CN108713585A - 一种淡水鱼复合保鲜剂及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及了一种淡水鱼复合保鲜剂及保鲜方法。所述复合保鲜剂包括细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物、百里酚和水。本发明针对淡水鱼中的主要腐败菌群而研制的绿色复合保鲜剂,具有无毒、抗菌谱广和抗菌性强等特点,适用于淡水鱼防腐保鲜,使用方法简单,生产成本低,可有效延长淡水鱼货架期达9 d,提高了冷藏保鲜鱼品质和贮藏稳定性,具有广阔的应用前景。

Description

一种淡水鱼复合保鲜剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及水产品保鲜技术领域,涉及一种淡水鱼复合保鲜剂及其制备方法与在淡水鱼保鲜中的应用。
背景技术
淡水鱼营养价值高,其中富含有钙、铁、维生素、必需氨基酸、多不饱和脂肪酸等营养成分,而深受大众消费者的喜爱,然而由于淡水鱼中蛋白质和水分含量高,含有多种不饱和脂肪酸及内源酶,使得淡水鱼容易腐败,在我国淡水鱼腐败率高达90%。淡水鱼的腐败主要受来自自身和环境中的微生物,以及本身的酶和脂肪氧化等因素的影响,其中微生物是造成腐败的主要因素。因此,研究鱼类腐败菌的生长,探究细菌群落动态变化并采取相应的能够有效抑制微生物生长的保鲜方法,对水产品捕捞、加工、贮藏、运输和销售过程中提高水产品品质和延长货架期至关重要。
我国市场上淡水鱼保鲜主要有冷冻保鲜、气调保鲜、化学防腐保鲜及辐照保鲜等方法,但以上方法存在蛋白质变性、营养成分流失和化学药品残留等问题,因而高效、安全、无毒的生物保鲜技术受到了人们广泛关注,已成为食品保鲜领域的研究热点。目前生物保鲜剂在水产品中应用最广泛的有壳聚糖、茶多酚、乳酸链球菌素、生物酶等。抗菌脂肽(lipopeptide)是指一类由芽孢杆菌(Bacillus sp.)通过非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide synthetases,NRPSs)合成的具有高效抑菌活性的脂肽类次级代谢产物,其结构中包含一个含有7~10个氨基酸和1个短链脂肪酸(C9~C13)组成的环型脂肽,具有抗菌性强、抗菌谱广、安全无毒、稳定性好等特性,因而抗菌脂肽作为一种新型、高效、广谱的生物源天然食品防腐剂,在食品加工中具有潜在的应用前景。但是目前,抗菌脂肽在淡水鱼产品保鲜方面的应用研究报道甚少,对于其是否能够应用于淡水鱼保鲜以及如何保鲜方面的研究尚未见报道。
发明内容
技术问题
本发明目的是针对目前水产品化学保鲜剂残留量高的问题,提供一种以安全、无毒、高效、广谱的抗菌肽为基础的一种淡水鱼复合保鲜剂及其制备方法与应用。
为解决上述技术问题,本发明现提供如下技术方案:
一种淡水鱼复合保鲜剂,包括细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物、百里酚和水。
进一步地,所述的淡水鱼复合保鲜剂,包括以下质量浓度组成的组分:细菌素粗提物0.4%-0.6%,抗菌脂肽粗提物1%-2%,百里酚1%-2%,余量为水。
进一步地,所述的淡水鱼复合保鲜剂,所述细菌素粗提物的制备方法包括以下步骤:
(1)将植物乳杆菌(Laaobacillusplantaram)163接种到种子培养基,培养培养20h-24h作为作为种子液;
(2)将种子液以2%的接种量接入发酵培养基中,发酵培养45-50h;
(3)将发酵培养后的发酵液离心除去菌体,得到发酵上清液;在4℃下,将发酵上清液与乙酸乙酯按照1:1比例(体积比)过夜萃取,然后旋蒸去除乙酸乙酯即得植物乳杆菌细菌素粗提物。
更进一步地,所述细菌素粗提物的制备方法步骤(1)中种子培养基为MRS液体培养基。
更进一步地,所述细菌素粗提物的制备方法步骤(2)中所述发酵培养基的组成为麦芽糖浆50-65g,玉米干粉15-35g,乙酸钠6-10g,柠檬酸氢二铵4-7g,吐温-80 1.0-1.8g,调节pH至4.8。
进一步地,所述的淡水鱼复合保鲜剂,所述抗菌脂肽粗提物的制备方法包括以下步骤:(1)将淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ES-2-4接种于PAD琼脂培养基中,37℃培养18-24h活化菌种,然后再将活化后的菌种接种于BPY培养基中,37℃,180rpm下培养18-24h制成种子液;
(2)以3-4%种子液接种于Landy发酵培养基中,在33℃180rpm下发酵36h后取出;
(3)将发酵后的发酵液离心除去菌体,用HCI将上清液调节pH至2-4,然后轻微搅动或静止于4℃环境下12-15h,最后9000rpm离心收集沉淀,加入60%-70%的乙醇抽提,再用NaOH中和,10000rpm下离心10min取上清液,获得抗菌脂肽粗提物。
更进一步地,所述抗菌脂肽粗提物的制备方法步骤(1)中PAD琼脂培养基包括马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g和蒸馏水1000ml;BPY培养基包括牛肉膏5g,酵母膏5g,氯化钠5g,鱼粉蛋白胨10g,葡萄糖10g和水1000mL。
更进一步地,所述抗菌脂肽粗提物的制备方法步骤(2)中Landy发酵培养基包括葡萄糖42.0g,谷氨酸钠14.0g,MgSO4·7H2O0.5g,KCl 0.5g,KH2PO4 1g,FeSO4·7H2O 0.15mg,MnSO4·7H2O 5mg,CuSO4·5H2O 0.16mg和水1000mL。
进一步地,所述的淡水鱼复合保鲜剂的制备方法,先将百里酚制备成百里酚保鲜液,然后将百里酚保鲜液、细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物和水混合后配制达到各组分质量浓度要求;其中百里酚保鲜液制备方法为取一定量的百里酚溶解在质量浓度为0.5%-0.8%的司班-20的无菌水溶液中,超声乳化后得到百里酚保鲜液。
以上所述的淡水鱼复合保鲜剂在淡水鱼保鲜中的应用,包括以下步骤:
(1)将鲜活淡水鱼处死后去除不需要的部位和器官,然后用无菌水冲洗后在10℃以下环境中沥干或将鱼按照储藏要求切割后再使用无菌水冲洗,并在10℃以下环境中沥干;
(2)将沥干后的淡水鱼浸入权利要求1或2所述的淡水鱼复合保鲜剂中,浸泡10-20min;
(3)将浸泡后的淡水鱼在10℃以下环境中沥干,并于4℃环境下贮藏。
有益效果
本发明的主要优点如下:
1.本发明的抗菌脂肽具有安全无毒、抗菌性强、且抗菌谱广,与细菌素、百里酚协同使用时,其对淡水鱼的抗菌防腐效果比单一组成分制成的保鲜剂的防腐效果有显著的增强,能扩大其抑菌谱,有效地抑制了淡水鱼贮藏过程中主要优势腐败菌菌落数、TVB-N、TBA、和感官评价等指标的增长,有效延长淡水鱼的货架期。
2.本发明一种淡水鱼绿色复合保鲜剂,既不影响淡水鱼感官品质,又避免了化学残留影响人们身体健康的危险。
具体实施方式:
以下实施例中所采用的植物乳杆菌(Laaobacillusplantaram)163从贵州来源的发酵食品中分离得到,淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ES-2-4从中药植物黄芩中分离得到,该两种菌株都是申请人报告过的现有菌株。
实例1是空白参照,是无菌水处理的样品,实例2是抗菌脂肽粗提物的处理组,实例3、4和5是抗菌脂肽粗提物、细菌素粗提物和百里酚三种保鲜剂的混合物的处理组。
实施例1(空白参照)
处理A:将鲜活鲫鱼敲头致死,去头、去尾、去内脏,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干;
处理B:将草鱼切片处理,切成20g/片,长9cm,宽4cm,厚0.5cm的草鱼鱼片,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干。
将上述预处理的淡水鱼鱼体放置在无菌水中,鱼体全部浸没在无菌水中,浸泡15min。将浸泡处理后的鱼体在10℃以下环境中沥干,置于无菌托盘中,贮藏在4℃环境条件下。
实施例2(对照)
抗菌脂肽粗提物的制备:Bacillus amyloliquefaciens ES-2-4接种于试管斜面PAD琼脂培养基(马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g、蒸馏水1000ml,自然pH)上,37℃培养箱中培养24h活化菌种,再将活化后的菌种接种于装有种子培养基BPY培养基(牛肉膏5g,酵母膏5g,氯化钠5g,鱼粉蛋白胨10g,葡萄糖10g,水1000mL。115℃灭菌20min)的三角瓶中,37℃180rpm下培养24h制成种子液。种子液以4%浓度接种于Landy发酵培养基(葡萄糖42.0g,谷氨酸钠14.0g,MgSO4·7H2O0.5g,KCl 0.5g,KH2PO4 1g,FeSO4·7H2O 0.15mg,MnSO4·7H2O 5mg,CuSO4·5H2O 0.16mg,水1000mL。115℃高压灭菌20min)中,在33℃,180rpm下发酵36h后取出,9000rpm下离心15min除去菌体,用HCI将上清液调节pH至2,然后轻微搅动或静止于4℃环境下12h,最后9000rpm离心收集沉淀,加入60%的乙醇抽提,再用NaOH中和,10000rpm下离心10min取上清液,获得抗菌脂肽粗提物的浓缩储备液。
处理A:将鲜活鲫鱼敲头致死,去头、去尾、去内脏,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干;
处理B:将草鱼切片处理,切成20g/片,长9cm,宽4cm,厚0.5cm的草鱼鱼片,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干。
将上述抗菌脂肽用无菌水制成质量浓度为1%的保鲜液,将上述预处理的淡水鱼鱼体放置在抗菌脂肽保鲜液水中,鱼体全部浸没在保鲜液中,浸泡15min。将浸泡处理后的鱼体在10℃以下环境中沥干,置于无菌托盘中,贮藏在4℃环境条件下。
实施例3
1.一种淡水鱼绿色复合保鲜剂制备,依次进行以下步骤。
(1)细菌素粗提物的制备:将植物乳杆菌163接种到种子培养基(MRS液体培养基:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,K2HPO4 2.0g,柠檬酸二铵2.0g,乙酸钠5.0g,葡萄糖20.0g,吐温-80 1mL,MgSO4·H2O 0.58g,MnSO4·4H2O 0.25g,蒸馏水1000mL,调节pH至6.2~6.4,琼脂18.0~20.0g,115℃灭菌20min。),培养24h作为种子液,以2%的接种量接入改良的发酵培养基(麦芽糖浆55g,玉米干粉20g,乙酸钠8g,柠檬酸氢二铵6g,吐温-801.3g。调节pH至4.8)中,发酵48h后,5000r/min离心30分钟,发酵液5000r/min离心30分钟除去菌体,得到发酵上清液。在4℃下,将发酵上清液与乙酸乙酯按照(体积比)1:1比例过夜萃取,然后旋蒸去除乙酸乙酯即得植物乳杆菌细菌素粗提物。
(2)抗菌脂肽粗提物的制备:Bacillus amyloliquefaciens ES-2-4接种于试管斜面PAD琼脂培养基(马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g、蒸馏水1000ml,自然pH)上,37℃培养箱中培养24h活化菌种,再将活化后的菌种接种于装有种子培养基BPY培养基(牛肉膏5g,酵母膏5g,氯化钠5g,鱼粉蛋白胨10g,葡萄糖10g,水1000mL。115℃灭菌20min)的三角瓶中,37℃180rpm下培养24h制成种子液。种子液以4%浓度接种于Landy发酵培养基(葡萄糖42.0g,谷氨酸钠14.0g,MgSO4·7H2O0.5g,KCl 0.5g,KH2PO4 1g,FeSO4·7H2O0.15mg,MnSO4·7H2O 5mg,CuSO4·5H2O 0.16mg,水1000mL。115℃高压灭菌20min)中,在33℃,180rpm下发酵36h后取出,9000rpm下离心15min除去菌体,用HCI将上清液调节pH至2,然后轻微搅动或静止于4℃环境下12h,最后9000rpm离心收集沉淀,加入60%的乙醇抽提,再用NaOH中和,10000rpm下离心10min取上清液,获得抗菌脂肽粗提物的浓缩储备液。
(3)百里酚保鲜液的制备:取一定量的百里酚溶解在司班-20的质量浓度为0.5%的无菌水溶液中,超声乳化30min制得均匀的百里酚保鲜液。
将上述三种保鲜液混合,最后用水使各组分的浓度达到:各成分质量浓度为细菌素粗提物0.4%,抗菌脂肽粗提物1%,百里酚1%,其余的为水。
2.样品的保鲜处理
处理A:将鲜活鲫鱼敲头致死,去头、去尾、去内脏,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干;
处理B:将草鱼切片处理,切成20g/片,长9cm,宽4cm,厚0.5cm的草鱼鱼片,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干。
将上述预处理的淡水鱼鱼体放置在保鲜液中,鱼体全部浸没在保鲜液中,浸泡15min。将浸泡处理后的鱼体在10℃以下环境中沥干,置于无菌托盘中,贮藏在4℃环境条件下。
实施例4
1.一种淡水鱼绿色复合保鲜剂制备,依次进行以下步骤。
(1)细菌素粗提物的制备:将植物乳杆菌163接种到种子培养基(MRS液体培养基:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,K2HPO4 2.0g,柠檬酸二铵2.0g,乙酸钠5.0g,葡萄糖20.0g,吐温-80 1mL,MgSO4·H2O 0.58g,MnSO4·4H2O 0.25g,蒸馏水1000mL,调节pH至6.2~6.4,琼脂18.0~20.0g,115℃灭菌20min。),培养24h作为种子液,以2%的接种量接入改良的发酵培养基A(麦芽糖浆55g,玉米干粉20g,乙酸钠8g,柠檬酸氢二铵6g,吐温-801.3g。调节pH至4.8)中,发酵48h后,5000r/min离心30分钟,发酵液5000r/min离心30分钟除去菌体,得到发酵上清液。在4℃下,将发酵上清液与乙酸乙酯按照1:1比例过夜萃取,然后旋蒸去除乙酸乙酯即得植物乳杆菌细菌素粗提物。
(2)抗菌脂肽粗提物的制备:Bacillus amyloliquefaciens ES-2-4接种于试管斜面PAD琼脂培养基(马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g、蒸馏水1000ml,自然pH)上,37℃培养箱中培养24h活化菌种,再将活化后的菌种接种于装有种子培养基BPY培养基(牛肉膏5g,酵母膏5g,氯化钠5g,鱼粉蛋白胨10g,葡萄糖10g,水1000mL。115℃灭菌20min)的三角瓶中,37℃180rpm/min下培养24h制成种子液。种子液以4%浓度接种于Landy发酵培养基(葡萄糖42.0g,谷氨酸钠14.0g,MgSO4·7H2O0.5g,KCl 0.5g,KH2PO41g,FeSO4·7H2O0.15mg,MnSO4·7H2O 5mg,CuSO4·5H2O 0.16mg,水1000mL。115℃高压灭菌20min)中,在33℃180rpm/min下发酵36h后取出,9000rpm下离心15min除去菌体,用HCI将上清液调节pH至2,然后轻微搅动或静止于4℃环境下12h,最后9000rpm离心收集沉淀,加入60%的乙醇抽提,再用NaOH中和,10000rpm下离心10min取上清液,获得抗菌脂肽粗提物的浓缩储备液。
(3)百里酚保鲜液的制备:取一定量的百里酚溶解在0.5%的司班-20的无菌水溶液中,超声乳化30min制得均匀的百里酚保鲜液。
将上述三种保鲜液混合,最后用水使各组分的浓度达到:各成分质量浓度为细菌素粗提物0.5%,抗菌脂肽粗提物1.5%,百里酚1.5%,其余的为水。
2.样品的保鲜处理
处理A:将鲜活鲫鱼敲头致死,去头、去尾、去内脏,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干;
处理B:将草鱼切片处理,切成20g/片,长9cm,宽4cm,厚0.5cm的草鱼鱼片,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干。
将上述预处理的淡水鱼鱼体放置在保鲜液中,鱼体全部浸没在保鲜液中,浸泡15min。将浸泡处理后的鱼体在10℃以下环境中沥干,置于无菌托盘中,贮藏在4℃环境条件下。
实施例5
1.一种淡水鱼绿色复合保鲜剂制备,依次进行以下步骤。
(1)细菌素粗提物的制备:将植物乳杆菌163接种到种子培养基(MRS液体培养基:蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,K2HPO4 2.0g,柠檬酸二铵2.0g,乙酸钠5.0g,葡萄糖20.0g,吐温-80 1mL,MgSO4·H2O 0.58g,MnSO4·4H2O 0.25g,蒸馏水1000mL,调节pH至6.2~6.4,琼脂18.0~20.0g,115℃灭菌20min。),培养24h作为种子液,以2%的接种量接入改良的发酵培养基A(麦芽糖浆55g,玉米干粉20g,乙酸钠8g,柠檬酸氢二铵6g,吐温-801.3g。调节pH至4.8)中,发酵48h后,5000r/min离心30分钟,发酵液5000r/min离心30分钟除去菌体,得到发酵上清液。在4℃下,将发酵上清液与乙酸乙酯按照1:1比例过夜萃取,然后旋蒸去除乙酸乙酯即得植物乳杆菌细菌素粗提物。
(2)抗菌脂肽粗提物的制备:Bacillus amyloliquefaciens ES-2-4接种于试管斜面PAD琼脂培养基(马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g、蒸馏水1000ml,自然pH)上,37℃培养箱中培养24h活化菌种,再将活化后的菌种接种于装有种子培养基BPY培养基(牛肉膏5g,酵母膏5g,氯化钠5g,鱼粉蛋白胨10g,葡萄糖10g,水1000mL。115℃灭菌20min)的三角瓶中,37℃180rpm/min下培养24h制成种子液。种子液以4%浓度接种于Landy发酵培养基(葡萄糖42.0g,谷氨酸钠14.0g,MgSO4·7H2O0.5g,KCl 0.5g,KH2PO4 1g,FeSO4·7H2O0.15mg,MnSO4·7H2O 5mg,CuSO4·5H2O 0.16mg,水1000mL。115℃高压灭菌20min)中,在33℃180rpm/min下发酵36h后取出,9000rpm下离心15min除去菌体,用HCI将上清液调节pH至2,然后轻微搅动或静止于4℃环境下12h,最后9000rpm离心收集沉淀,加入60%的乙醇抽提,再用NaOH中和,10000rpm下离心10min取上清液,获得抗菌脂肽粗提物的浓缩储备液。
(3)百里酚保鲜液的制备:取一定量的百里酚溶解在0.5%的司班-20的无菌水溶液中,超声乳化30min制得均匀的百里酚保鲜液。
将上述三种保鲜液混合,最后用水使各组分的浓度达到:各成分质量浓度为细菌素粗提物0.6%,抗菌脂肽粗提物2%,百里酚2%,其余的为水。
2.样品的保鲜处理
处理A:将鲜活鲫鱼敲头致死,去头、去尾、去内脏,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干;
处理B:将草鱼切片处理,切成20g/片,长9cm,宽4cm,厚0.5cm的草鱼鱼片,用无菌水冲洗15-20S,在10℃以下环境中沥干。
将上述预处理的淡水鱼鱼体放置在保鲜液中,鱼体全部浸没在保鲜液中,浸泡15min。将浸泡处理后的鱼体在10℃以下环境中沥干,置于无菌托盘中,贮藏在4℃环境条件下。食品安全国家标准动物性水产制品GB10136-2015中规定,即食性动物水产品菌落数要小于105CFU/g,而鲫鱼、草鱼等淡水鱼在菌落数超过106CFU/g时,鱼体发臭不可食用,因此确定菌落数达到106CFU/g时为产品货架期,GB2733-2005鲜、冻动物性水产品卫生标准中规定淡水鱼中TVB-N含量小于20mg/100g。
感官评价标准如下:
表1淡水鱼的感官评价标准
表2 4℃贮藏条件下各实施例淡水鱼感官变化
表3 4℃贮藏条件下各实施例淡水鱼菌落总数变化
表4 4℃贮藏条件下各实施例鲫鱼优势腐败菌菌落总数变化
表5 4℃贮藏条件下各实施例淡水鱼TVB-N的变化
表6 4℃贮藏条件下各实施例淡水鱼TBA的变化
由此可见,抗菌脂肽单独作用时,也能有效抑制淡水鱼贮藏过程中菌落总数、TVB-N和TBA的增长,同时本发明利用细菌素、抗菌脂肽和百里酚有效抑制了淡水鱼贮藏过程优势腐败菌菌落总数的增长,减缓了微生物对蛋白质的降解活动,从而有效抑制了淡水鱼贮藏过程中TVB-N的增长,延缓异味的产生,从而有效延长淡水鱼的货架期。

Claims (10)

1.一种淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,包括细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物、百里酚和水。
2.根据权利要求1所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,包括以下以质量百分比计的组分:
细菌素粗提物0.4%-0.6%,抗菌脂肽粗提物1%-2%,百里酚1%-2%,余量为水;所有组分的质量百分比之和为100%。
3.根据权利要求1或2所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,所述细菌素粗提物的制备方法包括以下步骤:
(1)将植物乳杆菌(Laaobacillusplantaram)163接种到种子培养基,培养20 h-24 h作为种子液;
(2)将种子液以2%的接种量接入发酵培养基中,发酵培养45-50 h;
(3)将发酵培养后的发酵液离心除去菌体,得到发酵上清液;在4℃下,将发酵上清液与乙酸乙酯按照1:1的体积比过夜萃取,然后旋蒸去除乙酸乙酯即得植物乳杆菌细菌素粗提物。
4.根据权利要求3所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,所述细菌素粗提物的制备方法步骤(1)中种子培养基为MRS液体培养基。
5.根据权利要求3所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,所述细菌素粗提物的制备方法步骤(2)中所述发酵培养基的组成为麦芽糖浆50-65 g,玉米干粉15-35g,乙酸钠6-10 g,柠檬酸氢二铵4-7 g,吐温-80 1.0-1.8 g,调节pH至 4.8。
6.根据权利要求1或2所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,所述抗菌脂肽粗提物的制备方法包括以下步骤:
(1)将淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) ES-2-4接种于PAD琼脂培养基中,37℃培养18-24h活化菌种,然后再将活化后的菌种接种于BPY培养基中,37℃,180rpm下培养18-24 h制成种子液;
(2)以3-4%种子液接种于Landy发酵培养基中,在33℃ 180 rpm下发酵36 h后取出;
(3)将发酵后的发酵液离心除去菌体,用HCI将上清液调节pH至2-4,然后轻微搅动或静止于4℃环境下12 -15 h,最后9000 rpm离心收集沉淀,加入60%-70%的乙醇抽提,再用NaOH中和,10000 rpm下离心10 min取上清液,获得抗菌脂肽粗提物。
7.根据权利要求6所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,所述抗菌脂肽粗提物的制备方法步骤(1)中PAD琼脂培养基包括马铃薯200g 、葡萄糖20g、琼脂15~20g和蒸馏水1000ml;BPY培养基包括牛肉膏5 g,酵母膏5 g,氯化钠5 g,鱼粉蛋白胨10 g,葡萄糖10 g和水1000 mL。
8.根据权利要求6所述的淡水鱼复合保鲜剂,其特征在于,所述抗菌脂肽粗提物的制备方法步骤(2)中Landy发酵培养基包括葡萄糖42.0 g,谷氨酸钠14.0 g,MgSO4·7H2O0.5 g,KCl 0.5 g ,KH2PO4 1 g,FeSO4·7H2O 0.15 mg,MnSO4·7H2O 5 mg,CuSO4·5H2O 0.16 mg和水1000 mL。
9.权利要求1或2所述的淡水鱼复合保鲜剂的制备方法,其特征在于,先将百里酚制备成百里酚保鲜液,然后将百里酚保鲜液、细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物和水混合后配制达到各组分质量浓度要求;其中百里酚保鲜液制备方法为取百里酚溶解在质量浓度为0.5%-0.8%的司班-20的无菌水溶液中,超声乳化后得到百里酚保鲜液。
10.权利要求1或2所述的淡水鱼复合保鲜剂在淡水鱼保鲜中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将鲜活淡水鱼处死后去除不需要的部位和器官,然后用无菌水冲洗后在10℃以下环境中沥干或将鱼按照储藏要求切割后再使用无菌水冲洗,并在10℃以下环境中沥干;
(2)将沥干后的淡水鱼浸入权利要求1或2所述的淡水鱼复合保鲜剂中,浸泡10-20min;
(3)将浸泡后的淡水鱼在10℃以下环境中沥干,并于4℃环境下贮藏。
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