CN108065037A - 微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料 - Google Patents

微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料 Download PDF

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CN108065037A CN201711471049.5A CN201711471049A CN108065037A CN 108065037 A CN108065037 A CN 108065037A CN 201711471049 A CN201711471049 A CN 201711471049A CN 108065037 A CN108065037 A CN 108065037A
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汪志明
陆姝欢
付杰
余超
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Abstract

本发明涉及一种微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料,属于发酵工程领域。制备方法包括:将微生物菌种于液体培养基中第一次发酵36‑48h后,然后接种至固体培养基中第二次发酵100‑140h。微生物菌种为具有产DHA能力的微生物。该方法简单,采取固液体发酵结合工艺,通过发酵周期有效控制功能性饲料中DHA的含量和蛋白质含量,成本低廉、能耗低、设备损坏小、无废水废弃物产生,发酵后处理工段简单,解决了发酵菌体直接造粒难的问题。本发明中的功能性饲料含有丰富的DHA和蛋白质,营养价值高,可改善动物的生产性能以及动物产品的品质。

Description

微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料
技术领域
本发明涉及发酵工程领域,且特别涉及一种微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料。
背景技术
二十二碳六烯酸(DHA)是一种具有重要生理功能的长链多不饱和脂肪酸,可促进大脑和视力发育,提高智力,因此广泛添加于婴幼儿奶粉中。此外,DHA具有预防及治疗心血管疾病、防止老年痴呆、抑制细胞癌变等生理功能,因而广泛应用于食品工业。
研究发现,裂殖壶菌能大量积累DHA,藻油中DHA含量较其它微藻高。另外,还有其它多种能用于生产DHA的微生物菌种。但该类微生物多采用纯液体发酵,发酵过程中需要不断通气和搅拌以保证溶氧,且液体发酵含水量高达80%以上,干燥处理能耗较高,液体发酵产出的DHA属多不饱和脂肪酸容易被氧化,需要进一步包埋处理。
因此,需对现有技术中利用微生物生产DHA的方法进行改进。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种微生物发酵制备功能性饲料的方法,该方法简单,采取固液体发酵结合工艺,通过发酵周期有效控制功能性饲料中DHA的含量和蛋白质含量,成本低廉、能耗低、设备损坏小、无废水废弃物产生,发酵后处理工段简单,解决了发酵菌体直接造粒难的问题。
本发明的第二目的在于提供一种功能性饲料,该饲料含有丰富的DHA和蛋白质,营养价值高,可改善动物的生产性能以及动物产品的品质。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的:
本发明提出一种微生物发酵制备功能性饲料的方法,包括以下步骤:将微生物菌种于液体培养基中第一次发酵36-48h,然后接种至固体培养基中第二次发酵100-140h。
微生物菌种为具有产DHA的能力的微生物。
较佳地,微生物菌种包括裂殖壶菌、破囊壶菌、双鞭甲藻和酵母菌中的任意一种。
液体培养基的成分包括葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐。
固体培养基的成分包括蛋白类物质、无机盐和维生素。
本发明还提出一种功能性饲料,该功能性饲料可采用上述制备方法制备而得。
本发明较佳实施例中微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料的有益效果是:
通过先利用液体发酵给予裂殖壶菌较好的生长环境,待其菌体浓度较高时,进行无菌浓缩富集并转接于固体培养基中继续发酵的方式,可使发酵过程中无需不断通气和搅拌,避免了常规发酵过程中采用的纯液体发酵所带来的操作复杂以及能耗成本高等问题。蛋白类物质主要作为氮源供裂殖壶菌利用,且所选用的蛋白类物质均含有丰富的蛋白质,原料来源相对容易且成本较低。
由上述方法得到的功能性饲料含有丰富的DHA和蛋白质,营养价值高,可提高动物饮食的营养价值,改善动物的生产性能以及动物产品的品质。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的微生物发酵制备功能性饲料的方法及功能性饲料进行具体说明。
本发明实施例提供了一种利用微生物发酵制备功能性饲料的方法,例如可以包括以下步骤:将微生物菌种于液体培养基中第一次发酵,然后接种至固体培养基中第二次发酵。通过先利用液体发酵给予裂殖壶菌较好的生长环境,待其菌体浓度较高时,进行无菌浓缩富集并转接于固体培养基中继续发酵。由此,发酵过程中无需不断通气和搅拌,从而避免了常规发酵过程中采用的纯液体发酵所带来的操作复杂以及能耗成本高等问题。
上述微生物菌种为具有产DHA的能力的微生物,作为可选地,例如可以为裂殖壶菌、破囊壶菌、双鞭甲藻和酵母菌中的任意一种。作为可选地,上述液体培养基的成分例如可以包括葡萄糖、无机盐、谷氨酸钠和/或酵母浸膏。其中,葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐在液体培养基中的质量百分数例如可以依次为5-7wt%、2-4wt%、0.8-1wt%和3-5wt%,优选为6wt%、3wt%、0.9wt%和4wt%。
较佳地,无机盐例如可以包括0.5-0.7wt%的磷酸盐、0.7-0.9wt%的硫酸盐、1.5-2.5wt%的钠盐和0.02-0.04wt%的氯化钙等。优选地,无机盐包括0.6wt%的磷酸二氢钾、0.8%wt%的硫酸镁、2wt%的氯化钠、0.03wt%的氯化钙以及0.44wt%的硫酸钠。
作为可选地,上述固体培养基的成分例如可以包括蛋白类物质、无机盐和维生素。优选地,蛋白类物质例如可以包括玉米、小麦和黄豆及其衍生物和加工副产物,在本发明实施例中,玉米可以以玉米淀粉以及玉米浆干粉为例,小麦可以以小麦麸皮为例,黄豆可以以黄豆饼粉为例。该类蛋白类物质主要作为氮源供裂殖壶菌利用,均含有丰富的蛋白质。此外,该类蛋白类物质能够较好地增加培养基之间的孔隙率,使各物料成分之间具有一定的孔隙,以提高培养过程中的传氧传质效果。
此外,蛋白类物质还可以包括原料来源相对容易且成本较低的木糖渣、螺旋藻粉和羽毛粉中的至少一种。
较佳地,固体培养基可以含有质量比为10-14:38-42:8-12:8-12:3-5:3-5的玉米淀粉、小麦麸皮、黄豆饼粉、玉米浆干粉、无机盐和维生素。更佳地,玉米淀粉、小麦麸皮、黄豆饼粉、玉米浆干粉、无机盐和维生素的质量比为12:40:10:10:4:4。
其中,无机盐的种类可参照液体培养基,维生素例如可以包括0.8-1.2wt%的硫胺素、0.2-0.4wt%的泛酸钙、0.004-0.008wt%的生物素以及0.01-0.02wt%的氰钴胺。优选地,维生素包括1.0wt%的硫胺素、0.3wt%的泛酸钙、0.006wt%的生物素以及0.015wt%的氰钴胺。
为了给固体培养基中的裂殖壶菌提供良好的生长和发酵环境,本发明实施例在固体培养基中还加入有与玉米淀粉质量比为10-14:18-22的水,以得到蓬松的营养生长环境,避免固体培养基过于干燥和硬实。接种裂殖壶菌前,还可将混合后的固体培养基的成分于95-100℃的条件下蒸煮10-20min,以使固体培养基中的颗粒成分得以均匀分散,更利于培养基中不同位置的裂殖壶菌的生长。蒸煮后高温灭菌至少20min。
将裂殖壶菌接种于液体培养基中,于26-30℃的条件下第一次发酵36-48h。
优选地,第一次发酵的温度为27-29℃,更优地,为28℃。具体地,第一次发酵的温度可以为26℃、26.5℃、27℃、27.5℃、28℃、28.5℃、29℃、29.5℃和30℃。
优选地,第一次发酵的时间为40-44h,更优地,为42h。具体地,第一次发酵的时间可以为36h、38h、40h、42h、44h、46h和48h。
将第一次发酵后所得的物质离心浓缩,收集浓缩后的菌体转接于固体培养基中,于26-30℃的条件下第二次发酵100-140h。
优选地,第二次发酵的温度也为27-29℃,更优地,为28℃。具体地,第二次发酵的温度也可以为26℃、26.5℃、27℃、27.5℃、28℃、28.5℃、29℃、29.5℃和30℃。
优选地,第二次发酵的时间为110-130h,更优地,为120h。具体地,第一次发酵的时间可以为110h、115h、120h、125h、130h、135h和140h。
作为可选地,固体培养基中菌体的接种量例如可以为固体培养基的10-30wt%,优选为15-25wt%,更优为20wt%。按上述优选的接种量接种,可使固体培养基与菌体达到最佳平衡,避免出现菌体发酵所需的营养物质过多或过少导致发酵效果和发酵产物欠佳的情况。
较佳地,第二次发酵过程中每隔10-14h翻动固体培养基一次,每次翻动例如可以持续5-10min。具体地,每次翻动均可按照以下方式进行:在无菌操作室中用无菌铲和无菌涂布棒相结合的方法进行翻动,先用无菌铲铲动培养基,然后用涂布棒进行均匀涂布,来回翻动2-3回合,共计翻动5-10min,需注意的是,翻动过程中保证无菌。
通过在第二次发酵过程中对固体培养基进行翻动,不仅能能够防止培养基结团,还能够使菌体和营养物质充分接触,达到蓬松的环境,也即固体培养基中容纳有一定的空气与水,形成由固、液、气三相构成的适合裂殖壶菌生长繁殖的环境,并利于溶氧。
进一步地,本发明实施例中于翻动过程中向固体培养基中补充无菌水,可选地,无菌水的补充量为固体培养基的5-10wt%,例如可以为5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%和10wt%。较佳地,不同发酵时期补水量不同,因发酵前期时间较短,补水量可相对少一些,发酵中后期时间长且水分挥发多,因此该发酵时期可相对加大补水量。通过于翻动过程中补充无菌水,一方面可辅助防止培养基结团,另一方面可利于水作为固体发酵的传质介质,在发酵中使固、液、气三种状态达到相平衡,以获得良好的发酵环境,使裂殖壶菌得以较好的生长。
经上述方法得到的培养基和菌体均具有满足造粒工艺要求的粘度和表面状态,从而解决了现有技术中仅经纯液体发酵所得的菌体存在的发酵废液处理难、干燥程度低、造粒困难以及菌体不能循环利用的缺陷,同时还补充了高蛋白的营养成分。
鉴于此,在工业生产中,可直接将经本发明实施例提供的发酵方法中第二次发酵所得的固体培养基与菌体进行干燥、粉碎和造粒,得到做成富含DHA及高蛋白的功能性产物。
干燥和粉碎可在微波干燥机中进行,干燥至待干燥物质无明显水分并呈干燥粉末状即可。较佳地,干燥过程中的干燥功率不低于5kw、干燥温度为90-110℃、干燥时间为0.5-2h。造粒指标按照饲料通用指标即可。
经测定,由上述制备方法制备而得的功能性产物具有以下特性:DHA含量为8wt%-30wt%、蛋白含量为30wt%-80wt%、粗纤维含量低于10wt%。较佳地,上述功能性产物的DHA含量为10wt%-20wt%、蛋白含量为40wt%-60wt%、粗纤维含量低于5wt%。
进一步地,上述功能性产物的颗粒度为0.8-6mm、水分含量不超过10wt%、碳氮比为(15-30):1。
可选地,本发明实施例中的功能性饲料可以直接为上述功能性产物,也可以经上述功能性产物与普通饲料混合而得。
具体地,上述功能性饲料可以为动物饲料或海产饲料以应用于动物或海产的养殖。将上述动物饲料或海产饲料应用于动物或海产的养殖中,可提高动物或海产的饮食营养价值,改善动物或海产的生产性能以及产品品质。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
将裂殖壶菌接种于液体培养基中,于26℃的条件下第一次发酵48h,然后离心浓缩,收集浓缩后的菌体。于固体培养基中加入水,于95℃的条件下蒸煮20min,灭菌20min。按接种量为10wt%将浓缩后的菌体转接于固体培养基中,于26℃的条件下第二次发酵140h。将第二次发酵所得的培养基与菌体在干燥功率为5kw、干燥温度为90℃的微波干燥机中干燥粉碎2h,然后造粒,得到功能性饲料。
第二次发酵中每隔10h翻动固体培养基一次,每次翻动例如可以持续5min。翻动过程中按固体培养基的5wt%向固体培养基中补充无菌水。
其中,液体培养基含有5wt%、2wt%、0.8wt%和3wt%的葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐,无机盐含有0.5wt%的磷酸二氢钾、0.7wt%的硫酸镁、1.5wt%的氯化钠、0.02wt%的氯化钙以及0.40wt%的硫酸钠。
固体培养基含有质量比为10:38:8:8:3:3的玉米、小麦、黄豆、玉米浆干粉、无机盐和维生素。无机盐与液体培养基所用的相同。维生素含有0.8wt%的硫胺素、0.2wt%的泛酸钙、0.004wt%的生物素以及0.01wt%的氰钴胺。蒸煮前固体培养基中所加的水与所含的玉米淀粉的质量比为10:18。
实施例2
将裂殖壶菌接种于液体培养基中,于30℃的条件下第一次发酵36h,然后离心浓缩,收集浓缩后的菌体。于固体培养基中加入水,于100℃的条件下蒸煮10min,灭菌30min。按接种量为30wt%将浓缩后的菌体转接于固体培养基中,于30℃的条件下第二次发酵100h。将第二次发酵所得的培养基与菌体在干燥功率为10kw、干燥温度为110℃的微波干燥机中干燥粉碎0.5h,然后造粒,得到功能性产物。将上述功能性产物与普通饲料混合,得到功能性饲料。
第二次发酵中每隔14h翻动固体培养基一次,每次翻动例如可以持续10min。翻动过程中按固体培养基的10wt%向固体培养基中补充无菌水。
其中,液体培养基含有7wt%、4wt%、1wt%和5wt%的葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐,无机盐含有0.7wt%的磷酸二氢钾、0.9wt%的硫酸镁、2.5wt%的氯化钠、0.04wt%的氯化钙以及0.48wt%的硫酸钠。
固体培养基含有质量比为14:42:12:12:5:5的玉米淀粉、小麦麸皮、黄豆饼粉、玉米浆干粉、无机盐和维生素。无机盐与液体培养基所用的相同。维生素含有1.2wt%的硫胺素、0.4wt%的泛酸钙、0.008wt%的生物素以及0.02wt%的氰钴胺。蒸煮前固体培养基中所加的水与所含的玉米淀粉的质量比为14:22。
实施例3
将裂殖壶菌接种于液体培养基中,于27℃的条件下第一次发酵44h,然后离心浓缩,收集浓缩后的菌体。于固体培养基中加入水,于98℃的条件下蒸煮15min,灭菌30min。按接种量为15wt%将浓缩后的菌体转接于固体培养基中,于27℃的条件下第二次发酵130h。将第二次发酵所得的培养基与菌体在干燥功率为12kw、干燥温度为100℃的微波干燥机中干燥粉碎1h,然后造粒,得到功能性产物。将上述功能性产物与普通饲料混合,得到功能性饲料。
第二次发酵中每隔12h翻动固体培养基一次,每次翻动例如可以持续7.5min。翻动过程中按固体培养基的7wt%向固体培养基中补充无菌水。
其中,液体培养基含有6wt%、3wt%、0.9wt%和4wt%的葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐,无机盐含有0.6wt%的磷酸二氢钾、0.8%wt%的硫酸镁、2wt%的氯化钠、0.03wt%的氯化钙以及0.44wt%的硫酸钠。
固体培养基含有质量比为12:40:10:10:4:4的玉米淀粉、小麦麸皮、黄豆饼粉、玉米浆干粉、无机盐和维生素。无机盐与液体培养基所用的相同。维生素含有1.0wt%的硫胺素、0.3wt%的泛酸钙、0.006wt%的生物素以及0.015wt%的氰钴胺。蒸煮前固体培养基中所加的水与所含的玉米淀粉的质量比为12:20。
实施例4
将裂殖壶菌接种于液体培养基中,于29℃的条件下第一次发酵40h,然后离心浓缩,收集浓缩后的菌体。于固体培养基中加入水,于98℃的条件下蒸煮15min,灭菌30min。按接种量为25wt%将浓缩后的菌体转接于固体培养基中,于29℃的条件下第二次发酵110h。将第二次发酵所得的培养基与菌体在干燥功率为15kw、干燥温度为105℃的微波干燥机中干燥粉碎1h,然后造粒,得到功能性产物。将上述功能性产物与普通饲料混合,得到功能性饲料。
第二次发酵中每隔12h翻动固体培养基一次,每次翻动例如可以持续7.5min。翻动过程中按固体培养基的8wt%向固体培养基中补充无菌水。
其中,液体培养基含有6wt%、3wt%、0.9wt%和4wt%的葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐,无机盐含有0.6wt%的磷酸二氢钾、0.8%wt%的硫酸镁、2wt%的氯化钠、0.03wt%的氯化钙以及0.44wt%的硫酸钠。
固体培养基含有质量比为12:40:10:10:4:4的玉米淀粉、小麦麸皮、黄豆饼粉、玉米浆干粉、无机盐和维生素。无机盐与液体培养基所用的相同。维生素含有1.0wt%的硫胺素、0.3wt%的泛酸钙、0.006wt%的生物素以及0.015wt%的氰钴胺。蒸煮前固体培养基中所加的水与所含的玉米淀粉的质量比为12:20。
实施例5
将裂殖壶菌接种于液体培养基中,于28℃的条件下第一次发酵42h,然后离心浓缩,收集浓缩后的菌体。于固体培养基中加入水,于98℃的条件下蒸煮15min,灭菌30min。按接种量为20wt%将浓缩后的菌体转接于固体培养基中,于28℃的条件下第二次发酵120h。将第二次发酵所得的培养基与菌体在干燥功率为8kw、干燥温度为95℃的微波干燥机中干燥粉碎1.5h,然后造粒,得到功能性产物。将上述功能性产物与普通饲料混合,得到功能性饲料。
第二次发酵中每隔12h翻动固体培养基一次,每次翻动例如可以持续7.5min。翻动过程中按固体培养基的7.5wt%向固体培养基中补充无菌水。
其中,液体培养基含有6wt%、3wt%、0.9wt%和4wt%的葡萄糖、谷氨酸钠、酵母浸膏和无机盐,无机盐含有0.6wt%的磷酸二氢钾、0.8%wt%的硫酸镁、2wt%的氯化钠、0.03wt%的氯化钙以及0.44wt%的硫酸钠。
固体培养基含有质量比为12:40:10:10:4:4的玉米淀粉、小麦麸皮、黄豆饼粉、玉米浆干粉、无机盐和维生素。无机盐与液体培养基所用的相同。维生素含有1.0wt%的硫胺素、0.3wt%的泛酸钙、0.006wt%的生物素以及0.015wt%的氰钴胺。蒸煮前固体培养基中所加的水与所含的玉米淀粉的质量比为12:20。
实施例6
本实施例与实施例5的区别在于所用的微生物菌种为破囊壶菌。
实施例7
本实施例与实施例5的区别在于所用的微生物菌种为双鞭甲藻。
实施例8
本实施例与实施例5的区别在于所用的微生物菌种为酵母菌。
实施例9
本实施例与实施例5的区别在于固体培养基中的蛋白类物质还含有木糖渣。木糖渣与玉米淀粉的质量比为4-6:10-14。
实施例10
本实施例与实施例5的区别在于固体培养基中的蛋白类物质还含有木糖渣和螺旋藻粉。木糖渣、螺旋藻粉与玉米淀粉的质量比为2-3:1-2:10-14。
实施例11
本实施例与实施例5的区别在于固体培养基中的蛋白类物质还含有木糖渣、螺旋藻粉和羽毛粉。木糖渣、螺旋藻粉、羽毛粉与玉米淀粉的质量比为1-2:1-2:1-2:10-14。
实施例12
本实施例提供一种动物饲料,该动物饲料含有上述实施例1-11所得的功能性饲料。
实施例13
本实施例提供一种海产饲料,该海产饲料含有上述实施例1-11所得的功能性饲料。
实施例14
本实施例提供一种婴儿奶粉,该婴儿奶粉含有上述实施例1-11所得的功能性饲料。
试验例1
重复实施上述实施例2-11,得到足够多的功能性饲料。以实施例5-8为例,设置对照组1-4,对照组1-4分别对应实施例5-8,对照组与实施例的区别在于对照组采用现有的纯液体发酵方式(参照专利CN104312929B),对比实施例5-8以及对照组1-4所得的功能性饲料中DHA和蛋白质的含量(以DHA/蛋白质占功能性饲料的重量百分比计),其结果如表1和表2所示。
表1 DHA和蛋白质的含量(%)
表2 DHA和蛋白质的含量(%)
结合表1与表2可以看出,由实施例5-8所得的功能性饲料较对照组1-4所得的功能性饲料,DHA和蛋白质的含量均明显更高。说明本发明实施例提供的制备方法(固液体发酵结合工艺)较现有技术的纯液体发酵工艺,能够发酵产生更多的DHA和蛋白质。
并且,实施例5较实施例6-8所得的功能性饲料的DHA和蛋白质的含量更高,说明在裂殖壶菌、破囊壶菌、双鞭甲藻和酵母菌中本发明方案尤其适于裂殖壶菌。
试验例2
以试验例1中实施例5和对照组1的功能性饲料为例,比较其饲料特性如表3所示。
表3 饲料特性
由表3可以看出,本发明实施例提供的制备方法(固液体发酵结合工艺)较现有技术的纯液体发酵工艺制备所得的功能性饲料具有更优的饲料特性,并有效解决了目前该技术领域造粒困难的问题。
此外,按同样方法对实施例6-8与对照组2-3进行对比,其结果同样显示固液体发酵结合工艺较纯液体发酵工艺能得到特性更优的饲料添加剂,且并未出现造粒困难的问题。
注:上述实施例5-8所得的功能性饲料的DHA含量范围为8wt%-30wt%、蛋白含量范围为30wt%-80wt%、粗纤维含量不超过10wt%、颗粒度范围为0.8-6mm、水分含量均不超过10wt%、碳氮比范围为(15-30):1。
试验例3
以实施例12为例,将实施例12提供的动物饲料代替常用饲料用于饲喂猪,其余养殖条件均不变,养殖30天,比较用实施例12养殖后猪的日均增重较用常用饲料养殖后猪的日均增重。另,将实施例13提供的海产饲料代替常用饲料用于饲喂白鲢,其余养殖条件均不变,养殖15天,比较用实施例13养殖后白鲢的日均增重较用常用饲料养殖后白鲢的日均增重。其结果如表4所示。
表4 日均增重
由表4可以看出,采用本发明实施例提供的含有功能性饲料的动物饲料或海产饲料养殖猪或白鲢,能较常用饲料养殖猪或白鲢明显提高其日均增重,也即提高了饲料利用率。
综上所述,本发明实施例的微生物发酵制备功能性饲料的方法简单,采取固液体发酵结合工艺,通过发酵周期有效控制功能性饲料中DHA的含量和蛋白质含量,成本低廉、能耗低、设备损坏小、无废水废弃物产生,发酵后处理工段简单,解决了发酵菌体直接造粒难的问题。由上述方法得到的功能性饲料含有丰富的DHA和蛋白质,营养价值高,可提高动物饮食的营养价值,改善动物的生产性能以及动物产品的品质。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

Claims (11)

1.一种微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,包括以下步骤:将微生物菌种于液体培养基中第一次发酵36-48h,然后接种至固体培养基中第二次发酵100-140h;
所述微生物菌种为具有产DHA的能力的微生物;
所述液体培养基的成分包括葡萄糖、无机盐、谷氨酸钠和酵母浸膏;
所述固体培养基的成分包括蛋白类物质、无机盐和维生素。
2.根据权利要求1所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,所述微生物菌种包括裂殖壶菌、破囊壶菌、双鞭甲藻和酵母菌中的任意一种。
3.根据权利要求1所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,第一次发酵与第二次发酵的温度均为26-30℃;
优选地,第一次发酵与第二次发酵的温度均为27-29℃;
更优地,第一次发酵与第二次发酵的温度均为28℃。
4.根据权利要求1所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,第二次发酵过程中每隔10-14h翻动所述固体培养基一次,每次翻动持续5-10min。
5.根据权利要求4所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,翻动过程中向所述固体培养基中补充无菌水;
优选地,所述无菌水的补充量为所述固体培养基的5-10wt%。
6.根据权利要求1所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,接种所述微生物菌种前,将混合后的所述固体培养基的所述成分于95-100℃的条件下蒸煮10-20min。
7.根据权利要求1所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,接种量为所述固体培养基的10-30wt%;
优选地,所述接种量为所述固体培养基的15-25wt%;
更优地,所述接种量为所述固体培养基的20wt%。
8.根据权利要求1所述微生物发酵制备功能性饲料的方法,其特征在于,还包括将第二次发酵所得的固体培养基与菌体进行干燥、粉碎和造粒;
优选地,干燥功率不低于5kw,干燥温度为90-110℃,干燥时间为0.5-2h。
9.一种功能性饲料,其特征在于,所述功能性饲料的DHA含量为8wt%-30wt%、蛋白含量为30wt%-80wt%、粗纤维含量低于10wt%。
10.根据权利要求9所述功能性饲料,其特征在于,所述功能性饲料的所述DHA含量为10wt%-20wt%、所述蛋白含量为40wt%-60wt%、所述粗纤维含量低于5wt%。
11.根据权利要求9或10任一项所述功能性饲料,其特征在于,所述功能性饲料的颗粒度为0.8-6mm、水分含量不超过10wt%、碳氮比为(15-30):1。
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