CN108142447B - 一种铁苋菜提取物及其作为植物抗菌物的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种铁苋菜提取物，所述的铁苋菜提取物为醇提物，其中醇提物提取方法为：是称取粉碎样品800g，用5倍量的乙醇浸泡植物干粉，室温下静置12h；超声提取2h；减压抽滤，连续提取3次，合并滤液，在45℃下用旋转蒸发仪浓缩，干燥后，4℃中保存、备用；还包括铁苋菜提取物作为植物抗菌物的应用。本发明所用的铁苋菜提取物是一种植物源生物农药，其具有抗菌活性高、抑菌谱广、不易产生抗性、对人和动物无毒的特点，可以提高葡萄果实食品安全性。
Description
技术领域
本发明涉及生物农药领域，具体涉及植物源生物农药，更具体涉及一种铁苋菜提取物及其作为植物抗菌物的应用。
背景技术
葡萄与其它园艺作物一样，病虫害的严重危害是产业健康发展的限制因子，常见的、危害严重的葡萄病害如葡萄灰霉病、白腐病、炭疽病等；这些病害的为害严重影响葡萄质量和产量，不但是我国葡萄生产上必须解决的困难，而且也是世界性葡萄生产上的难题。农业生产中，常用防控方法为使用化学农药的化学防治法，但是化学防治存在引起葡萄病原菌的抗药性、残留污染、再猖獗等风险。使用多种方法交替配合综合防控是病虫害防控及防止真菌毒素污染的发展方向和避免风险的途径。因此寻找非化学农药的其它途径和方法，是产业发展的重要任务，也是科学研究的重要课题。从植物中挖掘植物源方法，包括开发植物源农药、从植物源化合物中寻找先导化合物、甚至植物浸提液的直接利用，是这个发展方向的重要内容。
铁苋菜(Acalypha australis L.)是大戟科(Euphorbiaceae)铁苋菜属(Acalypha)植物，我国除西部高原或干燥地区外，大部分省区均产。生于海拔20-1200米平原或山坡较湿润耕地和空旷草地，有时石灰岩山疏林下。俄罗斯远东地区、朝鲜、日本、菲律宾、越南、老挝也有分布。但未见将其作为生物农药应用到葡萄病害防治的报道和研究。
发明内容
本发明主要解决的技术问题是提供一种铁苋菜提取物及其作为植物抗菌物的应用，能够达到较理想的防治效果，且可提高葡萄食品安全性。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种铁苋菜提取物，所述的铁苋菜提取物为醇提物，所述的醇提物提取方法为：称取粉碎样品800g，用5倍量的乙醇浸泡植物干粉，室温下静置12h；超声提取2h；减压抽滤，连续提取3次，合并滤液，在45℃下用旋转蒸发仪浓缩，干燥后，4℃中保存、备用。
还涉及一种铁苋菜提取物作为植物抗菌物的应用，所述的铁苋菜提取物对以下病害病原菌有显著的抑菌活性，主要包括葡萄灰霉病菌、葡萄白腐病菌、葡萄炭疽病菌和炭黑曲霉病菌。
进一步，其中所述的葡萄炭疽病菌包括对多菌灵高抗炭疽病菌菌株，所述的灰霉病菌包括对多菌灵高抗灰霉病菌菌株。
进一步，所述的醇提物浓度为0.3125mg/mL-5mg/mL。
进一步，当醇提物浓度为5mg/mL时，对炭疽病菌、白腐病菌和灰霉病菌抑制率分别为48.09％、73.49％和15.74％，对多菌灵敏感炭疽病菌菌株FJZZ-62、coll-9和coll-20的抑制率分别为59.26％、52.41％和43.75％，对多菌灵高抗炭疽病菌菌株FJND-9、FJND-40和GZSD-89的抑制率分别为61.72％、57.66％和60.00％，对多菌灵敏感葡萄灰霉病菌菌株GXGL-7、GXNN-6和GXNN-7的抑制率分别为30.63％、23.34％和27.61％，对高抗葡萄灰霉病菌菌株HBLF-10、GXZY-4和GXZY-7的抑制率分别为26.72％、48.13％和29.80％。
本发明的有益效果是：本发明涉及的铁苋菜提取物作为有效成分的杀菌药物是一种植物源生物农药，属于生物药物的一种，符合现代社会对新农药的要求。其次，铁苋菜提取物具有抗菌活性高、抑菌谱广、不易产生抗性、对人和动物无毒的特点。另外，其对葡萄果实常见病原菌有抑制效果，可以提高葡萄果实食品安全性。
具体实施方式
下面结合较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
实施例1：
一、醇提物的制备
本发明的铁苋菜购自安徽亳州药材市场。将备用材料晒干，粉碎，放在通风干燥处保存备用。称取粉碎样品800g，用5倍量的乙醇浸泡植物干粉，室温下静置12h；超声提取2h；减压抽滤，连续提取3次，合并滤液，在45℃下用旋转蒸发仪浓缩，干燥后，4℃中保存、备用。
二、醇提物的抑菌作用
采用菌丝生长速率法测定白芷水提物、醇提物对葡萄灰霉病菌(Botrytiscinerea)、葡萄白腐病菌(Coniothyrium diplodiella)、葡萄炭疽病菌(Glomerellacingulata)和炭黑曲霉(Aspergillus carbonarius)的抑菌活性。具体步骤如下：
将冻存菌种于室温下复苏，用接种针挑取少量菌落挑取至含PDA培养基的培养皿中心区域，封口，无光照倒置培养于温度25℃、湿度73％的培养箱中。
称取一定量的提取物，用无菌水将醇提物分别配制成50mg/mL、25mg/mL、12.5mg/mL、6.25mg/mL、3.125mg/mL的溶液。无菌水作为空白对照，5μg/mL的多菌灵作为阳性对照。在无菌洁净工作台中，将配制好的药液分别与PDA培养基按照1:9的比例混，使带药培养基的浓度为5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.3125mg/mL，倒入直径为90mm的培养皿，放置待其凝固。
将菌种活化后，用无菌打孔器(Ф＝5mm)在菌丝生长旺盛处均匀打孔，制得菌饼，接种到带药培养基上，每个培养皿中央接一个菌饼，在温度为25-28℃，湿度为73％的培养箱中倒置培养2-7d后，用十字交叉法测菌落直径，计算抑制率。每个处理设3个重复。
结果表明：铁苋菜醇提物对4种葡萄病原真菌表现出不同程度的抑菌效果，当醇提物浓度为5mg/mL时，对炭疽病菌、白腐病菌和灰霉病菌抑制率分别为48.09％、73.49％和15.74％，对炭黑曲霉病菌没有抑制作用。
三、醇提物对多菌灵敏感炭疽病菌菌株的抑制作用
当铁苋菜醇提物浓度为5mg/mL时，对多菌灵敏感炭疽病菌菌株FJZZ-62、coll-9和coll-20的抑制率分别为59.26％、52.41％和43.75％。
四、醇提物对多菌灵高抗炭疽病菌菌株的抑制作用
100μg/mL多菌灵对菌株FJND-9、FJND-40和GZSD-89的抑制率分别为9.80％、21.50％和10.01％。铁苋菜醇提物对多菌灵高抗炭疽病菌菌株具有较好的抑制活性。当铁苋菜醇提物浓度为5mg/mL时，对多菌灵高抗炭疽病菌菌株FJND-9、FJND-40和GZSD-89的抑制率分别为61.72％、57.66％和60.00％，显著强于100μg/mL多菌灵的抑制作用。
五、醇提物对多菌灵敏感灰霉病菌菌株的抑制作用
当铁苋菜醇提物浓度为5mg/mL时，对多菌灵敏感葡萄灰霉病菌菌株GXGL-7、GXNN-6和GXNN-7的抑制率分别为30.63％、23.34％和27.61％。
六、醇提物对多菌灵高抗灰霉病菌菌株的抑制作用
100μg/mL多菌灵对菌株HBLF-10、GXZY-4和GXZY-7的抑制率分别为53.45％、55.11％和14.76％。铁苋菜醇提物对高抗葡萄灰霉病菌菌株也表现出一定的抑制作用。当铁苋菜醇提物浓度为5mg/mL时，对高抗葡萄灰霉病菌菌株HBLF-10、GXZY-4和GXZY-7的抑制率分别为26.72％、48.13％和29.80％。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (3)
1.一种铁苋菜提取物作为植物抗病害病原菌药物 的应用，其特征在于：所述的铁苋菜提取物为醇提物，所述的醇提物提取方法为：称取粉碎样品800g，用5倍量的乙醇浸泡植物干粉，室温下静置12h；超声提取2h；减压抽滤，连续提取3次，合并滤液，在45℃下用旋转蒸发仪浓缩，干燥后，4℃中保存、备用，所述的病害病原菌为葡萄灰霉病菌、葡萄白腐病菌、葡萄炭疽病菌和炭黑曲霉病菌，所述的醇提物浓度为0.3125mg/mL-5mg/mL。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，其中所述的葡萄炭疽病菌包括对多菌灵高抗炭疽病菌菌株，所述的灰霉病菌包括对多菌灵高抗灰霉病菌菌株。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，当醇提物浓度为5mg/mL时，对炭疽病菌、白腐病菌和灰霉病菌抑制率分别为48.09％、73.49％和15.74％，对多菌灵敏感炭疽病菌菌株FJZZ-62、coll-9和coll-20的抑制率分别为59.26％、52.41％和43.75％，对多菌灵高抗炭疽病菌菌株FJND-9、FJND-40和GZSD-89的抑制率分别为61.72％、57.66％和60.00％，对多菌灵敏感葡萄灰霉病菌菌株GXGL-7、GXNN-6和GXNN-7的抑制率分别为30.63％、23.34％和27.61％，对高抗葡萄灰霉病菌菌株HBLF-10、GXZY-4和GXZY-7的抑制率分别为26.72％、48.13％和29.80％。
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