CN109566371B - 一种黄***子的培育方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及到一种黄***子的培育方法，包括如下步骤，将成熟的黄精鲜果进行薄层发酵，搓洗去皮，得到黄***子。将黄***子相互碰撞以损伤种子表面，然后低温冷藏，休眠，将充分休眠后的黄***子和培养基质间隔层铺进行催芽处理，所述培养基质为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的混合物，保持其处于合适的湿度和温度条件下一定时间后萌发球茎，然后过冬，得到培育后的黄***苗球茎，第二年2‑3月份播种到大田，合适的温度和湿度条件下黄***苗球茎种苗萌发单叶，球茎增大。本发明极大地提高了种苗的质量，提高了黄***苗播种到大田以后的萌发单叶的平均水平。

Description

一种黄***子的培育方法

技术领域

本发明属于一种中药材种子的处理领域，具体涉及到一种黄***子的培育方法。

背景技术

黄精(学名：Polygonatumsibiricum)，又名：鸡头黄精、黄鸡菜、笔管菜、爪子参、老虎姜、鸡爪参。为黄精属植物，根茎横走，圆柱状，结节膨大。叶轮生，无柄。药食两用植物，具有补脾，润肺生津的作用。在我国，黄精品种一共有31种，而进入《中国药典》的仅仅滇黄精、鸡头黄精和多花黄精。滇黄***子萌芽比较简单，合适的温湿度环境下直接播种就可以萌芽，而鸡头黄精和多花黄***子萌芽需要采取多种技术手段才能萌芽良好。

黄精的繁育方法，主要包括：根状茎繁殖和种子繁育，不同品种需要不同的繁育方法，更需要不同的处理步骤和时间，其成功率也会存在明显的区别。

不同处理对多花黄***子的影响，刘保财等，福建农业学报30(5)：469-472，215，讲述了多花黄***子的处理方法，包括如下步骤：进行常温(自然条件)干燥贮藏、常温(自然条件)沙藏、低温(4℃冰箱)沙藏，各处理370粒种子，3次重复。贮藏5个月后，取出各处理种子中350粒，进行温水浸种(30℃浸种)、GA3处理3h)，各处理50粒种子，播种到铺有2层滤纸和1层沙的培养皿里，将培养皿置于20℃气候箱中培育，每天观察水分状况，缺水时补充水分，3次重复。多花黄精组培苗快速繁殖体系建立研究，莫勇生等，中国现代中药，2018年4月第20卷第4期，介绍了各种培养基和激素对种子繁育的影响，激素主要为6-BA、NAA、GA₃和IBA。

专利申请号为201510097497.8的专利，公开了一种滇黄***子的萌发方法，步骤如下：

(1)滇黄***子清洗脱皮：于9～11月采收成熟滇黄精绿色种子，置阴凉处后熟10～15日，再放入水中搓洗去果皮，漂洗去除杂质，取出下沉的种子，晾干水分备用；

(2)塑料筐沙藏处理：采用有网格的塑料筐，筐底部垫一层筛网，筛网上放置5cm厚河沙，河沙上放置第一层经步骤(1)清洗脱皮的滇黄***子，种子上覆盖5cm厚河沙，然后放置第二层经步骤(1)清洗脱皮的滇黄种子，再覆盖5cm厚河沙，之后再放置第三层经步骤(1)清洗脱皮的滇黄种子，最后覆盖55cm厚河沙；

(3)温室培养：将经沙藏处理的塑料筐，放入温室中，采用温湿度控制仪保持温室内昼夜温度30℃～5℃、每天室内空气相对湿度40～80％的条件下培养6个月。

不同处理对多花黄***子产量和质量的影响及播种技术研究，贵州大学2016届硕士学位论文，研究了各种不同的处理方法对种子繁育的影响，比如：

1、种子的调制研究，调制过程为：软化果肉、弄碎果肉，用水淘出种子再干燥与净种，将采摘黄精的成熟果实放在塑料袋中发酵和直接揉搓漂洗调制处理，经发酵漂洗得到的种子。成熟度、发芽率和千粒重都比直接揉搓漂洗的种子好，该法是黄***子生产上较可取的方法。还实验了浓硫酸对种子萌发的影响。

2、种子的贮藏研究，室温干藏的黄***子发芽率最低，冷冻贮藏的黄***子较高，低温沙藏和冷冻沙藏的最高，其原因是种子经低温沙藏和冷冻沙藏处理后，种子内部水分可以得到有效的保留，利于种胚后熟发育和种子活力保持，可以缩短发芽时间，使发芽快而整齐，而室温处理的种子内部水分大量散失，后熟停滞，致使发芽率下降。

3、种子的萌发研究，种子萌发受到外界条件如氧气、光照、温度、水分、土壤盐分、土壤酸碱等生态因子和自身内在的激素、酶和生理发育等因子影响。黄***子要经历2个冬季休眠才能出苗，本研究中用AB和CD处理多花黄***子和初生根茎可一年出苗。

黄***子的萌发率关系到种子种植能使用的数量，种子萌发后种苗的强壮程度、抗病性能，关系到收获的黄精块茎的重量和质量，更为重要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种黄***子的培育方法，该方法能极大的保证黄精球茎种苗的质量，保证黄***苗的平均水平，提高种子的萌芽率。

本发明的内容包括如下步骤，将成熟的黄精鲜果进行薄层发酵，搓洗去皮，得到黄***子，将黄***子相互摩擦碰撞以损伤种皮，然后低温冷藏促使种子休眠，将充分休眠后的黄***子和培养基质间隔层铺，所述培养基质为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的混合物，保持其处于合适的湿度和温度条件下一定时间，所述湿度为空气湿度，优选为75-80％，培养基质湿度为60％左右。所述温度优选为22-28℃，种子萌芽以后形成黄精球茎，然后低温休眠，得到培育后的具有根系、球茎、顶芽的黄***苗。

本发明的过冬，包括自然年度的冬天，比如立冬到立春的三个月时间，还包括处于0-5℃条件下3个月以上时间(此时不限于上述的时间，还可以是比如3-5月份)，使黄***子和具有球茎、根系、顶芽的黄精球茎有充足的休眠期。本发明的黄***子主要为多花黄精和鸡头黄***子。

优选的，所述低温冷藏的温度为0-5℃，时间为2-4个月。

优选的，所述腐熟树皮粉末的制备方法为将树皮粉碎，堆积发酵3个月以上得到。

优选的，所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为0.5-2:0.5-2:0.5-2。

优选的，所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为1:1:1。

优选的，所述薄层发酵的方法为将黄精鲜果平铺，密封，控制湿度为75％以上，优选为80％，平铺的厚度为10-15cm，温度控制在25度以下，时间为1个月以上。一是保证种子充分后熟，二是严格控制黄精鲜果因为发酵升温直接烧坏种子。

优选的，所述薄层发酵的方式为将黄精鲜果和芽孢杆菌混合，平铺，密封，控制湿度为75％以上，优选为80％，平铺的厚度为10-15cm，发酵温度控制在25度以下，时间为1个月以上。芽孢杆菌会分解种皮，种皮的损伤程度更为均匀。

优选的，所述搓洗去皮的步骤为，将水洒在薄层发酵后的黄精果上，然后使黄精果之间相互摩擦，去掉果皮，当黄***子表皮出现轻微损伤时停止摩擦。

优选的，所述黄***子培育种苗全程都是在高湿度环境下进行，种子没有干燥过程，一是保证黄***子充分后熟，再就是保障种胚芽的活性。

优选的，所述黄***子和培养基质间隔层铺后，当年在温湿度比较稳定的环境下培育一年形成具有球茎、根系、顶芽的黄精小球茎，过冬休眠以后再播种到大田，极大地提高了黄***子的萌芽率和黄精球茎的生长量。

本发明的休眠方式为在自然条件下过冬的方式休眠，或者在0-5℃条件下休眠，休眠期一般为3个月以上。

本发明的有益效果是，本发明采用薄层发酵(即平铺10cm-15cm，其上覆盖薄膜密封)，而不是堆积发酵，湿度控制在75％-80％之间，温度控制在25度以下，更好地保证了种子后熟，控制种子处于比较均匀的温湿度状态，其每个鲜果所处的环境温湿度比较一致，发酵的效果更好，也保证了黄***子的充分后熟。相对于直接平铺薄层发酵，本发明采用将芽孢杆菌菌液喷洒在黄精鲜果表面的方法，种子的质量明显更好，这可能是由于发酵的产物渗透进种子，提高了种子的质量。

本发明在黄***子表皮晾干以后进入冷藏前，将黄***子的表面主要为表皮进行破损(主要方式为搓揉摩擦)，搓揉摩擦的力度比清洗的力度大，使表皮出现轻微破损即可，种皮轻微破损有利于种根伸展，然后在种根上形成球茎，再从球茎上分化出根系和顶芽，黄***子没有子叶，种根伸展以后种子胚乳仅仅作为一个营养器官供给球茎营养，球茎形成以后种子胚乳慢慢褐变腐烂。一般来说，对于种皮比较厚的种子，有进行破损的步骤以提高萌芽率，但是黄***子的表皮不厚，另一方面，一般会在播种萌芽前才会进行破壁处理。本发明将破壁处理提前到冷藏之前，虽然萌芽率没有明显的影响，但是黄***子的萌芽质量却有明显提高。

本发明将黄***子和培养基间隔层铺(即先铺一层培养基质，然后将种子放在培养基质上，再铺一层培养基，再把种子放在培养基质上。如此反复，每层培养基的厚度5cm左右，一般为4-6cm)，相对于常用的直接将种子播种到大田苗圃的方式，种子所处的环境温湿度更稳定，种子萌发率更高，形成的球茎质量更好。鸡头黄精、多花黄精属于喜阴植物，种子播种第一年不需要阳光，第二年单叶萌发以后也需要蔽阴环境，因此，相比在大田直接用种子播种育苗，在室内或者阴凉的温湿环境下播种更适合工厂规模化育苗。

本发明的培养基质为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末，没有添加额外的激素。相对于常用的将种子直接播种到大田苗圃，种子的萌芽率更高，种子形成的球茎质量更好。本发明的培养基质并不提供直接的营养成分，珍珠岩、泥炭土属于多孔介质，腐熟树皮粉末也并没有直接的营养成分，其多用于肥料。一般来讲，培养基都会添加氮肥、钾肥等营养物质，本发明只提供珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末，相比添加了氮肥、钾肥等营养物质的培养基质，种子萌发前期到形成根系和球茎初期，种子依赖本身胚乳的营养即可满足萌发初期所需的营养需求，后期泥炭土和腐熟树皮粉末充分分解也能满足球茎所需的营养要求，，在充分满足黄***子对温度、湿度要求的前提下，其种子萌发的球茎质量更好。相对于单纯的珍珠岩和泥炭土，因为营养过于单纯，其种子萌芽效果类似，但是后期球茎生长速度稍慢，这可能是由于培养基质中不但给种子萌芽提供了一个比较好的环境，更因为培养基质添加了腐熟树皮粉末模拟了自然界黄***子萌芽所处的自然环境，从而提高了黄***子球茎的形成的质量。

本发明中从搓洗果皮，到用培养基质播种，所有过程全部控制在高湿度环境进行，没有干燥过程。整个过程更有利于环境物质和种子的交互，保证种胚的活性，提高了球茎种苗的质量。

本发明将种子播种以后经过2个自然冬天的长时间的处理，结合破壁和培养操作，再播种到大田，种子的萌芽率最高可达97.2％，球茎质量比直接播种好了很多。

具体实施方式

实施例1

多花黄***子2015年10月12日取自林泉药业塘湾镇白羊基地和当地肖稳生自家种植的多花黄精完熟果子，鸡头黄***子2015年10月15日取自雪峰镇界脚村易延局种植的鸡头黄精完熟果子，将成熟的黄精鲜果进行薄层发酵，薄层发酵的方法为将黄精鲜果平铺15cm左右，密封，控制湿度为75％以上，温度控制在25度以下，时间1个月。搓洗去皮，得到黄***子，将黄***子相互碰撞以损伤种子表面，然后混合种子净重2倍含水量60％的珍珠岩0-5℃冷藏过冬，冷藏过冬的时间为3个月，将过冬后的黄***子和培养基质间隔层铺。所述培养基为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的混合物(所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为1:1:1)，保持培养基质湿度为60％，温度为25℃下8个月，然后在11月份再次过冬3个月(温度为0-5℃)，得到培育后的黄精球茎。在2017年3月2日播种，2017年3月中旬种子大量萌发球茎，将其播种到大田中，球茎在大田苗圃生长，2018年10月份采收种茎种苗。

实施例2

多花黄***子2015年10月12日取自林泉药业塘湾镇白羊基地和当地肖稳生自家种植的多花黄精完熟果子，鸡头黄***子2015年10月15日取自雪峰镇界脚村易延局种植的鸡头黄精完熟果子，将成熟的黄精鲜果进行薄层发酵，薄层发酵的方法为将黄精鲜果平铺15cm左右，密封，控制湿度为80％，温度控制在25度以下，时间2个月。搓洗去皮，得到黄***子，将黄***子相互碰撞以损伤种子表面，混合种子净重2倍含水量60％的珍珠岩置0-5℃环境下冷藏休眠，冷藏休眠的时间为4个月，将充分休眠后的黄***子和培养基质间隔层铺。所述培养基为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的混合物(所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为0.5:1:2)，保持其处于湿度为80％，温度为25℃下7个月，然后在11月份再次自然环境下越冬近4个月，得到培育后的黄精球茎。在2017年3月2日播种，2017年3月中旬种子大量萌发球茎，将其播种到大田中，球茎在大田苗圃生长，2018年10月份采收种茎种苗。

实施例3

多花黄***子2015年10月12日取自林泉药业塘湾镇白羊基地和当地肖稳生自家种植的多花黄精完熟果子，鸡头黄***子2015年10月15日取自雪峰镇界脚村易延局种植的鸡头黄精完熟果子，将成熟的黄精鲜果进行薄层发酵，薄层发酵的方法为将黄精鲜果平铺15cm左右，喷洒芽孢杆菌菌液(侧孢芽孢杆菌，购自扬州市海诚生物技术有限公司)，密封，控制湿度为75％以上，温度控制在25度以下，时间1个月。搓洗去皮，得到黄***子，将黄***子相互碰撞以损伤种子表面，混合种子净重2倍含水量60％的珍珠岩置0-5℃环境下冷藏休眠，冷藏休眠的时间为4个月，将休眠后的黄***子和培养基质间隔层铺。所述培养基为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的混合物(所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为1:1:1)，保持其处于湿度为60％，温度为25℃下8个月，然后在11月份自然环境下再次过冬3个月(温度为0-5℃)，得到培育后的黄精球茎。在2017年3月2日播种，2017年3月中旬种子大量萌发球茎，将其播种到大田中，球茎在大田苗圃生长，2018年10月份采收种茎种苗。。

对比例1

相比实施例1，对比例1的区别在于搓洗去皮时，不磨损种子表皮，低温冷藏前，也没有将黄***子相互碰撞以损伤种子表面的步骤。

对比例2

相比实施例1，对比例2的区别在于，过冬后的黄***子在培养基质表面播种而不是间隔层铺。

对比例3

相比实施例1，对比例3的区别在于，培养基质为珍珠岩和泥炭土(体积比1:1)。

对比例4

取和实施例1相同的成熟的黄精鲜果，放入密封袋中发酵1个月，然后搓洗去皮，洗净干燥，得种子，然后将种子低温沙藏，冷藏4个月，然后于2016年3月将处理后的黄***子和添加植物生长激素和MS培养基培养液混合，再直接播种到大田苗圃，2018年10月份采收种茎种苗。

将实施例1-3和对比例1-4的种子萌芽情况进行比较，主要的比较标准为在相同时间内种子的出苗率、株高、顶芽，根茎鲜重、鲜品产量、干品脱水率(直接晒干得到)和多糖含量，得到如下数据。

说明：下列实施例和对比例的各项数据中，种子出苗率和顶芽形成率为播种冷藏休眠2-4个月后第一年生长期的11月份进行统计检测数据，根茎鲜重、鲜品产量、干品脱水率、多糖含量、种苗株高以及种茎大小对比等数据为第三年生长期的11月份进行检测的数据。

表1多花黄精不同方法处理种子得到的球茎及产品质量对比表

处理类型	出苗率(％)	顶芽(％)	根茎鲜重(g)	鲜品产量(kg/m<sup>2</sup>)	干品脱水率(％)	多糖含量(％)
							实施例1	97.2	94	2.98	5.36	23.22	15.7
实施例2	96.6	92	2.79	5.41	24.13	16.1
							实施例3	97.4	92.3	3.21	6.03	22.81	15.8
对比例1	92.3	92.2	2.88	4.66	21.63	15.3
							对比例2	94.6	93.4	2.82	4.96	20.32	14.8
对比例3	90.3	92.1	2.62	4.82	21.31	15.7
							对比例4	30.3	91.5	2.52	1.63	25.13	16.8

表2鸡头黄精不同方法处理种子得到的球茎及产品质量对比表

处理类型	出苗率(％)	顶芽(％)	根茎鲜重(g)	鲜品产量(kg/m<sup>2</sup>)	干品脱水率(％)	多糖含量(％)
							实施例1	95.4	96	8.25	8.26	22.64	15.9
实施例2	94.5	94	7.82	7.12	21.75	15.6
							实施例3	95.2	93	8.33	8.38	20.36	14.4
对比例1	90.6	90	8.05	5.31	22.12	14.5
							对比例2	95.3	95	8.01	7.63	21.32	15.8
对比例3	90.4	90	7.36	4.39	20.56	15.7
							对比例4	28.6	90	7.59	2.6	21.53	15.3

所述的干品脱水率是指同样重量的鲜品充分脱除水分后，得到的干品重量除以鲜品重量的百分比。

从出苗率来看，各个实施例和对比例1、2、3并没有明显的区别，但是实施例和对比例4区别很大，实施例最高萌芽率97.2％，对比例4萌芽率鸡头黄精28.6％，多花黄精30.3％。从顶芽，根茎鲜重、鲜品产量、的比较数据可以看出，本发明相对于对比例1、3、也具有明显的优势。相比对比例4，虽然黄精球茎顶芽形成和根茎鲜重区别不大，但是单位面积产量本发明接近对比例4的3.699倍(多花黄精)和3.223倍(鸡头黄精)，过低的萌芽率严重影响了黄***子育苗球茎形成的产量。

从干品脱水率和黄精多糖含量来看，实施例和对比例区别不大，两个数据都稳定在一个比较恒定的区间。

本发明和对比例2的数据比较不明显，说明间隔层铺相比表面播种，有一定的效果。

不同的种子培育方法得到的种苗质量最好一致，这样收获的产品的质量就会有保障，本发明比较了不同的处理方法得到的株高和球茎大小的分布，用于评价产品质量的分布状况，具体见表3-6。

表3多花黄精不同方法处理种子得到的种苗株高对比表(％)

表4鸡头黄精不同方法处理种子得到的种苗株高对比表(％)

表5多花黄精不同方法处理种子得到的球茎大小对比表(％)

表6鸡头黄精不同方法处理种子得到的球茎大小对比表(％)

从表3-6的数据分析可知，本申请处理后的种子繁育得到的种苗的生长(株高和球茎大小)分布情况更为集中，集中的分布更有利于工厂化生产和繁育，提高产品的质量。并且，鸡头黄精的球茎大小各种处理方式都比多花黄精球茎生长量大很多。

Claims (5)

1.一种黄***子的培育方法，其特征在于：包括如下步骤，将成熟的黄精鲜果进行薄层发酵，所述薄层发酵的方法为将黄精鲜果平铺10-15厘米，密封，控制湿度为75％以上，温度控制在25度以下，时间为1个月以上，搓洗去皮，得到黄***子，

将黄***子相互摩擦碰撞以损伤种皮，然后低温冷藏促使种子休眠，

将充分休眠后的黄***子和培养基质间隔层铺，所述培养基质为珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的混合物，所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为0.5-2:0.5-2:0.5-2，所述腐熟树皮粉末的制备方法为将树皮粉碎，堆积发酵3个月以上得到，保持其处于合适的湿度和温度条件下一定时间，所述湿度为75-80％，所述温度为22-28℃，

种子萌发形成黄精球茎，然后低温休眠，得到培育后的具有完整根系、球茎和顶芽的黄精球茎种苗。

2.如权利要求1所述的黄***子的培育方法，其特征在于，所述低温冷藏的温度为0-5℃，时间为2-4个月。

3.如权利要求1或2所述的黄***子的培育方法，其特征在于，所述珍珠岩、泥炭土和腐熟树皮粉末的体积比为1:1:1。

4.如权利要求1或2所述的黄***子的培育方法，其特征在于，所述薄层发酵的方式为将黄精鲜果和芽孢杆菌混合，平铺，密封，控制湿度为75％以上。

5.如权利要求1或2所述的黄***子的培育方法，其特征在于，所述搓洗去皮的步骤为，将水洒在薄层发酵后的黄精果上，然后使黄精果之间相互摩擦，去掉老皮，当黄***子表皮出现损伤时停止摩擦。