CN109843300B - 一种化合物的结晶多晶型形式 - Google Patents

Abstract

本发明涉及3‑羟基‑4,5‑双苄氧基‑6‑苄氧基甲基‑2‑苯基‑2‑氧代‑2λ5‑[1,2]氧杂膦环己烷的新结晶多晶型形式及其制备方法。

Description

一种化合物的结晶多晶型形式

技术领域

本发明涉及3-羟基-4,5-双苄氧基-6-苄氧基甲基-2-苯基-2-氧代 -2λ5-[1,2]氧杂膦环己烷(3-Hydroxy-4,5-bis-benzyloxy-6-benzyloxymethyl- 2-phenyl-2-oxo-2λ5-[1,2]oxa phosphinane)的新结晶多晶型形式及其制备方法。

背景技术

3-羟基-4,5-双苄氧基-6-苄氧基甲基-2-苯基-2-氧代-2λ5-[1,2]氧杂膦环己烷(其他名称：4,5-双(苄氧基)-6-((苄氧基)甲基)-3-羟基-2-苯基-1,2- 氧杂膦环己烷2-氧化物)在本发明中称为“化合物I”。化合物I是一种已被证明为有效的抗癌剂并且特别是用于减少或预防转移出现的化合物 (在以前的文献中也称为3.48或3.1)，如分别由PCT申请WO2009/004096和WO2014/128429所述的。化合物I及其对成胶质细胞瘤的用途在J.Med.Chem.2012,55,2196-2211中有更具体的披露。本文提供的合成化合物I的方法实例允许其以四个非对映异构体的混合物的形式形成，所述混合物由两个手性中心的生成而产生。在形成的四种对映纯的非对映异构体中，最有效的非对映异构体为PST3.1a。

如所引用的现有技术中所公开的，PST3.1a(在本文中也称为式(I) 的化合物)的合成可通过使2,3,5-三-O-苄基***糖3与苯膦酸乙酯4 反应来进行，如以下路线1所示。

在THF(四氢呋喃)中处理等摩尔的3和4，然后加入叔丁醇钾，实际上得到约等摩尔量的4种非对映异构体的混合物。在本说明书中，所述4种非对映异构体的混合物称为“混合物A”，且其中包含的非对映异构体如下所示(路线2)。

搅拌所得混合物(混合物A)并蒸发溶剂后，加入氯仿，并用氯化铵洗涤所得有机溶液，干燥，过滤，并蒸发溶剂，得到含所述四种非对映异构体的黄色油状残余物。在硅胶色谱上纯化后，可以在制备型反相 HPLC上通过色谱法分离所述四种非对映异构体。但是，PST3.1a的总收率很低(约为4％)。为了提高PST3.1a的总收率，还用了其他色谱法或基于分级结晶的方法。然而，这些方法中涉及的技术规范、溶剂和/或纯化技术不能使其有效且容易地转化为工业规模。

有机合成的永久目标是创造可转化为工业条件的合成工艺。为了满足工业过程的要求，要优化合成的不同参数。首先，溶剂必须具有尽可能小的挥发性，以便易于回收。因此，优选避免氯化挥发性溶剂(例如二氯甲烷、氯仿和/或四氯化碳)。此外，所需试剂的当量数量优选是有限的，所涉及的温度最好保持在容易接近的范围内，并优选易于进行纯化步骤。最后，反应混合物和分离的产物优选是热稳定的。

现行药品生产管理规范(c-GMP)已被定义为给药于人或动物的药物产品的制备。GMP规范要求采用质量方法进行生产，使企业能够最小化或消除污染、混淆和错误的情况。GMP规范处理的问题包括记录保存、人员资格、卫生、清洁、设备验证、工艺验证和投诉处理。

据申请人所知，到目前为止还没有描述合成化合物PST3.1a的工业可应用的方法。

因此，本发明的一个目的是提供制备PST3.1a的方法，所述方法与使用不安全的化合物(例如氯仿和***)和/或柱色谱的现有技术的方法相比，可以容易且有效地适应工业规模。

此外，由于人类治疗通常需要高纯度形式(通常大于99.0％)的药物，因此，兼有控制异构体的形成和易于最终纯化的方法特别有利。

此外，除了方法问题之外，本发明的目的为提供化合物I的固态物理性质。通过控制以固体形式获得化合物I的条件可以影响这些性质。固态物理性质包括，例如，研磨固体的流动性。流动性影响在加工成药物产品过程中处理材料的难易程度。当粉末状化合物的颗粒不容易相互流动时，制剂专业人员必须使用助流剂，例如胶体二氧化硅、滑石粉、淀粉或磷酸三钙。

药物化合物的另一个重要的固态性质是其在含水流体中的溶出速率。活性成分在患者胃液中的溶出速率可具有治疗后果，因为其对口服给药的活性成分能达到患者血流的速率施加了上限。溶出速率也是配制糖浆、酏剂和其他液体药物中的一个考虑因素。化合物的固态形式也可影响其在压实性能和贮存稳定性方面的性能(behavior)。

这些实际的物理特性受到晶胞中分子的构象和取向的影响，其定义了物质的特定多晶型形式。所述多晶型形式可以产生不同于无定形物质或另一种多晶型形式的热性能。热性能在实验室中利用诸如毛细管熔点、热重分析(TGA)和差示扫描量热法(DSC)的技术测量，并且可以用于将某些多晶型形式与其他形式区分开来。特定的多晶型形式还可以产生可以通过粉末X射线晶体学和红外光谱法检测的不同光谱性质。

通常，结晶固体相对于无定形形式以及具有低结晶度的形式具有改善的化学和物理稳定性。其还可以表现出较低的吸湿性、改善的堆积性能和/或流动性。

药学上有用的化合物的新多晶型形式的发现为改善药物产品的性能特征提供了新的机会。其扩大了制剂科学家可用于设计，例如，具有目标释放曲线或其他所需特征的药物剂型的材料库。本领域需要结晶的化合物I及其有利的多晶型形式。

发明内容

本发明涉及3-羟基-4,5-双苄氧基-6-苄氧基甲基-2-苯基-2-氧代 -2λ5-[1,2]氧杂膦环己烷的新的结晶多晶型物形式，其作为药物具有高可用性，可用作人用药物或兽用药物。

本发明还涉及制备所述结晶多晶型形式的方法，特别是从PST3.1a 开始制备。

本发明还涉及制备所述结晶多晶型形式的总体方法，更具体地说，从2,3,5-三-O-苄基***糖3与苯膦酸乙酯4的反应开始制备。

另一方面，本发明提供药物组合物，其包含本文所述的结晶多晶型形式(更具体地，所述结晶多晶型形式是通过本发明的方法制备的)，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

本发明进一步提供制备药物制剂的方法，其包括将本文所述的结晶多晶型形式与至少一种药学上可接受的赋形剂组合。

本发明进一步提供本文所述的结晶多晶型形式，其作为药物，特别是用于治疗患有癌症的患者的癌症和/或用于减少或预防转移的出现。

本发明进一步提供本文所述的结晶多晶型形式用于制备药物组合物的用途，所述药物组合物用于治疗患有癌症的患者癌症和/或用于减少或预防转移的出现。

附图说明

除非另有说明，否则在本发明的说明书和权利要求中使用以下缩写和名称：

Ph＝苯基；Et＝乙基；tBu＝叔丁基；Ac＝乙酰基

THF＝四氢呋喃

MeTHF＝2-甲基四氢呋喃

MTBE＝甲基叔丁基醚

rt＝室温

vol.＝体积

eq.＝当量

NMR＝核磁共振

HPLC＝高效液相色谱

图1说明了本发明的结晶形式(如实施例1制备)的粉末X-射线衍射图，其特征在于在约8.65、16.06、16.53、19.16和21.05±0.20°2θ处的X-射线粉末衍射反射。

图2说明了本发明的结晶形式(如实施例1制备)的DSC分析。

图3说明了本发明的结晶形式(如实施例1制备)的热重分析。

图4说明在DVS分析期间本发明的结晶形式(如实施例1制备)的 RH％步骤期间的质量变化对时间的关系。

图5说明在DVS分析期间本发明的结晶形式(如实施例1制备)的质量值对RH％的关系。

图6为本发明的结晶形式(如实施例1制备)的RMN ¹H-CDCl3波谱，其包括目标范围的扩大(上)。

图7为本发明的结晶形式(如实施例1制备)的RMN ³¹P波谱，其包括目标范围的扩大(上)。

图8为本发明的结晶形式(如实施例1制备)的RMN ¹³C-CDCl3 波谱，其包括目标范围的扩大(上)。

具体实施方案

如本文所用，术语“环境温度”或“室温”是指约15℃至约30℃的温度。

在本公开中，英文单数形式“a”、“an”和“the”包括复数个提及物，并且对特定数值的提及至少包括该特定值，除非上下文另有明确说明。因此，例如，提及“溶剂”是指提及一种或多种这样的溶剂以及其对于本领域技术人员来说的等同，等等。

如本文所用，术语“约”或“大约”会为本领域技术人员所理解，并且在某种程度上会根据其使用的上下文而变化。如果考虑使用所述术语的上下文，所述术语的使用对于本领域技术人员而言不清楚，那么“约”或“大约”将意味着所述特定术语的至多正负10％。

除非另有说明，否则百分比在本文中表示为重量。

根据本发明，术语“包含(comprise(s)或comprising)”(及其他类似术语，例如“含有(containing)”和“包括(including)”)是“开放式的”并且通常可以解释为包括所有具体提到的特征和任何任选的、额外的及未指明的特征。除非另有说明，其也可以被解释为短语“基本上由......组成”(其中包括指明的特征和不实质性地影响所要求保护的发明的基本和新颖特征的任何任选的、额外的和未指明的特征)，或者也可以被解释为短语“由......组成”(其中仅包括指明的特征)。

如本文所用，术语“治疗(treatment)或(therapy)”(以及其不同的词形式)包括预防性(preventative)(例如预防性(prophylactic))、治愈性或缓解性治疗。此类预防性、治愈性或缓解性治疗可为完全或部分的。例如，完全消除不期望的症状或部分消除一种或多种不期望的症状代表本文所考虑的“治疗”。

如上文和整个公开内容所使用的，术语“有效量”是指达到相关疾病、病症或副作用的治疗的期望结果所需要的在剂量和时间段方面有效的量。应当理解，本发明的结晶多晶型形式的有效量会因患者而异，不仅随所选的特定化合物、组分或组合物、给药途径以及所述结晶多晶型形式在个体中引起期望的反应的能力而变化，而且随诸如疾病状态或所要缓解的病症的严重程度、个体的年龄、性别、体重、患者的身体状况以及所治疗病症的严重程度、特定患者彼时进行的同时用药或特殊饮食，以及本领域技术人员会认识到的其他因素而变化，最终由主治医生决定适当剂量。剂量方案可以调整，以提供改善的治疗反应。有效量也是这样的量，在该量下所述结晶多晶型形式的毒性或有害作用被治疗有益效果超过。例如，可用于本发明治疗方法的结晶多晶型形式以一定的剂量给药一定的时间，使得转移率和/或其出现与治疗开始前的水平相比降低。

“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适合与人类和动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、***反应或其他难处理的并发症并具有合理的收益/风险比的那些的化合物、材料、组合物和/或剂型。

除非不相容，否则本文中指定的每个具体/优选/特定实施方案可彼此组合。

文献J.Med.Chem.2012,55,2196-2211、PCT申请WO2009/004096 和WO2014/128429公开了通过色谱法分离和回收PST3.1a。然而，获得的固体形式为多晶型形式的混合物。

本发明提供化合物I的结晶形式，其特征在于在约8.65、16.06、16.53、 19.16和21.05±0.20°2θ，优选±0.1°2θ处的粉末x射线衍射反射。该结晶形式的特征还在于在约14.04、17.69、19.66、22.02和25.12±0.20°2θ处的粉末X射线衍射反射，或者基本上如下图1或表1中所示的粉末X 射线衍射反射。

表1

优选地，本发明化合物I的这种结晶形式具有少于约20％的所存在的任何其他形式的化合物I，更优选少于约10％的所存在的任何其他形式的化合物I，甚至更优选地是基本上纯的形式，即具有小于约5％的所存在的任何其他形式的化合物I，且最优选具有少于约2％的所存在的任何其他形式的化合物I。

在一个特定实施方案中，通过差示扫描量热法(DSC)，以10℃/min 的加热速率，本发明化合物I的所述结晶形式的熔点为175.5-177.5℃，更特别地为176.2℃±0.4℃(或±0.3℃)。

在特定实施方案中，通过热重分析(“TGA”)，在约25℃至250℃的范围内(即在其熔点之前和之后)测量，化合物I的这种结晶形式没有显示出显著的重量损失。在特定实施方案中，通过卡尔费休(Karl Fisher) 测量的水含量至多为约0.3％(w/w)。

在特定实施方案中，本发明的结晶形式是非吸湿性的。更具体地，对于所研究的相对湿度范围(0％RH至95％RH)，对本发明的结晶形式的动态蒸气吸附(DVS)分析显示重量损失低于0.1％。

根据特定实施方案，通过激光衍射方法测量的体积当量球直径 (volumeequivalent sphere diameter)如下变化：D10：从70nm至80nm，和/或D50％：从140nm至160nm，和/或D90：从360nm至380nm。D10、 D50和D90分别表示通过激光衍射法测量的颗粒数的10％、50％和90％的平均直径。例如，D10直径是这样的直径，在该直径下10％的颗粒包含较小颗粒，D50是这样的直径，在该直径下50％的颗粒包含较小颗粒。

本发明的另一个目的涉及用于制备本发明的结晶形式的方法，所述方法包括至少一个含有异构体PST3.1a和丙酮的溶液的结晶步骤。优选地，所述溶液是在丙酮中的饱和PST3.1a溶液。在更具体的实施方案中，所述溶液还包含异构体PST3.1b。所述溶液中PST3.1a/PST3.1b的重量比可以为40/60至90/10，优选为50/50至90/10，更具体地为60/40至85/15。

所述结晶步骤(重结晶和分离)可以包括冷却方法(包括冷却结晶***的方法)、弱溶剂添加方法(包括向结晶***添加弱溶剂的方法)和任何其他方法。在特定实施方案中，所述结晶步骤包括冷却方法。对于所述冷却方法，冷却速率不特别局限于特定的一个。冷却可以是快速冷却或优选缓慢冷却。冷却速率可以是例如约0.1℃/分钟至20℃/分钟，优选约5℃/分钟至15℃/分钟，以及更优选约10℃/分钟至15℃/分钟。

根据优选的实施方案，用于制备本发明的结晶形式的方法包括1、2、 3、4或5个结晶步骤。优选地，包含异构体PST3.1a和丙酮的溶液的结晶步骤是最后的结晶步骤。根据特定的实施方案，在用丙酮的结晶步骤之前的一或多个结晶步骤是用包含异构体PST3.1a和溶剂的溶液进行的，所述溶剂选自丙酮和乙醇，并任选地与水或甲基叔丁基醚(MTBE) 组合。优选地，本发明方法中的一或多个结晶步骤的一或多种溶液是在所选溶剂中的饱和PST3.1a溶液。

根据特定实施方案，在用丙酮的结晶步骤之前的结晶步骤是用包含异构体PST3.1a和乙醇(任选地具有水或MTBE，或优选作为唯一溶剂- 纯溶剂)的溶液进行的。优选地，用包含异构体PST3.1a和乙醇的溶液进行两个结晶步骤，然后进行包含异构体PST3.1a和丙酮的溶液的一个结晶步骤。

在所述结晶步骤中使用的PST3.1a可以来自用于制备它的任何已知的方法，例如引用的现有技术中描述的方法。通常，PST3.1a存在于混合物A(具有如前所述的3种其他非对映异构体)中或存在于包含 PST3.1a和PST3.1b化合物(仅有的非对映异构体)的混合物中。所述混合物中非对映异构体的比例可以在宽范围内变化，并且通常取决于用于制备它们的方法。根据优选的实施方案，在本发明的结晶步骤之前，混合物中PST3.1a相对于其它非对映异构体的比例最高，但仍然不令人满意(例如通过³¹P NMR测得小于90％、或甚至小于95％或98％)。如上所述，在特定实施方案中，所述混合物还包含异构体PST3.1b。所述混合物中PST3.1a/PST3.1b的重量比可以为40/60至90/10，优选可以为 50/50至90/10，更特别地可以为60/40至85/15。

上述的一或多个结晶步骤不仅允许制备根据本发明以及如上所述的多晶型形式，而且还允许使PST3.1a(相对于其他三种非对映异构体，特别是PST3.1b)的比例增加至高达99％(通过³¹P NMR测量)，同时产生令人满意的收率。

根据特定实施方案，通过包括以下步骤的方法制备实施结晶步骤的 PST3.1a：

a.在叔丁醇钾存在下，使2,3,5-三-O-苄基***糖3和苯膦酸乙酯 4在有机溶剂中接触；

b.向步骤a)的溶液中加入叔丁醇钾的中和剂；

c.向步骤b)的混合物中加入水不混溶性有机溶剂，以允许倾析有机层；

d.用水洗涤，然后加入醚类或甲苯溶剂；以及

e.回收PST3.1a，优选通过过滤回收。

步骤a)的有机溶剂可以是任何类型，更优选地其选自THF、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、MeTHF、丙酮、甲苯及其混合物。在特定实施方案中，步骤a)的溶剂是THF。

步骤b)的中和剂可以是能够淬灭步骤a)中的叔丁醇钾的任何试剂。所述中和剂可以是任何高度稀释的酸溶液，包括过量的水。在特定实施方案中，所述中和剂是NH₄Cl。

步骤c)的水不混溶性有机溶剂可以是二氯甲烷、氯仿，或优选乙酸乙酯。

步骤d)的溶剂可以是甲苯或醚类如异丙醚、或优选甲基叔丁基醚。

根据优选的实施方案，在步骤(a)中，化合物3和4各自使用1 摩尔当量。

根据优选的实施例，步骤(a)在室温至40℃的温度下、更优选在室温下，以及优选在约大气压下进行。

根据另一实施方案，用于制备本发明的结晶多晶型形式的方法包括如上详述的步骤(a)至(e)，然后是如上所述的重结晶步骤。

在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含本文所述的结晶多晶型形式(更特别地，通过本发明的方法制备的结晶多晶型形式)以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

本发明进一步提供用于制备药物制剂的方法，其包括将本文所述的结晶多晶型形式与至少一种药学上可接受的赋形剂组合。

本发明进一步提供本文所述的结晶多晶型形式，其作为药物，特别是用于治疗患有癌症的患者的癌症和/或用于减少或预防转移的出现。

本发明进一步提供本文所述的结晶多晶型形式用于制备药物组合物的用途，所述药物组合物用于治疗患有癌症的患者的癌症和/或用于减少或预防转移的出现。

本发明进一步提供用于治疗患有癌症的患者的癌症和/或用于减少或预防转移的出现的方法，所述方法通过向需要这种治疗的患者给药有效量的本文所述的结晶多晶型形式。

特别地，本文所述的结晶多晶型形式可用作人或兽医用药物组合物中的活性成分，预期用于治疗癌症(转移性或原发性)，即癌细胞，或用于预防癌症的出现，特别是用于减少或预防患有癌症的患者中转移的出现。在患者患有转移性癌症的情况下，本文所述的结晶多晶型形式尤其特别针对减少或预防其他转移的出现。

在本说明书中，患者表示动物(特别是非人类哺乳动物)和人两者。术语“患有癌症的患者”是指患有明显的(declared)癌症(原发性或转移性) 和隐藏的癌症(即不可见的癌症，其存在是例如通过发现转移而被揭示的)的患者。

在本说明书中，癌细胞表示具有引起癌症的细胞的如下所述的典型特征的细胞：例如不受控制的增殖、永生性、转移潜能、快速生长和高速增殖以及某些特定的形态学特征。癌细胞通常是以肿瘤的形式，但是这些细胞可以单独存在于体内，或者可以是非肿瘤形成的癌细胞，例如白血病细胞。癌细胞可以与多种类型的癌症相关，包括但不限于白血病、淋巴瘤、黑素瘤、神经母细胞瘤、肝癌、卵巢癌、脑癌、肺癌、肠癌、乳腺癌、胰腺癌、***癌、睾丸癌、食道癌、子宫癌、***、肾癌、胃癌、膀胱癌、脑脊髓癌或结直肠癌。本发明的结晶多晶型形式或药物组合物可以用于治疗上述癌症中的至少一种。

当根据本发明的结晶多晶型形式在抗转移治疗的背景下使用时，患者患有“原发性”癌症。该癌症是能够转移的癌症，其可以是但不限于黑素瘤、多形性胶质母细胞瘤、肺癌(尤其是非小细胞肺癌)、肠癌或结肠直肠癌、乳腺癌、***癌、睾丸癌、***、肾癌，优选是多形性胶质母细胞瘤、乳腺癌或非小细胞肺癌。本发明的结晶多晶型形式特别适用于治疗患有多形性胶质母细胞瘤的患者的转移风险。现在已经认识到多形性胶质母细胞瘤(GBM)(通常称为胶质母细胞瘤)可能是具有转移潜能的癌症，从而产生广泛的病症(

S.S.等，Journal of Clinical Oncology 2011,29,23,668-671)。源自胶质母细胞瘤的癌细胞可以有效地穿过血脑屏障并建立神经外转移。报道的神经外转移部位是肺、胸膜、肝脏、颈***、骨和骨髓。

所述癌症更特别地选自多形性胶质母细胞瘤、乳腺癌和非小细胞肺癌，优选多形性胶质母细胞瘤。

包含本发明的抗癌化合物的药物组合物同样以固体或液体形式存在。以液体形式时，所述药物组合物优选作为水性悬浮液或非水性悬浮液，或作为油包水或水包油乳剂。

在本发明的药物组合物中，可特别提及适用于如下所述的那些组合物：口服、局部、肠胃外、鼻腔、静脉内、经皮(percutaneous)、透皮 (transcutaneous)、直肠、经舌或气道给药，尤其是简单或糖衣片剂、舌下片剂、胶囊、锭剂、栓剂、乳膏、软膏、皮肤凝胶、口服摄入或注射安瓿。

剂量方案取决于患者的性别、年龄和体重，取决于给药途径以及取决于癌症类型、癌症的进展状态，特别是在患者中是否检测到转移。剂量方案也可以取决于相关抗癌治疗的类型。

一般而言，本发明的多晶型形式的用量优选为每24小时0.001mg/kg 患者或动物体重至1g/kg患者或动物体重，以一次或多次药物摄入。优选地，所述量至少等于0.01mg/kg、更优选至少等于0.05mg/kg。优选地，所述量至多等于500mg/kg、更优选至多等于100mg/kg。

为了通过口服途径给药，本发明的药物组合物可以如下形式出现：片剂、胶囊、包衣片剂、糖浆、悬浮液、溶液、粉末、丸剂、乳剂、微球或纳米球的悬浮液、脂质囊泡悬浮液或各种聚合物系囊泡。

为了通过口服途径给药，本发明的药物组合物可以是片剂形式，其可以从包含本发明的结晶多晶型形式与各种赋形剂(如微晶纤维素、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸二钙或甘氨酸)的固体组合物获得。可以使用各种崩解剂，例如淀粉(玉米、马铃薯或木薯淀粉等)、海藻酸或硅酸盐。也可以使用粘合剂，如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶或***胶。也可以使用润滑剂，如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、或甚至滑石。这种固体组合物(如粉末)可以用于制备明胶胶囊。对于固体组合物，也可以使用乳糖或具有高分子量的聚乙二醇。

为了制备用于口服给药的液体组合物，所述结晶多晶型形式可以与各种甜味剂、调味剂、着色剂，可能存在的乳化剂或悬浮剂，以及稀释剂(如水、乙醇、丙二醇、甘油)，或这些赋形剂的任何组合进行组合。

为了通过肠胃外途径给药，本发明的药物组合物可以以输注或注射溶液和悬浮液的形式存在。

为了通过肠胃外途径给药，可以使用油或水溶液或悬浮液、乳液或植入物，特别是包括栓剂。例如，所述结晶多晶型形式可以分散在液体载体中，例如通常用于制备注射用药物制剂的液体盐水溶液或含有5重量％葡萄糖的盐水溶液。

为了通过肠内途径给药，可以使用控释组合物，例如这样的组合物，其中所述结晶多晶型形式被多个涂层保护以免受外部环境影响，所述涂层以不同方式分解，例如在与中性或碱性介质接触时(肠溶包衣)或在与含水介质接触时(包含可溶性聚合物或在水中分解的聚合物的涂层)。

一般而言，本发明的药物组合物包含占所述组合物的总重量的0.01 重量％至99重量％，有利地占1重量％至90重量％的抗癌化合物。

一般而言，本发明的药物组合物包含1重量％至99.99重量％，有利地包含10重量％至99重量％的赋形剂或药学上可接受的赋形剂的混合物。

本发明的药物组合物可用于肠胃外、外用或局部给药，并以预防和/ 或治疗的方式使用。因此，本发明的抗癌化合物以适合于所选择的给药途径的形式制备(例如以液体或冷冻干燥的形式)。包含本发明的结晶多晶型形式的药物组合物可含有赋形剂和/或液体或固体的药学上可接受的载体(例如水性载体)。可以使用许多药学上可接受的赋形剂和/或载体，例如水，适当时与丙二醇或聚乙二醇、缓冲水、盐水溶液、甘氨酸溶液及其衍生物以及产生生理条件所需的物质例如缓冲剂和pH调节剂、表面活性剂诸如乙酸钠、乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙混合，此名单为非限制性的。此外，可以使用本领域技术人员熟知的灭菌方法对所述药物组合物进行灭菌。

合适的惰性、无毒、药学上可接受的载体、辅剂或赋形剂包括作为非限制性实例的稀释剂、溶剂/增溶剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、粘合剂、溶胀剂、崩解剂、包囊剂、延缓剂(retardant)、润滑剂、吸附剂、悬浮剂、着色剂、调味剂、稳定剂、增稠剂等。此类化合物例如为碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、纤维素系材料、可可脂等。

当制备片剂形式的固体组合物时，将主要活性成分与药物载体(诸如明胶、淀粉、乳糖、硬脂酸镁、滑石粉、***树胶或等效物)混合。

片剂可以用蔗糖或任何其它合适的原料包衣，或者它们可以以这样的方式处理，所述方式使它们具有长效或延迟的活性并且它们以持续的方式释放预定量的活性成分。

通过将活性成分与稀释剂混合并将如此获得的混合物倒入软或硬胶囊中来获得胶囊制剂。

糖浆或酏剂形式的药物组合物可含有活性成分和甜味剂，优选低热量甜味剂、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯，以及调味剂和合适的着色剂。

水分散性粉末或颗粒可含有与分散剂、润湿剂或悬浮剂诸如聚乙烯吡咯烷酮以及甜味剂或味道改良剂混合的活性成分。

作为活性成分的结晶多晶型形式也可以配制成微胶囊形式，任选地与一种或多种载体或添加剂一起配制。

一般而言，为了提供本发明的药物组合物，本领域技术人员可以有利地参考最新版的欧洲药典，例如2005年1月出版的第5版欧洲药典版本或2007年6月公开发行的第6版欧洲药典版本。

本领域技术人员可以容易地找到制备本发明的药物组合物的方法，例如Remington′s Pharmaceutical Sciences,Mid.Publishing Co,Easton,Pa., USA中找到。

生理学上可接受的辅剂、载体和赋形剂也记载在“Handbook of PharmaceuticalExcipients,”Second Ed.,American Pharmaceutical Association,1994中。

为了配制本发明的药物组合物，本领域技术人员可以有利地参考最新版本的欧洲药典或美国药典(USP)。

本领域技术人员可以特别有利地参考美国药典(USP)的 USP30-NF25版本。

当本发明的药物组合物包含至少一种药学上或生理学上可接受的赋形剂时，其特别地是适合于口服给药所述组合物的赋形剂或适合于肠胃外给药所述组合物的赋形剂。

本发明可以与其他治疗方式组合应用，诸如化学疗法、冷冻疗法、高温疗法、放射疗法等。

现在用以下非限制性实施例说明本发明。

实施例

实施例1：

-由化合物3和化合物4合成化合物I

从商购获得的2,3,5-三-O-苄基***呋喃糖3和苯膦酸乙酯4开始，进行PST3.1a的合成(路线1)。

通过叔丁醇钾(tBuOK)在THF中处理3和4的等摩尔混合物提供了4种非对映异构体的混合物(路线2)。

PST3.1b是主要杂质(PST3.1a/PST3.1b/获得的其他非对映异构体的比率为：29/31/39(通过³¹P NMR))。

整个过程(在结晶步骤之前)如下(路线3)：

这样将乙酸乙酯加入到淬灭的混合物中以允许倾析有机层。在水洗后，且在不干燥的情况下，在真空下将溶剂转换成甲基叔丁基醚 (MTBE)，直至发生沉淀。加入MTBE，过滤得到的黄色悬浮液，得到粗PST3.1a，产量为20％-25％(以重量百分比计)和75/25-78/22的PST3.1a/PST3.1b比率(通过³¹P NMR测定)。通过MTBE从混合物中除去两种其他非对映异构体。

用异丙醚代替MTBE来测试溶剂转换：以良好收率分离PST3.1a，但PST3.1a/PST3.1b比率(45/55)较低。

-结晶步骤

在粗PST3.1a(PST3.1a/PST3.1b比率为62/38)的结晶过程中试验了不同的溶剂来提高收率和/或1a/1b比率。结果示于表2。

表2

对粗混合物(62/38)(表2，条目1)使用丙酮得到PST3.1a，收率为45％，1a/1b比率为88/12(类似于其他结果：收率为45％，从粗化合物1a/1b比率64/36至1a/1b比率87/13)。在MTBE中的重结晶(表2，条目2)产生了良好的收率，但是，即使化合物的混合物不能完全溶于30体积的溶剂，1a/1b比率的增加也是有限的。乙醇显示出非常有趣的结果，比率为90/10(表2，条目3)。甲苯和异丙醇(表2，条目4和5) 得到的结果很差。使用乙醇获得了良好的结果，对使用该溶剂的混合物进行了试验(表2，条目6和7)，获得了有趣的结果，但没有改善纯乙醇的结果。

在该第一次溶剂筛选后，考虑完整的重结晶序列。使用丙酮的序列在3次重结晶后提供纯PST3.1a(99/1比率)，收率为10％。

在乙醇中重结晶3次后，仅获得96/4的比率，但收率为35％。最后，在丙酮中额外的重结晶提供纯PST3.1a(99/1比率)，总收率为25％(重结晶序列)。

从约98/2的比率开始，在丙酮中进行3次新的重结晶后获得高纯度的PST3.1a(路线4)。

最后，如路线5所示实施整个方法。基于263克化合物3进行PST3.1a 的合成，得到26.7g最终化合物，收率为7.8％，具有良好的 PST3.1a/PST3.1b比率。

通过¹H NMR(CDCl₃,500MHz)、³¹P NMR(CDCl₃,121MHz)和¹³C NMR(CDCl₃,125MHz)确认了PST3.1a。(分别参见图6、图7和图8)。

在214nm处的HPLC：纯度＝98.4％

该方法具有高度的可再现性。有趣的是注意到，从32、83、93和 263g化合物3开始，在收率和纯度方面产生了非常接近的结果。

实施例2：

分析所得产物

-X射线粉末衍射(XRPD)

样品(通过实施上述路线5获得的产物)的分析是在PANalytical X′Pert Pro衍射仪上以透射模式进行。将样品(几毫克)置于两个聚合物箔(

和/或聚丙烯)之间。值得注意的是，

表现出具有低强度的宽峰，约为2θ＝5.5°。

在2°和50°之间进行分析(除非另有说明)。在每次分析活动之前验证衍射仪的校准，以满足质量体系的要求。

表3.X射线粉末衍射分析的技术规范

差示扫描量热法(DSC)

在Perkin Elmer Diamond DSC上进行分析。将样品(通过实施上述路线5获得的几毫克产物)置于25μL铝样品盘中并用刺破的盖子卷曲。在氮气吹扫(20mL/min)下进行分析，其中温度扫描在20℃和300℃之间以10°/min进行(除非另有说明)。

在每次分析活动之前验证校准，以满足我们质量体系的要求。

热重分析法(TGA)

在Perkin Elmer Pyris 1 TGA上进行该分析。将样品(通过实施上述路线5获得的几毫克产物)置于铝盘中并将盖子卷曲。在氮气吹扫 (20mL/min)下进行分析，并在分析开始时将盖子刺破。

温度扫描在25℃和300℃之间以10°/min的速度进行(除非另有说明)。

在每次分析活动之前验证校准，以满足我们质量体系的要求。

动态蒸汽吸附(DVS)

在表面测量***DVS Intrinsic上进行分析。将样品(通过实施上述路线5获得的几毫克产物)置于敞口铝盘中。在25℃下进行分析。

在0％RH和95％RH之间以10％RH步进扫描相对湿度 (40-0-95-0-95；除非另有说明)。稳定性标准是在5分钟窗口内的质量变化低于0.002％(最小步进时间为10分钟，最长为100分钟)。

在每次分析活动之前验证校准，以满足我们质量体系的要求。

红外光谱(FTIR-ATR)

在配备有iS7ATR模块的Nicolet iS5 FT-IR光谱仪上测量红外光谱，参数收集在表4中。

表4.IR分析的特征。

结果

-获得的粉末X射线衍射图示于图1。

因此，化合物I的结晶形式的特征在于在约8.65、16.06、16.53、19.16 和21.05±0.20°2θ，优选±0.1°2θ处的粉末x射线衍射反射。该晶体形式的特征还在于在约14.04、17.69、19.66、22.02和25.12±0.20°2θ处的粉末X射线衍射反射，或者基本上如图1或表1(上文)所示。

-DSC热分析图显示吸热，起始温度为176.2℃，其对应于样品的溶化。DSC分析示于图2。

-热重分析表明样品熔化前后(最高可达250℃)的重量损失不大 (参见图3)。在高于250℃时重量损失的开始可对应于样品的分解。

-DVS分析在干燥步骤中表现出低于0.1％的损失(参见图4)。相对于在较高的相对湿度条件下进行的步骤的初始重量，样品还表现出0.1％的有限增加。两个周期都显示类似的结果。因此样品是非吸湿性的。

图5中还显示了相对于干燥样品的重量变化曲线。

在分析的最后步骤中，在通过X射线粉末衍射分析之前将样品保持在95％RH。获得的XRPD图表明与DVS分析之前相同的图案。

实施例3：

对所得产物的附加分析

-压缩试验

将样品引入直径为13mm(m＝103,83mg)的模具中。然后用液压机在10吨的压力下将样品压缩5分钟，并立即通过X射线衍射分析。

结果

在对接受10吨压力5分钟的整个团粒进行分析后得到的衍射图案与起始材料的衍射图案的叠加具有相同峰值。该结果表明本发明的固态化合物在压缩后的稳定性。获得的衍射图案是结晶样品的特征。

-其他多晶型形式

其他多晶型形式可以从本发明的结晶形式开始，通过从特定的有机溶剂中重结晶而获得。然而，所述其他多晶型形式在室温(更具体地在 25℃)熟化几天后不稳定。交叉接种试验也如此，在这些试验中本发明的结晶形式似乎在25℃下是最稳定的形式。

Claims (23)

1.3-羟基-4,5-双苄氧基-6-苄氧基甲基-2-苯基-2-氧代-2λ5-[1,2]氧杂膦环己烷的结晶形式，其特征在于在8.65、16.06、16.53、19.16和21.05±0.20°2θ处和在14.04、17.69、19.66、22.02和25.12±0.20°2θ处的粉末X射线衍射反射。

2.权利要求1的结晶形式，其中所述结晶形式的特征还在于如图1所示的粉末X射线衍射反射图。

3.权利要求1至2中任一项的结晶形式，其中通过差示扫描量热法(DSC)，以10℃/min的加热速率，所述结晶形式的熔点为175.5-177.5℃。

4.权利要求1至2中任一项的结晶形式，其中通过差示扫描量热法(DSC)，以10℃/min的加热速率，所述结晶形式的熔点为176.2℃±0.4℃。

5.用于制备权利要求1至4中任一项的3-羟基-4,5-双苄氧基-6-苄氧基甲基-2-苯基-2-氧代-2λ5-[1,2]氧杂膦环己烷的结晶形式的方法，其中所述方法包括至少一个含有丙酮和下式(I)的化合物的溶液的结晶步骤：

6.权利要求5的方法，其中所述方法包括1、2、3、4或5个结晶步骤。

7.权利要求5的方法，其中所述包含式(I)的化合物和丙酮的溶液的结晶步骤是最后的结晶步骤。

8.权利要求6的方法，其中所述包含式(I)的化合物和丙酮的溶液的结晶步骤是最后的结晶步骤。

9.权利要求7的方法，其中在所述最后的结晶步骤之前的一或多个结晶步骤是用包含所述式(I)的化合物和溶剂的溶液进行的，其中所述溶剂选自丙酮和乙醇，并任选地与水或甲基叔丁基醚组合。

10.权利要求8的方法，其中在所述最后的结晶步骤之前的一或多个结晶步骤是用包含所述式(I)的化合物和溶剂的溶液进行的，其中所述溶剂选自丙酮和乙醇，并任选地与水或甲基叔丁基醚组合。

11.权利要求9的方法，其中在所述最后的结晶步骤之前的一或多个结晶步骤是用包含所述式(I)的化合物和乙醇的溶液进行的。

12.权利要求10的方法，其中在所述最后的结晶步骤之前的一或多个结晶步骤是用包含所述式(I)的化合物和乙醇的溶液进行的。

13.权利要求5至12中任一项的方法，其中所述方法包括用包含所述式(I)的化合物和乙醇的溶液进行的两个结晶步骤，以及随后的用包含所述式(I)的化合物和丙酮的溶液进行的一个结晶步骤。

14.权利要求5至12中任一项的方法，其中，在权利要求5至12中任一项的一或多个结晶步骤之前，通过包括以下步骤的方法制备所述式(I)的化合物：

a.在叔丁醇钾存在下，使2,3,5-三-O-苄基***糖3和苯膦酸乙酯4在有机溶剂中接触；

b.向步骤a)的溶液中加入叔丁醇钾的中和剂；

c.向步骤b)的混合物中加入水不混溶性有机溶剂，以允许倾析有机层；

d.用水洗涤，然后加入醚类或甲苯溶剂；以及

e.回收所述式(I)的化合物。

15.权利要求14的方法，其中在步骤(a)中，化合物3和4各自使用1摩尔当量。

16.权利要求14的方法，其中步骤a)的有机溶选自THF、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、MeTHF、丙酮、甲苯及其混合物。

17.权利要求14的方法，其中步骤c)的水不混溶性有机溶剂是乙酸乙酯。

18.权利要求14的方法，其中在步骤d)加入的醚类溶剂是异丙醚或甲基叔丁基醚。

19.权利要求14的方法，其中步骤e)的回收是通过过滤进行的。

20.权利要求14的方法，其中步骤a)的溶剂是THF。

21.药物组合物，其包含权利要求1至4中任一项所述的结晶形式以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

22.权利要求1至4中任一项所述的结晶形式，其用作药物。

23.权利要求1至4中任一项所述的结晶形式，其用于治疗癌症和/或用于在患有癌症的患者中减少或预防转移的出现。

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