生素C，使用HPLC法测定抗坏血酸、脱氢抗坏血酸、2，3-二酮古洛糖酸的总量。
图11～13的浓度变化的图示出了以在刚刚采尿后进行盐酸处理后的尿中的水溶性维生素浓度作为基准的、使用各种酸性溶液处理后的尿中水溶性维生素浓度的相对值。需要说明的是，图中的值表示为相对于刚刚采尿后的盐酸处理样品而言的相对值的平均±标准偏差(n＝3，但维生素C为n＝2)。
如图11(1)(2)的图所示，对于维生素B1而言，水及乙酸处理后，尿中硫胺素浓度由于3天以上的保存而增加至2倍以上。除此以外的处理中，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图11(3)的图所示，对于维生素B2而言，水处理后，尿中核黄素浓度由于7天的保存而降低至56％。另一方面，盐酸、草酸、磺基水杨酸处理后，尿中核黄素浓度由于7天的保存而增加至约1.8倍。除此以外的处理中，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
图11(4)的图如所示，对于维生素B6而言，关于任一种处理，均未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图12(1)的图所示，对于烟酸而言，关于任一种处理，均未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图12(2)的图所示，对于泛酸而言，磺基水杨酸处理后，尿中泛酸浓度由于7天的保存而降低至42％。另外，尿中泛酸浓度由于草酸处理而降低至约70％。除此以外的处理中，未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图12(3)(4)的图所示，对于叶酸而言，水处理后，尿中叶酸浓度由于3天以上的保存而增加至3倍以上。对于抗坏血酸、草酸、酒石酸的处理而言，尿中叶酸浓度在7天的保存中是稳定的。除此以外的处理中，尿中叶酸浓度由于3～7天的保存而降低至50～70％。
如图13(1)的图所示，对于生物素而言，关于任一种处理，均未观察到由于7天的保存导致的较大变动。
如图13(2)的图所示，对于维生素C而言，仅草酸处理在3天的保存中未显示变动。除此以外的任一种处理中，尿中总抗坏血酸浓度均由于3天的保存而降低至30％以下，均由于7天的保存而降低至几乎为0％。即使是用于使生物体试样中的维生素C稳定化的偏磷酸，也无法稳定地保存3天以上。可以认为，2，3-二酮古洛糖酸可能由于37℃的保存而被进一步氧化。
即，对于除了维生素C以外的7种水溶性维生素而言，发挥了与盐酸同等的稳定性的酸为酒石酸、柠檬酸。乙酸无法稳定保存维生素B1，抗坏血酸及偏磷酸情况下，维生素B1的稳定性也差。草酸带来的泛酸的稳定性较差。磺基水杨酸成功地将泛酸稳定地保存至3天，但在保存7天的情况下未观察到稳定化。对于维生素C而言，仅草酸处理能够稳定地保持3天，其他任一种酸溶液均无法稳定地保存3天以上。
将各种酸性溶液对于尿中水溶性维生素浓度造成的影响总结示于下述表3。表3以盐酸处理0天的值作为基准，相对值的平均处于75～150％的范围时则为○，处于50～75％或150～200％的范围则为Δ，小于50％或为200％以上时则为×。
[表3]
由以上可知，能够用作代替盐酸的稳定剂的酸溶液为酒石酸、柠檬酸。但是，对抗坏血酸而言，虽然维生素B1的稳定化差，但叶酸的稳定化是最优异的。关于维生素C，已知即使使用酸溶液进行处理，也极难稳定地保存7天，对于草酸而言，可知其能够将维生素C保存3天。
因此，作为能够用作代替盐酸的稳定剂的酸溶液，优选酒石酸、柠檬酸或抗坏血酸，并且，可认为通过混合草酸，也能够成为实现维生素C的稳定化的构成。
实施例6
通常，尿检测中，尿糖(葡萄糖：Glu)被认为于常温进行阴性化。例如，根据日本农村医学会杂志(日本農村医学会雑誌)(第64卷，2016年1月，第5号)的789～797页中记载的论文“采尿后的经过时间和温度对于尿检测造成的影响”(採尿後の経過時間と温度が尿検查に及ぼす影辔)，大肠杆菌添加尿中，在25～26℃的室温经过4小时、于30℃经过3小时后，开始观察到糖酵解作用，糖200mg/dL池尿在24小时后被分解至几乎为0。
另外，变形杆菌添加尿中，以糖200mg/dL池尿，在室温情况下7小时后显示出减少的趋势，在30℃的情况下6小时后显示出减少的趋势。
这些通常被认为是对尿中的细菌分解葡萄糖的情况进行补充的数据。
本实施例中，就将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为稳定剂添加至尿中且常温保存的情况下、针对尿糖是否稳定化进行实验而确认的结果进行说明。
作为实验方法，针对在“无稳定剂”的条件下、采尿当天(第0天)测定尿糖的情况、和在“有稳定剂”的条件下、3天后、7天后测定尿糖的情况，对尿中的葡萄糖浓度(mg/dL)进行比较。
“有稳定剂”的检体是将尿8mg与稳定剂2mg混合而成的。如此，对于“有稳定剂”的检体而言，由于混合稳定剂而使得尿被稀释，因此，针对“无稳定剂”的检体也采用乘以0.8所得的数值，以使得与“有稳定剂”的检体的稀释浓度相匹配，进行比较。
以下表4对上述实验结果进行了总结。如下表所示，受检者为受检者1～10这10人，针对各受检者采尿3次，算出3个检体的平均值。
受检者1为42岁女性，受检者2为21岁女性，受检者3为24岁女性，受检者4为21岁男性，受检者5为25岁女性，受检者6为23岁女性，受检者7为21岁女性，受检者8为22岁女性，受检者9为47岁男性，受检者10为45岁女性。
表中的所谓“第0天”，是指将“无稳定剂”条件下采尿当天的尿中葡萄糖浓度的测定数值乘以0.8得到的数值。所谓“第3天”，是指“有稳定剂”条件下采尿后第3天的测定数值。所谓“第7天”，是指“有稳定剂”条件下采尿后第7天的测定数值。
另外，所谓“3天后”，是指从将“无稳定剂”条件下采尿当天的尿中葡萄糖浓度的测定数值乘以0.8得到的值中减去“有稳定剂”条件下采尿后第3天的测定数值而得到的值。同样地，所谓“7天后”，是指从将“无稳定剂”条件下采尿当天的尿中葡萄糖浓度的测定数值乘以0.8得到的值中、减去“有稳定剂”条件下采尿后第7天的测定数值而得到的值。因此，“3天后”及“7天后”的值为尿中葡萄糖浓度的降低度，值为正数时，可认为葡萄糖浓度降低，反之，值为负数时，可认为葡萄糖浓度上升。需要说明的是，表中的数值适当进行了四舍五入。
[表4]
如上述表4所示，受检者1中，3天后的降低度为0.73mg/dL、7天后的降低度为-0.07mg/dL。受检者2中，3天后的降低度为-0.40mg/dL，7天后的降低度为-0.40mg/dL。受检者3中，3天后的降低度为-0.80mg/dL，7天后的降低度为-1.80mg/dL。受检者4中，3天后的降低度为-0.53mg/dL，7天后的降低度为-1.53mg/dL。受检者5中，3天后的降低度为0.14mg/dL，7天后的降低度为0.80mg/dL。受检者6中，3天后的降低度为0.07mg/dL，7天后的降低度为-0.93mg/dL。受检者7中，3天后的降低度为-0.07mg/dL，7天后的降低度为-0.40mg/dL。受检者8中，3天后的降低度为0.26mg/dL，7天后的降低度为0.93mg/dL。受检者9中，3天后的降低度为-0.54mg/dL，7天后的降低度为0.13mg/dL。受检者10中，3天后的降低度为0.07mg/dL，7天后的降低度为-0.93mg/dL。
对于受检者1～10而言，尿中葡萄糖浓度的降低度的变化平均为-0.6，变化标准偏差为1.0。
如前所述，例如大肠杆菌添加尿中，尿糖在24小时后几乎被分解为0，与此相比，可认为即使在采尿7天后，葡萄糖浓度的降低仍然较少。
因此，可认为通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为稳定剂添加至尿中，使尿中的葡萄糖浓度在采尿后至少7天稳定化。
实施例7
对将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中、从而分别确认蛋白质、矿物质、维生素的稳定化程度的结果进行说明。对于矿物质而言，针对钠(Na)、钾(K)、磷(P)、钙(Ca)、镁(Mg)及钼(Mo)进行了确认。对于维生素而言，针对维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸及生物素进行了确认。作为实验方法，将采尿当天(第0天)测得的结果分别与在第3天、1周(第7天)、第10天、2周(第14天)测得的结果进行比较。需要说明的是，添加有稳定剂的尿于常温(20℃)保存。受检者为4人，各测定时，针对各受检者采尿2次，算出其平均值，算出各测定中的4人的平均值。结果示于下述表5。
[表5]
由表5能够确认以下情况。即，通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中，尿中蛋白质浓度通过测定而确认到其在14天期间是稳定的。另外，通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中，钠(Na)、钾(K)、磷(P)、钙(Ca)及镁(Mg)这样的矿物质浓度通过测定而确认到其在14天期间是稳定的。此处，钼(Mo)自第3天的测定起增加量(为负值，所以为增加)较大，可以推定，这是由于尿中的钼浓度为μg/mL，是较之其他矿物质而言低三个数量级左右的微量，所述结果是由测定分辨率导致的。
另一方面，关于维生素，通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中，关于维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸及生物素，确认到它们直到第10天为止是稳定的。对于叶酸而言，确认到虽然自第3天的测定起增加，但增加量直到第10天为止都没有大幅度变化，是稳定的。
实施例8
将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中后，进行冷冻，冷冻保存数天，然后解冻，在这种情况下，分别确认了蛋白质、矿物质、维生素的稳定化程度，对结果进行说明。对于矿物质而言，针对钠(Na)、钾(K)、磷(P)、钙(Ca)、镁(Mg)及钼(Mo)进行了确认。对于维生素而言，针对维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸及生物素进行了确认。作为实验方法，将在采尿当天(第0天)测得的结果分别与冷冻7天后解冻的尿、冷冻20天后解冻的尿进行比较。需要说明的是，冷冻保存在-10℃的冷冻室内进行，解冻通过于常温(20℃)自然解冻进行。受检者为4人，算出各测定中的4人的平均值。结果示于下述表6。
[表6]
由表6确认了以下情况。即，确认了通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中，尿中蛋白质浓度在冷冻7天后解冻的尿、和冷冻20天后解冻的尿这两种情况下是稳定的。另外，确认了通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中，钠(Na)、钾(K)、磷(P)、钙(Ca)及镁(Mg)这样的矿物质浓度在冷冻7天后解冻的尿、和冷冻20天后解冻的尿这两种情况下是稳定的。此处，钼(Mo)自冷冻7天后解冻的尿的测定起，增加量(为负值，因此是增加)较大，但可以推定，这是由于尿中的钼浓度为μg/mL，是较之其他矿物质而言低三个数量级左右的微量，所述结果是由测定分辨率导致的。
另一方面，关于维生素，通过将柠檬酸与草酸混合而成的水溶液作为尿的稳定剂添加至尿中，关于维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸及生物素，确认到在冷冻7天后解冻的尿、和冷冻20天后解冻的尿这两种情况下是稳定的。
产业上的可利用性
本发明在尿检测装置方面有用。

Claims (20)

1.尿检测装置，其特征在于，将选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液干燥或冷冻干燥而得到的制剂作为尿的稳定剂收容于尿样的收纳容器内。
2.尿检测装置，其特征在于，在尿样的收纳容器内壁涂布有选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂。
3.尿检测装置，其特征在于，其具备尿样的收纳容器和填充有选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂的容器。
4.尿检测装置，其特征在于，其具备介质和尿样的收纳容器，所述介质含浸有选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂。
5.如权利要求1～4中任一项所述的尿检测装置，其特征在于，所述稳定剂为柠檬酸水溶液。
6.如权利要求1～4中任一项所述的尿检测装置，其特征在于，所述稳定剂为草酸水溶液。
7.如权利要求1～4中任一项所述的尿检测装置，其特征在于，所述稳定剂为柠檬酸水溶液和草酸水溶液的混合液。
8.如权利要求5或7所述的尿检测装置，其特征在于，所述稳定剂和尿的混合液中的柠檬酸的浓度为0.005～0.24mol/L。
9.如权利要求5或7所述的尿检测装置，其特征在于，所述稳定剂和尿的混合液中的柠檬酸的浓度为0.01～0.1mol/L。
10.尿检测方法，其特征在于，对下述尿进行检测，所述尿是通过向采集的尿中添加选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂从而使采尿后至少7天的尿中维生素浓度、尿中矿物质浓度、或、尿中蛋白质浓度稳定化而得到的尿。
11.如权利要求10所述的尿检测方法，其特征在于，所述维生素为维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、叶酸及生物素，
所述矿物质为钠、钙、钾、磷及镁。
12.如权利要求10或11所述的尿检测方法，其特征在于，对通过添加所述稳定剂从而在37℃的条件下使采尿后至少7天的尿中维生素浓度稳定化的尿进行检测。
13.尿检测方法，其特征在于，对下述尿进行检测，所述尿是通过向采集的尿中添加选自柠檬酸、草酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种或任一组合的水溶液作为尿的稳定剂从而使采尿后至少7天的尿中葡萄糖浓度稳定化而得到的尿。
14.如权利要求13所述的尿检测方法，其特征在于，所述稳定剂为柠檬酸水溶液。
15.尿检测方法，其特征在于，对下述尿进行检测，所述尿是通过向采集的尿中添加选自柠檬酸、酒石酸及抗坏血酸的组中的任一种与草酸的组合的水溶液、或者草酸作为尿的稳定剂从而使采尿后至少3天的尿中维生素C浓度稳定化而得到的尿。
16.尿检测方法，其特征在于，使用权利要求1～9中任一项所述的尿检测装置采集尿，
对使采尿后至少7天的尿中维生素浓度稳定化的尿进行检测。
17.尿检测方法，其特征在于，使用权利要求1～9中任一项所述的尿检测装置采集尿，
对使采尿后至少7天的尿中矿物质浓度稳定化的尿进行检测。
18.尿检测方法，其特征在于，使用权利要求1～9中任一项所述的尿检测装置采集尿，
对使采尿后至少7天的尿中蛋白质浓度稳定化的尿进行检测。
19.尿检测方法，其特征在于，使用权利要求1～9中任一项所述的尿检测装置采集尿，
对使采尿后至少3天的尿中维生素C浓度稳定化的尿进行检测。
20.尿检测方法，其特征在于，使用权利要求1～9中任一项所述的尿检测装置采集尿，
对使采尿后至少7天的尿中葡萄糖浓度稳定化的尿进行检测。
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