CN109641918A - 作为组蛋白去甲基化酶抑制剂的咪唑 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及咪唑衍生物，含有这些化合物的药物组合物及其在治疗中的用途，其中A、R、R1和R2如说明书中所定义。

Description

作为组蛋白去甲基化酶抑制剂的咪唑
技术领域
本发明涉及咪唑衍生物、含有这些化合物的药物组合物及其在治疗中的用途。
背景技术
主要是由组蛋白成分的翻译后修饰决定的染色质的结构和功能状态的改变涉及多种疾病的发病机制。控制核小体上的这些翻译后修饰的酶促过程已成为所谓的表观遗传疗法的潜在靶标(Portela,A.等人，《国家生物科技(Nat.Biotechnol.)》2010,28，1057-1068)。
越来越多的组蛋白赖氨酸去甲基化酶的发现凸显了组蛋白甲基化调节(涉及真核基因组和基因调控的关键染色质修饰)的动态性质。组蛋白赖氨酸去甲基化酶代表表观遗传药物的有吸引力的靶标，因为它们的表达和/或活性在癌症中经常被错误调节(Varier,R.A.等人，《生物化学生物物理学报(Biochim.Biophys.Acta.)》，2011，1815，75-89)。赖氨酸可以是单、二和三甲基化的，并且即使在相同的氨基酸上，每种修饰都可以具有不同的生物学效应。
组蛋白赖氨酸去甲基化酶通过两种不同类型的机制发挥其活性(Anand,R.等人，《生物化学杂志(J.Biol.Chem.)》，2007，282，35425-35429；Metzger,E.等人，《自然结构与分子生物学(Nat.Struct.Mol.Biol.)》，2007，14，252-254)。虽然含有十文字(Jumonji)结构域的组蛋白去甲基化酶(其为铁和2-氧代戊二酸依赖性氧化酶)作用于单、二和三甲基化赖氨酸，但黄素依赖性(FAD)组蛋白去甲基化酶催化单和二甲基化赖氨酸残基的切割。目前，已鉴定出两种FAD依赖性去甲基化酶：LSD1，也称为KDM1A，和LSD2，也称为KDM1B。(Culhane,J.C.等人，《生物化学当代观点(Curr.Opin.Chem.Biol.)》，2007，11，561-568，Ciccone,D.N.等人，《自然(Nature)》，2009，461，415-418)。
KDM1A是几种染色质重塑复合物中的成分，并且通常与共抑制蛋白CoREST相关。KDM1A特异性地去除组蛋白H3(其为一种充分表征的基因激活标记)的单和二甲基Lys4中的甲基。由于其在固体和血液肿瘤中的过表达，KDM1A代表了表观遗传药物的目标靶标(Schulte,J.H.等人，《癌症研究(Cancer Res.)》，2009，69，2065-2071；Lim,S.等人，《致癌作用(Carcinogenesis)》，2010，31，512-520；Hayami,S.等人，《国际癌症杂志(Int.J.Cancer)》，2011，128，574-586；Schildhaus,H.U.等人，《人体病理学(Hum.Pathol.)》，2011，42，1667-1675；Bennani-Baiti,I.M.等人《人体病理学》，2012，43，1300-1307)。其过度表达与***癌中的肿瘤复发相关(Kahl,P.等人，《癌症研究》，2006，66，11341-11347)，并且KDM1A在各种分化过程，如脂肪生成(Musri,M.M.等人，《生物化学杂志》，2010，285，30034-30041)、肌肉骨骼分化(Choi,J.等人，《生物化学生物物理研究通讯(Biochem.Biophys.Res.Commun)》，2010，401，327-332)和造血(Hu,X.等人，《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)》，2009，106，10141-10146；Li,Y.等人，《致癌基因(Oncogene.)》，2012，31，5007-5018)中起作用。KDM1A进一步涉及细胞能量消耗的调节(Hino S.等人，《自然通讯(Nat Commun.)》，2012，doi：10.1038/ncomms1755)，涉及脂肪组织中的产热和氧化代谢的调节(Duteil等人，《自然通讯》，2014年06月10日；5:4093，doi:10.1038/ncomms5093.)，涉及生产和潜伏感染中病毒基因表达的检查点的控制(Roizman,B.，《病毒学杂志(J.Virol.)》，2011，85，7474-7482)，以及更具体地涉及对疱疹病毒感染的控制(Gu,H.，《病毒学杂志》，2009，83，4376-4385)和HIV转录(Sakane,N.等人，《公共科学图书馆病原体期刊(PLoS Pathog.)》，2011，7(8):e1002184)。KDM1A在调节神经干细胞增殖(Sun,G.等人，《分子细胞生物学(Mol.Cell Biol.)》，2010，30，1997-2005)和控制神经炎形态发生(Zibetti,C.等人，《神经科学期刊(J.Neurosci.)》，2010，30，2521-2532)中的作用表明其可能涉及神经退行性疾病。
此外，已发现KDM1A与其它重要的细胞过程的控制有关，如DNA甲基化(Wang,J.等人，《自然遗传(Nat.Genet.)》，2009，41(1):125-129)、细胞增殖(Scoumanne,A.等人，《生物化学杂志》，2007，282，15471-15475；Cho,H.S.等人，《癌症研究》，2011，71，655-660)、上皮间充质转变(Lin,T.等人，《致癌基因》，2010，29，4896-4904)和染色体分离(Lv,S.等人，《欧洲细胞生物学杂志(Eur.J.Cell Biol.)》，2010，89，557-563)。此外，KDM1A抑制剂能够重新激活沉默的肿瘤抑制基因(Huang,Y.等人，《美国国家科学院院刊》，2007，104，8023-8028；Huang,Y.等人，《临床癌症研究(Clin.Cancer Res.)2009，15，7217-7228》，以选择性地靶向具有多能性干细胞特性的癌细胞(Wang,J.等人，《癌症研究》，2011，71，7238-7249)，以及重新激活急性髓性白血病中的全反式维甲酸分化途径(Schenk,T.等人，《自然医学(NatMed.)》，2012，18，605-611)。此外，KDM1A在维持白血病干细胞中MLL-AF9易位的致癌潜力(Harris等人，《癌症细胞(Cancer Cell)》，21(2012)，473-487)，以及人胶质母细胞瘤的干细胞样肿瘤增殖细胞(Suvà等人，《细胞(Cell)》，2014，157，580-594)方面具有明确的作用。
最近发现的去甲基化酶KDM1B(LSD2)与组蛋白H3的单和二甲基化Lys4的KDM1A特异性相似。与KDM1A不同，KDM1B不结合CoREST，并且到目前为止其在任何含KDM1A的蛋白质复合物中都未被发现(Karytinos,A.等人，《生物化学杂志》，2009，284，17775-17782)。相反，KDM1B与常染色质组蛋白甲基转移酶G9a和NSD3形成活性复合物，并与转录延伸中涉及的细胞因子形成活性复合物。据报道，KDM1B具有转录延伸调节剂的作用，而不是如针对KDM1A所提出的转录抑制因子(Fang,R.等人《分子细胞(Mol.Cell)》，2010，39，222-233)。
KDM1A和KDM1B都是具有FAD辅酶结合基序、SWIRM结构域和胺基氧化酶结构域(所有这些都是KDM1家族成员的酶活性的组成部分)的黄素氨基氧化酶依赖性蛋白质。此外，KDM1A和KDM1B均显示出与单胺基氧化酶MAO-A和MAO-B的结构相似性。实际上，发现用作抗抑郁药的MAO抑制剂的反苯环丙胺也能够抑制KDM1A。该化合物充当不可逆抑制剂，与FAD辅因子形成共价加合物。(Lee,M.G.等人，《化学生物(Chem.Biol.)》，2006，13，563；Schmidt,D.M.Z.等人，《生物化学(Biochemistry)》，2007，46，4408)。在《生物有机与药物化学快报(Bioorg.Med.Chem.Lett.)》，2008,18,3047-3051、《生物有机与药物化学(Bioorg.Med.Chem.)》，2011，19，3709-3716以及《美国化学社会杂志(J.Am.Chem.Soc)》中描述了反苯环丙胺类似物及其KDM1A抑制活性。作为KDM1A、MAO-A和/或MAO-B酶抑制剂的其它芳基环丙胺和杂芳基环丙胺衍生物公开于US2010/324147、WO2012/045883、WO2013/022047和WO2011/131576中。
可逆的KDM1A抑制剂并不常见，且目前尚无其临床数据。可逆抑制剂的实例是如《药物化学通讯(Med.Chem.Commun.)》，2013，4，1513-1522中所述的氨基噻唑，其为N'-(1-苯基亚乙基)-苯甲酰肼系列(《药物化学杂志(J.Med.Chem.)》，2013，56，9496-9508、WO2013025805)，或噻吩并吡咯衍生物(WO2016/034946)。因此，仍然需要另外的可逆抑制剂，其具有有用的抗肿瘤性能、足够的选择性和作用稳定性，并且在其特定亚类上可能显示出更高的活性。
发明内容
本发明涉及取代的咪唑衍生物，其具有高效KDM1A酶抑制活性和超过单胺基氧化酶(MAO)的选择性，可用于与组蛋白去甲基化酶活性有关的疾病和病症的预防或治疗。
根据本发明，提供了通式(I)的化合物：
其中，
R为氢或L1-R5；
R1、R2独立地为氢、C1-C4-烷基、C3-C7环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)zCF3，或者R1和R2与它们所结合的碳原子一起与咪唑形成稠合杂环或稠合杂芳基；
z为从0到6的整数；
R3、R4为氢或C1-C4-烷基；
L1为-(CH2)j-Y-或-CH2-
j为2至6的整数；
Y为键、氧或CH2；
R5为C1-C4-烷基或芳基，其中所述芳基可选地被卤素、C1-C6-烷基或L2-R6取代；
L2为-(CH2)m-；-(CH2)n-W-(CH2)p-；
R6为杂环基，其中所述杂环基可选地被C1-C6-烷基取代；
m、n、p独立地为0或1至6的整数；
W为氧、硫、NH或CH2；
或其立体异构体或药学上可接受的盐。
在一个实施方式中，R1和R2独立地为氢、C1-C4-烷基、C3-C7环烷基、芳基、杂芳基，或R1和R2与它们所结合的碳原子一起与咪唑形成稠合杂环或稠合杂芳基。
优选地，R3或R4为甲基或乙基。
在更优选的实施方式中：
R为氢或L1-R5；
R1、R2独立地为氢、C1-C4-烷基、环丙基、环丁基、苯基、吡啶基，或者R1和R2与它们所结合的碳原子一起与咪唑形成稠合杂环或稠合杂芳基；
R3、R4为甲基或乙基；
L1为-(CH2)2-Y-或-CH2-
Y为键、氧或CH2；
R5为甲基或可选地被L2-R6取代的苯基；
L2为-W-(CH2)p-；
R6为杂环基，其中所述杂环基可选地被C1-C6-烷基取代；
p为0或1至6的整数；
W为氧；
或其立体异构体或药学上可接受的盐。
通式(I)的特别优选的化合物包括：
4-甲基-5-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(4-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-异丙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-环丙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(4-丙基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-环丁基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(5-乙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(5-异丙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-乙基-5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-环丁基-1H-咪唑-2-基)-4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(4-苯基-5-丙基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯；
5-(5-乙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯；
4-甲基-5-(4,5,6,7-四氢-1H-苯并咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-4-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-4-苯基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-5-苯基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[3-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[3-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯；
4-甲基-5-[5-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-4-苯基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-5-苯基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-异丙基-5-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-苯基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[3,4-双(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[3,4-双(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-4-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-5-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-丙基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[5-丙基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基甲基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基甲基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-(2-甲氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-(2-甲氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-(2-苯氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-(2-苯氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(1-苄基-5-乙基咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-(4-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]苯并咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[3-[4-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[4-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[3-[4-[[(3S)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[4-[[(3S)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[4-甲基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[5-甲基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[4-(3,3,3-三氟丙基)-1H-咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-4-(3,3,3-三氟丙基)咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
或其立体异构体或药学上可接受的盐。
在一个实施方式中，通式(I)的化合物为可逆的KDM1A(LSD1)抑制剂。
在另一个实施方式中，本发明提供了通式(I)的化合物，其供作为药物。
在另一个实施方式中，本发明提供了通式(I)的化合物，其用于治疗和/或预防癌症、感染性疾病或以细胞能量代谢异常为特征的疾病(如肥胖症)。优选地，通式(I)的化合物用于治疗和/或预防白血病、非小细胞肺癌、肝细胞癌或胶质母细胞瘤。再优选地，所述胶质母细胞瘤是巨细胞胶质母细胞瘤或胶质肉瘤。
在另一个实施方式中，本发明提供了一种治疗或预防癌症(如白血病、非小细胞肺癌、肝细胞癌或胶质母细胞瘤)、感染性疾病或以细胞能量代谢异常为特征的疾病(如肥胖症)的方法，其中所述方法包括以有效量向受试者施用通式(I)化合物的步骤。
在再一个实施方式中，本发明提供了通式(I)化合物在制备用于治疗或预防癌症(如白血病、非小细胞肺癌、肝细胞癌或胶质母细胞瘤)、感染性疾病或以细胞能量代谢异常为特征的疾病(如肥胖症)的药物的用途。
本发明的再一个实施方式是药物组合物，其包含通式(I)的化合物连同药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。所述药物组合物可进一步包含至少一种其它治疗剂，优选选自由组蛋白去乙酰化酶抑制剂、类视黄醇受体调节剂、抗增殖/抗肿瘤药、细胞抑制剂、抑制癌细胞侵袭的药剂、生长因子功能抑制剂、抗血管生成剂、细胞周期抑制剂、蛋白酶体抑制剂、HSP90抑制剂、选择性COX-2抑制剂或化学治疗剂组成的群组。
在本发明中，“芳基”表示分别为6、9或10个原子的单环或双环芳环***，这种芳基的实例为苯基、茚基、茚满基和萘基和四氢萘基。取代的芳基是指各个独立的碳原子上的氢原子可以独立地被如上文定义的取代基所取代。
“杂芳基”表示分别为5至10个成员的单环或双环杂芳环***，其含有一个、两个、三个或四个选自氮、氧或硫的杂原子和一至九个碳原子。所述杂芳基的实例包括但不限于：吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、苯并吡喃基、吲唑基、苯并咪唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基和喹喔啉基。
“杂环基”表示分别为4至12个成员的单环、双环或螺环饱和或部分饱和的非芳环***，其含有一个、两个或三个选自氮、氧和硫的杂原子和三至十一个碳原子。此杂环的实例包括但不限于：吡咯烷基、吡咯烷基、哌啶基(piperidyl)、哌啶基(piperidinyl)、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、四氢喹喔啉基、苯并二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-苯并二氧杂环己基、苯并噁唑基、氮杂环丁基、氮杂环庚基和二氮杂卓。双环***的实例包括但不限于：2-氮杂-双环[2.2.1]庚基、2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚-2-基或8-氮杂双环[3.2.1]辛基。螺环***的实例包括但不限于，3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷。取代的杂环基是指各个独立的碳原子或杂原子上的一个或两个氢原子可以独立地被如上文定义的取代基所取代。
“稠合杂环”表示分别为8至12个成员的双环的部分饱和的非芳族环系。这些杂环的实例包括但不限于：四氢环戊二烯并[d]咪唑、四氢苯并咪唑或六氢环庚[d]咪唑。
“稠合杂芳基”表示双环的芳环***。根据本发明，所述稠合杂芳基的一个环由式I的化合物的咪唑环形成。这种杂芳基的实例包括但不限于苯并咪唑。
术语“C1-C6烷基”是指直链或支链的烃链基团，仅由碳和氢原子组成，具有1至6个碳原子。“C1-C6烷基”基团优选为直链或支链C1-C4烷基，更优选C1-C2烷基。C1-C6烷基的合适的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基和己基。术语“C1-C4烷基”是指直链或支链的烃链基团，仅由碳和氢原子组成，具有1至4个碳原子。
术语“C3-7环烷基”是指具有三至七个碳原子的饱和单环烃环***。C3-6-环烷基的合适的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。“卤素”优选为氟、氯或溴，特别是氟或氯。
“离去基团”是指卤素，优选氯化物、溴化物或碘化物。
“可逆抑制剂”为抑制性分子实体，其通过非共价相互作用与酶相互作用并且能够与所述酶结合/解离。
药学上可接受的盐包括通过式(I)的化合物与无机酸(例如，盐酸、氢溴酸、硫酸或磷酸)或与有机酸(例如，乙酸、丙酸、琥珀酸、苯甲酸、磺胺、2-乙酰氧基苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、水杨酸、乙醇酸、乳酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸或萘磺酸)的成盐作用而获得的常规无毒盐。关于合适的药用盐的综述参见Berge S.M.等人，《药物科学杂志(J.Pharm.Sci.)》，1977，66，1-19；Gould P.L.，《国际制药学杂志(Int.J.Pharm)》，1986，33，201-217；以及Bighley等人，《制剂技术百科全书(Encyclopedia of Pharmaceutical Technology)》，Marcel Dekker Inc，纽约，1996，第13卷，第453-497页。其它非药学上可接受的盐(例如三氟乙酸盐)可用于制备本发明的化合物，这些形成本发明的另一方面。本发明在其范围内包括式(I)的化合物的盐的所有可能的化学计量和非化学计量形式。
此外，式(I)化合物可以与药学上可接受的溶剂如水、EtOH等以非溶剂化以及溶剂化的形式存在。
式(I)的某些化合物可以以立体异构的形式存在(例如，它们可以含有一个或多个不对称碳原子)。单独的立体异构体(对映异构体和非对映异构体)和它们的混合物包括在本发明的范围内。本发明还涵盖由式(I)表示的化合物的各个异构体与其异构体的混合物，其中一个或多个手性中心被反转。
本发明还包括本发明的化合物的所有合适的同位素变体。可以掺入本发明的化合物中的同位素的实例分别包括如2H、3H、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F和36Cl的同位素。本发明的某些同位素变体，例如其中掺入如3H或14C的放射性同位素的那些，可用于药物和/或底物组织分布研究。此外，采用如氘2H的同位素的取代可以提供由更高的代谢稳定性导致的某些治疗优势。本发明的化合物的同位素变体通常可采用合适试剂的适当同位素变体通过常规方法(如通过说明性方法)或通过下文实施例中描述的制备来制备。
如下面的方案A-I所示，式(I)的咪唑(其中R为氢)可以在合适的溶剂(例如，THF或THF/水混合物)中，在室温至回流的温度范围内，通过与式A2的α-卤代酮缩合由式A1的脒来合成，式A2为市售可得或者可以根据本领域技术人员公知的常规方法或按照WO 2012/049277中描述的方法来制备，并且其中X为氯、溴或碘(Li,B.等人，《有机工艺研究与开发(Org.Process Res.Dev.)》，2002，6，682-683)。
方案A-I
其中A、R1和R2如上所定义，并且X为氯、溴或碘。
如下面的方案A2所示，式(I)的咪唑(其中R为L1-R5，L1和R5如上所定义)可以在合适的溶剂(例如，二甲基乙酰胺)中，并且在碱的存在下，通过式(I)的化合物(其中R为氢)与式A3的衍生物(其中LG为离去基团(例如，溴))的反应而获得：
方案A-II
其中A、R1和R2如上所定义，R为L1-R5(其中L1和R5如上所定义)，并且LG为离去基团。
如下面的方案B所描述的，式A1的脒可以从式B1和B2的化合物开始制备：
方案B
其中R3、R4和A如上所定义。
4H-噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸乙酯(化合物B1，Fluorochem公司，CatNo.067104)和6H-噻吩并[2,3-b]吡咯-5-羧酸乙酯(化合物B2，Sigma Aldrich公司，CatNo.PH011284)是市售可得的。化合物B1或B2可以在合适的碱(如NaH)存在下，在合适的溶剂(如DMF)中，在约0℃至约50℃的温度范围下，用合适的烷基卤化物R3-LG1或R4-LG1来烷基化，其中R3和R4如上所定义，LG1是离去基团，例如溴化物或碘化物。
根据已知方法，例如，通过用碱(如LiOH或NaOH)，在合适的溶剂中(例如，在乙醇、THF或乙醇/水混合物中)，式B3或B4的化合物的乙酯基团可以水解为式B5的羧酸。所述乙酯的水解可在0℃至溶剂沸点的温度下进行。
根据本领域技术人员公知的常规方法，式B5的羧酸被转化为式B6的伯酰胺。例如，式B5的羧酸被转化为合适的酰化剂，如酰氯，然后在0℃下在合适的溶剂如水中用NH3处理。
可以在约0℃至回流的温度下，在合适的溶剂(例如CH2Cl2、甲苯、乙腈)中，用脱水剂(如五氧化二磷、SOCl2、DBU/二氯磷酸乙酯)将式B6的化合物转化为式B7的腈。
式A1的脒可以通过酰亚胺化物的酰胺化(Pinner反应)、N-甲硅烷基化的芳基脒的水解(AR Sanger，《无机和核化学快报(Inorg.Nucl.Chem.Lett.)》，1973，9，351)、向腈中加入氨基化铝(《四面体快报(Tetrahedron Letters)》，1995，48，8761-8764)、或通过式B9(其可以通过式B7的腈与羟胺反应，然后与乙酸酐反应而获得)的酰化脒肟的还原由式B7的化合物来制备。式B9的化合物的还原可以，例如，通过使用还原剂(如H2)的钯炭(Ismail,M.A.等人，《药物化学杂志》，2003，46，4761-4769，Lange,U.E.W等人，《生物有机与药物化学快报》，2003，13，2029-2033)、甲酸钾或甲酸铵(Nadrah,K.等人，《合成化学快报(Synlett)》，2007，1257-125，Jnaneshwara,G.K.等人《化学研究杂志(J.Chem.Research)》，1998，160-161)、三乙基硅烷(Mahajan,U.S.等人，《合成通讯(Synthetic Communications)》，2011，41，2195-2199)或在乙酸中采用Zn(Goswami,R.等人，《生物有机与药物化学》，2014，22，3187-3203)的催化氢化来进行。
式A3的化合物可通过已知方法来制备。例如，式C5的化合物(其中LG和R6如上所定义，Y和L2为氧)可以通过式C1的二醇衍生物与式C2的醇在光延反应的标准条件下进行反应而获得，例如，在约0℃至80℃的温度下，在合适的溶剂(如四氢呋喃或甲苯)中，通过与三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯反应约30分钟至72小时的时间，以得到式C3的化合物。如以下方案C中所示，在光延反应的标准条件下，式C3的化合物与式C4的醇反应得到中间体C5：
方案C
其中p、R6和LG如上所定义。
式C1、C2和C4的化合物为已知化合物或可通过已知方法制备。
或者，如下面的方案D中所示，在光延反应的标准条件下，式D1的化合物与式D2的醇反应得到的中间体D3：
方案D
其中p、R6和LG如上所定义。
式D1和D2的化合物为已知化合物或可通过已知方法制备。
在进行前述反应之一之前，必须保护本发明的化合物和/或其中间体的化学基团的情况下，可以根据已知方法保护和去保护所述化学基团。关于保护/去保护步骤的详尽讨论例如在Greene和Wuts(Greene,T.W.；Wuts,P.G.M.，《有机合成中的保护基团(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)》，John Wiley&Sons Inc.，2006)或Kocienski(Kocienski,P.J.，《保护基团(Protecting Groups)》，George Thieme Verlag，2005)中提供。
可以通过已知的常规方法进行式(I)的化合物的盐化作用和不含其盐的式(I)化合物的制备。
鉴于上述作用机制，本发明的化合物可用于预防或***类型的疾病，包括但不限于：急性和慢性髓性白血病、急性和慢性淋巴细胞白血病、骨髓增生异常综合征、多发性骨髓瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、皮肤和外周T细胞淋巴瘤、成人T细胞白血病、大B细胞淋巴瘤；乳腺肿瘤；肺肿瘤和胸膜间皮瘤、腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌；皮肤肿瘤包括基底细胞癌(基底细胞癌)、黑色素瘤、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、角化棘皮瘤、骨肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、脑肿瘤、头颈癌、睾丸和卵巢肿瘤、***、子宫内膜和***癌肿瘤(例如晚期***癌)、甲状腺癌(例如甲状腺滤泡癌)、结肠癌(例如结肠腺癌、结肠腺瘤)、胃肿瘤和胃肠腺癌、肝细胞癌、胰腺癌(例如外分泌胰腺癌)、肾肿瘤、畸胎癌和胚胎癌。
本发明的化合物还可用于预防或治疗感染，包括但不限于，由原生动物、真菌、植物毒性剂、病毒和寄生虫引起的感染，例如，HIV或疱疹病毒感染。
此外，本发明的化合物还可用于预防或治疗肥胖症。
式(I)化合物还可以通过单独给药，或者通过在同一药物制剂中包括两种活性成分而与其它药剂，特别是抗肿瘤和分化剂组合使用。合适的其它药剂的非详尽示例包括：
a)组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(例如，但不限于，SAHA、PXD101、JNJ-26481585、SB939、ITF-2357、LBH589、PCI-24781、丙戊酸、丁酸、MS-275、MGCD0103和FK-228)；
b)类视黄醇受体调节剂，如13-顺式-视黄酸、9-顺式-视黄酸、贝沙罗汀、阿利维A酸或维甲酸；维生素D；
c)用于肿瘤内科的抗增殖/抗肿瘤药物及其组合，如烷化剂(例如铂原衍生物、如顺铂、卡铂、奥沙利铂、洛铂、沙铂、奈达铂、七铂；氮芥(nitrogen mustard)如苯丁酸氮芥、美法仑、氮芥(chlormethine)、环磷酰胺、异环磷酰胺、曲磷胺、乌拉莫司汀、苯达莫司汀、雌莫司汀；白消安、替莫唑胺或亚硝基脲)；抗代谢物(例如抗叶酸剂如氨蝶呤、甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞)；克拉屈滨、氯法拉滨、氟达拉滨、巯嘌呤、喷司他丁、硫鸟嘌呤等嘌呤类；嘧啶类、如卡培他滨、阿糖胞苷、氟尿嘧啶、氟尿嘧啶、吉西他滨；阿扎胞苷、地西他滨；胞嘧啶***糖苷或羟基脲；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类药物、如阿克拉霉素、氨柔比星、道诺霉素、阿霉素、表柔比星、伊达比星(idarabicin)、戊柔比星、佐柔比星；米托蒽醌；或来自链霉菌的抗生素、如放线菌素、博来霉素、丝裂霉素或普卡霉素)；抗有丝***剂(例如长春花新碱、长春花碱、长春花碱地辛或长春瑞滨等长春花生物碱；多西紫杉醇、紫杉醇或替西他赛(tesetaxel)等紫杉醇类；伊沙匹隆等埃坡霉素)和拓扑异构酶抑制剂(例如依托泊苷和替尼泊苷等表鬼臼毒素；安吖啶、喜树碱、伊立替康、鲁比替康红花素和拓扑替康)；
d)细胞抑制剂，如抗***(例如但不限于他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和艾多昔芬)、***受体下调剂(例如但不限于氟维司群)、抗雄激素(例如但不限于比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特、利罗唑或醋酸环丙孕酮)、LHRH拮抗剂或LHRH激动剂(例如但不限于戈舍瑞林、亮丙瑞林或布舍瑞林)、孕激素(例如但不限于醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制剂(例如但不限于阿那曲唑、来曲唑、伏氯唑和依西美坦)和5-α-还原酶抑制剂如非那雄胺；
e)抑制癌细胞侵袭的药剂(例如金属蛋白酶抑制剂和尿激酶纤溶酶原激活物受体功能抑制剂)；
f)生长因子功能抑制剂，例如生长因子抗体，生长因子受体抗体(例如但不限于抗erbb2抗体曲妥珠单抗、抗erbbl抗体西妥昔单抗和帕尼单抗、抗IGF1R抗体单株抗体(figitumumab))、法呢基转移酶抑制剂、MEK抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂和丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂，例如恩扎妥林、达沙替尼、埃罗替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、尼洛替尼、索拉非尼、舒尼替尼、依维莫司、西罗莫司或替西罗莫司；
g)抗血管生成剂，抑制血管内皮生长因子作用的那些，例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗、来那度胺或沙利度胺；
h)细胞周期抑制剂，包括例如CDK抑制剂(例如但不限于夫拉平度、细胞周期蛋白B激酶抑制剂(roscovitine))和细胞周期检查点的其它抑制剂；极光激酶抑制剂和参与有丝***和胞质***调节的其它激酶；
i)蛋白酶体抑制剂(例如但不限于乳胞素、硼替佐米、环氧酶素)；
j)HSP90抑制剂(例如但不限于AT-13387、KOS-953、KOS-1022、CNF-1010、CNF-2024、SNX 5422、STA-9090、NVP-HSP990、NVP-AUY922、PU-H17和XL-888)
k)选择性COX-2抑制剂(例如但不限于塞来昔布)，或非选择性NSAID(例如但不限于双氯芬酸、氟比洛芬、布洛芬、酮洛芬或萘普生)。
另一方面，通式(I)的化合物可与放射疗法组合使用。在再一个方面，通式(I)的化合物可以与标准化学疗法组合施用，例如但不限于CMF(环磷酰胺、甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶)、CAF(环磷酰胺、阿霉素和5-氟尿嘧啶)、AC(阿霉素和环磷酰胺)、FEC(5-氟尿嘧啶、表柔比星和环磷酰胺)、ACT或ATC(阿霉素、环磷酰胺和紫杉醇)或CMFP(环磷酰胺、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶和***)。
本发明还提供了包含一种或多种式(I)的化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂的药物组合物。所述药物组合物可以根据治疗要求来选择。这些组合物是通过共混制备的，并且适合于口服或肠胃外给药，并且因此可以以片剂、胶囊、口服制剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、可注射或可输注液体、溶液、悬浮液、乳液、栓剂、软膏、乳膏、洗剂、凝胶、糊剂、透皮给药装置的形式给药。
用于口服给药的片剂和胶囊通常以单位剂量形式提供并含有常规赋形剂，如粘合剂、填充剂(包括纤维素、甘露醇、乳糖)、稀释剂、压片剂、润滑剂(包括硬脂酸镁)、洗涤剂、崩解剂(如聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物、如乙醇酸钠淀粉)、着色剂、调味剂和润湿剂(如十二烷基硫酸钠)。
口服固体组合物可通过常规的共混、填充或压片方法来制备。可以重复共混操作以将活性成分分布在含有大量填料的组合物中。这种操作是常规的。
口服液体制剂可以是以，例如，水性或油性悬浮液、溶液、乳液、糖浆或酏剂的形式，或者可以作为干燥产品存在，用于在使用前用水或合适的载体重建。这种液体制剂可含有常规添加剂，如悬浮剂，例如山梨糖醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪；乳化剂，如卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯或***胶；非水性载体(可包括食用油)，如杏仁油、分馏椰子油、油性酯(如甘油、丙二醇或乙醇的酯)；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，以及常规的调味剂或着色剂(如果需要)。口服制剂还包括常规的缓释制剂，例如肠溶包衣片剂或颗粒剂。
通过吸入给药的药物制剂可以由吹入器或喷雾器加压包装中递送。
对于肠胃外给药，可以制备含有所述化合物和无菌载体的液体单位剂量。取决于载体和浓度，所述化合物可以是悬浮的或溶解的。所述肠胃外溶液通常通过将化合物溶解在所述载体中，过滤灭菌，填充合适的小瓶并密封来制备。有利地，助剂如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在所述载体中。为了增加稳定性，所述组合物可以在填充小瓶之后冷冻并在真空下除去水。胃肠外悬浮液以基本相同的方式制备，不同之处在于所述化合物可以悬浮在所述载体中而非溶解，并且在悬浮于无菌载体中之前通过接触环氧乙烷来灭菌。有利地，表面活性剂或润湿剂可包含在所述组合物中以促进本发明的化合物的均匀分布。
对于口腔或舌下给药，所述组合物可以是片剂、锭剂、软锭剂或凝胶。
所述化合物可以药物配制成用于直肠给药的，例如含有常规栓剂基质如可可脂、聚乙二醇或其它甘油酯的栓剂或保留灌肠剂。
施用本发明的化合物的另一种方法涉及局部治疗。局部制剂可含有例如软膏、乳膏、洗剂、凝胶、溶液、糊剂和/或可含有脂质体、胶束和/或微球。软膏的实例包括含油软膏，如植物油、动物脂肪、半固体烃，可乳化的软膏，如羟基硬脂酸硫酸酯、无水羊毛脂、亲水性凡士林、鲸蜡醇、甘油单硬脂酸酯、硬脂酸，含有各种分子量的聚乙二醇的水溶性软膏。如制剂专家所知的乳膏是粘性液体或半固体乳液，并含有油相、乳化剂和水相。所述油相通常含有凡士林和醇(如十六烷基或硬脂基醇)。适合局部施用于眼睛的制剂还包括滴眼剂，其中将活性成分溶解或悬浮在合适的载体中，尤其是用于活性成分的含水溶剂中。
施用本发明的化合物的另一种方法涉及透皮递送。典型的透皮制剂包含常规的水性和非水性载体，如乳膏、油、洗剂或糊剂，或者可以是膜或药物贴剂的形式。
所述制剂的参考文献是Remington的书(《雷明顿：药学技术与实践(Remington：The Science and Practice of Pharmacy)》，Lippincott Williams&Wilkins，2000)。
本发明的化合物可单独用作单一疗法或与其它治疗剂组合用于治疗上述病症。所述组合可以作为治疗的各个组分的单独组合物(同时，顺序)给药，或作为含有两种药剂的单一剂型给药。当本发明的化合物与其它活性成分组合时，所述活性成分可以分别配制成上述形式之一的单一成分制剂，然后作为组合制剂提供，它们同时或不同时给予，或可以一起配制成两种或更多种成分制剂。
通式(I)化合物可以以，例如，0.001至1000mg/kg体重每日的每日总剂量给药患者。剂量单位组合物可含有其约数的此量以构成日剂量。确定特定患者的最佳剂量是本领域技术人员所熟知的。
通常的做法是，所述组合物通常附有书面或印刷的说明书，用于所讨论的治疗。
提供以下实施例和生物学数据以进一步说明本发明。
1.化学合成
除非另有说明，否则使用市售可得的试剂和溶剂(HPLC级)而无需进一步纯化。具体而言，以下缩写可能已经用于实验方法的描述中：
除非另有说明，否则所有温度均以℃(摄氏度)或K(开氏度)表示。
用Varian 500MHz仪器获得1H-NMR谱。化学位移以百万分率(ppm，单位δ)表示。耦合常数以赫兹(Hz)表示，***模式描述为s(单重态)、bs(宽信号)、d(双重态)、t(三重态)、q(四重态)、quint(五重态)、m(多重态)。
LC-MS分析在采用Acquity UPLC BEH C18(50x 2.1mm，1.7μm)或Acquity UPLCHSS T3(50x 2.1mm，1.8μm))色谱柱的与SQD单四极杆(Waters)连接的Waters AcquityUPLC或Waters Acquity UPLC H-Class上进行。A相由Milli-Q水/CH3CN 95/5+0.07％甲酸或Milli-Q水+0.07％甲酸组成；B相由CH3CN+0.05％甲酸组成；流速：0.6mL/min；UV检测(DIODE阵列)由210至400nm；ESI+检测范围为100-2000m/z。如果没有另外说明，则假定产品为100％纯度来计算产率。
中间体1：4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸
如EP申请14183755.9中所述制备4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸酯。
中间体2：4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸
如EP申请14183755.9中所述制备4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸酯。
中间体3：4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲酰胺
在室温下将1.7g(14mmol，1mL)的SOCl2和3滴干燥DMF加入到2.12g(11.7mmol)的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸(中间体1)溶于15mL的干燥CH2Cl2/THF(3:1，v:v)的溶液中。将混合物在回流下搅拌2小时，然后冷却至室温并在0℃下滴加至8.2mL(58.5mmol)的28％的铵水溶液中。5分钟后，将反应混合物用水稀释并用EtOAc萃取。将有机相用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干燥，得到2.1g的棕色固体状的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲酰胺(99％)。1H NMR(DMSO)δ(ppm):7.70-7.65(bs,1H),7.44(d,J＝5.4Hz,1H),7.18(d,J＝5.4Hz,1H),6.87–6.84(bs,1H),7.09(s,1H),3.97(s,3H)；MS(ESI):m/z:181[M+H]+。
中间体4：4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲酰胺
根据中间体3的程序，由4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-羧酸(中间体2)开始，制备了4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲酰胺，得到棕色固体状的4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲酰胺(99％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.31(d,J＝5.4Hz,1H),6.98(d,J＝5.4Hz,1H),6.85(s,1H),5.57(bs,2H),4.59(q,J＝6.8Hz,2H),1.44(t,J＝6.8Hz,3H)；MS(ESI):m/z:195[M+H]+。
中间体5：4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈
在0℃下，将0.62g(3.84mmol，0.39mL)的二氯磷酸乙酯和0.93g(5.76mmol，0.58mL)的DBU加入到0.35g(1.92mmol)的4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5甲酰胺(中间体3)的干燥CH2Cl2(10mL)的溶液中。在室温下搅拌12小时后，加入额外的0.62g(3.84mmol)的二氯磷酸乙酯和0.93g(5.76mmol，0.58mL)的DBU，并使反应再进行2小时。然后将混合物用水稀释并用2M HCl调至酸性pH；将水相用CH2Cl2萃取，并将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干燥。粗产物通过快速硅胶色谱(己烷/EtOAc，1％的EtOAc至10％的EtOAc)纯化，得到0.234g的淡黄色固体状的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈(75％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.41(d,J＝5.4Hz,1H),7.02(s,1H),6.97(d,J＝5.4Hz,1H),3.90(s,3H)。
中间体6：4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈
根据中间体5的程序，由4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲酰胺(中间体4)开始，制备了4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈，得到浅黄色固体状的4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈中间体(73％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.43(d,J＝5.4Hz,1H),7.01(s,1H),6.95(d,J＝5.4Hz,1H),4.28(q,J＝7.3Hz,2H),1.51(t,J＝7.3Hz,3H)。
中间体7：N'-羟基-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒
将0.58g(8.3mmol)的盐酸羟胺和1.07g(8.34mmol，1.45mL)的DIPEA加入到1.23g(7.58mmol)的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈(中间体5)在16mL的干燥EtOH中的溶液中。将混合物在55℃下加热2小时，然后加入额外的0.2g(2mmol)的盐酸羟胺和0.3g(2mmol，0.4mL)的DIPEA，并将混合物再搅拌2小时。将溶液浓缩，并将残余物在CH2Cl2/水之间分配。水层用CH2Cl2萃取，并将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干，得到1.47g的淡黄色固体状的N'-羟基-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒(99％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):9.62(s,1H),7.28(d,J＝5.4Hz,1H),7.13(d,J＝5.4Hz,1H),6.71(s,1H),5.72(bs,2H),3.86(s,3H)；MS(ESI):m/z:196[M+H]+。
中间体8：4-乙基-N'-羟基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒
根据中间体7的程序，由4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈(中间体6)开始，制备了4-乙基-N'-羟基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒，得到浅黄色固体状的4-乙基-N'-羟基-噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒(99％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.19(d,J＝5.4Hz,1H),6.95(d,J＝45.4Hz,1H),6.65(s,1H),4.86(bs,2H),4.39(q,J＝7.3Hz,2H),1.38(t,J＝7.3Hz,3H)；MS(ESI):m/z:210[M+H]+。
中间体9：氨基-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)亚甲基]氨基]乙酸酯
室温下将0.95g(9.3mmol，0.88mL)的乙酸酐加入到1.52g(7.79mmol)的N'-羟基-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒(中间体7)在20mL的AcOH中的溶液中，将混合物在室温下搅拌15分钟。然后将混合物用水/CH2Cl2稀释，并用饱和NaHCO3溶液中和。水相用CH2Cl2萃取，有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干。所得的深色固体用硅胶柱色谱纯化(EtOAc/己烷1:10(v:v)至8:2(v:v))，得到1.57g的深色固体状的氨基-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)亚甲基]氨基]乙酸酯(85％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):7.39(d,J＝5.4Hz,1H),7.17(d,J＝5.4Hz,1H),6.89(s,1H),6.70(s,2H),3.92(s,3H),2.15(s,3H)；MS(ESI):m/z:497[2M+Na]+。
中间体10：氨基-(4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)亚甲基]氨基]乙酸酯
按照中间体9的程序，由4-乙基-N'-羟基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒(中间体8)开始得到深色固体状的氨基-(4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)亚甲基]氨基]乙酸酯(80％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.23(d,J＝5.4Hz,1H),6.96(d,J＝5.4Hz,1H),6.75(s,1H),5.00(bs,2H),4.50(q,J＝7.2Hz,2H),2.28(s,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI):m/z:274[M+Na]+。
中间体11：4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯
将1.56g(6.57mmol)的氨基-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)亚甲基]氨基]乙酸酯(中间体9)溶于250mL的EtOH中，并加入3mL的AcOH。将混合物在H-立方体装置中使用10％Pd/C柱在35℃和大气压下以0.5mL/min的流速氢化。然后将溶液浓缩，残余物用Et2O沉淀。将固体滤出并干燥，得到1.07g的灰色粉末状的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯(70％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):10.99–8.34(bs,4H),7.52(d,J＝5.4Hz,1H),7.24(d,J＝5.4Hz,1H),7.00(s,1H),3.91(s,3H),1.74(s,3H)；MS(ESI):m/z:180[M+H]+。
或者，中间体11可以直接由4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲腈中间体5获得。将2.09g(12.88mmol)的中间体5溶于干燥THF(7mL)中并加入到双(三甲基硅烷基)氨基化锂(14.17mmol，14.17mL)的1M溶液中。在室温下搅拌4.5小时后，将反应混合物在0℃下用2NHCl***溶液(57.96mmol，30mL)淬灭，并在0℃下搅拌15分钟。
在冰箱中放置过夜后，将混合物过滤，固体用***洗涤并干燥，得到米色粉末状的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒盐酸盐中间体11(96％)。
中间体12：4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯
在0℃下，将0.097g(0.83mmol，0.13mL)的三乙基硅烷滴加到0.06g(0.06mmol)的10％Pd/C和0.07g(0.28mmol)的氨基-(4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)亚甲基]氨基]乙酸酯(中间体10)在0.5mL的干燥MeOH中的悬浮液中。使混合物在1小时内达到室温并在室温下再搅拌30分钟。将混合物在硅藻土床上过滤，浓缩，并将残余物用CH2Cl2/Et2O打浆，得到49mg的灰色粉末状的4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯(69％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):10.60–8.43(bs,4H),7.48(d,J＝5.4Hz,1H),7.25(d,J＝45.4Hz,1H),6.96(s,1H),4.45(q,J＝7.1Hz,2H),1.74(s,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)；MS(ESI):m/z:194[M+H]+。
中间体13：6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲脒盐酸盐
6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-羧酸
如EP申请14183755.9中所述制备6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-羧酸。
6-甲基吡咯并[2,3-b]吡咯-5-甲酰胺
根据中间体3的程序，由6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-羧酸开始，制备了6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲酰胺，得到浅黄色固体状的6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲酰胺(99％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):7.65(bs,1H),7.11(d,J＝4.9Hz,1H),7.06(s,1H),7.05-7.02(m,2H),7.05(3.94(s,3H).MS(ESI):m/z:181[M+H]+。
6-甲基吡咯并[2,3-b]吡咯-5-甲腈
根据中间体5的程序，由6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲酰胺开始，制备了6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲腈，得到浅黄色固体状的6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲腈(64％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.03–7.02(d,J＝5.4Hz,1H),7.00(s,1H),6.99(d,J＝5.4Hz,1H),3.87(s,3H)。
6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲脒盐酸盐
将0.391g(2.41mmol)的6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲腈溶于2.5mL的干燥THF中，并在室温下滴加至3.1mL(3.1mmol)的六甲基二硅基胺基锂在THF中的1M溶液中。将混合物在室温下搅拌过夜。然后再加入0.2mL(0.2mmol)的六甲基二硅基胺锂的1M溶液。在室温下再搅拌3小时后，在0℃下滴加1.2mL(2.4mmol)的HCl的Et2O中的2M溶液，并使混合物在15分钟内达到室温。观察到一些沉淀物，用Et2O稀释混合物，过滤，残余物用Et2O洗涤，得到0.444g的米色粉末状的6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲脒盐酸盐(86％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):8.61(bs,4H),7.23(d,J＝4.9Hz,1H),7.10(d,J＝4.9Hz,1H),7.04(s,1H),3.88(s,3H).MS(ESI):m/z:180[M+H]+。
实施例1：4-甲基-5-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯
将0.018g(0.092mmol)的2-溴-1-苯基-乙酮(Sigma-Aldrich，Cat.No.115835)在THF(0.05mL)中的溶液滴加到0.016g(0.092mmol)的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯(中间体11)在0.55mL的THF/水(4:1(v:v))中的悬浮液中。将混合物加热至回流30分钟。然后将溶液浓缩，并将残余物用水稀释，用EtOAc萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。所得的粗产物通过快速硅胶色谱(己烷/EtOAc，97:3(v:v)至7:3(v:v))纯化，然后用Et2O打浆，得到0.013g的白色粉末状的N'-羟基-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒(51％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.83–7.73(m,2H),7.46–7.38(m,2H),7.34(s,1H),7.32–7.28(m,1H),7.17(d,J＝5.4Hz,1H),6.96(d,J＝5.4Hz,1H),6.73(s,1H),4.18(s,3H)；MS(ESI):m/z:280[M+H]+。
根据实施例1所述的程序，由4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯(中间体11：实施例2-10、13和16-17)、4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯(中间体12：实施例11-12)或6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯-5-甲脒盐酸盐(中间体13：实施例14-15)和适当的α-溴代酮或α-氯代酮开始，制备了以下化合物(参见表1)。
表1
中间体14：4-[3-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
4-(3-羟基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下将0.64g(3.0mmol，0.62mL)DIAD(Sigma-Aldrich，Cat.No.225541)滴加到0.33g(3.0mmol)的间苯二酚(Sigma-Aldrich，Cat.No.398047)、0.42g(2.0mmol)的4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(Apollo，Cat.No.OR5404)和0.80g(3.0mmol)的PPh3(Sigma-Aldrich，Cat.No.T84409)在20mL的干燥THF中的溶液中。使反应混合物达到室温并搅拌过夜。然后除去溶剂，并将粗混合物经快速硅胶色谱(己烷/丙酮，0％至15％丙酮)纯化，以得到0.217g的白色固体状的4-(3-羟基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(37％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.16–7.11(m,1H),6.52–6.48(m,1H),6.46–6.41(m,2H),4.96(bs,1H),4.50–4.38(m,1H),3.75–3.65(m,2H),3.39–3.29(m,2H),1.97–1.86(m,2H),1.81–1.69(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:238[M-56+H]+。
4-[3-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下将0.16g(0.76mmol，0.158mL)的DIAD(Sigma-Aldrich，Cat.No.225541)滴加到包含0.150g(0.51mmol)的4-(3-羟基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯、0.100g(0.76mmol，0.057mL)的2-溴乙醇(Sigma-Aldrich，Cat.No.B65586)和0.203g(0.76mmol)的PPh3(Sigma-Aldrich，Cat.No.T84409)在5mL的干燥THF中的溶液中。使溶液达到室温并搅拌过夜。然后将另外0.028mL的2-溴乙醇、0.101mg的PPh3和0.079mL的DIAD加入到冷却至0℃的反应混合物中，并将混合物在室温下再搅拌24小时。除去溶剂，粗产物通过快速硅胶色谱(己烷/丙酮，0％至5％丙酮)纯化，以得到0.105g的无色油状物的4-[3-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(51％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.23–7.15(m,1H),6.58–6.47(m,3H),4.50–4.43(m,1H),4.28(t,J＝6.4Hz,2H),3.75–3.67(m,2H),3.64(t,J＝6.4Hz,2H),3.38–3.28(m,2H),1.96–1.86(m,2H),1.81–1.69(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:344[M-56+H]+。
中间体15：3-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
3-[(4-羟基苯氧基)甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.23g(2.1mmol)的氢醌(Sigma-Aldrich，Cat.No.H9003)和0.22g(1.0mmol)的3-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(Fluorochem，Cat.No.048620)开始，制备了0.37g的3-[(4-羟基苯氧基)甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(产率：24％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.82–6.73(m,4H),4.59(s,1H),3.94–3.80(m,2H),3.63–3.55(m,1H),3.53–3.44(m,1H),3.42–3.32(m,1H),3.24–3.14(m,1H),2.70–2.60(m,1H),2.12–2.00(m,1H),1.87–1.73(m,1H),1.47(s,9H)；MS(ESI):m/z:238[M-56+H]+。
3-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤2的程序，由0.070g(0.25mmol)的3-[(4-羟基苯氧基)甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯和2-溴乙醇开始，制备了0.053g的3-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(收率：54％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.92–6.79(m,4H),4.25(t,J＝6.4Hz,2H),3.97–3.81(m,2H),3.62(t,J＝6.1Hz,2H),3.60–3.56(m,1H),3.51–3.44(m,1H),3.41–3.32(m,1H),3.23–3.16(m,1H),2.70–2.61(m,1H),2.11–2.02(m,1H),1.85–1.74(m,1H),1.47(s,9H)；MS(ESI):m/z:344[M-56+H]+。
中间体16：4-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
4-[(4-羟基苯氧基)甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.50g(4.5mmol)的氢醌(Sigma-Aldrich，Cat.No.H9003)和0.65g(3.0mmol)的4-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(Sigma-Aldrich，Cat.No.556017)开始，制备了0.28g的4-[(4-羟基苯氧基)甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(产率：31％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.83–6.70(m,4H),4.58(bs,1H),4.22–4.10(m,2H),3.75(d,J＝6.4Hz,2H),2.81–2.69(m,2H),2.00–1.88(m,1H),1.86–1.77(m,2H),1.48(s,9H),1.31–1.23(m,2H)；MS(ESI):m/z:252[M-56+H]+。
4-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤2的程序，由0.28g(0.90mmol)的4-[(4-羟基苯氧基)甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯和2-溴乙醇开始，制备了0.11g的4-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(产率：29％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.89–6.79(m,4H),4.25(t,J＝6.4Hz,2H),4.20–4.11(m,2H),3.76(d,J＝6.4Hz,2H),3.62(t,J＝6.4Hz,2H),2.81–2.70(m,2H),2.00–1.88(m,1H),1.87–1.77(m,2H),1.47(s,9H),1.32–1.23(m,2H)；MS(ESI):m/z:358[M-56+H]+。
中间体17：4-[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
4-(4-苄氧基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.60g(3.0mmol)的4-苄氧基苯酚(Sigma-Aldrich，Cat.No.158348)和0.93g(4.5mmol)的4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(Apollo，Cat.No.OR5404)开始，制备了0.8g的4-(4-苄氧基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(产率：70％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.46–7.42(m,2H),7.42–7.37(m,2H),7.36–7.31(m,1H),6.93–6.84(m,4H),5.03(s,2H),4.38–4.28(m,1H),3.76–3.68(m,2H),3.35–3.24(m,2H),1.95–1.84(m,2H),1.78–1.67(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:328[M-56+H]+。
4-(4-羟基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将溶于47mL的干燥EtOH中的0.454g(1.18mmol)的4-(4-苄氧基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯在H-立方体装置中使用10％Pd/C柱在25℃、大气压下以0.5mL/min的流速氢化5小时。然后将溶液浓缩，以得到0.340g的白色固体状的4-(4-羟基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(98％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.87–6.71(m,4H),4.58(bs,1H),4.36–4.27(m,1H),3.76–3.67(m,2H),3.37–3.24(m,2H),1.95–1.82(m,2H),1.78–1.66(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:238[M-56+H]+。
4-[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤2的程序，由0.340g(1.16)的4-(4-羟基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯和2-溴乙醇开始，获得了0.31g的4-[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：66％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.92–6.80(m,4H),4.37–4.31(m,1H),4.25(t,J＝6.1Hz,2H),3.76–3.67(m,2H),3.63(t,J＝6.4Hz,2H),3.35–3.26(m,2H),1.95–1.85(m,2H),1.77–1.67(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:344[M-56+H]+。
中间体18：4-[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
4-(4-苄氧基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.60g(3.0mmol)的4-苄氧基苯酚和0.97g(4.5mmol)的4-羟基氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(Sigma-Aldrich，Cat.No.CDS009029)开始，制备了0.74g的4-(4-苄氧基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(产率：62％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.46–7.42(m,2H),7.42–7.37(m,2H),7.36–7.31(m,1H),6.92–6.80(m,4H),5.02(s,2H),4.37–4.26(m,1H),3.65–3.23(m,4H),2.09–1.84(m,5H),1.70–1.59(m,1H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:342[M-56+H]+。
4-(4-羟基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体17步骤2的程序，由0.71g(1.8mmol)的4-(4-苄氧基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯开始，制备了0.51g的4-(4-羟基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(产率：92％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.82–6.72(m,4H),4.58(bs,1H),4.36–4.25(m,1H),3.65–3.22(m,4H),2.12–1.83(m,5H),1.70–1.59(m,1H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:252[M-56+H]+。
4-[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤2的程序，由0.36g(1.2mmol)的4-(4-羟基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯和2-溴乙醇开始，制备了0.22g的4-[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(收率：47％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.92–6.76(m,4H),4.38–4.29(m,1H),4.25(t,J＝6.4Hz,2H),3.67–3.22(m,6H),2.11–1.84(m,5H),1.70–1.59(m,1H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:358[M-56+H]+。
中间体19：4-[4-(3-溴丙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.22g(1.0mmol)的4-(3-溴丙基)苯酚(US5204018)和0.30g(1.5mmol)的4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(Apollo，Cat.No.OR5404)开始，制备了0.33g的4-[4-(3-溴丙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(产率：82％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.17–7.08(m,2H),6.89–6.81(m,2H),4.49–4.38(m,1H),3.78–3.65(m,2H),3.40(t,J＝6.6Hz,2H),3.37–3.30(m,2H),2.73(t,J＝7.3Hz,2H),2.18–2.10(m,2H),1.95–1.87(m,2H),1.80–1.69(m,2H),1.47(s,9H)；MS(ESI):m/z:342[M-56+H]+。
中间体19A：4-[4-(3-溴丙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.28g(1.3mmol)的3-(3-溴丙基苯酚(Murphy,W.等人，《化学学会杂志，Perkin学报1：有机生物学-有机化学(J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1:Org.Bio-Org.Chem.)》，1980，7，1567-1577)和0.40g(1.95mmol)的4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(Apollo，Cat.No.OR5404)开始，制备了0.41g的4-[3-(3-溴丙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(产率：79％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.25–7.18(m,1H),6.83–6.74(m,3H),4.51–4.42(m,1H),3.76–3.67(m,2H),3.41(t,J＝6.4Hz,2H),3.38–3.31(m,2H),2.75(t,J＝7.3Hz,2H),2.21–2.13(m,2H),1.97–1.87(m,2H),1.81–1.69(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:342[M-56+H]+。
中间体20：3-[[4-(3-溴丙基)苯氧基]甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体15步骤1的程序，由0.39g(1.8mmol)的4-(3-溴丙基)苯酚(US5204018)和0.57g(2.7mmol)的3-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(Fluorochem，Cat.No.048620)开始，制备了0.37g的3-[[4-(3-溴丙基)苯氧基]甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(产率：52％)。1HNMR(CDCl3)δ(ppm):7.16–7.07(m,2H),6.87–6.78(m,2H),3.95–3.85(m,2H),Part AB ofABX System:VA＝3.6,VB＝3.21,JAB＝10.9Hz,JAX＝7.6Hz,JBX＝6.8Hz,3.52–3.44(m,1H),3.42–3.33(m,3H),2.76–2.62(m,3H),2.17–2.03(m,3H),1.85–1.75(m,1H),1.47(s,9H)；MS(ESI):m/z:342[M-56+H]+。
中间体21：4-[3-(2-溴乙氧基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
4-(3-羟基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.50g(4.5mmol)的间苯二酚(Sigma-Aldrich，Cat.No.398047)和0.65g(3.0mmol)的4-羟基氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(Sigma-Aldrich，Cat.No.CDS009029)开始，制备了0.43g的4-(3-羟基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(产率：46％)。1H NMR(CDCl3+D2O)δ(ppm):7.19–7.05(m,1H),6.52–6.33(m,3H),4.48–4.32(m,1H),3.68–3.15(m,4H),2.16–1.81(m,5H),1.72–1.61(m,1H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:252[M-56+H]+。
4-[3-(2-溴乙氧基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤2的程序，由0.19g(0.61mmol)的4-(3-羟基苯氧基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯和2-溴乙醇开始，制备了0.13g的3-[[4-(2-溴乙氧基)苯氧基]甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(产率：51％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.23–7.14(m,1H),6.55–6.48(m,2H),6.48–6.44(m,1H),4.48–4.38(m,1H),4.28(t,J＝6.4Hz,2H),3.64(t,J＝6.1Hz,2H),3.60–3.20(m,4H),2.13–1.86(m,5H),1.71–1.60(m,1H),1.49(s,9H)；MS(ESI):m/z:358[M-56+H]+。
中间体22：4-[[4-(3-溴丙基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.20g(0.91mmol)的4-(3-溴丙基)苯酚(US5204018)和0.29g(1.4mmol)的4-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(Sigma-Aldrich，Cat.No.556017)开始，制备了0.28g的4-[[4-(3-溴丙基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(产率：76％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.17–7.07(m,2H),6.87–6.76(m,2H),4.21–4.11(m,2H),3.79(d,J＝6.4Hz,2H),3.39(t,J＝6.6Hz,2H),2.83–2.69(m,4H),2.19–2.09(m,2H),2.01–1.90(m,1H),1.88–1.76(m,2H),1.47(s,9H),1.34–1.19(m,2H)；MS(ESI):m/z:356[M-56+H]+。
中间体23：4-[4-(3-溴丙基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.20g(0.91mmol)的4-(3-溴丙基)苯酚(US5204018)和0.29g(1.4mmol)的4-羟基氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(中间体18，步骤2)开始，制备了0.28g的4-[4-(3-溴丙基)苯氧基]氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(产率：76％)。1HNMR(CDCl3)δ(ppm):7.14–7.07(m,2H),6.85–6.77(m,2H),4.45–4.38(m,1H),3.65–3.24(m,6H),2.72(t,J＝7.3Hz,2H),2.18–2.10(m,2H),2.10–2.02(m,1H),1.99–1.85(m,4H),1.70–1.59(m,1H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:356[M-56+H]+。
中间体24：4-[[4-(3-溴丙基)-2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
4-[[2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]-4-(3-羟丙基)苯氧基]甲基]哌啶- 1-羧酸叔丁酯
在氮气氛下，将0.079g(0.47mmol)的4-(3-羟丙基)苯-1,2-二醇(Yang,J等人，《生物有机和药物化学快报(Biorg.Med.Chem Lett.)》，2014，24，2680-2684)、0.03g(0.2mmol)的NaI和0.61g(1.9mmol)的Cs2CO3悬浮于1.5mL的干燥DMF中。加入在0.8mL的干燥DMF中的0.46g(1.6mmol)的4-(溴甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(Sigma-Aldrich，Cat.No.796719)，并将悬浮液在80℃下搅拌7小时。
将混合物冷却至室温，再加入一部分的NaI(0.014g，0.09mmol)、Cs2CO3(0.23g，0.72mmol)和4-(溴甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.2g，0.72mmol)。将所得混合物在80℃下加热过夜，然后冷却至室温，产物用EtOAc萃取，用Na2SO4干燥，并通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：己烷/丙酮，0％至18％丙酮)，得到148mg(56％)的淡黄色油状物的4-[[2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]-4-(3-羟丙基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.85–6.69(m,3H),4.22–4.08(m,4H),3.86–3.78(m,4H),3.69(t,J＝7.3Hz,2H),2.82–2.71(m,4H),2.65(t,J＝7.3Hz,2H),2.06–1.94(m,2H),1.92–1.78(m,6H),1.48(s,9H),1.47(s,9H),1.33–1.19(m,4H)；MS(ESI):m/z:585[M+Na]+。
4-[[4-(3-溴丙基)-2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]苯氧基]甲基]哌啶- 1-羧酸叔丁酯
在-18℃下，将0.10g(0.31mmol)的CBr4在0.75mL的CH2Cl2中的溶液滴加至0.144g(0.256mmol)的4-[[2-[(1-叔丁氧基羰基)-4-哌啶基)甲氧基]-4-(3-羟丙基)苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和0.081g(0.31mmol)的PPh3在1.75mL的CH2Cl2中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌4小时。然后，将溶液浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱液：己烷/丙酮，0％至7％丙酮)，得到118mg(74％)的浅黄色油状物的4-[[4-(3-溴丙基)]-2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]苯氧基]甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):6.85–6.67(m,3H),4.24–4.05(m,4H),3.87–3.75(m,4H),3.39(t,J＝6.6Hz,2H),2.83–2.63(m,6H),2.19–2.10(m,2H),2.05–1.93(m,2H),1.88–1.79(m,4H),1.48(s,9H),1.47(s,9H),1.32–1.18(m,4H)；MS(ESI):m/z:647[M+Na]+。
中间体25：4-[4-(2-溴乙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体14步骤1的程序，由0.40g(2.0mmol)的4-(2-溴乙基)苯酚(Fluorochem，Cat.No.233801)和0.61g(3.0mmol)的4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(Apollo,Cat.No.OR5404)开始，制备了0.56g的4-[4-(2-溴乙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(产率：73％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.18–7.08(m,2H),6.91–6.81(m,2H),4.50–4.37(m,1H),3.76–3.65(m,2H),3.54(t,J＝7.6Hz,2H),3.39–3.28(m,2H),3.11(t,J＝7.6Hz,2H),1.99–1.85(m,2H),1.80–1.68(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:328[M-56+H]+。
中间体26：4-[3-[2-[4-乙基-2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)咪唑-1-基]乙氧基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
将0.03g(0.13mmol)的5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯(实施例2)加入到冷却至-15℃的0.0060g(0.16mmol)的NaH(60％的在矿物油中的分散体)在干燥DMA(0.2mL)中的悬浮液中。将混合物在-15℃至0℃的温度下搅拌1小时，然后在0℃下加入0.065g的4-[3-(2-溴乙氧基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体14)在0.5mL干燥DMA中的溶液，并将混合物在室温下搅拌过夜。加入水终止反应，用EtOAc萃取产物。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干燥。粗产物通过快速硅胶色谱(己烷/丙酮，94:6％→60:40(v:v))纯化，得到0.043g的白色泡沫状的4-[3-[2-[4-乙基]-2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)咪唑-1-基]乙氧基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体26，产率：60％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):7.32(d,J＝5.4Hz,1H),7.18(d,J＝5.4Hz,1H),7.16–7.07(m,2H),6.67(s,1H),6.57–6.39(m,3H),4.54–4.45(m,1H),4.37–4.20(m,4H),3.76(s,3H),3.68–3.55(m,2H),3.21–3.09(m,2H),2.51(q,J＝7.3Hz,2H),1.91–1.78(m,2H),1.52–1.42(m,2H),1.39(s,9H),1.18(t,J＝7.3Hz,3H)；MS(ESI):m/z:551[M+H]+。
中间体27：4-[3-[2-[5-乙基-2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)咪唑-1-基]乙氧基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯
通过快速色谱(己烷/丙酮，94:6％至60:40(v:v))纯化粗中间体26，也得到0.0092g的浅黄色泡沫状的4-[3-[2-[5-乙基-2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)咪唑-1-基]乙氧基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体27，产率：13％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):7.32(d,J＝5.4Hz,1H),7.19(d,J＝5.4Hz,1H),6.86(s,1H),6.72(s,1H),6.55–6.30(m,3H),4.52–4.43(m,1H),4.39–4.33(m,2H),4.12–4.07(m,2H),3.69(s,3H),3.64–3.56(m,2H),3.21–3.05(m,2H),2.75–2.67(m,2H),1.87–1.77(m,2H),1.52–1.43(m,2H),1.39(s,9H),1.30–1.24(m,3H)；MS(ESI):m/z:551[M+H]+。
由适当的单或双取代的5-(1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯(中间体28-46和48-85的实施例1、2、6、7、9、10、13)或由5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯(中间体47的实施例14)和根据中间体26和27的程序的适当的烷基溴化物(中间体14-24)开始，制备了以下中间体(参见表2)
表2：BOC中间体
实施例18：5-[4-乙基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯盐酸盐
在0℃下将0.042g(0.076mmol)的4-[3-[2-[4-乙基-2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)咪唑-1-基]乙氧基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体26)溶于0.5mL的HCl的4M二噁烷溶液中。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后除去溶剂，将残余物用Et2O打浆并干燥，以得到0.036g的白色粉末状的5-[4-乙基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯盐酸盐(98％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):8.87–8.71(m,2H),7.76(s,1H),7.55(d,J＝5.4Hz,1H),7.28(d,J＝5.4Hz,1H),7.20–7.11(m,1H),7.04(s,1H),6.63-6.45(m,3H),4.65–4.56(m,1H),4.52–4.44(m,2H),4.39–4.28(m,2H),3.77(s,3H),3.25–3.14(m,2H),3.15–2.99(m,2H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.14–1.70(m,4H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H)；MS(ESI):m/z:451[M+H]+。
根据实施例18所述的程序，由相应的Boc-中间体开始，得到了下列化合物。
在实施例19、21、24、26、31-33、37-39的情况下，化合物通过制备HPLC纯化而得到作为三氟乙酸盐(实施例24和26)或在碳酸氢盐SPE柱(200mg)上过滤并用MeOH洗脱后作为游离碱(实施例19、21、31、32、33、39)的产物。在实施例37和38的情况下，将化合物在碳酸氢盐SPE柱(200mg)上过滤，并通过快速硅胶色谱纯化。化合物41、43、48、49、58和60通过硅胶柱色谱(CH2Cl2/MeOH/NH3)纯化。
表3：最终产品
根据中间体26所述的程序，由化合物2和1-溴-2-甲氧基-乙烷(Sigma-Aldrich，Cat.No.238155)开始，获得了化合物101和102，并通过硅胶柱色谱(己烷/丙酮，95:5→60:40(v:v))分离。根据中间体26所述的程序，由化合物2和2-溴乙氧基苯(Sigma-Aldrich，Cat.No.B75506-25G)开始，获得了化合物103和104，并由化合物2和苄基溴(Sigma-Aldrich，Cat.No.B17905)获得了化合物105。
实施例106：4-甲基-5-[4-(4-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
根据实施例1所述的程序，由4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲脒乙酸酯(中间体11)和2-溴-1-(4-吡啶基)乙酮(Fluorochem，Cat.No.017122)开始，制备了4-甲基-5-[4-(4-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯，并通过快速硅胶色谱(CH2Cl2/MeOH/NH3，97:3:0.5(v:v:v))纯化。1H NMR(MeOH-d4)δ(ppm):8.53–8.46(m,2H),7.88–7.79(m,3H),7.25(d,J＝5.4Hz,1H),7.09(d,J＝5.4Hz,1H),6.83(s,1H),4.14(s,3H)；MS(ESI):m/z:281[M+H]+。
实施例107：5-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
在无溶剂条件下在-15℃下搅拌0.050g(0.30mmol)的4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-甲醛(Aldrich，Cat.N.CDS015804)、0.033g(0.30mmol)的邻苯二胺(Aldrich，Cat.N.P23938-5G)和二乙酸碘苯(Aldrich，Cat.N.178721-25G)。然后将混合物温热至室温，变为粘稠的棕色油状物。在室温下搅拌1.5小时后，再加入0.018g(0.18mmol)的邻苯二胺。所得的深色油状物通过硅胶柱色谱(EtOAc/己烷3:97(v:v)至30:70(v:v))纯化，以得到0.025g的5-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯(33％)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):12.74–12.57(bs,1H),7.68–7.46(m,2H),7.44–7.39(m,1H),7.28–7.22(m,1H),7.21-7.14(m,3H),4.26(s,3H)；MS(ESI):m/z:254[M+H]+。
实施例108：4-甲基-5-[1[3[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]苯并咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯盐酸盐
4-[4-[3-[2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)苯并咪唑-1-基]丙基]苯氧基]哌 啶-1-羧酸叔丁酯
根据中间体26的程序，由5-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯(实施例107)和4-[4-(3-溴丙基)苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体19)开始，制备了4-[4-[3-[2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)苯并咪唑-1-基]丙基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。1H NMR(CDCl3)δ(ppm):7.95–7.74(m,1H),7.39-7.29(m,3H),7.26(d,J＝5.4Hz,1H),7.06–6.99(m,3H),6.85-6.80(m,2H),6.59(s,1H),4.48-4.39(m,1H),4.38–4.31(t,J＝7.1Hz,2H),4.02(s,3H),3.76-3.66(m,2H),3.38–3.26(m,2H),2.64(t,J＝7.1Hz,2H),2.25-2.15(m,2H),1.97–1.85(m,2H),1.80-1.69(m,2H),1.48(s,9H)；MS(ESI):m/z:571[M+H]+。
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]苯并咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡 咯盐酸盐
根据实施例18所述的程序，由4-[4-[3-[2-(4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯-5-基)苯并咪唑-1-基]丙基]苯氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯开始，获得了4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]苯并咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯盐酸盐。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm):8.80–8.57(m,2H),7.86-7.75(m,2H),7.54(d,J＝5.4Hz,1H),7.49-7.38(m,2H),7.29(d,J＝5.4Hz,1H),7.12-7.05(m,2H),6.89-6.81(m,3H),4.59–4.52(m,1H),4.40(t,J＝7.3Hz,2H),3.94(s,3H),3.27-3.14(m,2H),3.10-3.00(m,2H),,2.58(t,J＝7.3Hz,2H),2.16–1.99(m,4H),1.83-1.71(m,2H)；MS(ESI):m/z:471[M+H]+。
2.生物测试
2.1 KDM1A(LSD1)酶抑制的测定
采用TR-FRET测定法(时间分辨荧光共振能量转移，超去甲基化酶技术(珀金埃尔默(Perkin Elmer)公司，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市))测定了KDM1A抑制活性，其包含铕螯合供体染料(TRF0404，珀金埃尔默公司，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市)和ULightTM(TR0102，珀金埃尔默公司，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市)、具有红移荧光发射的小分子量受体染料，以及生物素化的21个氨基酸组蛋白H3衍生的单甲基化肽(H3K4me)[Lys(Me1)4]-组蛋白H3(1-21)-GGK(生物素)，(64355，Anaspec，美国加利福尼亚州佛利蒙市)作为底物。发光强度与生物素化反应产物的水平成比例。人重组KDM1A/CoREST蛋白的复合物在大肠杆菌中作为单独的蛋白质产生并如前所述被共纯化(Forneris,F.等人，《生物化学趋势(TrendsBiochem,Sci)》，2008，33，181-189)(Forneris,F.等人，《生物化学杂志(J.Biol.Chem.)》，2007，282，20070-20074)。
去甲基化酶测定条件：以终体积为48μL的测定缓冲液(Tris HCl 50mM pH 8.8，NaCl 50mM，DTT 1mM，吐温-20 0.01％)将在100％DMSO中的0.25nM KDM1A/CoREST蛋白和化合物添加至96孔半区域平底白板(3693Costar，Sigma-Aldrich，美国密苏里州圣路易)的各个孔中。
通过加入50nM单甲基化组蛋白H3K4来开始去甲基化酶反应。在室温下20分钟后，加入300μM反苯环丙胺(P8511-1G，Sigma-Aldrich，密苏里州圣路易，63103)以终止反应。
检测步骤条件：将10μL的测定混合物从原始平板转移至384孔白色板(6007290OptiPlateTM，珀金埃尔默公司，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市)以及10μL的在1XLance检测缓冲液中含有2nM Eu-抗体和10nM U-轻链霉抗生物素蛋白的检测混合物(TRF0404、TR0102、CR97100，珀金埃尔默公司，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市)。将得到的混合物在黑暗中在室温下孵育1小时。然后，通过荧光计(F200，Tecan，瑞士)读取TR-FRET信号(激发320nm，发射665nm和620nm，延迟时间50μs，窗口时间100μs)。
IC50测定：抑制剂浓度范围为0.025至500μM(连续1:3稀释)。使用GraphPad软件计算IC50。
化合物2、4-8、11、13、15、16和70展现出小于10μM的IC50值，实施例9、10和12展现出小于1μM的IC50值，实施例18-54和57-62展现出小于0.1μM的IC50值。
2.2细胞生长
(Promega)是一种非溶解性、单试剂添加荧光测定法，其测量实验操作后培养群体中活细胞的相对数量。CellTiter-FluorTM细胞活力测定法测量活细胞内的储备和构成性蛋白酶的活性，因此可作为细胞活力的标记物。
用不同浓度的抑制剂将以指数生长的人白血病MV4-11细胞(获得自德国微生物菌种保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen)，ACC 102)或NB4细胞(获得自德国微生物菌种保藏中心)培养48小时。48小时后，加入体积等于细胞培养基体积的五分之一的试剂。将内容物混合并在37℃下孵育至少90分钟以获得稳定的信号。使用360nm的激发波长和535nm的发射记录荧光。使用GraphPad软件计算IC50。
化合物18-33对人白血病MV4-11细胞展现出小于10μM的IC50值，对人白血病NB4细胞展现出小于20μM的IC50值，化合物39-50和57对人白血病NB4细胞展现出小于10μM的IC50值。
2.3单胺基氧化酶的生物发光偶联分析(MAO-Glo分析)
将来自Promega的MAO Glo Assay(cat.V1402，Promega，威斯康星州麦迪逊)用于测量抑制剂对MAO A和MAO B活性的影响。人重组MAO A和MAO B在毕赤酵母中表达并如公开的那样纯化(Binda C.等人，《美国国家科学院院刊》，2003，9750-9755)。所述测定在室温下以50μL(25μL反应溶液+25μL检测试剂)在96孔半区白板(Cat.3693，康宁(Corning)公司，纽约州康宁市)中进行。使用酶标仪(Infinite F200，帝肯集团(Tecan Group)，瑞士)在黑暗中孵育20分钟后测量发光，每孔的积分时间为0.25s。将50nM MAO A或125nM MAO B与5种不同的抑制剂浓度(0.004μM至100μM)在室温下在Promega MAO缓冲液或Promega MAO B缓冲液(MAO Glo检测试剂盒，目录号V1402，Promega，威斯康星州麦迪逊)中孵育15分钟。孵育30分钟后，用Promega检测试剂终止反应。所有化合物检测两次，并使用GraphPad Prismversion4.0(GraphPad软件公司，加利福尼亚州圣地亚哥)计算IC 50值。
与MAO A和MAO B相比，化合物7、10、19-20和23-26对KDM1A(LSD1)的活性至少高10倍。

Claims (14)

1.一种式(I)的化合物：
其中，
A
R为氢或L1-R5；
R1、R2独立地为氢、C1-C4-烷基、C3-C7环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)zCF3，或者R1和R2与它们所结合的碳原子一起与咪唑形成稠合杂环或稠合杂芳基；
z为从0到6的整数；
R3、R4为氢或C1-C4-烷基；
L1为-(CH2)j-Y-或-CH2-
j为2至6的整数；
Y为键、氧或CH2；
R5为C1-C4-烷基或芳基，其中所述芳基可选地被卤素、C1-C6-烷基或L2-R6取代；
L2为-(CH2)m-；-(CH2)n-W-(CH2)p-；
R6为杂环基，其中所述杂环基可选地被C1-C6-烷基取代；
m、n、p独立地为0或1至6的整数；
W为氧、硫、NH或CH2；
或其立体异构体或药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的式(I)的化合物，其中，R1和R2独立地为氢、C1-C4-烷基、C3-C7环烷基、芳基、杂芳基，或R1和R2与它们所结合的碳原子一起与咪唑形成稠合杂环或稠合杂芳基。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的式(I)的化合物，其中，R2或R3为甲基或乙基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的式(I)的化合物，其中，
R为氢或L1-R5；
R1、R2独立地为氢、C1-C4-烷基、环丙基、环丁基、苯基、吡啶基，或者R1和R2与它们所结合的碳原子一起与咪唑形成稠合杂环或稠合杂芳基；
R3、R4为甲基或乙基；
L1为-(CH2)2-Y-或-CH2-
Y为键、氧或CH2；
R5为甲基或可选地被L2-R6取代的苯基；
L2为-W-(CH2)p-；
R6为杂环基，其中所述杂环基可选地被C1-C6-烷基取代；
p为0或1至6的整数；
W为氧；
或其立体异构体或药学上可接受的盐。
5.根据权利要求1所述的化合物，其选自：
4-甲基-5-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(4-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-异丙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-环丙基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(4-丙基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-环丁基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(5-乙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(5-异丙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-乙基-5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-环丁基-1H-咪唑-2-基)-4-乙基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-(4-苯基-5-丙基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯；
5-(5-乙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯；
4-甲基-5-(4,5,6,7-四氢-1H-苯并咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-4-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-4-苯基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-5-苯基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[3-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[3-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯；
4-甲基-5-[5-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-4-苯基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-5-苯基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-异丙基-5-苯基-1-[2-[4-(4-哌啶基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-苯基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[3,4-双(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-4-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[3,4-双(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-5-乙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-4-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[3-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯基]丙基]-5-环丁基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-丙基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[5-丙基-1-[3-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基甲基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基甲基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-(2-甲氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-(2-甲氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[5-乙基-1-(2-苯氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-乙基-1-(2-苯氧基乙基)咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(1-苄基-5-乙基咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[4-(4-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯；
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]苯并咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯；
5-[4-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-6-甲基噻吩并[2,3-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[3-[4-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[4-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[3-[4-[[(3S)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[4-[[(3S)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[5-环丁基-1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[4-甲基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[5-甲基-1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[4-环丁基-1-[2-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]乙基]咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[3-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[2-[3-(4-哌啶氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-4-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶基甲氧基)苯基]丙基]-5-丙基咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-4-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
5-[1-[2-[4-(氮杂环庚烷-4-基氧基)苯氧基]乙基]-5-丙基咪唑-2-基]-4-甲基噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[4-(3,3,3-三氟丙基)-1H-咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
4-甲基-5-[1-[3-[4-(4-哌啶氧基)苯基]丙基]-4-(3,3,3-三氟丙基)咪唑-2-基]噻吩并[3,2-b]吡咯
或其立体异构体或药学上可接受的盐。
6.一种药物组合物，其包含权利要求1至5中任一项所定义的化合物。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其进一步包含至少一种治疗剂，所述治疗剂选自由组蛋白去乙酰化酶抑制剂、类视黄醇受体调节剂、抗增殖/抗肿瘤药、细胞抑制剂、抑制癌细胞侵袭的药剂、生长因子功能抑制剂、抗血管生成剂、细胞周期抑制剂、蛋白酶体抑制剂、HSP90抑制剂、选择性COX-2抑制剂或化学治疗剂组成的群组。
8.根据权利要求6或7所述的药物组合物，其为片剂、胶囊、口服制剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、可注射或可输注液体、溶液、悬浮液、乳液、栓剂、软膏、乳膏、洗剂、凝胶、糊剂、透皮给药装置的形式。
9.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其供作为药物。
10.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其用于治疗和/或预防癌症、感染性疾病或以细胞能量代谢异常为特征的疾病，如肥胖症。
11.根据权利要求10的化合物，其用于治疗和/或预防白血病、非小细胞肺癌、肝细胞癌或胶质母细胞瘤。
12.一种获得根据权利要求1至5中任一项所述的式(I)的化合物的工艺，其中R为氢，所述工艺包括如下面的方案A-I所示的通过式A1的化合物与合适的式A2的α-卤代酮反应来制备式(I)化合物：
方案A-I
其中A、R1和R2如权利要求1所定义，并且X为氯、溴或碘。
13.一种获得根据权利要求1至5中任一项所述的式(I)化合物的工艺，其中R为L1-R5，所述工艺包括如下面的方案A-II所示的，在碱的存在下，根据权利要求1的式(I)化合物与式A3的衍生物的反应，其中R为氢：
方案A-II
其中A、R1和R2如权利要求1所定义，R为L1-R5，其中L1和R5如权利要求1所定义，并且LG为离去基团。
14.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中，式(I)的化合物为可逆的KDM1A(LSD1)抑制剂。
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