CN107721825B - 一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:(1)预处理:将大麦芽粉碎后,加入水中,搅拌,然后,加入虎杖,搅拌,加热1.5h,然后超声处理;取出虎杖后用水清洗,沥干水分;然后烘干,自然冷却后,用香菇熏蒸2‑3h;然后烘干,得到预处理过的虎杖;(2)酶处理:将预处理过的虎杖,粉碎,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α‑淀粉酶、氯化钙,加入pH调节剂调节体系的pH为5.0,进行酶解;(3)醇提:用乙醇提取;(4)水沉除杂;(5)结晶分离。本发明通过采用食材对虎杖进行预处理,然后采用酶处理,制备方法绿色环保,可以同时提取白藜芦醇及虎杖甙,产品得率高,纯度好。
Description
技术领域
本发明属于生物提取技术领域,具体涉及一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法。
背景技术
虎杖( polygonum cusp idtum sieb)为蓼科蓼属多年生草本植物虎杖的干燥根茎,主要含有蒽醌类、二苯乙烯类、水溶性多糖和鞣质等成份,其中二苯乙烯类是虎杖的主要功效成分,主要为白藜芦醇(3, 4′,5-三羟基-二苯乙烯)和虎杖甙(白藜芦醇苷) ,具有保护心脏、抗血栓、降血脂等药理作用。白藜芦醇及白藜芦醇苷的药理作用相近,但其极性却相差较大。白藜芦醇是非黄酮类的多酚化合物,白色针状晶体,难溶于水,易溶于***、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸、乙酯等有机溶剂,在波长365nm的紫外光照射下能产生荧光,并能和三氯化铁-铁***起显色反应。虎杖甙,别名白藜芦醇甙、白藜芦醇苷、云杉新甙,白色针状结晶粉末,易溶于甲醇、乙醇、丙酮,微溶于水、乙酸乙酯、醋酸丁酯等,不溶于***、石油醚等。
虎杖是一种常见的传统中药,资源丰富、价格低廉,利用简单的工艺提取出有效成分,将大大增加其经济价值;目前,提取虎杖中有效成分的方法主要为醇提,有些还经过有机溶剂萃取,但是存在工艺流程时间长、产品得率和纯度较低等问题,使得虎杖资源为得到充分利用。
发明内容
针对现有技术的缺陷,本发明旨在提供一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,该方法的产品得率高,而且纯度高。
一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)预处理:将大麦芽粉碎后,按照料液比1g:100mL加入水中,搅拌,然后按照大麦芽和虎杖的质量比为1:10加入虎杖,搅拌,在50-65℃下搅拌加热1.5h,然后在功率200-300W下超声处理10-20min;取出虎杖后用水清洗,沥干水分;然后在70-80℃下烘干2h,再在95-105℃下烘干2h;取出自然冷却后,用香菇熏蒸2-3h;然后在90-100℃下烘干4-5h,得到预处理过的虎杖;
(2)酶处理:取预处理过的虎杖,粉碎,过30-40目,按照料液比1g:4 mL加入水,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙,加入pH调节剂调节体系的pH为5.0,搅拌,在45-50℃下酶解10h,得到虎杖的酶处理液;
(3)醇提:用乙醇提取,过滤,滤液经过减压浓缩得到浸膏;
(4)水沉除杂,得到虎杖提取物粗品;
(5)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离。
步骤(1)中香菇熏蒸的具体步骤为:按照香菇和虎杖的质量比为1:10称取香菇,切块后加入蒸锅内,加入水,水保持沸腾状态,将虎杖置于蒸笼上。
步骤(2)酶处理中,所述酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙的加入量分别为25-30 U/mL、25-30 U/mL、15 -25 U/mL、0.05- 0.15g/100mL。
步骤(2)中,所述pH调节剂为盐酸、硫酸、乳酸或者乙酸中的至少一种。
步骤(3)醇提中,用乙醇提取的具体操作为:在虎杖的酶处理液中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩20-25min,得到浸膏。
步骤(4)水沉除杂的具体操作为:将步骤(3)得到的浸膏加入3-5倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,去除脂溶性色素、脂类以及水溶性杂质,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥6-8h,得到粉末状的虎杖提取物粗品。
步骤(5)中硅胶柱分离的具体操作为:按照质量比为1:(2-3),将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,去除脂溶性色素、脂类等杂质,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液。
步骤(5)中加入***进行结晶分离的具体操作为:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:(3-5),向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在80-85℃下干燥3-4h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在80-85℃下干燥3-4h,得到白藜芦醇纯品。
本发明的优点:
本发明通过采用食材对虎杖进行预处理,然后采用酶处理,制备方法绿色环保,可以同时提取白藜芦醇及虎杖甙,产品得率高,纯度好。
具体实施方式
虎杖原料:白藜芦醇含量为0.23%,虎杖甙含量为2.0%,本发明的每次实施例中,称取0.5kg的虎杖。
实施例1
一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)预处理:将大麦芽粉碎后,按照料液比1g:100mL加入水中,搅拌,然后按照大麦芽和虎杖的质量比为1:10加入虎杖,搅拌,在50℃下搅拌加热1.5h,然后在功率200W下超声处理20min;取出虎杖后用水清洗,沥干水分;然后在70℃下烘干2h,再在105℃下烘干2h;取出自然冷却后,按照香菇和虎杖的质量比为1:10称取香菇,切块后加入蒸锅内,加入水,水保持沸腾状态,将虎杖置于蒸笼上,用香菇熏蒸2h;然后,将虎杖在90℃下烘干5h,得到预处理过的虎杖;
(2)酶处理:取预处理过的虎杖,粉碎,过30目,按照料液比1g:4 mL加入水,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙,其中,酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙的加入量分别为30 U/mL、30 U/mL、15 U/mL、0.05g/100mL,加盐酸作为pH调节剂,调节体系的pH为5.0,搅拌,在45℃下酶解10h,得到虎杖的酶处理液;
(3)醇提:用乙醇提取,在虎杖的酶处理液中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩25min,得到浸膏;
(4)水沉除杂,将步骤(3)得到的浸膏加入3倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,去除脂溶性色素、脂类以及水溶性杂质,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥6h,得到粉末状的虎杖提取物粗品;
(5)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离,具体操作为:按照质量比为1:2,将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,去除脂溶性色素、脂类等杂质,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液;然后加入***进行结晶分离:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:3,向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在80℃下干燥4h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在80℃下干燥4h,得到白藜芦醇纯品。
实施例2
一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)预处理:将大麦芽粉碎后,按照料液比1g:100mL加入水中,搅拌,然后按照大麦芽和虎杖的质量比为1:10加入虎杖,搅拌,在65℃下搅拌加热1.5h,然后在功率300W下超声处理10min;取出虎杖后用水清洗,沥干水分;然后在80℃下烘干2h,再在95℃下烘干2h;取出自然冷却后,按照香菇和虎杖的质量比为1:10称取香菇,切块后加入蒸锅内,加入水,水保持沸腾状态,将虎杖置于蒸笼上,用香菇熏蒸3h;然后,将虎杖在100℃下烘干4h,得到预处理过的虎杖;
(2)酶处理:取预处理过的虎杖,粉碎,过40目,按照料液比1g:4 mL加入水,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙,其中,酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙的加入量分别为25 U/mL、25U/mL、25U/mL、0.15g/100mL,加硫酸作为pH调节剂,调节体系的pH为5.0,搅拌,在50℃下酶解10h,得到虎杖的酶处理液;
(3)醇提:用乙醇提取,在虎杖的酶处理液中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩20min,得到浸膏;
(4)水沉除杂,将步骤(3)得到的浸膏加入5倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,去除脂溶性色素、脂类以及水溶性杂质,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥8h,得到粉末状的虎杖提取物粗品;
(5)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离,具体操作为:按照质量比为1:3,将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,去除脂溶性色素、脂类等杂质,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液;然后加入***进行结晶分离:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:5,向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在85℃下干燥3h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在85℃下干燥3h,得到白藜芦醇纯品。
实施例3
一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)预处理:将大麦芽粉碎后,按照料液比1g:100mL加入水中,搅拌,然后按照大麦芽和虎杖的质量比为1:10加入虎杖,搅拌,在58℃下搅拌加热1.5h,然后在功率260W下超声处理15min;取出虎杖后用水清洗,沥干水分;然后在75℃下烘干2h,再在100℃下烘干2h;取出自然冷却后,按照香菇和虎杖的质量比为1:10称取香菇,切块后加入蒸锅内,加入水,水保持沸腾状态,将虎杖置于蒸笼上,用香菇熏蒸2.5h;然后,将虎杖在95℃下烘干4.5h,得到预处理过的虎杖;
(2)酶处理:取预处理过的虎杖,粉碎,过40目,按照料液比1g:4 mL加入水,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙,其中,酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙的加入量分别为27.5U/mL、27.5U/mL、20U/mL、0.10g/100mL,加入乳酸和乙酸作为pH调节剂,调节体系的pH为5.0,搅拌,在48℃下酶解10h,得到虎杖的酶处理液;
(3)醇提:用乙醇提取,在虎杖的酶处理液中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩23min,得到浸膏;
(4)水沉除杂,将步骤(3)得到的浸膏加入4倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,去除脂溶性色素、脂类以及水溶性杂质,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥7h,得到粉末状的虎杖提取物粗品;
(5)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离,具体操作为:按照质量比为1:3,将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,去除脂溶性色素、脂类等杂质,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液;然后加入***进行结晶分离:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:5,向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在83℃下干燥3.5h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在83℃下干燥3.5h,得到白藜芦醇纯品。
对比例1(不进行步骤(1)的预处理,步骤(2)中只按照料液比1g:4 mL加入水,然后继续实施例3中的步骤(3)、(4)、(5),其他同实施例3)
一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)取虎杖,粉碎,过40目,按照料液比1g:4 mL加入水;
(2)醇提:用乙醇提取,向步骤(1)得到的混合液体中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩23min,得到浸膏;
(3)水沉除杂,将步骤(2)得到的浸膏加入4倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,去除脂溶性色素、脂类以及水溶性杂质,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥7h,得到粉末状的虎杖提取物粗品;
(4)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离,具体操作为:按照质量比为1:3,将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,去除脂溶性色素、脂类等杂质,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液;然后加入***进行结晶分离:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:5,向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在83℃下干燥3.5h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在83℃下干燥3.5h,得到白藜芦醇纯品。
对比例2(不进行步骤(1)的预处理,直接进行酶处理,其他同实施例3)
一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)酶处理:取虎杖,粉碎,过40目,按照料液比1g:4 mL加入水,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙,其中,酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙的加入量分别为27.5U/mL、27.5U/mL、20U/mL、0.10g/100mL,加入乳酸和乙酸作为pH调节剂,调节体系的pH为5.0,搅拌,在48℃下酶解10h,得到虎杖的酶处理液;
(2)醇提:用乙醇提取,向步骤(1)得到的混合液体中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩23min,得到浸膏;
(3)水沉除杂,将步骤(2)得到的浸膏加入4倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,去除脂溶性色素、脂类以及水溶性杂质,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥7h,得到粉末状的虎杖提取物粗品;
(4)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离,具体操作为:按照质量比为1:3,将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,去除脂溶性色素、脂类等杂质,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液;然后加入***进行结晶分离:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:5,向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在83℃下干燥3.5h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在83℃下干燥3.5h,得到白藜芦醇纯品。
对得到的白藜芦醇纯品和虎杖甙纯品,采用高效液相色谱检测其纯度,结果如表1所示。
表1 白藜芦醇纯品和虎杖甙纯品的检测结果
由表1可知,不采用预处理和酶处理时,虎杖甙和白藜芦醇的得率明显降低,纯度也降低;当采用酶处理时,虎杖甙和白藜芦醇的得率虽然提高,但是纯度却基本没有提高;而采用本发明提供的方法提取虎杖时,虎杖甙和白藜芦醇的得率和纯度都较高。
Claims (6)
1.一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,包括以下步骤:
(1)预处理:将大麦芽粉碎后,按照料液比1g:100mL加入水中,搅拌,然后按照大麦芽和虎杖的质量比为1:10加入虎杖,搅拌,在50-65℃下搅拌加热1.5h,然后在功率200-300W下超声处理10-20min;取出虎杖后用水清洗,沥干水分;然后在70-80℃下烘干2h,再在95-105℃下烘干2h;取出自然冷却后,用香菇熏蒸2-3h;然后在90-100℃下烘干4-5h,得到预处理过的虎杖;
(2)酶处理:取预处理过的虎杖,粉碎,过30-40目,按照料液比1g:4 mL加入水,然后加入酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙,加入pH调节剂调节体系的pH为5.0,搅拌,在45-50℃下酶解10h,得到虎杖的酶处理液;
(3)醇提:用乙醇提取,过滤,滤液经过减压浓缩得到浸膏;
(4)水沉除杂,得到虎杖提取物粗品;
(5)结晶分离:采用质量浓度为95%的乙醇为洗脱液进行硅胶柱分离,然后加入***进行结晶分离;
其中,步骤(1)中香菇熏蒸的具体步骤为:按照香菇和虎杖的质量比为1:10称取香菇,切块后加入蒸锅内,加入水,水保持沸腾状态,将虎杖置于蒸笼上;
其中,步骤(5)中加入***进行结晶分离的具体操作为:按照体积比1:1,向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入***,过滤,按照滤液与***的体积比为1:(3-5),向滤液中加入***,静置结晶12h,过滤,得到滤渣和***母液,滤渣在80-85℃下干燥3-4h,即得到虎杖甙纯品;***母液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和***,然后按照虎杖提取物粗品与水的料液比1g:4mL加入水,静置12h,将沉淀过滤,在80-85℃下干燥3-4h,得到白藜芦醇纯品。
2.根据权利要求1所述一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,其特征在于:步骤(2)酶处理中,所述酸性蛋白酶、纤维素酶、α-淀粉酶、氯化钙的加入量分别为25-30 U/mL、25-30 U/mL、15 -25 U/mL、0.05- 0.15g/100mL。
3.根据权利要求1所述一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述pH调节剂为盐酸、硫酸、乳酸或者乙酸中的至少一种。
4.根据权利要求1所述一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,其特征在于:步骤(3)醇提中,用乙醇提取的具体操作为:在虎杖的酶处理液中加入乙醇,调整乙醇的质量浓度为70%,60℃加热回流1h,过滤,收集滤液,滤渣按照料液比1g:3 mL,用质量浓度为70%的乙醇提取2次,每次提取都是在60℃加热回流1h,合并3次滤液,将滤液在温度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下减压浓缩20-25min,得到浸膏。
5.根据权利要求1所述一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,其特征在于:步骤(4)水沉除杂的具体操作为:将步骤(3)得到的浸膏加入3-5倍质量的水中,搅拌均匀,静置12h,经抽滤,将得到的沉淀物在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa的条件下真空干燥6-8h,得到粉末状的虎杖提取物粗品。
6.根据权利要求1所述一种从虎杖中提取白藜芦醇及虎杖甙的方法,其特征在于:步骤(5)中硅胶柱分离的具体操作为:按照质量比为1:(2-3),将虎杖提取物粗品与200目的硅胶拌样上柱,采用95%的乙醇为洗脱液进行洗脱,同时用三氯化铁-铁***检识洗脱液中的白藜芦醇,当检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阳性时,开始收集洗脱液,直至检测到洗脱液中的白藜芦醇呈阴性时,停止收集洗脱液;将收集的洗脱液真空蒸馏,回收乙醇,然后按照虎杖提取物粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷,溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液。
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