CN107941681B - 鉴定生物样品中定量细胞组成的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了鉴定生物样品中细胞组成的定量、综合性图像的表观遗传血象，又被称为表观遗传血细胞计数，其中有利的是使用了归一化标准物。所述归一化标准物为核酸分子，其包含对待检测的每种血细胞特异的至少一种标志物区域，以及为细胞非特异的至少一种对照区域，其中所述区域以相同拷贝数存在于所述分子和/或已知组成的天然血细胞样品中。此外，本发明涉及实施生物样品的综合性定量细胞组成的表观遗传评估的试剂盒以及试剂盒的用途。所述生物样品来源于，例如哺乳动物体液，包括外周血样品、毛细管血样品或静脉血样品或其亚组分，如外周血单个核细胞或外周血单核细胞，或者组织样品，器官样品，或者来源于冷冻的、干燥的、包埋的、保存的或新鲜的体液或组织样品。

Description

鉴定生物样品中定量细胞组成的方法

本发明提供了鉴定生物样品中细胞组成的定量、综合性图像的表观遗传血象，又被称为表观遗传血细胞计数，其中有利的是，使用了归一化标准物。所述归一化标准物为核酸分子，其包含对待检测的每种血细胞和/或免疫细胞特异的至少一种标志物区域以及为细胞非特异的至少一种对照区域，其中所述区域以相同拷贝数存在于所述分子和/或已知组成的天然血细胞样品中。此外，本发明涉及进行生物样品的综合性定量细胞组成的表观遗传评估的试剂盒以及试剂盒的用途。所述生物样品来源于，例如哺乳动物体液，包括外周血样品、毛细管血样品或静脉血样品或其亚组分，如外周血单个核细胞或外周血单核细胞，或组织样品、器官样品，或来源于冷冻的、干燥的、包埋的、保存的或新鲜的体液或组织样品。

发明背景

“血细胞计数”、“全血细胞计数”或“血细胞概况”通常指确定血细胞和/或其细胞亚群(例如，嗜中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、 CD19或CD3细胞及其亚群，如CD3⁺CD4⁺和/或CD3⁺/CD8⁺细胞)的数目、比率和形态的一组测试。这样的血细胞计数在临床诊断中被用作病症的广泛筛选测试或个体一般健康状况的确定。通常，“血细胞计数”包括涉及血细胞比容、血红蛋白的定量、总血细胞和红血细胞指标(例如，平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白、平均红细胞血红蛋白浓度、红血细胞分布)的测定。

白血细胞(也称为白细胞)为细胞免疫***(我们将所有免疫细胞，包括B-细胞明确定义为细胞免疫***)的一部分，且不仅在防御哺乳动物免于外来生物体(特别是例如：病毒、细菌、寄生虫等)引起的病理效应，而且在防御哺乳动物免于来自患病的自体细胞(如肿瘤细胞)畸变中起重要作用。另外，免疫细胞自身经受疾病，作为原发性(先天性)免疫疾病如IPEX综合征，或作为继发性(获得性)免疫疾病如，例如AIDS，HIV。在前者中，免疫***自身受损，然而，在后者中，外界因素(如病毒感染、辐射、化学疗法或环境因素)导致削弱免疫***。存在若干类型的白细胞，它们来源于髓系-例如嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞-或者来源于淋巴系，包括所有淋巴细胞亚群–如，例如T-细胞、B-细胞、NK细胞。因为已经对免疫***的成分及其细胞膜进行了许多分析，所以该正常免疫细胞计数(或比率)的失常易于被认可，被用于诊断中且可用于临床决策。因此，在临床背景中定期分析这些细胞的比率和计数–作为常规诊断工具或分析工具以及在临床研究或试验中–以便检测可由疾病或者疾病治疗或者其它内部或外部因素引起的任何异常或明显变化。例如，血细胞计数被用于诊断白细胞减少症或淋巴细胞减少症或者白细胞增多症或淋巴细胞增多症(如粒细胞增多症)的发作/出现。此外，进行血细胞计数以监测所有疾病的治疗成功，所述疾病由总体或特异性白细胞计数或淋巴细胞计数的变化导致、引起，或者所述疾病的治疗导致总体或特异性白细胞计数或淋巴细胞计数的变化。例如，针对诊断或监测感染、贫血、白血病或化学疗法的效果，使用所谓的全血细胞“分类”计数以便分析和鉴别免疫细胞及其亚群。在一些原发性免疫病症和继发性免疫病症中，该程序可为唯一可用的诊断工具。白细胞分类计数包括针对总白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的定量的测定。

通常地，对于可溶性细胞，即主要为血液还有可溶性组织或体液，这样的特异性免疫细胞概况通过流式细胞术或通过免疫组织化学(IHC，针对固体组织)来测量。两种技术都基于暴露于细胞膜上的蛋白质表位起作用，所述蛋白质表位对细胞亚群的每种亚型为特异的。最近，研究集中于白细胞亚群的生物学作用，这导致允许鉴别这种群体的临床应用及研究应用的强烈需求。

技术上，在常规诊断学中，通过基于光检测和电阻抗的自动细胞计数仪来确定血细胞比容、血红蛋白以及总白细胞计数。经由血液涂片的手动显微计数或自动计数来确定白细胞分类计数，包括嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞和肥大细胞。

允许检测T细胞群的其它方法为MHC多度量分析、细胞因子捕获分析、个别T细胞检测(ELISPOT-测定法)或仅定性检测和定位免疫细胞 (免疫组织化学分析)。如流式细胞术，这些测定基于蛋白质的检测；未使用独立于特异性表达水平的标志物。值得注意的是，所有这些测定以及基于mRNA检测的所有测定在细胞之间是不同的。这是因为即使对某种蛋白质无疑为阳性的细胞仍存在以时间方式变化量的蛋白质。因此，根据给定抗体的亲和力和非特异性结合性质以及靶蛋白的表面表达的平均量，必须确定各种和每种蛋白质标记物的“阳性”阈值。

即使个体中几乎所有细胞含有完全相同的DNA密码互补/组成，高等生物体必须在不同类型的组织中利用且维持不同的基因表达模式。大多数基因调控为瞬时的，这取决于当前的细胞状态以及外界刺激的变化。另一方面，持续性调控为表观遗传学的主要作用-不会改变DNA的基本遗传密码的可遗传调控模式。DNA甲基化为表观遗传调控的典型形式；其充当细胞的稳定记忆且在维持不同细胞类型的长期身份中起重要作用。最近，发现了表观遗传调控的其它形式。除了“第五碱基”5-甲基胞嘧啶(mC)之外，可找到第六(5-羟甲基胞嘧啶，hmC)、第七(5-甲酰基胞嘧啶，fC)和第八(5-羧基胞嘧啶，cC)(Michael J.Booth等.Quantitative Sequencing of 5-Methylcytosine and 5-Hydroxymethylcytosine atSingle-Base Resolution Science,2012年5月18日,第336卷,6083期, 934-937页)。所提及的DNA修饰的主要靶标为两个核苷酸序列胞嘧啶- 鸟嘌呤(“CpG位点”)；在该上下文中，胞嘧啶(C)可经历简单的化学修饰以变成甲酰化的、甲基化的、羟甲基化的或羧化的。在人基因组中，除了在被称为“CpG岛”的某些相对密集簇之外，CG序列比预期更罕见。 CpG岛通常与基因启动子相关，估计多于一半的人基因具有CpG岛 (Antequera and Bird,ProcNatl Acad Sci USA 90:11995-9,1993)。

对于最近描述的一种胞嘧啶修饰，5-羟甲基化，显示了对CpG岛处的5hmC作图且定量的氧化亚硫酸氢盐测序的效用(Michael J.Booth等. Quantitative Sequencing of 5-Methylcytosine and 5-Hydroxymethylcytosine at Single-Base Resolution Science,2012年5月18日,第336卷,6083期, 934-937页)。

在本发明的上下文中，术语“亚硫酸氢盐可转化的染色质”应意指允许亚硫酸氢盐化学修饰胞嘧啶的染色质结构(例如，充分打开的结构)。因此，术语“DNA亚硫酸氢盐可转化性”涉及使用亚硫酸氢盐处理，在所述染色质中和/或为所述染色质的一部分的各个核酸中的胞嘧啶碱基可以(或已经)被转化的程度。术语还涉及使用亚硫酸氢盐处理，在参考核酸(如质粒)中的胞嘧啶碱基可以(或已经)被转化的程度。反过来，术语“亚硫酸氢盐不可转化的染色质”或“亚硫酸氢盐不可转化的核酸”涉及使用亚硫酸氢盐处理，胞嘧啶碱基不可以(或不能)被转化的程度。

如上文所提及的，最近发现了三种新的胞嘧啶修饰。因此，预期将来的科学发现将对过去所述的亚硫酸氢盐可转化性的表观遗传模式产生更精确的解释。胞嘧啶修饰的这些过去结果涵盖亚硫酸氢盐可转化的(未甲基化的，未修饰的)胞嘧啶以及不可转化的(甲基化的，修饰的)胞嘧啶。如所述，两个术语需要被重新解释。根据新的科学发现(i)亚硫酸氢盐不可转化的胞嘧啶涵盖5-甲基胞嘧啶(mC)和5-羟甲基胞嘧啶(hmC)，以及(ii) 亚硫酸氢盐可转化的胞嘧啶涵盖5-甲酰基胞嘧啶(fC)、5-羧基胞嘧啶(cC) 以及未修饰的胞嘧啶。

另外，早期发明基于(i)亚硫酸氢盐可转化的胞嘧啶与染色质总量的比率(不依赖于细胞类型的，100％亚硫酸氢盐可转化的DNA基因座)，或者(ii)亚硫酸氢盐可转化的胞嘧啶(fC，cC，未修饰的胞嘧啶)与亚硫酸氢盐不可转化的胞嘧啶(hmC和mC)的比率。这些比率被用于表征细胞类型、细胞分化、细胞阶段以及病理性细胞阶段。因此，新技术将产生新的、更多的特定比率，可以补充当前的细胞特异性、细胞期特异性以及表观遗传修饰的病理模式，因此，定义了潜在的新型生物标志物。待发现为生物标志物的新比率可定义为：

生物标志物比率＝a/b

a＝∑(C和/或mC和/或hmC和/或fC和/或cC)

b＝∑(C和/或mC和/或hmC和/或fC和/或cC)，

由此，通过一至四种修饰，a和b彼此不同。新的DNA修饰的发现必定会扩展该列举。

出于本申请的目的，DNA序列中的表观遗传修饰通过以下术语指明：(i)亚硫酸氢盐可转化的胞嘧啶(5-甲酰基胞嘧啶(fC)和/或5-羧基胞嘧啶(cC))，以及(ii)亚硫酸氢盐不可转化的胞嘧啶((包括5-甲基胞嘧啶 (mC)，5-羟甲基胞嘧啶(hmC))。因为两种甲基化，mC和hmC是亚硫酸氢盐不可转化的，所以区分这两者是不可能的。同样，fC、cC以及未修饰的胞嘧啶为亚硫酸氢盐可转化的，也不可能彼此区分。

此外，除DNA修饰之外，组蛋白也经历改变其与DNA和核酸蛋白质相互作用的翻译后修饰。修饰包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、 sumoylation、瓜氨酸化和ADP-核糖基化。也可修饰组蛋白H2A、H2B 和H3的核心。组蛋白修饰在不同的生物学过程中起作用，如基因调控、 DNA修复、染色体浓缩(有丝***)和***发生(减数***)。另外，对于这些修饰，修饰的特定模式对不同的细胞类型、细胞阶段、分化状态是特异的，可分析亚硫酸氢盐可转化性的这种模式或相似方法，以便鉴定某些细胞和细胞阶段。本发明也涵盖这些修饰的应用。

预期未来将发现DNA修饰的其它变体。每种修饰类型应为亚硫酸氢盐-可转化的或亚硫酸氢盐-不可转化的。也可将这些新的修饰用作生物标志物读出。另外，预期将建立亚硫酸氢盐修饰的新方法，从而产生可转化的DNA和不可转化的DNA的不同组。

报道临床上或分析上有用的细胞免疫状态的适应症种类非常多。对于几乎每种疾病，细胞免疫状态直接相关或者由于可以引起继发性免疫病症和畸变的药物影响而变得相关(如在癌症中)。疾病背景中总体免疫状态的这种广泛意义产生对测量这些参数(即，白细胞亚型和亚群)的方法的明显需求。

解决该需求的当前方式为通过流式细胞术和免疫组织化学方法，其为已经确立的且已经开发为供医院使用的高通量***，为参考实验室中的标准程序，以及对于更多简单应用，为医师可用的。然而，某些问题和要求限制了流式细胞术和免疫组织化学的可应用性。

a)对于流式细胞术，细胞需要为完整的。这意味着血样必须以“新鲜”状态测量，测量的任何延迟可以导致结果偏差。一般说来，应在8小时内测量样品，因为在该时间范围以后，粒细胞(血液中的一种主要细胞成分)开始裂解。作为新鲜处理的替代选择，可以是冷藏保存的血样，但存在与性能和可重复性相关的重要问题。因此，在临床常规中避免流式细胞术且省略许多可能有意义的分析，然而在临床试验中，免疫标志物为治疗预测的主要生物标志物备选物，经常被忽略，或者如果调控需要的话，则需要配置额外的设备。

b)抗原表达不是数字化过程(开–关)，而是模拟过程(低、中、高)。因此，必须确定限定阳性信号对比阴性信号的阈值。对于某些标志物，这是没有问题的，而对于其它标志物，阈值非常难且不精确。

c)对于流式细胞术，其也造成问题：许多细胞类型不能通过表面(分化簇–CD)分子简单鉴定，但是一些细胞类型的特征在于胞内或胞外可溶性蛋白质，例如转录因子或细胞因子。当前针对Tfh、Th1、Th2细胞和 Tregs的标志物属于这种类别的细胞类型–完全归一化程序的应用甚至更困难。这是因为细胞类型特异性标志物需要被捕获以便与细胞相关联。

d)此外，流式细胞术依赖于所分析底物(细胞悬液)的溶解性。关于这一点，可以通过酶消化溶解组织细胞，但这经常导致其表面分子的丢失–使得作为流式细胞术分析的主要靶标的CD标志物无用。

e)通常，表面标志物、胞内标志物或胞外标志物均不是100％细胞类型特异的。已经报道了某些基因产物的“泄露”表达(Wiezcorek等,Cancer Res.2009年1月15日；69(2):599-608)，使得定量稍有不精确。

f)因为免疫组织化学基于与流式细胞术相同的原理，所以特异性问题重叠。然而，该技术的主要问题是其仅被视为半定量的。特别地，具体问题是由于存在各种不同的细胞层而使总细胞计数不可行，难于正确区分和计数。

就方面e)而言，发明人先前已经发表了出版物，证明了流式细胞术检测表达的表面表位，但其不能区分细胞类型特异性表位表达与不依赖于细胞类型的表位表达的诱导以及其不能检测当前不表达或较少表达某些表面标志物的特异性细胞。例如，CD4⁺CD25⁺CD45RA⁺T细胞的体外刺激产生高表达水平的FOXP3，然而FOXP3基因仍为甲基化的，因此无活性(Baron等,Epigenetics.2006年1月-3月；1(1):55-60)。另外，对于体外分化的Th17细胞，尽管存在高水平的IL-17A转录物，但未观测到 IL-17A启动子的脱甲基化(JansonP.C.J.等.Profiling of CD4+T cells with epigenetic immune lineage analysis.TheJournal of Immunology.2010, 92-102)。另一方面，公开了甲基化与标志物表达有关(Hamerman,Page, Pullen.Distinct methylation states of the CD8βgene inperipheral T cells and Intraepithelial Lymphocytes.The Journal of Immunology1997,P1240-1246； Janson P.C.J等.Profiling of CD4+T cells with epigeneticimmune lineage analysis.The Journal of Immunology.2010.92-102；Melvin等.Hypomethylation in IFN-Gamma Gen correlates with expression of IFN-G,including CD8cells.,Eur J Immunol.1995年2月；25(2):426-30；Landolfi MM等.CD2-CD4-CD8-lymph node T lymphocytes in MRL lpr/lpr mice are derived from a CD2+CD4+CD8+thymic precursor J Immunol.1993年7月 15日；151(2):1086-96；以及CarboneAM等.Demethylation in CD8suggests that CD4+derives from CD8+cells.Role ofmethylation pattern during cell development.Science.1988年11月25日；242(4882):1174-6)。

鉴于上文提及的在临床诊断和药学研究中的需求，期望提供样品中多种细胞类型的精确且综合性定量的新方法，以便建立更精确的且因此显著改善的血象。在阅读本公开，特别是以下实施例之后，其它目标和优势对本领域技术人员而言是明显的。

在其第一方面，该目标通过本发明用于产生表观遗传血象的方法来解决，其包括以下步骤：在表观遗传学上检测生物样品中的血细胞，以及使用归一化标准物定量所检测的所述血细胞，其中所述归一化标准物为核酸分子，其包括对待检测的每种血细胞特异的至少一种标志物区域以及为细胞非特异的至少一种对照区域，其中所述区域以相同拷贝数存在于所述分子和/或已知组成的天然血细胞样品中。

本发明的关键和基础为使用多种不同的细胞类型特异性亚硫酸氢盐- 可转化的DNA标志物。使用这些标志物用于单个血细胞类型和免疫细胞类型的鉴别和定量。

原则上，先前已表明基于已知的表观遗传程序如何进行细胞类型的定量和血细胞计数((Wiezcorek等,Cancer Res.2009年1月15 日；69(2):599-608,Sehouli等.Epigenetics.2011年2月；6(2):236-46)。简言之，对特异性修饰基因区域的细胞类型特异地(扩增且)计数，因此连同细胞类型特异性基因区域的相对种类一起定量。为提供独立的定量，接着将这两种测量结果置于相关联以提供给定(血液)样品中细胞类型的百分率部分：

细胞类型特异性基因组区域的亚硫酸氢盐可转化的DNA拷贝数/(细胞类型特异性基因组区域的亚硫酸氢盐可转化的DNA拷贝数)+(细胞类型特异性基因组区域的亚硫酸氢盐不可转化的DNA拷贝数)＝细胞类型％

可选择地，在给定样品中测量细胞类型特异性基因区域的亚硫酸氢盐可转化的DNA拷贝数，除以细胞类型非特异性基因区域的亚硫酸氢盐 -可转化的DNA拷贝数。使用完整地亚硫酸氢盐-可转化的细胞非特异的基因区域或者已知在所有细胞类型中一律为亚硫酸氢盐-不可转化的或亚硫酸氢盐-可转化的区域，通过测量所有DNA拷贝可确定后者。

细胞类型特异性基因组区域的亚硫酸氢盐可转化的DNA拷贝数/细胞类型非特异性基因组区域的亚硫酸氢盐可转化的DNA拷贝数＝细胞类型％

因此，当已知单个特异性亚硫酸氢盐-可转化的基因组标志物时，先前建立的***允许给定样品中的任何一种细胞类型的相对(百分率(％))定量。为此，可使用任何给定归一化的拷贝数或拷贝当量。所得到的所讨论细胞类型的百分率份额与用不同方法测量的细胞份额相关。此处，“相关”意味着-根据斯皮尔曼相关(Spearman correlation)-通过表观遗传学技术测量的最低份额对应于通过–例如–流式细胞术测量的最低份额。已经表明这样的体系非常稳定、技术上是稳健且可靠的。因此，只要存在实现的高度细胞特异性亚硫酸氢盐可转化的DNA标志物，在理论上，对拥有特异性亚硫酸氢盐可转化的基因组标志物区域的那些细胞的量做出准确且精确的测定应当是可能的。

已知根据RT-PCR成分，包括引物、探针和DNA纯度，实时(RT-)PCR 体系的效率和性能不同。因此，使用标准物以便说明在哪个Cp(交叉点) 或Ct(阈值循环)值可检测给定(已知)量的标准物DNA的问题。所述标准物DNA的稀释系列产生标准曲线，并允许差异进行的/有效的RT-PCR体系归一化。因为定量在等效体系中进行，所以使性能的差异归一化。然而，解决的问题涉及对DNA进行(RT-)PCR，其旨在检测生物学上和/或化学上改变的DNA。这种生物学上和/或化学上改变的DNA的复杂性不同于正常/天然基因组DNA(由以下简单事实开始：DNA分子的复杂性不同，因为质粒由四个碱基(CTGA)的双链DNA组成，然而基因组DNA由五个碱基(CTGAC^m)的双链组成，亚硫酸氢盐转化的DNA仅由三个单链碱基(TGA)组成)。因此，如果标准物为质粒或基因组DNA，则靶DNA(即，人染色体基因组或亚硫酸氢盐-转化的DNA)与标准物DNA之间的扩增效率不同，但更重要地，(质粒)标准物与靶DNA之间的“扩增效率差异”在扩增靶标(即，引物对、探针等)之间是不同的。当对亚硫酸氢盐处理且扩增的DNA中进行qPCR时，这产生许多观测结果，如例如：

当测量样品中的不同血细胞时，总细胞数应相等，这不依赖于所使用的方法。然而，在进行不同的qPCR-测定而平均分配的给定样品中，尽管对于每个反应使用单独标准物，但所检测的总拷贝数不同。在(例如) 使用不同的RT-PCR体系测量的血样的情况下，这产生以下问题(此处用 CD3作为实例示出)：

表1：在使用亚硫酸氢盐-处理的、扩增的血样DNA的表观遗传qPCR 之后总DNA拷贝数和定量细胞含量的计算。(CP)交叉点，(CN-BC)拷贝数亚硫酸氢盐转化的CD3⁺标志物DNA区域，(CN-NBC)拷贝数亚硫酸氢盐未转化的CD3⁺标志物DNA区域，(CN-GAPDH)拷贝数亚硫酸氢盐转化的GAPDH标志物DNA区域。

如表1所示，计算的总CD3⁺DNA拷贝数在两个所使用的归一化体系之间不同：亚硫酸氢盐-转化的DNA对比亚硫酸氢盐-未转化的DNA 以及亚硫酸氢盐-转化的CD3⁺标志物区域与亚硫酸氢盐-转化的 GAPDH(总细胞)标志物区域。对于第一个血样(WBL02)，由GAPDH亚硫酸氢盐转化的DNA数目计算的CD3⁺DNA拷贝数(1420个拷贝)比由亚硫酸氢盐转化的加上亚硫酸氢盐未转化的CD3⁺DNA拷贝数计算的(1678 个拷贝)更小。对于第二个样品(WBL03)，情况相似。当使用这些计算的拷贝数来定量这两个血样内的CD3⁺细胞时，差异变得更明显。对于样品 WBL02，由亚硫酸氢盐转化的与未转化的DNA拷贝数的定量产生36.6％的CD3⁺细胞，然而由亚硫酸氢盐转化的CD3⁺DNA拷贝数与亚硫酸氢盐转化的GAPDH DNA拷贝数的定量产生50.1％的CD3⁺细胞。两种结果和方法强烈不同。

如所提及的，即使进行亚硫酸氢盐-转化的质粒标准物的归一化，不同测定的不同性能/效率也不会产生相同的拷贝数。

当将纯化的细胞类型用“其”特异性表观遗传细胞类型标志物测量并与样品中总细胞量比较时(如通过细胞类型非特异性标志物(GAPDH) 测量以及通过细胞类型特异性标志物区域(此处为FOXP3)的亚硫酸氢盐不可转化的DNA测量)，该问题变得尤其明显。

表2：纯化的Treg的两个样品中的调节性T细胞(Treg)的定量评估。分离DNA，用亚硫酸氢盐处理，并经由qPCR评估亚硫酸氢盐转化的DNA 与未转化的DNA的相对量。相对于在细胞非特异性GAPDH区域中亚硫酸氢盐转化的DNA的拷贝数以及在细胞类型特异性FOXP3区域中亚硫酸氢盐未转化的DNA的拷贝数，设置在细胞特异性FOXP3区域中亚硫酸氢盐转化的DNA的拷贝数，以获得Treg的定量数目。(CP)交叉点， (CN-BC)拷贝数亚硫酸氢盐转化的细胞类型特异性FOXP3DNA区域， (CN-NBC)拷贝数亚硫酸氢盐未转化的细胞类型特异性FOXP3DNA区域，(CN-GAPDH)拷贝数亚硫酸氢盐转化的GAPDH DNA区域。

从表2再次可见，两种定量方法的结果强烈不同(97％对比102％和 97％对比106％)。

最后，测量不同的细胞部分(例如血液白细胞)时，合计其应组成样品中存在的所有细胞，然而上述问题使得提供准确的“全血细胞计数”是不可能的。作为这样的实例，针对两种血样，定量白细胞(表3，样品04 和样品08)。此处，术语白细胞概括了所有五种类型的白细胞：粒细胞、单核细胞、B-淋巴细胞、自然杀伤细胞和CD3⁺T-淋巴细胞。因此，预期单细胞计数加起来为100％，代表(完整的)白细胞血象。然而，当使用表观遗传qPCR分析时，情况常常并非如此(参见表3)。白细胞的单个量的总和经常不同于100％。

表3：两种血样的定量细胞组成的评估。将DNA分离，用亚硫酸氢盐处理，并经由qPCR评估亚硫酸氢盐转化的DNA的相对量。相对于 GAPDH的细胞非特异性DNA区域的亚硫酸氢盐转化的拷贝数来设置细胞特异性区域中亚硫酸氢盐转化的DNA的拷贝数，以获得白细胞的定量数目。(CN-BC)拷贝数亚硫酸氢盐转化的细胞类型特异性标志物DNA区域，(CN-GAPDH)拷贝数亚硫酸氢盐转化的GAPDH标志物DNA区域。

概括上文提及的表观遗传细胞定量问题时，精确的血细胞计数工具提供了以下：

1.允许精确的、综合性血细胞计数和免疫细胞计数的评估，

2.克服了所使用的标准物与待分析的生物样品之间的测定性能和/或效率的差异，

3.不依赖于待计数细胞的膜完整性(完整的或不完整的细胞)，以及

4.不依赖于含有细胞的样品类型(新鲜的、冷冻的、包埋的、保存的、液体、固体组织)。

本发明提供了这样的工具及各自的方法。根据本发明，评估表观遗传血象包括通过亚硫酸氢盐-未转化的或亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物中qPCR结果的归一化来测量细胞的绝对量。归一化标准物由核酸分子组成，其包括对待检测的每种血细胞特异的至少一种标志物区域以及为细胞非特异的至少一种对照区域，其中所述区域以相同拷贝数存在于所述分子和/或已知组成的天然血细胞样品中。

在方法的优选实施方案的第一步中，确定qPCR测定-特异性校正因子，以实现所有qPCR测定的归一化和可比性以及校正测定效率中的差异。在第二步中，将生物样品的DNA分离、纯化并用亚硫酸氢盐处理。之后，对亚硫酸氢盐-转化的细胞类型特异性和/或细胞类型非特异性基因组标志物区域进行特异性qPCR。然后，用所述归一化标准物使qPCR扩增结果归一化，这代表标志物DNA的相对拷贝量，并因此代表特异性细胞的相对量。归一化标准物含有亚硫酸氢盐-转化的基因组标志物区域或含有天然的、亚硫酸氢盐-未转化的标志物区域。在后一种情况下，在开始qPCR之前，将对核酸进行亚硫酸氢盐处理，以与对所分析的生物样品进行的处理相平行。在下一步中，在qPCR之后，通过如本文所述的测定特异性校正因子来校正标志物DNA归一化的相对拷贝量，以便校正表明细胞绝对量的测定效率的差异。

本方法不仅允许定量生物样品中不完整的血细胞，而且允许定量生物样品中完整的血细胞，所述生物样品如，例如干燥的、冷冻的、包埋的、保存的以及新鲜的体液，干血斑、血块和组织样品。样品不含有纯化或富集的细胞。此外，本发明的方法提供了血细胞计数，其中细胞的身份和数量基于基因组水平上明确的是/否信息，所述基因组水平独立于蛋白表达水平。

因此，本发明提供了待用作医疗用途中分析和诊断工具以及作为治疗中决策基础的血液和/或免疫细胞计数。

根据本发明，优选的是这样的方法，其还包括基于所述检测和定量获得综合性血象的步骤。因此，血细胞计数基于许多表观遗传学参数来鉴定细胞组成的综合性血象。这些表观遗传学参数的组合被用于鉴定血液或组织样品的细胞组成，即表观遗传血象，且基于细胞特异性基因组区域的亚硫酸氢盐可转化性的分析提供所述表观遗传血象。

优选地，所述表观遗传血象类似于白细胞血象(leukocytogram)和/或 T-淋巴细胞血象(T-lymphocytogram)和/或粒细胞血象(granulocytogram) 和/或单核细胞血象(monocytogram)和/或B-淋巴细胞血象和/或NK细胞血象(cytogram)。

优选地，根据本发明，所示方法还包括使用亚硫酸氢盐-未转化的或亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物对例如qPCR结果进行归一化。术语“亚硫酸氢盐-未转化的”归一化标准物涵盖含有原始/初始生物学修饰，如甲酰化、羧基化、甲基化或羟甲基化且未经亚硫酸氢盐-处理的天然DNA 分子，因而为亚硫酸氢盐-未转化的。术语“亚硫酸氢盐-转化的”归一化标准物涵盖含有对应于亚硫酸氢盐-已转化的细胞类型特异性和非特异性标志物区域的(基因组)标志物序列的DNA分子。

亚硫酸氢盐-未转化的或亚硫酸氢盐-转化的核酸分子优选选自：质粒、酵母人工染色体(YAC)、人类人工染色体(HAC)、P1-来源的人工染色体(PAC)、细菌人工染色体(BAC)和PCR-产物。亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物为质粒、酵母人工染色体(YAC)、人类人工染色体(HAC)、P1- 来源的人工染色体(PAC)、细菌人工染色体(BAC)或PCR-产物。

天然血细胞样品优选为已知细胞组成和/或已知血细胞类型组成的血样，且优选提前制备，即所组合的血细胞类型的数量和数目为预定的。

根据本发明的方法的优选实施方案中，归一化标准物(即质粒、YAC、 HAC、PAC、BAC和PCR-产物)在所述分子中以相同已知拷贝数含有细胞特异性和非特异性基因组标志物区域(待根据表观遗传血象分析的)。在一个实施方案中，这些标准物中的每一种为单个分子，其在待建立的表观遗传血象中含有相同数目的所关注的所有细胞类型特异性和非特异性基因组标志物区域。用作亚硫酸氢盐-未转化的归一化标准物的天然血细胞样品(优选为哺乳动物，如人)含有已知组成和数量的细胞，由此可预先纯化且预先混合细胞以获得已知组成的样品，这也为预定的。

在分析过程期间，亚硫酸氢盐-未转化的归一化标准物为与待分析的生物样品的亚硫酸氢盐处理相平行且相同方式的亚硫酸氢盐-处理。

然后，使用有助于检测细胞类型特异性或非特异性亚硫酸氢盐-转化的基因组区域的特异性引物，对未知生物样品以及对(现在)亚硫酸氢盐- 处理的亚硫酸氢盐-未转化的归一化标准物进行qPCR。相比之下，亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物(明显)不是亚硫酸氢盐-处理的，因为其已经含有对应于由qPCR引物识别的亚硫酸氢盐-转化的标志物序列的特异性标志物序列，所述qPCR引物对亚硫酸氢盐-转化的基因组区域为特异的。

在优选实施方案中，归一化标准物包括根据血象待检测和分析的预定量的血细胞类型。优选地，使用由确定拷贝数和相同化学计量的特异性细胞和/或细胞类型特异性标志物区域和/或细胞类型非特异性标志物区域组成的归一化标准物。优选的是针对血象所关注的所有细胞类型含有相同拷贝数和/或化学计量的细胞类型特异性标志物区域和/或细胞类型非特异性标志物区域的单个质粒。

根据本发明的方法的优选实施方案，还包括用测定特异性校正因子校正所产生的所述表观遗传血象的步骤。通过将在所提供的所述哺乳动物天然细胞样品中细胞量的已知定量与使用归一化标准物由qPCR评估的所述哺乳动物天然细胞样品的亚硫酸氢盐-转化的细胞类型特异性标志物DNA的拷贝数的相对量进行比较，来确定所述测定-特异性校正因子(针对所检测和分析的细胞)。使用该方法，本方法允许精确定量细胞，因为考虑了可能已经发生的任何测定-特异性变化。根据所使用的归一化标准物的种类，测定特异性校正因子可不同。归一化标准物及其分析过程越适合生物样品及其处理，测定特异性校正因子将越接近1，或甚至可被忽略。在优选实施方案中，使用了亚硫酸氢盐-未转化的归一化标准物，因为其类似于天然细胞样品的复杂性和不纯，且因此应比对生物样品与标准物之间的qPCR效率。最优选的是使用如本文所述的已知细胞组成和数量的哺乳动物天然细胞样品。

此外，根据本发明的方法包括在未知组成的生物样品内确定细胞类型特异性和非特异性DNA的相对量(拷贝)的步骤。这通过使用对亚硫酸氢盐-转化的细胞类型特异性和非特异性DNA标志物序列特异的引物，对所述生物样品的分离的、纯化的和亚硫酸氢盐-转化的DNA进行qPCR 来实现。所有靶细胞类型的qPCR扩增结果在所述亚硫酸氢盐-未转化的或转化的标准物中归一化，从而指明靶细胞的相对量。根据使用的标准物和测定法，将特异性测定校正因子应用于靶细胞的相对量，以根据所建立的所述血象接收细胞含量的绝对量和百分比。由此，在所述生物样品中确定绝对的、综合性细胞组成。根据所使用的归一化标准物，测定校正因子不同于1，或大约为1，则可被忽略。确定细胞类型特异性和非特异性DNA的相对量(拷贝)的其它方法包括选自以下的方法：特异性酶消化或染料排除技术、亚硫酸氢盐测序、下一代测序、纳米孔测序、单分子实时测序、启动子区中的表观遗传修饰分析、使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的引物、使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的阻断寡核苷酸、使用荧光标记的淬灭的寡核苷酸探针，使用对亚硫酸氢盐-转化的 DNA特异的单核苷酸引物延伸的引物、数字或定量PCR分析、以及特定选择性(核酸和/或染色质)沉淀。

根据本发明，优选的是这样的方法，其中靶细胞的相对量的确定基于将所确定的所述亚硫酸氢盐-转化的细胞特异性区域的拷贝量与对所确定的细胞类型非特异的亚硫酸氢盐-转化的区域的拷贝量进行比较，从而鉴定特定细胞类型相对于样品中存在的所有细胞的相对量。

根据本发明的一个实施方案中，靶细胞的相对量基于以下确定：将所确定的所述亚硫酸氢盐-转化的细胞特异性区域的拷贝量与所确定的亚硫酸氢盐-未转化的细胞特异性区域的拷贝量进行比较，从而鉴别靶细胞相对于样品中存在的所有其它细胞的相对量。

根据本发明的方法的优选实施方案中，在表观遗传测定的在先评估期间进一步生成包括关于所估计/所计算的细胞特异性测定-校正因子的信息的知识库。可以有利地使用这些数值，以便选择特别合适的归一化标准物。

根据本发明的方法的特别优选的实施方案中，检测细胞类型标志物区域，将特异性细胞类型和/或至少一种特异性细胞亚群与白细胞血象、 T-淋巴细胞血象、粒细胞血象、单核细胞血象、B-淋巴细胞血象和/或NK- 细胞血象的其它细胞区别开。优选地，a)白细胞血象由T-淋巴细胞、自然杀伤细胞、B-淋巴细胞、单核细胞和/或粒细胞组成，b)T-淋巴细胞血象由CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、CD8^-CD4^-和/或CD8⁺CD4⁺组成，c)粒细胞血象由嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和/或粒细胞髓源抑制性细胞组成，d)单核细胞血象由CD14⁺单核细胞、CD14^-单核细胞、巨噬细胞、单核细胞髓源抑制性细胞、浆细胞样树突状细胞、髓样树突状细胞和/或全部树突状细胞组成，e)B-淋巴细胞血象由初始B细胞、前B细胞、记忆B细胞、过渡型B细胞和/或未成熟B细胞组成，以及f)NK细胞血象由CD56^暗和/或CD56^亮NK细胞组成。

优选地，在所确定的血象内，可确定亚血象(sub-haemograms)(或亚群)。优选为辅助性T细胞血象，其包括例如Th1、Th2、Th9、Th17、Th19、 Th21、Th22、Tfh、CD4⁺自然杀伤细胞(NKT)、初始CD4⁺、记忆CD4⁺、效应CD4⁺细胞和/或CD4⁺调节性T细胞，或者T-细胞血象，其包括例如初始CD8⁺、效应CD8⁺、记忆CD8⁺、CD8⁺自然杀伤细胞(NKT)和/或CD8⁺调节性T细胞。此外，可确定单核细胞的亚群，其包括经典型单核细胞 (CD14^-)、中间型单核细胞(CD14⁺)和/或非经典型单核细胞(CD14⁺⁺)或者包括髓样树突状细胞和浆细胞样树突状细胞的树突细胞血象(dendritogram)。未来的科学研究可能发现并鉴别仍然未知的血细胞和白细胞亚类，并可对某些血细胞分配新的功能和/或对不同的白细胞亚群分配已知的血细胞。

确定亚硫酸氢盐-可转化的和/或亚硫酸氢盐不可转化的DNA或核酸的相对量包括选自以下的方法：特异性酶消化或染料排除技术、亚硫酸氢盐测序、下一代测序、纳米孔测序、单分子实时测序、启动子区中的表观遗传修饰分析、使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的引物、使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的阻断寡核苷酸、使用荧光标记的淬灭的寡核苷酸探针，使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的单核苷酸引物延伸的引物、数字或定量PCR分析、以及特定选择性(核酸和/或染色质) 沉淀。

根据本发明，进一步优选的方法，其中所述归一化标准物为亚硫酸氢盐-未转化的并且含有至少一个亚硫酸氢盐-可转化的CpG位点。

根据本发明，进一步优选的方法，其中所述生物样品中的细胞类型的所述定量基于使用亚硫酸氢盐-未转化的归一化标准物或使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物，将细胞类型特异性和非特异性染色质的相对量进行归一化。

根据本发明，甚至更优选的方法，其中使用亚硫酸氢盐-未转化的归一化标准物的所述归一化表明所述生物样品中的细胞含量的绝对量和/或百分比。

根据本发明，甚至更优选的方法，其中所述生物样品为未知细胞组成的样品。

在本发明的上下文中所分析的生物样品为含有待分析细胞的任何样品，所述细胞即血细胞和/或免疫***细胞，如白细胞血象的细胞，其选自T-淋巴细胞、自然杀伤细胞、B淋巴细胞、单核细胞和/或粒细胞及其组合；T-淋巴细胞血象的细胞，其选自CD3⁺CD4⁺、CD4⁺记忆细胞、CD4⁺效应细胞、CD4⁺初始细胞、CD3⁺CD8⁺、CD8⁺记忆细胞、CD8⁺效应细胞、 CD8⁺初始细胞、CD3⁺CD8^-CD4^-、CD3⁺CD8⁺CD4⁺、NKT细胞、iTreg、 Treg、Tfh、Th1、Th2、TH9、Th17、Th19、Th21、Th22、记忆和/或效应辅助性T细胞及其组合；粒细胞血象的细胞，其选自嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、全部嗜中性粒细胞和/或粒细胞髓源抑制性细胞及其组合；单核细胞血象的细胞，其选自CD14⁺单核细胞、CD14- 单核细胞、巨噬细胞、浆细胞样树突状细胞、单核细胞髓源抑制性细胞、中间型单核细胞、经典型单核细胞、非经典型单核细胞和/或全部树突状细胞及其组合；B-淋巴细胞血象的细胞，其选自初始B细胞、前B细胞、记忆B细胞、过渡型B细胞和/或未成熟B细胞及其组合；以及NK细胞血象的细胞，其选自CD56^暗和/或CD56^亮NK细胞。

术语“细胞-特异性区域”在本文应意指在细胞和/或核酸的基因组中选择的遗传区域，以在表观遗传水平上将一种细胞类型和/或细胞亚群与所有其它细胞类型和/或细胞亚群区别开。这些区域包括某些标志物(如，例如，某些蛋白质标志物)的基因，如5’非翻译区、启动子区、内含子、外显子、内含子/外显子边界、3’区、CpG岛，并且特别包括亚硫酸氢盐处理之后扩增的特异性区域(扩增子)，所述特异性区域(扩增子)对于一种细胞类型和/或细胞亚群为“提供信息的”。这些细胞特异性区域的实例在文献中为已知的，如，例如，基因CD3γ、δ和ε(WO 2010/069499)；颗粒溶素基因(WO 2010/125106)；CCR6基因(WO 2011/135088)；FOXP3基因(WO 2004/050706及Wieczorek等，Quantitative DNA methylationanalysis of FOXP3as a new method for counting regulatory T cells inperipheral blood and solid tissue.Cancer Res.2009年1月15日； 69(2):599-608.)。

细胞-特异性标志物区域通常为这样的DNA区域，其含有仅在特定细胞类型中为亚硫酸氢盐-可转化的单个CpG或CpG岛，并由此表明特定细胞类型。另外，这些细胞特异性标志物区域将一种细胞类型与所有其它血细胞以及其它组织细胞区别开。

根据本发明，通过分析所述细胞特异性基因组区域中至少一个CpG 位点的亚硫酸氢盐可转化性来鉴别和定量表观遗传血象的细胞。

因此，根据本发明的优选的方法，其中在下表4中所列出的区域内至少一个CpG位点的亚硫酸氢盐转化，表明在所述表中所列出的各自血细胞类型。对于给定的细胞类型，这些是例如下列基因组标志物区域：

在表4中，列出了含有对血细胞类型粒细胞、单核细胞、CD4+细胞、细胞毒性T-细胞、B-细胞、自然杀伤细胞和自然杀伤T-细胞特异的CpG 的区域，以及其被称为“发现片段”(优选区域)和区别性“关注区域”(更优选区域)的SEQ ID NO。发现片段包含对所示细胞类型特异的至少一个 CpG，因此适于将该细胞类型与血象的所有其它细胞类型区别开。区别性关注区域(ROI)序列为这样的区域，其位于发现区域附近，且形成设计所示特定细胞类型的特异性测定的基础，且含有另外相关的CpG，即为了区分所示的细胞类型也可使用的CpG的序列。

在表4A至4J中，列出了含有对每个表头中所显示的各个血细胞类型特异的CpG区域。在“发现片段”栏中提供的序列为优选区域，且包含对各个表的细胞类型特异的(可通过显示的数据鉴别的)至少一个CpG。在本发明的不同实施方案和方面的上下文中，还包含的是每个标志物在人基因组中的“发现片段”序列上游和下游(因此为“附近”)的500个碱基对的区域。“发现片段”上游和下游的500个碱基对区域为表4A至4J 的标志物的区别性ROI。

因此，本发明还涉及如上文所显示的表4以及4A至4J中任一个的“发现片段”或ROI(人基因组中的每个“发现片段”上游和下游500bp) 的任一个内至少一个CpG位点的亚硫酸氢盐转化，这表明表4中所列的各个细胞类型。在本发明的所有实施方案和方面中，T-淋巴细胞血象因而可以含有上表4以及4A至4J中所列出的任何细胞类型以及这些细胞类型的任何组合。

嗜中性粒细胞(nGRC)的另外区域来源于脂质运载蛋白-2，嗜中性粒细胞明胶酶相关的脂质运载蛋白(LCN2)基因组区域(Ensembl-ID： ENSG00000148346)；在此被命名为AMP1730。AMP 1730基因组序列和区别性ROI 1132分别为SEQ ID NO:686和685。也参见图2。

嗜酸性粒细胞(eGRC)的另外区域来源于蛋白聚糖2(PRG2)基因组区域(Ensembl-ID:ENSG00000186652)，在此分别被命名为AMP 2034和 2035。AMP 2034和2035基因组序列以及区别性ROI1403分别为SEQ ID NO:687，688和689。也参见图3。

优选地，选择如本文所述的细胞特异性基因区域以将一种细胞类型或细胞亚群与诸如如本文所述的白细胞血象、T-淋巴细胞血象、粒细胞血象、单核细胞血象、B-淋巴细胞血象和/或NK细胞血象的所有其它细胞类型区别开。因此，高度特异性的细胞类型标志物被用作鉴别和定量的基础，所述鉴别和定量并非基于蛋白表达水平而是基于细胞类型-特异性表观遗传信息。当细胞特异性富含CpG的基因组区域为亚硫酸氢盐可转化的或亚硫酸氢盐不可转化的，通过qPCR可检测的或不可检测的，以及基因组拷贝不会改变时，该方法提供了明确的是/否信息且不依赖于阈值。该方法还检测和鉴别以及定量可能无限数目的细胞亚群，例如，调节性T细胞的检测限为0.3％。

根据本发明优选的方法，其中被检测且因此针对表观遗传血象的细胞选自：白细胞血象、和/或T-淋巴细胞血象、和/或粒细胞血象、和/或单核细胞血象、和/或B-淋巴细胞血象、和/或NK细胞血象。

优选地，所分析的所述标志物区域对预选定血象的细胞为特异的，对于白细胞血象，这些细胞优选选自T-淋巴细胞、自然杀伤细胞、B-淋巴细胞、单核细胞、粒细胞及其组合；对于T-淋巴细胞血象，这些细胞优选选自CD3⁺CD4⁺、CD4⁺记忆细胞、CD4⁺效应细胞、CD4⁺初始细胞、 CD3⁺CD8⁺、CD8阳性细胞、CD8⁺记忆细胞、CD8⁺效应细胞、CD8⁺初始细胞、CD3⁺CD8^-CD4^-、CD3⁺CD8⁺CD4⁺、NKT细胞、iTreg、Treg、Tfh、 Th1、Th2、TH9、Th17、Th19、Th21、Th22、记忆和效应T辅助细胞及其组合；对于粒细胞血象，这些细胞优选选自嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和/或粒细胞髓源抑制性细胞及其组合；对于单核细胞血象，这些细胞优选选自CD14⁺单核细胞、CD14-单核细胞、巨噬细胞、浆细胞样树突状细胞、髓样-树突状细胞、中间型单核细胞、经典型单核细胞、非经典型单核细胞、和/或全部树突状细胞及其组合；对于B-淋巴细胞血象血象，这些细胞优选选自初始B细胞、前B细胞、记忆B细胞、过渡型B细胞和/或未成熟B细胞及其组合；以及对于NK细胞血象血象，这些细胞优选选自CD56^暗和/或CD56^亮NK细胞。

与术语“细胞-特异性区域”相反，术语“细胞非特异性区域”在此应意指在细胞和/或核酸的基因组中为非特异选择的基因区域，即对多于一种，优选对所有细胞类型和/或细胞亚群为特异的基因区域。这些细胞非特异性区域也包括某些标志物(如，例如，某些蛋白质标志物)的基因，如5’非翻译区、启动子区、内含子、外显子、内含子/外显子边界、3’区、CpG岛，并且特别包括亚硫酸氢盐处理之后扩增的特异性区域(扩增子)，所述特异性区域(扩增子)为多于一种细胞类型和/或细胞亚群“提供信息的”。由文献可知这些细胞非特异性区域的实例，且选自，例如包含以下基因的区域：管家基因，如GAPDH、ACTB(β-肌动蛋白)、UBC(泛素C)、核糖体蛋白质(例如RPS27A、RPS20、RPL11、RPL38、RPL7、RPS11、 RPL26L1)、CALR(钙网蛋白)、ACTG1(γ肌动蛋白)、RPS20(核糖体蛋白质S20)、HNRPD(核糖核蛋白D)、NACA(新生多肽相关复合物α亚基)、 NONO(八聚体结合蛋白质)、PTMAP7(前胸腺素)、GFRA4(GDNF受体α -4)、CDC42(GTP-结合蛋白质)、EIF3H(翻译起始因子)、UBE2D3(泛素结合酶)以及例如She等(Definition,conservation and epigenetics of housekeeping andtissue-enriched genes.BMC Genomics.2009年6月17 日；10:269.)和PCT/EP2011/051601中所述的基因。

根据本发明，所述方法通常鉴别生物样品的定量细胞组成。根据本发明优选的方法，其中所述生物样品为未知细胞组成的样品。然而，也可定量已知细胞组成的样品，甚至部分已知组成的样品。

可将待分析的生物样品新鲜-冷冻保存、石蜡-包埋保存或者肝素、柠檬酸盐或EDTA-稳定化保存，因为样品中的细胞无需是完整的。本方法为非常稳健的，且与流式细胞术相比，允许细胞身份和数量以及样品组成的平行、独立评估。也提供了与FACS的非常好的相关性。

待分析的生物样品可为包含一种或多种细胞类型或疑似包含一种或多种待定量的细胞类型的任何样品。优选的材料/生物样品选自血样，特别是外周血样品、毛细管血样品或静脉血样品；血块；或被认为含有血细胞的样品，例如滑液、淋巴液、唾液、尿液；肿瘤样品；以及其它液体和组织样品；组织学制备物；DBS；人工产生的细胞及其混合物(例如细胞培养物样品)。

此外，根据本发明的另一方面，涉及本发明的方法，其还包括基于所产生的所述表观遗传血象来推断哺乳动物免疫状态的步骤。

此外，根据本发明的另一方面，涉及本发明的方法，其还包括通过将所鉴定的所述组成和/或血象与取自同一哺乳动物更早期的生物样品组成和/或与对照样品组成进行比较，而在所鉴定的所述生物样品中监测所述细胞组成的步骤。在这方面，例如，在药物治疗期间，可监测患者中细胞组成的修饰和变化。

然后，本发明的另一方面涉及诊断疾病或疾病易感性的方法，其包括根据本发明如上所述的方法，以及基于所鉴定的所述生物样品中的细胞组成来推断疾病或所述疾病易感性的步骤。在这方面，例如，可将患者中细胞组成的修饰和变化用于诊断疾病或疾病易感性，特别是当将样品与健康受试者的样品或与医学参考值范围进行比较时。优选地，所述生物样品为血样，特别是全血样品或外周血样品，且所述样品的细胞的基因组中的所述细胞特异性区域选自血细胞类型特异的区域。待诊断的疾病可选自免疫疾病或病症、移植排斥、传染病、癌症、神经疾病、过敏症、原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷以及血液恶性肿瘤，如，例如，淋巴肿瘤、成熟B-细胞肿瘤、成熟T–细胞肿瘤和成熟NK–细胞肿瘤、霍奇金淋巴瘤、移植后淋巴增殖性过程、HIV和AIDS、移植物抗宿主病、风湿性关节炎、红斑狼疮、乳腺癌、结直肠癌、食管癌、胃癌、白血病/ 淋巴瘤、肺癌、***癌、子宫癌、皮肤癌、内分泌腺癌、肾癌、泌尿***癌、胰腺癌、其它胃肠癌、卵巢癌、***、头颈癌、腺瘤、出生缺陷、肌肉疾病、精神发育迟缓、肥胖症、糖尿病、妊娠糖尿病、多发性硬化症和哮喘。

在本发明的一个优选实施方案中，表观遗传血象的诊断用途还基于使用不同群体和/或/与不同亚群(亚血象)和/或/与根据所述表观遗传血象属于同一亚血象的细胞的比率。这样的比率为，例如但不限于，调节性T 细胞群相对于CD3⁺T-淋巴细胞、或调节性T细胞相对于CD4⁺T-淋巴细胞群、或调节性T细胞相对于CD8⁺T-淋巴细胞群、或CD3⁺T-淋巴细胞相对于CD4⁺辅助性T-细胞、或CD3⁺T-淋巴细胞相对于CD8⁺细胞毒性 T细胞、或CD4⁺辅助性T-细胞相对于CD8⁺细胞毒性T-细胞、或Th1相对于Th2、或Th1相对于Th17、或Th2相对于Th17、或记忆或初始CD4⁺辅助性T-细胞相对于CD3⁺T-淋巴细胞、或记忆CD8⁺细胞毒性T-细胞相对于CD3⁺T-淋巴细胞，所有都作为T-淋巴细胞血象的亚群；或者CD3⁺T- 淋巴细胞相对于嗜中性粒细胞、或巨噬细胞相对于CD4⁺辅助性T-细胞； CD4⁺T-淋巴细胞相对于嗜中性粒细胞、或CD8⁺T-淋巴细胞相对于嗜中性粒细胞，所有都作为不同亚血象的细胞之间的关联；或者CD3⁺T-淋巴细胞相对于粒细胞、或B-淋巴细胞相对于CD3⁺T-淋巴细胞、或单核细胞相对于CD3⁺T-淋巴细胞、或单核细胞相对于B-淋巴细胞，所有都作为白细胞血象的群体比率；或者CD3⁺T-淋巴细胞或单核细胞或B-淋巴细胞、或粒细胞或NK细胞相对于总体白细胞。

但根据本发明且根据表观遗传血象所评估亚群的其它比率也可用作诊断方法。所述疾病可选自：免疫疾病或病症、移植排斥、传染病、癌症、神经疾病、过敏症、原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷以及血液恶性肿瘤，如，例如，淋巴肿瘤、成熟B-细胞肿瘤、成熟T–细胞肿瘤和成熟NK–细胞肿瘤、霍奇金淋巴瘤、移植后淋巴增殖性过程、HIV和AIDS、移植物抗宿主病、风湿性关节炎、红斑狼疮、乳腺癌、结直肠癌、食管癌、胃癌、白血病/淋巴瘤、肺癌、***癌、子宫癌、皮肤癌、内分泌腺癌、肾癌、泌尿***癌、胰腺癌、其它胃肠癌、卵巢癌、***、头颈癌、腺瘤、出生缺陷、肌肉疾病、精神发育迟缓、肥胖症、糖尿病、妊娠糖尿病、多发性硬化症和哮喘。诊断用途涵盖但不限于疾病的诊断和/或疾病的随访和/或疾病易感性和/或监测化学或生物物质的作用。

在另一实施方案中，本发明的表观遗传血象被用于评估患者中发展疾病的风险，因此用于诊断目的。在本发明的一个优选实施方案中，用于评估发展疾病风险的表观遗传血象的诊断用途还基于使用不同群体和/ 或/与不同亚群(亚血象)和/或/与根据所述表观遗传血象属于同一亚血象的细胞的比率。这样的比率为，例如但不限于，调节性T细胞群相对于 CD3⁺T-淋巴细胞、或调节性T细胞相对于CD4⁺T-淋巴细胞群、或调节性 T细胞相对于CD8⁺T-淋巴细胞群、或CD3⁺T-淋巴细胞相对于CD4⁺辅助性T-细胞、或CD3⁺T-淋巴细胞相对于CD8⁺细胞毒性T细胞、或CD4⁺辅助性T-细胞相对于CD8⁺细胞毒性T-细胞、或Th1相对于Th2、或Th1 相对于Th17、或Th2相对于Th17、或记忆或初始CD4⁺辅助性T-细胞相对于CD3⁺T-淋巴细胞、或记忆CD8⁺细胞毒性T-细胞相对于CD3⁺T- 淋巴细胞，所有都作为T-淋巴细胞血象的亚群；或者CD3⁺T-淋巴细胞相对于嗜中性粒细胞、或巨噬细胞相对于CD4⁺辅助性T-细胞；CD4⁺T-淋巴细胞相对于嗜中性粒细胞、或CD8⁺T-淋巴细胞相对于嗜中性粒细胞，所有都作为不同亚血象的细胞之间的关联；或者CD3⁺T-淋巴细胞相对于粒细胞、或B-淋巴细胞相对于CD3⁺T-淋巴细胞、或单核细胞相对于CD3⁺ T-淋巴细胞、或单核细胞相对于B-淋巴细胞，所有都作为白细胞血象的群体的比率；或者CD3⁺T-淋巴细胞或单核细胞或B-淋巴细胞、或粒细胞或NK细胞相对于总体白细胞。

但根据本发明且根据表观遗传血象所评估亚群的其它比率也可用于评估发展疾病的风险。本文所述实施方案的疾病可选自：免疫疾病或病症、移植排斥、传染病、癌症、神经疾病、过敏症、原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷以及血液恶性肿瘤如，例如，淋巴肿瘤、成熟B-细胞肿瘤、成熟T–细胞肿瘤和成熟NK–细胞肿瘤、霍奇金淋巴瘤、移植后淋巴增殖性过程、HIV和AIDS、移植物抗宿主病、风湿性关节炎、红斑狼疮、乳腺癌、结直肠癌、食管癌、胃癌、白血病/淋巴瘤、肺癌、***癌、子宫癌、皮肤癌、内分泌腺癌、肾癌、泌尿***癌、胰腺癌、其它胃肠癌、卵巢癌、***、头颈癌、腺瘤、出生缺陷、肌病、精神发育迟缓、肥胖症、糖尿病、妊娠糖尿病、多发性硬化症和哮喘。诊断用途涵盖但不限于疾病的诊断和/或疾病的随访和/或疾病易感性和/或疾病风险的评估和/或监测化学或生物物质的作用。

如所示，根据本发明所评估的上述比率具有表明，例如受试者生存期间发展某些疾病的风险的潜能。发现了调节性T-淋巴细胞与CD3+T- 淋巴细胞的比率在风险评估中的临床作用。在本发明的上下文中特别优选的是调节性T-淋巴细胞与CD3+T-淋巴细胞的比率增加，表明在生存期间发展癌症(癌性疾病)的风险。癌症选自但不限于上文所提供的列表，其中调节性T-淋巴细胞与CD3+T-淋巴细胞的比率增加的重要影响预期为肺癌发展，这为特别优选的。此外，比率具有预测移植物抗宿主病发展的潜能，其中在干细胞移植之后前两周内调节性T-淋巴细胞与CD4+T- 淋巴细胞的比率增加预示移植物抗宿主病的发展。

此外，本发明的另一方面涉及鉴别化学或生物物质或药物对细胞组成的影响的方法，其包括如上所述根据本发明实施该方法，优选对从用所述物质处理或接触的哺乳动物获得的血样实施该方法，以及将在所述样品中的细胞组成与处理之前的样品组成或与未处理样品的组成进行比较。待用所述化学或生物物质或药物处理的哺乳动物可以为健康的或患有选自以下的疾病：免疫疾病或病症、移植排斥、传染病、癌症、神经疾病、过敏症、原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷以及血液恶性肿瘤，如，例如，淋巴肿瘤、成熟B-细胞肿瘤、成熟T–细胞肿瘤和成熟NK–细胞肿瘤、霍奇金淋巴瘤、移植后淋巴增殖性过程、HIV和AIDS、移植物抗宿主病、风湿性关节炎、红斑狼疮、乳腺癌、结直肠癌、食管癌、胃癌、白血病/淋巴瘤、肺癌、***癌、子宫癌、皮肤癌、内分泌腺癌、肾癌、泌尿***癌、胰腺癌、其它胃肠癌、卵巢癌、***、头颈癌、腺瘤、出生缺陷、肌病、精神发育迟缓、肥胖症、糖尿病、妊娠糖尿病、多发性硬化症和哮喘。

此外，本发明的另一方面涉及诊断试剂盒及其用途，其包括试试如本文所述根据本发明的方法的材料，任选地具有使用说明书。诊断试剂盒特别地含有对关注区域特异的寡核苷酸(例如用于产生扩增子)、亚硫酸氢盐试剂和/或用于PCR的成分。诊断试剂盒及其用途涵盖但不限于疾病的诊断和/或疾病的随访和/或疾病易感性和/或疾病风险的评估和/或监测化学或生物物质的作用。

如上文所提及，当前在临床诊断和研究以及药物开发中，期望的是提供白细胞及其亚群的精确且综合性定量的新方法，即使生物样品不再完整。本发明克服了当前常规使用的定量方法、流式细胞术和免疫组织化学的大多数问题，但更重要地，克服了关于靶细胞绝对定量的qPCR 的几个生化和技术问题。因此，本发明提供了有效检测和定量不同细胞群的方法。特别地，本方法首次允许评估综合性血细胞血象的独立于表达的方法。此外，本发明能够使时间范围灵活，其不依赖于快速样品处理，而是允许长期样品保存以及样品采集与样品处理之间的单独协调。

现将在以下实施例和附图中进一步解释本发明，然而，本发明不限于此。为了本发明的目的，本文所引用的所有参考文献通过引用整体并入本文。

图1显示表观遗传血象的示意概述。血象包括白细胞血象，其包括B 细胞、单核细胞、粒细胞、CD3⁺T-淋巴细胞和NK细胞。每个亚群分别建立另外的细胞血象，即B-淋巴细胞血象、单核细胞血象、粒细胞血象、 T-淋巴细胞血象和NK细胞血象。对于这五种亚细胞血象，描述了对应的细胞类型。这五种亚细胞血象中的每一种可被分成另外的亚群，例如T 细胞细胞血象可被进一步分成CD4⁺辅助性T-细胞血象和CD8⁺细胞毒性血象。

图2显示表明细胞类型特异性基因组标志物区域中亚硫酸氢盐不可转化性的矩阵。分析了不同的细胞类型，表明通过亚硫酸氢盐处理，基因组区域AMP1730内的CpG可完全转化，这对应于0％的亚硫酸氢盐- 不可转化性。粒细胞的总分数对应于嗜中性粒细胞。嗜中性粒细胞占粒细胞的约90％，嗜酸性粒细胞占粒细胞的约7％，嗜碱性粒细胞占粒细胞的约3％(参见实施例4)。

图3显示表明细胞类型特异性基因组标志物区域中亚硫酸氢盐不可转化性的矩阵。分析了不同的细胞类型，表明与给定的其它细胞类型相反，在基因组区域AMP2034和2035内的CpG可由亚硫酸氢盐高程度的转化且表明该特定细胞类型(参见实施例5)。

图4显示根据实施例7所扩增的测试-模板结果。unM(TpG模板)：亚硫酸氢盐-转化的测试-DNA；Meth(CpG模板)：亚硫酸氢盐未转化的测试-DNA；NTC：无模板对照；左图：Mg2+浓度，3.2mM；右图：Mg2+ 浓度，3.6mM。

SEQ ID No.1至689示出在本发明的上下文中所使用的序列。

实施例

本实施例已在已知和未知白细胞和T-淋巴细胞组成的样品上实施。本领域技术人员应理解，在没有过度负担和/或无需创造性的情况下，在表观遗传血象的背景中如何改进实验以便鉴定和定量其它细胞类型，特别是血细胞。

实施例1-使用已知组成的样品评估细胞特异性测定-校正因子

发明人提供了已知白细胞和T-淋巴细胞组成的人血样。经由流式细胞术分析该血样的组成。样品含有61％的粒细胞、12％的单核细胞、3％的B-淋巴细胞、4％的自然杀伤细胞和19％的T-淋巴细胞(表5)。T细胞群由13％的CD4⁺辅助性T细胞、1.4％的调节性T细胞、5％的CD8⁺细胞毒性细胞和2％的初始CD8⁺细胞组成。

在下一步中，分析已知白细胞和T-淋巴细胞组成的该样品的细胞类型特异性基因区域中的亚硫酸氢盐可转化的染色质的相对量，产生了亚硫酸氢盐可转化的染色质的独特的区别性细胞类型特异性模式，例如，对于粒细胞，为在嗜中性粒细胞明胶酶相关的脂质运载蛋白基因中的区域；对于单核细胞，为在白细胞免疫球蛋白样受体基因中的区域；对于B细胞，为IgE的低-亲和力受体的基因的区域；对于自然杀伤细胞，为在氧化固醇-结合蛋白样蛋白质5同工型a的基因中的区域；对于T-淋巴细胞，为在CD3D/G基因中的区域；对于CD4⁺辅助性T细胞，为在CD4 基因中的区域；对于调节性T细胞，为在FOXP3基因中的区域；对于CD8⁺细胞毒性T细胞，为在CD8A/B基因中的区域；对于初始CD8⁺细胞，为在内皮唾酸蛋白基因中的区域。使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物通过qPCR进行分析，表明了含有亚硫酸氢盐可转化性的上述独特的所述细胞类型特异性模式的基因拷贝数目的相对量。细胞特异性基因拷贝的这些相对数目表明所述特异性细胞的相对量。

将特异性细胞(所述白细胞和T-淋巴细胞)的这种相对数目与流式细胞术的结果进行比较。将两种结果设置关联，并确定校正因子(表1)。流式细胞术显示61％的粒细胞，qPCR显示91.6％的粒细胞，因此细胞特异性粒细胞测定-校正因子为1.502。

对于每组评估，分别确定校正因子并将其并入测定-特异性校正因子的数据库中。除了独立且分别确定的校正因子(针对每组评估)以外，还可使用过去校正因子的平均值。

表5.细胞特异性测定-校正因子的评估。通过针对白细胞以及T-淋巴细胞的流式细胞术和qPCR评估人血样的细胞组成。使用亚硫酸氢盐- 转化的归一化标准物进行qPCR。接下来对未知组成的样品的qPCR的校正因子通过qPCR/FC比率来确定。(C-因子)校正因子，(FC)流式细胞术， (GRK01)内部样品编号。(qPCR)实时定量聚合酶链式反应。

实施例2-使用已知组成的样品利用所确定的测定-校正因子(如实施例1所示)来 评估健康志愿者的未知血样中的绝对细胞组成

获得健康志愿者的未知白细胞和T-淋巴细胞组成的人血样，用于经由qPCR评估绝对白细胞和T-淋巴细胞组成。如实施例1，将血样DNA 分离、经亚硫酸氢盐转化，以及使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物经由qPCR评估亚硫酸氢盐转化的DNA的相对量。相对于细胞非特异性 DNA区域的亚硫酸氢盐-可转化的DNA(始终不依赖于细胞的恒定模式的亚硫酸氢盐-可转化性)，设置细胞特异性基因区域中亚硫酸氢盐可转化的 DNA的量，以获得所评估细胞的相对量。

使用流式细胞术，在平行实验组中测定人血样中的粒细胞、单核细胞、B-淋巴细胞、自然杀伤细胞、T-淋巴细胞、CD4⁺辅助性T细胞、调节性T细胞和CD8⁺细胞毒性T细胞来确定细胞-特异性测定-校正因子(参见实施例1的方法；与实施例1相比，实施例2的人血样不同)。使用细胞特异性测定校正因子校正所获得的评估细胞的相对量。例如，患者样品S04的单核细胞的qPCR得出单核细胞的相对量为7.94％，但校正揭示单核细胞的绝对细胞量为3.69％。

预期属于白细胞血象的细胞总和为100％，属于T-淋巴细胞血象的细胞总和具有与白细胞血象中所确定的T-淋巴细胞完全相同的细胞量。已知的是，即使流式细胞术定量也有局限性，如上所述。

流式细胞术测量误差反映在qPCR校正中。另一方面，如本文所述，基于qPCR的表观遗传学独立地检测标志物表达的细胞类型。即使细胞特异性标志物以非常低的量表达，或根本不存在，表观遗传-qPCR也可检测这些细胞(例如，Th17细胞中所发现的，参见上文)。另外，某些细胞不表达细胞特异性标志物，即使这些细胞未进入已知与标志物表达相关的特异性细胞状态(例如，调节性T细胞中所发现的，参见上文描述)。通过基于表观遗传的qPCR不可检测这样的细胞。另外，对于该实施例，选择的T-淋巴细胞(CD4⁺辅助性T细胞、CD8⁺细胞毒性细胞)并未代表完整的T-淋巴细胞组(参见图1)。细胞血象代表科学知识的当前状态，且不能排除存在另外的细胞类型或存在其亚群的错误定义。

表6.来自健康志愿者血液的绝对细胞组成的评估。通过对白细胞以及T-淋巴细胞进行qPCR来评估人血样的细胞组成。使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行qPCR。在平行实验组中确定qPCR的校正因子(此处未详细描述，评估C-因子的实施例参见实施例1)。(C-因子)校正因子，(FC)流式细胞术，(S04)(S08)内部样品编号。(qPCR)实时定量聚合酶链式反应。

实施例3-使用已知组成的样品利用所确定的测定-校正因子(如实施例1所显示) 来评估患有自身免疫疾病志愿者的未知血样中的绝对细胞组成

获得患有自身免疫疾病志愿者的未知白细胞和T-淋巴细胞组成的人血样，用于经由qPCR评估绝对白细胞和T-淋巴细胞组成。如实施例1，将血样DNA分离、经亚硫酸氢盐转化，以及经由qPCR评估亚硫酸氢盐转化的DNA的相对量。相对于细胞非特异性DNA区域的亚硫酸氢盐- 可转化的DNA(始终不依赖于细胞的恒定模式的亚硫酸氢盐-可转化性)，设置细胞特异性基因区域中亚硫酸氢盐可转化的DNA的量，以获得所评估细胞的相对量。

使用流式细胞术，在平行实验组中测定人血样中粒细胞、单核细胞、 B-淋巴细胞、自然杀伤细胞、T-淋巴细胞、CD4⁺辅助性T细胞、调节性 T细胞和CD8⁺细胞毒性T细胞来确定细胞-特异性测定-校正因子(参见实施例1的方法；与实施例1相比，实施例3的人血样不同)。使用这些细胞特异性测定校正因子校正所获得的评估细胞的相对量。例如，T-淋巴细胞的qPCR评估T-淋巴细胞的相对量，患者M06为8.49％，患者M10 为23.94％。校正揭示T细胞的绝对细胞量分别为5.4％和15.3％。

与来自健康患者的数据(参见实施例2)相比，对于患有自身免疫疾病的患者M06，观测到白细胞血象内白细胞的5种亚型有4种明显减少。对于患者M10，仅观测到B-淋巴细胞和单核细胞的绝对数目明显减少。

另外，两名患者之间的T-淋巴细胞亚型也观测到差异。对于患者 M06，T-淋巴细胞的三种亚型的qPCR分析揭示CD4+辅助性T细胞以及 CD8+细胞毒性细胞强烈减少，而调节性T细胞水平的减少较不显著。对于患者M10，与实施例2中两名健康患者的平均值相比，所有三种细胞水平同时减少约50-60％。

所有这些差异可能与，例如这两名患者的不同药物治疗和/或疾病阶段相关，并且提供了用于疾病诊断、预测以及伴随监测的临床常规手段。

表8.来自患有自身免疫疾病患者血液的绝对细胞组成的评估。使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物，通过对白细胞以及T-淋巴细胞进行 qPCR来评估人血样的细胞组成。观测到某些细胞群水平明显降低，这是自身免疫疾病已知的。在平行实验组中确定qPCR的校正因子(此处未详细描述，评估C-因子的实施例参见实施例1)。(C-因子)校正因子，(FC)流式细胞术，(S04)(S08)内部样品编号。(qPCR)实时定量聚合酶链式反应。

实施例4-基于嗜中性粒细胞明胶酶相关的脂质运载蛋白(LCN2)的基因中的 AMP1730来检测嗜中性粒细胞(参见图2)

图2示出表明细胞类型特异性基因组标志物区域中亚硫酸氢盐-不可转化性的矩阵。分析了不同的细胞类型，表明通过亚硫酸氢盐处理，基因组区域AMP1730内的CpG为完全可转化的，这对应于0％的亚硫酸氢盐-不可转化性。在嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞内，AMP1730的特异性 CpG不可通过亚硫酸氢盐转化。因此，附图中的术语“(总)粒细胞”对应于嗜中性粒细胞。嗜中性粒细胞占粒细胞的约90％，嗜酸性粒细胞占粒细胞的约7％，嗜碱性粒细胞占粒细胞的约3％。

表7-AMP1730的差别性质量(Discriminatory quality):使用 AMP1730的测定特异性引物对“样品”中指定的细胞进行qPCR，以分析由AMP1730给定的基因组区域中存在的CpG的亚硫酸氢盐-可转化性。将来自纯化的细胞样品的DNA分离、经亚硫酸氢盐处理，以及通过使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行qPCR测定。通过将AMP1730 的亚硫酸氢盐-可转化的DNA的拷贝数与AMP1730的亚硫酸氢盐-不可转化的DNA的拷贝数进行比较来评估细胞的相对量，命名为“TpG/CpG- 体系”(可转化的拷贝数/(可转化的拷贝数+不可转化的拷贝数)＝细胞类型％)。将细胞纯化并经由流式细胞术分选。在嗜中性粒细胞样品内，使用AMP1730，超过95％的细胞被检测为嗜中性粒细胞。(bGRAN)嗜碱性粒细胞，(eGRAN)嗜酸性粒细胞，(nGRAN)嗜中性粒细胞，(MOC)单核细胞，(THC)CD3⁺CD4⁺T-淋巴细胞，(CTL)细胞毒性CD3⁺CD8⁺T-淋巴细胞，(NKC)CD3^-自然杀伤细胞，(NKT)CD3⁺自然杀伤细胞，(BLC)B- 淋巴细胞。

实施例5-基于AMP 2034和/或2035(PRG2)的嗜酸性粒细胞的检测

表明细胞类型特异性基因组标志物区域中亚硫酸氢盐-不可转化性的矩阵。分析了不同的细胞类型，表明与给定的其它细胞类型相反，在基因组区域AMP2034和2035内的CpG可由亚硫酸氢盐高程度的转化，且表明这种特定细胞类型(参见图3)。

实施例6-使用亚硫酸氢盐-不可转化的核酸分子(质粒标准物)作为归一化标准物 来评估细胞特异性测定-校正因子

发明人将亚硫酸氢盐不可转化的基因组质粒标准物研发为归一化标准物。这些基因组质粒标准物中的一种包括对稳定的调节性T细胞(Treg 细胞)特异的标志物区域(TSDR区域)以及对细胞类型非特异的标志物区域(GAPDH，管家基因，检测所有细胞，100％的细胞)。该质粒标准物被用于确定允许评估未知血样内稳定的Treg的绝对量的Treg-特异性测定校正因子。

在第一步中，提供了未知组成的人血样，分离DNA，并经亚硫酸氢盐处理。之后，评估亚硫酸氢盐转化的TSDR拷贝和GAPDH拷贝的量(表 8，第2部分)。使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行这些qPCR分析(表8，第1部分)，表明含有TSDR标志物区域以及GAPDH标志物区域的亚硫酸氢盐-转化的DNA拷贝数(表8，第2部分)。稳定的Treg的相对量计算为亚硫酸氢盐转化的TSDR拷贝数相对于亚硫酸氢盐转化的 GAPDH拷贝数的百分比。

亚硫酸氢盐-转化的TSDR拷贝数/亚硫酸氢盐-转化的GAPDH拷贝数x 100 ＝％Treg

67,70/6026,67x 100＝1.123％

稳定的调节性T细胞的细胞类型特异性区域TSDR，位于X-染色体。对于妇女，已知X-染色体的一个等位基因的表观遗传沉默。当计算稳定的Treg的相对量时，通过使用因子2推导出该影响(最终结果＝2.25％稳定的Treg)(表8，第2部分)。

在第二步中，基于所述基因组质粒标准物来评估Treg-特异性测定- 校正因子。所述质粒标准物为亚硫酸氢盐转化的，并且使用对Treg细胞和GAPDH的亚硫酸氢盐-转化的标志物区域特异的引物，通过qPCR来评估质粒拷贝数。还使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行这些qPCR 分析(表8，第1部分)。Treg细胞和GAPDH的qPCR效率应相等，因为新基因组的亚硫酸氢盐未转化的质粒标准物(底物)含有等摩尔量的Treg 细胞特异性和GAPDH-特异性基因组拷贝。因此，所评估的Treg拷贝数与GAPDH拷贝数的偏差对应于测定效率的差异。

Treg(TSDR)拷贝数＝6760对比GAPDH拷贝数＝6273,33

该偏差定义了细胞类型测定-特异性校正因子。例如：

Treg(TSDR)拷贝数/GAPDH拷贝数/100＝6760/6273,33＝1,077

对于Treg细胞，对测定校正因子1.1(平均值，n＝3)进行评估(表8，第3部分)。在未知血样WB01内，将Treg细胞的相对量通过因子1.1校正，产生2.05％的Treg细胞的绝对量。

Treg细胞的相对量/特异性测定-校正因子＝Treg的绝对量

2.25％/1.1＝2.05％的Treg细胞

表8：使用亚硫酸氢盐-未转化的核酸分子作为质粒标准物来评估 Treg-特异性测定-校正因子。

实施例7-用于检测和区别嗜中性粒细胞的细胞特异性qPCR测定的开发

检测细胞类型特定的差异性亚硫酸氢盐可转化性：

将来自纯化的嗜中性粒细胞(neutrophil granulocytes/neutrophils)、单核细胞、CD4+细胞、CD8+细胞、B细胞、NK-细胞和NKT细胞的DNA 经亚硫酸氢盐-处理，并分析不同的CpG二核苷酸基序处的亚硫酸氢盐转化的DNA。然后，发明人将这些CpG二核苷酸的亚硫酸氢盐可转化性(发现在原始(基因组)序列中被甲基化的胞嘧啶的C对比在原始序列中未被甲基化的胞嘧啶的T)进行比较(参见表4，位点259)。

令人惊讶地，发现与所测试的所有其它血细胞类型相比，脂质运载蛋白-2的基因组区域中的特异性区域在嗜中性粒细胞中差异性甲基化。这些区域被定义为发现片段，如，例如嗜中性粒细胞的SEQ ID 517(表4，位点259)。

亚硫酸氢盐可转化性的验证：

然后，在发现差异性亚硫酸氢盐可转化性后，发明人通过亚硫酸氢盐测序的方法分析较大基因组区域。该后面的程序用作探索和扩展所发现的差异性甲基化的区域，并且例如，用本文所公开的脂质运载蛋白-2 基因内的差异性亚硫酸氢盐转化的发现片段SEQID 517来进行(参见表 4，SEQ ID 517发现片段和SEQ ID 518区别性关注区域(ROI))。

在定义成SEQ ID 518的区别性ROI内，鉴定了待被分析的包括优选的CpG位点的优选关注区域(扩增子(AMP)1730，参见图2和SEQ ID 685)。

细胞类型特异性qPCR测定的开发：

在AMP 1730中，基于使用的扩增引物和探针进行详细分析，以开发高度特异性qPCR测定。设计并测试了亚硫酸氢盐转化的嗜中性粒细胞特异性AMP1730的扩增引物(正向和反向)以及探针(数据未示出)。

为了开发用于测定的特别优选的“完美”引物体系，开发了这样的引物，其并非100％对应于原始亚硫酸氢盐转化的序列但包括意外增加特异性的特定错配。引物序列中的错配加下划线且加粗。

TpG体系(在亚硫酸氢盐-转化的DNA中检测TpG位点)：

正向引物：q1730nm2Fw2_M1:ACCAAAAATACAACACTTCAA；

反向引物：q1730nm2R2:GGTAATTGTTAGTAATTTTTGTG；

水解探针：q1730nm2P4:FAM-CACTCTCCCCATCCCTCTATC-BHQ1。

CpG体系(在亚硫酸氢盐-转化的DNA中检测CpG位点)：

正向引物：q1730_m2F1:TACCAAAAATACAACACTCCG

反向引物：q1730_m2R2_M1:AGGTAATTGTTAGTAATTTTTACG

水解探针：q1730m2P1:HEX-CTCACTCTCCCCGTCCCTCTATC-BHQ1

基于测试-模板测试TpG-特异性PCR-体系的技术特异性(参见图4)。发现TpG和CpG特异性PCR体系分别对亚硫酸氢盐转化的模板和亚硫酸氢盐未转化的模板为高度特异的。另外，TpG-特异性和CpG-特异性 PCR体系分别未显示与CpG和TpG模板的交叉反应性(图4显示TpG- 特异性PCR体系)。为了进一步增加qPCR引物体系的特异性，Mg2+浓度从(通常应用的)3.2mM增加至3.5mM(参见图4)。

使用某些所分选的细胞部分以及使用全血样来测试嗜中性粒细胞-特异性qPCR-体系的生物学特异性(参见表9)。发现所建立的qPCR测定对嗜中性粒细胞为高度特异的。

由亚硫酸氢盐转化的嗜中性粒细胞-特异性标志物的拷贝数与样品中亚硫酸氢盐转化的和亚硫酸氢盐未转化的嗜中性粒细胞-特异性标志物的拷贝数总和如下计算样品中嗜中性粒细胞的相对量：

嗜中性粒细胞％＝

亚硫酸氢盐转化的嗜中性粒细胞拷贝数/亚硫酸氢盐未转化的嗜中性粒细胞拷贝数x 100；

嗜中性粒细胞％＝253.67/(253.67+152.67)x 100＝62.43

本测定在这样的意义中为特别的：使用“常见的”合适引物和标准物PCR-方案扩增亚硫酸氢盐-转化的嗜中性粒细胞-靶-DNA未提供充分的结果。仅在PCR中使用本文所确定的策略性位点处设计具有突变(“错配”)的扩增引物，连同使用较高Mg²⁺-浓度之后，允许嗜中性粒细胞-靶区域的有效扩增。

在下一步中，可设计基因组质粒标准物，以及可评估细胞特异性测定-校正因子(参见实施例6)。

实施例8-使用亚硫酸氢盐-未转化的核酸分子(基因组质粒标准物)作为归一化标 准物来评估细胞特异性测定-校正因子以定量细胞的绝对数/微升

发明人开发亚硫酸氢盐未转化的基因组质粒标准物作为归一化标准物。这些基因组质粒标准物中的一种包括对T-淋巴细胞特异的标志物区域以及为细胞类型非特异的标志物区域(GAPDH，管家基因，检测所有细胞，100％的细胞)。每种单个质粒含有相同拷贝数的这两种标志物区域(等摩尔)；这些质粒中的两种对应于DNA拷贝数/单个免疫细胞，因此被视为单个细胞。将含有限定数目的所述基因组质粒分子的储备液用于确定 T-淋巴细胞-特异性测定-校正因子以及评估未知血样中T-淋巴细胞的绝对数/微升。

在第一步中，分离未知组成的四个人血样的DNA。将该分离的DNA 以及基因组质粒标准物的基因组质粒经亚硫酸氢盐处理。随后，通过 qPCR评估亚硫酸氢盐转化的T-淋巴细胞-特异性标志物区域和GAPDH- 特异性标志物区域的拷贝量(表10，B、C部分)。使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行这些qPCR分析(表10，A部分)，表明亚硫酸氢盐-转化的DNA的相对数以及含有T-淋巴细胞-特异性标志物区域和GAPDH 标志物区域的基因组质粒拷贝的相对数(表10，B、C部分)。

未知血样中T-淋巴细胞的相对量百分比被计算为亚硫酸氢盐转化的 T-淋巴细胞-特异性标志物的拷贝数相对于亚硫酸氢盐转化的GAPDH拷贝数(表10，B部分)。

(例如RD260314)：1896,7/6570,0x 100＝28.87％

在下一步骤中，基于所述基因组质粒标准物来评估T-淋巴细胞-特异性测定-校正因子(表GR，C部分)。如上所述，所述基因组质粒标准物为亚硫酸氢盐转化的，并且使用对T-淋巴细胞和GAPDH的亚硫酸氢盐-转化的标志物区域特异的引物通过qPCR来评估质粒的拷贝数。还使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行这些qPCR分析(表10，A部分)。T- 淋巴细胞和GAPDH的qPCR效率应相等，因为新基因组的亚硫酸氢盐未转化的质粒标准物含有等摩尔量的T-淋巴细胞-特异性标志物区域和 GAPDH-特异性标志物区域。因此，所评估的基因组T-淋巴细胞拷贝数与 GAPDH拷贝数的偏差对应于qPCR测定效率的差异。

例如，平均T-淋巴细胞拷贝数＝6058对比平均GAPDH拷贝数＝5483

该偏差定义了细胞类型测定-特异性校正因子：

平均T-淋巴细胞拷贝数/平均GAPDH拷贝数＝6058/5483＝1.1。

对于T-淋巴细胞，对测定校正因子1.1(平均值，n＝2)进行评估(表10， C部分)。在未知血样RD260314中，将T-淋巴细胞的相对量通过因子1.1 校正，产生26.24％的T-淋巴细胞的绝对量(表10，D部分)。

T-淋巴细胞的绝对量＝T-淋巴细胞的相对量/特异性测定-校正因子

例如：28,87％/1.1＝26,24％的Treg细胞

另外，评估未知血样内T-淋巴细胞的绝对数/微升(表10，E部分)。如上所述，所述基因组质粒标准物(储备液为6250个拷贝/微升)为亚硫酸氢盐转化的，并且使用对T-淋巴细胞的亚硫酸氢盐-转化的标志物区域特异的引物通过qPCR来评估质粒的拷贝数(C部分)。使用亚硫酸氢盐-转化的归一化标准物进行这些qPCR(A部分)。

由储备液的已知、初始基因组质粒数(6250个拷贝)和未知血样内T- 淋巴细胞-特异性标志物的qPCR所评估的拷贝数(参见B部分)相对于 qPCR所评估的基因组质粒标准物拷贝数(参见C部分)计算未知血样内T- 淋巴细胞的量/微升。

(例如RD260314):(6250x 1896,7)/(6058,3x 2)＝978个T-淋巴细胞/μl (参见下表10)

表10：使用亚硫酸氢盐-未转化的核酸分子作为质粒标准物来评估 Treg-特异性测定-校正因子。

序列表

<110> 艾皮恩蒂斯有限公司(Epiontis GmbH)

<120> 鉴定生物样品中定量细胞组成的方法

<130> E31672WO

<150> US 61/813,802

<151> 2013-04-19

<150> EP13173442.8

<151> 2013-06-24

<160> 689

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 1

cggtcactca cctgcatctg ccctgggcag caggaggaag gccagcagaa 50

<210> 2

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 2

catggaatct gctgggtggg cacctgctta gtggctccag aactcctggg catttgggag 60

cctgggatag cctggagttg ggagtggcct ggaggaaggg gcttcaattt cctgctctga 120

aaaagggaag aacagcagac tttggtctgt aaatctttct tccatatgta gttgaaggcg 180

agcatacctg tcttagggac agtgaaatcc cagaggctcc tgatcattcc tctcctgact 240

ttgctttgtt tcaggtgagt ttccaagacc cttatgagtc ctgtggtgtc taggatagtg 300

ctgctttcta atggccaggg tgtaagtgga gggatctaga tactgtcata tcctgtttcc 360

tagagcctga catgtagtgg gtgcccagta aatgttcatg gctgcatgat ggactggctc 420

cagttagcct ctggatgagg gctggtagag cagtgctggt ggaattctag aaagcaggga 480

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agaaaagcag agttggagaa tgggactgag caaacacatt aacagtgttc tgaggacagt 600

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ctcttttcta gtttcccatc ctctgccatt tacttctagg aaagtcctac tctccaggtg 780

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cacaggcaag ctcagatact ccagggtgga ggccagctgc caacaggagg gcctgacttt 120

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<213> 智人(Homo sapiens)

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acagtcttac attatcccac acacacaggt cacacacaca gtgacatggt cttacacact 480

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<213> 智人(Homo sapiens)

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ttcagcccac ctttcccaac tctgtcctct cctcaccagc agtacctgcg actcgtggcc 60

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gaggaagtga ggtctgcccc tggtcagccc cactccccac tccctcaaca ccagggtggg 60

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aataagtgtt tcagattgaa atttcttgaa gaacccctag ccttttccat accaaataaa 60

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cacaatggaa tcagtgatgc tcatggctag ggaggcaatg ctgaagtcaa gcttcctgga 840

actgtgttgc agccttgtat attaccatgg actatcatca acttctttgg ctactggtat 900

cctttccagg aagcacaccg ctgcttttgc tgtaatggta cccattttct gctgaagttg 960

cctaggattg ggctatgctt agcttagact gggtgctcaa aaaccatttg gatgctgaga 1020

gaat 1024

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taggagctca atccacagct atagatgtgg tgaggggtcc catcccttcg 50

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ttgagtaggg gcagagatca gagtgattag aacatagagt gagtttaaaa ctcccctgcc 60

ctcctctgcc ccaggagccc aattttccca agaatcagga tgtttctggt ggaaaccttg 120

ctacctgctc tctggtctcc actgttcatg cctcttgcgc cactgtcaac acaaatccct 180

attttcaaca ctgctccctt accccttgct ccctgtgcaa actcacaaat taagggtaca 240

ggttgaattt ccctgaacca agctacagaa agagcctcaa cccatatccc cacaagaaag 300

ggtagaaatt gaaaatcata gaggagaacc ctggaatgtc aaactgaaag agacagaccc 360

tagggaccat ctagtcgaag ctctttggtt ccacagagtg attctgggac ccagaggggt 420

gaagtgactg gcctcactca tgagtatgcc ccaattggaa ccagcattct cctcatttct 480

agccccatct tggcttgtcc taggagctca atccacagct atagatgtgg tgaggggtcc 540

catcccttcg tgggagtctc attcgtagcc tgaaaagggg tctctgctga acccaaggca 600

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ggaggagcag ctgccacatg atgccacact ggagtggaca agtcaccaaa gatatccgga 720

gccctaaagg gaccaaaccg actagacagg aggaagtaaa cagcctttcc ccagcccctc 780

cacccatctc tgtcacccac caatttcctt ttcttgaaac ttcatctgac ttctcagtct 840

gaagtctggc aagggagccc caccatagaa caggaccagg aaggaaagag cctggaggca 900

aggtgggtgg gtctgccccc tttactccct caaaggtctg tggctgagca tctgaggaca 960

cacacagaat ctgccagagt gtgccctcag ccatcccagg atgcttgccc catctcctgg 1020

attt 1024

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ttatcaaatt caagtcctct gccagcaaat ccaggatgtt tcattctacg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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ccaaaggcac agtgagctca catgtgggca cacacatggg gaggcacaga tctgtgggcc 60

ccatggggat gtcctggcca ggctctgtct cagccccaga ccccacccct ttccccagac 120

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gcatcagagc gagcatgctc agctcctcct ctttgatgtg tctgtggagg agggctggcc 240

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atttaatttt ttcaccccct tgctgtcagc atgcagaccc ctttattttt tgattgggga 360

agtagaggtc ggaggtggag ccaggaaagg gtttgccatc cacagcccac aaacacacag 420

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acagcccctg cccaggcaac ttatcaaatt caagtcctct gccagcaaat ccaggatgtt 540

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tggctagtat ccccacgacc accagcagca ccctcactgc agccaccacc accgcagcac 660

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gcat 1024

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gggacatact gtgaggcaga ctgaacggta cagtaggtgg cccagttccg 50

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tatacactct cgtatacaca caaacctgca cacacagaca gacatccaca aagagctgca 60

cacacatgca tacccacaca ggcaaactca cccatactta gagacacaca aagacgcaca 120

tgtacaagca cactgaaaga gtcacagaaa cacaacatat caaagcaata ggacccaacc 180

tgagcaatat agcaagacct tgtctctact aaaaatcaaa caaattagcc aggggtactg 240

gcacgcacct gtatagtccc agttcttggg aggctgagac cagaggatca cttgagccca 300

ggagatcaag gctgcagcaa gctatgattg tgccactgca ctccagcctg ggcaacagag 360

tgagatcttg tctcaaaaca aaacaaaaaa agcaaagcaa taggaggcaa aaatatgcaa 420

ataagcatag caatatccca atgtagaaag ccagccccag agatatagac atgagccaat 480

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gacttcagaa gctacggggc agcagaccac tatgggcctg accccactaa ggcccggcct 840

gcatcctcat ttgcccacat ccccaactac agcaacttct cctctcaggc catcaaccct 900

ggcttccttg atagtggcac catcaggggt gtgtcaggtg agtccaaggg gtcggaggca 960

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ggag 1024

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tggttgaaca ataaacgcat gactctccct gaatcttgcg tgtgtgcgcg 50

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aacctgacct aagtcacctg aatcccaagt gagaagaaaa tcctaaacct cgtacccaaa 60

cctgtctcct tgatggcctc aaccccattc ccaatgccat ccccaaccac aaccacaatc 120

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ttac 1024

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ggggctcaca tgtgattccc gccctccagc gtgctgagtt tagcttaacg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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caaatgaccc gagaagttgc gaggctcccc ggtggcgggg acggggggca ccccgacgga 60

gccctcggac ccttcccgcc ctaggacgac cctgcccgca ccgagccccg gcccagctgc 120

cgcgccctag cccacgccgg cgcctgcgca cctaccatgc ggcccgcggc ccgcgagacc 180

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gcagtgcagt ccccgcagcc cgggcggcgc cccctcccgc actggcggag gacgcggccg 360

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tagcttaacg ccgtcacggt gtccctgcgg cctccagctc ctcctgcccc ccattcagac 600

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cgaccatcac cccctcgaaa cccttccttg gggccccccc actgccttct gaaaaagagc 900

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ctgc 1024

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aggccaggcg cagtggctta ggtgaaggcc acaccagact tgggcctacg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 36

gatacaactg gttaccgccc tgtaaagcag ataataataa acattacatt tcagtgctct 60

atagaatagt aagcagattt gcctcttctt gcctctatgt ctactcttca cagtctcacg 120

tgaatgggtt gcagtatctt gctggggttc ccttcctaat taaaagagtt ataaaaattt 180

tgaccaatgt tcattttata tttctaccat tgtcatgttt ttaccttctt gaaaaattat 240

tttttaagag ttcctgctcc ctaggctttt tggaaggatt ggtttaaaca tctgtattga 300

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taagaggttg tactgagcct ttagaaaagg gcggggttcg ggggggagtg agctgaaaaa 420

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ttaaggtcaa ggtgagtagt aggccaggcg cagtggctta ggtgaaggcc acaccagact 540

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ctctgtgcct ggtggggtcc agccctgtat gtggacttcc tgggggaccg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 38

gtctgccttc acgtgtgccg gggagaacag agattccctt tggcgtcatg catgtgtctg 60

gattctctca gaaaggagga ggacgtggaa ggaggaggac gtggccagca ccatggtctc 120

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tgggggaccg cctgcatgct gggaaagtcc tgcaactgtg ggctctgggc cggacccctc 600

ctccttgggg agcgttgctg tggtctccgc agcctgttgg tgtggtctga gaggggactg 660

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cgcagaccca ggccacccag gggcgacaca cttgaccagg tgacacctgg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cgcatcccag ggcccccggc ccatgccgcc gccggtccct cccggcgcgc ccgcgcctcc 60

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aggattcaag ccactcgagg gctcagggag gcacccccgg ggagaggggt gaggggagca 420

aggggcggaa atcttccagg acgtgaaagg gagctggatg aggtgaccac agcgcaaggc 480

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tgacacctgg tcaccgggag tgagagagag tagggctgtg atggagggag gggctggcat 600

cagtccccgc tgctctgagg acacccggct tgggacgcgc tgatgccagc ccctacctcc 660

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aggaagtcct ggccagcact ccagctctgc tgttgatttg ctgtgtgacg 50

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tagacagagt cccgttcttg tcgaccaggc tagagtgcag tggcacaatc tcggctcgct 60

gcaacctctg cctcccaggt tcgaatgatt cccctgcttc agactcctga gtagctggga 120

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ttcagtaccg tgaataaata cacacaggaa gacaactctg ggctctcacg 50

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ttctgcctcc catatttccc cccagtattt taagctccct ttactttaag tctgaggttg 60

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aaggctgtgc aggaccagct gcaggtcaat gacaacacgc agggaccccg 50

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cagaacagtg ttccttaggt tgaggcctct ttgatccatt caaatcaaga tcattatggg 60

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tttggggagt gtgggggaca ggagggaaag aaacctggtc cttgtagccg ttcgtctgct 60

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aggggctgga ggatactaca cgcaggggtg ggctgggctg ggctgggctg ggccaggaat 180

gcagcggggc agggctattt aagtcaaggg ccggctggca accccagcaa gctgtcctgt 240

gagccgccag catggatgac atctacaagg ctgcggtgag ggacagggct gggtagggct 300

ggggtgggca ggcccactgg gggctcactc agctgagagt gcggggttag tagccccagg 360

gaagtggtgg ggaccaagga gaaggcctac gtgccttcaa cccaggccct cacagggaca 420

gtgattctgg tgtttgagga tgcagaaggg gtagggggtt ccgggtctga agggtggtgg 480

aggaggttgc agctttcagc atcgtgtctc actctctgtt tccaagtgtc tgtggtctgt 540

ggcactgtcg ctcagccaca tgtctctgca tttgtctctg gacgtttttg cctttctctt 600

ttcatctctt cctcctgagc tgtctgagtc cccattactg tctccctgtc cccaaccccc 660

atttctgccc ctcacattct gcttctcaca tgctcaaaat ctgccacccc actccagccc 720

cttggcgggc cgaagatgct ttggagggtg gagggtgtga gaggaggggt ctgtagagcc 780

tgagtcctgg gctggagatg gggctttgaa gtttgaggca gggaagttct ggacatgagg 840

gagaaccaag gaagaaggaa cagagaactg gggccccagc tcccatcatg cctggcaggc 900

tcagggctca gtggcttagc taggggtgag agcgagggaa tgagggctgg agagtggtca 960

ccccaagccc ctgcaacctc ctgggtcact gagggtcttc agatgctatt ctatcctggg 1020

tggt 1024

<210> 49

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 49

cgcctttggt tctggaggcc cacaaagctg cgtcagagca ctccccaaaa 50

<210> 50

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 50

gcagtgccag gccacctgcc actgcccacg gtgacacagg gtagaagcca agagtctggc 60

attttgagac agaggagcaa aaagttctct tcagaaactc ctctttcccc cacctcttcc 120

acgtggagac atcagacacc catagcctgg aaagtgcccc tgacagaaga aggtcagggt 180

gtttcccatg cagatcagca gtcgggtggg ggagaccggt gccccaccac ttcctgggag 240

aggtgcccag gcagccacag gccctggggt gagagggctg ccaaccactc ccctgggcta 300

tgcgttagtc tccgtcagct tggcctctgt gtcgctgtca ctcagataac tgtgggagta 360

tcgcggtctg gaggtgttgt cgagagggtc gtgctcatca tctgaccgat caggggcaag 420

ggacttccag tagctggtgg ggctgcaggg accgaggaat aaggttaggg acaaatgaca 480

ctcctaccat taagcacgca cgcctttggt tctggaggcc cacaaagctg cgtcagagca 540

ctccccaaaa gccaaacatt gttaagtaaa aaccttcctt ggcttactta gaagatactc 600

aaaatgctaa gaggaaggag actctggaag cttttaaagc tccgaggaaa gggatgctga 660

gagcagtgag tctcggactc aagcgtgcat aagaatctga tgcaggttcc tgggcccttc 720

ctcttagaaa ccttgaatcg ctggcttttg ggtacaaccc agtaattctg cattttcagt 780

ccttccccag aaggctctga agcaggcagt ccgtgaacca cattggcttg gagactggag 840

gtctggtgag tacaacttgt ctagggtagg ggctctctta ggcgagtgat tcctaaaaag 900

attccttctg aggaggaggc gctttccctg tcaaatactc ccagatctga accctttccc 960

ctaatgatgg ctccctgagg cctgtgagaa ttttcagctt tgaccatgcc atcatctact 1020

aaca 1024

<210> 51

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 51

cgccattgtc agcttcatct cgcggcactt ctacgtggcc aagggcaacc 50

<210> 52

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 52

catctacatc cgggagtatt tccacagcca cgtcagcggc ggccaccccg aggccactcc 60

tctccgtgtg atgtacacgg accggccgct gagccagacg gacccagtca cgctgcagta 120

ctgttgcctg accgacgacc gccaggcttt ccgcccgccc acacgggcag agctggcgcg 180

gcaccgcgtg gtggtcacca ccacctccca ggcccgtgag ctcagggtgc cggtcggctt 240

cttctcccac attctcatcg atgaggcggc ccagatgctg gagtgcgagg ccctcacccc 300

gctggcctat gcctcgcacg gcacccgcct cgtgctggcg ggcgaccaca tgcaggtcac 360

accccggctg ttcagtgtgg ccagggcccg ggcggccgag cacacgctgc tgcaccgcct 420

cttcctgtgc taccagcagg agactcacga ggtggcgcgg cagagccgcc tggtcttcca 480

cgagaactac cgctgcacgg acgccattgt cagcttcatc tcgcggcact tctacgtggc 540

caagggcaac cccatccacg ccaggggcaa ggttccgccc cacccccggc actacccgct 600

catgttctgc cacgtggcgg gcagcccaga ccgggacatg tccatggcgt cctggctgaa 660

tctggctgag attgcgcagg tcgtcgagaa ggtgcaggag gcctacaaca cctggcccag 720

ctgctggggc ggccgcgagc agaggtgcat ctgtgtcgtt tcccacggtg cccaggtgag 780

cccggccagc ccgggacagc ccccgaccgc acccctgctg ggggaggggg agctctccgg 840

ctgatggacg agcccccgcc tcagtttccc catctgtaag agggggctgc agtatttgcc 900

tcccagggct gaggtggggc tcggcccctg aggtgtctgg agcttggtgg gggtgccgtc 960

tccttgtcgg gggtggccca gtcctcactg cgtcctgcgc tcatccccga gcttggtggg 1020

ggtg 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 53

cgcggtattt tcagataaac accagaggca tgactgatgt ggcccttgcc 50

<210> 54

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 54

acacaagtga cacagctcta aggccagaca gtaactgcag gtaacagccc acacccccct 60

tctctgggcc tgttttccag ctgcccagat ctgtctgtag ctctatgact gacccgatga 120

tgctacaagg cagctgggct gaggtggttc ctaccttcca ggccaacagt gcacaaaatg 180

ggttccagcc tctgggcgtg ggtactgcac tgctggtctt tgatgccaca gtggctgtct 240

cagtccctgc tgcaggctga cccacccaac cccaaacagt tcccctttgg ggtgcttggt 300

aatgaggctg atgccctggc agctggggag gcatcctctg tgtgctccca cccaccctcg 360

gcctcggctc atgctcaggg gatgagcttt gtgcccagcc gggctgtatc tacctgccct 420

gctcacaggc ctgtcatgtt cacattcatg tccagcctcc ctcctgcctc cccagactga 480

gtggtgccct cagacggaaa cgcggtattt tcagataaac accagaggca tgactgatgt 540

ggcccttgcc ttgtggagtg tgatgcagcc gcggtgagac aagtgagctg aaggaatgcg 600

gagggtgggt agccccacag gtgccagcta cagaagtggg gtaggaagaa gccttgtacc 660

acccccacca ggcgaagcgc ccacaacgcc atttgccaaa ggtatggcaa atccgcaagg 720

cccctcggtt ctggggccag ccccatgtgg cccctggcct ccaccagccc cagccatgac 780

tcctaccgct ctgctctgaa ggacactttc ccacccctct ccttgggcct ctgcgaggct 840

aggctccaag gcaggtcaca gttggtgcgg tgggtaagac agagccatgg ctcctggtgt 900

caagccctgg ccagtctgct tccccccacc cccacatgac acagcagacc ccacaggaca 960

gaggcttccc agaagaggtc gcattcgaca gggccttgca cacacaccca tgccacaggt 1020

ggag 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 55

agtggccaca ggcagagcct gcctttgatg aggttacaga ggcagccacg 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 56

aggtcaaggt ggggaaacag ctgcagccaa agattcccta ccccagggag ggaagaggga 60

gctggcttgg cctgccttgc cccttagggg taggggagct gtgacagccc atttcccccc 120

tttaagccct agatgtaggg gtttggagca gggaaggcca tcacctcata gaccctgggg 180

caagcatccc agaggccctt ccggagcctg gacctcgctc tgctttccag cccaccagcc 240

agctgctgag tcccaagccc ctccttgggc ttgatcccct gggctgcagc tgggaacagg 300

ctggagacct ggcctgggaa gccactgagt tgcccccacc tgccctgaga tcccctgtga 360

ctgggctggg ccccgatctt ccctgggggc caggccctta cctgggtgcc agtgaaggcc 420

gggtgcctgg tccccccagg aggctggtct tggagcaggt ggtccggtgc tggtggtgga 480

aggacagcag cttctctgct agtggccaca ggcagagcct gcctttgatg aggttacaga 540

ggcagccacg cctgtgctct ttggactctg gtgggtgggg aggcttcctg gtcactaacc 600

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tctgcctttt aggtgcctac tctggggaac aggtcagcat caggcacggg gctgggacca 780

gaagaagaga gcacacatgg cccagagtct gggttctgtg gtgagggcac aggtcggctg 840

gaggtggact ccaggcttgg gggaagctgt gggctggcgt gtgtgccatg cctgtgcgtg 900

ggtggcaccc ataggtgtgt gatcctgtgt acctgggtgg tgcctgtgag caggacatgg 960

atcttgtcac agaagatggg gactgaggcc cctggggcat tacatggagc gctgagattc 1020

cctc 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 57

cgggccatat ggtgtctgtc tggcacaaca atgtgactca gctctgctgt 50

<210> 58

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 58

cttttcattc tggagggctt gagagggaga gtgattgact ggaaaccctg gaagaagggt 60

ctagaaccca ggtctctgga gtcttcacgt actaaattgc cttccctcgg aggggtttct 120

gttccttggc attcaagggg accagagtaa gtcatcacca agaaacacct tccctttcac 180

ttgcctgaat taggatgctt tcagttacaa acactgcaaa cccagctcaa agtggttaaa 240

gcaaattgaa acatccaaca gaattgtttt caggcaccct gggtttaggt gtcaaaccag 300

tccttcaaga ttagggttgg ggttggagtt ggggttaggg ttagggttag agtcagtatc 360

tgactctctg cagctctcaa ttcccctttc ttttatgttg gttttactgt gagactggtt 420

agggttggca aagatgaccc cagagcaggg gttggcatgt ttttctgtag agggccacat 480

agtaaatatc tgagggcttt gcgggccata tggtgtctgt ctggcacaac aatgtgactc 540

agctctgctg ttgtagtaca aaagcagcag gacatgatat gtaaatgaat gggtatggct 600

gtgtgccata aaactttatt cattgacact gagatttgaa tttcttgtaa tttttgtgtc 660

tcacaaaata gtcttctttc tttttttttt aatgtaaaaa ccagccgggt atggagactc 720

atgcctgtaa tctcaacact ttgagaggct taggcgggag gatcacttga agccaggagt 780

tcaagaccca cctggggaac atagcaaaac cccatcttta tattttaaaa aaaagtaaaa 840

actattagct cataggccat ccaaaaacag gtggaagagg ctgctggatt tggcctgtgg 900

gcactgagct tactgagctt acatcttccc agctcagtaa gcctggcaga aggtatctct 960

ttcccagtag ttgggggaaa agtcccaggg tggactctca ttggacagac ttgggtcaca 1020

tgcc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 59

cagaaaatca gatgactctg cttgatagtg ccactccccc agtggattcg 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 60

caaatctttg accactagca gtgtctctgc ctcaatatta tctccacgca gaatttcttt 60

caaaattcaa aattcaaaat ctatatgctc ctgggatatg taatccacag gagctgactt 120

tttagtgtga tttgatcatt agatttccag gttagaagaa acccaggtag ggtagagaaa 180

tgggccctgg aagaacaagt caccagtgaa aggctgaaaa gatcacagaa aaggtggggg 240

tggggagggg tgaggacagg aactctttac cttcctcgtg ttacccaggt cctgcggatt 300

tagctcaggc ccctccgggc cactggatct gggctggtct gtcagcctag gatccagggc 360

tccagggctc cagggctcct taccagaaaa ggtggagggg ggtggccagg aagtgggagg 420

gttgttaacc tcttctcttc tctccagatt ctcccccgta accccatgtt ggttactctc 480

acaatggtcc aggtcccagg cagaaaatca gatgactctg cttgatagtg ccactccccc 540

agtggattcg tggacatctg ggacaggtct cacttggctt agaaaagccc aggaggcgag 600

cagcaggccc gtgtgggcac ctgatacttg ttaggggtgg agtggaggca ggggctgaca 660

caggtgcccg ccaacctttg ctataaatga atgctctttc tactccagaa tgacctaaaa 720

accactactc aggttttgtt ttttatttgt gtgtttcatt tggctcctgg gtggagttaa 780

ttgatcctcc cattgccatc cacgtaccca cccctccccc tgccacacac agagtcttgc 840

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ccagttctcc ttctcaagtg actcatctac gccttgcaaa atccagacaa gtatctggaa 960

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aagc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 61

cgctgcactc tgccctgctg catctgtcca cgaggggaac aggatcaggc 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 62

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cctagaggga caaggggaag tgaggggaga gagtcaaggg gacagggccg aagatggtaa 120

ccctacccta gggaggggtt gccacagcca tcaacaaggg atttagtgtc caggccctgg 180

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ccccaccccc aagaaaatgg gacaccaagg cagccaagta acccaagagg ctacagaatg 360

tgctgatggc agagggggag gggtaactgt ctcaggatgg gggcaggggt caccccaagt 420

cgtgcactga gggtcacctc atcccacact gtgctctaac caacggggtt tctgtggcca 480

gccccagagg cctgtggtct gcgctgcact ctgccctgct gcatctgtcc acgaggggaa 540

caggatcagg cccatgctgt gtgcgtgcag gagctaggca gaccccacag aaaggtgtcg 600

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cagggagcca ggtgggcggg gaccccggcg ctgggtgcaa agccacaagt tgttgctgaa 840

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aggg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 63

cgagaagtac cagctcacca gccagcatgg gccgctgctg ctcacgctcc 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 64

aagacacagg ggactagctt tacgacaaca ggacataaaa gttaggttag ggttaagatg 60

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ctgacttgga ccattaggtc aagttcctgt ctgcttcgtc tccgcagagc tgaggaactg 180

cgtgtggagt cagcccagtc tggatgcaca ggaggatgct ggcggcacag tgagtgaggc 240

ctggtgccag agctgtgcgg accccttgtt ggccatggag cagcaggccc agaggccctc 300

tccccagccc tgcttgcctg cctcggagag gacagaggcc taggcccacg ggggagggtg 360

ttggcagaca gatgccctcc aggccctggg gcctccttaa cggcccctta acgacacgcg 420

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cctgaccaag atgcgctcta cgagaagtac cagctcacca gccagcatgg gccgctgctg 540

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cagggggtga gtgagggcag cccctgggct tcacgtctcg gccccaacct tggccaagct 660

gctatcttct cttagcctct tctgtaaaat gcttatcttc tgtaaaatgc tatgcttttt 720

tgtttgtttt gttttgtttt tgggtttttt tgagacagag tctcactctg tcacccaggc 780

tggagtacag tggcatgatc tcggctcact gcaacctcca tctcctgggc tcaagcaatt 840

ctcctgcctc agccttccga gtagctagga tgacaggtgc atgccaccat gcccagctaa 900

tttttgtatt tttagtagag atgggctttc accatgttgg ccaggctggt ctcgaactcc 960

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acca 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 65

cgcttgtatc acatggggaa tttggcaaat caagtccgat tcttttgcag 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 66

aggctaatta gcaaccgtct tcccaggtag ctgcaacgaa actggtctct tccatgctgt 60

taagcaagct gggtctcttg tttgcagtta gatcctggct tctgttcagc tgacttaggg 120

taggattatt cccctggcat tgaggaacac acacggttga gtcaaacagc ccaaacccca 180

ttagatggca agggaaaata ctgctgtact ctgatgtcac ccgaggaaga cacgggaaca 240

gatggtgaag gcaaaagctt catgcaccac agaaacctcg gaatacaact ttcccacgta 300

agaatgaata aacactgaaa gaggccaaaa ccccaaacac tctggtatga ggactgctct 360

tctcaaagcc aaaaggtcat tgggatggct tcttagaagc ccttgcgttg ctttttcgtt 420

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catcattact cttggtttga gaagtctgca gtccttggag gacataaaac taaaccccaa 720

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cgggttcagg aacctgctgg ttcctgatac ataaatcaga cagcctctgc 50

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accacattgc actcatcggg gtcacagggt ttcttccaag tgacccgcac atgcccttcc 60

catctctgtg tgacagtggc acctgcacca gactgcatgt tgaggtgtca tctgaaatta 120

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accccctttc ctggctccca taggctaagt gcctggcttc ttgagaagcc tgcttcttga 420

gaacaaaaaa gtgatttaaa gcctcatggg agatgagcaa tcctcaagac acaagcagaa 480

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ggctccggcc aggatccctt ccttctcctc attggctgat ggatcccaag gggctcctct 660

ccttgacctt cgtgctgttt ctctccctgg cttttggggc aagctacgga acaggtgagt 720

gttcatctgc ctgatggttt gagtcccatg ttagctgcca ggaatcagcg tatcttcgtg 780

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cgacagaatg ggagtggggt tgagcccacc cctcactgca gcccaggaac ctgagcccag 60

agggggccac ccaccttccc caggcaggga ggcccggccc ccagggagat gggggggatg 120

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ggtgctgtgg caggcccagc cttggccccc agctctgccc cttaccctga gctgtgtggc 840

tttgggcagc tcgaactcct gggttcctct ctgggcccca actcctcccc tggcccaagt 900

cccctctttg ctcctgggca ggcaggacct ctgtcccctc tcagccggtc cttggggctg 960

cgtgtttctg tagaatgacg ggtcaggctg gccagaaccc caaaccttgg ccgtggggag 1020

tctg 1024

<210> 71

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 71

cgtgagcttg ttggtagttc aaagtcaagt cccttggcca ccgtctcctg 50

<210> 72

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 72

cctgagagag cagatgacag aattgaagag agaggaggac ccgtgaacag gaaaggagac 60

cctagtgggg gcagtcatga agggtgagga gtaggaaata ctgacacaca gagacgggca 120

aggccacttg tctcctgcca gccctctgtg atggggacag ctgtggcctc cgtaacctga 180

gtccccctac ccctcccagc tgtatttata gccctggcct agcccagtcc ctgcccccag 240

atctgagttc cagggacagg aggtcatggg cacgtgtgtt gggggccatg ttcctttccc 300

cccattctag ggcctcaata ctgacatcac tctctcacca gcacgtatca ttccagctgg 360

aaacaccccg caatcgaacc cccagtcctt ccgtcccagg agtctctccc ctctgataag 420

tctcttctgc ctcccccagg tgccccaggc tcccccaaaa acctgctaaa agtctagcct 480

ttgtctttgc agctgccaaa cgtgagcttg ttggtagttc aaagtcaagt cccttggcca 540

ccgtctcctg gccagggaga gacccctcac tggtcccctc cccagctggg aggaggagga 600

gcaggaggca ggcaggcggg gactgaccca gaataactca gggctgagag taaatttagc 660

tggagagagg ggaggggaag gaccctattg gctggggaat ggggagggag ggccccagag 720

gggggtcagg gggctccgga gacagcctca gaggggtgtc cagagccagg cagcaaggac 780

cagaggaagg tggacagaga ccgaaaggac aaaggagaga cacagagaaa aaaagagacc 840

aaccccaaag ggacaaagac cccaacgttt gtccacattg ccgcagaggc agctggagcc 900

agtgctgcct gtccgtcccc atgggccacc ataggccatg gctgcacgct tctgtcctct 960

gggctggggt ggccagcctg ctcctccccc cggccatgac ccagcagctc agaggggatg 1020

ggct 1024

<210> 73

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 73

cgccaaccgc cacccaaagc ttcgtggagt gaggtctttc cactggcctt 50

<210> 74

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 74

agctcgggcc gggttccccg aagtctcgga acatgcccgg ggctggcggc tctgcggggt 60

acacggctgc tgggttctga ctcacccgcg ccgtgcggag tcttttcttt ttatgaatga 120

aaagttctcg ggctgaacca ctgcgaccgc ggggggtggg ggcgttgcag cggcgcggtc 180

acctccaggc tccacccccg agacgcgccg ccttggcccg tcggtcccga acttggcgac 240

gcctccccaa gtccggctgc agccttttca ccgggatggg cccggctcgg cgttccccgg 300

aggctgcggg cccgcccccc tgacgtagct gcccatacat ggtgtaactt cctcgccgcg 360

cccaggtgga gccccgggtt cccctgcgga ctgacgcacc tgccagagcc cgcgccccgc 420

cccagccctc tcgaggcctg ggctaacctc cgtttctgct cccacaaaat agcacgaaag 480

aatcacatct ctaggagcca cgccaaccgc cacccaaagc ttcgtggagt gaggtctttc 540

cactggcctt gttttaaggc ttcgagtata tgaaaagtga ataaatgaca aaccagggtt 600

acaaaaatgg tggcatattt tattttactt tatatttttg agaccgggtc tctgtcaccc 660

aggctggagt gcagtggctc gatctcggcg cactgcaggc tcaacttcct gagctaaagg 720

gattctcctg cctcagcgcc ccctccaagt aagtgggact acaggcgcgc gtcaccacac 780

ccaggtaatt tttgtgtttt ttgtagggat tgggtctcgc cgtattgccc aggctgggtg 840

gtatatttta aatgtttgcg ataaggtaat gctttgaact aaccccacat aaaatgcaat 900

ataatagtat tactcaggat aatttcagga gctataacga gttttaattc agggccacta 960

caggtgtcct gaggtctgat aaacgccatc ttcattacgg tcagtgcctt tcggaggctt 1020

gtgg 1024

<210> 75

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 75

cgtcctaatg attcaggctg ggcctttctg gactttaatc agtttctctg 50

<210> 76

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 76

cagtggaaac tctatctgac ccctctcggc ttactctcca ccttatgtgg gaggtgctga 60

gacctgagga tccagtgcct gtgctgtgtc accctgagct ggttcctctg catccagctg 120

gtctcccaca cccaggtttt ggccagctgc ccagacatgg gagcggcacc caggctgtgg 180

ggattggctg gcccagccca gcccagccta gcctcccaca gccttcccta catcaggggc 240

caggggaaaa aacctcccag aagaagggga gaggaggttg tgtgggacaa ggtgctcctg 300

acagaaggtg ccagggtggg ggtggtgggc ctggggcatc ctagcctgtg atggagatgg 360

gcactgggca agggattggg cgcacacata ggggagcccc agccttccca cattctccat 420

tgctgcccaa ggcccaggca gctcctggtt gctggcttgg aggatgagtg gttttctaac 480

tgaaaccaag cccctggcaa cgtcctaatg attcaggctg ggcctttctg gactttaatc 540

agtttctctg tctttctcaa tctaagtgct taccgggtaa ctggaggcca cttggttgct 600

ggttttggct gggcctttct ggactttacc cctcagcccc tgtttatcca tccctgttta 660

ctcttactgt tctatctcca gcactgcccg tctctgcctc tctccactgt ccctggagct 720

ccctgggccc ttccctgggc ctcaggacct cactcaccac cccatctgcc ctgcaggatg 780

ccacagctga gcctgtcctc gctgggcctt tggccaatgg cagcatcccc gtggctgctc 840

ctgctgctgg ttggggcctc ctggctcctg gcccgcatcc tggcctggac ctataccttc 900

tatgacaact gctgccgcct ccggtgtttc ccgcaacccc cgaaacggaa ttggttcttg 960

ggtcacctgg gcctggtgag tgtggcagca ggacgggtct ggggtctcag ggtggatgga 1020

cttc 1024

<210> 77

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 77

cgtgacccag ggcagactgg tagcaaagcc cccacgccca gccaggagca 50

<210> 78

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 78

ccctcccgcc ctcacatgca ggtggatgtc aatgcgtgca cgcacccagg ttttcttgcc 60

tgttcccacc tctttatcct ccttggctgg ttcctccgct ccattctctg gctcaggaat 120

ttgctcccca gggtttttca ttccgctctg tagcagaatg tgctactgtt gctttccagc 180

atcaaacttt tcactcccat ggcctctgtg ttcttcttcc taatgggtgc cctttctgcc 240

tggcgctcct ggaggccggg cccctctccc aagtgtgaat ctgatggaag caggtccttc 300

tcgccgggac ctcatgtgag aaatgacatg tcccacctgt ctcaaggggc cgctctctga 360

catcagagct gctgtagagc ggagaggggc aggggtgaag ggccacggtg gtgcaaccca 420

ccacttcctc caaggaggag ctgagaggaa caggaagtgt caggacttta cgacccgcgc 480

ctccagctga ggtttctaga cgtgacccag ggcagactgg tagcaaagcc cccacgccca 540

gccaggagca ccgccgagga ctccagcaca ccgagggtga gtgtgcagag gccccgctat 600

gtccacggtg atttttggag ggaagcactc tcctgcccca gcctggagtg accctggtgg 660

ccctgcttat agccccggcc caggggtgtc tggcaggaag gggtctccag accgtctgct 720

ccagggtccc ctttgagacc cggcaagggg aagtgcctgc caccaagagc agagccacat 780

ggtgtgctgg gagcgcttgc ggctgaggat ggggccggca tgggaggaca aggggctgtg 840

aggccggcaa ggccaggaag aggctgggcc cacaagcccc tagggggacg gctggggggt 900

cctggtgctc cgggctgggc aggaggcagg ttcccggggc ctcctctgtg aacctgctgc 960

gcctgcctgt gttaggccct cctgtctgca tgctgccccg cctggctaca gcgattccat 1020

ctcc 1024

<210> 79

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 79

cgaaagatat aaaagaaagg ggaatgtcta tggagaggga atctatacct 50

<210> 80

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 80

atttagttct cacaacatca gatgaatggg tactactgct atgatccttt ccatctaaca 60

gatgaagaag ctgaggaaca aagaagttaa gtagctttcc caagcccaca cagccagcaa 120

tttgagaagc taaaaatcag aacctcaagc tatcattaca ctccactgtc ccctgagcta 180

tgctaaaatg cactttgcag accccatact tcaggcatat cgagaccacc cctcatcatc 240

agagctggca gacaaactca ggtgcagcca gtgggattta atgtacctaa gaggtgcgtg 300

tgcatgtgtg tgtatccata cccacatttt cccaaagaaa ttgctgtatt attatgtcta 360

acacttttta tcatggctcc aaaggaatca tcacatccta aagagaagcc atgttcacag 420

ttaaatgttc caaacctcta catagcaacc aaacagagac ctttgcagac atccccagta 480

gtccactggg aggcatttta acgaaagata taaaagaaag gggaatgtct atggagaggg 540

aatctatacc ttggaggctt caggctttgg cagacggctt tcctcccaag tccaccttgt 600

cgcaagtagg agacactcag aaaagatcac tacagcatct tttcccgata acggaagcct 660

ccacagactt aacgttatct ttgccttatg caacacttta gaggacttgg tgaaagtgtt 720

ttgcgggctg actgaccagt gtgctaatca catctgcatt tggggcctcg ctgatccatt 780

gtgtttcccc agggcttagt gatgattagg aaactggtgt gagggataac tgtcttctgg 840

ctttcagatg ttgcttaaca cattgctgga acaggaaaca caagcaacaa tatgggtaga 900

caagtgggaa gaggttgtgg gttggaggta gaacagtgtt aggtgcatag caagaagaga 960

caaagtcaca ctgtaagaga agcatctgga ggagggaggt ggtcactcag gcacttattt 1020

taca 1024

<210> 81

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 81

agaaagtgaa caccttgggg gccactaagg cagccctgct aggggagacg 50

<210> 82

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 82

aagagcagac aaacaggaac agaagttctc actctaggtc acgggtttca tttgggacca 60

gtagcctagt ctttcagcct tcaggctgtt tttggcttga aggtggggtt tcaccaggga 120

cctgccccta tctgcctagg catttggctg cctcctgtca ttatcaccag ggaggtgcct 180

ctacctgcca aggttaccct ggctctagaa gcagaacttt ggccagaagc tgccacagaa 240

caggggtggg agagagaaga ggagctgggt gacagagcag aagcattttg gggaactgat 300

ccttcaggca gcagctgatg tacttcctct ctcctccaca ctccacccct actcgccctc 360

tctctctctg cttctttcct tttctctctc atggtagggt tatgagtcag ttgccaaaag 420

gtggggacat ttcctgatgc atttgcaaca ctgagaagtt atcttaaggg aggctgggcc 480

ccattctact catctggccc agaaagtgaa caccttgggg gccactaagg cagccctgct 540

aggggagacg ctccaacctg tcttctctct gtctcctggc agctctcttg gcctcctagt 600

ttctacctaa tcatgtccct ggtggaggcc atcagcctct ggaatgaagg ggtgctggca 660

gcggacaaga aggactggaa gggagccctg gatgccttca gtgccgtcca ggacccccac 720

tcccggattt gcttcaacat tggctgcatg tacactatcc tgaagaacat gactgaagca 780

gagaaggtga gtggaggtgc ctctttccgg gcctcctctg tgcatttgtt attatgattc 840

tcaaccccat tgcatttcgg aaacctaacc tctggggaga ttgaaaagaa caaaagttgc 900

ccaagctcca cccctagaca gcctgattta actggtctgg gaggggcccc aggcagccag 960

ttttaaaagc tctccaggtg gagagcaggt gaggggcagc cagggttgcc tctttctcca 1020

tctt 1024

<210> 83

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 83

ccaagatcgg tctcactgta agtctgctat ctgtattttc ccattcttcg 50

<210> 84

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 84

aacagaacca tgtccaggac ttcatccgtg ggacaaaaag agtgaatctt cagtaagtct 60

gtgtgcagag aagcctgaga tgatttacct catttctaag ctactactgt actttgttgt 120

tgttgttgtt gttgttttga gacggagtct cgctctgtca ctcaggctgg agtgcagtgg 180

cgtgatctcg gctcactgca agctccgcct cacgggttca cgccattctc ctgcctcagc 240

ctcccgagta gctgggacta caggccccca ccaccactcc cagctaattt tttttttttt 300

tttttttttt tttttttttt gtatttttag tagaggcggg gtttcaccgt gttagccagg 360

aaggtctcaa tctcctgacc tcgtgatccg cctgcctcgg tctcccaaag tgctgggatt 420

acaggcgtga gccaccgagc cggccaacta ctgctgtact tcttaccccc tgtatcaaag 480

agttaaaatc taattttttc ccaagatcgg tctcactgta agtctgctat ctgtattttc 540

ccattcttcg tctgatagcc accgacatta atgaccagct cattacatgt tgaggtgtgg 600

ggagatgggg gtagaacccc gtcaacccag gattcgagtt tagaaagact acaagcccca 660

aaatgcaatt tcacctccca aaaactacca ttcccaacat gcaatgcaac caggacgagc 720

caaggaaaaa aagtacaagt gtggctgcaa agtttgcccc tcttgttacc ctcaggcaaa 780

tgattgattt agaaaggccc caggggctat tttttgcagg aacggtcact ccctaaatcc 840

aggcagggaa agggaggagt ctgagccgag tcacgcccct tctcctgtaa acttgggtcg 900

cctctagctt agcgagcgct ggagtttgaa gagcgggcag tggctgcaca cgccaaactt 960

tccctatggc ttcggtgacc agggccgtgt ttggagagct gccctcggga ggagggacag 1020

tgga 1024

<210> 85

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 85

aatggagaca caagcaccga ggagcccatg ctgaatgtgc agaggatacg 50

<210> 86

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 86

tggcgcctca cgcgggtgcg gcccgactac acggcgcagg tgcgtgcacc ccgtccgcac 60

cccgcccctg cagccgcctg gtctccccgc ctcccctcct ccctgcaggt ttgcgtggct 120

gaggctccca cctcctgacc tcgggggccg agagctttgc gagctgaccc cgcttccttc 180

tggctttgca gaacttggac cacgggaagg cctggggcat cctgaccttc aaaggtaagg 240

ctcgggagag cgggtgcccg gcagttcgat gccgaccgcc gacggcacag caagtgtgtg 300

cagacgcctc tttttcttca tcagggaaga ctgagagcga ggcgcgggag atcgaacacg 360

tcatgtacca tgactggcgg ctggtgccca agcacgagga ggaggccttc accgcgttca 420

cgccggcgcc ggaagacagc ctggcctccg tgccgtaccc gcctctcctc cgggccatga 480

ttatcgcaga acgacagaaa aatggagaca caagcaccga ggagcccatg ctgaatgtgc 540

agaggatacg catggaaccc tgggattacc ctgcaaaaca ggaagacaaa ggaagggcca 600

agggcacccc cgtctagaat gccagaacca gcgggtggcc ttaggggctg tgaggcagtg 660

gggaccttat tgatgaaaga aaccgtcttt gcgttacacc cgagtctgcc tctcggagca 720

gggagctcac cttccgcgac gtgttctgag ggtctgcatc ttagggggga gggctggggc 780

aaatcgccac ctgtgccttt cctctggccc tgctgccccc acacccaact ccgagggccc 840

acgctgggga aagcgggaag cgctcgctcc ctttccccca ttagtgctct ctctgcctgg 900

atcccggcag aagctatgaa agggaataaa gagaaaagaa gtacccaggg tcgtggtgtc 960

tttgcgctct gtctttagga ccggggagag aagggctgac gctgtggtcg tggccctggc 1020

cggg 1024

<210> 87

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 87

ggtgtggcat tcaccatgtg ctgcttccgg ataccactcc acctggttcg 50

<210> 88

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 88

ttgtttgttt ttttgagaca ggatctcact ctgtcgctca ggctggagtg cagtggcagt 60

ggtgtgatct cagctcactg cagcctcgac ctcctgagta gctgggacta caggcatgta 120

ccacacttgg ctaacttttt tgtagatgag ttccgctatg ttgcccagac agggcttgag 180

ttcctgggct tgagcgattc tcccgcctca gcctcccaaa gtgctgggat tataggcaag 240

tgccactgcg cccggctaaa atagatcttg accaatgaag tttgtgacac cagctaattg 300

taccttcctg actttcactg cttcttccac cgacaggggg ccttcttcaa caactgatag 360

attctcctcc ctccctccac aaacgttggt gtcttcccat agtgatatcc tttgctgaaa 420

aatgatttag acctctctcc atccacctcc ctgccaccat caagccccat gcttcttacc 480

tggcctcgag caatcttgaa gggtgtggca ttcaccatgt gctgcttccg gataccactc 540

cacctggttc ggtagtccac aatgtggcag gggggaagaa tgtactcgtc ataaagcaca 600

tctccgttgt agttgacaat gctacatcga gccaaggaac taacatgccc ctttggtcct 660

gtgcccacca tctcacagtc aattgccacc atcttccgtg gcaacttctg ggatgctccg 720

gagcatttat tctctgaatg agcttgggtg gagttctgtg gggcattctt ctgaggatgg 780

ttctttttag aggatttctt ctgggagctc ttcttctgag agcgggttgg gtggctattg 840

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ccat 1024

<210> 89

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 89

cggctggctg attatcaggc ccagaatcac gggcttagaa acattaacag 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 90

aattagccag gcgtggtggc acacgcctgt aatcccagct actcggaaga ctgagacacg 60

agaatcactt caacctgaga gacaggttgc agtgagccga caacacacca ttgcactcca 120

gcctgggtga caagtgcgaa accacgtgaa aaaagaaaga acaacaacaa caacaaaaaa 180

caagggccag atagggtgtc atgcacgggt agtcccagct acttgggagg ctgaggtcgg 240

aggatcgctt gagccccaaa ttcgagaaca gcctgggcaa aaccctgcct cttaaaaaca 300

cccccaaatc gtaataacaa atataaatcc ttgcactcaa atggacagtt cattacgtgg 360

taccgcgtcc tgttgcggat caaggccacc tgagttggtt aggacagcta agcgggacgt 420

ccagggctgc tcgccagcgg tgggtctaga tatgaacttg tgcttgagca gcccagcgtc 480

ttacaactct gctgtgagga cggctggctg attatcaggc ccagaatcac gggcttagaa 540

acattaacag gaagtacggt accgaaaagt ggaaacttta aggtgcttat tattttcctc 600

ctgccttgtt cctgtatgtg ccgcttcacc ggtatcacgt cctgggtctg gtgggacccc 660

ggcctggctg ccctaccgga agctaagaaa actcctcccc caggggtggc cgtcgggcct 720

cagcccggtc tacagcggga gaacgtggcc catgctacgg gtaactggtt gggcccctgg 780

tgcaggtcta gggcctgcag ccaggctcgg ggcctccggg ggtgcccgct ggctggggtc 840

tgaggcggct tctctcgggt acgggaaggc ggactgctgt gcagctgcgg gctcgctcgg 900

gaaacccaaa gtcacacgaa agcggcagca ccaccgcggc tgggatatcg tctcccaaca 960

tggggagaca aaatggccgc cacgccccga gccgaaatta catccgggct ccgcgacacg 1020

cccg 1024

<210> 91

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 91

cgtgaaaaaa ttaaaagtgg taagaaaatt gcttcgggtc aaaaatgtgt 50

<210> 92

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 92

aggaattcat tcattctaca ctcatttgtg gagaggtgac agtgccttct gctatgagct 60

gggatacctt tttcacattt tcccatatcc aaatatgacc aatcattgat ggcccagctc 120

aagggtcacc accgattccc ctttccctgc cctcaccacc cacaccttct catggcaccc 180

atgccattct gccttgtatt acagttatgt ggatgaatgt cacctcccct gcgtgtctga 240

atcctctgtg taattcctac tcagctcaac actgcatttt gcagaggagg aaaaacaact 300

ccctcgattg cttggaaata gaacatttgc tggtctaaat cctccagaca atgagctcca 360

cgagggcccg cactgcccgc cctcatcgcg cacagggaag ctgttcaagg gccatctgtt 420

gaatgaatga gtgaattaat ggcttcactc ctgtactctt ccttacgcgt ctttctcacc 480

atatttagca tccggctctc taacaacgtg aaaaaattaa aagtggtaag aaaattgctt 540

cgggtcaaaa atgtgtcatg caaaagccac cgcagagccg gaagcgtgac agcgccgcag 600

aacgccctgg cctccccgcc cttccccggg cgccgccctg cccgggtccg cgctcgcgcc 660

cagcccccac cccgcctcct gggcagtgga ggtccctggg ggcccggcca ggccgcctta 720

aaaccggcgt cccccggcgt cgcggggtcg ggcgggggca gggaagcccg gcggggagcc 780

ccccgcttct ctgagctcct ccttgccgat ctccaacggc cggcgcgggc cccacctgcg 840

ccccacgcct cggcaccgcg ccggcccggc ccaggggcgg ggaagcgtcc gtgcgcccag 900

agtcctcgag gcccagccgg gggccccgcc ggccgcccgt gcccgtccca gcccgcactc 960

accgtcgggg cccggcgctc ccgcggcgcc gcgggccagg ccgagcagca gcaacagcgg 1020

cagc 1024

<210> 93

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 93

gtgtcgcttc actccctctc cctgtgccaa tacagcagaa tagagttacg 50

<210> 94

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 94

ctccatccct cccaccaaga tccgtgccat cttctgcttg gccccttccc aaagctcaca 60

ctgtctgtac cacccctaag gatctgtccc tgtgctgcct ctgtctctcc accccttgag 120

cacaagtctg aagttccaga aagcaagtcc tgtccacaat aaacttctta aagaatgaag 180

ataaccacct agtattttca gaataaatga tttgatctga gagaaatctt ccaactgatg 240

tgaaagaata tcacacttca gcccccactt ctgaaagaag agcttagact ttctgaccaa 300

atcataccca aaatctgttt ggttttgacc acaatggaga caaagtgtgt gataatgcta 360

cagtcaaaat gtctccgcag gccttttgtg ataatcagaa ttctgggata gtctcctgtc 420

tggtcacaga gcaggcacct ggacaggcta accctccagc cctgagaggt accagggagc 480

tggtgagggt gagggctttt gtgtcgcttc actccctctc cctgtgccaa tacagcagaa 540

tagagttacg cttccgcacc caagtcaact gtgtttagcc cataaacttc acagccagtg 600

aaatatgaca cacctccagg caccactgga caaaaaatgt aaggaaaatc cacaagagag 660

aatgggaccc actggcactg gtgatcgatt ccgtgtgaac ggagaggaca tccagggagc 720

tagaaatagc atgcagagac aaaactgact caagactgac tcaagaggac ttaagccgag 780

tgacctgtcc actctgcaag ttctatatag gtcacaacca ctggctctgc ttcctgtact 840

acacacggaa tcacacgagt agatgttcac cgggaagaga aacactgagg tgttgaaaga 900

cgaaggggga tcacgagaca cagcccagtc taccctcggc caaccccccc accccccagg 960

ctacaaccgc aactacctgc aacacgtgtg cacccaccaa ctctcaagtt ccctggactg 1020

taga 1024

<210> 95

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 95

ctcagccaaa tggctttcat tagtttttat ggttagaccc caggtcctcg 50

<210> 96

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 96

ccgcagcaca cacccagact gcagcctgaa gagttggagc attgcattca cagaaagcat 60

ccagacatga tcatgggctc agggatacac ctgttctccg atgtgtacca gtgaaggatg 120

gaaactccta tgcctcccag aaagcaccac tcaagctttt gctgaatgct tctctgaagg 180

cccacaaggc ctgagaggct gtgcaacacc agcagtaaag tgaatgccca gactcccacc 240

tcctttcttg ggtggccatc tggaaaggcc actcccaccc tgatggctaa tgcctcagac 300

cagttcttgg cccagatgat cctagacaat tgtttaagct taaactgttc attggccaag 360

caaacaggtg atagtcacct ctggggaacc acatgccgcg tgtacatcca gtactcagga 420

gaacccaaaa atgtctgttc cacatagcaa cagaagccca ggtagcactc agtctcacct 480

gggtgttctc caacatccca gctcagccaa atggctttca ttagttttta tggttagacc 540

ccaggtcctc gggacactgc tttagaaaca cattccaaat cctcctctgt gtgcaggtgg 600

cattcctatc ccaatctctt tgcagggcgt atactgtgat acgcagccag gctgtcccag 660

aggccttaaa tattcccttg gtgcaggtag ttcagcttag ccacagccaa tgcatcacag 720

ggtcaactgt gttaggagcc attgagaatc catagttggt tgctgcctgg gcctggccag 780

ggctgaccaa ggtagatgag aggttcctct gtggagttct actttaacct caccttccca 840

ccaaatttct caactgtcct tgccaccaca attatttaat ggacccaaca gaaagtaacc 900

ccggaaatta ggacacctca tcccaaaaga cctttaaata ggggaagtcc acttgtgcac 960

ggctgctcct tgctatagaa gacctgggac agaggactgc tgtctgccct ctctggtcac 1020

cctg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cgagcaaagg gactgtgatg aacacaatgt catggctcgt tacctccctg 50

<210> 98

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 98

atgtccccag gtcttatctc agttcgctgt gggaggcgaa ggcacagaat catccaagga 60

caccaagcac ctgaggacaa ccagaacctg tgggttctga aggagcagcc ttcaaagcta 120

gtggcagagg gtagctcccc tcctgcctgt ggcttgtgct ggcctagaga gtatagggca 180

gaaggatggc agatgagtga ctccacatcc agagctgcct ccctttaatc caggatcctg 240

tccttcctgt cctgtaggag tgcctgttgc cagtgtgggg tgagacaagt ttgtcccaca 300

gggctgtctg agcagataag attaagggct gggtctgtgc tcaattaact cctgtgggca 360

cgggggctgg gaagagcaaa gtcagcggtg cctacagtca gcaccatgct gggcctgccg 420

tggaagggag gtctgtcctg ggcgctgctg ctgcttctct taggctccca gatcctgctg 480

atctatgcct ggcatttcca cgagcaaagg gactgtgatg aacacaatgt catggctcgt 540

tacctccctg ccacagtgga gtttgctgtc cacacattca accaacagag caaggactac 600

tatgcctaca gactggggca catcttgaat tcctggaagg agcaggttgg tgaccacgta 660

ccctcctgcc ctggcatctg gcatgtgctg ctcagtgaaa aatgggagtg gggtggggac 720

agggggtctt attgaagagt cttgttcacc agttgtagtc catacttaag aaaatacaag 780

gtagtttagt tagtttttga ttttgaaaac atctaagtta gaaatttcaa ataatttgat 840

cctaatcaac tctcatgaaa aacatattgt ttaatctcca tctttttatg acattattta 900

actgaagaat gacttcaaaa tgaggactac caagaaaatg aagatacgga ataaggaaaa 960

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aaaa 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 99

aagaatcaac catgggttcc tctgggtgag gggctctggc actgtccccg 50

<210> 100

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 100

gagacacctc atacccacct cattcaaccc ataggatact tctgatgaac taaacagaac 60

tggccttact gacccaaatg acaaatctgg ggctgagaga gggtaggtaa tttactcaag 120

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tgtacaggtg agtcccacac aaacttacca cttctcagcc tgttgtgggt ggagagctga 300

agagcatttt cagggcagtt ccagcgttcc caagcaaact ggaacttgca ctcctcgatg 360

ccactctggg cacccaaggc cacactagtc gtgtaggtca gataggcctg gcaaagggaa 420

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actgtccccg cccctctttt ctccagaaga gtccccttag ggccctcagt gggtaaaaac 600

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aggagtgagg gttgggaaag gacttaccag gcagaggcac tgaatgcagc acagcatatg 780

cccagagctg cccagagcat aaacaggttc cccatcgccc tgcctacccc agtggaccag 840

gtccagctca gggccaagtc cagagaagtg aggagagggc agggtcttcc tcagtattta 900

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cgcc 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 101

aggacttcac taatctgcct aaaccttgac ctgaggggcc tctaagggcg 50

<210> 102

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 102

actctagtta gaatggatgc ttcactttca gcgaacatgc cccctcctcc aggaagccct 60

ccctgcccct cctcacctcc tcagatcatc ctcaaagggc aggaaaagcc atttctttgg 120

catgtccttg aggaacaggt cctgctgctc ctccgtggag tcctgggaca cgtacaccag 180

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aggcagaggt gggaggatca tctgaggtca ggagtttgag accagcctgg ccaacatggt 720

gaaaccctgt ctgtactaaa aaataaaaaa attagccagg cgtggtggtg ggcacctgta 780

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tttg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tgcagatgcc tgcttctggg actcaatgca ctgcaccctg gtcatctgcg 50

<210> 104

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 104

atgcctggat cagggaagag ttcaaggagg gggaagcagc atgatgagtg ggccttctcc 60

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gtcatctgcg gactcagcct gagcttccag agggcctagg agcagtaagg gagtgagtgg 600

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gttt 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cgaggtggat gtatatttga actgagacat gaaaagtaag aaagactcag 50

<210> 106

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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caaa 1024

<210> 107

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<212> DNA

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agaagccaag gtgccacgaa gtacagcaga attgcagtcc tagtacctcg 50

<210> 108

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 108

aataacaaat gctggactgc ggtcctgcta tatgactata atttaatgac aactgcagtt 60

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acag 1024

<210> 109

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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ctttaggagt cccaggaaca gcaatttcag caagtgcctt tgcagtcacg 50

<210> 110

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 110

cctgggacct cctgggagct cacagccaga caggtccctg agcctggagg agggggctgt 60

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tatgaaaaag tgagtctatt ctgtgaaaaa caaagtcctg ctagccagct gcttaaatct 240

ctttaagtct cttctggagg ctgggctggg tccaggtctg caaatcataa aggaagggcg 300

ggaaggattc tgccttcctg ctggttctgg ccacattcac agaagcccct tggtcatctc 360

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tatc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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gggctgcccg gactggaagg cccacatgat aggcactgac caaggggtcg 50

<210> 112

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tgcttcctca gccccaccca gtgatggaga cacagtcagc attggttgtc gttttattat 60

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cccc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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atgttgggct tcattgatac ggcaaatact catgaagcac cttctctgcg 50

<210> 114

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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ggct 1024

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tttccctttc tgactcaacc acagcacaga acagatcatt catgttgacg 50

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<212> DNA

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<400> 116

tgggggtggg ggcagggtgg ggccagggga gaacaaggag gggtggtggg gtggtggggg 60

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atcaatggct tcttttaaga actcaatttc cttttttttt tttttaactt agcctccccc 960

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atctcgctgg aggctctgga gtcactccca actctgtgct gggaggaacg 50

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gagacaagtg ttctatccag ttctgtctct gcagtatctc tgatgtgtat gtatctctat 60

catcaatgcc gactgtctgt acagcaaggc caccatcatc cctgtgtact tactgggatc 120

agtataggat cttcacagct ggacttccct gaatctgcct tgcactctcc actgcagcct 180

tcacagcaca gttctatctc tataaattca aatcttacct tctcattccc ctggaacaaa 240

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cctattcccc tcagcccctc ccatcaccac catgttcact gcataggtac ctaaaaccta 360

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tggacaaagc tagagctggg gcaagcaagg agccttcctg tcctcgaggc cgtgggaaga 300

gaagcacgcc cagggggcca ctcctgagag cctctctgtc caccaggcct ctgcagaggg 360

gtcaccatgg ctctggcccg aggcagccgg cagctggggg ccctggtgtg gggcgcctgc 420

ctgtgcgtgc tggtgcacgg gcagcaggcg cagcccgggc agggctcgga ccccgcccgc 480

tggcggcagc tgatccagtg ggagaacaac gggcaggtgt acagcttgct caactcgggc 540

tcagagtacg tgccggccgg acctcagcgc tccgagagta gctcccgggt gctgctggcc 600

ggcgcgcccc aggcccagca gcggcgcagc cacgggagcc cccggcgtcg gcaggcgccg 660

tccctgcccc tgccggggcg cgtgggctcg gacaccgtgc gcggccaggc gcggcaccca 720

ttcggctttg gccaggtgcc cgacaactgg cgcgaggtgg ccgtcgggga cagcacgggc 780

atggcccggg cccgcacctc cgtctcccag caacggcacg ggggctccgc ctcctcggtc 840

tcggcttcgg ccttcgccag cacctaccgc cagcagccct cctacccgca gcagttcccc 900

tacccgcagg cgcccttcgt cagccagtac gagaactacg accccgcgtc gcggacctac 960

gaccagggtt tcgtgtacta ccggcccgcg ggcggcggcg tgggcgcggg ggcggcggcc 1020

gtgg 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 141

taagtaaagg tgttgactct tctagagggc ccacccagca ggtgagcgcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 142

agcgcagaag ccgaaaggcg ccttgctgcg gccgcgccct gtggctgaac ttaggccaat 60

tccgagcgag accgagacgc agggcggcgg tgggggctgg aaggggcctt tcatccactc 120

cagccgcagg acccctgctg cagctcggag cacgcgcagc aatgcaaata acacattcga 180

ggagagcaga ggaggtggct agccgcagct tggacagttg gaatgtcgga gggactaccc 240

tgcaaatcac agcccttcta tcgggattct cagctgggca tgatggaggc aaatttggaa 300

acctaagagt accacttgcc ttcctctctc attgctccat caccagcctt tggtggtggt 360

gaaatattct tttcagtttt ccaaagcaag gaagtatttt ctcacaaaat agggttttgc 420

tgaattctca gtttccaccc accttccgcc taacatttgt aaagaatcgg gcatgcagga 480

tggggactat gggtcaaaaa taagtaaagg tgttgactct tctagagggc ccacccagca 540

ggtgagcgcg cgggacagag tctccggaga gccagcgccg ggccctggtg gcctcctgct 600

cttcacatct caaggcagag cctctcaaag agtggcctgc aaggatctga accaccaggg 660

ggtgtgatat tgcagagtcc ctggccttac ctcaggctcc ttaaaccaga atctctgcgg 720

gtggggaatc agcaggttat gaggtacaac cacacgaaat tgcctacatt cgtctttttg 780

taacctacag aaatgtccat ttcgatacct ccagctgatt cccctgcacc ttaaagtttg 840

agcatcgctg ctttggcgtt ttagagccct tggacttgtt cacaagagga agagggagaa 900

gaggaggctc gaagggggcc tttatagtgg atacctgttt cactcggagc tcagggtctt 960

tgacgcggga aggcaaagtc tgtcttttgg aaatggggaa gtgggcacac agcacctgag 1020

aaca 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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tgactaccat tgattgaatc cttgccaggg gccaggctct atgccaagcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 144

cactatggcc gtaccccaac cagcctcgcc cccgggccca gctggagctg aggccccgcc 60

ccgctacgga gtctctcctc tatcccggca gccccgcccc caggttacac tggggattaa 120

gcccgccccg ctccagccct gtccactcac ggcgctgcct aacggtcccg cccagctccc 180

gcctacctcg tcctcccggt ctcctcccgg gccctcccag cgcccccgcc tccttcactt 240

tctccttcga gcccacccca tcccccggcc ctagtagggt gaggccacgc ccctccccgc 300

accagcctgg gctcagcgcc ttcctaatcc tgccctgccc tgcccctctc atctcgggcg 360

ggtagccctg gggcccccac gctggcattc cagggcgggt gtatccgggt gccgccgggg 420

aacggcgtgg gagcggtttg tgtcctaagt cggggcctct atcaggaggc ggcctgggcc 480

caggaacttt ttgaaaatac tgactaccat tgattgaatc cttgccaggg gccaggctct 540

atgccaagcg ctgaatacag ttctagccct tgaattccca caactcatgg gtactctcgt 600

tgcgcctatt ttactaatgc gcagtttaag gctcagagaa gggaagtcga gggctctgaa 660

tctcatggag gcgggcgtga gcgggatcca gcctcaggtc ctgagtcaca ggcttgagct 720

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catt 1024

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<400> 145

cgcaggctct atctgctctg aatttagcag tgacagtgag atttagcaaa 50

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<212> DNA

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<400> 146

tctatagccc ttagccatag agaggattta aaggaatctt ctgtaatgac accacggaag 60

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tctgtgcaaa tgcatccatc tccccgagct atttttcaga ttccacagaa ttgcatattc 180

agcaatttat aaataactct cggttccgaa acaatgaaaa ttttaaagtg aagaacagtt 240

ctaggcagaa gcaaacagta cacaatttaa atagaattcc ccaatgactt caaagagtaa 300

gaaatattta ccttcaagaa atcacaaaag cagcacttaa ataattgggt tggaagactg 360

ctgatttttc ccattgcttc tgaagtacaa agtctgaaaa tgaattggtt agcaggaata 420

atgaagcaaa aagaaatcca gagagatggg agatgttgag agcaatgtca catttcaatt 480

ttgaggactt tattccattg cgcaggctct atctgctctg aatttagcag tgacagtgag 540

atttagcaaa cagaagaggg atttagagaa aatcctcaca tttatctaca aaacacagac 600

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aagttattga gtaaggactt ttttgggcat ggtgacaaat aacatcatac ctttgcattt 720

taaaactaga gcacagaagc atttttttcc cttaaaagaa tgtgtgttag tgacagggtt 780

cgcagacatt aaaatactta tgctgccata gaaaataagg atctgttttc tgattaactt 840

tctgctgggc atgaagacac aaacgtctgc taatacacct taccagtatt aaaggaatat 900

gggggatggg agagcaattt tagattctag agcaaatgca ttatttaaaa caaaaaaaga 960

aagaaaggac gataagaccc tctccagcaa actctacaat tttaaccctg aagtgactgg 1020

ggta 1024

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cgggttaaca gatgcagtta ttatgcccat ttaacacgag ggaaactgag 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 148

aggaataaaa atgaatggct actccataga gcagccgact gtcattttac agatgtggaa 60

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tagagctctg atgcccccct ttcatgagcc catgtcacac ccccataggc tgggggtcat 180

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aggactcaat cccagcagtg ccctttcctc cggcggccct gcagctgggg tgtgcggggg 300

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gggaaactga ggcccagaga ggttgaggtt cacaggttgc agcagggcca cggtgtgaac 600

gcaggcagcc tcggaaacag ctcccgcgcg cggccttccc tgcgccacct tgtctgggta 660

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gctccttagc cccgggcctt ggcacacgct cttccccttg cccagacagc ctctctcctg 780

gtcaggccgc tttctcgttc tgtctcaagc tgagcccacg tgtcctctag gagacacccc 840

cattctgccc caggacaggc atgtcctggt cagaagctgt tttgtttgtt tttgtttttc 900

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tgac 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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gcaaggaggc ggatcaggct aggtcagaca ttggcatcgt ggagccgtcg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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gccgggtctg agcaggtctg gaggtgggcg gggagccctg gcctccccac ctcctcccgt 60

ccccaccctg ttcccagcac tcaagccttg ccaccgccga gccgggcttc ctgggtgttt 120

caggcaagga agtctaggtc cctggggggt gacccccaag gaaaaggcag cctccctgcg 180

cacccggttg cccggagccc tctccagggc cggctgggct gggggttgcc ctggccagca 240

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accaggagat caacaggatc ctcttggagc agaagaagca ggaccgcggg gagctgaagc 420

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caacccgttc tggccagccc acccgtaagg gaggggccgg ctccagcctc tccttcacca 840

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gtct 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 151

gccttggcct gcattttatt ttcaaccaag gttgaaatgg tagccccacg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 152

gacctccccg cccccgggcc gcgccccgcc ccgccccctc ctctggggca caccccgccc 60

cgccgcccct ccccctccct gggcacaccc tatgccgccg ttcctccccc tccctgggcg 120

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cccctggacc ccgccgcccc tccccctctt ggctgcgccc cgccccgcct tccgggcgcc 240

ctccttcccc ggtctgcctt ctccctgacc ctcctcccgg tcgccaggac cccgcggccc 300

gcgaggcagc tctttgttcc ccggcctcgc cccgccccgc cccgccccgc cccgccgggt 360

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tccacgcctg ccccttcaac tcctcttgcc ctgcaaaccc cgggtcgcca cctccacatc 480

ccttccactt ctacctgcct gccttggcct gcattttatt ttcaaccaag gttgaaatgg 540

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cgtagagttt atttgggttt ttagtgacac ctcaggatta ttatacagca 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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ttgctgctga ggctgctgga gctgcggtgt agagcaagtt gcaggcctct gagcctgttg 60

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gcgcgggtct cagatcccag ctccaatatc cacgcctttt cccttttcat ctcccggaag 180

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cattaatcag aaccattctg attcctgcta tcaaggttta tttaattcta agctcaaatg 300

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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caaccattcc tccctcccgc ccctggcagc ggagcgcggg gcggtgccac gcccagcccc 60

gccccctggt tgccgggaca acgcccgcac gcgcccggcc cctagtccca gcgcggggag 120

ggtactatcg cagcttctcc gtcaggcctt gggccatggc ctcgctacgc aatgccaacc 180

cgaggctgaa gaactacttc aaggagaact acattcctca ggtctgcgag gtactggaca 240

cgcgtggcag cggacacaga ccgtcggtgg ggagttagaa gggggaggag tcaggaaaga 300

cttcccggag gagggactag gtttcgggat tggggaggag tggagggaag gcggggcaga 360

atgcgagaaa gtgaagtcaa attcggactt gtaggcgatc agggctgaag acgctgatta 420

gagagaaaac agagggtgat ggtggctgca cgtggggaat gggtgacatc tcccaggggg 480

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gaaaccactg cccatgggtg aggccccaca gaggggcagt gcaggtgggg accccgggtg 720

caggtttggg ggccctcact tactgtgcag cctccagggc gagcatggtg gtgccgggcg 780

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ggataggggt ccagtccctt tgccccgctg ggatctacag tttgctatac tgcctttgtc 60

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ctttccttag gttcacgggt accgctattt gtccagcgtc catttgcggt ggcattagga 60

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tccagaatct tcccagagtt caactgagat ttaattgtag agtagtgaga aaaaagtttt 180

gagctgggca cggtggctca tgcctataat cccagcactt tgggaagctg aggtgggcgg 240

atcacgaggt caagagatcg agaccatcct ggccaacatg gtgaaacccc gtttctacta 300

aaaatacaaa aattagccag gtgtggtggt gcatgcctgt agtcccagct actcaggagg 360

ctgaggcagg aaaattgctt gaacccggga ggcggagctt acagtgagcc gagatcgtgc 420

cactgcactc caccctgggt gacagagcaa gactcagtct caaaaaaaaa aaagttttga 480

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tatacttgct gaaacaactt aaagtcctgt ttggtctctt gtctacctcc catttacagt 600

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caaattattt tctcagaaga aaagcagaat tgcatgtagg cccagctcag gtgacatccc 840

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tgac 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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agcccaggtt cattcctgac tggcttgaag gtcctcagca ctgccttgcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 188

ccctggaaca gaggaggcag gcacagagag gtgagtctgg gttcactacc caccccacaa 60

tgttaaaata taagagaaaa gtcatcccat gtgtccccaa taatcacttt ggcattccac 120

aggcagtcac ctgagcagag ggtgagaagc tggaggagga gaggggtcca ggccatggtg 180

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ttatcctctc ctcctaagag ggcacagagc acccttcatg caaatcacac ccctccccct 300

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taggggtcca gggcctggtt tcccagttga aacccccaca gaccctcagg gacaggccac 480

acttccctcc actgtctcag agcccaggtt cattcctgac tggcttgaag gtcctcagca 540

ctgccttgcg cacaccatcc ccacacagag gcagcgctca cgcacctcca cccccacccc 600

aggctctttg tgctgcaggt gctcaccaca gcacatttct cgctgcaaga tgggcctcct 660

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ggtc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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gtgaacaatc ttgtcaccaa cacgattctg gaactccagt agcattgtcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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aaatgtaatt taaatacaag tagagtctaa tacttcttag gcttcctttt gctatagtaa 60

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ctta 1024

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aaag 1024

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gtgc 1024

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gagaaaccag atcatagaaa tcaacaacaa taatgtacta cttactattc acctactttt 60

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atgatgcctc cagcctggga aaacccgaag gcagccagga aggcaagagt tttttccatg 780

ctagcccagt gactcactcc tgattccccc acgggacaag agtcctgcag cacagggcgg 840

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gaga 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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aggtttcatg ctcaccccct tcatcctttc cagatcatga taacatttat agacttgttt 60

taaataccac ttactcagtg gaacaaactt ctccttccca tatgaaccag tttcataaaa 120

cccacccaac ttgctttctc tttctgacaa tgataactta aaatgcatta ttattgataa 180

tgatataaaa tatgaatttt gaaaaatcaa aagtatttct gaaataactt atatccaaat 240

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ctgg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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gaggctccaa ggagaatctg ttccctcgcc tgttcaagcc tctgcaggct cccgcattcc 120

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acagcccctg ccgggtatgc ttcaggctgt gagtggagag aaactgctcc ctgcacctgt 60

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 256

gcccaggaat gacaagaact aggaaaagag agataaatca cttgttcgac tatatggttt 60

ctcagaactg ataataggta aaacagtatt tgacaaatct gtgcacacac acatatttta 120

aaaaaaatcc tccaaaccca gtcgcatgaa atattctaga aagaggaaaa tcggggagtt 180

ttagaagcca ttgagagaaa agaaagaaac aaagtttgca aatcacaagt caattcattc 240

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

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<212> DNA

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ttggtctcag ggttccctta cggtcttaaa tattattgag gttggtctga gtgcagtggt 60

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tcacacgcag ggcattttac tcgcccacac tgaggagcct cttggagcgt ctccctctca 240

gcgtcccagg aagtgcgttc ccagcgaggt acaccggagg cttctgggag cgcagtcagg 300

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tagc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tgccctcagt aaatgtttat tgcatgaaca cctcccagct tcgggcagga ctgaaatcta 60

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<212> DNA

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aataaagata gagacagcgc ccaattttaa ttttgtttca attgaacagt aaatgttgat 780

tatgtgccta ttaaatgcta aaccaaataa gttagtctct gctttgtaac tcgcagattg 840

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tagagggaat gggaggggat gggaggactt ggggacagca gtacaggcaa cagacaaggg 60

ggcctgctgt aaagggagca gataaatggg attggagcca aatgaagaag gggagtgtca 120

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tgatctctta gggagagaac agtgttaggg agggagaatg caggatagct gggggagggt 240

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ccctcctctc ctgtctgcaa ggggtcagtg ggctgagatt tcagcactta agcaaagcat 360

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gctggttagt gagaacagca ctaaggccag gttctcctcc ccagatgttt aagatgagac 840

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<212> DNA

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<212> DNA

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cgcatgttaa acatatgtaa atcctagaaa ccgaggtagc ttcctagacg 50

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<212> DNA

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<211> 1024

<212> DNA

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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catgcggtaa gcatggcaaa gggggctcag ggggcaccgc cagcctgccc tgctctgacg 60

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 326

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<212> DNA

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 370

tctcagtagg ataaaacttc tctgactccc atcctgctgc ccagatcaat agactgcttt 60

tcaaccttct tgaagaaaac aatgatgtca ctttgaaacc ccatttgagg atccctaatt 120

tcacacgagg gttttcaggc cacagcactt ggaagatgtc gcctgacttc tgcccaggga 180

gccatcaaag cacatggatg acagactcac cttgtgcaca ggagcagagg gccatggtgc 240

agacgaggac aaggagggca gctgcaaggc ccttcatgat gctgggcagg cagagaagtg 300

gtcagagtga gctggggctt ggaaactcac aactcctggc ctccttctgg ggtatgagct 360

gttgtctctc ctttttatag gcagactgga ccatgggaac attggaggtg ctgatgcaag 420

acattttaac tatggtggtg tcatgtgagt tctcagccca gggttgccta tggttacttg 480

aaaggtttag ggtacacaaa cgagtggttc acttgttgat tgaggggctt atggagaagt 540

tgtatctcca gatgggtgac caggagttgg aagcacccag ggattatgct taggattatg 600

cataatcatg tgattatgtt ttcacatgac agatatttct cagaaatgag tggtcacagc 660

ctcctttgat agagcagaat gctttaatgg attttcacaa ttgtttttcc ttttaagaga 720

gtcacatgct tcaatctttt atatacagtt aggcctttcg tgatctaatg agaaatcttc 780

ccctatccta aggcaataaa gatatcctcc tatgttaact tgtagaagct ttattgtttt 840

agcattaata tttaaattac aatccatctg gagttgattt ttatgtttgg tgtgaagaag 900

gattcaagat ttattttttg ccacatgaat acccaatgga ccttggcaac tcattggtaa 960

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taag 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 371

cgtctgtttc tagtaagtca tactgagaca aagacaggtg gggcaacttc 50

<210> 372

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 372

ctcaggcagg tccagggtga ttacaggaat tgagatctgc tcggcatttg gagaaccggc 60

cgcccctggg ttagtgggct cagcgtcaga ctttacactg gtcttctctg tgccaaccac 120

cctcaggtgg agggagcttt ccaaatctgt catggagttt ggggtactgc tcatcgtgat 180

aacaattttt atgggctcat gtagactcag tgggtctccg ggttgagaag tatcgatgag 240

agtaacagct acctcactat ctgaggagtc cacttcctgg tgcaagggca ggtccccctg 300

gcaggaggta tctacctgac aggatgtgtc tgctggctcc tccacaggct tggccacgat 360

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ttcccttatg gagccccggg gacaactgac aggttctgga atcaggactg aattctcact 480

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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aagatctgct ggaggccagg cacagacagg tgctttaact caagttatcg 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 374

ttagccaata cttattgagg gatgactgca tgccagtcac ccttctgagt actttacact 60

catttcatct tccagaaccc tctgaagtat gatcatcatc tgtttcacag acaaggaaac 120

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aggagccctg cctttctggc cctttcatgg aggtccatct atgtcacctg ccccattccc 300

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gttcagactc acactggacc aagatctgct ggaggccagg cacagacagg tgctttaact 540

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gcac 1024

<210> 375

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 375

cgagataaaa aggcttacct tgaggacagc cttattagga gcagaggcaa 50

<210> 376

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 376

ctgctccttc tttgggtcca tactgcattt cagagctgta acaccgtgaa ggtatacagc 60

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ggag 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cggtccaaag cagaacagca catgttagtg ggccccactg ggttggaacc 50

<210> 378

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 378

aaagggacag aggacacggg tgggaggcaa gtccagatat agaaggcccc gacccccaac 60

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aaaa 1024

<210> 379

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 379

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<210> 380

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 380

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caccaccacc tctgatagca ctggctcagc ctccctgagc tcagtttctc catccatcag 720

atgggatgat gcctctaggt ctggagcaga ctagagaccc tctgttaaca gaaggctcct 780

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cctt 1024

<210> 381

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 381

gctctaccac tggctgtgtg ggcaggggca agtctcttag cttctctgcg 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 382

tcatgtcttg tccctacatc aacactcaaa aaaattgact tctgctgtcc ccaccttgac 60

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atgt 1024

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<212> DNA

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<400> 383

tgccctcttc tcagaaaacc tttctggctg ggactagtaa gtggctcacg 50

<210> 384

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 384

tggttagcag atgacatagg cccagtcttc agggtgagcg caggaagatg aatgagaaaa 60

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gccc 1024

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<212> DNA

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cggactggcc agagaagaaa ccccagcagc taaggatact taatccagcc 50

<210> 386

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 386

agggggagga cacagcctct gcgagatgcc ccagagtggg ggcttcaagc atcaaagagg 60

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<211> 1024

<212> DNA

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cctgaatcat ttgcatggtt taatctctta gtcctcccaa cagtctattg ggaggtatta 60

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ttctgtaaat ctcttctcct tcctttctct gagcaaacac ataaaactgg gaggtaggta 300

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cagcactttt aatctctaaa acatagtgca gtatttagca ggtcatcaat aatttttgtt 420

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ccatagagat aaccaaatta cgtttctcaa actctgtcat gctgagggct gcagtgacaa 540

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tttt 1024

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<212> DNA

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ggcg 1024

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<210> 392

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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atctccacac ccaccactct cattgcattg cgcagagctc agccatcttt ctcatccgtc 60

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ccctagtatt agatcagtcc atagaaagtg ggagcaatgg cactgacact gctagaggat 660

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 394

tgtcagtcat cttcagctaa gatctttcac atgcagttga gagagttaaa ttatagaagt 60

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<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 416

ggttctatca tatgttttcc ttccacaaca atcacagttt tgaggttcat tctttatttt 60

tacctttcag attccagcct ctaagtctct ccttgataag aaccttggga ccatcatgaa 120

tcccagataa cacactatag gtttaataca aatattaaac cttgagcccc acaagctagc 180

ttgggcttgg gtagagacaa agttatagat acattgacaa agacggcctt tccactaagg 240

agatcagaat ctccttggca gccactaaaa tctcctagtc acactgttaa gagacaccct 300

gattattttg ggatttctct atcttcccct ctaacccact tttactctga aactcaccaa 360

gacacaggag ggtggtctgt ttggggtcca tcgtgctgac acggcctcag ccccgttgct 420

ctcctttcaa tgcacattag caggatgaca gatattctta cgacaataag ctccgcagga 480

agtatgagga cagagcccct cgtcagggaa tttccacatc tattgcctca caacaaagtg 540

gaacagttcg ttgccgaata acttagttcc aggttgctct tgggtggagc ccaagagaag 600

acatatatat gtatattttt ttaaatagag atggggtctt tctatgttgg ccagggtagt 660

ctctaacttc tggcatcaag aaatcctcct gcctaagacc tatatttcta tttatgtttc 720

agatgagaaa cgaatgagaa gtgaattttc attaagccag tgtctaatgg tgttcaaatt 780

catctttgaa ccagatgcta catccaaata gacgggcttg ggacagaata taaggtggtg 840

gataccatac aggcagacat tgccttcact gggccattag tcaaaagctc tgtggctttg 900

tctgttctga acctatgttt catctctgag attcatggtc tgagtatatt tacttggact 960

tgaccaggca tgcagtatac ccttatcctg gagatgatct caatgccaga gtgtggaggc 1020

attt 1024

<210> 417

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 417

cgcccagctt tgcagtgcca gaaagctgtt atctcagcac tgctaaggaa 50

<210> 418

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 418

gctggcgggg caggcaggga cccctcccag ggctcacagc ttccagcgga cagcaggcac 60

agggctgtgg ggatcagagc acaggcagaa gtcacctgac agcaggttcc cgaggcttca 120

ggcctggagg agtgaggacg gctgttgggt tcttgattcc agcagaggga ggctgtgcag 180

ggttgcagga aggacggttg ggggcgcttc ggggaggtac gagaagcaaa ggtgtttgca 240

gcccttgggg ccaggcggcg ggaaggcctg tagacgccag agggcgctcg tgctacatgc 300

aactcaggag ctgctggcac ccgccaagga gtgctgagcg cggggagccc aaaccacagc 360

cttggggaac ccaggagggg ccgggcgggt gcaggacccg catgagggat tccgagagca 420

cgatgtttaa atgttggggg aaaaaatgga tcaaagcgat gtgttcccag ggagcccctg 480

ttttctcgtt tcttttcgta cgcccagctt tgcagtgcca gaaagctgtt atctcagcac 540

tgctaaggaa accccagcgc ggcctcggag ggattaggca ttctgctgaa ccagggatat 600

gcggtgggcc tgaaaaagcc atttcgggag gaatctggtc tcggctgggg tccggccggc 660

accgtgaaca ccacgtgaac accacgtcgg aaatctgctg ggcagggaga tttcctcaag 720

gcctcccagg gaggagagcc acttcctggg ctgcaaagag ggccccaacc tggcttctga 780

attcagaggg ggctgtgtgt gcacgtgtgt acgtacgtgc atgtgcacgt ctgtgtaccc 840

atgtctgtgg aagtggcaca cgtgtgcatg tgtgcactca gtgtacgtgt gcgtgcctgt 900

gggtagctcc gtgcgcacat gcgtacacat atgcctggtg tgtgtgtgca cacgtgtgtc 960

tgacgtgtgt gtgctttgcg tgttcttgcc tgggaaggag ttcccggttt gggtggctct 1020

cctg 1024

<210> 419

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 419

cgtcacttct tggctgatgt atgagaggta actgcttgac agatcaagat 50

<210> 420

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 420

gaaagaagat tgaacctaaa gaggttgaag tggcatttca cccaaaaatg ctgagaatga 60

ctctgcagat catctcaccc tccatgcctg taaatgaaca tccttgcctc caaaacagga 120

aagcagaacc atgaactgtt ccaccaatgt gctcggcaaa tgaatacact gggcagtgct 180

tagtgatcaa tgaactcagg cagatggggt gtgcttgcct tacatgtact gtgtcctgga 240

tatgggcatc aaggaagggt ttcataacaa tgagaaggaa gaacgttagg attgaggaag 300

tggagatgat acttcctctt ctttcgaaag agctttactc tctgatcagc tttgaatgtt 360

agttctgggt tgactgagtt tccagagctg aggctgcttt aagtagaatc ctcaagcttg 420

gcctcagagt actatgaggc ttctgaatcc aggaataaga ctgctcttgg atttactctc 480

tttgtattgc atgtaagtaa cgtcacttct tggctgatgt atgagaggta actgcttgac 540

agatcaagat ggcaaagcaa tggataccct agcactctcc ttagagtagt gaggtaggaa 600

atatgacttt ggggatgtaa tattcactca gctctctgta atctgggaag ccaggtgcta 660

aagattcttt aattctgtga aagctttgaa agaggagaga gttgtgtact cactctgctt 720

ttatgtttct taaatgggtg ttgtcttgat aggtgtttag actgcagacc acaggtttga 780

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ctggggccgc cctctttcga gaaagtgtgt tctttgcaag ggagcttcct ttgcatggag 900

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ttga 1024

<210> 421

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 421

tctcctgggg tcaggatgat ttctgtgcag gctgcagtga gccgtgaccg 50

<210> 422

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 422

atggggtgga gacagggaac cgctttgggt ggccagggca gcctccctga ggaggtgaca 60

gtttgaggtc tgatggaggt agaagcaaag gcctgaggct ttaaggaaca ggaagaagcc 120

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cataacttgc tgctagtgtt ggacctgggt gacgggcacc agggtcccct ggactattct 300

ctttccttca gtttgaaatt ttccactata aaaagcttaa aataggccag gtgcggtggc 360

tcactactga aatcccagca ctttaggagg tcaaggcgag aggatggctt gagctaaggg 420

gttcgagacc agcctgggca acatagtgag acctccgtct gtacaaaaat acaaaaacta 480

gccggtcctg gtgggctaat tctcctgggg tcaggatgat ttctgtgcag gctgcagtga 540

gccgtgaccg cgccattgca ctccagcctg ggcgacagag ggagacaccg tctcaaaaaa 600

aaaaaaaggt tataaagtgc tgctgcattt tcatattacg attattgacc gctgagggtg 660

actgtgctgt gaggcccgcc ggaggcacca gaaggcacaa gcctcccact gcccctttcc 720

ccgccaagtc ccgcaggtct cgcagtcgcg ggcgccccca ccccacccct gcccaaggcc 780

agggtcgcag tcccaccggg tgacggcagt cgcgctccgc gtggggcagc ggcgagcgga 840

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accc 1024

<210> 423

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 423

cgagaagctc agcacttagg tggaggcata aacaggagac caatctggtc 50

<210> 424

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 424

gtagagaaac agctgaagaa gatgagattt tctgcaagaa aggaaaacct ctccacaaaa 60

aactacaaaa cccccagtgc caccaagtca ccacatacag gggttggact ggtagctctc 120

tggatcggag ggcaaaaacc tgcaggctgc tccacagacc tctaggaaaa tgtctaaata 180

ccttctgaga tcattataac cctgcttctt tgagaaaaat tatctaatga acaccatttt 240

ggtgtgcgtg cctgtgtgca tgtttgtaca cactctggat tgcctggaat aggagcaaag 300

gcaatcctgt tgtatacttt gctgagtcag ggtttaaatt actgtccaaa gttcaaaaaa 360

taataataaa gagaaaaaga aaaggctatg agagcaaagc acctgattaa tttcttctcc 420

ttccagaact acatccatgg gataaagaaa aaggcatggg ggaaaaggat gaaaacctag 480

aaaccagtgg agatgagcaa cgagaagctc agcacttagg tggaggcata aacaggagac 540

caatctggtc tgaggagatg gccaggtcag gctcctcaga aggaagtgga gcataagggg 600

aaacctgaag ggtaaggaag catcgggcgg gcttgctagg ttgaagtgct gggaggaagg 660

ttccaggcaa aggaaaccac cataaattgg gaaagagctc agtccatttg aggaaccaca 720

agaaggctga catggccaca gtatgaaaaa cagctctggg tctctctttg gtaatttcag 780

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agagaaactt tccctttgtc acgtaagagg gtcccagaac accctttagg acccaaatgc 900

attctgtttc taatggaaac aggaagcttc agcttcccaa gaaaccataa gctagttggc 960

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aaac 1024

<210> 425

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 425

cgccgggact gccaactcac caggttattt atagtgacaa gagagtgaga 50

<210> 426

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 426

tctccctcag cgacccctct cgccgagtga agggtcgagg gtttggggca caaagggcgc 60

agaacgtttt ttcctgtgag aggaacatta agactcctgg gagggctggg gctaacgcct 120

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ctataggcga ggcacaaggg actgcgagac caggcctgaa ggcagagagg tcagcaggct 360

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tctt 1024

<210> 427

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 427

gggaacctca gtgttttcac tggaacagta gagattgtcc ttctgtcccg 50

<210> 428

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 428

ttgatagacc cagtggagaa ggtaggggtg caggtctggg tggccatggt gctagcagag 60

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ttag 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 429

actcacctgt cattgaaatg ccgacttcag gtactctggg agtgtgagcg 50

<210> 430

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 430

catacaaaaa gtagccgggt gtggtggtgc atgcctgtag tcccagctac tcaggaggct 60

gaggcaggag aattgcttaa acatggagga cagaggttgc agtgagctga gattatgcca 120

ctgcactcca gtctgggcaa cagagtaaga ctctgtctca aaaaaaaaaa aaaaaggagt 180

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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<210> 432

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 432

agataaactt agccagacaa gctggtcccc ctaccaagac cattccatgc acagaacttc 60

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cgcccgccct cacagccctg ctctgccttg gtgagatttc aagatgggga 50

<210> 434

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<212> DNA

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cata 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 436

agcctgggct agacatcgtg aaacctcgtc tctacaaaaa aaaaatagaa aaatcagcca 60

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gcgc 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cgagatgaca ctgaacataa aaagggctta ggccaagtcc agatacatgg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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gggagaaaga gaggaaggaa ggaagaaagg aaggaaagga aagaagaaag agaggaagga 60

aggagggagg aaggaagtaa aagaaagaaa gaaggaaaga atgaaagaaa aagaaagaaa 120

gaaggaaaga aagaaagaga aaggaaggaa gggaggaaga gagaaaggga aatattggaa 180

gaaaggaagg aagcacagaa gggaaggaag gagggaggga agagagagaa agaagaaaaa 240

gaaataaaga aggaaagaga gagagagaaa gaaagaagaa agaaagagag agagaattga 300

aggaaggaag gaaggaagga ggaaggaagg aaggaaagaa ggaaggaagg ttcaaaatgt 360

tccccaccat ttcgagtaga cctgggcatg aatctgggct ctaccactca cttgctctgt 420

gttctcaaaa aaaggaaaca aggcttcctc atagccaagc agtcctacaa gcaaccccct 480

tttcttaata ttagggagaa cgagatgaca ctgaacataa aaagggctta ggccaagtcc 540

agatacatgg aacatttgca agaaatagta gatgctcatt taaagacaag tgaggagaat 600

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gctccctgtg cacctgcccc gggaggtgga aggagacctg gaattggtac catcggagga 720

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agctcaaaga ggaggctgag gcgcagaggt gctcggaggg gcttcccata cctgggcccg 900

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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ctgaatcttg aataggagct tgtccataga gggtcacgga tctcccacac agagagcacc 60

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ggagagtgat gaggaaaaag gggtggctgc cctgctcggt gctgttctgt caaagagccg 540

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<212> DNA

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<400> 442

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<212> DNA

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<212> DNA

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<212> DNA

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<212> DNA

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 454

ccccagtgcg gggacgcctc tctggggtgc agggcacgtg cttggggacg ctggcgagag 60

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 462

acatacatct gttgaagtgt taaaaccaga ttgaggccgg gcgtggtggc acatgcctgt 60

aatcccagca ctttgggagg ccgaggtggg cggatcacga ggtcaggaga tcaagaccat 120

cctgactaac acagtgaaac cccgtctcta ctaaaaaaaa tacaaaaaaa ttagctgggc 180

atggcaacat gcacctgtag tcccagctac ttgggaggct gaggcaggag aatggtgtga 240

acccgggagg cggagcttgc agcgagccaa gatcgtgcca ctgcactcca gcctgggcga 300

cagagcgaga ctctgtctca aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aacaaaacag actgagaata 360

actttctgtt aatgagaaaa tatatcatga gcagatgcca agggcacaga catcatatca 420

tggtggggag atttttcata attttcagtg gtgcagatga cgctcttccc atgtctgggg 480

aattgcctgc ccagagtctg ggagagacac aaggcctggg agccgctttc ctggcctgcc 540

gtgcagctga ggcactggca cgcagcctaa gccaggcaca cttgcccatg ccctggaatg 600

gagagccagt gacccagagt agtggggatg tgagcttctc cttctctggg ggtggagcaa 660

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cacctagtgt ttggcagtgg cagtagcatc ctcttcagac ctgtttatgg tgtgatttga 780

ggcattcttc ctggctgtgg accccacaca agattcacta gccctcccag tgactctagg 840

atctaccttc aaatgtttgc ataaatttcc ttttaagtca gcctgagtct gtttctgctg 900

ctttacaaag aagaccctta ctgaatcacc actaagtgct gggggagagg acacagagga 960

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tggc 1024

<210> 463

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 463

cggatgttaa gtggattgtt cagggttatt ctgttagcag tgaaggtgga 50

<210> 464

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 464

aaggcagagc caggaaaggg ggaaaaaagc agagtcctgt caaacaagga ggatggagct 60

ccagacacaa ggaggcccta gcaacactga gctcagttct ccatcaccac ggaagttgaa 120

caagatgaca ggggctaaag taagggtgaa ggagggatta ttggaaggtg tcacagtctg 180

aaactagtag ttagggtatc tcctttccca gagaattgga gaaaaaaacc tgctattagt 240

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attgtttcct tttcctctag attcttgtgt cattagcttg gagttgaagg gaaagcattc 420

aaggagctca gggaagtgtt tagcaggagg cctggagttc ttgatccagt catatcaaag 480

ccacatattt ttagttctga aagggaagaa aaactaacag agatgggtca ttttagtcca 540

gctgactcat tttaagaaag cggatgttaa gtggattgtt cagggttatt ctgttagcag 600

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gatactgata agaaaagatg tctcacaaat acagtaagat ctggagcata ctaaatagaa 720

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gtgt 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 465

ttccatatat cataaacaga gaccagtatt acaatacttc acccactgcg 50

<210> 466

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 466

agctgaaggc gggggcctag gaggaggccg cagagctgtg atgaagggct gctcatcaga 60

ggcacatgca cgggtcagat aaagaagctc cgctgcgaag acagggggca atgcaaggcc 120

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catgcttcta tgataatagg gaatgggggc cggggggaat atgtagaccc catatcaatg 240

ctctcaaaac ctctctctct ctctctctct ctgtctctct ccctccctct ctcttgctca 300

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ctctctctct ctttgtcgtg ctctctctct ccctctctct cccactcccc acctctggcc 420

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ccctgctact aggaaacttc ttccatatat cataaacaga gaccagtatt acaatacttc 540

acccactgcg ccaatttggc tttcatgtct gtttcctgtg tcgatcacaa catcctagac 600

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acct 1024

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<212> DNA

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<400> 467

cgcgtgcaca gcatgttctt tgactaggag gcacacctgc tttggttatc 50

<210> 468

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 468

ttttgccttg agtttcattt attagagaac ccagacattg tcccatatag tctcccagag 60

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catt 1024

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tccaaacgac aagccaagaa gacctgttga aagtttcctc ttaagtttcg 50

<210> 470

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tctctactaa aaatacaaaa attagccagg cgtgctggtg caagcctgta atcccagaaa 60

ctcaggaggc tgagatatga gaatcgcttg aacccaggag gcggaggttg cagtgcgcca 120

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gatt 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cgagcgcccg tgtctaagac accaattgtt cctgactgca ctgctcctgc 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 472

cgggggagac cagcctgggc ggggagatca gcctggggga ggagaccagc ctggtgagga 60

gaccagcctg ggggaggaga ccagcttgcg ggggagacca gcctgcgggg gagaccagcc 120

tgggcgggga gatcagcctg ggggaggaga ccagcctggt gaggagacca gcctggggga 180

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cacc 1024

<210> 473

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 473

ctaccattca ttaataactg cacaaggcca taaagagtag ccatagaacg 50

<210> 474

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 474

ctatttttat cagcaaaaat tcttgagttt gggggcaaca ggcaattctc ttctttcatg 60

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aact 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 475

cggcagcctg cgattctcaa ccaggggaac tctcactgtg ctttctgaga 50

<210> 476

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 476

gctgtgatct tgcatttgtt tagcgctttg ttctccttga ggcagtaaag tggtggcacc 60

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gcgg 1024

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<212> DNA

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<210> 478

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 478

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<212> DNA

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<211> 1024

<212> DNA

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ttaaaattga tgtacaaatg aaagctggtg taatactcga ggcaagcagg ggaaagaatg 60

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ttga 1024

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cgtgcctggc aggggaaagg aaaaactaaa atgattattt cggttctaaa 50

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<212> DNA

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gtatggtccc ttagaactgg tgtagtgttc ccagccaact ggctttttat gcatggaaca 60

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tgagaaatcc aaccagtcta agcaactagc tttaagggcc agtgttatca cagtttttcc 60

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<212> DNA

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caac 1024

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<212> DNA

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<212> DNA

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agcagtgacg gcgagtacca gccccgaagg cacccggtga attatccgac atcatttcaa 120

catctcagcc ccgggtgccc gggaacacag gagaatgcag gaaccctgcc agggtcatag 180

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ggctcagatg gcctggggct aacgcgagct gaaggctgga gactccatga cctgccctgc 300

cgcacacact agggcccctg agtggtgctc ctaaatgggc ctggttgatc caggtgaccc 360

gccaagcaaa tccagtccgg gtgggggctg tgccgggact ctggccttcc atgcccactc 420

ggggacaggc cccacacaca gtgagtgaca gcctctttag cccatggggg gcgttttgta 480

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tacgttaata cttgaagagt tttgtcagtc tgaaagcatc atgcatggaa ggacatgagc 780

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tggt 1024

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gcacacctgc ggtgggtggg tctgggctgt gggttctgtg agttctgccg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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acaggcgtga gccaccgcgt ccggccggta ttagtgtttt aaaataaaaa attacattta 60

cagaaaactc ttggcagaac ttcagataag gtaggacaga gctcgggcgg gtggggccac 120

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agacagcgat tgttacccaa taagcagtag tcacacactt ctaccaatcg 50

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ttat 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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tcacagatct gggaggcagt atagtgatgg gcaacagttg ctcttgggtc agctggcttg 720

atttgaatcc cactagctgt atgatcttgg gtaaggatct taactgctgt cgaccaaagt 780

taaggctgtt gaggcggaaa ttgataaagg cttattgaaa gccaaatttg aagattgaat 840

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 532

agggaaaaaa tcatcttcat ggaaattaat tactttttta caaattgtga atttgaccct 60

taagagtttt cttcctgata tttaaaattg aaaaaaaaat tgttgacatt aatatttctt 120

ctttcctttt ttttcttttc cttttttttt ttttttttgc aggtatggcc tcacaagtct 180

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tcaaagtaga gccaagcagt tgtgtattcc aggaaagaaa ctatccacgg acctatgtga 300

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taccatttaa tagacctcga ggacacaact tttcattgca gacaagtgct gttgttttga 420

aaaacactgc aggtgctaca aaggtcatag cagctcaggc acagcaagct cacgtgcagg 480

cacctcagat tggggcgtgg cgaaacagat tgcatttcct agaaggcccc cagcgatgtg 540

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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agagtccctg ctacctgtta cctccacccc tatttagtcc tagtggacag cctcgctcac 60

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gggtgtgggc tgacctgcct acagctgggg cctgataagg cagcagcaaa agggtggagg 180

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<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 554

aggccggaga atggcgtgaa cctgggaggc ggagcttgca gtgagctgag atcacgccac 60

tgcactccag cctgggtgac agagcgagac tctgtctcaa agaaaaaaaa aaaagaaccc 120

agggcctggg aagctttggg tcaacccccg agaaagcctt ccctgttctc cagggtgaac 180

tcatctctgg ttcctgagcc tcaaatctct gaagggcaga gtggggcata ggtttcaact 240

cagctgtgat tctcccagaa cggtgccagg gcagtgcttg gtcgggtagg ctgtgggtgg 300

cagtcttcgg cttaacacaa gaaattgcca gaggctggct cagggggaaa tgagctgccc 360

agtcctggaa gtttccatga aatgactgaa cataggggct ggtggccccc attagggaag 420

gggtggagga gggtgttgtg tgagaccaac ctttcagttg ctggttcact aggttccaag 480

cgaaagggaa gatgactcag cggagggaat cagggaaggc tgtgtaggag tcagcactta 540

agctggacct tgagagagtg cggcagttcc agtgttgaaa gggacttcag aaaccgtccc 600

tccagcagga cacaccatcc gtcaccaatt cacatgaggc tcagggagct gaagtcagtt 660

gcccatggtc acataacaag ttgtgcttta aaaaattcag agagtccccc aggcagggcc 720

catccaggag ccagtgtgtg cagccagctt ggtaattcag gtccagtggt taattagtaa 780

ctggaaggcc ccgaagccag cttccagcag gcagggctgg gaggttgaac ttgagccggt 840

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tgag 1024

<210> 555

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 555

tgatacacat ttcaacctgt gatatatctt ttttccaaga cggagtctcg 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 556

caacttggcc atccaagggt ccccagaagg agcttagttt gctgctgaat cctccccacc 60

accccagaaa aaaaaacgtg tggttagtgg ataggacctg ttctcccatc cagcagggca 120

tcccaaggga gcagatattt ctattttttt tcctaaggta attttgttgt agcaggaggg 180

aatatttcta aaacttgggt agtgggccag accttactcg tggacaaata ggaaaaggaa 240

aatacatagt acacacacac acacacaaac acacacacac acacgggaag ggggagcacg 300

aaccttctat ttccttcttt gcaatttgag tgtctgtttc tctacttcct gtctcctacc 360

cccaactata ttcacacata actccaagga caggatttct tatgacatac tcactagtta 420

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ctttcacata aatcactacc tgatacacat ttcaacctgt gatatatctt ttttccaaga 540

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ctccagctcc tgggttcaag cgattctcct gcctcagcct cctgagtagc tgagattaca 660

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taaa 1024

<210> 557

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 557

cgtccagctg aaggtgtgaa tgactgcagt caagccaact aaatgattgg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 558

tgcacgccac catgtctggc ttaatttctt agacctcatc ctaaactgta acaagaaaca 60

actccaaaat agtctttgat gtttttcagc tgaaagccat ttatctcctt ccatgaaagt 120

ttagggccag ttttgcaacc aaactcttgc aacagcagct tttgccagtg tggactctga 180

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agtc 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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catatgcatc tcaataaccg acggtggcat ttagtgcagc attaatcacg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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ggggggaatt tcacagcact ttgtgttaag cgctgactta tcccttgtat aatactttca 60

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cctc 1024

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cgcatgatgc aagaaagagg atgatttcac atgctcagtc cccaaggtct 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 562

gcaccagtgc ccacagcagc accagccaga gctggacatc agggagccgc atgctcctgg 60

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aggg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 563

cctgcagatg gtgccgattc atgagtgcgg ctagtgagtc cgatggagcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 564

ttgcaccgcc attctggatc ggcatcttct tcttcaggag gtggactgtc aggccaatag 60

tgatgcccca cagaaggcaa gagatgatgg ctgctgtccg attggagatc ttgttcaggg 120

cgtggtgggg atggaccacc cggaaatacc tgtctaccgc caccaccgtg aggaagatga 180

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gaaa 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 565

cggactccca cacaggtgag cccagagcag acggctggtc tgcaccccca 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 566

tactggaagt ccccccgacc ctccccccaa ggctagttcc cttcttgggc acctgctctg 60

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gacc 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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aggggacatg tgtgagcatg aggcctccat tgacctctcc gcctacatcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 568

cagggagtgg agaggcattc ccagaagcat cagcttcggg catctccaga accctggctt 60

ggtccctgac caaggagtgt ccccaactgc tgaataggcc aggagtcgcc tttctctaag 120

gcttacatct ctccctctgg ggtgtgtcct gcccctccct gagtcacccc aaggggagag 180

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gcct 1024

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cgcaggggcc atccctgacc acagcagatt tcatcgagta cttgcttgtt 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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ctgcgtgctt caggcttggg gtagggaggg gaccaactgg tgatttcagc ccgcatctac 60

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ctaacttcaa cttcatgaac tgagaatgct cttactgtgc tgaaatctcg 50

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tgatgtcttc tatctccttt tgtgttgtca tctttattag agtcaactcc ttgagggcga 60

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ccagagcttc tcagactggg tgctggggcc ctgacagttt gggacaatcg 50

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ttggcagatt cagatgcggt ctcctctgga ctgcaggcag ggccctcgga ggtgtttttt 60

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ggaattgaga tgctgagggt ggagctgctc agaggatggt cctccagcat tggaacccca 720

ggaaggggca ctaagtctcc tggctcctgt ctcagttggg cggctggtaa ggagctcgtc 780

tcccctgatg cctgctgtgg gcctcagttt tccacctgtt acagagaacc cctcgccctt 840

cgggatgggt tgcagttgta ggcagatctg gaagatgccc tagtggagga gagcactctg 900

aagcttctag actcttccaa gcaggctgtg ggcatgggct ttctcagtgt gccaaaggag 960

gcagatatgg ccagatttct agtcattgat tcatttgttc gataaaatgt taagactggg 1020

aatc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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gctgcgaggg gctcatggga tccccatggg ccaaggccag gtggttgacg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 578

ctcccgccca gccaaatgca ggccgccgcc ctccctgagg agatccgttg gctcctggaa 60

ggtaacgccc tggcgcaggc cccctccagt gctgagccga aggccgaaag gggacaccag 120

gcctcccacg gccaggcttt ctttacggct tcgtcactca cctccttcta gaaccttaag 180

gcttctagag ccctcaactc cctagagcca gctttccatc ctctcacctc agggcccctt 240

tcactccctg gagtcccaca tcttcttttg ccttgaggca cctccacgcc tccacttcac 300

ctccccggct tctaaagtcc tcaggccagg ttcttggtcc cccatgccac cttgcctggt 360

ctccgacctg tccctttctc caaaggactg ccctacatct gtagggtttc ccgtccccct 420

ccttccccag ccacgacttc ctcacctctc acagaagacc ccaaaccttc ctgcttagag 480

gtccccgagg ctctccaggg ggctgcgagg ggctcatggg atccccatgg gccaaggcca 540

ggtggttgac gtgagttttt gtcagtgcga aaaccccagc cctcccttta tcaccctgca 600

gacgtctagg ggtctcaccc accccaaggc aggctcattc tcagtatggg atttcctcct 660

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caacacacac tgccaacact ccaaagagat gtcacaaaga gacgttgcta acgggcagtt 840

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agggaggaca gaggcctgga atctgcagtc gcataaggct cccaggagga aactattcag 960

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ttgg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cgccctctgc aggtaggtgg aaaaaaagac aggagccata cagagaaaac 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 580

gaacactatg attttgcagt cctggtttct acgtggatct aatggtgtaa tggatatgaa 60

tgtacattgc aagctgttaa gtcatttctg ctaaatacag aatgacccac tgtggtcatc 120

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gcagtgggtg ggcaggtcca tgcctcccct ggccccccag ctctgcaggg cagtgttcct 420

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cagagaaaac accctcttca ggtaggtaga aaaaaagacg ggagagtctg gaggctcagg 600

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<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 582

gaagccaaca aatatgaaac actgtgaaaa gccagatatt tcttttgaat gactatttct 60

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tgtt 1024

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cggatacggc tggttgggca tcacactttg agaaccgctg tgtaatctag 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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ggctttagag ctatctggca ccaatccctc atctgtacaa tggtccagta aatacttttt 60

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tattgtactt ttggtcatcg tcatcaatga tttgtactat ttttagatct gttcaagaat 300

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ttga 1024

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cgtagagact gtggtttaga tcactcatag aaactggagg caaaatgcat 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 588

gccatagcag caaattccca aaatatcttg aagaaattga aaacaagata ttttttgaat 60

gagcgtaaac tcttgggaat gaattttaat ttgagattaa aattgctgtt gtctttactt 120

acctaacatt catttcctct gagagccaac tccttccttt caataaattc ttattttcta 180

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caac 1024

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<212> DNA

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<212> DNA

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<400> 592

aatcaggtgt tctatgaaga gaactagctg agcccattcc tccatctcca aaaggctcca 60

tagacccaac tccaccctcc atcctcctcc tcaaggagta gtagcttctg acacttctat 120

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gaga 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 599

cggaaaaaca aaaggcatct gcacctgcag ccctgctgag gcccctgctg 50

<210> 600

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 600

tgcctggcaa gaaacacttt caagtgggcc tcactcccat cagtaatgtc cctctcaggt 60

cccttccccc acccacctgg agtagcctta ccttgcgaga gaagggtagc cagtaccagg 120

ccagagagaa acgtgctatg ttccatctcc cagcggaact catccagtag ataaagccag 180

gtcaccgaac tatcagcctg ggtgagagct gccctcccct agctgactca caggtaccgg 240

aaagaggaga gtgggggagg aactagaaga tgtctgcttc tctgctttct gccgttgatg 300

gtgggaaatt ttcagagtgg gggtgggcta ggggtagggt aggaaggaag cggtgtaaat 360

tgctctatct ctgagcaggg agctggcaga gaatatggaa aaggtggcct gaactttagc 420

gtccctattg acaatgcaac cacatttaca cacaacctaa acactgccac atctcgaagc 480

cccttgagag aagccgtcgg ccccatagcg caagccgtag cagctagatt tctcatggag 540

gctgatcttt ctcaggaccc ttcactaggc agccagggac accagatcta gcagcttctt 600

gtcagtggga ggttgggctt tagagacccc agccagagat ttgaatcctg ggtccaatac 660

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cattattagg attcaaacaa gatatttgca tggtgcctca cgcatcatat gtgctcatta 780

aggggtagtt attaataata atataattga ctgacaggca atattgagcc tcccggtgag 840

acaaatggac ctttttcccc tgtggcctac gaggatctga aactcttcac gctgctgcag 900

ttagactgtc acttacctgg ggacagagtc atgcctgtct tgctcactgc tgtatcttgt 960

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gaga 1024

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<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 601

agtcatctgt tttgcttttt ttccagaagt agtaagtctg ctggcctccg 50

<210> 602

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 602

tgctgctcca tgccagatcc accacacaga aagcaaatgt tcagtgcatc tccctcttcc 60

tgtcagagct tatagaggaa ggaagacccc gcaatgtgga ggcatattgt attacaatta 120

cttttaatgg caaaaactgc agttactttt gtgccaacct actacatggt ctggacagct 180

aaatgtcatg tatttttcat ggcccctcca ggtattgtca gagtcctctt gtttggcctt 240

ctaggaaggc tgtgggaccc agctttcttc aaccagtcca ggtggaggcc tctgccttga 300

acgtttccaa gtgaggtaaa acccgcaggc ccagaggcct ctctacttcc tgtgtggggt 360

tcagaaaccc tcctcccctc ccagcctcag gtgcctgctt cagaaaatgg tgagtctctc 420

tcttataaag ccctcctttt tcatcctagc attgggaaca atggccccag ggtccttatc 480

tctagcagat gttttgaaaa agtcatctgt tttgcttttt ttccagaagt agtaagtctg 540

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gtgtgtctcc agaccgctgg aaggcttaca gccttacctg gcactgccta gtggcaccaa 720

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tacgagctca ttccaactta cccagccctc cagaactaac ccaaaagaga ctggaagagc 960

gaagctccac tccttgtttt gaagagacca gatacttgcg tccaaactct gcacagggca 1020

tata 1024

<210> 603

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 603

cgctgcagtc agactccaaa gtcaggaacg tgagggctac catctctcaa 50

<210> 604

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 604

cagttaccac ctgcaataaa ctgagagact ccttcctgcc gcaggtggag ctgggggctg 60

ggcccaaagg cagatggaga caggggagct gtactcaggc tgaaagcctc cccaaagtct 120

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gcaaaataaa gaccatacaa tgggccagcc taggaggagg cagagtatta gccgcacatt 240

ttgtaagaca gcatcaaatc attaactcta caaatttttg aaaaacttac tatgtgccag 300

gcactttccg gaggacatga ggcatcgggt gaaaggaaaa agttagtcaa cggcagccga 360

gatgagcacg ctgcccagaa tattgtgttt tttttttttt tttttttttc agtatctcac 420

ttgggtccca tttcagatac agtgaccaag tccctgagag gacaaccatg tgattctgtt 480

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tcatttttca gcagtggggg taagagtgat gaatttggcc aggcacagtg gctcatgcct 600

gtaatcccag caatttagga ggctgagaca ggaggattgc ttgaggccag gagttcgaga 660

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acaaaaatat aacgaattag ctgggcatgg tggtacatgc ctgtagtctc agctacttgg 780

gaggctaagg caggaggatc acttgagccc agtggttcaa gtctatagtt agtcataatt 840

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gagagtgaga gtgcactgta ggctctacag ctgaaatgtc ttgagagatg gtagccctca 1020

cgtt 1024

<210> 605

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<212> DNA

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cggcagagca cacagctgca gaagtaaaaa ggattgaaac atttggatcc 50

<210> 606

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 606

ccgcatgctc tgaactactg ttggggctcc tggggccccc cctggagcta gccccgcccc 60

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cggc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 607

cgcactcagc aaggcctcct gccctgagag aggctccgcc cactaccccc 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 608

actgcgcccg gcctagggtg gaccctattt caatatgact ggtgtccttt ggaaagggga 60

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ccttgtcgtg gtacttcctt agtttggccc caggaaacca tcccaaaggc aagggcgtgg 300

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gcctctggag ccggggcaca cctcatgcaa ggacagggtc caaattcctt tgtccttgga 720

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gtctggactt tccctctgcc cctccccact ctcaggctgg tggggtgggg aaagcagccc 840

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gaccctcatt cctcccaggg accccagacc tctgtctctc tcgggtaagt ctccatctct 960

gtctgtctct gtctctgtct ctgtctctgt ctgtttttca cgcactcagc aaggcctcct 1020

gccc 1024

<210> 609

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 609

cggtatacct gccctacttc ggtatagtcc ttggcacatg gcaggcactc 50

<210> 610

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 610

gggtcaccca gtgaactagg ggcagggcag gacagggcag ggccaggcct ctgctgtgct 60

ttctcctttc ctccctccaa cccaggcact atctccatca aaagttgtgt tctctcccca 120

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ctaccttcca aatcaagcag aaccctctgc tgcccactgg gagtcacaag gaggggacgg 360

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gaaccctccc tcagtataat cggtatacct gccctacttc ggtatagtcc ttggcacatg 540

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ctgatgcagg agagattggg cttttggaga ggtggaggtg ggggtactgt gaaactggag 660

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gcagagcagt ccttcctctg gcggcagcag cagcctttgt gtactgatct gggagacggc 900

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ctagaaggtg gtgcagatag gggtggggct gagccaaggg agtggacaat acagagatct 1020

ggaa 1024

<210> 611

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cggctgccta tccggtgcta ggctctagct gggtactgtt catacagggc 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 612

aaaaaattaa ggccgggcac agtggctcac gcctgtaatt cccagcactt tgtgaggccg 60

aggcgggcag atcatggggt caggagtttg agaccagcct gactaacatg gtgaaattcc 120

gtctctacta aaaatacaaa aaattagcca ggtgtggtgg caggcacctg taatcccagc 180

tacgcaagag gctgaggcag gagaatcgcc tgaacccggg aggcggaggt tgcagtgagc 240

tgagatcgcg ccattgcact ccaaggtggg cgacagacga gactatctcc aaaaaaaaaa 300

aaaaaaacta gctaggggtg gtggtgtagg ctgtagtccc agctacttgg gaggctgagg 360

tgggaggatc acctgaacca ggggaggcag aggctgcagt gagccttgat tgtgccactg 420

cactccagcc tgggtgacag agtgaggccc tgtcttaaaa aaaacaaaca aacccgaaaa 480

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tacagatgaa gaaactgagc cacagaatgg ggaggtgtga ggcagtggct tcccgagccc 660

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tcag 1024

<210> 613

<211> 50

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cgaaggcccc cagctgtggg agcccacgct atttattggt gatcaaagaa 50

<210> 614

<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 614

tcgacctccc catcacccgg cgcgtaccag cgcccgctca gtgactccca ggtttggtgg 60

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ctac 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cgctcatcag gacttcagca ctgcccgtcc atggggacgt ctgcactcac 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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tagagcaaca ctcaaagcct tcctttttaa acgagtacag acaggtagca gtcaagataa 60

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cgccttgagc tgtacctggc acatctttgt tgctcagcaa agagtggttg 50

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<212> DNA

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<212> DNA

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tcttaaacgg cgaatcagat cgggcccctc cttcacttaa aacccttggg tcatagagat 60

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tgtcacttta taggagaggc tgtcctgtcc agcctcctct atcacatctc cctggcttat 360

cactttcatt gataactctt agaaatggtc tgtcttctcc attcatcttg tgctcgtttg 420

cagtctgtct tgcgcagccg actgcaagct ctggagggca gggtggtgcc gagctttaat 480

ctccttagtc actgtatctc taggtcctag aacagagcct ggtgcacagc aagtgctcca 540

gcaatggtcg tccaacgtca aaagcgagtc ctgcctacat ctgtgtttgt gttgcctgtg 600

ctggtggttc ccaccctcca cgtcctcccc acacgtggac acatgtttat gatccaactg 660

gaacatgaat aatcccctct ctcctctctc tatgcttggt ctgattcctg attctgcccg 720

tttcttctct tccgtgcccg aataaatgat cccaaaggac tcagaggcag gagatggctt 780

agttggcctt tggctgacct atggccaccc tgtgtcctca aactaaccag aaccttgcca 840

ttgactcaac ttcactctca ctaagggaga cacaagacag gaacttgggg ttgggaaact 900

ctgcgaccga ggctagccct ggtccaggtg acaaacagga agtgcgcagg cattgcaaag 960

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taaa 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 623

cgggggataa tcagagcctc agaggcatag gcacataccc ttagactcag 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 624

aaagtggcac aactggggag tcagctgtgc ctgcagtgtc tggggatgct ctgtgtccat 60

ccgcaagcat tctacgtgac ctccactctg tgcctgcaat tggtgggttg tagaagaggt 120

agtcacgaag ggcccctggg agacccagag tcaagaggaa gagaggccta aaaaggagaa 180

aagatagaga ggggacagct ggagaagagc cacagacagg caggagccag caaagagaga 240

cagagagatg ggggataact gaggagttct ggggaggagg ggagcagaac ggcatctccc 300

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gcggggggga agggagctgc aaagcacttt acctctcact ccaaacctgc ccaaggtgca 420

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ccacatttac caaaagaaca cgggggataa tcagagcctc agaggcatag gcacataccc 540

ttagactcag tgcagaaggt ccccaaaact tcccctcctc tttctcacta ctcatccact 600

gtcaatgacc ctaggagttg aaaagtcctt ctccacttct acctttatct ctcaatctgc 660

agccatgggg agactctggg agctacctaa gaacagaggt gctgatggta gcagagtgtg 720

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cagc 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 625

cggcagagtc acagcagcca cctcgtcttg cccacgctgc agcctgccca 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 626

ttggtgtctg aggaaaagga ggctgatgtg tagaagcaaa gtaactgagg gggagagtgg 60

gaggaggtga aatcagggag gtaacaggat cagagagtac agaaatttgt gggctgtgaa 120

gaggacttgg gcttttgttc tgagtaaagt gggagccatg caaggttcta gggggagggg 180

gaaccagatc tgactctggt gttcacaggc accctctggc tgctgagtgg aaaaatagac 240

tggggggtgg agaggggcat gatagtggaa tcaaggagac caggatagag gaggcttggg 300

tcgcatttta caagggagga aactgaggca ccgagacatt caggtggagg atacaggact 360

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atcacttcct gagggttcag cggcagagtc acagcagcca cctcgtcttg cccacgctgc 540

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agggcagaag ctggcaccag tgggggcagg gcccctgggc ccagagccca ggtctgattg 660

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gtgcgtctgt ctgcctgtct gtctgtccgg actgggctca aggtcactag cagtcgaccc 840

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tgcg 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 627

cgctgcgcca catcccaccg gcccttacac tgtggtgtcc agcagcatcc 50

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<211> 1024

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 628

tgggtggatc acctgaggtc aggagtttga gaccagctgg ccaacatggt gaaaccctgt 60

ctctactaaa aaaaaaagaa aaaaaaatac aaaaaattag ccgggcatgg tggcaggcgc 120

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aggt 1024

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cgcactctct catcggactc cccaaaccgg tctgggtggc acttgaggct 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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ctcccctctg agttcccatt attcagtctc tgtgccttct gggacgcgga ccccctctcc 60

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tcaa 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 631

gaaggtgggc gttatcttcc gactgatcca gctggtggtc ctggtctacg 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 632

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ggga 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cggcttagca attggccctg tgacttccag tcacaaaaga ggaaggtgtt 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 634

aacaagaccc tgtctcaaga acaacaacaa aaacattgtg gactccccag ctcaagacac 60

agccccccaa caaacacaca tcccccaggc tctccagacc tgctttgtcc cctagtacag 120

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ccctgtcatc cactgtcctc ccttgcccct ctcgtctctg tccgtttaca actaggctct 480

gtgttccctc tgtgactgca cggcttagca attggccctg tgacttccag tcacaaaaga 540

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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taataaatgt gtgtcgggtt aagataggcc caaagccatt tcaaatgtcc aggcagtggt 60

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<213> 智人(Homo sapiens)

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ccca 1024

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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cgggccacca cacttacagc cctctgcatc gtcgcctgca acgagtgcag 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 646

atgagaccct ctgagctcat ttccttgggg ccattgacct atccatgaca cccccatgac 60

ctctagctct tctgagaagg ctgtccttgg aatccagttc acagcaaaca aagccaagga 120

gtggaccact gtaaacaggg aggaaggcct gatcagatgg ccagtgtgct cccctggctc 180

acctgcagca tatgagacac gtcaaagagc gagcagtgct ggcgtgtgtg caggtgcgag 240

tcagtgtgac tgtcccggta ctgcactggc agactccaac ccgcaaacgc caccattttc 300

ccgccgtggg ccaggtggaa gtcatagagc ggtgtcctgc ggagcacctc ctgtgggcgg 360

ctgggcttag tgccaccagg gccctagccc ccagccgctt ccctccccca ccctccaaga 420

tcagcaccct ctatcccacc tgtgcgcaac taagtggacg acacaaggcc ggggggaatg 480

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gtca 1024

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<213> 智人(Homo sapiens)

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atacggatgc ggctgtggct gatggctatt tggatgctgc ccaagcctcg 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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caagttcctc ccacctctgc cttttcacct gcttgctttt aaatccacca gttagagctc 60

tccagaggaa acctaactgg ataaagttgc tggcccaaag gtccgttcct cccttccctc 120

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ctgctgggga acagtagcta ccagctaagt tgatagagac actcgaagag gttcattcaa 420

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cggaaaggga atctaagctc aagcaggaac ttgaaaaacg tgcatttggc 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cagaggatct cattttcttt tttttcattg cttcttttcc tgtggagggc aggcaaggga 780

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

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ttct 1024

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cgccagcgcc cctacggatt agcccccagg gatctctgag cctggtatcc 50

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 656

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<212> DNA

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gggccctgct gtgtgatccc gagtgggttt cctactctct ctgggcccct gctgtgtgat 300

tctgagtggg tttcctgccc tctctggggc cctgctgtgt gatcccgagt gggtttcctg 360

ccctctctgg gcccacttcc tcaatcatga ggcaggtctg tcacccatca attttccagg 420

cagtgggaag gacccccctc tgcacgtttg ggatggggac agagtgttca gcctgaggac 480

aggcctttgg gggtcagttg cgggggagac agtgtccagg gacccaggga tccacactca 540

ggcctcatcc ccgagggctc agccgtgcgg ttgctgccgg cagccaggcc tcgacccacc 600

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<213> 智人(Homo sapiens)

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<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 670

cacctccacc ccacccagcc ccattgccca cagcgcactc tatctcattt tcttccaggc 60

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gagtattggt ggaaggtgtt gatgatggtc tctatgttgc gttccagctg cgacattttg 540

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cggtcattga aacgaatgac actacggctt gcaccaggtt gaagcagtac 50

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<213> 智人(Homo sapiens)

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cgtgttcaag caattttcct gcctcagcct cccaaatagc tgggattacc agtgcccacc 60

caccatgcct ggccaatttt ttttcttttt catattttta gtagagatgg agtttcacca 120

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agtgctagga ttacaggagt gagccaccgc gcccagctag cttttttaac cttgtagcta 240

tcttacttag gaatagaatg ggaggcaggt ttgtcctaca cagttaccag tttgacttct 300

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tccc 1024

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ggtaaatctc cctgtgaagg attctcccgg agctcctgct tggactaacg 50

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gagacgcgag caccccccag cctggagcct ggggaagagg gccaggaaga ggaggagtag 60

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gcct 1024

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gaactgtcct agtcatctga aatgctgatc cacggcaatt atcaccatca gattctatgc 900

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Claims (21)

1.用于针对来自哺乳动物的生物样品产生嗜中性粒细胞血象的试剂盒，其包括用于实施包含以下步骤的方法的材料，所述材料包括寡核苷酸和归一化标准物：使用所述寡核苷酸在表观遗传学上检测生物样品中的血细胞，以及使用所述归一化标准物定量所检测的所述血细胞，其中所述归一化标准物为核酸分子，其包含对待检测的嗜中性粒细胞(nGRC)特异的至少一种标志物区域，以及为细胞非特异的至少一种对照区域，其中所述标志物区域和所述对照区域以相同拷贝数存在于所述分子和/或已知组成的天然血细胞样品中；以及其中所述在表观遗传学上检测包括确定SEQ ID No:518或686任一个的序列内至少一个CpG位点的亚硫酸氢盐转化，其中与非嗜中性粒细胞相比，基因区域中至少一个CpG位点的亚硫酸氢盐转化指示嗜中性粒细胞，其中所述至少一个CpG位点选自如SEQ ID No:685所示的扩增子的CpG位点26、48、103、206、251和263。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述至少一个CpG位点选自CpG位点206和251。

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述生物样品选自哺乳动物体液，组织样品和器官样品。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其中所述生物样品选自外周血样品、毛细管血样品或静脉血样品或其亚组分。

5.如权利要求3所述的试剂盒，其中所述生物样品选自血块和干血斑。

6.如权利要求3所述的试剂盒，其中所述生物样品选自干燥的、冷冻的、包埋的、保存的和新鲜的体液或组织样品。

7.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述确定包括使用选自以下的方法：特异性酶消化或染料排除技术、亚硫酸氢盐测序、下一代测序、纳米孔测序、单分子实时测序、使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的引物、使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的阻断寡核苷酸、使用荧光标记的淬灭的寡核苷酸探针，使用对亚硫酸氢盐-转化的DNA特异的单核苷酸引物延伸的引物、数字或定量PCR分析、以及特异性选择性核酸和/或染色质沉淀。

8.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述方法还包括将产生的所述嗜中性粒细胞血象与选自以下的全部或至少一种细胞类型相区分：嗜碱性粒细胞(bGRAN)、嗜酸性粒细胞(eGRAN)、单核细胞(MOC)、CD3⁺CD4⁺T细胞(THC)、细胞毒性CD3⁺CD8⁺T细胞(CTL)、CD3^-自然杀伤细胞(NKC)、CD3⁺自然杀伤细胞(NKT)和B-淋巴细胞(BLC)。

9.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述方法还包括通过将所产生的所述嗜中性粒细胞血象与取自同一哺乳动物更早期样品的嗜中性粒细胞血象和/或与对照样品的嗜中性粒细胞血象进行比较，在所鉴定的所述生物样品中监测所述嗜中性粒细胞血象的步骤。

10.用于鉴定化学物质或生物物质对嗜中性粒细胞的影响的非诊断目的的方法，其包括对从用所述物质处理的哺乳动物获得的血样实施权利要求1至9中任一项所述的方法，以及将所述样品中的嗜中性粒细胞与未处理样品的嗜中性粒细胞进行比较。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述试剂盒包含：a)亚硫酸氢盐试剂，以及b)用于分析选自SEQ ID No:685的区域中的CpG位点的CpG位点甲基化状态的引物和探针。

12.如权利要求10或11所述的方法，其中所述天然血细胞样品为已知细胞组成的血样和/或已知血细胞类型和免疫细胞类型组成的血样。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述天然血细胞样品为提前制备的。

14.如权利要求10或11所述的方法，其还包括基于所述检测和定量来获得嗜中性粒细胞血象的步骤。

15.如权利要求10或11所述的方法，其中所述生物样品为未知细胞组成的样品。

16.如权利要求10或11所述的方法，其中所述生物样品选自哺乳动物体液，组织样品和器官样品。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述生物样品选自外周血样品、毛细管血样品或静脉血样品或其亚组分。

18.如权利要求16所述的方法，其中所述生物样品选自外周血单核细胞，血块和干血斑。

19.如权利要求16所述的方法，其中所述生物样品选自干燥的、冷冻的、包埋的、保存的和新鲜的体液或组织样品。

20.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述试剂盒还用于基于所产生的所述嗜中性粒细胞血象来推断哺乳动物的免疫状态。

21.如权利要求10或11所述的方法，其还包括通过将所产生的嗜中性粒细胞血象与取自同一哺乳动物更早期样品的嗜中性粒细胞血象和/或与对照样品的嗜中性粒细胞血象进行比较，在所鉴定的所述生物样品中监测所述嗜中性粒细胞血象的步骤。

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