CN109006163A - 一种松杉灵芝栽培种培养方法、培养基及培养基制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于灵芝人工栽培技术领域，具体涉及一种松杉灵芝栽培种培养方法、培养基及培养基制备方法，按质量百分比，培养基包括木屑25‑30％、棉籽皮35‑40％、麸皮15‑20％、玉米芯8‑12％、玉米面2‑5％、石膏1‑3％、过磷酸钙0.5‑1.5％、石灰0.5‑1.5％、上述各个成分总含水量60‑70％，且每千克培养基里加0.5‑0.7g***钠。本发明能够使松杉灵芝子实体质地紧密，质量好，出芝整齐，使松杉灵芝增产丰收。

Description

一种松杉灵芝栽培种培养方法、培养基及培养基制备方法

技术领域

本发明属于灵芝人工栽培技术领域，具体涉及一种松杉灵芝栽培种培养方法、培养基及培养基制备方法。

背景技术

松杉灵芝又名松杉树芝、铁杉树芝、木灵芝，属灵芝科灵芝属，是我国东北林区特有的灵芝品种，主要生长于海拔700～1400m红松阔叶混交林、针叶混交林内的冷杉、落叶松、红松、云杉的伐根、腐木上，是一种极为稀少的珍贵草药，主要分布在我国寒温带(产于长白山地区)地区。子实体一年生，木栓质至木质，有柄。菌盖肾形、半圆形或近扇形，盖面红褐色至***，有油漆状光泽，盖缘薄或钝，有时内卷。菌肉淡白色、白色至灰白色，菌丝无色至淡褐色。菌肉新鲜时多汁，干后质轻。菌柄粗而短，表面紫黑色，具有油漆状光泽。菌柄与菌盖的界线不清，常呈水平状钝角。孢子卵形，顶端常平截。目前野生松杉灵芝资源数量有限，而且越来越少。研究表明，松杉灵芝营养成分丰富，含有人体必需的氨基酸、核苷、微量元素、维生素及生物活性多糖、三萜类化合物、生物碱等，同时还是维护人体健康所必须的膳食纤维的良好来源。医学研究证明松杉灵芝除对肝炎、关节炎、糖尿病、高血压、高血脂、神经衰弱等疾病有效外，还对人类三大致死性疾病冠心病、癌症、脑溢血有显著疗效；具有抗肿瘤、提高机体免疫力、抗病毒、清除自由基、抗衰老、抗血栓、抗凝血等作用；松杉灵芝中的生物碱具有改善冠状动脉血流量，降低心肌耗氧量，增强心肌及机体的抗缺氧能力和降低胆固醇的作用，对冠心病、高血压、高血脂症、肝炎、肌无力等疾病有显著疗效；松杉灵芝中的核苷类成分腺苷、尿苷、腺嘌呤、尿嘧啶等活性成分，是松杉灵芝具有抗突变功能的物质基础；松杉灵芝子实体中含有18种氨基酸，其中人体必需氨基酸含量较其他食用菌高40％，尤其是食用菌中含量较低的蛋氨酸，松杉灵芝的平均含量远高于其他食用菌。研究表明松杉灵芝子实体含有Mn、Cr、Cu、Fe、Ca、Mg、Zn、Se、Ge等多种微量元素，松杉灵芝还含有大量的维生素，其中VitC、VitE和胡萝卜素的含量较高，具有显著的抗氧化、抗衰老活性。

目前，我国灵芝产业主要以种植业为主，是世界上主要的灵芝生产和出口国。但是农户栽培为主体，规模化、标准化的种植较少，新种植、栽培技术研发力量不强，多采用以原木为原料的种植方式，损耗较多森林资源。同时，以农户为主体的种植方式，其灵芝质量难以控制，致使部分灵芝质量较差，农残及重金属超标，高品质的灵芝货源不足，难以为加工产品提供优质原料。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种松杉灵芝栽培种培养方法、培养基及培养基制备方法，为规范化人工栽培种植松杉灵芝提供指导。

本发明是这样实现的，一方面提供一种松杉灵芝栽培种培养基，按质量百分比，包括木屑25-30％、棉籽皮35-40％、麸皮15-20％、玉米芯8-12％、玉米面2-5％、石膏1-3％、过磷酸钙0.5-1.5％、石灰0.5-1.5％，上述各个成分总含水量60-70％，且每千克培养基里加0.5-0.7g***钠。

进一步地，按质量比，包括木屑28％、棉籽皮37％、麸皮18％、玉米芯10％、玉米面3％、石膏2％、过磷酸钙1％、石灰1％，上述各个成分总含水量65％，且每千克培养基里加0.6g***钠。

本发明还提供一种松杉灵芝栽培种培养基的制备方法，包括如下步骤：

1)采用沙松、黑松、落叶松中一种或多种松树的原木或锯末，粉碎后加温至95-105℃蒸煮8-10小时，晾晒让松木颗粒充分发挥油脂和抑菌物质，完全晒干后攒成大堆基料备用；

2)按照如上述任一所述的配方称取培养基的各个成分，混匀；

3)将步骤2)中的培养基在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力为0.15MPa，时间1.5-2h，降至30℃以下；

4)将步骤1)中制备的5kg大堆基料和步骤3)中灭菌的1.2kg的培养基装入塑料袋中，混合均匀，获得松杉灵芝栽培种培养基。

本发明还提供一种松杉灵芝栽培种的培养方法，包括如下步骤：

a)按照上述的方法制备松杉灵芝栽培种培养基；

b)在无菌箱内，往培养基上接种灵芝母种，将接种好的塑料袋放在经过灭菌、通风干燥的培养室内，温度23-27℃、培养40-50天，至菌丝长满塑料袋；

c)将接种段木用气雾消毒盒熏蒸消毒25-35min后，扎成捆，打开步骤b) 中的塑料袋，在酒精火焰附近将塑料袋中长满菌丝的培养基撒入段木捆的表层及缝隙后，将段木捆放入塑料袋中立即扎口；

d)将装有接好种的段木捆的塑料袋置于培养室，温度为26-30℃，湿度为 40-65％，每天通风6-8小时，培养15-20天后放松扎口绳索继续培养至45-55天，菌丝满袋，再继续培养15-20天，至菌丝生理成熟，形成菌包，即可下地。

进一步地，将步骤d)中培养好的菌包进行林下仿野生配套栽培：5月下旬将菌丝生理成熟的菌包放置在林分内，顺坡行间摆放为宽80-100cm，长30-50m 的双层菌包，菌包间距为5-10cm，上覆土和生物质的混合物1cm，保持畦面湿润，畦上设塑料薄膜棚；培养至幼芝破土露面后，水分管理遵循干湿交替，即夜间关闭塑料薄膜棚的两端保湿，白天打开；塑料薄膜棚里安置微喷，早中晚各喷10-20min，灵芝子实体的菌盖边缘变为红褐色时，减少喷水；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。

进一步地，将步骤d)中培养好的菌包进行林下树墩仿野生栽培：5月下旬将直径20-30cm的松木截成50cm长的木段，用直径110cm的电钻在木段上钻一个长度300mm的孔备用，将菌包和松木段运至栽培林内，地上挖直径130cm，深40cm的坑穴，每坑装200左右菌包且将菌包外皮剥离，然后将松木段立于菌包坑内，木段的孔内也放入菌包，然后覆土20cm，松木段露出土面30cm，菌包全部埋严，每一穴灵芝的间距≥1m，后期生长温度控制在26-28℃，保持空气相对湿度在80-90％左右，每天通风8-10小时；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

提供了一种培养松杉林芝栽培种的培养基和培养方法，使松杉灵芝子实体质地紧密，质量好，出芝整齐，使松杉灵芝增产丰收。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。

设计为4种培养基配料方式，研究对比筛选出适宜于松杉灵芝最佳的栽培种培养基的配料方式。A：棉籽皮88％，麸皮10％，糖1％，石膏1％，含水量 65％；B：木屑77％，麸皮18％，玉米面3％，糖1％，石膏1％，含水量65％； C：玉米芯40％，木屑45％，麸皮10％，玉米面4％，石膏1％，含水量65％；D：木屑28％，棉籽皮37％，麸皮18％，玉米芯10％，玉米面3％，石膏2％，过磷酸钙1％，石灰1％，含水量65％。

4种不同栽培种培养基对松杉灵芝子实体的影响如表1所示，从表1可以看出，参试的4种栽培种培养基中，松杉灵芝菌株在A配比栽培种培养基上产量最高，总产量达到5050g，但子实体质地疏松；在D配比培养基上松杉灵芝菌株的产量列第二位，总产量达到4400g，但子实体质地紧密，质量好。因而，松杉灵芝菌株在D配比栽培种培养基上的综合评价最高，生物学效率列第二位，达10.5％，但子实体质地紧密，质量好，这说明棉子皮能提高松杉灵芝子实体的产量，在配料中加一定量的木屑有助于提高子实体的质量。

表1

实施例1、

松杉灵芝栽培种的培养方法，包括如下步骤：

1)采用沙松、黑松、落叶松中一种或多种松树的原木或锯末，粉碎后加温至100℃蒸煮9小时，晾晒让松木颗粒充分发挥油脂和抑菌物质，完全晒干后攒成大堆基料备用；

2)按照下述的配方称取培养基的各个成分，混匀：按质量百分比，包括木屑28％、棉籽皮37％、麸皮18％、玉米芯10％、玉米面3％、石膏2％、过磷酸钙1％、石灰1％，上述各个成分总含水量65％，且每千克培养基里加0.6g***钠。

3)将步骤2)中的培养基在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力为0.15MPa，时间1.7h，降至30℃以下；

4)将步骤1)中制备的5kg大堆基料和步骤3)中灭菌的1.2kg的培养基装入塑料袋中，混合均匀，获得松杉灵芝栽培种培养基。

5)在无菌箱内，往培养基上接种灵芝母种，将接种好的塑料袋放在经过灭菌、通风干燥的培养室内，温度25℃、培养45天，至菌丝长满塑料袋；

6)将接种段木用气雾消毒盒熏蒸消毒30min后，扎成捆，打开步骤5)中的塑料袋，在酒精火焰附近将塑料袋中长满菌丝的培养基撒入段木捆的表层及缝隙后，将段木捆放入塑料袋中立即扎口；

7)将装有接好种的段木捆的塑料袋置于培养室，温度为28℃，湿度为42％，每天通风7h，培养17天后放松扎口绳索继续培养至50天，菌丝满袋，再继续培养17天，至菌丝生理成熟，形成菌包，即可下地。

将步骤7)中培养好的菌包进行林下仿野生配套栽培：5月下旬将菌丝生理成熟的菌包放置在林分内，顺坡行间摆放为宽90cm，长40m的双层菌包，菌包间距为7cm，上覆土和生物质的混合物1cm，保持畦面湿润，畦上设塑料薄膜棚；培养至幼芝破土露面后，水分管理遵循干湿交替，即夜间关闭塑料薄膜棚的两端保湿，白天打开；塑料薄膜棚里安置微喷，早中晚各喷15min，灵芝子实体的菌盖边缘变为红褐色时，减少喷水；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。

实施例2、

松杉灵芝栽培种的培养方法，包括如下步骤：

1)采用沙松、黑松、落叶松中一种或多种松树的原木或锯末，粉碎后加温至95℃蒸煮8小时，晾晒让松木颗粒充分发挥油脂和抑菌物质，完全晒干后攒成大堆基料备用；

2)按照下述的配方称取培养基的各个成分，混匀：按质量百分比，包括木屑25％、棉籽皮35％、麸皮15％、玉米芯8％、玉米面2％、石膏1％、过磷酸钙0.5％、石灰0.5％，上述各个成分总含水量60％，且每千克培养基里加0.5g ***钠。

3)将步骤2)中的培养基在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力为0.15MPa，时间1.5h，降至30℃以下；

4)将步骤1)中制备的5kg大堆基料和步骤3)中灭菌的1.2kg的培养基装入塑料袋中，混合均匀，获得松杉灵芝栽培种培养基。

5)在无菌箱内，往培养基上接种灵芝母种，将接种好的塑料袋放在经过灭菌、通风干燥的培养室内，温度23℃、培养40天，至菌丝长满塑料袋；

6)将接种段木用气雾消毒盒熏蒸消毒25min后，扎成捆，打开步骤5)中的塑料袋，在酒精火焰附近将塑料袋中长满菌丝的培养基撒入段木捆的表层及缝隙后，将段木捆放入塑料袋中立即扎口；

7)将装有接好种的段木捆的塑料袋置于培养室，温度为26℃，湿度为40％，每天通风6h，培养15天后放松扎口绳索继续培养至45天，菌丝满袋，再继续培养15天，至菌丝生理成熟，形成菌包，即可下地。

将步骤7)中培养好的菌包进行林下树墩仿野生栽培：5月下旬将直径20cm 的松木截成50cm长的木段，用直径110cm的电钻在木段上钻一个长度300mm 的孔备用，将菌包和松木段运至栽培林内，地上挖直径130cm，深40cm的坑穴，每坑装200左右菌包且将菌包外皮剥离，然后将松木段立于菌包坑内，木段的孔内再放入菌包，然后覆土20cm，松木段露出土面30cm，菌包全部埋严，每一穴灵芝的间距≥1m，后期生长温度控制在26℃，保持空气相对湿度在80％左右，每天通风8小时；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。

实施例3、

松杉灵芝栽培种的培养方法，包括如下步骤：

1)采用沙松、黑松、落叶松中一种或多种松树的原木或锯末，粉碎后加温至105℃蒸煮10小时，晾晒让松木颗粒充分发挥油脂和抑菌物质，完全晒干后攒成大堆基料备用；

2)按照下述的配方称取培养基的各个成分，混匀：按质量百分比，包括木屑30％、棉籽皮40％、麸皮20％、玉米芯12％、玉米面5％、石膏3％、过磷酸钙1.5％、石灰1.5％，上述各个成分总含水量70％，且每千克培养基里加0.7g ***钠。

3)将步骤2)中的培养基在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力为0.15MPa，时间2h，降至30℃以下；

4)将步骤1)中制备的5kg大堆基料和步骤3)中灭菌的1.2kg的培养基装入塑料袋中，混合均匀，获得松杉灵芝栽培种培养基。

5)在无菌箱内，往培养基上接种灵芝母种，将接种好的塑料袋放在经过灭菌、通风干燥的培养室内，温度27℃、培养50天，至菌丝长满塑料袋；

6)将接种段木用气雾消毒盒熏蒸消毒35min后，扎成捆，打开步骤5)中的塑料袋，在酒精火焰附近将塑料袋中长满菌丝的培养基撒入段木捆的表层及缝隙后，将段木捆放入塑料袋中立即扎口；

7)将装有接好种的段木捆的塑料袋置于培养室，温度为30℃，湿度为65％，每天通风8h，培养20天后放松扎口绳索继续培养至55天，菌丝满袋，再继续培养20天，至菌丝生理成熟，形成菌包，即可下地。

将步骤7)中培养好的菌包进行林下仿野生配套栽培：5月下旬将菌丝生理成熟的菌包放置在林分内，顺坡行间摆放为宽100cm，长50m的双层菌包，菌包间距为10cm，上覆土和生物质的混合物1cm，保持畦面湿润，畦上设塑料薄膜棚；培养至幼芝破土露面后，水分管理遵循干湿交替，即夜间关闭塑料薄膜棚的两端保湿，白天打开；塑料薄膜棚里安置微喷，早中晚各喷20min，灵芝子实体的菌盖边缘变为红褐色时，减少喷水；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。

对实施例1、2、3中得到的灵芝进行检测，可以发现，***钠能够提高灵芝子实体产量、增加灵芝体内硒含量、且出菇整齐、提高灵芝体内蛋白质、多糖、氨基酸含量。

Claims (6)

1.一种松杉灵芝栽培种培养基，其特征在于，按质量百分比，包括木屑25-30％、棉籽皮35-40％、麸皮15-20％、玉米芯8-12％、玉米面2-5％、石膏1-3％、过磷酸钙0.5-1.5％、石灰0.5-1.5％，上述各个成分总含水量60-70％，且每千克培养基里加0.5-0.7g***钠。

2.如权利要求1所述的松杉灵芝栽培种培养基，其特征在于，按质量比，包括木屑28％、棉籽皮37％、麸皮18％、玉米芯10％、玉米面3％、石膏2％、过磷酸钙1％、石灰1％，上述各个成分总含水量65％，且每千克培养基里加0.6g***钠。

3.一种松杉灵芝栽培种培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)采用沙松、黑松、落叶松中一种或多种松树的原木或锯末，粉碎后加温至95-105℃蒸煮8-10小时，晾晒让松木颗粒充分发挥油脂和抑菌物质，完全晒干后攒成大堆基料备用；

2)按照如权利要求1或2任一所述的配方称取培养基的各个成分，混匀；

3)将步骤2)中的培养基在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力为0.15MPa，时间1.5-2h，降至30℃以下；

4)将步骤1)中制备的5kg大堆基料和步骤3)中灭菌的1.2kg的培养基装入塑料袋中，混合均匀，获得松杉灵芝栽培种培养基。

4.一种松杉灵芝栽培种的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)按照权利要求3所述的方法制备松杉灵芝栽培种培养基；

b)在无菌箱内，往培养基上接种灵芝母种，将接种好的塑料袋放在经过灭菌、通风干燥的培养室内，温度23-27℃、培养40-50天，至菌丝长满塑料袋；

c)将接种段木用气雾消毒盒熏蒸消毒25-35min后，扎成捆，打开步骤b)中的塑料袋，在酒精火焰附近将塑料袋中长满菌丝的培养基撒入段木捆的表层及缝隙后，将段木捆放入塑料袋中立即扎口；

d)将装有接好种的段木捆的塑料袋置于培养室，温度为26-30℃，湿度为40-65％，每天通风6-8小时，培养15-20天后放松扎口绳索继续培养至45-55天，菌丝满袋，再继续培养15-20天，至菌丝生理成熟，形成菌包，即可下地。

5.如权利要求4所述的松杉灵芝栽培种的培养方法，其特征在于，将步骤d)中培养好的菌包进行林下仿野生配套栽培：5月下旬将菌丝生理成熟的菌包放置在林分内，顺坡行间摆放为宽80-100cm，长30-50m的双层菌包，菌包间距为5-10cm，上覆土和生物质的混合物1cm，保持畦面湿润，畦上设塑料薄膜棚；培养至幼芝破土露面后，水分管理遵循干湿交替，即夜间关闭塑料薄膜棚的两端保湿，白天打开；塑料薄膜棚里安置微喷，早中晚各喷10-20min，灵芝子实体的菌盖边缘变为红褐色时，减少喷水；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。

6.如权利要求4所述的松杉灵芝栽培种的培养方法，其特征在于，将步骤d)中培养好的菌包进行林下树墩仿野生栽培：5月下旬将直径20-30cm的松木截成50cm长的木段，用直径110cm的电钻在木段上钻一个长度300mm的孔备用，将菌包和松木段运至栽培林内，地上挖直径130cm，深40cm的坑穴，每坑装200左右菌包且将菌包外皮剥离，然后将松木段立于菌包坑内，木段的孔内也放入菌包，然后覆土20cm，松木段露出土面30cm，菌包全部埋严，每一穴灵芝的间距≥1m，后期生长温度控制在26-28℃，保持空气相对湿度在80-90％左右，每天通风8-10小时；

当菌盖边缘白色生长圈开始消失，颜色也开始由浅变深，菌盖不再增大，孢子不断散发时，采收灵芝子实体。