CN109160930A - 一种一水曲克芦丁化合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种一水曲克芦丁化合物及其制法，每摩尔曲克芦丁含1摩尔水。本发明以芦丁和环氧乙烷为原料，使用碱催化剂，同时在反应体系中加入金属离子络合剂和抗氧剂，合成一水曲克芦丁化合物。本发明的一水曲克芦丁化合物引湿性低，杂质含量低，热力学稳定性好，具有更广泛地应用前景。

Description

一种一水曲克芦丁化合物

技术领域

本发明属于化学工程医药结晶技术领域，涉及一种一水曲克芦丁化合物及其制法。

背景技术

曲克芦丁(troxerutin)，是一类抗凝血药及溶栓药，化学名为3′,4′,7-三-[O-(2-羟乙基)]卢丁，别名托克芦丁、维脑路通、维生素P4、羟乙基卢丁。

曲克芦丁是芦丁经羟乙基化制成的半合成黄酮化合物，具有活血化瘀作用，能抑制血小板的凝集，有防止血栓形成，同时能对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低毛细血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水肿；对急性缺血性脑损伤有显著的保护作用；曲克芦丁还可以用来治疗静脉曲张，脑梗塞及中风后遗症等多种病症；有抗放射性损伤、抗炎症、抗过敏、抗溃疡等作用。具有临床疗效确切，安全性好，价格低等特点，目前广泛使用。

曲克芦丁的制备方法通常有以下几种：以芦丁和氯乙基氯甲酸酯为原料；1966年专利GB833174报道水介质中氯乙醇法：以芦丁和氯乙醇为原料，氢氧化钠为催化剂；1997年American Chemical Society报道的有机介质中环氧乙烷法：用芦丁、环氧乙烷为原料，甲醇为溶剂、吡啶为催化剂，在高压釜中70℃保压反应2h；2008年《应用化工》报道的水介质中环氧乙烷法：在NaOH的水溶液中，80℃左右环氧乙烷与芦丁反应。氯乙基氯甲酸酯法需要两步反应；氯乙醇法反应收率低，且有大量NaCl不易除去；环氧乙烷法反应简便，收率高，故应用最为广泛。上述报道的曲克芦丁，存在易引湿性低，杂质含量高，热力学稳定性差等问题。

目前，在国内外文献中，对曲克芦丁水合物的研究几乎没有报道。因此，有必要发明一种稳定性好、不易吸湿、热分解温度高的曲克芦丁化合物。

发明内容

本发明公开了曲克芦丁的一种新的溶剂化物，更具体的为一水曲克芦丁化合物，即每摩尔曲克芦丁化合物含1摩尔水，分子式为C₃₃H₄₂O₁₉·H₂O，分子量为760.69，结构式如下：

本发明所述的一水曲克芦丁化合物，制备包括以下步骤：

(1)将碳酸钠、乙二胺四乙酸二钠和亚硫酸钠加入水中使其溶解，搅拌下加入一半量的芦丁，升温，缓慢通入环氧乙烷，待溶液由粘稠变稀，再加入剩余的芦丁，保温反应，观察溶液的颜色变化，并测溶液pH值，加入磷酸二氢钾调节溶液pH值；

(2)用HPLC监测，直至合适的二羟乙基芦丁、三羟乙基芦丁和四羟乙基芦丁的相对比例(面积归一法)，停止通环氧乙烷，使反应结束；

(3)稀盐酸调pH值，减压浓缩，干燥，加入甲醇水溶液，升温搅拌溶解，降温结晶，干燥，得一水曲克芦丁化合物。

优选地，上述制备方法中，步骤(1)中所述碳酸钠的用量为卢丁的2％～4％，所述的乙二胺四乙酸二钠的用量为卢丁的1％～2％，所述的亚硫酸钠的用量为卢丁的2％～4％。

优选地，上述制备方法中，步骤(1)中所述的升高温度至70℃～80℃。

优选地，上述制备方法中，步骤(1)中所述的反应溶液的颜色应由浅绿变成深黄，最后成棕色。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(1)中控制pH值不超过9。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(2)中二羟乙基芦丁的相对比例<2.5％、三羟乙基芦丁的相对比例>80％和四羟乙基芦丁的相对比例<5％。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(3)中稀盐酸调节pH值至4.7～5.3。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(3)中甲醇水中甲醇的浓度为85％～90％。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(3)中升温至60℃～65℃。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(3)中降温至-10℃～0℃。

优选地，上述制备方法中，所述步骤(3)中干燥条件为30～40℃减压干燥40～60分钟。

卡尔费休法是各种测定物质中含有水分方法中最为专一、准确的方法之一，已被列为许多物质中水分测定的基本方法，尤其是对有机化合物，结果准确可靠。本发明公开的曲克芦丁化合物用卡尔费休法测定水分含量在2.28％～2.43％之间，理论水分含量为2.37％，可确定本发明曲克芦丁化合物含有1个水。

本发明所述的一水曲克芦丁化合物，其TG分析结果显示，曲克芦丁化合物的失重百分率计算结果可知，失重约2.35％，1水曲克芦丁化合物分子中水的理论百分含量是2.37％，参照费休氏法测得曲克芦丁水分含量为2.28％～2.43％，而实验测得TG失重为2.35％，与理论水含量基本相符。因此可推断曲克芦丁TG失重是脱除水所致，且每摩尔曲克芦丁化合物含1摩尔水。如附图1所示。数据由热分析-质谱联用仪(NETZSCH STA 449C)分析得到。分析条件为：样品2～10mg，氧化铝坩埚，高纯氮气做反应气和保护气，流量分别为40ml/min和30ml/min，升温速率10K/min，温度测试范围为25～400℃。样品分解温度约为266.6℃。

本发明所述的一水曲克芦丁化合物，其红外光谱在波数为3402.1±2cm^-1，2922.7±2cm^-1，1654.9±2cm^-1，1598.5±2cm^-1，1496.5±2cm^-1，1433.5±2cm^-1，1322.8±2cm^-1，1274.6±2cm^-1，1172.9±2cm^-1，1063.7±2cm^-1，902.4±2cm^-1，805.8±2cm^-1处有特征吸收峰，如附图2所示。红外光谱测试条件为：安捷伦Cary 630，溴化钾压片。

本发明所述的一水曲克芦丁化合物，其粉末X射线衍射图谱在衍射角2θ为8.06±0.2°，9.36±0.2°，13.43±0.2°，16.19±0.2°，17.34±0.2°，19.48±0.2°，24.03±0.2°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，11.19，8.65，15.24，9.82，9.53，9.51。如附图3所示。X射线粉末衍射测试条件：荷兰Panalytical公司的EMPYREAN(锐影)X射线衍射仪，CuKα辐射，光管电压40kV，灯丝电流300mA，连续扫描，步长0.02°，扫描速度8°/min，扫描范围为2～50°。

本发明所述的一水曲克芦丁化合物，其DSC分析结果显示，在约181.1℃有吸热峰，在约259.0℃有放热峰。如附图4所示。DSC数据由热分析-质谱联用仪(NETZSCH STA449C)分析得到，分析条件为：样品2～10mg，氧化铝坩埚，高纯氮气做反应气和保护气，流量分别为40ml/min和30ml/min。升温速率10℃/min，温度范围25～400℃。

本发明的另一目的，提供了一种含一水曲克芦丁化合物的药物组合物。优选地，所述药物组合物包含一水曲克芦丁化合物和药学上接受的赋形剂。更优选地，药物组合物选自药学上可接受的剂型。

附图说明

图1一水曲克芦丁化合物的TG分析图；

图2一水曲克芦丁化合物的傅里叶红外光谱图；

图3一水曲克芦丁化合物的粉末X射线衍射图谱；

图4一水曲克芦丁化合物的DSC分析图。

具体实施方式

下面将通过具体实施方式对本发明做进一步说明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围中，本领域的技术人员应理解，对本发明内容所做的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。

实施例1一水曲克芦丁化合物的制备

(1)将16g碳酸钠、8g乙二胺四乙酸二钠和16g亚硫酸钠加入1.5L水中使其溶解，搅拌下加入400g的芦丁，升温至70℃，缓慢通入环氧乙烷，待溶液由粘稠变稀，再加入400g芦丁，保温反应，溶液的颜色应由浅绿变成深黄，最后成棕色，测定溶液pH值，加入磷酸二氢钾调节溶液pH值，使溶液pH值不超过9；

(2)用HPLC监测，至二羟乙基芦丁的相对比例为2.1％、三羟乙基芦丁的相对比例为83.3％和四羟乙基芦丁的相对比例为3.1％(面积归一法)，停止通环氧乙烷，使反应结束；

(3)稀盐酸调pH值至4.7，减压浓缩，40℃减压干燥40min，加入1L 85％的甲醇水溶液，升温至60℃搅拌溶解，降温至0℃结晶，40℃减压干燥50min，得一水曲克芦丁783g。

X射线粉末衍射图谱在衍射角2θ为8.06°，9.36°，13.43°，16.19°，17.34°，19.48°，24.03°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，11.19，8.65，15.24，9.82，9.53，9.51。

傅里叶红外光谱在波数为3402.1cm^-1，2922.7cm^-1，1654.9cm^-1，1598.5cm^-1，1496.5cm^-1，1433.5cm^-1，1322.8cm^-1，1274.6cm^-1，1172.9cm^-1，1063.7cm^-1，902.4cm^-1，805.8cm^-1处有特征峰，各个波数对应的特征峰基本一致，都在范围之内。

HPLC法检测纯度为98.56％；卡尔费休法测定水分为2.39％，热重分析失重为2.35％，这样与含有的1个水的结果(理论值2.37％)基本一致；元素分析理论值为：C：52.10％，H：5.83％，O：42.07％；实测值为：C：52.22％，H：5.74％，O：42.02％。

实施例2一水曲克芦丁化合物的制备

(1)将24g碳酸钠、12g乙二胺四乙酸二钠和24g亚硫酸钠加入1.2L水中使其溶解，搅拌下加入300g的芦丁，升温至80℃，缓慢通入环氧乙烷，待溶液由粘稠变稀，再加入300g芦丁，保温反应，溶液的颜色应由浅绿变成深黄，最后成棕色，测定溶液pH值，加入磷酸二氢钾调节溶液pH值，使溶液pH值不超过9；

(2)用HPLC监测，至二羟乙基芦丁的相对比例为1.8％、三羟乙基芦丁的相对比例为83.6％和四羟乙基芦丁的相对比例为3.2％(面积归一法)，停止通环氧乙烷，使反应结束；

(3)稀盐酸调pH值至5.3，减压浓缩，40℃减压干燥60min，加入900ml 85％的甲醇水溶液，升温至65℃搅拌溶解，降温至-10℃结晶，30℃减压干燥40min，得一水曲克芦丁579g。

X射线粉末衍射图谱在衍射角2θ为8.05°，9.38°，13.40°，16.17°，17.33°，19.45°，24.06°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，12.36，8.07，14.18，9.27，10.14，9.66。

傅里叶红外光谱在波数为3402.5cm^-1，2922.2cm^-1，1654.6cm^-1，1598.4cm^-1，1496.7cm^-1，1433.2cm^-1，1322.5cm^-1，1274.4cm^-1，1172.6cm^-1，1063.3cm^-1，902.1cm^-1，805.9cm^-1处有特征峰，各个波数对应的特征峰基本一致，都在范围之内。

HPLC法检测纯度为98.43％；卡尔费休法测定水分为2.43％，热重分析失重为2.40％，这样与含有的1个水的结果(理论值2.37％)基本一致；元素分析理论值为：C：52.10％，H：5.83％，O：42.07％；实测值为：C：52.31％，H：5.79％，O：41.84％。

实施例3一水曲克芦丁化合物的制备

(1)将30g碳酸钠、15g乙二胺四乙酸二钠和30g亚硫酸钠加入2L水中使其溶解，搅拌下加入500g的芦丁，升温至75℃，缓慢通入环氧乙烷，待溶液由粘稠变稀，再加入500g芦丁，保温反应，溶液的颜色应由浅绿变成深黄，最后成棕色，测定溶液pH值，加入磷酸二氢钾调节溶液pH值，使溶液pH值不超过9；

(2)用HPLC监测，至二羟乙基芦丁的相对比例为2.0％、三羟乙基芦丁的相对比例为84.7％和四羟乙基芦丁的相对比例为4.1％(面积归一法)，停止通环氧乙烷，使反应结束；

(3)稀盐酸调pH值至5.0，减压浓缩，40℃减压干燥40min，加入1.5L 90％的甲醇水溶液，升温至63℃搅拌溶解，降温至-5℃结晶，35℃减压干燥60min，得一水曲克芦丁972g。

X射线粉末衍射图谱在衍射角2θ为8.05°，9.38°，13.40°，16.17°，17.33°，19.45°，24.06°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，12.36，8.07，14.18，9.27，10.14，9.66。

傅里叶红外光谱在波数为3402.5cm^-1，2922.2cm^-1，1654.6cm^-1，1598.4cm^-1，1496.7cm^-1，1433.2cm^-1，1322.5cm^-1，1274.4cm^-1，1172.6cm^-1，1063.3cm^-1，902.1cm^-1，805.9cm^-1处有特征峰，各个波数对应的特征峰基本一致，都在范围之内。

HPLC法检测纯度为98.64％；卡尔费休法测定水分为2.28％，热重分析失重为2.33％，这样与含有的1个水的结果(理论值2.37％)基本一致；元素分析理论值为：C：52.10％，H：5.83％，O：42.07％；实测值为：C：51.92％，H：5.91％，O：42.07％。

对比例1曲克芦丁化合物的制备

根据专利GB 833174报道的方法合成曲克芦丁化合物

将610g芦丁悬浮于水中，在氮气流下，加2mol/L的氢氧化钠溶液500ml，然后缓缓加入300g氯乙醇，于75℃保温反应约3h，直至pH值不再下降，冷却，用盐酸酸化至pH值为5.1，过滤，滤液减压除水，然后残余物用乙醇重结晶，35℃减压干燥70min，得曲克芦丁化合物481g。

制备的曲克芦丁化合物通过TG线分析结果，失重百分率约1.63％，卡尔费休法检测水分含量为1.71％。HPLC法检测纯度为92.24％；元素分析理论值为：C：53.37％，H：5.70％，O：40.93％；实测值为：C：53.49％，H：5.62％，O：40.78％。

对比例2制备曲克芦丁0.5水合物

制备过程：

将400g卢丁加入1.5L 90％的甲醇水混合溶液中，加入6g三乙胺作为催化剂，搅拌升温至回流，缓慢通入环氧乙烷，升温至85℃反应8h；加入8g活性炭，脱色回流30min；热过滤，滤液用盐酸溶液调节pH值至4，滤液降温降温至-5℃结晶，抽滤，35℃减压干燥50min，得曲克芦丁化合物374g。

制备的曲克芦丁化合物通过TG线分析结果，失重百分率约1.19％，卡尔费休法检测水分含量为1.16％，这样与含有的0.5个水的结果(理论值1.20％)基本一致。HPLC法检测纯度为93.96％；元素分析理论值为：C：52.73％，H：5.77％，O：41.51％；实测值为：C：52.86％，H：5.87％，O：41.27％。

试验例1溶解性考察

将实施例1～3和对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物分别溶于水溶液中，震摇30min，通过检测含量计算实施例1～3、对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物在水中的溶解度，试验结果如下：

实施例	溶解度
		实施例1	420mg/ml
实施例2	470mg/ml
		实施例3	410mg/ml
对比例1	245mg/ml
		对比例2	298mg/ml

结论：本发明实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物的溶解性明显好于对比例1～2的曲克芦丁化合物。

试验例2冷冻干燥考察

将实施例1～3和对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物置于冷冻干燥机中-30℃冷冻干燥18小时，通过卡尔费休法测定水分含量，考察冷冻干燥前后水分变化，结果如下：

结论：实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物和对比例2制备的曲克芦丁0.5水合物冻干前后水分基本没有明显变化，对比例1制备的曲克芦丁化合物水分下降明显；推断本发明实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物和对比例2制备的曲克芦丁0.5水合物所含水为结晶水，对比例1制备的曲克芦丁化合物所含水为吸附水。

试验例3热稳定性考察

将实施例1～3和对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物置于60℃烘箱中10天，通过卡尔费休法测定水分含量，考察放置前后水分变化，结果如下：

结论：高温60℃放置10天，实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物和对比例2制备的曲克芦丁0.5水合物水分基本没有明显变化，对比例1制备的曲克芦丁化合物水分下降明显；推断本发明实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物和对比例2制备的曲克芦丁0.5水合物所含水为结晶水，对比例1制备的曲克芦丁化合物所含水为吸附水。

试验例4流动性考察

本发明人对本发明实施例1～3和对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物的流动性进行了研究。休止角检测方法为将颗粒置于固定的漏斗中，使其自由落至水平面上，形成一底部半径为r的圆盘形堆积体，测定堆积体的高度为H，根据公式tanθ＝H/r计算。

检测结果见下表：

结果：本发明实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物的流动性明显好于现有技术对比例1～2制备的的曲克芦丁化合物，在制剂的制备过程中，可以满足多种制备方式的需要。

试验例5引湿性考察

本发明人对本发明实施例1～3和对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物引湿性进行了研究。考察条件为相对湿度75％(RH)与相对湿度92.5％(RH)，温度为40℃，考察指标为曲克芦丁中的含水量。

检测结果见下表：

结果：本发明实施例1～3制备的一水曲克芦丁化合物引湿性明显低于现有技术对比例1～2制备的曲克芦丁化合物。说明本发明所述的一水曲克芦丁化合物稳定性良好，适合药物制剂的制造及长期储存。

试验例6稳定性考察

本发明人对本发明实施例1～3和对比例1～2所制备的曲克芦丁化合物进行了稳定性考察。考察条件为温度40℃±2℃，放置6个月，分别于0、1、2、3、6月末取样。考察指标为性状、溶液的澄清度、水分、酸度、含量及有关物质。

试验考察结果见下表：

结论：由上述结果可知，通过6个月加速试验，本发明实施例1～3制备的样品各项检测指标明显优于对比例1～2制备的产品，充分说明了本发明制备的一水曲克芦丁化合物稳定性更好，质量优于同类产品。同时，实施例1～3和对比例2的样品水分基本没有明显变化，推断其含有的水为结晶水，而对比例1的样品水分明显降低，推断其含有的水为吸附水。

Claims (4)

1.一种一水曲克芦丁化合物，其特征在于，每摩尔曲克芦丁含1摩尔水，分子式为C₃₃H₄₂O₁₉·H₂O，分子量为760.69，结构式如下：

2.一种药物组合物，其特征在于包含权利要求1所述的一水曲克芦丁化合物。

3.一种药物组合物，其特征在于包含权利要求1所述的一水曲克芦丁化合物和药学上接受的赋形剂。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物选自药学上可接受的剂型。