CN109907168A - 一种宠物口粮及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种宠物口粮及其制备方法，所述的宠物口粮以农业废渣为主原料，先通过黑木耳、灰树花和桦褐孔菌组合进行发酵分解，然后经过乳酸菌发酵，最后与豆粕、麸皮混合制备成宠物口粮，本发明能有效的降解废渣的木质素和半纤维素，提高发酵效率和口粮的适口性，黑木耳、灰树花和桦褐孔菌是药食两用真菌，富含丰富的营养物质，能促进宠物的胃部动力，促进消化吸收，提高免疫力。本发明制备的宠物口粮农业废渣降解率高，营养含量丰富，制备时间短，具有很好的发展前景。
Description
技术领域
本发明属于宠物饲料技术领域，特别涉及一种宠物口粮及其制备方法。
背景技术
我国是农业大国，农业废渣如甘蔗渣、木薯渣作为主要副产物之一，目前多用于燃烧和纸浆造纸，随着科技的不断进步，农业废渣作为优质资源的综合高值化利用将受到更多关注。目前废渣主要利用途径：一是直接燃烧产热发电，占蔗渣产生量的75%左右；二是作纸浆造纸原料，占废渣产生量的20%左右；饲料、肥料等其他用途占5%左右。农业废渣的主要成分中，纤维素为35%~50%、半纤维素19%~24%、木质素23%~32%，大大的影响了饲料的适口性，不利于消化。
发明专利CN201510360054.3，一种提高幼年宠物犬适口性的蘑菇味饲料及其制备方法，该饲料包括以下重量百分比的原料：蘑菇粉3.0%，豆粕28.0%，花生粕9.0%，麸皮5.0%，玉米粉35.0%，磷酸氢钙2.2%，畜禽骨泥蛋白8.5%，食用油3.0%，石粉2.0%，胡萝卜粉1.5%，贻贝足粉2.0%，食盐0.8%；还包括占上述原料总重的0.2%海藻糖，0.08%4-己基间苯二酚，0.02%复合维生素。该发明制备的蘑菇味饲料加水浸泡后饲料外形保持完整，适口性好，营养丰富全面，长期食用，能够使宠物犬增加免疫力，促进长发育及改善皮毛健康。
发明专利CN201110303174.1，利用香蕉酒渣制作宠物膨化饲料的方法，其技术方案是：酒渣干燥，粉碎，加入淀粉含量，调整水分含量，膨化成型。该发明可对香蕉酒渣中的粗纤维、蛋白质及K、Na、Ca、Mg等矿物质进行回收利用，变废为宝；挤压膨化处理可同时达到加工和成型的效果，对香蕉酒渣中的粗纤维、蛋白质进行降解和改性，提高其消化吸收利用率；消除或减少对周围环境的污染。该发明利用香蕉果酒渣生产挤压膨化饲料，达到了二次利用蛋白质、淀粉和膳食纤维的效果，提高了饲料的营养成分，生产工艺简化，加工周期短，经济效率高。
关于农业废渣中的活性多糖的提取纯化、木质素和纤维素的高效利用的研究报导较少，利用农业废渣制备宠物粮食具有很好的经济效益，但是农业废渣中木质素与半纤维素通过共价键联接成牢固的结合层是阻碍微生物降解纤维素的主要原因，是提高粮食适口性重点需要解决的问题。
发明内容
针对农业废渣降解难度大，制备的宠物口粮适口性差的问题，本发明提供一种农业废渣发酵制备宠物口粮的方法。
本发明制备的宠物口粮适用于猫、狗、鱼、仓鼠、鸟等宠物。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种宠物口粮，包括组分1、组分2和组分3，所述的组分1由以下重量份数比物质通过分解菌和乳酸菌发酵后制备而得：农业废渣20~40份、促进剂1~3份、豆粕5~10份、麸皮5~10份、罗汉果块根粉10~15份、食盐2~5份、食用油2~5份；所述的组分2包括以下重量份数比物质：玉米粉2~5份、小麦粉5~8份、土豆粉2~5份、食盐1~3份；所述的组分3由以下重量份数比物质组成：肉类20~50份、维生素5~10份、矿物质5~10份。
优选的，所述的农业废渣为甘蔗渣、木薯渣中的一种。
优选的，所述的促进剂为吐温80、油酸中的一种，体积分数为0.1~0.5%。
优选的，所述的食用油为花生油或橄榄油中的一种。
优选的，所述的肉类为猪肉、牛肉、羊肉、鱼肉、鸡肉、鸭肉中的一种或多种。
优选的，所述的维生素为维生素B、维生素E、维生素B12、维生素C中一种或多种。
优选的，所述的矿物质为K、Na、Ca、Zn、Fe中一种或多种。
本发明以农业废渣为主原料，利用黑木耳、桦褐孔菌和灰树花并添加有机酸和表面活性剂促进固态发酵农业废渣后，再经过乳酸菌发酵，最后与豆粕、麸皮混合制备而成的宠物口粮，能有效的降解农业废渣的木质素和半纤维素，保留纤维素，提高了发酵效率和饲料的适口性，黑木耳、桦褐孔菌和灰树花固态发酵相比于液态发酵，木质素的降解率远远大于纤维素的降解率，能保留更多的纤维素，更有利于饲料营养需求；黑木耳、桦褐孔菌和灰树花三类真菌均是药食两用菌，富含营养物质，能提高宠物的胃部动力，促进宠物进食与吸收，提高机体免疫力。乳酸菌发酵进一步改善了农业废渣发酵后的适口性和提供了酸香味，乳酸菌作为主要的可直接饲喂微生物可以降低瘤胃酸中毒发病率、提高免疫力。
本发明还提供了所述的宠物的口粮的制备方法，包括以下步骤：
（1）取无霉变的农业废渣去除杂质，然后将灭菌后的分解菌培养基均匀喷洒到农业废渣上，使农业废渣含水率达到10%~50%，得到发酵底料1；
（2）按照发酵底料1质量的5%接种分解菌液种子液，置于25~32℃条件下发酵，发酵1~3天时添加促进剂，待分解菌长出子实体后停止发酵，得到发酵后的农业废渣和分解菌子实体，即发酵底料2；
（3）将发酵底料2进行粉碎后，按照0.2L/kg发酵底料2的量加入乳酸菌培养基，然后接种发酵底料2质量5%的乳酸菌种子液，搅拌均匀，连续液态发酵10~15天，得到基料；
（4）将基料与豆粕、麸皮、罗汉果块根粉、食盐、食用油混合均匀得到组分1；
（5）将玉米粉、小麦粉、土豆粉、食盐混合，得到组分2；
（6）将肉类、维生素、矿物质混合，在常温下腌制30~60分钟，得到组分3；
（7）将组分1、组分2和组分3进行混合，然后在60~70℃下烘制8~10h，即得到宠物口粮；
所述的分解菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：CoCl2•6H2O 0.002g、CuSO4•5H2O0.002g、ZnSO4•7H2O 0.001g、FeSO4•7H2O 0.005g、KH2PO4 0.1g、K2HPO4•3H2O 0.05g、MgSO40.02g、MnCl2•4H2O 0.009g、CaCl2 0.05g、玉米粉1g、蛋白胨0.3g，pH为6.0；
所述的乳酸菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：蔗糖2g、蛋白胨1g，NaCl 0.5g。
作为本发明的进一步改进，所述宠物口粮的制备方法中，的步骤（2）的发酵为固态发酵。
作为本发明的进一步改进，所述的分解菌液种子液为黑木耳菌种子液、桦褐孔菌种子液和灰树花种子液中的两种组合，优选为黑木耳菌种子液、灰树花种子液组合或黑木耳菌种子液、桦褐孔菌种子液组合中的一种。
所述的桦褐孔菌种子液制备方法如下：
（1）在无菌条件下，用接种棒将原始桦褐孔菌接种到有Mea培养基的平板上，然后将平板放入恒温培养箱中，在相对湿度90%、温度25℃下培养10d，桦褐孔菌的菌丝不满平板，即活化的桦褐孔菌；
（2）用接种铲从活化的桦褐孔菌中取出4~5块大小约1~2cm的菌块，接种到液体培养基1中，然后将接种好的液体培养基置于恒温恒湿培养箱中，在相对湿度80%、温度25℃下培养3~4天后，将其转移到恒温摇床中，在温度28℃、转速150r/min下培养4~5天，即得到桦褐孔菌种子液；
所述的Mea培养基以100mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨0.3g、麦芽浸粉3g、琼脂1.5g，pH自然；
所述的液体培养基1以100mL计，由以下重量物质制备而得：KH2PO4 0.1g、MgSO4 0.15g、CaCl2 0.01g、酵母浸膏0.1g、蛋白胨0.3g、葡萄糖2g，pH自然。
所述的黑木耳菌种子液制备方法如下：
（1）于黑木耳菌母种试管中切出蚕豆大小的菌丝块，接种于PDA斜面培养基1中，在25℃下培养7天，得到活化的黑木耳菌丝；
（2）将活化的黑木耳菌丝切成小块，接种到PDB液体种子培养基中，装液量为150mL/500mL三角瓶，一支斜面活化的黑木耳菌丝接种一瓶，在25℃、200r/min摇床条件下培养4天，得到黑木耳菌种子液；
所述的PDA斜面培养基1以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，pH自然；所述PDA斜面培养基1的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液1；
（2）将混合液1用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液2；
（3）将混合液2用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基1；
所述的PDB液体种子培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g，pH自然；所述的PDB液体种子培养基的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液A；
（2）将混合液A用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖，得到混合液B；
（3）将混合液B补充水至1000mL，即得到PDB液体种子培养基。
所述的灰树花种子液制备方法如下：
（1）从野外采集得到的“灰树花”子实体上取1块叶片，用酒精擦拭2~3遍，然后切成米粒大小菌块，接种于PDA斜面培养基2，25℃下培养8~12天，复壮培养1~2次、培养5~7天后，取形态均一的菌落，即得到灰树花母种；
（2）利用金属打孔器从灰树花母种获得直径1cm的菌块，接种于液体培养基2中，在25℃、150r/min摇床中培养5~7天，即得到灰树花种子液；
所述的PDA斜面培养基2以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g，pH自然；所述的PDA斜面培养基2的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液a；
（2）将混合液a用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液b；
（3）将混合液b用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基2；
所述的液体培养基2以1000mL计，由以下重量物质制备而得：葡萄糖30g、蛋白胨2g、MgSO4·7H2O 1g、KH2PO4 2g、玉米浆15g。
所述的乳酸菌种子液制备方法如下：
将乳酸菌接种于MRS液体培养基中，在37℃下培养4~5天，即得到乳酸菌种子液；
所述的MRS液体培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母提取物5g、K2HPO4 2g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、MgSO4 0.5g、MnSO4 0.25g、吐温80 1mL，pH为6~7。
本发明的技术原理：
在乳酸菌液体发酵过程中，乳酸菌产生的胞外多糖能刺激黑木耳、灰树花和桦褐孔菌进行代谢，提高三种真菌对农业废渣的降解率；另一方面，黑木耳液态发酵产生的多糖能促进灰树花、桦褐孔菌胞外多酚物质和酶的产生量，有助于真菌分解废渣中的纤维素和半纤维素，提高发酵物质中的营养成分；同时，黑木耳多糖能改善灰树花对农业废渣发酵的适宜性。
吐温80、油酸能在很大程度上促进黑木耳和桦褐孔菌的菌丝体和胞内外多糖的产量，吐温可拮抗脂肪酸的合成，吐温80具有较长的C18链，可被微生物酶（如脂肪酶）分解成油酸，吐温80的存在也诱发了脂肪酶活性，由吐温80分解而来的油酸可以促进菌丝体的生长，吐温80还能促进黑木耳菌和桦褐孔菌从发酵液中更有效的吸收营养物质从而促使生物生长。而脂肪酸在膜形成过程中为甘油三酯合成提供原料，并在一定程度上影响脂脂酰链的饱和度，通过改变磷脂双分子层排列疏散程度从而增加细胞膜的流动性，结果导致细胞膜的通透性发生了改变，促使黑木耳菌和桦褐孔菌能充分利用发酵液中的营养物质的同时释放更多的多糖到细胞外，导致了细胞内外多糖的增加。
吐温80和油酸在不同的发酵时间进行添加，会影响菌体数和菌体分泌胞外多糖，为了能使菌体数最大和胞外多糖分泌最多达到平衡，经过试验验证，吐温80添加时间为底料1发酵的第1~2天，油酸添加时间为底料1发酵的第2~3天时最好。
本发明的有益效果：
1、本发明利用农业废渣甘蔗渣、木薯渣通过真菌和乳酸菌发酵降解木质素制备成宠物口粮，提高了农业废渣的利用率，增加了农业废渣的处理途径，为宠物饲料提供了新的制备途径，大大提高了原料的利用率，具有很好的经济效益。
2、本发明利用黑木耳、桦褐孔菌和灰树花三类真菌固态发酵降解农业废渣，提高了木质素和半纤维素的降解率，保留了更多的纤维素，提高了发酵效率，缩短了发酵时间；黑木耳、桦褐孔菌和灰树花三类菌子实体和发酵产生的粗蛋白与多糖为宠物口粮提供了更多的营养，再利用乳酸菌进行发酵提高口粮的香味，大大改善了农业废渣发酵制备的宠物口粮的适口性；
3、本发明利用吐温80和油酸促进了黑木耳、桦褐孔菌和灰树花菌体生长和细胞内/外多糖的含量，使菌体分泌更多的木质素分解酶和多糖，提高了木质素的降解率和为饲料提供更多的营养物质，进一步提高了发酵效率。同时利用乳酸菌、黑木耳、灰树花和桦褐孔菌在发酵过程代谢物质的相互利用、相互促进作用，进一步提高了农业废渣的降解效率和宠物口粮的营养物质，使得本发明制备的宠物口粮具有很大的营养价值。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
（1）取无霉变的甘蔗渣去除杂质，然后将灭菌后的分解菌培养基均匀喷洒到农业废渣上，使农业废渣含水率达到10%，得到发酵底料1；
（2）按照发酵底料1质量的5%接种分解菌液种子液，置于32℃条件下进行固态发酵，发酵3天时添加体积分数为0.1%的吐温80 3份，待分解菌长出子实体后停止发酵，得到发酵后的农业废渣和分解菌子实体，即发酵底料2；
所述的分解菌为黑木耳、灰树花组合，接种量分别为发酵底料1质量的2.5%。
（3）将发酵底料2进行粉碎后，按照0.2L/kg发酵底料2的量加入乳酸菌培养基，然后接种发酵底料2质量5%的乳酸菌种子液，搅拌均匀，连续液态发酵15天，得到基料；
所述的乳酸菌为鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌等量混合而得，每克含有活菌数＞4×108个。
（4）将基料与豆粕5份、麸皮5份、罗汉果块根粉10份、食盐2份、花生油2份混合均匀得到组分1；
（5）将玉米粉2份、小麦粉5份，土豆粉2份，黄粉虫粉4份，骨粉5份，食盐1份混合得到组分2；
（6）将肉类20份、维生素10份、矿物质10份混合，常温腌制20分钟，得到组分3；
（7）按照组分1、组分2、组分3质量比为3:4:3进行混合，在60℃下烘制10h，即得到宠物口粮；
所述的肉类为猪肉、牛肉、鸡肉等量混合制备而得；
所述的维生素为维生素B、维生素B12、维生素C等量混合而得；
所述的矿物质为K、Ca、Fe等量混合而得。
所述的分解菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：CoCl2•6H2O 0.002g、CuSO4•5H2O 0.002g、ZnSO4•7H2O 0.001g、FeSO4•7H2O 0.005g、KH2PO4 0.1g、K2HPO4•3H2O 0.05g、MgSO4 0.02g、MnCl2•4H2O 0.009g、CaCl2 0.05g、玉米粉1g、蛋白胨0.3g，pH为6.0；
所述的乳酸菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：蔗糖2g、蛋白胨1g，NaCl 0.5g。
所述的黑木耳菌种子液制备方法如下：
（1）于黑木耳菌母种试管中切出蚕豆大小的菌丝块，接种于PDA斜面培养基1中，在25℃下培养7天，得到活化的黑木耳菌丝；
（2）将活化的黑木耳菌丝切成小块，接种到PDB液体种子培养基中，装液量为150mL/500mL三角瓶，一支斜面活化的黑木耳菌丝接种一瓶，在25℃、200r/min摇床条件下培养4天，得到黑木耳菌种子液；
所述的PDA斜面培养基1以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，pH自然；所述的PDA斜面培养基1的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液1；
（2）将混合液1用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液2；
（3）将混合液2用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基1；
所述的PDB液体种子培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g，pH自然；所述的PDB液体种子培养基的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液A；
（2）将混合液A用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖，得到你混合液B；
（3）将混合液B补充水至1000mL，即得到PDB液体种子培养基。
所述的灰树花种子液制备方法如下：
（1）从野外采集得到的“灰树花”子实体上取1块叶片，用酒精擦拭2~3遍，然后切成米粒大小菌块，接种于PDA斜面培养基2，25℃下培养8天，复壮培养1次、培养5天后，取形态均一的菌落，即得到灰树花母种；
（2）利用金属打孔器从灰树花母种获得直径1cm的菌块，接种于液体培养基2中，在25℃、150r/min摇床中培养5天，即得到灰树花种子液；
所述的PDA斜面培养基2以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g，pH自然；所述的PDA斜面培养基2的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液a；
（2）将混合液a用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液b；
（3）将混合液b用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基2；
所述的液体培养基2以1000mL计，由以下重量物质制备而得：葡萄糖30g、蛋白胨2g、MgSO4·7H2O 1g、KH2PO4 2g、玉米浆15g。
所述的乳酸菌种子液制备方法如下：
将乳酸菌接种于MRS液体培养基中，在37℃下培养4天，即得到乳酸菌种子液；
所述的MRS液体培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母提取物5g、K2HPO4 2g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、MgSO4 0.5g、MnSO4 0.25g、吐温80 1mL，pH为6。
实施例2
（1）取无霉变的木薯渣去除杂质，然后将灭菌后的分解菌培养基均匀喷洒到农业废渣上，使农业废渣含水率达到50%，得到发酵底料1；
（2）按照发酵底料1质量的5%接种分解菌液种子液，置于25℃条件下进行固态发酵，发酵1天时添加体积分数为0.5%的油酸1份，待分解菌长出子实体后停止发酵，得到发酵后的农业废渣和分解菌子实体，即发酵底料2；
所述的分解菌为黑木耳、桦褐孔菌组合，接种量分别为发酵底料1质量的2.5%。
（3）将发酵底料2进行粉碎后，按照0.2L/kg发酵底料2的量加入乳酸菌培养基，然后接种发酵底料2质量5%的乳酸菌种子液，搅拌均匀，连续液态发酵10天，得到基料；
所述的乳酸菌为鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌等量混合而得，每克含有活菌数＞4×108个。
（4）将基料与豆粕10份、麸皮10份、罗汉果块根粉15份、食盐5份、花生油或橄榄油5份混合均匀得到组分1；
（5）将玉米粉5份、小麦粉8份，土豆粉5份，黄粉虫粉7份，骨粉10份，食盐3份混合得到组分2；
（6）将肉类50份、维生素5份、矿物质5份混合，常温腌制40分钟，得到组分3；
（7）按照组分1、组分2、组分3质量比为4:4:2进行混合，在70℃下烘制8h，即得到宠物口粮；
所述的肉类为鸡肉、鸭肉、鱼肉等量混合而得；
所述的维生素为维生素B、维生素E、维生素B12、维生素C等量混合而得；
所述的矿物质为K、Na、Ca、Zn、Fe等量混合而得。
所述的分解菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：CoCl2•6H2O 0.002g、CuSO4•5H2O 0.002g、ZnSO4•7H2O 0.001g、FeSO4•7H2O 0.005g、KH2PO4 0.1g、K2HPO4•3H2O 0.05g、MgSO4 0.02g、MnCl2•4H2O 0.009g、CaCl2 0.05g、玉米粉1g、蛋白胨0.3g，pH为6.0；
所述的乳酸菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：蔗糖2g、蛋白胨1g，NaCl 0.5g。
所述的桦褐孔菌种子液制备方法如下：
（1）在无菌条件下，用接种棒将原始桦褐孔菌接种到有Mea培养基的平板上，然后将平板放入恒温培养箱中，在相对湿度90%、温度25℃下培养10d，桦褐孔菌的菌丝不满平板，即活化的桦褐孔菌；
（2）用接种铲从活化的桦褐孔菌中取出5块大小约1~2cm的菌块，接种到液体培养基1中，然后将接种好的液体培养基置于恒温恒湿培养箱中，在相对湿度80%、温度25℃下培养4天后，将其转移到恒温摇床中，在温度28℃、转速150r/min下培养5天，即得到桦褐孔菌种子液；
所述的Mea培养基以100mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨0.3g、麦芽浸粉3g、琼脂1.5g，pH自然；
所述的液体培养基1以100mL计，由以下重量物质制备而得：KH2PO4 0.1g、MgSO4 0.15g、CaCl2 0.01g、酵母浸膏0.1g、蛋白胨0.3g、葡萄糖2g，pH自然。
所述的黑木耳菌种子液制备方法如下：
（1）于黑木耳菌母种试管中切出蚕豆大小的菌丝块，接种于PDA斜面培养基1中，在25℃下培养7天，得到活化的黑木耳菌丝；
（2）将活化的黑木耳菌丝切成小块，接种到PDB液体种子培养基中，装液量为150mL/500mL三角瓶，一支斜面活化的黑木耳菌丝接种一瓶，在25℃、200r/min摇床条件下培养4天，得到黑木耳菌种子液；
所述的PDA斜面培养基1以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，pH自然；所述的PDA斜面培养基1的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液1；
（2）将混合液1用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液2；
（3）将混合液2用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基1；
所述的PDB液体种子培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g，pH自然；所述的PDB液体种子培养基的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液A；
（2）将混合液A用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖，得到混合液B；
（3）将混合液B补充水至1000mL，即得到PDB液体种子培养基。
所述的乳酸菌种子液制备方法如下：
将乳酸菌接种于MRS液体培养基中，在37℃下培养5天，即得到乳酸菌种子液；
所述的MRS液体培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母提取物5g、K2HPO4 2g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、MgSO4 0.5g、MnSO4 0.25g、吐温80 1mL，pH为7。
实施例3
（1）取无霉变的甘蔗渣去除杂质，然后将灭菌后的分解菌培养基均匀喷洒到农业废渣上，使农业废渣含水率达到30%，得到发酵底料1；
（2）按照发酵底料1质量的5%接种分解菌液种子液，置于30℃条件下进行固态发酵，发酵2天时添加体积分数为0.4%的吐温802份，待分解菌长出子实体后停止发酵，得到发酵后的农业废渣和分解菌子实体，即发酵底料2；
所述的分解菌为黑木耳、桦褐孔菌组合，接种量分别为发酵底料1质量的2.5%。
（3）将发酵底料2行粉碎后，按照0.2L/kg发酵底料2的量加入乳酸菌培养基，然后接种发酵底料2质量5%的乳酸菌种子液，搅拌均匀，连续液态发酵12天，得到基料；
所述的乳酸菌为鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌等量混合而得，每克含有活菌数＞4×108个。
（4）将基料与豆粕6份、麸皮8份、罗汉果块根粉12份、食盐4份、花生油3份混合均匀得到组分1；
（5）将玉米粉3份、小麦粉6份，土豆粉4份，黄粉虫粉5份，骨粉7份，食盐2份混合得到组分2；
（6）将肉类30份、维生素8份、矿物质6份混合，常温腌制30分钟，得到组分3；
（7）按照组分1、组分2、组分3质量比为4:5:1进行混合，在65℃下烘制10h，即得到宠物口粮；
所述的肉类为猪肉、羊肉、鱼肉、鸭肉等量混合而得；
所述的维生素为维生素B、维生素E、维生素C等量混合而得；
所述的矿物质为K、Na、Ca、Zn等量混合而得。
所述的分解菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：CoCl2•6H2O 0.002g、CuSO4•5H2O 0.002g、ZnSO4•7H2O 0.001g、FeSO4•7H2O 0.005g、KH2PO4 0.1g、K2HPO4•3H2O 0.05g、MgSO4 0.02g、MnCl2•4H2O 0.009g、CaCl2 0.05g、玉米粉1g、蛋白胨0.3g，pH为6.0；
所述的乳酸菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：蔗糖2g、蛋白胨1g，NaCl 0.5g。
所述的桦褐孔菌种子液制备方法如下：
（1）在无菌条件下，用接种棒将原始桦褐孔菌接种到有Mea培养基的平板上，然后将平板放入恒温培养箱中，在相对湿度90%、温度25℃下培养10d，桦褐孔菌的菌丝不满平板，即活化的桦褐孔菌；
（2）用接种铲从活化的桦褐孔菌中取出4~5块大小约1~2cm的菌块，接种到液体培养基1中，然后将接种好的液体培养基置于恒温恒湿培养箱中，在相对湿度80%、温度25℃下培养3~4天后，将其转移到恒温摇床中，在温度28℃、转速150r/min下培养4~5天，即得到桦褐孔菌种子液；
所述的Mea培养基以100mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨0.3g、麦芽浸粉3g、琼脂1.5g，pH自然；
所述的液体培养基1以100mL计，由以下重量物质制备而得：KH2PO4 0.1g、MgSO4 0.15g、CaCl2 0.01g、酵母浸膏0.1g、蛋白胨0.3g、葡萄糖2g，pH自然。
所述的黑木耳菌种子液制备方法如下：
（1）于黑木耳菌母种试管中切出蚕豆大小的菌丝块，接种于PDA斜面培养基1中，在25℃下培养7天，得到活化的黑木耳菌丝；
（2）将活化的黑木耳菌丝切成小块，接种到PDB液体种子培养基中，装液量为150mL/500mL三角瓶，一支斜面活化的黑木耳菌丝接种一瓶，在25℃、200r/min摇床条件下培养4天，得到黑木耳菌种子液；
所述的PDA斜面培养基1以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，pH自然；所述的PDA斜面培养基1的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液1；
（2）将混合液1用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液2；
（3）将混合液3用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基1；
所述的PDB液体种子培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g，pH自然；所述的PDB液体种子培养的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液A；
（2）将混合液A用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖，得到混合液B；
（3）将混合液B补充水至1000mL，即得到PDB液体种子培养基。
所述的乳酸菌种子液制备方法如下：
将乳酸菌接种于MRS液体培养基中，在37℃下培养4~5天，即得到乳酸菌种子液；
所述的MRS液体培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母提取物5g、K2HPO4 2g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、MgSO4 0.5g、MnSO4 0.25g、吐温80 1mL，pH为6~7。
试验例1
将本发明实施例1制备的宠物口粮和普通市售宠物猫粮分别喂养30只宠物猫，连续喂养3个月，对宠物猫生病总只数、每月体重增长值（平均值）
进行统计，结果见表1。
表1 宠物猫生长情况表
试验例2
将本发明实施例2制备的宠物口粮和普通市售的仓鼠口粮分别喂养50只仓鼠，连续喂养3个月，对仓鼠的每周进食总量（平均值）、体重增长值（平均值）、生病总次数进行统计，统计结果见表2。
表2 仓鼠生长情况表
试验例3
将本发明实施例3制备的宠物口粮和普通市售的狗粮分别喂养20只宠物狗，连续喂养6个月，对宠物狗病菌感染导致生病的总次数和每月体重增长数值（平均值）进行统计，结果见表3和表4。
表3 宠物狗生病次数
表4 宠物狗每月体重增长值
由试验例1~3各项数据结果显示，相比于市售的普通饲料，本发明制备的宠物口粮能有效提高宠物的机体免疫力，促进宠物生长。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。
Claims (10)
1.一种宠物口粮，其特征在于，包括组分1、组分2和组分3；所述的组分1由以下重量份数比物质通过分解菌和乳酸菌发酵后制备而得：农业废渣20~40份、促进剂1~3份、豆粕5~10份、麸皮5~10份、罗汉果块根粉10~15份、食盐2~5份、食用油2~5份；所述的组分2包括以下重量份数比物质：玉米粉2~5份、小麦粉5~8份、土豆粉2~5份、食盐1~3份；所述的组分3由以下重量份数比物质组成：肉类20~50份、维生素5~10份、矿物质5~10份；
所述的农业废渣为甘蔗渣、木薯渣中的一种；
所述的促进剂为吐温80、油酸中的一种，体积分数为0.1~0.5%；
所述的食用油为花生油、橄榄油中的一种；
所述的肉类为猪肉、牛肉、羊肉、鱼肉、鸡肉、鸭肉中的一种或多种；
所述的维生素为维生素B、维生素E、维生素B12、维生素C中一种或多种；
所述的矿物质为K、Na、Ca、Zn、Fe中一种或多种。
2.根据权利要求1所述的宠物口粮，其特征在于，所述的组分1、组分2、组分3质量比为(3~4):(4~5):(1~3)。
3.根据权利要求1所述的所述的宠物口粮，其特征在于，所述的乳酸菌为鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌等量混合而得，每克含有活菌数＞4×108个。
4.如权利要求1~3任一所述宠物口粮的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）取无霉变的农业废渣去除杂质，然后将灭菌后的分解菌培养基均匀喷洒到农业废渣上，使农业废渣含水率达到10%~50%，得到发酵底料1；
（2）按照发酵底料1质量的5%接种分解菌液种子液，置于25~32℃条件下发酵，发酵1~3天时添加促进剂，待分解菌长出子实体后停止发酵，得到发酵后的农业废渣和分解菌子实体，即发酵底料2；
（3）将发酵底料2进行粉碎后，按照0.2L/kg发酵底料2的量加入乳酸菌培养基，然后接种发酵底料2质量5%的乳酸菌种子液，搅拌均匀，连续液态发酵10~15天，得到基料；
（4）将基料与豆粕、麸皮、罗汉果块根粉、食盐、食用油混合均匀得到组分1；
（5）将玉米粉、小麦粉、土豆粉、食盐混合，得到组分2；
（6）将肉类、维生素、矿物质混合，在常温下腌制30~60分钟，得到组分3；
（7）将组分1、组分2和组分3进行混合，然后在60~70℃下烘制8~10h，即得到宠物口粮；
所述的分解菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：CoCl2•6H2O 0.002g、CuSO4•5H2O0.002g、ZnSO4•7H2O 0.001g、FeSO4•7H2O 0.005g、KH2PO4 0.1g、K2HPO4•3H2O 0.05g、MgSO40.02g、MnCl2•4H2O 0.009g、CaCl2 0.05g、玉米粉1g、蛋白胨0.3g，pH为6.0；
所述的乳酸菌培养基以100mL计，含有以下重量物质：蔗糖2g、蛋白胨1g，NaCl 0.5g。
5.根据权利要求4所述的宠物口粮的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）的发酵为固态发酵。
6.根据权利要求4所述的宠物口粮的制备方法，其特征在于，所述的乳酸菌种子液制备方法如下：
将乳酸菌接种于MRS液体培养基中，在37℃下培养4~5天，即得到乳酸菌种子液；
所述的MRS液体培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母提取物5g、K2HPO4 2g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、MgSO4 0.5g、MnSO4 0.25g、吐温80 1mL，pH为6~7。
7.根据权利要求4所述的宠物口粮的制备方法，其特征在于，所述的分解菌液种子液为黑木耳菌种子液、桦褐孔菌种子液和灰树花种子液中的两种组合，优选为黑木耳菌种子液、灰树花种子液组合或黑木耳菌种子液、桦褐孔菌种子液组合中的一种。
8.根据权利要求7所述的宠物口粮的制备方法，其特征在于，所述的桦褐孔菌种子液制备方法如下：
（1）在无菌条件下，用接种棒将原始桦褐孔菌接种到有Mea培养基的平板上，然后将平板放入恒温培养箱中，在相对湿度90%、温度25℃下培养10d，桦褐孔菌的菌丝不满平板，即活化的桦褐孔菌；
（2）用接种铲从活化的桦褐孔菌中取出4~5块大小约1~2cm的菌块，接种到液体培养基1中，然后将接种好的液体培养基置于恒温恒湿培养箱中，在相对湿度80%、温度25℃下培养3~4天后，将其转移到恒温摇床中，在温度28℃、转速150r/min下培养4~5天，即得到桦褐孔菌种子液；
所述的Mea培养基以100mL计，由以下重量物质制备而得：蛋白胨0.3g、麦芽浸粉3g、琼脂1.5g，pH自然；
所述的液体培养基1以100mL计，由以下重量物质制备而得：KH2PO4 0.1g、MgSO4 0.15g、CaCl2 0.01g、酵母浸膏0.1g、蛋白胨0.3g、葡萄糖2g，pH自然。
9.根据权利要求7所述的宠物口粮的制备方法，其特征在于，所述的黑木耳菌种子液制备方法如下：
（1）于黑木耳菌母种试管中切出蚕豆大小的菌丝块，接种于PDA斜面培养基1中，在25℃下培养7天，得到活化的黑木耳菌丝；
（2）将活化的黑木耳菌丝切成小块，接种到PDB液体种子培养基中，装液量为150mL/500mL三角瓶，一支斜面活化的黑木耳菌丝接种一瓶，在25℃、200r/min摇床条件下培养4天，得到黑木耳菌种子液；
所述的PDA斜面培养基1以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，pH自然；所述PDA斜面培养基1的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液1；
（2）将混合液1用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液2；
（3）将混合液2用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基1；
所述的PDB液体种子培养基以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g，pH自然；所述的PDB液体种子培养基的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液A；
（2）将混合液A用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖，得到混合液B；
（3）将混合液B补充水至1000mL，即得到PDB液体种子培养基。
10.根据权利要求7所述的宠物口粮的制备方法，其特征在于，所述的灰树花种子液制备方法如下：
（1）从野外采集得到的“灰树花”子实体上取1块叶片，用酒精擦拭2~3遍，然后切成米粒大小菌块，接种于PDA斜面培养基2上，25℃下培养8~12天，复壮培养1~2次、培养5~7天后，取形态均一的菌落，即得到灰树花母种；
（2）利用金属打孔器从灰树花母种获得直径1cm的菌块，接种于液体培养基2中，在25℃、150r/min摇床中培养5~7天，即得到灰树花种子液；
所述的PDA斜面培养基2以1000mL计，由以下重量物质制备而得：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g，pH自然；所述的PDA斜面培养基2的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取200g马铃薯先洗净去皮后切成小块，加1000mL水煮烂，得到混合液a；
（2）将混合液a用八层纱布过滤取滤液，在滤液中加入上述质量的葡萄糖和琼脂，得到混合液b；
（3）将混合液b用小火加热并不断搅拌，待琼脂完全溶解后，补充水至1000mL，即得到PDA斜面培养基2；
所述的液体培养基2以1000mL计，由以下重量物质制备而得：葡萄糖30g、蛋白胨2g、MgSO4·7H2O 1g、KH2PO4 2g、玉米浆15g。
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