CN109526748B - 一种白鹤芋花序组织培养方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种白鹤芋花序组织培养方法，该方法为：通过消毒清洗、花序丛生芽诱导及其增殖（培养和继代培养）、对丛生芽的生根诱导、生根苗的移栽炼苗获得白鹤芋。本发明能够获得培育性状稳定、生长一致的白鹤芋组培苗，选取生长旺盛的试管苗在草炭土或草炭土：蛭石=4:1中进行驯苗，试管苗成活率为98%且长势良好，为工厂化生产节约成本提供技术支撑。

Description

一种白鹤芋花序组织培养方法
技术领域
本发明涉及一种白鹤芋花序组织培养方法，属于白鹤芋花序组织培养技 术领域。
背景技术
白鹤芋(学名：Spathiphyllum kochii Engl.&K.Krause)天南星科白鹤芋 属植物，是近些年室内栽培观赏植物；种类多样，以观赏叶片和花序为主。 由于白鹤芋花粉退化不易结籽需要人工进行授粉；而白鹤芋常规繁殖以分株 繁殖为主，繁殖速度慢周期长不适宜规模化生产育苗。迄今为止，白鹤芋组 织培养有很大的突破，现有的技术主要通过叶片和茎尖等进行扩繁以及研究 花序的胚状体和研究肉穗花序的萌发均取得一定的成果。但并未记载对白鹤 芋花序的培养技术。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种白鹤芋花序组织培养方法，以解 决上述现有技术中存在的问题。
本发明采取的技术方案为：一种白鹤芋花序组织培养方法，该方法包括 以下步骤：
(1)采集花序，于初夏早8点至早10点采集生长旺盛、无病虫害且幼 嫩的母株花序，长不超过2cm，对花序进行清洗消毒；
(2)将每个花序用刀片平均切成4份，诱导培养基为MS，MS诱导培养 基添加6-BA、KT、NAA、琼脂和蔗糖，培养条件为暗培养，温度为25±2 ℃，继代培养在原培养基中诱导，培养条件在光条件下进行，光照强度2000lux， 16h/d，温度为25±2℃；
(3)待花序丛生芽生长良好，分化芽高长至2cm以上即可切下生根，以 1/2MS为基本生根培养基，加入生长素IBA浓度0.5mg/L，添加蔗糖浓度20g/L；
(4)移栽驯苗选取生长良好叶片翠绿的生根苗，移栽的基质均经过高温 灭菌处理，基质为100％草炭土或草炭土：蛭石＝4:1，驯苗初期先将培养瓶从 培养箱中移到室内培养架上过渡一周后，打开封口膜驯苗一周以上，真菌在 培养瓶中大量滋生之前对试管苗进行移栽驯化，每天早晚对试管苗叶片进行 喷水。
优选的，上述步骤(1)中清洗消毒：加入4滴洗洁精清洗后在自来水下 冲洗半小时转移至超净工作台经75％酒精处理30s，0.1％HgCl2处理6min。
优选的，上述步骤(2)中6-BA、KT、NAA、琼脂和蔗糖的量分别为3mg/L、 0.5mg/L、0.1mg/L、6g/L和30g/L。
本发明的有益效果：与现有技术相比，本发明以白鹤芋的花序为外植体， 通过消毒清洗、花序丛生芽诱导及其增殖(培养和继代培养)、对丛生芽的生 根诱导、生根苗的移栽炼苗获得白鹤芋，能够获得培育性状稳定、生长一致 的白鹤芋组培苗，培养和继代培养的MS培养基中添加6-BA3mg/L、 KT0.5mg/L、NAA0.1mg/L、琼脂6g/L和蔗糖30g/L，花序萌发率达89％，在 原培养基上进行继代分化，分化丛生芽数最高可达20余株，在生根阶段，以1/2MS为基本培养基，添加0.5mg/LIBA，20g/L为适宜丛生芽生根培养基； 选取生长旺盛的试管苗移栽至100％草炭土或草炭土：蛭石＝4:1中进行驯苗， 试管苗成活率均为98％以上且长势良好，为工厂化生产节约成本提供技术支 撑。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明进行进一步介绍。
实施例1：一种白鹤芋花序组织培养方法，该方法包括以下步骤：
(1)采集花序，于初夏早8点至早10点采集生长旺盛、无病虫害且幼 嫩的母株花序，长不超过2cm，对花序进行清洗消毒；
(2)将每个花序用刀片平均切成4份，诱导培养基为MS，MS诱导培 养基添加6-BA、KT、NAA、琼脂和蔗糖，培养条件为暗培养，温度为25±2℃， 继代培养在原培养基中诱导，培养条件在光条件下进行，光照强度2000lux， 16h/d，温度为25±2℃；
(3)待花序丛生芽生长良好，分化芽高长至2cm以上即可切下生根，以 1/2MS为基本生根培养基，加入生长素IBA浓度0.5mg/L，添加蔗糖浓度20g/L；
(4)移栽驯苗选取生长良好叶片翠绿的生根苗，移栽的基质均经过高温 灭菌处理，基质为草炭土或草炭土与蛭石，草炭土：蛭石＝4:1，驯苗初期先将 培养瓶从培养箱中移到室内培养架上过渡一周后，打开封口膜驯苗一周以上， 真菌在培养瓶中大量滋生之前对试管苗进行移栽驯化，每天早晚对试管苗叶 片进行喷水。
优选的，上述步骤(1)中清洗消毒：加入4滴洗洁精清洗后在自来水下 冲洗半小时转移至超净工作台经75％酒精处理30s，0.1％HgCl2处理6min。
优选的，上述步骤(2)中6-BA、KT、NAA、琼脂和蔗糖的量分别为3mg/L、 0.5mg/L、0.1mg/L、6g/L和30g/L。
为了进一步说明本发明的效果，进行如下实验：
1试验材料与方法
1.1试验材料及处理
试验材料取自内蒙古赤峰市天鑫花卉繁育基地12号白鹤芋培育大棚，采 集花序最好季节为初夏，采集时间为早上8点-10点。采集花序的母株生长旺 盛、无病虫害且幼嫩花序长不超过2cm为宜。带回实验室清洗，然后加入4 滴洗洁精清洗后在自来水下冲洗半小时转移至超净工作台经75％酒精处理 30s，0.1％HgCl2处理6min。
1.2花序丛生芽诱导及其增殖
将每个花序用刀片平均切成4份，诱导培养基为MS；其中培养基中添加 6-BA(1.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L)、KT(0.5mg/L)和NAA(0.1mg/L、0.5mg/L)， 重复实验3次，每组接种10瓶，每瓶接种2个外植体。培养条件为暗培养， 继代培养在原培养基中诱导，培养条件在光条件下进行。
1.3不同蔗糖浓度对丛生芽的生根诱导
待花序丛生芽生长良好，分化芽高长至2cm以上即可切下生根。以1/2MS 为基本生根培养基，加入生长素IBA浓度0.5mg/L，添加不同的蔗糖浓度 20g/L、30g/L、40g/L和50g/L；10d～20d观察分化芽的生根情况及其苗的长 势情况。
1.4不同基质下对生根苗的移栽炼苗
移栽驯苗选取生长良好叶片翠绿的生根苗，移栽的基质均经过高温灭菌 处理，基质为100％草炭土或草炭土：蛭石＝4:1，每组驯苗300株。驯苗初期 先将培养瓶从培养箱中移到室内培养架上过渡一周后，打开封口膜驯苗一周 以上，真菌在培养瓶中大量滋生之前对试管苗进行移栽驯化。每天早晚对试 管苗叶片进行喷水以防叶片干枯。
1.5培养条件
暗培养条件：温度为25±2℃；光照培养为：光照强度2000lux，16h/d， 温度为25±2℃。培养基中均添加蔗糖30g/L，琼脂6g/L。
2结果与分析
2.1不同激素组合对花序丛生芽诱导的影响
花序接种至培养基中培养第10天表面开始膨大有突起；培养第21天时， 花序表面明显变大且有分化迹象，此时将培养瓶转移至光照培养箱中进行光 培养；光培养第7天白色花序变为绿色且有小部分小苗从花序上分化出来； 培养到第40天时分化的小苗叶片张开生长良好，此时培养基养分消耗较多需 进行继代培养；培养至49天，小苗陆续从花序团的基部分化；当培养时间超 过60天以后，丛生芽占据整个培养瓶，最多可高达20余株。然而从表1可 以得出：随着6-BA浓度的增加，丛生芽诱导率随之增加，丛生芽增殖数也在 增加(如表1)；当6-BA浓度为3.0mg/L，NAA浓度为0.1mg/L时，丛生芽诱 导率可达89％作为花序诱导丛生芽培养基。
表1不同激素组合对花序丛生芽诱导的影响
Figure BDA0001929386890000051
注:同列不同小写字母分别代表显著水平(P<0.05)。
2.2不同蔗糖浓度对丛生芽生根的影响
将生长良好的丛生芽切下接种至不同蔗糖浓度的生根培养基中，丛生芽在 生根培养基中培养10d左右，芽原基从基部开始分化。由表2可以看出，随 着蔗糖浓度提高，丛生芽的生根率均为100％，蔗糖浓度对丛生芽的生根率不 具有显著性差异(P<0.05)，且对生根根数也不具有显著性差异(P<0.05)； 然而生根苗的生长情况较为一致，没有明显的差异。所以从经济角度分析， 选择20g/L作为生根培养基中蔗糖的浓度。
表2不同蔗糖浓度对丛生芽生根的影响
Figure BDA0001929386890000061
2.3不同基质对试管苗生长的影响
驯苗初期将培养瓶从培养箱中移出，驯苗过程中(打开封口膜第一天) 打开瓶口的大小随着时间的增加不断变大，一般驯苗5天左右培养瓶内开始 滋生真菌繁殖速度极快，如不及时移栽就会侵害试管苗以致死亡。通过统计 移栽到草炭土：蛭石＝4:1中的300株试管苗成活了294株成活率高达98％， 生长良好；而移栽到草炭土中的300株试管苗成活了295株成活率为98.3％ (草炭土中移栽第35天)。在两种基质中的生长的试管苗生长均良好，没有 明显的差异，均可作为试管苗的移栽基质。
3结论与讨论
花序在MS培养基中添加激素3mg/L6-BA、0.5mg/LKT和0.1mg/LNAA花 序萌发率达89％，在原培养基上进行继代分化，分化丛生芽数最高可达20余 株；在生根阶段，以1/2MS为基本培养基，添加0.5mg/LIBA，20g/L为适宜 丛生芽生根蔗糖浓度；选取生长旺盛的试管苗在草炭土和草炭土：蛭石＝4:1 中进行驯苗，试管苗成活率为98％且长势良好。
本实验花序丛生芽的启动添加6-BA，KT和NAA，试验得出高浓度的细 胞***素更利于花序的启动，增殖和分化，诱导率高达89％。在0.5mg/LIBA 下使用不同蔗糖浓度对丛生芽进行生根诱导，然而生根诱导率均为100％，从 试管苗的长势和生根根数均无明显差异，选择更加经济的蔗糖浓度20g/L。将 逐级驯化的试管苗移栽至草炭土或草炭土：蛭石＝4:1中，成活率均达98％以 上。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限 于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易 想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内，因此，本发明的保护 范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (1)

1.一种白鹤芋花序组织培养方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
（1）采集花序，于初夏早8点至早10点采集生长旺盛、无病虫害且幼嫩的母株花序，长不超过2cm，对花序进行清洗消毒；清洗消毒：加入4滴洗洁精清洗后在自来水下冲洗半小时转移至超净工作台经75%酒精处理30s，0.1%HgCl2处理6min；
（2）将每个花序用刀片平均切成4份，诱导培养基为MS+3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA+6g/L琼脂+30g/L蔗糖，培养条件为暗培养，温度为25±2℃，继代培养在原培养基中诱导，培养条件为光照培养，光照强度2000lux，16h/d，温度为25±2℃；
（3）待花序丛生芽生长良好，分化芽高长至2cm以上即可切下生根，生根培养基为1/2MS+0.5mg/L生长素IBA+20g/L蔗糖+6g/L琼脂；
（4）移栽驯苗选取生长良好叶片翠绿的生根苗，移栽的基质均经过高温灭菌处理，基质为100%草炭土或草炭土：蛭石=4:1，驯苗初期先将培养瓶从培养箱中移到室内培养架上过渡一周后，打开封口膜驯苗一周以上，每天早晚对试管苗叶片进行喷水。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN110741901B (zh) * 2019-11-13 2021-09-28 云南省农业科学院花卉研究所 一种重瓣朱顶红培育方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101238795A (zh) * 2008-03-07 2008-08-13 阳光国际集团科技发展有限公司 一种白鹤芋人工繁育方法
CN106106181A (zh) * 2016-08-08 2016-11-16 吴子平 一种白鹤芋的组培快繁方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101238795A (zh) * 2008-03-07 2008-08-13 阳光国际集团科技发展有限公司 一种白鹤芋人工繁育方法
CN106106181A (zh) * 2016-08-08 2016-11-16 吴子平 一种白鹤芋的组培快繁方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
白掌品种‘维克’茎尖离体培养及快速繁殖;陈汉鑫等;《福建农业学报》;20130531;第28卷(第5期);第1.2.3、1.2.4、2.3、2.4节 *
白掌的组培与快繁技术;江金兰等;《浙江农业科学》;20111231(第5期);第1、2.3、2.4节 *
白掌的组织培养与快速繁殖研究;王颖等;《中国农业信息》;20160430;第126-128页 *
白掌的组织培养及快速繁殖;范敏等;《植物生理学通讯》;20031031;第39卷(第5期);第477页 *
白鹤芋温室规模化生产;李春华等;《中国花卉园艺》;20161231(第18期);第28页第2栏第4段 *
白鹤芋试管苗丛芽增殖与生根诱导试验;刘静等;《农业科学研究》;20140930;第35卷(第3期);第20-23页 *

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