CN107698677A - 胆酸‑非洲爪蟾胰高血糖素样肽‑1缀合肽及其应用 - Google Patents

胆酸‑非洲爪蟾胰高血糖素样肽‑1缀合肽及其应用 Download PDF

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CN107698677A CN201711195452.XA CN201711195452A CN107698677A CN 107698677 A CN107698677 A CN 107698677A CN 201711195452 A CN201711195452 A CN 201711195452A CN 107698677 A CN107698677 A CN 107698677A
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周凤
韩京
傅俊杰
费颖颖
张莹
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Jiangsu Normal University
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
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  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及一种胆酸‑非洲爪蟾胰高血糖素样肽‑1(XenGLP‑1)缀合肽及其应用。通过对XenGLP‑1的侧链进行结构修饰，引入具有高血清蛋白结合率的胆酸小分子衍生物，得到具有更高降糖活性和更长药理作用时间的XenGLP‑1缀合肽。本发明的XenGLP‑1缀合肽的生物活性显著提高，具有很强的长效降糖和减肥作用。

Description

胆酸-非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1缀合肽及其应用
技术领域
本发明涉及一类非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物及其应用
背景技术
糖尿病(Diabetes mellitus,DM)是一种全球性的内分泌代谢疾病,表现在因胰岛素分泌不足而引起的糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱及体内酸碱失衡,以血糖水平升高为主要特征。根据体内胰岛素的缺失、及受损情况将糖尿病分为：1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠期糖尿病及其他类型糖尿病。其中2型糖尿病占比90％。根据国际糖尿病联盟(IDF)统计，2015年全球糖尿病患者约有4.15亿人，每11个人就有1人患有糖尿病。预测到2040年，全球将会有6.42亿人患有糖尿病，中国糖尿病患者也将达到1.51亿。目前,临床中糖尿病的治疗方法包括注射胰岛素和口服降血糖药物,但这些方法在长期使用中会产生毒副作用,因此,寻找天然的、无毒的降血糖药物是非常必要的。
胰高血糖素样肽-1(GLP-1)具有葡萄糖浓度依赖性降糖作用，作为一种肠源性激素，GLP-1是在营养物质特别是碳水化合物的刺激下才释放入血的,其促胰岛素分泌作用呈葡萄糖浓度依赖性。GLP-1刺激胰岛素分泌而不出现低血糖，这种葡萄糖依赖性的促胰岛素分泌特性，避免了临床糖尿病治疗中病人常产生低血糖症的危险，另外GLP-1几乎含盖了现有糖尿病治疗药物的所有优点，能从根本上改善2型糖尿病患者的症状，因此开发GLP-1作为一种I2型糖尿病治疗药物具有良好的前景。然而人体内二肽基肽酶(dipeptidyl-peptidase，DPP-IV)和中性肽链内切酶(neutral endopeptidase，NEP 24.11)会快速降解GLP-1，造成GLP-1在体内半衰期很短(1～2min)，这限制了其在临床上的应用。因此，需要我们寻找和GLP-1具有相似的生物活性，但能在体内长效作用的新型GLP-1受体激动剂。目前，大部分的GLP-1受体激动剂的研究都是在GLP-1肽序的基础上进行结构改造和化学修饰，以延长其半衰期，这在极大程度上限制了新型GLP-1受体激动剂的研发。
非洲爪蟾GLP-1(XenGLP-1)的降糖活性优于天然GLP-1，另外其特殊的氨基酸序列使其具有更好的体内稳定性，是一个优良的先导多肽。天然产物中的胆酸类化合物有比较强的血清蛋白结合率，血清白蛋白结合以后的药物与游离药物在体内产生平衡，缓慢释放实现长效化。同时血清白蛋白结合药物不易被肾小球滤过，可以避免肾脏的滤过代谢。所以，我们设计了以胆酸为母核的化合物，通过Glu和不同长度的脂肪链与XenGLP-1的肽链相连接。
发明内容
本发明涉及一类非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物，其序列为：
His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Xaa2-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Xaa3-Gly-Xaa4-Xaa5(SEQ.ID NO:1)
其中：
Xaa1:Ala，Gly或Aib；
Xaa2:Lys(cholic acid analog)或Lys；
Xaa3:Lys(cholic acid analog)或Lys；
Xaa4:Lys(cholic acid analog)或Lys；
Xaa5:Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2，Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys
-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2或-NH2；
前提是所述序列不是His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu
-Glu-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Lys-Gly-Lys-NH2,
His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr
-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Lys-Gly-Lys-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2或His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-
Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Lys-Gly-Lys-Pr o-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2；
以及该类似物所成的可药用的盐、溶剂化物、螯合物或非共价复合物，基于该类似物基础上的药物前体，或上述形式类似物的任意混合物。
其中Lys(cholic acid analog)选自
这里：n选自4～18。
其中优选的Lys(cholic acid analog)结构为
优选的XenGLP-1类似物的氨基酸序列如SEQ.ID NO:2-7所示。
本发明还提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的至少一种上述XenGLP-1类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、螯合物或非共价复合物，基于该类似物基础上的药物前体，或上述形式类似物的任意混合物，和一种或者多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明进一步提供了上述XenGLP-1类似物或其药学上可接受的盐或药物组合物在药物中的应用。
本发明涉及的XenGLP-1类似物，以liraglutide及semaglutide为对照，在体外实验中利用高度表达GLP-1受体的HEK293细胞模型，评价其体外受体激动活性。并利用人血浆温敷，评价其体外稳定性。在体内实验中，以糖尿病小鼠及肥胖小鼠为实验模型，鉴定其长效降血糖及减肥效果。体外和体内实验结果表明，本发明提供的XenGLP-1类似物具有极高的体外稳定性，并且其降血糖作用时间及减肥效果优于liraglutide及semaglutide。
本发明的优点在于：
本发明所涉及的非洲爪蟾GLP-1(XenGLP-1)类似物，由于其特殊的氨基酸序列，其体内稳定性显著的优于天然GLP-1，进一步利用胆酸修饰所得到的XenGLP-1类似物，其体内降糖作用时间和减肥作用显著优于以GLP-1肽链为主体的liraglutide及semaglutide，可以广泛的应用于糖尿病及肥胖的治疗。
附图说明
上文对本发明做了一般性描述，下面附图用于说明本发明的具体实施方案。其中：图1显示的是XenGLP-1类似物体外血浆稳定性实验的降解图；
图2显示的是XenGLP-1类似物长效降糖实验的血糖-时间曲线图；
图3显示的是XenGLP-1类似物降低体重实验的体重变化曲线图。
具体实施方式
在本说明书全文中采用以下缩写：
DMF：二甲基甲酰胺；DCM：二氯甲烷；Fmoc：N-9-芴甲氧羰基；DIC：N,N’-二异丙基碳二亚胺；HOBT：1-羟基-苯并三氮唑；TFA：三氟乙酸；EDT：二巯基乙烷；HPLC：高效液相色谱；ESI-MS：电喷雾质谱；LC-MS：液质联用质谱；Gly：甘氨酸；Ser：丝氨酸；Ala：丙氨酸；Thr：苏氨酸；Val：缬氨酸；Ile：异亮氨酸；Leu：亮氨酸；Tyr：酪氨酸；Phe：苯丙氨酸；His：组氨酸；Pro：脯氨酸；Asp：天门冬氨酸；Met：蛋氨酸；Glu：谷氨酸；Trp：色氨酸；Lys：赖氨酸；Arg：精氨酸；Asn：天冬酰胺；Gln：谷氨酰胺；Cys：半胱氨酸。
本发明是通过下列实施例来进行说明的，但这些实施例不做任何限制本发明的解释。
实施实例1
(1)树脂的溶胀
称取担载量为0.382mmol/g的Rink Amide MBHA树脂0.262g(0.1mmol)，放入25mL的反应器中，用7mL的DCM和甲醇交替清洗树脂1次，7mL的DCM清洗树脂2次，然后用7mL的DCM溶胀树脂1h，最后用7mLDMF清洗树脂3次。
(2)树脂Fmoc保护基的脱除
将溶胀后的树脂转入多肽合成仪，加入7mL 20％哌啶/DMF室温反应5min，滤去脱保护溶液，7mL DMF清洗树脂一次，再加入7mL20％哌啶/DMF脱保护清洗树脂15min，最后7mLDMF清洗树脂4次，每次1.5min，得到脱除Fmoc保护基的Rink树脂。
(3)Fmoc-Lys-Rink amide-MBHAResin的合成
称Fmoc-Lys(Boc)-OH(0.4mmol)，用3mL10％DMF/DMSO溶解，加入2ml DIC/HOBt(0.4mmol/0.44mmol)，搅拌30min后，将活化好的氨基酸加入反应器中，室温震荡反应2h，滤去反应液后用7mLDMF清洗树脂4次。
(5)肽链的延长
按照肽链的序列，重复上述脱保护和耦合的步骤依次连接上相应的氨基酸，直至肽链合成完毕。其中脂肪酸化位点的Lys使用具有特殊侧链保护基的Fmoc-Lys(Dde)-OH，N末端的His使用的是Boc-His(Boc)-OH。
(6)Lys定点胆酸化修饰
肽链合成完毕后，加入7mL2％水合肼/DMF选择性脱除胆酸化位点Lys的Dde保护基，Dde保护基脱除后加入0.4mmol的Fmoc-Glu-OtBu，0.4mmol的DIC及0.44mmol的HOBt，震荡反应2h。然后使用相同方法脱除Fmoc后，加入0.4mmol的Fmoc-6氨基己酸，0.4mmol的DIC及0.44mmol的HOBt缩合反应2h，反应完全后用7mL DMF清洗树脂4次。再使用相同脱除Fmoc保护基，加入0.4mmol的石胆酸，0.4mmol的DIC及0.44mmol的HOBt缩合反应2h，滤去反应液后用7mL DMF清洗树脂4次。
(7)多肽的裂解
将上述得到的连有多肽的树脂转移至圆底瓶中，使用切割剂Reagent R(TFA/苯甲硫醚/苯酚/EDT，90:5:3:2，V/V)5mL切割树脂，在油浴中恒温30℃反应2h，切割液倾入40ml冰***，冷冻离心后粗品用15ml冰***洗涤3次，最后用氮气吹干，得到粗肽。
(8)多肽的纯化
将目标多肽粗品溶于水中，浓度为10mg/mL，用0.25μm微孔滤膜过滤后进岛津制备型反相HPLC***纯化。色谱条件为C18反相制备柱(250mm×20mm，12μm)；流动相A：0.1％TFA/水(V/V)，流动相B：乙醇(V/V)；流速为15mL/min；检测波长为214nm。采用线性梯度(55％B～90％B/30min)洗脱，收集目标峰冻干得纯品。理论相对分子质量为4101.2。ESI-MSm/z:calu[M+3H]3+1368.0,[M+4H]4+1026.3；found[M+3H]3+1368.5,[M+4H]4+1026.7。
实施例2～6
根据实施例1所述的方法，根据相应的序列和侧链合成得到实施例2～6的XenGLP-1类似物，通过ESI-MS确证各自的分子量。
实施例2
理论相对分子质量为4185.3。ESI-MS m/z:calu[M+3H]3+1396.1,[M+4H]4+1047.3；found[M+3H]3+1396.8,[M+4H]4+1047.8。
实施例3
理论相对分子质量为4879.1。ESI-MS m/z:calu[M+3H]3+1627.4,[M+4H]4+1220.8；found[M+3H]3+1627.8,[M+4H]4+1221.2。
实施例4
理论相对分子质量为4963.2。ESI-MS m/z:calu[M+3H]3+1655.4,[M+4H]4+1241.8；found[M+3H]3+1655.9,[M+4H]4+1242.1。
实施例5
理论相对分子质量为5551.0。ESI-MS m/z:calu[M+3H]3+1851.3,[M+4H]4+1388.8；found[M+3H]3+1851.6,[M+4H]4+1389.3。
实施例6
理论相对分子质量为5635.1。ESI-MS m/z:calu[M+3H]3+1879.4,[M+4H]4+1409.8；found[M+3H]3+1879.6,[M+4H]4+1410.3。
实施例7
体外GLP-1受体激动实验
将编码人GLP-1受体的cDNA克隆至载体pcDNA3.0上，转染HEK293细胞，得到能稳定表达人GLP-1受体的HEK293细胞。细胞在DMEM-31053培养基中培养，实验2h前将HEK293细胞重新悬浮于生长培养基中并接种在96孔板中。将liraglutide，semaglutide和SEQ.ID NO:2-7用DMSO溶解后按照1pM-1000nM的浓度梯度稀释后加入96孔板中，然后在室温下孵育20分钟后使用cAMP试剂盒在Envision2104酶标仪中测定生成的cAMP的量，分析数据，计算化合物的EC50值。如表1所示，所有XenGLP-1类似物的受体激动活性都优于liraglutide和semaglutide，C末端经过修饰的XenGLP-1类似物的受体激动活性高于C末端未经修饰的XenGLP-1类似物。
表1Liraglutide，semaglutide和XenGLP-1类似物的体外活性
实施例8
XenGLP-1类似物的体外血浆稳定性实验
大鼠眼球取血，血液装入含有肝素的离心管中，3000rpm离心10分钟，取上清血浆作为温孵血浆，利用LC-MS来检测化合物的响应信号。100uL的liraglutide，semaglutide及SEQ.ID NO:2-7溶液与100uL的血浆，涡旋混合后置入37℃水浴中，温孵96小时，在0，12，24，48，72，96h时间点取10uL，加入20uL乙腈沉淀，14000rpm离心，取上清液进LC-MS，计算各个时间点的峰面积，做出衰减曲线，计算半衰期。如图1所示，liraglutide和semaglutide的半衰期分别为16.9及41.0h，而所有的XenGLP-1类似物的半衰期全部在72h以上，其中部分XenGLP-1类似物的半衰期已经超过96h。
实施例9
XenGLP-1类似物的长效降糖实验
8周龄db/db糖尿病模型小鼠，适应性饲养一周，血糖仪测定小鼠的血糖值高于20mmol/L后，随机分组，每组六只。分为阳性对照组liraglutide和semaglutide(25nmol/kg)，阴性对照组生理盐水，化合物组SEQ.ID NO:2-7(25nmol/kg)。小鼠自由饮水、饮食，0h给予化合物，在0，6，12，24，48，72h用血糖仪测定血糖，做出时间-血糖曲线。如图2所示，XenGLP-1类似物的长效降糖活性显著的优于liraglutide和semaglutide，所有XenGLP-1类似物的降糖时间都超过72h。
实施例10
XenGLP-1类似物的降低体重实验
9周龄db/db糖尿病模型小鼠，适应性饲养一周，随机分组，每组6只。小鼠每天给予阳性对照liraglutide和semaglutide(25nmol/kg)，阴性对照生理盐水，给药组每天给予SEQ.ID NO:2-7(25nmol/kg)，治疗周期40天，每10天检测一次小鼠的体重。如图3所示，XenGLP-1类似物能显著降低小鼠的体重，它们的体重减轻作用显著优于阳性对照liraglutide和semaglutide，表明了XenGLP-1类似物具有良好的治疗糖尿病和减肥的药用前景。
序列表
<110> 江苏师范大学
<120> 胆酸-非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1缀合肽及其应用
<160> 7
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 31
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (2)..(2)
<223> 第2位的Xaa是Ala，Gly或Aib
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)或Lys
<220>
<221> VARIANT
<222> (28)..(28)
<223> 第28位的Xaa是Lys (cholic acid analog)或Lys
<220>
<221> VARIANT
<222> (30)..(30)
<223> 第13位的Xaa是Lys (cholic acid analog)或Lys
<220>
<221> VARIANT
<222> (31)..(31)
<223> 第31位的Xaa是 Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-NH2，Pro Ser SerGly Ala Pro Pro Ser Lys Lys Lys Lys Lys Lys-NH2，或-NH2
<220>
<221> UNSURE
<222> (2)..(2)
<223> The 'Xaa' at location 2 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<220>
<221> UNSURE
<222> (28)..(28)
<223> The 'Xaa' at location 28 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<220>
<221> UNSURE
<222> (30)..(30)
<223> The 'Xaa' at location 30 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<220>
<221> UNSURE
<222> (31)..(31)
<223> The 'Xaa' at location 31 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 1
His Xaa Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Xaa Gly Xaa Xaa
20 25 30
<210> 2
<211> 30
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 2
His Gly Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Lys Gly Lys
20 25 30
<210> 3
<211> 30
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 3
His Gly Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Lys Gly Lys
20 25 30
<210> 4
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)
<220>
<221> VARIANT
<222> (31)..(31)
<223> 第31位的Xaa是Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-NH2
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 4
His Gly Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Lys Gly Lys Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 5
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)
<220>
<221> VARIANT
<222> (31)..(31)
<223> 第31位的Xaa是Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-NH2
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 5
His Gly Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Lys Gly Lys Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 6
<211> 44
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)
<220>
<221> VARIANT
<222> (31)..(31)
<223> 第31位的Xaa是Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Ser Lys Lys Lys Lys LysLys-NH2
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 6
His Gly Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Lys Gly Lys Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Ser Lys Lys Lys Lys Lys Lys
35 40
<210> 7
<211> 44
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<221> VARIANT
<222> (20)..(20)
<223> 第20位的Xaa是Lys (cholic acid analog)
<220>
<221> VARIANT
<222> (31)..(31)
<223> 第31位的Xaa是Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Ser Lys Lys Lys Lys LysLys-NH2
<220>
<221> UNSURE
<222> (20)..(20)
<223> The 'Xaa' at location 20 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.
<400> 7
His Gly Glu Gly Thr Tyr Thr Asn Asp Val Thr Glu Tyr Leu Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Ala Xaa Glu Phe Ile Glu Trp Leu Ile Lys Gly Lys Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Ser Lys Lys Lys Lys Lys Lys
35 40

Claims (7)

1.一种含有式Ⅰ(SEQ.ID NO：1)结构的非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物，其序列为：
His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Xaa2-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Xaa3-Gly-Xaa4-Xaa5(SEQ.ID NO:1)
其中：
Xaa1:Ala，Gly或Aib；
Xaa2:Lys(cholic acid analog)或Lys；
Xaa3:Lys(cholic acid analog)或Lys；
Xaa4:Lys(cholic acid analog)或Lys；
Xaa5:Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2，Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2或-NH2；
前提是所述序列不是His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Lys-Gly-Lys-NH2,His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Lys-Gly-Lys-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2或His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Lys-Gly-Lys-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2；
以及该类似物所成的可药用的盐、溶剂化物、螯合物或非共价复合物，基于该类似物基础上的药物前体，或上述形式类似物的任意混合物。
2.根据权利要求1所述的肽，其中Lys(cholic acid analog)选自
这里：n选自4～18。
3.根据权利要求2所述，其中优选的Lys(cholic acid analog)结构为
。
4.根据权利要求1所述的非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物，优选的序列为：
。
5.一种药物组合物，包括治疗有效量的权利要求1中所述的非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、螯合物或非共价复合物，基于该类似物基础上的药物前体，或上述形式类似物的任意混合物，和一种或者多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
6.权利要求1中所述的非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物或其药学上可接受的盐或权利要求5中所述的药物组合物在药物中的应用。
7.权利要求6中所述的应用，包括所述类似物或药物组合物在制备治疗下述至少一种疾病的药物中的应用，所述疾病包括2型糖尿病、糖耐量受损、1型糖尿病、肥胖、高血压、代谢综合征、血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗塞、冠状动脉心脏病、心血管疾病、中风、炎性肠道综合征或消化不良。
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