CN109198208A - 改善猪肉品质的饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种改善猪肉品质饲料添加剂及其制备方法，所述饲料添加剂由发酵饲料组合物、富硒酵母、包被半胱胺及胍基乙酸组成。本发明的饲料添加剂能显著改善肉品质和抗氧化能力、降低料肉比，提高育肥猪生长性能。

Description

改善猪肉品质的饲料添加剂及其制备方法
技术领域
本发明属于动物饲料制备技术领域，具体涉及一种改善猪肉品质的饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
长期以来，提高育肥猪猪的生速度和瘦肉率一直是科研工作者和饲料生产企业的追求的目标，而随着人民生活水平的提高，不仅仅局限于对瘦肉率和食用量，更加关注肉的色泽、嫩度及口感等指标。集约化养殖方式使猪长期处于亚健康状态，极易受到外界环境如环境温度、饲养密度、空气质量、噪音的影响，极易导致动物产生应激，影响动物健康状态和PSE肉的产生。
杜仲叶是一种安全、无残留的绿色饲料添加剂，含有丰富的氨基酸、维生素和矿物质等营养成分，还含有杜仲多糖、杜仲黄铜、绿原酸、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷等活性成分，主要功效是补肝肾、强筋骨，具有镇静、降压、提高免疫力、抗炎、抗氧化等作用，国内外很多学者在日粮中添加杜仲叶来提高动物生长性能、胴体性状及肉品质指标。
我国是种桑养蚕大国，桑叶种植面积约有100万公顷。桑叶营养丰富，含有大量蛋白质、维生素和矿物质，其中氨基酸种类达到18种之多，这些营养物质对维持机体免疫力和提高抗氧化能力具有重要作用。另外，桑叶含有丰富的多糖、多酚、生物碱等抗氧化成分，能保护脂质免受氧化，从而抑制猪肉酸败，对猪肉品质起到保护作用。
本发明通过益生菌和复合酶对杜仲叶和桑叶复合物进行发酵，使叶片中的大分子蛋白分解成小肽和氨基酸，同时降解叶片细胞壁成分，使其中的多种生活活性成分释放，提升药效，并以发酵好的该组合物为载体，添加富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸混合制成成品，该添加剂既能提高猪生长速度、增加瘦肉率，又能改善肉质。
发明内容
为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种改善猪肉品质的饲料添加剂，由以下质量百分比的原料组成：发酵饲料组合物为80％-90％，富硒酵母为 0.5％-2％，包被半胱胺为4.5％-10％，胍基乙酸为5％-10％。
优选的是，所述发酵饲料混合物的活菌总数≥5.0×108CFU/g，所述发酵饲料由以下质量百分比的原料组成：杜仲叶为38％-55％，桑叶为40％-60％，淀粉为2％-5％。
在上述任一方案中优选的是，所述发酵饲料组合物的制备方法按照先后顺序包括以下步骤：
步骤(1)：将杜仲叶、桑叶粉碎，过0.6mm筛；
步骤(2)：制备粪肠球菌菌液；
步骤(3)：将杜仲叶、桑叶及淀粉在蒸球中均匀混合，通入蒸汽灭菌；
步骤(4)：将灭菌后的物料取出，放置自然冷却；
步骤(5)：将粪肠球菌菌液、复合酶与纯水混合均匀，然后通入混合机中与灭菌冷却后的物料混合；
步骤(6)：将混合好的物料分装入呼吸袋中，15℃-30℃，发酵3-7d；
步骤(7)：采用流化床烘干，进气温度80℃-95℃，出料温度≤55℃，物料水分≤8％烘干后即得。
在上述任一方案中优选的是，步骤(3)中，所述物料灭菌条件为：121℃灭菌30-50min；
步骤(5)中，所述粪肠球菌接种量为5％-10％，复合酶用量为0.04％-0.09％，发酵物料水分含量控制在36％-40％；
所述复合酶的组成及比例为：纤维素酶：酸性蛋白酶：木聚糖酶：甘露聚糖酶＝2:1:1:1，所述纤维素酶酶活为1万IU、酸性蛋白酶酶活为10万IU、木聚糖酶酶活为10万IU、甘露聚糖酶酶活为5万IU。
在上述任一方案中优选的是，所述粪肠球菌菌液由以下生产工艺制得：
步骤(1)：菌种活化与摇瓶培养：
菌种活化：取西林瓶冻干菌种，用少量MRS液体培养基溶解后，接入250ml
三角瓶(装液量50ml)，37℃，120r/min，振荡培养24h；
摇瓶扩配：将活化种子液按照1％-2％的接种量接入摇瓶中，37℃，160r/min，
振荡培养18-22h；
步骤(2)：一级种子罐培养：将摇瓶种子按照1％-2％接种量接入一级种子罐，
37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速80-120r/min；
步骤(3)：二级种子罐培养：将一级种子液按照5％-10％接种量接入二级种
子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速80-120r/min；
步骤(4)：发酵罐培养：将二级种子液按照5％-10％的接种量接入发酵罐，
37℃，通风比1:0.2，0.03-0.05MPa，转速100-150r/min。
在上述任一方案中优选的是，所述一级种子罐培养基成分包括：葡萄糖 20-30g/L、蛋白胨10-20g/L、酵母膏5-10g/L、柠檬酸三铵2-3g/L、无水乙酸钠 3.5-4.5g/L、磷酸氢二钾1.5-3g/L、硫酸锰0.2-0.4g/L，硫酸镁0.2-0.4g/L，碳酸钙 3-6g/L；
所述二级种子罐培养基成分包括：葡萄糖20-30g/L、蛋白胨10-20g/L、酵母膏5-10g/L、柠檬酸三铵2-3g/L、无水乙酸钠3.5-4.5g/L、磷酸氢二钾1.5-3g/L、硫酸锰0.2-0.4g/L，硫酸镁0.2-0.4g/L，碳酸钙3-6g/L；
所述发酵罐培养基成分包括：葡萄糖10-20g/L、淀粉10-20g/L、蛋白胨 10-15g/L、豆饼粉5-10g/L、酵母膏5-10g/L、柠檬酸三铵2-3g/L、无水乙酸钠 3.5-4.5g/L、磷酸氢二钾1.5-3g/L、硫酸锰0.2-0.4g/L，硫酸镁0.2-0.4g/L，碳酸钙 3-6g/L。
在上述任一方案中优选的是，所述富硒酵母由以下生产工艺制得：
步骤(1)：菌种活化：取酿酒酵母甘油管菌种，接入PDA液体培养基中，
28℃-32℃，160-200r/min振荡培养48-72h；
步骤(2)：菌种驯化培养：将活化好的酿酒酵母按照5％-10％的接种量接种
在含***钠浓度分别为10mg/L、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、 100mg/L的PDA培养基中，28℃-32℃，160-200r/min对酿酒酵母进行硒浓度由低到高的驯化，每个浓度梯度驯化时间48-72h，离心，干燥菌体，测定酿酒酵母菌体硒含量，获得富硒能力强的酿酒酵母菌种；
步骤(3)：种子液制备：采用5000ml大摇瓶，装液量1000ml，接种量1％-2％，
培养温度28℃-32℃，转速180-220r/min，培养时间24h；
步骤(4)：种子罐发酵：按照1％-2％接种量将摇瓶种子液接入发酵罐中，培
养温度28℃-32℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，搅拌转速 120-160r/min，培养时间16-22h；
步骤(5)：发酵罐发酵：按照5％-10％的接种量将种子罐菌液接入发酵罐，
培养温度28℃-32℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，发酵至16-20h 时，开始流加无机硒盐和糖蜜水溶液，每小时取样测定无机硒及残糖含量，控制发酵培养基中无机硒含量在60-100mg/L，总糖含量在2％-3％，发酵时间 25-30h，待酵母生物量达80g/L以上时，结束发酵；
步骤(6)：酵母菌泥制备：所得最终发酵液经离心、洗涤、过滤制得酵母菌泥；
步骤(7)：喷雾干燥制备成品。
在上述任一方案中优选的是，步骤(4)和步骤(5)中，所用培养基配方包括：糖蜜60-80g/L、酵母浸膏30-40g/L、蛋白胨10-15g/L，磷酸氢二钾2-5g/L、硫酸锰0.2-0.5g/L；
所述无机硒水溶液为***钠水溶液，浓度为300-600g/L，所述糖蜜水溶液浓度为500-700g/L；
步骤(7)的具体操作步骤为：将得到的酵母泥加淀粉调浆，浓度控制在20％-30％，喷雾干燥进口温度控制在150℃-200℃，出口温度控制在50℃-65℃，制得淡黄色粉末，水分含量≤8％。
在上述任一方案中优选的是，所述包被半胱胺中包被半胱胺的含量≥50％，所述胍基乙酸中胍基乙酸的含量≥98％；所述富硒酵母的有机硒含量为1500-1800mg/kg，含水量≤8％。
在上述任一方案中优选的是，按照先后顺序包括以下生产步骤：
步骤(1)：按照预定比例称取各组分：发酵饲料组合物、富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸；
步骤(2)：现将发酵饲料组合物投入混合机中，开起搅拌；
步骤(3)：依次从大料口投入包被半胱胺和胍基乙酸，混合；
步骤(4)：最后从小料口加入富硒酵母，混合后即制得成品。
与现有技术相比，本发明饲料添加剂中的发酵饲料组合物与富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸联合使用，组合物中的益生菌促进动物肠道微生态的平衡，而桑叶与杜仲叶中的活性成分与有机硒、包被半胱胺、胍基乙酸相互协同，促进动物生长，提高猪肉肌内脂肪含量和瘦肉率，降低胴体皮厚和滴水损失，增加眼肌面积、肉色评分和大理石纹评分等。
具体实施方式
为了更进一步了解本发明的发明内容，下面将结合具体实施例详细阐述本发明。
实施例1
一种改善猪肉品质饲料添加剂，其特征在于，由以下百分比的原料组成：发酵饲料组合物80％，富硒酵母0.5％，包被半胱胺10％，胍基乙9.5％。
所述的发酵饲料混合物活菌总数≥5.0×108CFU/g，其组成为：杜仲叶40％，桑叶58％，淀粉2％。
所述的富硒酵母有机硒含量为1500-1800mg/kg，含水量≤8％。
所述的包被半胱胺、胍基乙酸为市售产品，含量为：包被半胱胺≥50％，胍基乙酸≥98％。
一种改善猪肉品质饲料添加剂，其中，包括以下生产步骤：
1)按照预定比例称取各组分：发酵饲料组合物、富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸；
2)现将发酵饲料组合物投入混合机中，开起搅拌；
3)依次从大料口投入包被半胱胺和胍基乙酸，混合3-5分钟；
4)最后从小料口加入富硒酵母，混合3-5分钟，即制得成品。
其中，所述发酵饲料组合物，生产工艺包括以下步骤：
1)原料粉碎：将杜仲叶、桑叶粉碎，过0.6mm筛；
2)粪肠球菌菌液制备；
3)物料灭菌：将杜仲叶、桑叶及淀粉在蒸球中均匀混合，通入蒸汽灭菌；
4)冷却：将物料放出，自然冷却；
5)混合：将粪肠球菌菌液、复合酶与纯水混合均匀，然后通入混合机中与灭菌冷却后的物料混合；
6)发酵：将混合好的物料分装入呼吸袋中，15℃-30℃，发酵3-7d。
7)烘干：采用流化床烘干，进气温度80℃-95℃，出料温度≤55℃，物料水分≤8％。
上述发酵饲料组合物，所用粪肠球菌菌液由以下上产工艺制得：
1)菌种活化与摇瓶培养：
菌种活化：取西林瓶冻干菌种，用少量MRS液体培养基溶解后，接入250ml 三角瓶(装液量50ml)，37℃，120r/min，振荡培养24h；
摇瓶扩配：将活化种子液按照1％的接种量接入摇瓶中，37℃，160r/min，振荡培养18-22h；
2)一级种子罐培养：将摇瓶种子按照1％接种量接入一级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速80-120r/min；
3)二级种子罐培养：将一级种子液按照5％-％接种量接入二级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速80r/min；
4)发酵罐培养：将二级种子液按照5％的接种量接入发酵罐，37℃，通风比 1:0.2，
0.03-0.05MPa，转速100r/min。
所述一级种子罐培养基成分包括：葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母膏5g/L、柠檬酸三铵2g/L、无水乙酸钠3.5g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、硫酸锰0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，碳酸钙3g/L；
所述二级种子罐培养基成分包括：葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母膏5g/L、柠檬酸三铵2g/L、无水乙酸钠3.5g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、硫酸锰0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，碳酸钙3g/L；
所述发酵罐培养基成分包括：葡萄糖10g/L、淀粉10g/L、蛋白胨10g/L、豆饼粉5g/L、酵母膏5g/L、柠檬酸三铵2g/L、无水乙酸钠3.5g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、硫酸锰0.2g/L，硫酸镁0.2g/L，碳酸钙3g/L。
上述发酵饲料组合物，
所述物料灭菌条件为：121℃灭菌30-50min。
所述粪肠球菌接种量为5％，复合酶用量为0.04％，发酵物料水分含量控制在36％-40％。
所述复合酶的组成及比例包括：纤维素酶：酸性蛋白酶：木聚糖酶：甘露聚糖酶＝2:1:1:1，纤维素酶酶活为1万IU、酸性蛋白酶酶活为10万IU、木聚糖酶酶活为10万IU、甘露聚糖酶酶活为5万IU。
其中，所述富硒酵母由以下生产工艺制得：
1)菌种活化：取酿酒酵母甘油管菌种，接入PDA液体培养基中，28℃-32℃， 160-200r/min振荡培养48-72h；
2)菌种驯化培养：将活化好的酿酒酵母按照5％的接种量接种在含***钠浓度分别为10、20、40、60、80、100mg/L的PDA培养基中，28℃，160r/min 对酿酒酵母进行硒浓度由低到高的驯化，每个浓度梯度驯化时间48h，离心，干燥菌体，测定酿酒酵母菌体硒含量，获得富硒能力强的酿酒酵母菌种；
3)种子液制备：采用5000ml大摇瓶，装液量1000ml，接种量1％，培养温度28℃，转速180r/min，培养时间24h；
4)种子罐发酵：按照1％接种量将摇瓶种子液接入发酵罐中，培养温度28℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，搅拌转速120r/min，培养时间16h；
5)发酵罐发酵：按照5％％的接种量将种子罐菌液接入发酵罐，培养温度 28℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，发酵至16h时，开始流加无机硒盐和糖蜜水溶液，每小时取样测定无机硒及残糖含量，控制发酵培养基中无机硒含量在60-100mg/L，总糖含量在2％-3％，发酵时间25-30h，待酵母生物量达80g/L 以上时，结束发酵。
6)酵母菌泥制备：所得最终发酵液经离心、洗涤、过滤制得酵母菌泥。
7)喷雾干燥制备成品：将得到的酵母泥加淀粉调浆，浓度控制在20％-30％，喷雾干燥进口温度控制在150℃-200℃，出口温度控制在50℃-65℃，制得淡黄色粉末，水分含量≤8％。
所述酵母菌用培养基配方为：糖蜜60g/L、酵母浸膏30g/L、蛋白胨10-g/L，磷酸氢二钾2g/L、硫酸锰0.2g/L。
所述无机硒水溶液为***钠水溶液，浓度为300g/L，所述糖蜜水溶液浓度为500g/L。
实施例2
一种改善猪肉品质饲料添加剂，其特征在于，由以下百分比的原料组成：发酵饲料组合物85％％，富硒酵母1％，包被半胱胺7％，胍基乙酸7％。
所述的发酵饲料混合物活菌总数≥5.0×108CFU/g，其组成为：杜仲叶50％，桑叶47％，淀粉3％。
所述的富硒酵母有机硒含量为1500-1800mg/kg，含水量≤8％。
所述的包被半胱胺、胍基乙酸为市售产品，含量为：包被半胱胺≥50％，胍基乙酸≥98％。
一种改善猪肉品质饲料添加剂，其中，包括以下生产步骤：
1)按照预定比例称取各组分：发酵饲料组合物、富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸；
2)现将发酵饲料组合物投入混合机中，开起搅拌；
3)依次从大料口投入包被半胱胺和胍基乙酸，混合3-5分钟；
4)最后从小料口加入富硒酵母，混合3-5分钟，即制得成品。
其中，所述发酵饲料组合物，生产工艺包括以下步骤：
1)原料粉碎：将杜仲叶、桑叶粉碎，过0.6mm筛；
2)粪肠球菌菌液制备；
3)物料灭菌：将杜仲叶、桑叶及淀粉在蒸球中均匀混合，通入蒸汽灭菌；
4)冷却：将物料放出，自然冷却；
5)混合：将粪肠球菌菌液、复合酶与纯水混合均匀，然后通入混合机中与灭菌冷却后的物料混合；
6)发酵：将混合好的物料分装入呼吸袋中，15℃-30℃，发酵3-7d。
7)烘干：采用流化床烘干，进气温度80℃-95℃，出料温度≤55℃，物料水分≤8％。
上述发酵饲料组合物，所用粪肠球菌菌液由以下上产工艺制得：
1)菌种活化与摇瓶培养：
菌种活化：取西林瓶冻干菌种，用少量MRS液体培养基溶解后，接入250ml 三角瓶(装液量50ml)，37℃，120r/min，振荡培养24h；
摇瓶扩配：将活化种子液按照1.5％的接种量接入摇瓶中，37℃，160r/min，振荡培养18-22h；
2)一级种子罐培养：将摇瓶种子按照1.5％接种量接入一级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速100r/min；
3)二级种子罐培养：将一级种子液按照8％接种量接入二级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速100r/min；
4)发酵罐培养：将二级种子液按照8％的接种量接入发酵罐，37℃，通风比 1:0.2，
0.03-0.05MPa，转速120r/min。
所述一级种子罐培养基成分包括：葡萄糖25g/L、蛋白胨15g/L、酵母膏 7.5g/L、柠檬酸三铵2.5g/L、无水乙酸钠4g/L、磷酸氢二钾2g/L、硫酸锰0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，碳酸钙4g/L；
所述二级种子罐培养基成分包括：葡萄糖25g/L、蛋白胨15g/L、酵母膏 7.5g/L、柠檬酸三铵2.5g/L、无水乙酸钠4g/L、磷酸氢二钾2g/L、硫酸锰0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，碳酸钙5g/L；
所述发酵罐培养基成分包括：葡萄糖15g/L、淀粉15g/L、蛋白胨12.5g/L、豆饼粉8g/L、酵母膏7.5g/L、柠檬酸三铵2.5g/L、无水乙酸钠4g/L、磷酸氢二钾2g/L、硫酸锰0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，碳酸钙4g/L。
上述发酵饲料组合物，
所述物料灭菌条件为：121℃灭菌30-50min。
所述粪肠球菌接种量为7.5％，复合酶用量为0.06％，发酵物料水分含量控制在36％-40％。
所述复合酶的组成及比例包括：纤维素酶：酸性蛋白酶：木聚糖酶：甘露聚糖酶＝2:1:1:1，纤维素酶酶活为1万IU、酸性蛋白酶酶活为10万IU、木聚糖酶酶活为10万IU、甘露聚糖酶酶活为5万IU。
其中，所述富硒酵母由以下生产工艺制得：
1)菌种活化：取酿酒酵母甘油管菌种，接入PDA液体培养基中，230℃， 180r/min振荡培养60h；
2)菌种驯化培养：将活化好的酿酒酵母按照7.5％的接种量接种在含***钠浓度分别为10、20、40、60、80、100mg/L的PDA培养基中30℃，180r/min 对酿酒酵母进行硒浓度由低到高的驯化，每个浓度梯度驯化时间60h，离心，干燥菌体，测定酿酒酵母菌体硒含量，获得富硒能力强的酿酒酵母菌种；
3)种子液制备：采用5000ml大摇瓶，装液量1000ml，接种量1.5％，培养温度30℃，转速200r/min，培养时间24h；
4)种子罐发酵：按照1.5％接种量将摇瓶种子液接入发酵罐中，培养温度 30℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，搅拌转速1400r/min，培养时间20h；
5)发酵罐发酵：按照7.5％的接种量将种子罐菌液接入发酵罐，培养温度 30℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，发酵至18h时，开始流加无机硒盐和糖蜜水溶液，每小时取样测定无机硒及残糖含量，控制发酵培养基中无机硒含量在60-100mg/L，总糖含量在2％-3％，发酵时间25-30h，待酵母生物量达80g/L 以上时，结束发酵。
6)酵母菌泥制备：所得最终发酵液经离心、洗涤、过滤制得酵母菌泥。
7)喷雾干燥制备成品：将得到的酵母泥加淀粉调浆，浓度控制在20％-30％，喷雾干燥进口温度控制在150℃-200℃，出口温度控制在50℃-65℃，制得淡黄色粉末，水分含量≤8％。
所述酵母菌用培养基配方为：糖蜜70g/L、酵母浸膏35g/L、蛋白胨12.5g/L，磷酸氢二钾3g/L、硫酸锰0.3g/L。
所述无机硒水溶液为***钠水溶液，浓度为400g/L，所述糖蜜水溶液浓度为600g/L。
实施例3
一种改善猪肉品质饲料添加剂，其特征在于，由以下百分比的原料组成：发酵饲料组合物88％，富硒酵母2％，包被半胱胺5％％，胍基乙酸5％。
所述的发酵饲料混合物活菌总数≥5.0×108CFU/g，其组成为：杜仲叶55％，桑叶40％，淀粉5％。
所述的富硒酵母有机硒含量为1500-1800mg/kg，含水量≤8％。
所述的包被半胱胺、胍基乙酸为市售产品，含量为：包被半胱胺≥50％，胍基乙酸≥98％。
一种改善猪肉品质饲料添加剂，其中，包括以下生产步骤：
1)按照预定比例称取各组分：发酵饲料组合物、富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸；
2)现将发酵饲料组合物投入混合机中，开起搅拌；
3)依次从大料口投入包被半胱胺和胍基乙酸，混合3-5分钟；
4)最后从小料口加入富硒酵母，混合3-5分钟，即制得成品。
其中，所述发酵饲料组合物，生产工艺包括以下步骤：
1)原料粉碎：将杜仲叶、桑叶粉碎，过0.6mm筛；
2)粪肠球菌菌液制备；
3)物料灭菌：将杜仲叶、桑叶及淀粉在蒸球中均匀混合，通入蒸汽灭菌；
4)冷却：将物料放出，自然冷却；
5)混合：将粪肠球菌菌液、复合酶与纯水混合均匀，然后通入混合机中与灭菌冷却后的物料混合；
6)发酵：将混合好的物料分装入呼吸袋中，15℃-30℃，发酵3-7d。
7)烘干：采用流化床烘干，进气温度80℃-95℃，出料温度≤55℃，物料水分≤8％。
上述发酵饲料组合物，所用粪肠球菌菌液由以下上产工艺制得：
1)菌种活化与摇瓶培养：
菌种活化：取西林瓶冻干菌种，用少量MRS液体培养基溶解后，接入250ml 三角瓶(装液量50ml)，37℃，120r/min，振荡培养24h；
摇瓶扩配：将活化种子液按照1％-2％的接种量接入摇瓶中，37℃，160r/min，振荡培养22h；
2)一级种子罐培养：将摇瓶种子按照1％-2％接种量接入一级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速120r/min；
3)二级种子罐培养：将一级种子液按照5％-10％接种量接入二级种子罐， 37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速120r/min；
4)发酵罐培养：将二级种子液按照5％-10％的接种量接入发酵罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速150r/min。
所述一级种子罐培养基成分包括：葡萄糖30g/L、蛋白胨20g/L、酵母膏 10g/L、柠檬酸三铵3g/L、无水乙酸钠4.5g/L、磷酸氢二钾3g/L、硫酸锰0.4g/L，硫酸镁0.4g/L，碳酸钙6g/L；
所述二级种子罐培养基成分包括：葡萄糖30g/L、蛋白胨20g/L、酵母膏 10g/L、柠檬酸三铵3g/L、无水乙酸钠4.5g/L、磷酸氢二钾3g/L、硫酸锰0.4g/L，硫酸镁0.4g/L，碳酸钙6g/L；
所述发酵罐培养基成分包括：葡萄糖20g/L、淀粉20g/L、蛋白胨15g/L、豆饼粉10g/L、酵母膏10g/L、柠檬酸三铵3g/L、无水乙酸钠4.5g/L、磷酸氢二钾 3g/L、硫酸锰0.4g/L，硫酸镁0.4g/L，碳酸钙6g/L。
上述发酵饲料组合物，
所述物料灭菌条件为：121℃灭菌30-50min。
所述粪肠球菌接种量为10％，复合酶用量为0.09％，发酵物料水分含量控制在36％-40％。
所述复合酶的组成及比例包括：纤维素酶：酸性蛋白酶：木聚糖酶：甘露聚糖酶＝2:1:1:1，纤维素酶酶活为1万IU、酸性蛋白酶酶活为10万IU、木聚糖酶酶活为10万IU、甘露聚糖酶酶活为5万IU。
其中，所述富硒酵母由以下生产工艺制得：
1)菌种活化：取酿酒酵母甘油管菌种，接入PDA液体培养基中，32℃， 200r/min振荡培养72h；
2)菌种驯化培养：将活化好的酿酒酵母按照10％的接种量接种在含***钠浓度分别为10、20、40、60、80、100mg/L的PDA培养基中，32℃，200r/min 对酿酒酵母进行硒浓度由低到高的驯化，每个浓度梯度驯化时间72h，离心，干燥菌体，测定酿酒酵母菌体硒含量，获得富硒能力强的酿酒酵母菌种；
3)种子液制备：采用5000ml大摇瓶，装液量1000ml，接种量2％，培养温度32℃，转速220r/min，培养时间24h；
4)种子罐发酵：按照2％接种量将摇瓶种子液接入发酵罐中，培养温度32℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，搅拌转速160r/min，培养时间22h；
5)发酵罐发酵：按照5％-10％的接种量将种子罐菌液接入发酵罐，培养温度 32℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，发酵至20h时，开始流加无机硒盐和糖蜜水溶液，每小时取样测定无机硒及残糖含量，控制发酵培养基中无机硒含量在60-100mg/L，总糖含量在2％-3％，发酵时间25-30h，待酵母生物量达80g/L 以上时，结束发酵。
6)酵母菌泥制备：所得最终发酵液经离心、洗涤、过滤制得酵母菌泥。
7)喷雾干燥制备成品：将得到的酵母泥加淀粉调浆，浓度控制在20％-30％，喷雾干燥进口温度控制在150℃-200℃，出口温度控制在50℃-65℃，制得淡黄色粉末，水分含量≤8％。
所述酵母菌用培养基配方为：糖蜜80g/L、酵母浸膏40g/L、蛋白胨15g/L，磷酸氢二钾5g/L、硫酸锰0.5g/L。
所述无机硒水溶液为***钠水溶液，浓度为600g/L，所述糖蜜水溶液浓度为700g/L。
试验例
1试验方案
选择胎次、初始体重(62.5±1.3)kg、日龄基本一致的健康“杜×长×大”三元杂交育肥猪96头，随机分为4组，即对照组、试验1组、试验2组和试验3组，每组3个重复，每个重复8头猪。对照组饲喂基础日粮，试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮基础上添加1％的实施例1、实施例2和实施例3的饲料添加剂。试验期间采取自由采食和饮水，每日饲喂3次，预饲期7d，正饲期 60d，试验结束时每组选6头猪(公母各半)屠宰，测定肉品质指标和抗氧化能力指标。试验基础日粮参照NRC(2012)标准，根据育肥猪营养需要配制，饲粮组成及营养需要见表1
表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)
2测定项目与方法
2.1生长性能指标测定
试验开始和结束时，测定各组的体重，统计每试验期间各重复组的耗料量，计算平
均日采食量、平均日增重及料重比。
2.2肉品质指标测定
试验结束时，试验猪早餐空腹，宰前测活体质量后进行屠宰试验。测定并计算屠宰率、平均背膘厚度、眼肌面积。取背最长肌，测定肌肉pH45min、pH24h、肉色、大理石纹、熟肉率、嫩度、滴水损失、肌内脂肪含量和粗蛋白含量。
2.3抗氧化能力测定
屠宰猪只取肝脏，用PBS缓冲液清洗，剪取1g样品，加入0.85％生理盐水，制备匀浆，5000r/min离心6分钟，上清液-20℃冰箱保存测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)。
3试验结果
3.1饲料添加剂对育肥猪生长性能的影响
由表2可知，试验各组与对照组的平均日增重与平均日采食量差异不显著 (P>0.05)，试验各组料重比极显著低于对照组(P<0.01)，试验2组与试验3组料重比极显著低于试验1组(P<0.01)，试验2组与3组料重比差异不显著(P>0.05)。
表2 饲料添加剂对育肥猪生长性能的影响
注：同行数据肩注无字母或相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)，下同。
3.2饲料添加剂对育肥猪肉品质的影响
由表3可知，各试验组屠宰率、大理石纹、pH45min、pH24h、嫩度、粗蛋白与对照组差异不显著(P>0.05)；各试验组眼肌面积、肉色、肌内脂肪都极显著高于对照组(P<0.01)，各试验组之间差异不显著(P>0.05)；各试验组平均背膘极显著高于对照组(P>0.01)，其中试验2组和试验3组平均背膘厚度极显著高于试验1组(P<0.01)，试验2组和试验3组平均背膘厚度差异不显著(P>0.05)。试验2 组和试验3组熟肉率显著高于对照组(P<0.05)，与试验1组差异不显著(P>0.05)，试验1组与对照组差异不显著(P>0.05)。
表3 饲料添加剂对育肥猪肉品质的影响
3.3饲料添加剂对育肥猪抗氧化能力的影响
由表4可知，试验组GSH-Px活性极显著高于对照组(P<0.01)，试验1组 GSH-Px活性极显著低于试验2组和试验3组；试验2组与试验3组SOD活性极显著高于对照组和试验1组(P<0.01)，试验1组与对照组SOD活性差异不显著(P>0.05)；试验组MDA含量极显著低于对照组(P<0.01)，试验2组和试验3 组MDA含量极显著低于试验1组(P<0.01)，试验2组和3组MDA含量差异不显著(P>0.05)。
表4 饲料添加剂对育肥猪抗氧化能力的影响
指标 对照组 试验1组 试验2组 试验3组
GSH-Px/(IU/mg) 113.24±7.5<sup>Cc</sup> 123.81±8.4<sup>Bb</sup> 131.06±9.2<sup>Aa</sup> 132.14±8.9<sup>Aa</sup>
SOD/(IU/mg) 92.34±3.32<sup>Bb</sup> 94.25±4.29<sup>Bb</sup> 98.22±1.29<sup>Aa</sup> 101.15±2.53<sup>Aa</sup>
MDA/(nmol/mg) 8.74±0.15<sup>Aa</sup> 8.03±0.12<sup>Bb</sup> 7.96±0.05<sup>Cc</sup> 7.83±0.08<sup>Cc</sup>
4结论
饲料中添加本发明饲料添加剂能显著降低料肉比，提高育肥猪生长性能，同时改善肉品质指标和提高抗氧化能力。
本领域技术人员不难理解，本发明的改善猪肉品质的饲料添加剂及其制备方法包括上述本发明说明书的发明内容和具体实施方式部分，限于篇幅并为使说明书简明而没有将这些组合构成的各方案一一描述。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种改善猪肉品质的饲料添加剂，由以下质量百分比的原料组成：发酵饲料组合物为80％-90％，富硒酵母为0.5％-2％，包被半胱胺为4.5％-10％，胍基乙酸为5％-10％。
2.根据权利要求1所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，所述发酵饲料混合物的活菌总数≥5.0×108CFU/g，所述发酵饲料由以下质量百分比的原料组成：杜仲叶为38％-55％，桑叶为40％-60％，淀粉为2％-5％。
3.根据权利要求2所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，所述发酵饲料组合物的制备方法按照先后顺序包括以下步骤：
步骤(1)：将杜仲叶、桑叶粉碎，过0.6mm筛；
步骤(2)：制备粪肠球菌菌液；
步骤(3)：将杜仲叶、桑叶及淀粉在蒸球中均匀混合，通入蒸汽灭菌；
步骤(4)：将灭菌后的物料取出，放置自然冷却；
步骤(5)：将粪肠球菌菌液、复合酶与纯水混合均匀，然后通入混合机中与灭菌冷却后的物料混合；
步骤(6)：将混合好的物料分装入呼吸袋中，15℃-30℃，发酵3-7d；
步骤(7)：采用流化床烘干，进气温度80℃-95℃，出料温度≤55℃，物料水分≤8％烘干后即得。
4.根据权利要求3所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，步骤(3)中，所述物料灭菌条件为：121℃灭菌30-50min；
步骤(5)中，所述粪肠球菌接种量为5％-10％，复合酶用量为0.04％-0.09％，发酵物料水分含量控制在36％-40％；
所述复合酶的组成及比例为：纤维素酶：酸性蛋白酶：木聚糖酶：甘露聚糖酶＝2:1:1:1，所述纤维素酶酶活为1万IU、酸性蛋白酶酶活为10万IU、木聚糖酶酶活为10万IU、甘露聚糖酶酶活为5万IU。
5.根据权利要求3所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，所述粪肠球菌菌液由以下生产工艺制得：
步骤(1)：菌种活化与摇瓶培养：
菌种活化：取西林瓶冻干菌种，用少量MRS液体培养基溶解后，接入250ml三角瓶(装液量50ml)，37℃，120r/min，振荡培养24h；
摇瓶扩配：将活化种子液按照1％-2％的接种量接入摇瓶中，37℃，160r/min，振荡培养18-22h；
步骤(2)：一级种子罐培养：将摇瓶种子按照1％-2％接种量接入一级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速80-120r/min；
步骤(3)：二级种子罐培养：将一级种子液按照5％-10％接种量接入二级种子罐，37℃，通风比1:0.2，罐压0.03-0.05MPa，转速80-120r/min；
步骤(4)：发酵罐培养：将二级种子液按照5％-10％的接种量接入发酵罐，37℃，通风比1:0.2，0.03-0.05MPa，转速100-150r/min。
6.根据权利要求5所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，所述一级种子罐培养基成分包括：葡萄糖20-30g/L、蛋白胨10-20g/L、酵母膏5-10g/L、柠檬酸三铵2-3g/L、无水乙酸钠3.5-4.5g/L、磷酸氢二钾1.5-3g/L、硫酸锰0.2-0.4g/L，硫酸镁0.2-0.4g/L，碳酸钙3-6g/L；
所述二级种子罐培养基成分包括：葡萄糖20-30g/L、蛋白胨10-20g/L、酵母膏5-10g/L、柠檬酸三铵2-3g/L、无水乙酸钠3.5-4.5g/L、磷酸氢二钾1.5-3g/L、硫酸锰0.2-0.4g/L，硫酸镁0.2-0.4g/L，碳酸钙3-6g/L；
所述发酵罐培养基成分包括：葡萄糖10-20g/L、淀粉10-20g/L、蛋白胨10-15g/L、豆饼粉5-10g/L、酵母膏5-10g/L、柠檬酸三铵2-3g/L、无水乙酸钠3.5-4.5g/L、磷酸氢二钾1.5-3g/L、硫酸锰0.2-0.4g/L，硫酸镁0.2-0.4g/L，
碳酸钙3-6g/L。
7.根据权利要求1所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，所述富硒酵母由以下生产工艺制得：
步骤(1)：菌种活化：取酿酒酵母甘油管菌种，接入PDA液体培养基中，28℃-32℃，160-200r/min振荡培养48-72h；
步骤(2)：菌种驯化培养：将活化好的酿酒酵母按照5％-10％的接种量接种在含***钠浓度分别为10mg/L、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L的PDA培养基中，28℃-32℃，160-200r/min对酿酒酵母进行硒浓度由低到高的驯化，每个浓度梯度驯化时间48-72h，离心，干燥菌体，测定酿酒酵母菌体硒含量，获得富硒能力强的酿酒酵母菌种；
步骤(3)：种子液制备：采用5000ml大摇瓶，装液量1000ml，接种量1％-2％，培养温度28℃-32℃，转速180-220r/min，培养时间24h；
步骤(4)：种子罐发酵：按照1％-2％接种量将摇瓶种子液接入发酵罐中，培养温度28℃-32℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，搅拌转速120-160r/min，培养时间16-22h；
步骤(5)：发酵罐发酵：按照5％-10％的接种量将种子罐菌液接入发酵罐，培养温度28℃-32℃，通风比：1:0.6，罐压0.03-0.05MPa，发酵至16-20h时，开始流加无机硒盐和糖蜜水溶液，每小时取样测定无机硒及残糖含量，控制发酵培养基中无机硒含量在60-100mg/L，总糖含量在2％-3％，发酵时间25-30h，待酵母生物量达80g/L以上时，结束发酵；
步骤(6)：酵母菌泥制备：所得最终发酵液经离心、洗涤、过滤制得酵母菌泥；
步骤(7)：喷雾干燥制备成品。
8.根据权利要求7所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，步骤(4)和步骤(5)中，所用培养基配方包括：糖蜜60-80g/L、酵母浸膏30-40g/L、蛋白胨10-15g/L，磷酸氢二钾2-5g/L、硫酸锰0.2-0.5g/L；
所述无机硒水溶液为***钠水溶液，浓度为300-600g/L，所述糖蜜水溶液浓度为500-700g/L；
步骤(7)的具体操作步骤为：将得到的酵母泥加淀粉调浆，浓度控制在20％-30％，喷雾干燥进口温度控制在150℃-200℃，出口温度控制在50℃-65℃，制得淡黄色粉末，水分含量≤8％。
9.根据权利要求1所述的改善猪肉品质的饲料添加剂，其特征在于，所述包被半胱胺中包被半胱胺的含量≥50％，所述胍基乙酸中胍基乙酸的含量≥98％；所述富硒酵母的有机硒含量为1500-1800mg/kg，含水量≤8％。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的改善猪肉品质的饲料添加剂的制备方法，按照先后顺序包括以下生产步骤：
步骤(1)：按照预定比例称取各组分：发酵饲料组合物、富硒酵母、包被半胱胺、胍基乙酸；
步骤(2)：现将发酵饲料组合物投入混合机中，开起搅拌；
步骤(3)：依次从大料口投入包被半胱胺和胍基乙酸，混合；
步骤(4)：最后从小料口加入富硒酵母，混合后即制得成品。
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