CN109674805A - 苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于药物领域,具体苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用。本发明提供了苯乙醇苷类化合物的新用途,将苯乙醇苷类化合物应用于牙周病的治疗和预防的药物中,能够抑制牙周炎性牙槽骨吸收、促进成骨细胞分化,可促进牙周病相关的骨修复,与壳聚糖合用,效果更为优异。

Description

苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用
技术领域
本发明属于药物领域,具体苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用。
背景技术
牙周病是指一类发生于牙周组织(包括牙龈、牙周膜、牙槽骨、牙骨质等)的一慢性炎症性疾病。牙周病不仅是临床引起牙周脓肿、牙龈出血、牙龈萎缩、口臭等口腔问题的元凶之一,还可引起牙周组织的降解、牙槽骨的吸收,并最终导致牙齿的松动甚至脱落,其中牙周组织的破坏和牙槽骨吸收是牙周病的典型临床病理变化。
对于牙周病,目前临床多针对其致病因素,采用抗炎、牙齿修复、根管治疗等方法,能够一定程度上缓解牙周病的发展,延迟牙槽骨吸收,从而在一定程度上避免牙齿松动和脱落,但目前的治疗方法作用单一,起效慢,需要手术治疗,成本高,患者依从性差,且难以逆转已经产生的牙槽骨吸收,因此,对于牙周病,特别是牙周病导致的牙槽骨吸收的治疗效果仍不理想。
苯乙醇苷类化合物是一类本丙烯酸和苯乙醇部分分别通过酯键和糖苷键与β-吡喃葡萄糖连接后形成的该化合物,具体可以分为:
(1)葡萄糖的C-3’位被α-L-鼠李糖取代的苯乙醇苷,如:
(2)葡萄糖的C-3’位无取代或被α-L-鼠李糖以外的糖取代的苯乙醇苷,如:
(3)苯乙醇基的C-7位有取代基的苯乙醇苷,如:
(4)含有1,4-二氧六元环的苯乙醇苷,如:
(5)含有环烯醚萜基的苯乙醇苷,如:
(6)葡萄糖连接在苯乙基-4羟基的苯乙醇苷,如:
(7)核心糖为葡萄糖以外的糖基的苯乙醇苷,如:
已报道,苯乙醇苷类化合物具有多重生物活性,包括抗肿瘤、抗病毒、抑菌、抗炎、保肝护肝、抗氧化、免疫调节、神经保护等,但苯乙醇苷类化合物用于牙周病,尤其是促进牙周病骨修复的用途还未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用。
为实现上述发明目的,本发明采用以下技术方案:
一方面,苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用。
上述应用中,所述苯乙醇苷类化合物,具有如下结构:
其中,R1、R2独立的选自氢或糖基;R3、R5独立的选自氢或羟基;R4选自氢、乙酰基或糖基。
可选的,所述糖基选自:吡喃葡萄糖基、α-L-鼠李糖基、半乳糖基。
可选的,所述苯乙醇苷类化合物选自:管花肉苁蓉苷A、管花肉苁蓉苷B1、管花肉苁蓉苷B2、管花肉苁蓉苷C1、管花肉苁蓉苷C2的一种或几种。
另一方面,苯乙醇苷类化合物与壳聚糖的组合物在制备促进牙周病骨修复的药物组合物中的应用。
可选的,所述壳聚糖选自:羧甲基壳聚糖。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:本发明提供了苯乙醇苷类化合物的新用途,将苯乙醇苷类化合物应用于牙周病的治疗和预防的药物中,能够抑制牙周炎性牙槽骨吸收、促进成骨细胞分化,可促进牙周病相关的骨修复,与壳聚糖合用,效果更为优异。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1一种促进牙周病骨修复的凝胶剂
管花肉苁蓉苷B2 6份、羧甲基壳聚糖11份、灭菌水50份、矫味剂1份,按照以下方法制备:
(1)粉碎:将管花肉苁蓉苷B2、羧甲基壳聚糖分别粉碎过40目筛后混合均匀得混合粉,备用;
(2)制剂:在混合粉中加入矫味剂和灭菌水后搅拌均匀,充分溶胀后分装即得本发明促进牙周病骨修复的凝胶剂。
实施例2-6一种促进牙周病骨修复的凝胶剂
组分 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5 实施例6
管花肉苁蓉苷B2 8.5 2
管花肉苁蓉苷A 6
管花肉苁蓉苷B1 6
管花肉苁蓉苷C1 6
管花肉苁蓉苷C2
羧甲基壳聚糖 8.5 15 11 11 11
矫味剂 1 1 1 1 1
灭菌水 50 50 50 50 50
按照实施例1所述方法制备实施例2-6所述的促进牙周病骨修复的凝胶剂。
效果例1苯乙醇苷类化合物对大鼠成骨细胞增殖的影响
1.1实验药物:
管花肉苁蓉苷A、管花肉苁蓉苷B1、管花肉苁蓉苷B2、管花肉苁蓉苷C1、管花肉苁蓉苷C2,使用无菌PBS溶液配制成0.25g/L的液体备用。
1.2实验方法
(1)取颅盖骨:于无菌条件下取新生SD大鼠颅盖骨,剔除大鼠颅盖骨上粘附的***和血管,使用无菌PBS溶液冲洗5次,使用灭菌手术剪剪碎;
(2)去除成纤维细胞:剪碎后的大鼠颅盖骨加入3g/L的胰蛋白酶于37℃下消化15min,吸除消化液后使用无菌PBS冲洗3次;
(3)成骨细胞的消化:加入体积比为1:1的1.5g/L的I型胶原酶和1g/L的透明质酸酶,37℃下消化20min,消化液吸出备用,充分消化5次,收集第3-5次的消化液,离心,弃去上清,使用不含血清的DMEM培养基冲洗后离心,弃去上清,加入含10%胎牛血清的DMEM培养基吹打均匀,以3×105/mL的浓度将所获取的细胞接种于细胞培养瓶中,置于37℃、5%CO2培养箱中,每48h换液1次,待细胞融合后,使用2.5g/L的胰蛋白酶消化后传代。取第3代细胞,以3×104/mL的密度接种于96孔板中,加入含10%胎牛血清的DMEM培养基,每孔100μL,将接种细胞分为空白组、实验1-5组,每组3个重复孔,接种24小时后吸去上清液,重新加入含10%胎牛血清的DMEM培养基,每孔90μL,按组别加入吹打均匀的实验药物,每孔10μL,其中空白组加入无菌PBS溶液,继续培养48h,随后加入5g/L的MTT溶液,每孔20μL,继续培养4h,吸去培养液后加入DMSO,每孔150μL,振摇5min后使用酶标仪,检测570nm的吸光度,计算各实验药物对成骨细胞增殖的促进率,具体实验结果见表1,其中:
促进率(%)=(实验组吸光度-空白组吸光度)/空白组吸光度×100%。
1.3实验结果
应用统计软件SPSS的多因素方差分析模块进行数据分析,其中当P<0.05时表示差异有统计学意义。
表1苯乙醇苷类化合物对大鼠成骨细胞增殖的影响
组别 吸光度 促进率(%)
空白组 0.596±0.047
管花肉苁蓉苷A 0.675±0.068* 13.26%
管花肉苁蓉苷B1 0.742±0.054* 24.50%
管花肉苁蓉苷B2 0.839±0.076** 40.77%
管花肉苁蓉苷C1 0.663±0.051* 11.24%
管花肉苁蓉苷C2 0.724±0.065* 21.48%
与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表1实验结果显示了管花肉苁蓉苷A、管花肉苁蓉苷B1、管花肉苁蓉苷B2、管花肉苁蓉苷C1和管花肉苁蓉苷C2均显示了对大鼠成骨细胞增殖的促进作用,其中尤其以管花肉苁蓉苷B1、管花肉苁蓉苷B2和管花肉苁蓉苷C2的效果更为优异,更尤其的以管花肉苁蓉苷B2的效果最为优异,相对于空白组的促进率超过了40%,显示了苯乙醇苷类化合物,尤其是管花肉苁蓉苷B2具有显著的促进大鼠成骨细胞增殖的效果。
效果例2:管花肉苁蓉苷B2与羧甲基壳聚糖的组合对大鼠成骨细胞增殖的影响
2.1实验药物
以下实验药物均使用无菌PBS溶液配制成0.25g/L的液体备用。
表2实验药物
组别 实验药物
药物1 管花肉苁蓉苷B2
药物2 羧甲基壳聚糖
药物3 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶1
药物4 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶2
药物5 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶4
药物6 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶6
药物7 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶8
药物8 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶9
药物9 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶10
药物10 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶11
药物11 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶12
药物12 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶13
药物13 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶16
药物14 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶20
2.2实验方法
按照实施例1所述方法,测定各实验药物对大鼠成骨细胞的促进率,具体实验结果见表3。
2.3实验结果
应用统计软件SPSS的多因素方差分析模块进行数据分析,其中当P<0.05时表示差异有统计学意义。
表3实验结果显示了,单独的羧甲基壳聚糖并不具有促进大鼠成骨细胞增殖的影响,管花肉苁蓉苷B2与羧甲基壳聚糖组合的比例对其促进大鼠成骨细胞增殖的效果具有明显的影响,并可大致划分为三个阶段:第一阶段:当管花肉苁蓉苷B2含量多于羧甲基壳聚糖时,随着羧甲基壳聚糖含量的增加,组合物促进大鼠成骨细胞增殖的效果逐渐降低;第二阶段:当管花肉苁蓉苷B2含量少于羧甲基壳聚糖,且管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖大于或等于6∶11时,组合物促进大鼠成骨细胞增殖的效果逐渐增强,当管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶11时,组合物具有显著的促进大鼠成骨细胞增殖的效果,且该效果优于单独管花肉苁蓉苷B2的效果,显示了管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶11时,具有增效的促进大鼠成骨细胞增殖的效果;第三阶段:当管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖小于6∶11时,组合物促进大鼠成骨细胞增殖的效果逐渐降低,当管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶20时,组合物几乎不具有促进大鼠成骨增殖的效果。
表3管花肉苁蓉苷B2与羧甲基壳聚糖的组合对大鼠成骨细胞增殖的影响
组别 试验药物 吸光度 促进率(%)
空白组 0.531±0.044
药物1 管花肉苁蓉苷B2 0.725±0.057** 36.53%
药物2 羧甲基壳聚糖 0.486±0.061 -8.47%
药物3 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶1 0.659±0.068* 24.11%
药物4 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶2 0.592±0.053 11.49%
药物5 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶4 0.617±0.066* 16.20%
药物6 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶6 0.580±0.076 9.23%
药物7 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶8 0.629±0.054* 18.46%
药物8 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶9 0.658±0.069* 23.92%
药物9 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶10 0.714±0.081** 34.46%
药物10 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶11 0.787±0.079** 48.21%
药物11 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶12 0.705±0.094** 32.77%
药物12 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶13 0.673±0.061* 26.74%
药物13 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶16 0.624±0.048* 17.51%
药物14 管花肉苁蓉苷B2∶羧甲基壳聚糖=6∶20 0.539±0.053 1.51%
与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01。
以上描述了本发明优选实施方式,然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (6)

1.苯乙醇苷类化合物在促进牙周病骨修复的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述苯乙醇苷类化合物,具有如下结构:
其中,R1、R2独立的选自氢或糖基;R3、R5独立的选自氢或羟基;R4选自氢、乙酰基或糖基。
3.如权利要求2所述的的应用,其特征在于,所述糖基选自:吡喃葡萄糖基、α-L-鼠李糖基、半乳糖基。
4.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述苯乙醇苷类化合物选自:管花肉苁蓉苷A、管花肉苁蓉苷B1、管花肉苁蓉苷B2、管花肉苁蓉苷C1、管花肉苁蓉苷C2的一种或几种。
5.苯乙醇苷类化合物与壳聚糖的组合物在制备促进牙周病骨修复的药物组合物中的应用。
6.如权利要求2所述的的应用,其特征在于,所述壳聚糖选自:羧甲基壳聚糖。
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