CN108101943B - 一种替诺福韦前药或可药用盐及其在医药上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种替诺福韦前药及其在医药上的应用。具体而言，本发明涉及一种如通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)所示的化合物或其异构体、可药用盐，以及它们在制备治疗病毒感染性疾病特别是艾滋病(HIV)感染、乙型肝炎和乙肝病毒引起的疾病的药物中的应用，其中通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)中的各取代基的定义与说明书中的定义相同。

Description

一种替诺福韦前药或可药用盐及其在医药上的应用

技术领域

本发明涉及一种替诺福韦前药或可药用盐及其在医药上的应用。

背景技术

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus)是指引起人类急性肝炎和慢性肝炎的DNA病毒，简称HBV。据世界卫生组织统计，全世界有20亿人感染乙肝病毒，3.5亿以上的人患有慢性（长期）肝脏感染疾病，其中中国的乙肝患者约占1/3，中国目前每年用于乙肝治疗的总费用超过1000亿，已成为全球最大的乙肝药物市场。慢性乙肝患者发展成肝硬化或肝细胞癌的概率为 15%-40%，全球每年有 100 万人死于慢性乙肝而乙肝目前而言被认为还不能被彻底治愈，因此抗病毒被认为是其中最基本、最重要的治疗手段。

替诺福韦是抗乙型肝炎病毒的母核，最早公布于1985年的捷克专利。但是该药物在生理pH条件下为二磷酸，口服基本不吸收，限制了其临床使用。吉利德公司对该药物进行了深入的研究，发现将该药物成酯，做成前药后可极大的改善该药物的口服吸收并改善生物利用度。在此基础上吉利德开发出了富马酸替诺福韦二吡呋酯（TDF）和替诺福韦艾拉酚胺富马酸盐(TAF)，用于治疗艾滋病感染和乙型肝炎。大量临床试验表明：TAF用于治疗慢性HBV感染成人患者，只需 TDF（300 mg•d-1）1/10 的剂量（25 mg•d-1），便可获得相似的抗病毒效用。TAF 的靶向性、安全性、血浆稳定性都优于TDF，且进入HBV感染的细胞后仍能保持最大程度的完整性，因此TAF具有良好的市场前景。

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但是，TAF因为技术壁垒，专利限制，价格因素等原因，国内要引进该药物还有很长的一段时间。目前，公司在替诺福韦艾拉酚胺的结构上进行修饰，使之能达到甚至优于替诺福韦艾拉酚胺的治疗效果。由于药物结构和替诺福韦艾拉酚胺不一致，能有效避开原创公司的知识产权保护，为乙型肝炎患者的治疗，提供一种新的有效选择。

发明内容

发明人在替诺福韦艾拉酚胺的结构上进行修饰，使之能达到甚至优于替诺福韦艾拉酚胺的治疗效果。由于药物结构和替诺福韦艾拉酚胺不一致，能有效避开原创公司的知识产权保护，为乙型肝炎患者的治疗，提供一种新的有效选择。

本发明涉及一种如通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)所示的化合物或其可药用盐。

其中：

（1）R₁ 是氢或C_1-6 烷基、取代或非取代的C_6-10 芳基或6~10元杂芳基；

（2）R₂ 是氢或C_1-6 烷基、氰基；

（3）Ar为取代或非取代的C_6-10芳基；；

（4）X 独立地选自O、N、S、P；

（5）Y 为取代或非取代的C_1-6烷基；

（6）烷基是指饱和的脂肪族烃基团，包括1至6个碳原子的直链或支链基团；

（7）当被取代时，取代基为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基；

（8）化合物中磷原子具有手性，其构型是S-或R-构型，或者是S-构型和R-构型的混合物。

所述的如通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)所示的化合物或其可药用盐，其选自但不仅限于以下结构：

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在本发明的优选的具体实施方案中进一步公开了具有如下结构的化合物或其可药用盐。

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本发明还提供了一种药物组合物，其含有如通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)所述的化合物或其可药用盐与药学上可接受的载体。

本发明提供的的药物组合物，其中所述药学上可接受载体选自注射用水、冻干粉剂辅料或口服制剂辅料。

本发明另一方面还涉及如通式(Ⅰ)或通式(Ⅱ)所述的化合物、其可药用盐或前述的药物组合物在制备治疗病毒感染性疾病的药物中的用途优选在制备治疗艾滋病感染、乙型肝炎或乙肝病毒引起的疾病的药物中的用途。

除非有相反陈述，本发明中的术语具有下列的含义。

“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括1至6个碳原子的直链和支链基团。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1, 1-二甲基丙基、1, 2-二甲基丙基、2, 2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1, 1, 2-三甲基丙基、1, 1-二甲基丁基、1, 2-二甲基丁基、2, 2-二甲基丁基、1, 3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2, 3-二甲基丁基等。

“烷基”可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代， 优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代。

“芳基”指6至10元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，具有共轭的π电子体系的多环 (即其带有相邻对碳原子的环) 基团，例如苯基和萘基。芳基可以 是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、 烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。

“杂芳基”是指包含1、2、3或4个杂原子，6至10个环原子的杂芳族体系，优选5至6个环原子，其中杂原子包括氧、硫和氮；例如吡啶基、嘧啶基等。“杂芳基”可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、硫醇、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。

具体实施方式

以下将结合具体实施例详细地解释本发明，使得本领域技术人员更全面地理解本专利，具体实施例仅用于说明本发明的技术方案，并不以任何方式限定本发明。

实施例1

步骤1:

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将替诺福韦（70.5 g）、三乙胺、DMAP、亚磷酸三苯酯和乙腈混合物于80℃回流48小时后停止加热，旋蒸除掉乙腈，分别用水、乙酸乙酯、乙腈萃取分液。水相于低温（≤25℃）下滴加浓盐酸（30%）至pH 为3，继续搅拌，有固体析出。继续滴加浓盐酸至pH 小于2。过滤，干燥，得到白色粉末状固体IIA 73.1 g，收率81.57%。MS(m/z):364.1(M+H)⁺。

步骤2:

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将氯化亚砜（336mg）加入IIA（513m g）的乙腈混合物中，于80℃ 搅拌5 h，析出固体，减压蒸馏除去乙腈，固体加甲苯后旋干。然后将固体用二氯甲烷溶解，于-30℃下滴加IIIA（337mg）和二氯甲烷的混合溶液。滴毕，搅拌5分钟后继续滴加三乙胺至pH 为6~7，滴毕，继续反应1小时。升温至-5℃，依次用二水磷酸二氢钠溶液，碳酸氢钠溶液，饱和盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析后得到淡黄色油状物537mg，收率75.3%。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8 .34(s，1H)，7.93(m，1H)，7 .30～7.43(m，1H)，7 .21～7.35(m，1H)，7 .0～7.21(m，2H)，6.80～6.99(m，1H)，5.50～5.65(m，2H)，4.58～4.92(m，4H)，4.38～4.48(m，1H)，4.01～4.20(m，4H)，3.60～3.74(m，2H) ，1 .28～1 .50(m，9H) 。MS(m/z):505.1(M+H)⁺。

手性化合物A1和A2的制备:

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纯品A（100 mg）经HPLC制备分离（制备柱：Waters Symmetry C18，流动相A:0.02%三氟乙酸水溶液；B:甲醇）后得到化合物A1 31.5 mg 和 A2 38.5 mg MS(m/z):505.1(M+H)⁺。

实施例2

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将氯化亚砜（336mg）加入IIA（513m g）的乙腈混合物中，于80℃ 搅拌5 h，析出固体，减压蒸馏除去乙腈，固体加甲苯后旋干。然后将固体用二氯甲烷溶解，于-30℃下滴加IIIA（337mg）和二氯甲烷的混合溶液。滴毕，搅拌5分钟后继续滴加三乙胺至pH 为6~7，滴毕，继续反应1小时。升温至-5℃，依次用二水磷酸二氢钠溶液，碳酸氢钠溶液，饱和盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析后得到淡黄色油状物482mg，收率71.5%。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8 .35(s，1H)，7.94(m，1H)，7 .30～7.43(m，1H)，7 .21～7.35(m，1H)，7 .0～7.21(m，2H)，6.80～6.99(m，1H)，5.50～5.65(m，2H)，4.58～4.92(m，4H)，4.38～4.48(m，1H)，4.01～4.20(m，3H)，3.60～3.74(m，2H) ， 1 .28～1 .31(m, 6H)。

纯品C（150 mg）经HPLC制备分离（制备柱：Waters Symmetry C18，流动相A:0.02%三氟乙酸水溶液；B:甲醇）后得到化合物C1 50.0 mg。MS(m/z): 477.2(M+H)⁺。

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实施例3：按合成化合物C和C1类似的方法，合成了化合物D和D1。

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D: ¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8 .34(s，1H)，7.93(m，1H)，7 .00～7.21(m，2H)，6.80～6.99(m，2H)，5.50～5.65(m，2H)，4.58～4.92(m，4H)，4.38～4.48(m，1H)，4.01～4.20(m，4H)，3.60～3.74(m，2H)， 1 .28～1 .50(m，9H) 。

D1: MS(m/z):523.2(M+H)⁺。

实施例4：按合成化合物C和C1类似的方法，合成了化合物I和I1。

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I: ¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8 .34(s，1H)，8.01(m，1H)，7 .30～7.43(m，1H)，7.21～7.35(m，1H)，7 .0～7.21(m，2H)，6.80～6.99(m，1H)，5.50～5.65(m，2H)，4.38～4.48(m，1H)，4.01～4.20(m，4H)，3.60～3.74(m，2H) ，1 .28～1 .70(m，12H) 。

I1: MS(m/z):502.2(M+H)⁺。

实施例5：富马酸盐的制备。

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常温下，向单口烧瓶中依次加入化合物A1(504mg)，富马酸(116mg)和乙腈，升温到70~75℃，并在此温度下搅拌1小时。过夜降温析晶，抽滤，得白色固体A1富马酸盐502mg。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.10(m，2H)，7.28(m，2H)，7.18(s，2H)，7.10(m，1H)，7.05(m，2H)，6.59(S，2H)，4.84～4.98(m，3H)，4 .5(d，2H)，4.29(m，1H)，4.17(m，1H)，3.94(m，1H)，3.70～3.91(m，3H)，1.12～1.23(m，9H)。

实施例6：抗病毒实验。

体外抗乙型肝炎病毒活性研究。

以HepG 2 .2 .15细胞为乙型肝炎病毒载体，测定化合物抑制乙型肝炎病毒进行DNA 复制的能力。

测试方法：HepG 2 .2 .15细胞种96孔培养板，24小时后按不同稀释度分别加入样品及阳性对照药，同时设细胞对照孔，加药72小时后分别更换含不同稀释浓度样品的培养液，于加药后第6天分别收集细胞上清及2.2.15细胞，测定细胞培养上清和细胞内的HBVDNA含量，三复孔求平均值进行评价HBV复制和释放情况，计算IC₅₀(结果见表1)。

细胞毒性试验。

测试方法：HepG 2 .2 .15细胞种96孔培养板，按不同稀释度分别加入样品及阳性对照药，每浓度 3 孔，每 4 天换同浓度药液，设空白对照组，培养 8 d。显微镜下观察细胞病变，完全破坏为 4；75% 破坏为 3； 50% 破坏为 2； 25% 破坏为 1；无病变为 0。计算每浓度药液平均细胞病变程度和抑制率。按 Reed & Muench 法计算半数毒性浓度CC₅₀ (结果见表1)。

表1、各化合物的HBV抑制率和细胞毒性结果

化合物	IC<sub>50</sub>（nM）	CC<sub>50</sub>（nM）
			阳性对照TAF游离碱	18	大于20000
A(混合物)	31	大于20000
			A1(手性)	13	大于20000
A2(手性)	121	大于20000
			C(混合物)	71	大于20000
D(混合物)	36	大于20000
			E(混合物)	182	大于20000
F(混合物)	96	大于20000
			H(混合物)	225	大于20000
I(混合物)	45	大于20000
			I1(手性)	22	大于20000
I2(手性)	210	大于20000

Claims (7)

1.一种如式(A1)或(I1)所示的化合物或其可药用盐，

2.一种药物组合物，其含有根据权利要求1所述的化合物或其可药用盐与药学上可接受的载体。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其中所述药学上可接受载体选自注射用水、冻干粉剂辅料或口服制剂辅料。

4.根据权利要求1所述的化合物或其可药用盐在制备治疗病毒感染性疾病的药物中的用途。

5.根据权利要求1所述的化合物或其可药用盐在制备治疗艾滋病感染、乙型肝炎或乙肝病毒引起的疾病的药物中的用途。

6.根据权利要求2或3所述的药物组合物在制备治疗病毒感染性疾病的药物中的用途。

7.根据权利要求2或3所述的药物组合物在制备治疗艾滋病感染、乙型肝炎或乙肝病毒引起的疾病的药物中的用途。