CN106106138B - 一种红掌杂交育种及快速繁殖方法 - Google Patents

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Abstract

一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，依次包括选材、人工授粉、无菌播种培养、增殖培养、壮苗生根培养、试管苗移栽六个步骤。采用本发明方法可提高红掌杂交成功率，解决一些杂交组合花期不遇问题，快速培育优质种苗，具投入少、产出高等优势，以运用于规模化生产和红掌种质资源的保护。

Description

一种红掌杂交育种及快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及植物的育种及繁殖方法，尤其是指一种红掌杂交育种及快速繁殖方法。
背景技术
红掌（Anthurium adndraeanum）是天南星科花烛属（Anthurium Schott ）热带草本花卉，其花姿奇特优雅, 佛焰苞色彩靓丽各异、广泛分布于中南美洲。全世界红掌约有19个属或亚属，拥有原生种、变种和杂交种约1000多个，是天南星科最大的属之一。红掌由于独特的佛焰苞且花期极长，而具有极高的观赏价值，是世界上栽培广泛、销售量最大的盆切花卉之一，目前全世界红掌的年消费额已超过100亿人民币，上世纪80年代末才被引入到我国并开始广泛栽植；迄今为止，中国已形成世界最大的单一市场。
红掌通常可采用分株和扦插繁殖,由于红掌茎短，分蘖能力也有限，因此这两种无性繁殖方法的繁殖系数都不高，而且繁殖速度慢，尽管相当一部分红掌种子可通过自然杂交授粉并结实获得，但杂合成功率不高，亲本来源未明，花期不遇且由于各红掌品种种子成熟期不一，收获期长，需多次采收、多次播种，效率较低，若红掌种子在自然环境或基质播种萌发、发芽率偏低，仅20%～30%。
发明内容
本发明提供一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其主要目的在于克服现有红掌杂合率低、花期不遇、繁育周期长、种子萌发率低等缺陷。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，包括以下步骤：
1)选材：选取植株健壮、抗性优良、观赏价值高的两种不同种属的红掌分别作为父本和母本；
2)人工授粉：经短期低温（16℃～18℃）刺激或冬季时节，在开花时期，晨间采集父本的花粉，并对母本进行人工授粉，将授粉后发育至成熟而未脱落的黄色种子作为外植体；
3)无菌播种培养：将该黄色种子的外层果皮脱去并清洗干净，先用浓度体积分数为74％～77％的酒精浸泡30～40秒，再用浓度质量分数为0.12％～0.18％的升汞溶液消毒14～16分钟，然后用无菌水漂洗5～7 次，最后用滤纸吸干该黄色种子外表面的水分并将其接种到pH值为5.5～6.0的萌发培养基上培养，培养成高为1～1.5 厘米的小植株；
萌发培养基的配方为：1/2MS基本培养基,活性炭（AC）0.5～1.0g/L，肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0～2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02 ～0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.1～0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.005～0.5 mg/L，蔗糖15～30g/L，琼脂4～5g/L；
4)增殖培养：将经过步骤3）中的培养得出的小植株切根并转移到pH 值为5.5～6.0的增殖培养基内培养，培养成高度为1.5～3.0厘米的小苗；
增殖培养基的配方为：MS基本培养基，肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0 ～ 2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02～0.6mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.1～1.0 mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，蔗糖20～30g/L，琼脂4～5g/L；
5)壮苗生根培养：将经过步骤4）中的培养得出的小苗转接到pH 值为5.5～6.0壮苗生根培养基中培养，培养成高为3.0～5.0cm的试管苗；
壮苗生根培养基的配方为：1/2MS基本培养基，活性炭（AC）0.5～3.0g/L，含肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0～2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02～0.6mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，萘乙酸（NAA）0.005～0.5 mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，蔗糖20～30g/L，琼脂5～6g/L；
6)试管苗移栽：将经过步骤5）中的培养得出的试管苗转移到遮光70%以上温室中炼苗5～10天，然后将其从壮苗生根培养基中取出，洗净根部残留的培养基，用70%甲基托布津或多菌灵可湿性粉剂800倍液消毒处理后栽入到育苗基质中栽培成种苗；
育苗基质的配方为：将泥炭土、珍珠岩、河沙按体积比为8:1:1～9:0.5:0.5混合形成的混合基质。
进一步的，步骤2）中人工授粉过程，当父本和母本花期相同时，母本肉穗花序雌蕊开始分泌粘液1～2天；在晨间4点～6点时候取父本花粉用毛笔直接授于母本柱头上。
进一步的，步骤2）人工授粉中，当父本和母本花期不遇时，取父本材料置于人工气候室中，其中夜间设置温度16℃～18℃，白天栽培温度28℃～32℃，光照度2000lx，光照时长12h/ d；处理半个月以上，直至采集到父本花粉为止，之后用毛笔将花粉直接授于母本柱头上。
进一步的，步骤3）～5）中的培养温度为22～27℃。
进一步的，步骤3）～5）中的光照强度为1500～2000lx。
进一步的，步骤3）～5）光照时长为10～14 h/d。
进一步的，步骤6）中的光照强度为1500～2500lx。
进一步的，所述红掌的种属可以为Anthurium andraeanum（大叶花烛）、A.bakeri（绿色佛焰苞花烛）、A.crystallinum、A.dussii(三角叶花烛)、A.holtonianum（八角叶花烛）、A.hookeri、A.kempteri、A.longipetiolatum、A.macrolobum、A.magnificure、A.miquelianum、A.nymphillium、A.ozfisianum、A.pedatoradiatum、A.putamayo、A.scanden、A.signature（三裂叶花烛）、A.subsignatum、A.undatum、A.variabile、A.veitchii、A.warocquenum。
本发明中，萌发培养基、增殖培养基、壮苗生根培养基内使用的 MS 基本培养或1/2MS 基本培养基为红掌种苗的生长提供了 N、P、K 等无机营养元素，以满足其生长的基本需求。
本发明中使用的活性炭，英文名称 activated carbon(简称 AC)，具有吸附红掌生长中代谢的有毒物质的作用。
本发明中使用的肌醇，英文名称Inositol，其在糖类的相互转化中起作 用，是细胞壁的构建材料。肌醇参与碳水化合物，磷脂代谢及离子平衡等生理活动，具有帮助活性物质发挥作用的效果，能促进愈伤组织生长，对胚状体和芽的形成也有良好的促进作用。
本发明中使用的甘氨酸，英文名称Glycine，能够提高植物抗逆性，对植物生长特别是光合作用具有独特的促进作用；其可以增加植物的叶绿素含量，提高酶的活性，促进二氧化碳的渗透，使光合作用更加旺盛，从而提高红掌的品质。
本发明中使用的盐酸硫胺素(简称VB1)，是维生素B1的一种存在形式，盐酸硫胺素对于红掌愈伤组织的诱导具有促进作用，还能促进细胞***，提高其生长速度。
本发明中使用的盐酸吡哆醇(简称VB6)，别名维生素B6，能够促进植物根部生长，提高红掌的生长速度。
本发明中使用的烟酸也称作维生素B3，或维生素PP，分子式：C6H5NO2。其主要生理作用在于参与碳水化合物代谢，磷脂代谢及离子平衡作用，对组织快速生长有促进作用，对胚状体和芽的形成有良好影响。
本发明中使用的6-苄氨基腺嘌呤，英文名称 6-Benzylaminopurine(简称 6-BA)，属广谱性植物生长调节剂，可促进红掌细胞生长，抑制其叶绿素的降解，提高氨基酸的含量，延缓叶片衰老等。
本发明中使用的萘乙酸，英文名称 1-Naphthaleneacetic acid(简称NAA)，是广谱型植物生长调节剂，能促进细胞***与扩大，诱导形成不定根增加座果，防止落果，改变雌、雄花比率等。
本发明中使用的蔗糖起到能源物质和渗透调节剂的作用，而且除供能之外,还能诱导愈伤组织组织的再分化。
和现有技术相比，本发明产生的有益效果在于:
1、本发明生产的红掌具有杂交成功率高、出苗快、苗壮、种苗品质好、生长良好等特点，能解决一些杂交组合花期不遇问题，快速培育优质种苗，而且可规模化生产，具有投入少、产出高等优势。能获得大量种苗，以用于规模化生产和红掌种质资源的保护。
2、本发明的各种成分中，基本培养基只保证培养物的生存和最低的生理活动，肌醇、盐酸硫胺素促进愈伤组织生长，活性炭、甘氨酸、盐酸吡哆醇、烟酸、6-苄氨基腺嘌呤、萘乙酸能促进细胞***，使组织快速增长，使得红掌能够快速繁殖。
3、目前，国内外虽有红掌无菌播种和试管苗繁殖方法，但没有一种培养基可适合于不同品种红掌的无菌播种和试管成苗，因此本发明在适应性上具有较大的优势，能适用于各个种属的红掌。
具体实施方式
下面说明本发明的具体实施方式。
一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，包括以下步骤：
步骤一：选材
选取植株健壮、抗性优良、观赏价值高的两种不同种属的红掌分别作为父本和母本。该红掌的种属可以为Anthurium andraeanum（大叶花烛）、A.bakeri（绿色佛焰苞花烛）、A.crystallinum、A.dussii(三角叶花烛)、A.holtonianum（八角叶花烛）、A.hookeri、A.kempteri、A.longipetiolatum、A.macrolobum、A.magnificure、A.miquelianum、A.nymphillium、A.ozfisianum、A.pedatoradiatum、A.putamayo、A.scanden、A.signature（三裂叶花烛）、A.subsignatum、A.undatum、A.variabile、A.veitchii、A.warocquenum。
步骤二：人工授粉
经短期低温（16℃～18℃）刺激或冬季时节，在开花时期，晨间采集父本的花粉，并对母本进行人工授粉，将授粉后发育至成熟而未脱落的黄色种子作为外植体；
人工授粉过程中，当父本和母本花期相同时，母本肉穗花序雌蕊开始分泌粘液1～2天；在晨间4点～6点时候取父本花粉用毛笔直接授于母本柱头上；
当父本和母本花期不遇时，取父本材料置于人工气候室中，其中夜间设置温度16℃～18℃，白天栽培温度28℃～32℃，光照度2000lx，光照时长12h/ d；处理半个月以上，直至采集到父本花粉为止，之后用毛笔将花粉直接授于母本柱头上。
步骤三：无菌播种培养
将该黄色种子的外层果皮脱去并清洗干净，先用浓度体积分数为74％～77％的酒精浸泡30～40秒，再用浓度质量分数为0.12％～0.18％的升汞溶液消毒14～16分钟，然后用无菌水漂洗5～7 次，最后用滤纸吸干该黄色种子外表面的水分并将其接种到pH值为5.5～6.0的萌发培养基上培养，培养成高为1～1.5 厘米的小植株；
萌发培养基的配方为：1/2MS基本培养基,活性炭（AC）0.5～1.0g/L，肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0～2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02 ～0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.1～0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.005～0.5 mg/L，蔗糖15～30g/L，琼脂4～5g/L；
萌发培养基的作用是提高种子的发芽率以及发芽速度，使种子快速成长为小植株，减少资源的浪费，黄色种子在萌发培养基中培养30～35天即可培养成高为1～1.5 厘米的小植株。
步骤四：增殖培养
将经过步骤三中的培养得出的小植株切根并转移到pH 值为5.5～6.0的增殖培养基内培养，培养成高度为1.5～3.0厘米的小苗；
增殖培养基的配方为：MS基本培养基，肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0 ～ 2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02～0.6mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.1～1.0 mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，蔗糖20～30g/L，琼脂4～5g/L；
增殖培养基的作用是为了大规模生产，提高生产的效率，小植株在增殖培养基中培养30～60天，即可培养成高度为1.5～3.0厘米的小苗。
步骤五：壮苗生根培养
将经过步骤四中的培养得出的小苗转接到pH 值为5.5～6.0壮苗生根培养基中培养，培养成高为3.0～5.0cm的试管苗；
壮苗生根培养基的配方为：1/2MS基本培养基，活性炭（AC）0.5～3.0g/L，含肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0～2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02～0.6mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，萘乙酸（NAA）0.005～0.5 mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，蔗糖20～30g/L，琼脂5～6g/L；
壮苗生根培养基的作用是提高试管苗的成活率，并促进其生长。小苗在壮苗生根培养基中培养30～40天，即可培养成高为3.0～5.0cm的试管苗。
步骤六：试管苗移栽
将经过步骤五中的培养得出的试管苗转移到遮光70%以上温室中炼苗5～10天，然后将其从壮苗生根培养基中取出，洗净根部残留的培养基，用70%甲基托布津或多菌灵可湿性粉剂800倍液消毒处理后栽入到育苗基质中栽培成种苗；
育苗基质的配方为：将泥炭土、珍珠岩、河沙按体积比为8:1:1～9:0.5:0.5混合形成的混合基质；
在育苗基质中培养45～90天，即可栽培成种苗。
其中，步骤三～五中的培养温度为22～27℃，光照强度为1500～2000lx，光照时长为10～14 h/d。步骤六中的光照强度为1500～2500lx。本发明生产的红掌种苗具有杂交成功率高、出苗快、苗壮、种苗品质好、生长良好等特点，而且可规模化生产，具有投入少，产出高等优势。能获得大量种苗，以用于红掌种质资源的保护和商品化生产。目前，国内外虽有红掌无菌播种和试管苗繁殖方法，但没有一种培养基可适合于不同品种红掌的无菌播种和试管成苗，因此本发明在适应性上具有较大的优势，能适用于各个种属的红掌。
另外，本发明的各种成分中，基本培养基只保证培养物的生存和最低的生理活动，肌醇、盐酸硫胺素愈伤组织生长，活性炭、甘氨酸、盐酸吡哆醇、烟酸、6-苄氨基腺嘌呤、萘乙酸能促进细胞***，使组织快速增长，使得红掌能够快速繁殖。
实施例一
步骤一：选材
选取大哥大（Dakota）和樱桃红（Cherry red），并以大哥大为母本，樱桃红为父本。
步骤二：人工授粉
于12月～2月开花时期，在樱桃红肉穗花序花粉囊开裂1～2天时采集花粉，用毛笔将其授于母本大哥大的肉穗花序基部分泌黏液中。授粉后套袋，挂上标签，注明父母本、杂交日期等信息，等种子成熟至变成黄色时采集作为外植体；
4个月后统计授粉的成功率，达90%以上。
步骤三：无菌播种培养
用洗衣粉将黄色种子表面污物漂洗干净，之后将外层果皮抽去并清洗干净，用75％酒精浸泡35秒，再用0.15％升汞溶液消毒15分钟，无菌水漂洗6次，滤纸吸干水分后将黄色种子接种到萌发培养基上，第13天时种子开始萌动露白，第25天时种子子叶发芽，第35天即能形成1～1.5 厘米高的小植株；
萌发培养基的配方为：1/2MS基本培养基,活性炭（AC）0.5g/L，肌醇100mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5 mg/L，烟酸0.5 mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.05 mg/L，蔗糖20g/L，琼脂5 g/L，其pH 值为6.0。
步骤四：增殖培养
将小植株切根后转接到增殖培养基上，60天后能形成高度为1.5～3.0厘米的小苗；
增殖培养基的配方为：MS基本培养基，肌醇100mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.2 mg/L，烟酸0.5 mg/L，蔗糖30g/L，琼脂5g/L，其pH 值为6.0。
步骤五：壮苗生根培养
将小苗转接到壮苗生根培养基中培养，30天后即能形成3.0～5.0cm高的试管苗；
壮苗生根培养基的配方为：1/2MS基本培养基，活性炭（AC）1.5g/L，肌醇100mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，烟酸0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.05mg/L，蔗糖25g/L，琼脂5g/L，其pH 值为6.0 。
步骤六：试管苗移栽
将试管苗置于遮光70%以上的温室中炼苗7天，然后洗净根部残留培养基，再用70%甲基托布津或多菌灵可湿性粉剂800倍液消毒处理后栽入到泥炭土、珍珠岩、河沙（体积比8:1:1）的混合基质中栽培60天，得到种苗。
上述步骤三～五中培养条件为培养温度24℃，光照度2000lx，光照时长12h/ d；上述步骤六中培养条件为光照强度2000lx。最后经统计，成活率为98％。
实施例二
步骤一：选材
选取宝丽（Baby pear）和梦幻（Princess Amalia Brilliant），并以宝丽为母本，梦幻为父本。
步骤二：人工授粉
由于宝丽和梦幻花期不相同，取父本梦幻亲本材料置于人工气候室中，其中夜间设置温度16℃，白天栽培温度28℃～32℃，光照度2000lx，光照时长12h/ d；处理1个月；在梦幻肉穗花序花粉囊开裂1～2天时采集花粉，用毛笔将其授于母本宝丽的肉穗花序基部分泌黏液中。授粉后套袋，挂上标签，注明父母本、杂交日期等信息，等种子成熟至变成黄色时采集作为外植体；
4个月后统计授粉的成功率，达75%以上。
步骤三：无菌播种培养
用洗衣粉将黄色种子表面污物漂洗干净，之后将外层果皮抽去并清洗干净，用74％酒精浸泡30秒，再用0.12％升汞溶液消毒14分钟，无菌水漂洗5次，滤纸吸干水分后将黄色种子接种到萌发培养基上，第10天时种子开始萌动露白，第20天时种子子叶发芽，第30天即能形成1～1.5 厘米高的小植株；
萌发培养基的配方为：1/2MS基本培养基, 活性炭（AC）0.7g/L，肌醇80mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.5mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5 mg/L，烟酸0.5 mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.5 mg/L，萘乙酸（NAA）0.05 mg/L，蔗糖20g/L，琼脂5 g/L，其pH 值为5.6。
步骤四：增殖培养
将小植株切根后转接到增殖培养基上，40天后能形成高度为1.5～3.0厘米的小苗；
增殖培养基的配方为：MS基本培养基，肌醇80mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.5mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.5mg/L，烟酸0.5 mg/L，蔗糖30g/L，琼脂5g/L，其pH 值为5.6。
步骤五：壮苗生根培养
将小苗转接到壮苗生根培养基中培养，30天后即能形成3.0～5.0cm高的试管苗；
壮苗生根培养基的配方为：1/2MS基本培养基，活性炭（AC）1.0g/L，肌醇100mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，烟酸0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.05mg/L，蔗糖25g/L，琼脂5g/L，其pH 值为5.6。
步骤六：试管苗移栽
将试管苗置于遮光70%以上的温室中炼苗5天，然后洗净根部残留培养基，再用70%甲基托布津或多菌灵可湿性粉剂800倍液消毒处理后栽入到泥炭土、珍珠岩、河沙（体积比8:1:1）的混合基质中栽培70天，得到种苗。
上述步骤三～五中培养条件为培养温度24℃，光照度2000lx，光照时长13h/ d；上述步骤六中培养条件为光照强度2200lx。最后经统计，成活率为95％。
实施例三
步骤一：选材
选取潘多拉（Bandola）和云芝（YunZhi），并以潘多拉为母本，云芝为父本。
步骤二：授粉
由于潘多拉和云芝花期不相同，取云芝亲本材料置于人工气候室中，其中夜间设置温度18℃，白天栽培温度28℃～32℃，光照度2000lx，光照时长12h/ d；处理45天；在云芝红肉穗花序花粉囊开裂1～2天时采集花粉，用毛笔将其授于母本大哥大的肉穗花序基部黏液中。授粉后套袋，挂上标签，注明父母本、杂交日期等信息，等种子成熟至变成黄色时采集作为外植体；
4个月后统计授粉的成功率，达70%以上。
步骤三：无菌播种培养
用洗衣粉将黄色种子表面污物漂洗干净，之后将外层果皮抽去并清洗干净，用77％酒精浸泡40秒，再用0.18％升汞溶液消毒16分钟，无菌水漂洗7次，滤纸吸干水分后将黄色种子接种到萌发培养基上，第15天时种子开始萌动露白，第25天时种子子叶发芽，第30天即能形成1～1.5 厘米高的小植株；
萌发培养基的配方为：1/2MS基本培养基, 活性炭（AC）0.5g/L，肌醇90mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4 mg/L，烟酸0.5 mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.5 mg/L，蔗糖20g/L，琼脂5g/L，其pH 值为5.8。
步骤四：增殖培养
将小植株切根后转接到增殖培养基上，45天后能形成高度为1.5～3.0厘米的小苗；
增殖培养基的配方为：MS基本培养基，肌醇80mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.5mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.8mg/L，萘乙酸（NAA）0.02mg/L，烟酸0.5 mg/L，蔗糖30g/L，琼脂5g/L，其pH 值为5.8。
步骤五：壮苗生根培养
将小苗转接到壮苗生根培养基中培养，40天后即能形成3.0～5.0cm高的试管苗；
壮苗生根培养基的配方为：1/2MS基本培养基，活性炭（AC）1.5g/L，肌醇100mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，烟酸0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.05 mg/L，蔗糖30g/L，琼脂5g/L，pH 5.8。
步骤六：试管苗移栽
将试管苗置于遮光70%以上的温室中炼苗5天，然后洗净根部残留培养基，再用70%甲基托布津或多菌灵可湿性粉剂800倍液消毒处理后栽入到泥炭土、珍珠岩、河沙（体积比8:1:1）的混合基质中栽培80天，得到种苗。
上述步骤三～五中培养条件为培养温度24℃，光照度2000lx，光照时长10h/ d；上述步骤六中培养条件为光照强度2500lx。最后经统计，成活率为92％。
经过试验得出采用本发明培养成7～9cm的种苗所需时间与采用土壤种植培养成7～9cm的种苗所需时间的对比表如下：
由此可知采用本发明培养成7～9cm的种苗所需时间相较于采用土壤种植培养成7～9cm的种苗所需时间要大大缩短。
上述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。

Claims (6)

1.一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
1) 选材：选取植株健壮、抗性优良、观赏价值高的两种不同种属的红掌分别作为父本和母本；
2) 人工授粉：经短期16℃～18℃刺激或冬季时节，在开花期晨间采集父本的花粉，并对母本进行人工授粉，将授粉后发育至成熟而未脱落的黄色种子作为外植体；
3) 无菌播种培养：将该黄色种子的外层果皮脱去并清洗干净，先用浓度体积分数为74％～77％的酒精浸泡30～40秒，再用浓度质量分数为0.12％～0.18％的升汞溶液消毒14～16分钟，然后用无菌水漂洗5～7 次，最后用滤纸吸干该黄色种子外表面的水分并将其接种到pH值为5.5～6.0的萌发培养基上培养，培养成高为1～1.5 厘米的小植株；
萌发培养基的配方为：1/2MS基本培养基,活性炭（AC）0.5～1.0g/L，肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0～2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02 ～0.4mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.1～0.5mg/L，萘乙酸（NAA）0.005～0.5 mg/L，蔗糖15～30g/L，琼脂4～5g/L；
4) 增殖培养：将经过步骤3）中的培养得出的小植株切根并转移到pH 值为5.5～6.0的增殖培养基内培养，培养成高度为1.5～3.0厘米的小苗；
增殖培养基的配方为：MS基本培养基，肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0 ～ 2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02～0.6mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）0.1～1.0 mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，蔗糖20～30g/L，琼脂4～5g/L；
5) 壮苗生根培养：将经过步骤4）中的培养得出的小苗转接到pH 值为5.5～6.0壮苗生根培养基中培养，培养成高为3.0～5.0cm的试管苗；
壮苗生根培养基的配方为：1/2MS基本培养基，活性炭（AC）0.5～3.0g/L，含肌醇80～100mg/L，甘氨酸1.0～2.0mg/L，盐酸硫胺素(VB1)0.02～0.6mg/L，盐酸吡哆醇(VB6)0.4～1.0mg/L，萘乙酸（NAA）0.005～0.5 mg/L，烟酸0.3～0.6mg/L，蔗糖20～30g/L，琼脂5～6g/L；
6) 试管苗移栽：将经过步骤5）中的培养得出的试管苗转移到遮光70%以上温室中炼苗5～10天，然后将其从壮苗生根培养基中取出，洗净根部残留的培养基，用70%甲基托布津或多菌灵可湿性粉剂800倍液消毒处理后栽入到育苗基质中栽培成种苗；
育苗基质的配方为：将泥炭土、珍珠岩、河沙按体积比为8:1:1～9:0.5:0.5混合形成的混合基质；
步骤2）人工授粉中，当父本和母本花期相同时，在母本肉穗花序雌蕊开始分泌粘液1～2天内；于晨间4点～6点时获取父本花粉用毛笔直接授于母本柱头上；当父本和母本花期不遇时，取父本材料置于人工气候室中，其中夜间设置温度16℃～18℃，白天栽培温度28℃～32℃，光照度2000lx，光照时长12h/ d；处理半个月以上，直至采集到父本花粉为止，之后用毛笔将花粉直接授于母本柱头上。
2.如权利要求1所述一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其特征在于：其特征在于：步骤3）～5）中的培养温度为22～27℃。
3.如权利要求1所述一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其特征在于：步骤3）～5）中的光照强度为1500～2000lx。
4.如权利要求1所述一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其特征在于：步骤3）～5）光照时长为10～14 h/d。
5.如权利要求1所述一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其特征在于：步骤6）中的光照强度为1500～2500lx。
6.如权利要求1所述一种红掌杂交育种及快速繁殖方法，其特征在于：所述红掌的种属可以为Anthurium andraeanum（大叶花烛）、A.bakeri（绿色佛焰苞花烛）、A.crystallinum、A.dussii(三角叶花烛)、A.holtonianum（八角叶花烛）、A.hookeri、A.kempteri、A.longipetiolatum、A.macrolobum、A.magnificure、A.miquelianum、A.nymphillium、A.ozfisianum、A.pedatoradiatum、A.putamayo、A.scanden、A.signature（三裂叶花烛）、A.subsignatum、A.undatum、A.variabile、A.veitchii、A.warocquenum。
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CN101785429B (zh) * 2009-12-01 2012-06-20 东莞市生物技术研究所 一种提高红掌愈伤组织快速分化成芽的方法
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