CN107568603A - 一种纳豆粉微胶囊的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种纳豆粉微胶囊的制备方法，所述方法以纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌发酵制备纳豆。（1）本发明所述微胶囊具有高纳豆激酶保留量，酶活性高，与冷冻产品品质接近；（2）本发明所述微胶囊在室温、自然光条件下贮存半年后，纳豆激酶保留率仍可达90%以上；（3）本发明所述微胶囊具有缓释的作用，保证纳豆激酶在体内充分发挥作用。
Description
技术领域
本发明属于食品技术领域，涉及一种保健食品，具体为一种纳豆粉微胶囊的制备方法。
背景技术
纳豆，是指以大豆为原料经纳豆枯草芽孢杆菌发酵而成盛行于日本的传统发酵大豆食品。成熟纳豆色泽金黄覆有一层粘性物质，挑起时有长长的拉丝状物质，它风味独特，营养丰富，具有多种保健功能。纳豆源于中国，类似中国的豆豉，藤原明衡著《新猿乐记》中称其为唐纳豆。日本的奈良时代，由遣唐使高僧们不断将豆类食品的制作方法从中国传播到日本。由于发酵方法不同，纳豆分为咸纳豆与拉丝纳豆，其中拉丝纳豆发酵后熟过程出现一种黏丝，是不放盐的。据须见洋行博士测定纳豆的主要成分是：水分、粗蛋白、粗脂肪、碳水化合物、粗纤维、灰分。食用纳豆有利于消化、抗氧化缓衰老、辅助糖尿病的防治、解酒醉、利于肝脏解毒功能的提高、预防心血管疾病、防癌抗癌等益处。因此，纳豆被誉为世纪的“超级健康食品”。
在日本，纳豆作为一种药食同源的食品，其食用方式多为鲜食，我国虽然大豆资源丰富，近年来已开发出多种纳豆产品，如纳豆浆、纳豆饮料、纳豆口服液、纳豆冲剂、纳豆粉、纳豆咀嚼片、纳豆冻干粉和纳豆活性胶囊等，但纳豆独特的氨臭味并不适应中国消费者的口感需求，同时传统湿纳豆需要冷冻保藏，贮藏时间较短，随着贮藏时间的延长，纳豆激酶活性和纳豆菌数降低，纳豆品质明显下降以致腐败。
纳豆激酶是由纳豆杆菌分泌的一种可溶解血栓的中性丝氨酸纤维蛋白酶，可水解纤维蛋白成小肽和氨基酸，研究表明，它不仅能直接作用于纤维蛋白，而且还可以激活体内的t-PA，从而表现出很强的溶血栓作用，对血栓的作用时间长。此外，纳豆激酶能被小肠吸收，其在肠道内稳定，具有抗胰酶水解能力，而且安全、无副作用。
但是，现有技术中的纳豆生产都存在发酵过程中工程菌与底物间的接触面积小，菌株对底物的转化效率低，单位纳豆粉的有效活性成分含量低，每克产品的活性单位比较小，因而转化效率低。
发明内容
本发明解决的技术问题：为了克服现有技术的缺陷，获得一种具有高纳豆激酶保留量的方法，本发明提供了一种纳豆粉微胶囊的制备方法。
技术方案：一种纳豆粉微胶囊的制备方法，包括以下步骤：
（1）除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过50～100目筛，按容器体积的1/10～1/5装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌20～45分钟；
（2）向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:3～8混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的6%～10%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取1～3份纳豆样品放入灭菌试管中，加入9～12份灭菌生理盐水振荡3～5分钟，在沸水浴中加热8～10分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1000～1200转/分钟离心5～8分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释1000～10000倍，取50～100μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养18～24小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养18～24小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存；
（3）将接种好的豆粉放置在28～37℃培养箱中培养12～18小时，通入空气继续培养20～40小时，收集发酵产物；
（4）将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为2%～6%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过80～120目筛；
（5）以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.2～0.4g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1:6～10的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
优选的，步骤（1）中除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过80目筛，按容器体积的1/8装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌30分钟。
优选的，步骤（2）中向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:6混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的8%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取2份纳豆样品放入灭菌试管中，加入11份灭菌生理盐水振荡3分钟，在沸水浴中加热10分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1200转/分钟离心6分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释5000倍，取80μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养20小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养22小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存。
优选的，步骤（3）中将接种好的豆粉放置在37℃培养箱中培养16小时，通入空气继续培养36小时，收集发酵产物。
优选的，步骤（4）中将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为5%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过100目筛。
优选的，步骤（5）中以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.3g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1:8的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
有益效果：（1）本发明所述微胶囊具有高纳豆激酶保留量，酶活性高，与冷冻产品品质接近；（2）本发明所述微胶囊在室温、自然光条件下贮存半年后，纳豆激酶保留率仍可达90%以上；（3）本发明所述微胶囊具有缓释的作用，保证纳豆激酶在体内充分发挥作用。
具体实施方式
实施例1
一种纳豆粉微胶囊的制备方法，包括以下步骤：
（1）除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过50目筛，按容器体积的1/10装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌20分钟；
（2）向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:3混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的6%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取1份纳豆样品放入灭菌试管中，加入9份灭菌生理盐水振荡3分钟，在沸水浴中加热8分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1000转/分钟离心5分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释1000倍，取50μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养18小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养18小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存；
（3）将接种好的豆粉放置在28℃培养箱中培养12小时，通入空气继续培养20小时，收集发酵产物；
（4）将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为2%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过80目筛；
（5）以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.2g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1:6的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
实施例2
一种纳豆粉微胶囊的制备方法，包括以下步骤：
（1）除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过80目筛，按容器体积的1/8装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌30分钟；
（2）向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:6混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的8%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取2份纳豆样品放入灭菌试管中，加入11份灭菌生理盐水振荡3分钟，在沸水浴中加热10分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1200转/分钟离心6分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释5000倍，取80μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养20小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养22小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存。
（3）将接种好的豆粉放置在37℃培养箱中培养16小时，通入空气继续培养36小时，收集发酵产物。
（4）将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为5%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过100目筛。
（5）以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.3g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1:8的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
实施例3
一种纳豆粉微胶囊的制备方法，包括以下步骤：
（1）除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过100目筛，按容器体积的1/5装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌45分钟；
（2）向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:8混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的10%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取3份纳豆样品放入灭菌试管中，加入12份灭菌生理盐水振荡5分钟，在沸水浴中加热10分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1200转/分钟离心8分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释10000倍，取100μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养24小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养24小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存；
（3）将接种好的豆粉放置在37℃培养箱中培养18小时，通入空气继续培养40小时，收集发酵产物；
（4）将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为6%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过120目筛；
（5）以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.4g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1: 10的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
对实施例1～3所述方法制得的微胶囊进行检测，结果如下：
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | |
| 包埋率（%） | 91.2 | 96.5 | 93.7 |
| 纳豆激酶保留率（%） | 92.1 | 98.7 | 95.6 |
| 6个月纳豆激酶保留率（%） | 91.3 | 97.2 | 94.5 |
Claims (6)
1.一种纳豆粉微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过50～100目筛，按容器体积的1/10～1/5装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌20～45分钟；
（2）向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:3～8混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的6%～10%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取1～3份纳豆样品放入灭菌试管中，加入9～12份灭菌生理盐水振荡3～5分钟，在沸水浴中加热8～10分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1000～1200转/分钟离心5～8分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释1000～10000倍，取50～100μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养18～24小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养18～24小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存；
（3）将接种好的豆粉放置在28～37℃培养箱中培养12～18小时，通入空气继续培养20～40小时，收集发酵产物；
（4）将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为2%～6%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过80～120目筛；
（5）以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.2～0.4g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1:6～10的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
2.根据权利要求1所述的一种纳豆粉微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（1）中除去黄豆中杂质，洗净，烘去表面水分，然后粉碎，过80目筛，按容器体积的1/8装量装入豆粉，封口膜封口，高温灭菌30分钟。
3.根据权利要求1所述的一种纳豆粉微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（2）中向步骤（1）获得的豆粉中喷洒纯化后的纳豆枯草芽孢杆菌与生理盐水按1:6混合的溶液，纳豆芽孢杆菌接种量占豆粉的8%；所述纳豆枯草芽孢杆菌由以下方法纯化获得：
A、按重量份计，称取2份纳豆样品放入灭菌试管中，加入11份灭菌生理盐水振荡3分钟，在沸水浴中加热10分钟，杀灭各种不耐热的杂菌，以转速1200转/分钟离心6分钟，取上清；
B、将步骤A中的上清液稀释5000倍，取80μL的稀释液涂布于酪素培养基平板，37℃倒置培养20小时；
C、挑取步骤B培养后的单菌落，点种于酪蛋白培养基上，在37℃恒温培养箱中倒置培养22小时，选取单菌落蛋白水解圈较大的菌株作为最终分离得到的菌株，斜面4℃保存。
4.根据权利要求1所述的一种纳豆粉微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（3）中将接种好的豆粉放置在37℃培养箱中培养16小时，通入空气继续培养36小时，收集发酵产物。
5.根据权利要求1所述的一种纳豆粉微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（4）中将步骤（3）收集的发酵产物进行冷冻干燥，至含水量为5%，然后经高速中草药粉碎机粉碎制得纳豆粉，过100目筛。
6.根据权利要求1所述的一种纳豆粉微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（5）中以麦芽糊精和***胶为壁材，壁材浓度为0.3g/mL，加入100℃水溶解，然后按纳豆粉∶壁材质量比为1:8的比例加入纳豆粉，并加入2%乳化剂，高速搅拌使三者混合均匀，放置至充分溶胀，形成乳化分散液；该乳化分散液通过喷雾干燥机，在热气流的作用下雾化成微细液滴，溶剂受热迅速蒸发，使包覆在微细化芯材周围的壁材形成具有筛分作用的网状膜结构，分子较大的芯材被包留在形成的囊腔内，而壁材中的水分因热蒸发而透过网孔，使膜进一步干燥固化，得到干燥粉粒状纳豆粉微胶囊。
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180112 |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |