CN107835812A - 靶向突变体k‑ras 的组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了抑制K‑ras尤其是突变体K‑ras的化合物和组合物。本发明提供优先地或选择性地抑制突变体K‑Ras的特定形式尤其是G12D突变体形式的某些化合物。

Description

靶向突变体K-RAS 的组合物和方法
本申请要求2003年4月15日申请的美国临时申请序列号62/142974的优先权。
本发明的领域
本发明的领域是药学化合物、组合物和方法，以及其在治疗与突变体 KRAS蛋白相关的疾病中的用途。
发明背景
背景说明书包括可以理解本发明的信息。本文提供的任何信息并不认为是现有技术或是与目前所要求保护的发明有关，或者也不认为任何具体或隐含提到的出版物是现有技术。
本文以引证的方式结合了所引用的所有出版物和申请，其结合程度如同每个单独出版物或专利申请具体和独立地以引证的方式结合到本文中一样。如果所结合的参考文献中的术语的定义或用途与本文提供的术语的定义不一致或相反，则使用本文提供的术语的定义，并且不使用参考文献中的术语的定义。
K-Ras(或Ki-Ras或Kirsten-Ras)是GTP酶蛋白的Ras家族的21kD成员，并且是细胞信号传导所必需的组分。活化的K-Ras通常活化对于生长因子及其它受体信号(例如，c-Raf和PI3-激酶)的传播所必需的下游激酶。令人遗憾的是，编码K-Ras的基因的遗传变化与肿瘤的形成有关，并且活化的机理已有比较充分地了解。
癌症相关的突变体K-Ras具有结构性活性，同时它的GTP结合(活性)状态的稳定性延长，并由此能够结构性地活化下游效应子，例如，Raf激酶和磷酸肌醇-3激酶(PI3K)。这两种激酶在增殖/存活/抗凋亡信号途径中起到重要作用。与对于EGFR靶向治疗(例如，帕尼单抗(panitumumab)、西妥昔单抗
(Cetuximab)，等等)的敏感性显著不足的K-Ras易感染癌细胞中的突变一样，这些突变使得对于EGFR靶向的抗癌症治疗不敏感。与Ras GTP酶活化蛋白(RasGAP)的相互作用是K-Ras的合适失活所不可缺少的，导致GTP更有效地水解为GDP。由于GTP水解所造成的K-Ras结构的构型变化，导致K-Ras对于效应子蛋白的亲合性的消除，由此使下游增殖和抗死亡途径失活。K-Ras中的癌症相关的突变已经显示了与RasGAP的相互作用差，因此保留在“on”或结构性的活性位置。
在所有人类肿瘤当中，大约33％表达突变体Ras，并且这些突变通常使 Ras稳定处于GTP结合(活性)状态。在K-Ras中发现的突变，强烈地与胰腺癌 (90％)、胆道癌(33％)、结肠直肠癌(32％)和肺癌(20％)相关，还有其它的癌症。在所有人类肿瘤当中，大约20-25％在编码K-Ras的基因中隐藏有活化突变。
在甘氨酸-12(Gly12)、Gly13和谷氨酰胺-61(Gln61)上发现了癌症相关的突变的例子，其中Gly12是主要的突变位点(88％)。最值得注意的是，尽管大部分一般Gly12突变在相同位置是有缺陷的，但不同的突变具有它们自己不同的特征。例如，G12C的表达通常与对于顺铂的响应降低和对于紫杉酚和培美曲唑(Pemetrexed)的敏感性提高有关，而G12D突变体的表达通常导致对于紫杉酚治疗的耐受性和对于索拉非尼(sorafenib)的敏感性。当与野生型变体相比较时，G12V突变体对于顺铂显示出强烈的敏感性，并且对于培美曲唑(Pemetrexed)的耐受性略微提高。这种治疗响应上的差异性，造成了在发现合适的针对K-Ras特异性的药物治疗方面的困难，并且使得K-Ras的特定突变形式可能需要特定药物来抑制K-Ras活性变得更加突出。
最近，已经推荐了特异性药物来靶向K-Ras的具体突变形式。例如， WO2013/155223A1公开了G12C突变形式的小分子抑制剂。同时，由于限制使用和潜在毒性的问题，可能限制了‘223参考文献所提供的化合物。为了规避突变体特定形式，推荐变构抑制剂(PLOSOne October 2011，Volume 6， Issue 10，e25711)。然而，该报道没有区分不同的突变形式。
考虑到突变体K-Ras在各种肿瘤疾病状态中所起到的重要作用，有利的是，能够鉴定与癌症疾病状态有关的突变体K-Ras蛋白形式和/或特定突变形式特异性结合的化合物，最优选，与野生型的结合性小或不与野生型结合的特定突变型。
由此，尽管本领域已知K-ras的各种形式的抑制剂，但还需要优先或选择性靶向突变体K-Ras尤其是单一突变形式的组合物和方法。
本发明概述
本发明的主题涉及抑制突变体K-Ras的化合物、组合物和方法，尤其是抑制G12V和/或G12D突变体K-Ras。最优选，相比于其它突变形式，本文提供的化合物高选择性地抑制G12V和/或G12D突变体K-Ras，并且相比于野生型K-Ras，具有高特异性。
在本发明主题的一个方面，具有按照式I的结构的化合物
其中，X是O或S，其中，R1和R2独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤素、-OH、-NHC(O)烷基或-NHC(O)芳基，其中，R3是H、C1-C4烷基、 -NHR6或-OR6，其中，R6是H、烷基、卤代烷基、烯基、芳基或杂芳基，其中，R4和R5一起形成任选取代的5、6或7元杂环，或当R5是-NHC(O)烷基或 -NHC(O)芳基时，R4不存在。
在进一步优选的方面，R1和R2独立地是H、烷基、杂芳基、环烷基或杂环烷基。例如，R1可以是烷基或环烷基，R2可以是烷基。最优选(但不一定)， X是S，和/或，R3是H或C1-C4烷基。另外，通常优选，任选取代的5、6或7元杂环含有氮原子，并且所述环进一步含有氧代取代基。因此，携带R4和R5的苯基可以与5、6或7元杂环一起形成两个或三个环结构，包括
因此，从另一个方面考虑，所涵盖的化合物可以具有按照式的结构
其中，X是O或S，其中，R1和R2独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤素、 -OH、-NHC(O)烷基或-NHC(O)芳基；其中，R3是H或C1-C4烷基；其中，R7是H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基或烷杂芳基。例如，所涵盖的化合物包括其中R1是烷基或环烷基、R2是烷基的那些化合物。如前所述，优选，至少在一些化合物中，X是S，和/或，R3是H。
例如，尤其优选的化合物具有式III或式IV的结构，其中，R3是H、甲基或卤素。
在本发明主题的另一个方面，本发明包括含有可药用载体和一或多种上面提供的化合物的药物组合物。最优选，当以有效抑制哺乳动物的K-ras的剂量给予哺乳动物时，以有效抑制哺乳动物的K-ras的浓度提供所述化合物。此外，通常优选，K-ras是突变体K-ras。例如，尤其涵盖的组合物包括：相对于突变体K-G12V和突变体K-ras G12C，所述化合物优先抑制突变体K-ras G12D的那些组合物。
因此，本发明还包括上面所提供的化合物抑制K-ras信号的用途，在最优选的用途中，所述化合物具有按照式II、式III或式IV的结构。由此，还包括的是，突变体K-ras介导K-ras信号传导。例如，突变体K-ras是K-ras G12D，并且相对于突变体K-ras G12V和突变体K-ras G12C，所述化合物优先抑制突变体K-ras G12D。
从另一个方面考虑，本发明还包括本文提供的化合物在制备***疾病的药物中的用途，尤其是与突变体K-ras(例如，K-ras G12D)有关的肿瘤疾病。例如，这种药物中的化合物可以具有按照式II、式III或式IV的结构。
另外，本发明还包括抑制突变体K-ras的方法。这种方法通常包括使突变体K-ras与能够有效抑制突变体K-ras(例如，其中突变体K-ras是K-ras G12D) 浓度的所涵盖的化合物接触(体外或体内)的步骤。例如，相对于突变体 K-G12V和突变体K-ras G12C，尤其优选的化合物优先抑制突变体K-ras G12D。就MEK信号和ERK信号中的至少一种信号而论，合适的浓度能够有效降低下游信号。
在本发明主题的进一步方面，本发明还包括在需要的哺乳动物中***疾病(例如，结肠癌、胰腺癌和非小细胞肺癌)的方法，其中，这种方法包括在有效抑制哺乳动物的K-ras的方案下给予哺乳动物所包括的化合物的步骤。例如，合适的化合物具有按照式II、式III或式IV的结构，和/或，还包括的是，给药步骤包括口服或注射给药。
通过下列优选实施方案的详细说明，以及附图，本发明主题的各种目的、特征、方面和优越性变得更明显，其中，附图中类似数字代表类似组分。
附图的简要说明
图1描述了使用G-LISA试验来说明重组细胞中的各种突变形式的Ras抑制的曲线。
图2描述了使用G-LISA试验来说明各种癌细胞中的Ras抑制。
图3给出了抑制下游信号的自动射线照相，通过野生型和K-ras突变体 (G12D)细胞中的MEK和Erk的磷酸化(phospohorylation)来证明。
图4A-4D给出了在检测K-Ras抑制过程中所选择的化合物。
图5-73描述了按照本发明主题的其它示例性的化合物。
详细说明
本发明人现在发现，可以制备能够优先或选择性抑制突变体K-ras的某些化合物。这种化合物具有式A图解说明的骨架。
其中，X和Q独立地并且通常是五元杂芳香环(最通常是任选取代的噻唑或噁唑)，A包括芳基、杂芳基或杂环部分(最通常是取代的苯基或四氢喹啉)， M是一个或多个取代基，例如，烷基、环烷基、烯基或卤素。
本文使用的术语“取代的”是指用官能团替代原子或化学基团(例如，H、 NH2或OH)，尤其涵盖的官能团包括亲核基团例如，-NH2、-OH、SH、-NC，等等)、亲电子基团(例如，C(O)OR、C(X)OH，等等)、极性基团(例如，-OH)、非极性基团(例如，芳基、烷基、烯基、炔基，等等)、离子基团(例如，NH3 +) 和卤素(例如，-F、-Cl)，以及其所有的化学上合理的组合。由此，本文使用的术语“官能团”可以指的是亲核基团(例如，-NH2、-OH、SH、-NC、-CN，等等)、亲电子基团(例如，C(O)OR、C(X)OH、C(卤素)OR，等等)、极性基团(例如，-OH)、非极性基团(例如，芳基、烷基、烯基、炔基，等等)、离子基团(例如，NH3 +)和卤素。
尽管不限制本发明的主题，但本发明人发现，Q和X的杂环***优选五元杂芳基***，可以被一个或多个取代基取代，或可以不被一个或多个取代基取代。因此，在其它合适的杂芳基***当中，尤其优选的X和Q基团包括噻唑环、噁唑环、咪唑环、***环、呋喃环和噻吩环。在更进一步优选的方面，Q是噁唑或噻唑，优选，在噁唑或噻唑中，Q中的一或两个氢原子被C1-C4烷基部分(可以是环状)取代。由此，尤其优选的取代基包括：甲基、乙基、三氟甲基、丙基和环丙基，在示例性列出的Q部分中所描述的每个取代基具有一或两个M取代基(本文称为R4和R5，可以优选烷基、环烷基、烯基、羟基、三氟甲基或卤素)。
类似地，应该理解的是，X基团可以明显不同。然而，尤其优选的X基团任选被噻唑取代，尤其是噻唑被相对小的取代基(例如，甲基、羟基、卤素，等等)取代。
关于A基团，优选，这种基团包括芳基、杂芳基或包括芳香部分的杂环部分。最典型的是，A基团包括可以与一个或多个其它芳香的、饱和的或不饱和的环系稠合的苯基环，可以包括杂原子，或可以不必包括杂原子。例如，在A是取代的苯基环的情况下，优选，取代基是可以与酰基部分偶合的氨基。另一方面，在A基团是稠环***的情况下，优选，至少一个环包括苯基，优选，另一个环是杂环。例如，合适的A基团包括下列基团。
除非上下文另外规定，否则，本文使用的术语“偶合”包括直接偶合(其中，彼此偶合的两个组成部分彼此接触)和间接偶合(其中，至少一个额外的组成部分位于两个组成部分之间)。因此，术语“偶合(coupled to)”和“与偶合 (coupled with)”可同义使用。
因此，在X基团是噻唑以及Q基团是噁唑或噻唑的情况下，所涵盖的化合物可以具有按照式II的结构
其中，X是O或S，其中，R1和R2独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤素、 -OH、-NHC(O)烷基或-NHC(O)芳基。优选，在这种化合物中，R3是H或C1-C4烷基(可以是环状)，和/或，R7是H、烷基、环烷基、杂环-烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基或烷杂芳基。然而，最优选，所涵盖的化合物包括其中R1是烷基或环烷基(尤其是环丙基)、R2是烷基(尤其是甲基)的化合物，尤其是，其中，X是S，其中，R3是H。
例如，尤其优选的化合物具有式III或式IV的结构，其中，R3是H、甲基或卤素。
本文涵盖的某些化合物可以包括一个或多个不对称中心，因此，存在不同的对映体形式。应该认识到，本文明确包括所涵盖的化合物的所有对映体形式。类似地，在所涵盖的化合物显示出旋光性和/或具有立体异构体的情况下，本文包括所有的异构形式。此外，在双键显示Z形式、E形式(或顺式-、反式-)的情况下，本文包括这两种异构体。
更进一步，应该认识到，还可以用同位素标记按照本发明主题的化合物。合适的同位素的例子是2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、18F或36Cl。本发明主题的某些同位素标记的化合物，例如，结合了14C或3H的那些化合物，可以用于药物和/或底物组织分配试验。另一方面，用非放射性同位素(例如，2H或13C)取代，由于代谢稳定性更佳，例如，体内半衰期增加，或剂量要求降低，所以，可以提供某些治疗优势，并由此在一些情况下可以优选。
可以将所涵盖的化合物制备为可药用盐，尤其包括所涵盖的化合物可以提供的酸性或碱性基团的盐。例如，碱性的所涵盖的化合物可以与无机和有机酸形成多种盐。合适的酸可以提供药用阴离子，包括氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖二酸盐、糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、合氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐[1,1'-亚甲基双-(2-羟基-3- 萘酸酯)]阴离子。类似地，酸性化合物可以与各种可药用阳离子形成碱式盐，尤其合适的阳离子包括碱金属或碱土金属离子(例如，钠和钾阳离子)。
更进一步，还可以将按照本发明主题的化合物制备为前体药物，只要这种前体药物能够提高药物(或前体药物的代谢物)在靶器官或靶细胞处的浓度，则本文认为前体药物的所有已知的样式和类型适合于使用。例如，在所述化合物具有游离氨基、氨基、羟基、硫基或羧基的情况下，可以涵盖这样的基团，其可以被用于与药物共价结合并可以被释放的部分、从而使药物转化为前体药物。因此，前体药物尤其包括所涵盖的化合物与另一个可断裂的部分形成酯、酰胺或二硫键的那些前体药物。这种部分可以有助于药物的器官或细胞特异性递送。例如，可以使羧基衍生，形成可以包括醚、胺和/或羧基酰胺或烷基酯。可以使用半琥珀酸酯、磷酸酯、二甲基氨基乙酸酯和磷酰基氧基甲氧羰基，使游离羟基衍生，正如下列文献所列出的那样：D. Fleisher,R.Bong,B.H.Stewart,Advanced Drug Delivery40Reviews(1996)19, 115。还包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前体药物，羟基的碳酸酯前体药物和硫酸酯。羟基衍生为(酰氧基)甲基和(酰氧基)***，其中，酰基可以是烷基酯(任选被取代)，或还包括酰基是氨基酸酯(这种类型的前体药物描述在R.P. Robinson等人，J.药物化学(1996)39:p.10中)。
更进一步，还应该认识到，所涵盖的化合物可以在细胞中或胞外腔隙中代谢，并且这种代谢物可以显示出相同或不同的药理学效果。例如，可以使所涵盖的化合物磷酸化，并由此比母体化合物更有活性。另一方面，还原或糖基化可以影响所涵盖的化合物的生物利用率。因此，所涵盖的化合物不只是包括上述那些化合物，还包括其代谢物。
从另一个方面考虑，应该理解，所涵盖的化合物和组合物可以用于与 K-ras的失调和/或功能障碍有关的所有症状和/或病症，尤其是K-ras的突变体形式(尤其是G12D和/或G12V)。例如，所涵盖的症状和病症包括各种癌症，尤其是胰腺癌、结肠癌和非小细胞肺癌。
从又一个方面考虑，本发明主题涉及在细胞中调节(例如，抑制或降低)K-ras依赖性信号的各种化合物，和/或，直接或间接地影响(突变体)K-ras、 GTP结合以及效应子蛋白相互作用，由此妨碍信号转导。因此，示例性的化合物不但包括上述讨论的化合物，而且还包括具有一种或另一种有利性能的各种衍生物。
基于本发明人发现的所涵盖化合物的生物活性，通常包括的是，可以配制按照本发明主题的化合物，用于治疗与K-ras或突变体K-ras的失调和/或功能障碍有关的各种疾病。因此，在其它用途当中，本发明尤其涉及的是，含有所涵盖的化合物的药物组合物可以有效用于治疗或预防K-ras信号依赖性癌症，尤其是结肠癌、胰腺癌和非小细胞肺癌，其中，所涵盖的药物组合物包含治疗有效量的所涵盖的化合物(或其可药用盐、水合物或前体药物)和可药用载体。因此，应该认识到，所涵盖的化合物适合用于抑制K-ras信号，和/或，用于制备治疗与K-ras的突变有关的肿瘤疾病，尤其是K-ras具有G12D 或G12V突变。因此，本发明还涉及抑制突变体KRAS的方法，所述方法包括：使用有效抑制(突变体)K-ras浓度的所涵盖的化合物，使突变体KRAS与抑制 K-ras或突变体K-ras的方法接触的步骤。本文与K-ras活性结合使用的术语“抑制”是指在其它条件都相同的条件下，与没有接触抑制化合物的相同(突变体)K-ras的活性相比较，降低下游信号组成部分(例如，MEK、Erk，等等)的活化。
因此，尤其优选，所涵盖的化合物包括在与一或多种无毒和可药用载体一起配制的组合物中。将优选的药物组合物配制为口服的固体或液体形式，或肠胃外注射形式。由此，应该认识到，使用各种途径，包括口服、直肠、肠胃外、腹膜内、***或局部给药，可以给予人及其它动物的按照本发明主题的药物组合物。
例如，优选，用于注射的合适的药物组合物包括可药用无菌水或非水溶液剂、分散剂、乳剂或混悬剂，以及用于在使用之前重组为无菌注射溶液或分散体的无菌粉剂。合适的水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的例子包括：水、乙醇、多元醇(例如，丙三醇、丙二醇、聚乙二醇，等等)和其合适的混合物、油和注射有机酯(例如，油酸乙酯)。所涵盖的组合物还可以包含各种非活性的组分，例如，防腐剂、润湿剂、乳化剂和/或分散剂。通过包含抗菌剂和/或抗真菌剂(例如，对羟基苯甲酸酯、苯酚、山梨酸、氯丁醇，等等)，可以保证无菌效果。如果合适的话，可以包括渗透性活性剂(例如，糖、氯化钠，等等)。
另外，可以将所涵盖的组合物配制为口服固体剂型，并因此可以是胶囊剂、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在优选的固体剂型中，将所涵盖的化合物与至少一种可药用赋形剂或载体(例如，枸橼酸钠或磷酸氢钙)、填料或膨胀剂(例如，淀粉、乳糖、砂糖、葡萄糖、甘露糖醇或硅酸)粘结剂(例如，羧甲纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、砂糖，等等)、保湿剂(例如，丙三醇)、崩解剂(例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐或碳酸钠)、溶液阻滞剂(例如，石蜡)、吸收促进剂(例如，季胺化合物)、润湿剂(例如，鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯)、吸附剂(例如，高岭土或膨润土)和润滑剂(例如，滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基磺酸钠)混合。
相似类型的固体组合物也可以在软和硬填充的胶囊(使用乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇这样的载体，等等)中用作填料。片剂、糖锭、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以用包衣和壳制备，例如，肠溶衣及药物配制领域众所周知的其它包衣。可以进一步配制所涵盖的组合物，使得它们仅仅释放活性组分，或优选，在肠道的某一部分中释放，任选，以延缓方式释放。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物和石蜡。如果合适的话，所涵盖的化合物还可以是含有一或多种上述赋形剂的微囊密封的形式。
口服液体剂型包括可药用乳剂、液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除了活性化合物之外，液体剂型还可以包含本领域通常使用的惰性稀释剂(例如，水或其它溶剂、增溶剂)、乳化剂(例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺)、油(尤其是棉籽、落花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻油)、丙三醇、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯以及其混合物。除了惰性稀释剂以外，口服组合物还可以包含助剂，例如，润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
优选，直肠或***给药组合物是栓剂，其可以如下制备：将本发明的化合物与合适的无刺激性的赋形剂或载体混合，例如，可可脂、聚乙二醇或栓剂石蜡，其在室温下是固体，但在体温下是液体，因此可以在直肠或***腔中融化，并且释放活性化合物。还可以给予脂质体形式的按照本发明主题的化合物，可以是单层、寡层或多层。脂质体形式的所涵盖的组合物可以进一步含有稳定剂、防腐剂、赋形剂，等等。脂质体形式的优选的脂质包括天然以及合成形式的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)。在本领域，形成脂质体的方法是已知的。参见，例如，Prescott,Ed.,Methods in Cell Biology,Volume XIV, Academic Press,NewYork,N.Y.(1976),p.33et seq。
在按照本发明主题的药物组合物中，所涵盖的化合物的实际剂量水平可以不同，以便使所涵盖化合物的数量能够使具体患者、组合物和给药模式有效获得目标治疗响应。由此，所选择的剂量水平取决于各种因素，包括具体化合物的活性、给药途径、所治疗的病症的严重程度以及所治疗的患者的症状和先前的病史。然而，在本领域技术范围之内，化合物的起始剂量水平比获得目标治疗效果所要求的剂量水平低，并逐渐提高剂量，直到获得预期效果为止。通常，剂量水平为每天大约0.01mg/kg体重至大约0.1mg/kg体重，或大约0.1mg/kg体重至大约1mg/kg体重，或大约1mg/kg体重至大约10 mg/kg体重，或大约10mg/kg体重至大约50mg/kg体重。由此，当口服给予哺乳动物患者时，给药的单剂量单位典型地在0.1mg和1mg之间，在1mg和50 mg之间，在50mg和250mg之间，在250mg-1,000mg之间，在1,000mg和5,000 之间，或更高。如果需要的话，应该理解，为了给药，可以将有效日剂量分成多剂量，例如，每天两个至四个单独的剂量。
除非上下文另外规定，否则，本文列出的所有范围应该解释为包括它们的端点，开放的范围应该解释为包括商业上的实际值。类似地，应该认为所有列出的值包括中间值，除非上下文另外指明。在一些实施方案中，用于描述和主张本发明的实施方案的表达组分的量、性能(例如，浓度)、反应条件等等的数字，在有些情况下利用术语“大约”来修饰。相应地，在一些实施方案中，在说明书和附加权利要求中列出的数字参数是近似值，其可以根据具体实施方案所设法获得的目标性能而变化。在一些实施方案中，应该根据以有效数字所报道的数目，并通过使用通常的舍入方法，解释数字参数。尽管本发明的一些实施方案列出的数值范围和参数是近似值，但其是以尽可能精确地具体实施例列出的数值报道的。由于各个试验测定所存在的标准偏差，所以，本发明的一些实施方案提供的数值一定具有某些误差。
应该更进一步理解的是，所涵盖的药物组合物还可以包括其它药学活性化合物，尤其涵盖的其它药学活性化合物包括抗代谢和/或抗肿瘤剂和/或免疫活性剂，它们可以作用于细胞***、细胞程序死亡、T细胞识别、NK细胞活性、记忆细胞形式、检测点抑制和/或免疫刺激。当然，应该认识到，其它药学活性化合物可以包括在相同药物组合物中，或可以单独给予，本领域普通技术人员容易确定合适的共同给予其它药学活性化合物的计划和途径。
实施例
示例性的化合物
下列实施例目的是提供非限制性的制备各种中间体的常规方案，所述中间体随后可以用于制备按照本发明主题的化合物。基于下面的示例性方案，本领域普通技术人员将从类似的物质入手容易地制备类似的化合物。同样，生物活性提供的实施例列出了用于确定抑制活性和优先/选择性的***和方法。
中间体1
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (7.93g，59.45mmol)、二硫化碳(40mL)和氯乙酰氯(2.30g，20.38mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入3,4-二氢 -2(H)-喹啉酮(2.50g，16.99mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(50mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，用水(3x 50mL)洗涤，而后用四氢呋喃(2x 100 mL)和己烷(1x 200mL)洗涤。真空干燥固体，得到6-(2-氯乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(3.44g，90％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 10.47(bs,1H),7.83(s,1H),7.80(dd,1H,J＝8.8,1.6Hz),6.94(d,1H,J＝8.0Hz), 5.08(s,2H),2.95(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C11H10ClNO2的计算值∶223，实测值：224(M+1)+
中间体2
在氩气氛中，在密封管中，将6-(氯乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(1.00 g，4.47mmol)和硫脲(thiourea)(0.36g，4.69mmol)悬浮在无水乙醇(10mL)中。将密封管在120℃下微波30分钟。将该混合物用四氢呋喃(200mL)稀释，用 1N NaOH水溶液中和，而后用乙酸乙酯(2x 200mL)提取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.920g，73％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.27(s,1H),8.71(br s,2H),7.61(s, 1H),7.55(dd,1H,J＝8.8,2.0Hz),7.05(s,1H),6.91(d,1H,J＝8.4Hz),2.91(t,2H, J＝7.6Hz),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C12H11N3OS的计算值：245,实测值：246(M+1)+
中间体3
在密封管中，在氩气氛中，将5-Chloroacetyloxidole(2.00g，9.54mmol) 和硫脲(0.76g，10.02mmol)悬浮在无水乙醇(15mL)中。将密封管在120℃下微波35分钟。将该混合物用四氢呋喃(200mL)稀释，用1N NaOH水溶液中和，而后用乙酸乙酯(2x 200mL)提取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到5-(2- 氨基噻唑-4-基)二氢吲哚-2-酮(2.36g，92％)的浅棕色固体。1H NMR(400 MHz,DMSO-d):δ10.64(s,1H),8.95(bs,1H),7.62(s,1H),7.60(dd,1H,J＝8.4, 1.2Hz),7.06(s,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz)。MS(ESI):C11H10ClN3OS的计算值∶267，实测值：268(M+1)+
中间体4
制备∶在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝(6.30g，47.25mmol)、二硫化碳(35mL)和氯乙酰氯(1.83g，16.20 mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该混合物中分为几部分加入3,4- 苯并二氢香豆素(3,4-dihydrocoumarin)(2.00g，13.50mmol)。将该反应搅拌10 分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(50mL)，同时充分搅拌。过滤收集褐色沉淀，并用水充分洗涤。将粗品沉淀悬浮在***(10mL)中，并超声处理，再次过滤收集所得到的微细固体，真空干燥，得到6-(2-氯乙酰基)色满-2-酮(1.60g，53％)的米色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d):δ7.96(d,1H,J＝2.0Hz),7.90(dd,1H, J＝16.0,8.8Hz),7.21(d,1H,J＝8.0Hz),5.16(s,2H),3.08(t,2H,J＝7.2Hz), 2.84(t,2H,J＝7.2Hz)。MS(ESI):C11H9ClO3的计算值∶224，实测值：371(不稳定)。
中间体5
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (6.96g，52.19mmol)、二硫化碳(35mL)和氯乙酰氯(2.02g，17.89mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入2-羟基苯并咪唑(2.00g，14.91mmol)。将该反应混合物搅拌10分钟，而后回流2.5 小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(50 mL)，同时充分搅拌。过滤收集褐色沉淀，并用水充分洗涤。将沉淀在***(10mL)中超声处理，并再次过滤收集所得到的微细固体。真空干燥固体，得到5-(2-氯乙酰基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(2.92g，93％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ11.12(s,1H),10.96(s,1H),7.67(dd,1H,J＝8.8, 2.0Hz),7.49(d,1H,J＝2.0Hz),7.03(d,1H,J＝8.4Hz),5.13(s,2H)。MS(ESI): C9H7ClN2O2的计算值∶210，实测值：390(不稳定)。
中间体6
在密封管中，在氩气氛中，将5-(2-氯乙酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(2.00g，9.50mmol)和硫脲(0.76g，9.97mmol)悬浮在无水乙醇(15mL)中。将密封管在120℃下微波40分钟。将该混合物用四氢呋喃(200mL)稀释，用 1N NaOH水溶液中和，而后用乙酸乙酯(2x 200mL)提取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到5-(2-氨基噻唑-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.81g，22％) 的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.67(s,1H),10.64(s,1H), 7.40(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.37(s,1H),7.01(bs,2H),6.88(d,1H,d,J＝8.0Hz), 6.80(s,1H)。MS(ESI):C11H9N3OS的计算值∶231，实测值：232(M+1)+
中间体7
在密封管中，在氩气氛中，将6-(2-氯乙酰基)色满-2-酮(1.30g，5.79mmol) 和硫脲(0.46g，6.08mmol)悬浮在无水乙醇(12mL)中。将密封管在120℃下微波35分钟。将该混合物用四氢呋喃(200mL)稀释，用1N NaOH水溶液中和，而后用乙酸乙酯(2x 200mL)提取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到3-(5-(2- 氨基噻唑-4-基)-2-羟基苯基)丙酸乙酯(1.50g，89％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ9.50(s,1H),7.51(d,1H,J＝2.0Hz),7.44(dd,1H,J ＝8.2,2.0Hz),6.96(bs,2H),6.74(d,1H,J＝8.0Hz),6.70(s,1H),4.03(q,2H, J＝7.2Hz),2.78(t,2H,J＝7.8Hz),2.55(t,2H,J＝7.8Hz),1.51(t,3H,J＝7.0Hz)。 MS(ESI):C14H16N2O3S的计算值：292，实测值：293(M+1)+
中间体8
在密封管中，在氩气氛中，将N-[4-(2-氯乙酰基)苯基]苯甲酰胺(0.241g，0.882mmol)和硫脲(0.071g，0.926mmol)悬浮在无水乙醇(5mL)中。将密封管在120℃下微波30分钟。将该混合物用四氢呋喃(50mL)稀释，用1N NaOH 水溶液中和，而后用乙酸乙酯(4x50mL)提取。将合并的有机层用无水 Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(4-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)苯甲酰胺(0.08g，33％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.28(s,1H),7.95(m,2H),7.78(s,4H), 7.60-7.50(m,3H),7.02(s,2H),6.93(s,1H)。MS(ESI):C16H13N3OS的计算值： 295，实测值：296(M+1)+
中间体9
在密封管中，在氩气氛中，将6-(2-氯乙酰基)色满-2-酮(0.283g，1.26mmol) 和硫脲(0.101g，1.32mmol)溶于无水乙睛(10mL)中。将密封管在80℃下微波30分钟。用三甲胺(1mL)淬灭该反应，用乙酸乙酯(2x 200mL)提取，并用饱和NaHCO3(2x 50mL)洗涤。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2-氨基噻唑 -4-基)色满-2-酮(0.26g，84％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ7.10(d,1H,J＝2.0Hz),7.67(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.04(m,2H),6.96(s,1H), 3.01(t,2H,J＝7.6Hz),2.80(t,2H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C12H10N2O2S的计算值：246，实测值：247(M+1)+
中间体10
在密封管中，在氩气氛中，将4-氯乙酰基乙酰苯胺(1.00g，4.72mmol) 和硫脲(0.378g，4.96mmol)悬浮在无水乙醇(8mL)中。将密封管在120℃下微波30分钟。将密封管在120℃下微波40分钟。将该混合物用四氢呋喃(200 mL)稀释，用1N NaOH水溶液中和，而后用乙酸乙酯(2x 200mL)提取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(4-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)乙酰胺(1.05g，95％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ9.95(s,1H),7.70(d,2H,J＝8.4 Hz),7.56(d,2H,J＝8.4Hz),7.00(s,2H),6.86(s,1H),2.04(s,3H)。MS(ESI): C11H11N3OS的计算值：233，实测值：234(M+1)+
中间体11
在密封管中，在氩气氛中，将6-(2-氯乙酰基)-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-2- 酮(0.50g，2.10mmol)和硫脲(0.17g，2.21mmol)悬浮在无水乙醇(4mL)中。将密封管在120℃下微波35分钟。将该混合物用四氢呋喃(100mL)稀释，用三乙胺(2mL)中和，并用乙酸乙酯(2x200mL)提取，而后用饱和碳酸氢钠(2 x 100mL)洗涤。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2-氨基噻唑-4-基)-1-甲基-3,4- 二氢喹啉-2(1H)-酮(0.50g，92％)的vanilla固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d): δ7.67(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.64(d,1H,J＝1.6Hz),7.06(d,1H,J＝8.4Hz), 7.02(s,2H),6.91(s,1H),3.26(s,3H),2.88(t,2H,J＝6.4Hz),2.55(t,2H,J＝6.8 Hz)。MS(ESI):C13H13N3OS的计算值：259，实测值：260(M+1)+
中间体12
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (5.79g，43.42mmol)、二硫化碳(40mL)和氯乙酰氯(1.68g，14.89mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入4,5-二氢 -1H-苯并[b]氮杂环庚三烯-2(3H)-酮(2.00g，12.41mmol)。将该混合物搅拌10 分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(50mL)，同时充分搅拌。过滤收集褐色沉淀，并用水充分洗涤。将沉淀在***(10mL)中超声处理，并再次过滤收集所得到的微细固体。真空干燥固体，得到7-(2-氯乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂环庚三烯-2-酮(2.68g，91％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ9.90(s,1H), 7.90(d,1H,J＝2.0Hz),7.85(dd,1H,J＝8.0,2.0Hz),7.07(d,1H,J＝8.4Hz), 2.76(t,2H,J＝7.2Hz),2.20(m,2H),2.16(m,2H)。MS(ESI):C12H12ClNO2的计算值：237，实测值：238(M+1)+
中间体13
在密封管中，在氩气氛中，将7-(2-氯乙酰基)-4,5-二氢-1H-苯并[b]氮杂环庚三烯-2(3H)-酮(1.50g，6.31mmol)和硫脲(0.504g，6.63mmol)悬浮在无水乙醇(12mL)中。将密封管在120℃下微波40分钟。将该混合物用四氢呋喃(200mL)稀释，用三乙胺(5mL)中和，并用乙酸乙酯(2x 200mL)提取，而后用饱和碳酸氢钠(2x 200mL)洗涤。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到7-(2-氨基噻唑-4-基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂环庚三烯-2-酮(1.25g，76％)的褐色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d):δ9.52(s,1H),7.67(d,1H,J＝2.0Hz), 7.63(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.02(s,2H),6.93(m,2H),2.70(t,2H,J＝7.2Hz), 2.13(m,4H)。MS(ESI):C13H13N3OS的计算值：259，实测值：260(M+1)+
中间体14
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (5.33g，39.95mmol)、二硫化碳(40mL)和氯乙酰氯(1.55g，13.70mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入1-乙酰基-1,2,3,4-四氢喹啉(2.00g，11.41mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(50mL)，同时充分搅拌。过滤收集褐色沉淀，并用水充分洗涤。将沉淀在***(10mL)中超声处理，并再次过滤收集所得到的微细固体。真空干燥固体，得到1-(1-乙酰基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-2-氯代乙烷-1-酮(1.79g，62％) 的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ7.76(m,3H),5.14(s,2H),3.72(t, 2H,J＝6.4Hz),2.78(t,2H,J＝6.8Hz),2.23(s,3H),1.89(p,2H,J＝6.8Hz)。 MS(ESI):C13H14ClNO2的计算值：251，实测值：252(M+1)+
中间体15
在密封管中，在氩气氛中，将1-(1-乙酰基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-2-氯代乙酮(1.00g，3.97mmol)和硫脲(0.318g，4.17mmol)悬浮在无水乙醇(10mL) 中。将密封管在120℃下微波35分钟。将该混合物用四氢呋喃(200mL)稀释，用三乙胺(3mL)中和，而后用乙酸乙酯(2x 200mL)提取，而后用饱和碳酸氢钠(2x 200mL)洗涤。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在1:3的二氯甲烷/***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到1-(6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙烷-1-酮(0.47g，43％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ7.58(m,2H),7.95(bs,1H,7.02(s,2H),6.93(s,1H), 3.68(t,2H,J＝6.4Hz),2.72(t,2H,J＝6.8Hz),2.17(s,3H),1.87(p,2H,J＝6.8 Hz)。MS(ESI):C14H15N3OS的计算值：273，实测值：274(M+1)+
中间体16
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (3.15g，23.62mmol)、二硫化碳(25mL)和氯乙酰氯(0.92g，8.10mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入3,4-二氢 -2(H)-喹啉酮(1.00g，6.75mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(25mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，用水(3x 50mL)洗涤，而后用四氢呋喃(2x 100 mL)和己烷(1x 200mL)洗涤。真空干燥固体，得到6-(2-氯乙酰基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(1.42g，94％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 9.50(s,1H),7.78(dd,1H,J＝8.8,1.6Hz),7.76(s,1H),7.04(s,1H),6.85(d,1H, J＝8.0Hz),5.04(s,2H),4.38(s,2H)。MS(ESI):C10H9ClN2O2的计算值：224，实测值：225(M+1)+
中间体17
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (1.35g，10.10mmol)、二硫化碳(15mL)和氯乙酰氯(0.39g，3.46mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入3,4-二氢 -2(H)-喹啉酮(0.50g，3.46mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(10mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，用水(3x 50mL)洗涤，而后用四氢呋喃(2x 100 mL)和己烷(1x 200mL)洗涤。真空干燥固体，得到8-(2-氯乙酰基)-1,2,5,6-四氢-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-4-酮(0.71g，98％)的米色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ7.74(s,2H),5.07(s,2H),3.99(t,2H,J＝8.8Hz),3.20(t,2H,J＝8.8 Hz),2.98(t,2H,J＝7.6Hz),2.60(t,2H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C13H12ClNO2的计算值：249，实测值：250(M+1)+
中间体18
在氩气氛中，将6-(2-氯乙酰基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.50g，2.23 mmol)、硫脲(0.178g，2.34mmol)和三乙胺(0.46mL，3.34mmol)悬浮在无水乙醇(12mL)中。将密封管在120℃下微波35分钟。过滤收集褐色沉淀，并用冷的乙醇洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.529g，96％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ9.06(s,1H),7.53(d,1H,J＝8.4Hz),7.50(s,1H),6.97(s,2H),6.81(s,1H),6.77(s,1H),6.73(d,1H,J＝8.4Hz),4.33(s,2H)。 MS(ESI):C11H10N4OS的计算值：246，实测值：247(M+1)+
中间体19
在密封管中，在氩气氛中，将8-(2-氯乙酰基)-5,6-二氢-1H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-4(2H)-酮(0.30g，1.20mmol)、硫脲(0.10g，1.26mmol)和三乙胺(0.25mL， 1.80mmol)悬浮在无水乙醇(12mL)中。将密封管在120℃下微波35分钟。过滤收集褐色沉淀，并用冷的乙醇洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到8-(2-氨基噻唑-4-基)-1,2,5,6-四氢-4H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉-4-酮 (0.296g，91％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ7.51(d,1H,J＝8.4 Hz),6.96(s,2H),6.82(s,1H),3.95(t,2H,J＝8.8Hz),3.14(t,2H,J＝8.8Hz),2.92(t, 2H,J＝7.6Hz),2.55(t,2H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C14H13N3OS的计算值：271，实测值：272(M+1)+
中间体20
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (7.10g，53.24mmol)、二硫化碳(60mL)和氯乙酰氯(2.06g，18.25mmol)。将该混合物搅拌15分钟。用5分钟向该搅拌混合物中分为几部分加入苯酰替苯胺(3.00g，15.21mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(100mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，并用水(3x 100ml)洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(4-(2-氯乙酰基)苯基)苯甲酰胺(3.75g，90％) 的灰色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d):δ10.60(s,1H),7.99(m,6H), 7.62(m,1H),7.56(m,2H),5.15(s,2H)。MS(ESI):C15H12ClNO2的计算值： 273，实测值：274(M+1)+
中间体21
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (3.17g，23.78mmol)、二硫化碳(20mL)和2-氯丁酰氯(85％tech，1.53g，10.87 mmol)。将该混合物搅拌15分钟。向该搅拌混合物中一次性加入3,4-二氢-2(H)-喹啉酮(1.00g，6.79mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(30mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，并用水(3x 50ml)洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2-氯代丁酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.81g， 48％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.30(s,1H),7.47(s,1H), 7.44(dd,1H,J＝8.8,1.6Hz),6.95(d,1H,J＝8.0Hz),2.97(t,1H,J＝7.2Hz),2.91(t, 2H,J＝7.6Hz),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,3H),2.45(t,2H,J＝7.2Hz)。 MS(ESI):C13H14ClNO2的计算值：251，实测值：252(M+1)+
中间体22
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (3.17g，23.78mmol)、二硫化碳(20mL)和2-氯丙酰基氯(1.04g，8.15mmol)。将该混合物搅拌15分钟。向该搅拌混合物中一次性加入3,4-二氢-2(H)-喹啉酮 (1.00g，6.79mmol)。将该混合物搅拌10分钟，而后回流2.5小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(30mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，并用水(3x 50ml)洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2-氯丙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(1.47g，91％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.48(s,1H),7.89-7.84(m,2H), 6.96(d,1H,J＝8.4Hz),5.70(q,1H,J＝6.8Hz),2.96(t,2H,J＝7.6Hz),2.50(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),1.59(2,3H,J＝6.8Hz)。MS(ESI):C12H12ClNO2的计算值：237，实测值：238(M+1)+
中间体23
在密封管中，在氩气氛中，将6-(2-氯丙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(1.00 g，4.21mmol)、硫脲(0.35g，4.63mmol)和三乙胺(0.88mL，6.31mmol)悬浮在无水乙醇(12mL)中。将密封管在120℃下微波45分钟。过滤收集褐色沉淀，并用冷的乙醇洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2- 氨基-5-甲基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.92g，84％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.11(s,1H),7.37(s,1H),7.32(dd,1H,J＝8.4,2.0 Hz),6.84(d,1H,J＝8.0Hz),6.70(s,2H),2.89(t,2H,J＝7.2Hz),2.46(t,2H,J＝7.6 Hz),2.30(s,3H)。MS(ESI):C13H13N3OS的计算值：259，实测值：260(M+1)+
中间体24
在密封管中，在氩气氛中，将6-(2-氯丁酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.80 g，3.18mmol)、硫脲(0.25g，3.34mmol)和三乙胺(0.66mL，4.77mmol)悬浮在无水乙醇(12mL)中。将密封管在120℃下微波45分钟。过滤收集褐色沉淀，并用冷的乙醇洗涤。将残余物干燥，加载到硅胶上，通过硅胶快速色谱纯化，使用CH2Cl2:MeOH(95:5)，得到6-(2-氨基-5-乙基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.27g，29％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 10.11(s,1H),7.30(s,1H),7.26(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),6.84(d,1H,J＝8.0Hz), 6.72(s,2H),2.89(m,2H),2.71(q,2H,J＝8.0Hz),2.46(t,2H,J＝8.4Hz),1.16(t,3H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C14H15N3OS的计算值：273，实测值：274(M+1)+
中间体25
在烧瓶中，在氩气氛中，将6-(氯乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.300g，1.34mmol)和脲(1.61g，26.82mmol)溶于无水乙睛(30mL)中。将该混合物回流15天。冷却后，滤出沉淀，用8:2的二氯甲烷/异丙醇(3x 20mL)，饱和 NaHCO3(2x 50mL)提取滤液。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到6-(2- 氨基噁唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.058g，19％)的桃色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.10(s,1H),7.74(s,1H),7.43(s,1H),7.39(dd,1H, J＝8.0,1.6Hz),6.82(d,1H,J＝8.4Hz),6.65(s,2H),2.87(t,2H,J＝7.6Hz), 2.45(部分掩蔽在d-DMSO下,t,2H,J＝7.2Hz)。MS(ESI):C12H11N3O2的计算值：229，实测值：230(M+1)+
中间体26
在密封管中，在氩气氛中，将6-(氯乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.500 g，2.24mmol)和N-乙酰基胍(0.678g，6.71mmol)悬浮在无水乙睛(15mL)中。将密封管在100℃下微波120分钟。滤出沉淀，并将滤液残余物通过硅胶快速色谱纯化，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到6-(1-乙酰基-2-氨基-1H-咪唑-4- 基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.044g，7％)的黄色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ11.52(s,1H),11.19(s,1H),10.04(s,1H),8.71(br s,2H),7.51(s,1H), 7.46(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.12(d,1H,J＝1.6Hz),6.79(d,1H,J＝8.0Hz), 2.87(m,2H),2.45(m,2H),2.06(s,3H)。MS(ESI):C14H14N4O2的计算值：270，实测值：271(M+1)+
中间体27
在冰浴中，向配备有冷凝器和氩气入口的500mL圆底烧瓶中加入氯化铝 (19.02g，142.69mmol)、二硫化碳(100mL)和二氯乙酰氯(7.21g，48.92 mmol)。将该混合物搅拌15分钟。向该搅拌混合物中一次性加入3,4-二氢 -2(H)-喹啉酮(6.00g，40.77mmol)。将该混合物搅拌15分钟，而后回流3小时。冷却该反应混合物，并倾析出溶剂。然后，慢慢地加入冰和冷水(250mL)，同时充分搅拌。滤出米色沉淀，并用水(3x 100ml)洗涤。通过在***中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到6-(2,2-二氯乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(9.54 g，91％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.56(bs,1H),7.93(bs, 1H),7.90(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.82(s,1H),6.98(d,1H,J＝8.4Hz),2.97(m, 2H),2.53(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C11H9Cl2NO2的计算值： 258，实测值：258(M)+
中间体28
在密封条件下，在氩气氛中，将6-(2,2-二氯乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)- 酮(1.00g，3.87mmol)和硫脲(0.310g，4.07mmol)悬浮在无水乙睛(12mL)中。将密封管在45℃下加热4天。过滤收集黄色沉淀，并用冷的乙醇洗涤。真空干燥固体，得到6-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮盐酸盐(0.90 g，74％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.22(s,1H),7.61(s,1H), 6.89(d,1H,J＝8.4Hz),6.30(bs,2H),2.91(m,2H),2.47(部分掩蔽在d-DMSO下, m,2H)。MS(ESI):C12H11Cl2N3OS的计算值：316，实测值：280(M+1-HCl)+
示例性的化合物
实施例1
步骤1∶制备呋喃-2-基-乙酰氯∶在0℃，将草酰氯(10.5mL，124.22mmol) 逐滴加入到呋喃-2-基-乙酸(0.500g，1.77mmol)的二氯甲烷(40mL)溶液中，而后加入DMF(1滴)，并将该混合物搅拌过夜(15小时)。真空浓缩该反应混合物，残余物不用进一步纯化，直接使用。
步骤2∶将6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮溶于1:1的乙腈/吡啶混合物(10mL/10mL)中，并加入过量的三乙胺(4mL)。将该混合物在冰浴中冷却，并慢慢地加入呋喃-2-基-乙酰氯的乙腈(5mL)溶液。然后，将该混合物在室温下搅拌过夜(15小时)。用水(20mL)淬灭该反应，并浓缩至最小量。用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 400mL)混合物提取粗品，用饱和NH4Cl(2x 400 mL)洗涤，并用无水Na2SO4干燥。然后，通过硅胶快速色谱浓缩残余物，使用CH2Cl2/MeOH(95:5)。然后，将固体在最低量的二氯甲烷中超声处理，过滤收集沉淀的固体，得到2-(呋喃-2-基)-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基) 噻唑-2-基)乙酰胺(0.423g，68％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 12.46(bs,1H),10.18(s,1H),7.70(s,1H),7.66(dd,1H,J＝8.8,1.6Hz),7.58(bs, 1H),7.46(bs,1H),6.88(d,1H,J＝8.8Hz),6.41(m,1H),6.31(m,1H),3.88(s, 2H),2.92(m,2H),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C18H15N3O3S 的计算值：353，实测值：354(M+1)+
实施例2
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.050g，0.203mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.035g，0.224mmol)和吡啶(0.06 mL，0.713mmol)的乙腈(2mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.29mL，0.489mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集固体，用冷的二氯甲烷洗涤，得到2,4-二甲基 -N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.045g，58％) 的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.58(bs,1H),10.18(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.45(bs,1H),6.88(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(m,2H),2.66(s,3H),2.61(s,3H),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。 MS(ESI):C18H16N4O2S2的计算值：384，实测值：385(M+1)+
实施例3
在密封管中，向5-(2-氨基噻唑-4-基)二氢吲哚-2-酮(0.050g，0.203 mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.035g，0.224mmol)和吡啶(0.06mL， 0.713mmol)的乙腈(2mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.29mL，0.489mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集固体，用冷的二氯甲烷洗涤，得到2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代二氢吲哚-5-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.045g，58％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.53(bs 1H),10.48(s,1H),7.77(m,2H),7.48(s, 1H),6.86(d,1H,J＝8.8Hz),3.54(s,2H),2.67(s,3H),2.61(s,3H)。MS(ESI): C17H14N4O2S2的计算值：370，实测值：371(M+1)+
实施例4
在密封管中，向5-(2-氨基噻唑-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(0.200 g，0.861mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.149g，0.947mmol)和吡啶(0.31 mL，3.872mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，1.790mL，3.012mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天。冷却后，用水(50mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 50mL) 提取，而后用饱和NaHCO3(200mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水 Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)噻唑-2-基)噻唑 -5-甲酰胺(0.035g，11％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.55(bs, 1H),10.76(s,1H),10.70(s,1H),7.51(m,3H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),2.67(s,3H), 2.61(s,3H)。MS(ESI):C16H13N5O2S2的计算值：371，实测值：372(M+1)+
实施例5
在密封管中，向N-(4-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)苯甲酰胺(0.041g，0.138 mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.024g，0.152mmol)和吡啶(0.01mL， 0.623mmol)的乙腈(1.5mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.29mL，0.485mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x25mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(4-(4- 苯基酰胺基苯基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺(0.029g，48％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.34(s,1H),7.96(d,2H,J＝7.2Hz), 7.89(m,4H),7.57(m,4H),2.67(s,3H),2.62(s,3H)。MS(ESI):C22H18N4O2S2的计算值：434，实测值：435(M+1)+
实施例6
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)色满-2-酮(0.100g，0.406mmol)、 2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.070g，0.447mmol)和吡啶(0.15mL，1.831mmol) 的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.95 mL，1.421mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持5天。冷却后，用水(50mL) 淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 50mL)提取，而后用饱和 NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在1:3的二氯甲烷/***混合物中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到 2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代色满-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.106g，67％) 的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.59(bs,1H),7.86(d,1H,J＝1.6 Hz),7.82(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.64(s,1H),7.12(d,1H,J＝8.4Hz),3.05(t,2H, J＝7.2Hz),2.83(t,2H,J＝7.2Hz),2.68(s,3H),2.61(s,3H)。MS(ESI): C18H15N3O3S2的计算值：385，实测值：386(M+1)+
实施例7
在密封管中，向N-(4-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)乙酰胺(0.200g，0.857 mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.184g，0.943mmol)和吡啶(0.31mL， 3.862mmol)的乙腈(8mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，1.79mL，3.001mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持5天。冷却后，用水(100mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x100mL)提取，而后用饱和NaHCO3(200mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到 N-(4-(4-乙酰胺基苯基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺(0.141g，44％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.02(s,1H),7.84(d,2H,J＝8.4Hz), 7.64(d,2H,J＝8.4Hz),7.54(s,1H),2.67(s,3H),2.61(s,3H),2.06(s,3H)。 MS(ESI):C17H16N4O2S2的计算值：372，实测值：373(M+1)+
实施例8
在密封管中，向3-(5-(2-氨基噻唑-4-基)-2-羟基苯基)丙酸乙酯(0.100g，0.342mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.059g，0.376mmol)和吡啶(0.12 mL，1.541mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.71mL，1.201mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持5天。冷却后，用水(50mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 50mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在1:3的二氯甲烷/***混合物中沉淀并过滤，将残余物纯化，高真空下干燥之后，得到3-(5-(2-(2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺基)噻唑-4-基)-2-((羟基(丙基)磷酰基)氧基)苯基)丙酸乙酯(0.028g，15％)的橙色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ7.82-7.10(m,6H),4.05(q,2H,J＝7.2Hz), 2.89(m,2H),2.67(s,3H),2.61(s,3H),1.75-1.30(m,6H),1.16(t,3H,J＝7.2Hz), 0.96(t,3H,J＝7.2Hz)。MS(ESI):C23H28N3O6PS2的计算值：537，实测值： 538(M+1)+
实施例9
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-环丙基-1,3-噻唑甲酸(0.076g，0.448mmol)和吡啶(0.15 mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到2-环丙基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.111g， 69％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.9(bs,1H),10.19(s,1H),8.65(s,1H),7.75(s,1H),7.70(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.51(s,1H),6.89(1H,d, J＝8.4Hz),2.93(t,2H,J＝6.8Hz),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),2.07(s, 1H),1.19(m,2H),1.08(m,2H)。MS(ESI):C19H16N4O2S2的计算值：396，实测值：397(M+1)+
实施例10
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-苯基噻唑-5-甲酸(0.092g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL， 1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到N-(4-(2-氧代 -1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2-苯基噻唑-5-甲酰胺(0.156g，88％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ13.10(bs,1H),10.20(s,1H),8.93(s, 1H),8.05(m,2H),7.77(s,1H),7.72(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.57(m,4H),6.90(d, 1H,J＝8.4Hz),2.94(t,2H,J＝6.8Hz),2.50(掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C22H16N4O2S2的计算值：432，实测值：433(M+1)+
实施例11
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-氰基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.069g，0.448mmol)和吡啶(0.15 mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到2-氰基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.073g， 47％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ13.43(bs,1H),10.21(s,1H),9.03(s,1H),7.75(s,1H),7.71(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.59(s,1H),6.91(d,1H, J＝8.4Hz),2.94(t,2H,J＝6.8Hz),2.50(掩蔽在d-DMSO下,m,2H)..MS(ESI): C17H11N5O2S2的计算值：381，实测值：382(M+1)+
实施例12
在密封管中，向1-(6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酮(0.100g，0.366mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.063g，0.402mmol)和吡啶 (0.13mL，1.65mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.76mL，1.281mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到N-(4-(1- 乙酰基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺(0.043g， 29％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.58(bs,1H),7.75(s,1H), 7.70(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.61(bs,2H),3.70(t,2H,J＝6.4Hz),2.77(t,2H, J＝6.4Hz),2.68(s,3H),2.61(s,3H),2.20(s,3H0,1.90(p,2H,J＝6.4Hz)。 MS(ESI):C20H20N4O2S2的计算值：412，实测值：413(M+1)+
实施例13
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-1-甲基-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.386mmol)、2-环丙基-1,3-噻唑甲酸(0.067g，0.424mmol)和吡啶 (0.14mL，1.742mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.80mL，1.352mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天。冷却后，用水(100mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 100 mL)提取，而后用饱和NaHCO3(200mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水 Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在1:3的二氯甲烷/***混合物中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到2,4-二甲基-N-(4-(1-甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基) 噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.059g，39％)的米色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ12.57(bs,1H),7.82(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.79(s,1H),7.56(s,1H), 7.15(d,1H,J＝8.4Hz),3.28(s,3H),2.92(t,2H,J＝6.4Hz),2.67(s,3H),2.62(s, 3H),2.58(t,2H,J＝6.4Hz)。MS(ESI):C19H18N4O2S2的计算值：398，实测值： 399(M+1)+
实施例14
在密封管中，向7-(2-氨基噻唑-4-基)-4,5-二氢-1H-苯并[b]氮杂环庚三烯 -2(3H)-酮(0.100g，0.386mmol)、2-环丙基-1,3-噻唑甲酸(0.067g，0.424 mmol)和吡啶(0.14mL，1.742mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.80mL，1.352mmol)。将密封管加热至 48.5℃，保持4天。冷却后，用水(100mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 100mL)提取，而后用饱和NaHCO3(200mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在1:3的二氯甲烷/***混合物中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂环庚三烯-7-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.060g，39％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.59(bs,1H),9.59(s,1H),7.82(s, 1H),7.76(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.59(s,1H),7.01(d,1H,J＝8.4Hz),2.73(t,2H, J＝6.4Hz),2.67(s,3H),2.61(s,3H),2.16(m,4H)。MS(ESI):C19H18N4O2S2的计算值：398，实测值：399(M+1)+
实施例15
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、5-噻唑甲酸(0.058g，0.448mmol)和吡啶(0.15ml，1.832mmol) 的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85 mL，1.431mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉 -6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.132g，91％)的米色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ13.01(bs,1H),10.19(s,1H),9.38(s,1H),8.93(s,1H),7.75(s,1H), 7.71(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.54(s,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz),2.93(m,2H), 2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C16H12N4O2S2的计算值： 356，实测值：357(M+1)+
实施例16
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、噁唑-5-甲酸(0.051g，0.448mmol)和吡啶(0.15ml，1.832mmol) 的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85 mL，1.431mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉 -6-基)噻唑-2-基)噁唑-5-甲酰胺(0.121g，87％)的米色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ13.03(bs,1H),10.18(s,1H),8.72(s,1H),8.29(s,1H),7.75(s,1H), 7.71(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.56(s,1H),6.90(d,1H,J＝8.4Hz),2.93(m,2H), 2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C16H12N4O3S的计算值：340，实测值：341(M+1)+
实施例17
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、1H-咪唑-4-甲酸(0.050g，0.448mmol)和吡啶(0.15ml，1.832 mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 25mL) 提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(0.013 g，10％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.73(bs,1H),11.38(bs, 1H),10.14(s,1H),8.04(s,1H),7.85(s,1H),7.72(s,1H),7.67(dd,1H,J＝8.4,1.6 Hz),7.44(s,1H),6.85(d,1H,J＝8.4Hz),2.90(m,2H),2.45(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C16H13N5O2S的计算值：339，实测值： 340(M+1)+
实施例18
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、1,2,4-***-3-甲酸(0.051g，0.448mmol)和吡啶(0.15ml，1.832 mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4- 四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-4H-1,2,4-***-3-甲酰胺(0.099g，71％)的绿色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.35(bs,1H),10.17(s,1H),8.74(s,1H),7.76(s,1H),7.71(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.56(s,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(m,2H),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C15H12N6O2S的计算值：340，实测值：341(M+1)+
实施例19
步骤1∶制备1H-四唑酰氯∶在0℃，将亚硫酰氯(0.74mL，10.191mmol) 逐滴加入到1H-四唑-5-甲酸(0.069g，0.612mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液中，而后加入DMF(1滴)，并将该混合物搅拌过夜(15小时)。真空浓缩该反应混合物，残余物不用进一步纯化，直接使用。
步骤2∶在冰浴中，将6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的吡啶(2mL)溶液快速加入到酰氯中。将该混合物剧烈搅拌10分钟，而后在室温下搅拌过夜(15小时)。用水(20mL)淬灭该反应，并浓缩至最小量。用8:2的二氯甲烷/异丙醇(3x 20mL)混合物提取该粗品混合物，用饱和NaHCO3(2x 20 mL)洗涤，并用无水Na2SO4干燥。通过在最低量的二氯甲烷中沉淀，将浓缩的残余物纯化，并过滤，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2- 基)-1H-四唑-5-甲酰胺(0.065g，47％)的灰绿色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ10.21(s,1H),8.11(bs,1H),7.61(s,1H),7.55(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz), 6.97(s,1H),7.56(s,1H),6.88(d,1H,J＝8.4Hz),2.90(m,2H),2.47(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C14H11N7O2S的计算值：341，实测值：398(不稳定,M+56)+
实施例20
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-环丙基-1,3-噻唑甲酸(0.079g，0.469mmol)和吡啶(0.15ml， 1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至48.7℃，保持7天。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 25mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在最小量的1:1的二氯甲烷/***混合物中沉淀，将该粗品混合物纯化。过滤收集所获得的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到4-环丙基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.129g， 80％)的绿色结晶固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.76(bs,1H),10.20(s, 1H),9.07(s,1H),7.74(s,1H),7.70(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.51(bs,1H),6.89(d, 1H,J＝8.4Hz),2.93(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C19H16N4O2S2的计算值：396，实测值：397(M+1)+
实施例21
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-(三氟甲基)-1,3-噻唑-5-甲酸(0.088g，0.448mmol)和吡啶 (0.15ml，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至48.7℃，保持7天。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 25mL) 提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水 Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在最小量的二氯甲烷中沉淀，将该粗品混合物纯化。过滤收集所获得的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到N-(4-(2- 氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-甲酰胺(0.155g， 90％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ13.35(bs,1H),10.20(s,1H), 9.36(s,1H),7.73(s,1H),7.68(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.59(bs,1H),6.89(d,1H, J＝8.4Hz),2.93(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C17H11F3N4O2S2的计算值：424，实测值：425(M+1)+
实施例22
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.075g，0.306mmol)、4-乙基-1,3-噻唑甲酸(0.055g，0.351mmol)和吡啶(0.11ml， 1.381mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.64mL，1.072mmol)。将密封管加热至50℃，保持7天。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 25mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在最小量的二氯甲烷中沉淀，将该粗品混合物纯化。过滤收集所获得的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到4-乙基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.090g，76％)的类白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.74(bs,1H),10.19(s,1H),9.18(s,1H), 7.74(s,1H),7.71(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.52(bs,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz), 3.08(q,2H,J＝7.2Hz),2.93(t,2H,J＝7.2Hz),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m, 2H),1.25(t,3H,J＝7.2Hz)。MS(ESI):C18H16N4O2S2的计算值：384，实测值：385(M+1)+
实施例23
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.100 g，0.406mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.073g，0.467mmol)和吡啶 (0.15ml，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1421mmol)。将密封管加热至50℃，保持5天。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 25mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过在最小量的二氯甲烷中沉淀，将该粗品混合物纯化。过滤收集所获得的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到2,4-二甲基 -N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹唑啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.129g， 82％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ9.15(s,1H),7.66(dd,1H, J＝8.4,1.6Hz),7.64(s,1H),7.44(s,1H),6.86(bs,1H),6.81(d,1H,J＝8.4Hz), 4.37(s,2H),2.67(s,3H),2.61(s,3H)。MS(ESI):C17H15N5O2S2的计算值：385，实测值：386(M+1)+
实施例24
在密封管中，向8-(2-氨基噻唑-4-基)-5,6-二氢-1H-吡咯并[3,2,1-ij]喹啉 -4(2H)-酮(0.075g，0.276mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.050g，0.318 mmol)和吡啶(0.10mL，1.121mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.58mL，1.241mmol)。将密封管加热至 50℃，保持5天。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/ 异丙醇(2x 25mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。过滤收集所获得的固体，并用冷的二氯甲烷洗涤，得到2,4-二甲基-N-(4-(4-氧代-1,2,5,6-四氢-4H-吡咯并 [3,2,1-ij]喹啉-8-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.089g，79％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.50(bs,1H),7.64(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.49(s, 1H),3.97(t,2H,J＝8.8Hz),3.18(t,2H,J＝8.8Hz),2.97(t,2H,J＝7.6Hz),2.67(s, 3H),2.61(s,3H),2.58(t,2H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C20H18N4O2S2的计算值： 410，实测值：411(M+1)+
实施例25
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-苯基噻唑-5-甲酸(0.092g，0.448mmol)和吡啶(0.15ml， 1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持6天。冷却后，用水(3mL)淬灭该混合物，并过滤收集沉淀，用冷的1:1的乙腈/水混合物洗涤。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(0.151g，86％)的黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d):δ12.82(bs,1H),10.18(s,1H),9.31(s,1H),7.69(m, 3H),7.64(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.54(s,1H),7.48-7.38(m,3H),6.87(d,1H, J＝8.4Hz),2.91(t,2H,J＝7.2Hz),2.47(部分掩蔽在d-DMSO下,t,2H,J＝7.2 Hz)。MS(ESI):C22H16N4O2S2的计算值：432，实测值：433(M+1)+
实施例26
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、二甲基-1,3-噁唑-5-甲酸(0.063g，0.448mmol)和吡啶 (0.15ml，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持6天。冷却后，用水(3mL)淬灭该混合物，并过滤收集沉淀，用冷的1:1的乙腈/水混合物洗涤。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噁唑-5-甲酰胺(0.12g，83％) 的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.38(bs,1H),10.19(s,1H), 7.75(s,1H),7.70(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.52(s,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(t,2H,J＝7.2Hz),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,5H),2.40(s,3H)。 MS(ESI):C18H16N4O3S的计算值：368，实测值：369(M+1)+
实施例27
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2,5-二甲基-1H-咪唑-4-甲酸(0.063g，0.448mmol)和吡啶 (0.15ml，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持12天。冷却后，用水(3mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(3x 50mL) 提取，而后用饱和NaHCO3(2x 50mL)洗涤。将该粗品固体干燥，加载到硅胶上，并通过快速色谱纯化，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到2,4-二甲基 -N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(0.07g， 47％)的桃色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.34(bs,1H),10.58(bs,1H), 10.16(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.45(s,1H),6.88(d,1H, J＝8.4Hz),2.93(t,2H,J＝7.2Hz),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,5H),2.31(s, 3H)。MS(ESI):C18H17N5O2S的计算值：367，实测值：368(M+1)+
实施例28
在密封管中，向6-(2-氨基-5-甲基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.386mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.067g，0.424mmol)和吡啶 (0.14mL，1.742mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.80mL，1.352mmol)。将密封管加热至50℃，保持6 天。冷却后，用水(3mL)淬灭该混合物，并过滤收集沉淀，用冷的1:1的乙腈 /水混合物洗涤。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到2,4- 二甲基-N-(5-甲基-4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺 (0.12g，78％)的类白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.38(bs,1H), 10.19(s,1H),7.46(s,1H),7.41(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),6.92(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(t,2H,J＝7.2Hz),2.65(s,3H),2.61(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m, 2H),2.43(s,3H)。MS(ESI):C19H18N4O2S2的计算值：398，实测值： 399(M+1)+
实施例29
在密封管中，向6-(2-氨基-5-乙基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.367mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.063g，0.402mmol)和吡啶(0.13mL，1.652mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.76mL，1.282mmol)。将密封管加热至50℃，保持6 天。冷却后，用水(3mL)淬灭该混合物，并过滤收集沉淀，用冷的1:1的乙腈 /水混合物洗涤。通过在二氯甲烷中沉淀并过滤，将残余物纯化，得到N-(5- 乙基-4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺 (0.11g，73％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.22(bs,1H), 10.20(s,1H),7.40(s,1H),7.35(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),6.92(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(t,2H,J＝7.2Hz),2.86(q,2H,J＝7.6Hz),2.65(s,3H),2.61(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),1.25(t,3H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C20H20N4O2S2的计算值：412，实测值：413(M+1)+
实施例30
在直火干燥(flamed dried)的烧瓶中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉 -2(1H)-酮(0.200g，0.815mmol)和苯甲醛(0.091g，0.856mmol)的无水四氢呋喃(20mL)溶液中加入冰醋酸(1mL)。将该混合物搅拌4小时，而后加入过量的硼氢化钠(0.070mg，1.71mmol)。然后，搅拌该混合物，并用LCMS监测完成状况。然后用水淬灭，并用乙酸乙酯(3x20mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4无水，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到6-(2-(苄基氨基)噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.099g，36％)的浅黄色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ10.10(s,1H),8.12(t,1H,J＝5.6Hz),7.62(s,1H),7.58(dd,1H,J＝8.4, 1.6Hz),7.42-7.30(m,4H),7.25(t,1H,J＝6.8Hz),6.88(s,1H),6.82(d,1H,J＝8.0 Hz),4.49(d,2H,J＝5.6Hz),2.89(t,2H,J＝7.8Hz),2.45(t,2H,J＝7.2Hz)。 MS(ESI):C19H17N3OS的计算值：335，实测值：336(M+1)+
实施例31
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、苯甲酸(0.055g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85 mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)苯甲酰胺(0.116g，82％)的米色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ12.73(s,1H),10.19(s,1H),8.12(d,2H,J＝6.8Hz),7.77(s,1H),7.72(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.65(t,1H,J＝7.2Hz),7.55(m,3H),6.90(d,1H, J＝8.4Hz),2.94(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C19H15N3O2S的计算值：349，实测值：350(M+1)+
实施例32
向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、嘧啶-2-甲酸(0.056g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4 mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL， 1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6- 基)噻唑-2-基)嘧啶-2-甲酰胺(0.132g，93％)的绿褐色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ12.39(s,1H),10.19(s,1H),9.06(d,2H,J＝5.6Hz),7.78(m,2H),7.72(dd,1H,J＝8.8,2.0Hz),7.61 9s,1H),6.90(d,1H,J＝8.4Hz),2.93(m,2H), 2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C17H13N5O2S的计算值：351，实测值：352(M+1)+
实施例33
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-甲基噻唑-5-甲酸(0.064g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL， 1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到4-甲基-N-(4-(2- 氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.134g，89％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.71(bs,1H),10.19(s,1H),9.18(s,1H),7.74(s,1H),7.70(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.52(bs,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(m,2H),2.68(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C17H14N4O2S2的计算值：370，实测值：371(M+1)+
实施例34
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、1,3-二甲基噻唑-2-甲酸(0.071g，0.448mmol)和吡啶(0.15 mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到4,5-二甲基 -N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-2-甲酰胺(0.062g，40％) 的米色固体。在HPLC和1H NMR中，4,5-二甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-2-甲酰胺以互变异构体形态存在：(400MHz, DMSO-d):δ12.39(bs,0.5H),10.95(bs,0.5H),10.18(s,1H),7.78-7.65(m,2H), 7.57(s,0.5H),7.47(s,0.5H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz),2.93(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C18H16N4O2S2的计算值：384，实测值： 385(M+1)+
实施例34
在密封管中，在鼓入氩气的条件下，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-氯嘧啶(0.047g，0.408mmol)、4,5-二(二苯基膦基)-9,9-二甲基-呫吨(0.045g，0.077mmol)和碳酸钾(0.197g，1.432 mmol)的无水二噁烷(4mL)悬浮液中加入醋酸钯(II)(0.017g，0.073mmol)。向该溶液混合物中再连续鼓入氩气10分钟。然后，将密封管在80℃下加热过夜(15小时)。冷却后，过滤收集沉淀，用冷的四氢呋喃洗涤，而后用水洗涤，得到6-(2-(嘧啶-2-基氨基)噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.126g，95％)的褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δDMSO-d):δ11.61(bs,1H),10.15(s, 1H),8.57(d,2H,J＝4.8Hz),7.72(s,1H),7.68(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.27(s,1H), 6.9(t,1H,J＝4.8Hz),6.87(d,1H,J＝8.4Hz),2.92(m,2H),2.49(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C16H13N5OS的计算值：323，实测值：324(M)+
实施例36
在密封管中，向6-(2-氨基噁唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.040g，0.175mmol)、2,4-二甲基噻唑-5-甲酸(0.030g，0.192mmol)和吡啶(0.06 mL，0.785mmol)的乙腈(2mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.36mL，0.612mmol)。将密封管加热至50℃，保持5天，形成沉淀。冷却后，用水(10mL)淬灭该混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇(2x 25 mL)提取，而后用饱和NaHCO3(100mL)洗涤一次。将合并的有机层用无水 Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过制备TLC纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷 /甲醇混合物，得到2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噁唑-2-基) 噻唑-5-甲酰胺(0.056g，87％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 10.15(s,1H),8.26(s,1H),7.52(s,1H),7.48(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),6.98(s,1H), 6.85(d,1H,J＝8.0Hz),2.88(m,2H),2.62(s,3H),2.53(s,3H),2.44(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C18H16N4O3S的计算值：368，实测值： 369(M+1)+
实施例37
在直火干燥的烧瓶中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)和2,4-二甲基噻唑-5-甲醛(0.063g，0.448mmol)的无水二氯甲烷(8mL)溶液中加入冰醋酸(1mL)。将该混合物搅拌20小时，而后加入过量的硼氢化钠(0.070mg，1.71mmol)。搅拌该反应混合物，并用LCMS 监测完成状况。当反应完成时，用水淬灭该混合物，并用乙酸乙酯(3x 20mL) 提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到 6-(2-(((2,4-二甲基噻唑-5-基)甲基)氨基)噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.029g，19％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ10.12(s,1H), 8.08(t,1H,J＝5.6Hz),7.65(s,1H),7.61(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),6.92(s,1H), 6.84(d,1H,J＝8.0Hz),4.55(d,2H,J＝5.6Hz),2.90(t,2H,J＝7.8Hz),2.52(s,3H), 2.45(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),2.35(s,3H)。MS(ESI):C18H18N4OS2的计算值：370，实测值：371(M+1)+
实施例38
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、o-toluic(0.061g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL，1.832mmol) 的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85 mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持14天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到2-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4- 四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)苯甲酰胺(0.099g，67％)的米色固体。1H NMR(400 MHz,DMSO-d):δ12.61(s,1H),10.18(s,1H),7.74(bs,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4, 2.0Hz),7.57(dd,1H,J＝7.6,1.6Hz),7.53(s,1H),7.43(ddd,1H,J＝7.6,7.6,1.6Hz),7.31 9m,2H),6.89(d,1H,J＝8.0Hz),2.93(m,2H),2.49(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,5H),2.42(s,3H)。MS(ESI):C20H17N3O2S的计算值：363，实测值：364(M+1)+
实施例39
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2,5-二甲基苯甲酸(0.067g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL， 1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持14天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到2,5-二甲基-N-(4-(2- 氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)苯甲酰胺(0.096g，62％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.53(s,1H),10.18(s,1H),7.74(bs,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.52(s,1H),7.42(bs,1H),7.25-7.18(m,2H),6.89(d, 1H,J＝8.0Hz),2.93(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),2.37(s,3H), 2.32(s,3H)。MS(ESI):C21H19N3O2S的计算值：377，实测值：378(M+1)+
实施例40
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-(甲氧基甲基)-4-甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.084g，0.448mmol) 和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液 (50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持7天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到2-(甲氧基甲基)-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.98g，58％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 12.65(bs,1H),10.19(s,1H),9.18(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.52(bs,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz),4.72(s,2H),3.45(s,3H),2.93(m,2H), 2.64(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C19H18N4O3S2的计算值：414，实测值：415(M+1)+
实施例41
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-(环丙基)-4-甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.082g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持7 天。用水淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯(3x20mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到2-环丙基-4-甲基 -N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.078g，46％) 的橙色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d):δ12.50(bs,1H),10.19(s,1H), 7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.50(bs,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz), 2.93(m,2H),2.58(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),2.44(m,1H), 1.18(m,2H),1.03(m,2H)。MS(ESI):C20H18N4O2S2的计算值：410，实测值： 411(M+1)+
实施例42
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-甲基-2-苯基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.098g，0.448mmol)和吡啶 (0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至48.5℃，保持 4天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2-苯基噻唑-5-甲酰胺 (0.151g，83％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.74(bs,1H), 10.20(s,1H),7.98(m,2H),7.75(bs,1H),7.70(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz), 7.59-7.48(m,4H),6.90(d,1H,J＝8.4Hz),2.94(m,2H),2.73(s,3H),2.50(掩蔽在 d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C23H18N4O2S2的计算值：446，实测值： 447(M+1)+
实施例43
实施例44
在直火干燥的烧瓶中，在氩气氛中，在0℃，向2,4-二甲基-N-(4-(2-氧代 -1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.100g，0.260mmol)和苄基溴(0.058g，0.338mmol)的无水二甲基甲酰胺(4mL)溶液中一次性加入氢化钠(60％，在矿物油中，0.015g，0.364mmol)。将该反应在0℃下搅拌15分钟，而后升温至室温。将该混合物搅拌过夜。起始原料耗尽之后，用饱和氯化铵 (25mL)淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯(2x 25mL)提取。将合并的有机物用饱和碳酸氢钠(50mL)洗涤一次，并用无水硫酸钠干燥。通过硅胶快速色谱纯化浓缩的残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到产物N-(4-(1-苄基-2- 氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺(0.021g， 17％)和N-苄基-N-(4-(1-苄基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺(0.027g，19％)，两者都是黄色固体。
43:N-(4-(1-苄基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺的1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.59(bs,1H),7.79(d,1H, J＝2.0Hz),7.65(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.53(bs,1H),7.31(m,2H),7.23(m,2H), 7.21(m,1H),6.97(d,1H,J＝8.4Hz),5.18(s,2H),3.01(m,2H),2.75(m,2H), 2.66(s,3H),2.60(s,3H)。MS(ESI):C25H22N4O2S2的计算值：474，实测值： 475(M+1)+
44:N-苄基-N-(4-(1-苄基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺的1H NMR(400MHz,DMSO-d)δ7.32(m,2H), 7.25-7.17(m,7H),7.14(dd,1H,J＝8.4,2.0Hz),7.02(s,1H),6.87(m,2H),5.35(s, 2H),5.18(s,2H),2.90(m,2H),2.72(m,2H),2.59(s,3H),2.56(s,3H)。MS(ESI): C32H28N4O2S2的计算值：564，实测值：565(M+1)+
实施例45
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-乙基-4-甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.077g，0.448mmol)和吡啶 (0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到2- 乙基-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺 (0.094g，58％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.56(bs,1H),10.19(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.51(bs,1H),6.89(d,1H, J＝8.4Hz),2.99(q,2H,J＝7.6Hz),2.93(m,2H),2.62(s,3H),2.49(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H),1.32(t,3H,J＝7.6Hz)。MS(ESI):C19H18N4O2S2的计算值： 398，实测值：399(M+1)+
实施例46
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-甲基-2-(氧杂环戊-3-基)-1,3-噻唑-5-甲酸(0.096g，0.448mmol) 和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2-(四氢呋喃-3-基)噻唑-5-甲酰胺(0.114g，63％)的浅棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.60(bs,1H),10.19(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.51(bs, 1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz),4.06(dd,1H,J＝8.0,7.2Hz),3.92(m,1H),3.86(m, 1H),3.81(m,1H),2.93(m,2H),2.63(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m, 2H),2.40(m,1H),2.12(m,1H)。MS(ESI):C21H20N4O2S2的计算值：440，实测值：441(M+1)+
实施例47
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-甲基-2-(吡啶-2-基甲基)-1,3-噻唑-5-甲酸(0.105g，0.448 mmol)和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至 50℃，保持5天。用水淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯(3x 20mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到4-甲基 -N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2-(吡啶-2-基甲基)噻唑-5-甲酰胺(0.096g，51％)的橙褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.57(bs, 1H),10.19(s,1H),8.57(dd,1H,J＝4.8,0.8Hz),7.81(ddd,1H,J＝8.0,8.0,2.0Hz), 7.73(s,1H),7.68(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.50(bs,1H),7.47(d,1H,J＝8.0Hz), 7.33(ddd,1H,J＝7.6,4.8,1.6Hz),6.88(d,1H,J＝8.4Hz),4.50(s,2H),2.92(m, 2H),2.61(s,3H),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C23H19N5O2S2的计算值：461，实测值：462(M+1)+
实施例48
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-(1H-咪唑-1-基)-4-甲基噻唑-5-甲酸(0.938g，0.448mmol)和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 2-(1H-咪唑-1-基)-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑 -5-甲酰胺(0.140g，79％)的黄棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ 12.81(bs,1H),10.21(s,1H),8.48(s,1H),7.87(s,1H),7.74(s,1H),7.68(dd,1H, J＝8.4,1.6Hz),7.48(bs,1H),7.21(s,1H),6.90(d,1H,J＝8.4Hz),2.93(m,2H), 2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI):C20H16N6O2S2的计算值： 436，实测值：437(M+1)+
实施例49
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、4-甲基-2-吗啉代噻唑-5-甲酸(0.102g，0.448mmol)和吡啶(0.15 mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持5天。用饱和NaHCO3淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯(3x 20mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/甲醇，得到4-甲基-2-吗啉代-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.046g，25％) 的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.03(bs,1H),10.18(s,1H), 7.73(s,1H),7.68(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.45(bs,1H),6.88(d,1H,J＝8.4Hz), 3.72(m,4H),2.47(m,4H),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C21H21N5O3S2的计算值：455，实测值：456(M+1)+
实施例50
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.100g，0.408mmol)、2-(2-甲氧基乙氧基)-4-甲基噻唑-5-甲酸(0.97g，0.448mmol) 和吡啶(0.15mL，1.832mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液 (50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.432mmol)。将密封管加热至50℃，保持5天。用饱和NaHCO3淬灭该反应混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇混合物(3x 20mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用95:5的二氯甲烷/ 甲醇，得到2-(2-甲氧基乙氧基)-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基) 噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.102g，57％)的白色固体。1H NMR(400MHz, DMSO-d):δ12.41(bs,1H),10.19(s,1H),7.73(s,1H),7.68(dd,1H,J＝8.4,1.6 Hz),7.48(bs,1H),6.88(d,1H,J＝8.4Hz),4.54(m,2H),3.69(m,2H),3.31(s,3H), 2.93(m,2H),2.55(s,3H),2.48(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H)。MS(ESI): C20H20N4O4S2的计算值：444，实测值：445(M+1)+
实施例51
在密封管中，向6-(2-氨基噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.200g，0.816mmol)和({[(叔丁氧基)羰基]氨基}-甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.233g， 0.856mmol)和吡啶(0.30mL，3.670mmol)的乙腈(8mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，1.70mL，2.851mmol)。将密封管加热至50℃，保持5天。用饱和NaHCO3淬灭该反应混合物，并用8:2的二氯甲烷/异丙醇混合物(3x 20mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，使用 95:5的二氯甲烷/甲醇，得到((4-甲基-5-((4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基甲酰基)噻唑-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.291g，72％)的黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.61(bs,1H),10.19(s,1H),7.85(m,1H), 7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.51(bs,1H),6.89(d,1H,J＝8.0Hz), 4.38(d,2H,J＝6.0Hz),2.93(m,2H),2.62(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下, m,2H),1.43(s,9H)。MS(ESI):C23H25N5O4S2的计算值：499，实测值：500(M+1)+
实施例52
在密封管中，向6-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮盐酸盐(0.200g，0.633mmol)、2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.109g，0.696mmol)和吡啶(0.28mL，3.481mmol)的乙腈(8mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，1.32mL，2.211mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 N-(5-氯-4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)-2,4-二甲基噻唑-5-甲酰胺(0.098g，33％)的淡粉红色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.86(bs, 1H),10.26(s,1H),7.72(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),6.94(d,1H,J＝8.4Hz),2.94(m,2H),2.68(s,3H),2.61(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m, 2H)。MS(ESI):C18H15ClN4O2S2的计算值：418，实测值：419(M+1)+
实施例53
在密封管中，向6-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮盐酸盐(0.100g，0.408mmol)、2-环丙基-4-甲基-1,3-噁唑-5-甲酸(0.072g，0.428mmol) 和吡啶(0.15mL，1.831mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 2-环丙基-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噁唑-5-甲酰胺(0.143g，89％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.52(bs,1H), 10.19(s,1H),7.75(s,1H),7.71(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.52(s,1H),6.89(d,1H, J＝8.4Hz),2.93(m,2H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下,m,2H),2.39(s,3H), 2.14(m,1H),1.25(m,2H),1.12(m,2H)。MS(ESI):C20H18N4O3S的计算值： 394，实测值：395(M+1)+
实施例54
在密封管中，向6-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮盐酸盐(0.100g，0.408mmol)、4-甲基-2-(丙-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酸(0.083g，0.448 mmol)和吡啶(0.15mL，1.831mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至50℃，保持5天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到2-异丙基-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5- 甲酰胺(0.104g，62％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.56(bs, 1H),10.19(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.51(s,1H),6.89(d, 1H,J＝8.4Hz),3.29(m,1H),2.93(m,2H),2.62(s,3H),2.49(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H),1.36(s,3H),1.34(s,3H)。MS(ESI):C20H20N4O2S2的计算值：412，实测值：413(M+1)+
实施例55
在密封管中，向6-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮盐酸盐(0.100g，0.408mmol)、2-环戊基-4-甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.095g，0.448mmol) 和吡啶(0.15mL，1.831mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 2-环戊基-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.143g，80％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.53(bs,1H), 10.19(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.50(bs,1H),6.89(d,1H, J＝8.4Hz),3.44(m,1H),2.93(m,2H),2.62(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下, m,2H),2.12(m,2H),1.77(m,4H),1.67(m,2H)。MS(ESI):C22H22N4O2S2的计算值：438，实测值：439(M+1)+
实施例56
在密封管中，向6-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮盐酸盐(0.100g，0.408mmol)、2-环己基-4-甲基-1,3-噻唑-5-甲酸(0.101g，0.448mmol) 和吡啶(0.15mL，1.831mmol)的乙腈(4mL)悬浮液中加入丙基磷酸酐溶液(50 wt％，在乙酸乙酯中，0.85mL，1.431mmol)。将密封管加热至50℃，保持5 天，形成沉淀。冷却后，过滤收集沉淀，并用冷的1:1的乙腈/水洗涤，得到 2-环己基-4-甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.149g，81％)的米色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δ12.54(bs,1H), 10.19(s,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.4,1.6Hz),7.51(bs,1H),6.89(d,1H, J＝8.4Hz),2.99(m,1H),2.93(m,2H),2.62(s,3H),2.49(部分掩蔽在d-DMSO下, m,2H),2.06(m,2H),1.78(m,4H),1.55-1.31(m,4H),1.27(m,1H)。MS(ESI):C23H24N4O2S2的计算值：452，实测值：453(M+1)+
实施例57
在密封烧瓶中，将((4-甲基-5-((4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基甲酰基)噻唑-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.100g，0.200mmol)悬浮在6mL的4M盐酸/二噁烷溶液中。将该混合物在室温下搅拌6小时。真空浓缩该反应混合物。将HCl盐溶于最低量的甲醇中，并用饱和碳酸氢钠淬灭。将该混合物用8:2的二氯甲烷/异丙醇(6x10mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3洗涤一次，用无水Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到2-(氨甲基)-4- 甲基-N-(4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)噻唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(0.060g， 75％)的橙色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d):δacylic NH(not observed),10.18(s,1H),7.85(m,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,1H,J＝8.0,1.6Hz),7.45(s,1H), 6.89(d,1H,J＝8.0Hz),4.03(s,2H),2.93(m,2H),2.62(s,3H),2.49(部分掩蔽在 d-DMSO下,m,2H),1.23(bs,2H)。MS(ESI):C18H17N5O2S2的计算值：399，实测值：400(M+1)+
所选择的化合物的生物活性
按照下面进一步描述的标准G-LISA方案，检测按照本发明主题的示例性化合物对于野生型、K-ras G12D和K-ras G12V的活性，IC50值(μM)结果示于表1中，同时，图4A-4D描述了化合物的分子式。
表1
将293H细胞播种在6个孔中，每个孔0.6x106个细胞，并在第二天，使用转染试剂Lipofectamine 3000，用5μg的Ras野生型或G12C、G12D或G12V突变体DNA质粒载体进行转染。下一天，将细胞用3.125-50μM的Ras化合物处理1小时。随后，用100ng/ml的EGF处理野生型转染的细胞2分钟。将细胞在冰冷的PBS中洗涤一次，裂解在冰上完全裂解缓冲液中，并按照Cytoskeleton 方案，用G-LISA进行。
对于示例性的化合物进行生存力试验，下面表2列出了利用野生型 (Ishikawa)和各种K-ras突变体(Panc1-G12D；Panc10.05-G12D；HCT116-G13D) 检测的所选择的化合物的示例性结果。结果用μM表示，相应的结构示于图 4A-4D中。
表2
细胞计数并播种到384孔微板中，1000个细胞/36μl培养基/孔。将细胞放回到37℃的CO2培养箱中18小时。在DMSO中制备200X的药物，并稀释到培养基中，稀释至10X。向每个孔中加入4μl 10X药物，并将板放回到培养箱中。 DMSO的最终试验浓度是0.5％。72小时之后，将8μl CellTiterBlue(Promega) 加入到每个孔中。3小时之后，在Victor PlateReader(Perkin Elmer)上测定荧光(Ex550/Em590)。通过DMSO对照(100％生存力)和100μM它莫西芬 (tamoxifen，0％生存力)，确定试验范围。使用Graphpad Prism，计算GI50值。
对于各个化合物，进行了对于Erk和Akt的细胞中磷酸化试验，示例性的结果示于下面表3中，对于G12D K-ras突变体，使用Panc1和Panc10.05细胞系。结果用μM表示，相应的结构示于图4A-4D中。
表3
在黑色侧面、底部透明的384孔微板中，将细胞播种在完全培养基中， 3000个细胞/27μl/孔。将板放回到37℃的CO2培养箱中18小时。在DMSO中制备200X的药物，并稀释到培养基中，稀释至10X。向每个孔中加入4μl 10X 受试物或对照物，并将板放回到培养箱中。DMSO的最终试验浓度是0.5％。一个小时之后，用甲醛固定细胞，用triton X-100冲洗和透化，并用BSA/Goat 血清封闭液进行封闭。加入primary phospho-Akt和phospho-ERK抗体，并将板在4℃下培养过夜。用Tween-20洗涤缓冲液冲洗板，并加入二抗(山羊抗兔，Thermofisher)。2小时之后，用Tween-20洗涤缓冲液冲洗板，而后用PBS冲洗。使板在Celigo(Nexcelom)上成像，并定量细胞荧光。使用1μM BEZ235(Sellekchem)，获得phospho-Akt的完全抑制，同时，使用1μM MEK 抑制剂II(Calbiochem)，获得phospho-ERK的完全抑制。使用Graphpad Prism，计算EC50值。
此外，用使用表面等离子共振的活性和非活性态下，检测所选择的化合物与K-ras的野生型和突变形式的选择性结合，示例性的结果示于表4中。
表4
在所有的表面等离子共振实验中，运行缓冲液是10mM HEPES(pH7.4)、150mMNaCl、0.1％(v/v)Tween-20、1mM MgCl2、8％ DMSO。在SensiQ Pioneer光生物传感器上进行实验。流速设置在 50μL/min，温度是25℃。将kRAS蛋白固定到SensiQ HisCap chip(sensiqtech.com)的带Nickel-NTA表面，得到4000RU的收率。在100％DMSO中制备小分子，进一步稀释到运行缓冲液中的8％DMSO。使用Taylor 扩散梯度注入方式，注入小分子(参见，例如，Evaluation of Taylor dispersion injections:Determiningkinetic/affinity interaction constants and diffusion coefficients in label-free biosensing,John G.Quinn,Analytical Biochemistry(2011))。为了双重参比目的，注入缓冲液空白。使用Qdat，进行数据处理和模型拟合。
本发明化合物的针对特定K-ras突变形式的细胞中选择性(In-cellselectivity)还可以如下列示例性的实验所示的来进行测定。将293H细胞播种在6个孔中，并在第二天，使用5μg的Ras野生型或G12C、G12D或G12V突变体DNA质粒载体进行转染。下一天，将细胞用3.125-50μM的Ras化合物处理1 小时。随后，用100ng/ml的EGF处理野生型转染的细胞2分钟。将细胞在冰冷的PBS中洗涤一次，裂解在冰上完全裂解缓冲液中，并按照Cytoskeleton 方案，用G-LISA进行。图1描述了示例性的结果。很明显，试验化合物 A0837(与图4A-4D的4562相同)针对G12D突变形式具有明确的选择性，并且与野生型相比较，IC50值低。
为了验证在特定癌细胞系中的结果，用3.1至25μM的Ras化合物A0837 处理癌细胞系BxPC-3(K-Ras野生型)、Panc10.05(K-Ras G12D突变体)和 Capan-2(K-Ras G12V)1小时，而后用100ng/ml EGF刺激2分钟。将细胞在冰冷的PBS中洗涤一次，裂解在冰上完全裂解缓冲液中，并按照Cytoskeleton 方案，用G-LISA进行。从图2可以清楚地看到，试验化合物针对K-ras突变体 G12D具有明显的选择性，这与上面提供的其它结果一致。
在野生型和K-ras G12D突变细胞中，如下检测所涵盖的化合物对于细胞信号传导的效果∶使癌细胞系BxPC-3(K-Ras野生型)和Panc10.05(K-Ras G12D突变体)血清饥饿(serum-starved)O/N，而后用3.1至25μM的Ras化合物 A0837处理1小时，而后用100ng/mlEGF刺激5分钟。用冰冷的PBS洗涤细胞一次，并裂解在冰上完全裂解缓冲液中，在用于检测pMEK和pErk的还原条件下，用SDS-PAGE进行。将膜洗提，并针对总MEK/Erk进行探针复测。图3 给出了这个实验的结果，证明试验化合物在突变细胞系中抑制Ras的信号传导下游，但不是在K-Ras野生型细胞系中。
在更进一步的实验中，本发明人使用下列一般方案在G-LISA试验中检测了所选择的化合物以比较对于野生型和各个突变体K-Ras(G12D、G12V) 的IC50值∶将293H细胞播种在6个孔中，每个孔0.6x106个细胞，并在第二天，使用转染试剂Lipofectamine 3000，用5μg的Ras野生型或G12C、G12D或G12V 突变体DNA质粒载体进行转染。下一天，将细胞用3.125-50μM的Ras化合物处理1小时。随后，用100ng/ml的EGF处理野生型转染的细胞2分钟。将细胞在冰冷的PBS中洗涤一次，裂解在冰上完全裂解缓冲液中，并按照 Cytoskeleton方案，用G-LISA进行。
表5提供了所检测的选择的化合物的典型结果(μM)，相应的结构示于图 4A-4D中。正如所看到的那样，相比于野生型和/或其它突变形式，某些试验化合物优先/选择性抑制G12D。N/A表示没有获得结果
化合物 G-LISA(野生型) G-LISA(G12D) G-LISA(G12V)
A0837/4562 0.5 7-13 38
4639 n/a >25 n/a
4662 n/a >25 n/a
4663 7 >25 32
4664 n/a >25 n/a
4665 n/a >25 n/a
4666 n/a >25 n/a
4683 n/a 11.89 n/a
4684 n/a >25 n/a
4685 n/a >25 n/a
4686 n/a 11 n/a
4687 n/a 19 n/a
4734 n/a >25 n/a
4735 n/a >25 n/a
4747 n/a >25 n/a
4748 n/a 21 n/a
4749 n/a 36 n/a
4800 n/a >25 n/a
4801 25.7 8.2 10.7
4802 n/a 27 17
4803 n/a 71 n/a
4805 7 187 n/a
4824 n/a >25 n/a
4825 n/a >25 n/a
4826 n/a >25 n/a
2827 >25 36.6 n/a
4828 n/a >25 n/a
4829 n/a >25 n/a
4874 n/a 16 n/a
4875 n/a 17 n/a
4877 16 6 9
4878 n/a 19 >25
4888 11.3 6 14.5
图5-73描述了按照本发明主题的进一步的示例性化合物，它们可以按照上面讨论的一般合成途径来制备。
本文说明书和整个权利要求书中使用的“一个(a)”、“一种(an)”和“该(the)”包括复数形式，除非上下文另外明确规定。本文说明书使用的“在...中”包括“在...中”和“在...上”，除非另外明确规定。
本文中数值范围的叙述仅仅作为引用的速记方法，每个单独的值分别落在该范围之内。本文除非另外说明，否则，各个单一的值将被并入本说明书中，好象本文分别列举的一样。本文描述的所有方法可以按照任何合适的顺序，进行除非本文另外说明，或上下文明显矛盾。本文相对于某些实施方案提供的任何和所有实施例或示例性语言(例如，“例如”)的使用，仅仅想要更好地阐明本发明，不会造成对本发明范围的限制。说明书中的文辞不应该被看作是表明任何实施本发明所必需的未提出保护的要素。
本文公开的本发明的替代性要素或实施方案的归组不被认为是限制性的。每个组的成员可以被分别提及和请求保护，或与该组的其它成员或本文存在的其它要素以任何组合形式被提及和请求保护。小组的一个或多个成员可以被归入小组，或可以由于便利性和/或专利性的原因被从小组中删除。当任何这种包括或删除出现时，认为本文的说明书包括这种更改的小组，由此使附加权利要求中使用的所有Markush小组满足说明书撰写要求。
对本领域技术人员显而易见的是，除了已经描述的之外，在不背离本文的发明构思的条件下，很多修改也是合适的。因此，本发明的主题不是被仅仅限制在附加权利要求的范围内。此外，在解释说明书和权利要求的过程中，应该以与上下文一致的最宽的合适方式来解释所有术语。尤其是，应该参照要素、组成部分或步骤，以非排它性方式解释术语“包括”和“包含”，这表示，可以提供或使用所提到的要素、组成部分或步骤，或与没有明确提到的其它要素、组成部分或步骤结合使用。在说明书权利要求中指出至少一个条目选自A、B、C和N的情况下，本文应该解释为：只是需要小组中的一个要素，而不是A加上N，或B加上N，等等。

Claims (36)

1.具有按照式I的结构的化合物∶
其中，X是O或S；
其中，R1和R2独立地选自H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤素、-OH、-NHC(O)烷基和-NHC(O)芳基；
其中，R3选自H、C1-C4烷基、-NHR6或-OR6，其中，R6是H、烷基、卤代烷基、烯基、芳基或杂芳基；
其中，R4和R5一起形成任选取代的5、6或7元杂环，或当R5是-NHC(O)烷基或-NHC(O)芳基时，R4不存在。
2.权利要求1的化合物，其中，R1和R2独立地选自H、烷基、杂芳基、环烷基和杂环烷基。
3.权利要求1的化合物，其中，R1是烷基或环烷基，其中，R2是烷基。
4.前述任一项权利要求的化合物，其中，X是S。
5.前述任一项权利要求的化合物，其中，R3是H或C1-C4烷基。
6.前述任一项权利要求的化合物，其中，任选取代的5、6或7元杂环包含氮原子，并且其中所述环进一步包含氧代取代基。
7.前述任一项权利要求的化合物，其中，任选取代的5、6或7元杂环选自：
8.权利要求1的化合物，其具有按照式II的结构：
其中，X是O或S；
其中，R1和R2独立地选自H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤素、-OH、-NHC(O)烷基和-NHC(O)芳基；
其中，R3是H或C1-C4烷基；
其中，R7是H、烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基或烷杂芳基。
9.权利要求8的化合物，其中，R1是烷基或环烷基，其中，R2是烷基。
10.权利要求8或权利要求9的化合物，其中，X是S。
11.权利要求8-10中任一项的化合物，其中，R3是H。
12.权利要求1的化合物，其具有式III或式IV的结构，其中，R3是H、甲基或卤素，
13.含有可药用载体和权利要求1-12的任一项的化合物的药物组合物。
14.权利要求13的药物组合物，其中，当给予哺乳动物有效抑制哺乳动物的KRAS的剂量时，所述化合物以有效抑制哺乳动物的KRAS的浓度存在。
15.权利要求14的药物组合物，其中，KRAS是突变体KRAS。
16.权利要求15的药物组合物，其中，相对于突变体KRAS G12V和突变体KRAS G12C，所述化合物优先抑制突变体KRAS G12D。
17.权利要求1-12的任一项的化合物抑制KRAS信号的用途。
18.权利要求17的用途，其中，所述化合物具有按照式II的结构。
19.权利要求17的用途，其中，所述化合物具有按照式III或式IV的结构。
20.权利要求17的用途，其中，所述KRAS信号是由突变体KRAS介导的信号。
21.权利要求20的用途，其中，所述突变体KRAS是KRAS G12D，其中，相对于突变体KRASG12V和突变体KRAS G12C，所述化合物优先抑制突变体KRAS G12D。
22.权利要求1-12的任一项的化合物在制备***疾病的药物中的用途。
23.权利要求22的用途，其中，所述肿瘤疾病与突变体KRAS有关。
24.权利要求23的用途，其中，突变体KRAS是KRAS G12D。
25.权利要求23的用途，其中，所述化合物具有按照式II的结构。
26.权利要求23的用途，其中，所述化合物具有按照式III或式IV的结构。
27.抑制突变体KRAS的方法，所述方法包括使突变体KRAS与有效抑制突变体KRAS浓度的权利要求1-12的任一项的化合物接触的步骤。
28.权利要求27的方法，其中，突变体KRAS是KRAS G12D。
29.权利要求27的方法，其中，相对于突变体KRAS G12V和突变体KRAS G12C，所述化合物优先抑制突变体KRAS G12D。
30.权利要求27的方法，其中，所述接触步骤是在突变体KRAS在细胞中时进行的。
31.权利要求31的方法，其中，所述浓度有效降低关于MEK信号和ERK信号中的至少之一的下游信号。
32.在需要的哺乳动物中***疾病的方法，所述方法包括下列步骤：在有效抑制哺乳动物的KRAS的方案下，给予哺乳动物权利要求1-12的任一项的化合物。
33.权利要求32的方法，其中，所述化合物具有按照式II的结构。
34.权利要求32的方法，其中，所述化合物具有按照式III或式IV的结构。
35.权利要求32的方法，其中，给药步骤包括口服或注射给药。
36.权利要求32的方法，其中，肿瘤疾病是结肠癌、胰腺癌和非小细胞肺癌。
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