CN107372104A - 一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法 - Google Patents

一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，具体步骤为：A、从姜块切下新芽后对新芽进行消毒处理，消毒完后用无菌水冲洗材料3次，然后按无菌操作要求取0.5～1.0mm左右大小的无菌外植体，即为无菌无毒芽；B、在超净工作台上，将取得的无菌无毒芽接种在诱导培养基，PH5.8～6.0，经一个月，形成小生姜；C、将取得的小生姜转接到增殖培养基，PH5.8～6.0,待小生姜直接形成小苗；D、待小苗长到5厘米左右，移出增殖培养基进行炼苗，炼苗第一星期要求80％以上湿度，然后在一周内逐步降低直至自然状态，一个月后炼苗结束，然后再移植大田，形成种姜。本发明简单无公害，极大缩短生产周期，降低生产成本，效果显著。

Description

一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及植物繁殖技术领域，尤其涉及一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法。
背景技术
姜具有很高的药用、食用及经济价值，是我国重要的经济作物之一。近年来，生姜消费量越来越大，生姜生产效益日渐增加，栽培面积逐年扩大，已遍及全国各地。由于姜不开花或很少开花，不能利用有性繁殖进行育种，其种质资源的繁殖和保存主要依靠用种姜作繁殖材料在每年进行田间种植。这不仅繁殖系数低、费用高，还由于自然灾害和病虫害的危害有可能导致资源材料的丢失。加上长期的营养繁殖，己造成生姜的种性退化和感病严重，致使品质和产量下降，品质退化，抗逆性下降，对生姜生产构成严重威胁，同时，生姜易通过带病种姜传播病害，尤其是姜青枯腐烂病，又称姜瘟，在世界各生姜产区均有发生，严重制约了姜的生产和发展。目前尚无理想的杀菌药剂和抗菌品种，只能以农业防治措施如选用抗(耐)性品种、进行种姜药剂消毒以及土壤消毒、轮作换茬等为主，辅以药剂防治，但效果不理想。
离体快速繁殖技术具有不受季节和环境限制等优点，且繁殖系数高，速度快。利用组培脱菌技术，获得脱菌生姜种苗，能克服种性退化，提高抗逆抗性，有效防治植物病害。脱菌姜种分为三代即原原种、原种和生产种，生产种可在生产中应用，有效期为3年，3年后需要更换1次。由通过脱菌能使姜的增产幅度达到30％以上，而且苗生长快、长势旺、抗性强；生产出的姜外观色泽好。所以通过脱菌不仅能提高产量，同时能提高姜的质量和价格。
现有也有一些生姜快速繁殖方法，例如中国专利号为201310301668.5的生姜一步成脱毒苗快速繁殖方法，其采用了常规的MS培养基，该MS培养基的配方为(单位：mg/L)：
NH4NO3 1650
KNO3 1900
CaCl2·2H2O 440
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 170
KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O 27.8
Na2-EDTA·2H2O 37.3
肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇 0.5
盐酸硫胺素 0.1
甘氨酸 2.0。
然而该繁殖方法仍然较为繁琐，有待改进。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种利用姜芽进行生姜脱毒、脱菌的组培快繁生产方法。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，具体步骤为：
A、从姜块切下新芽后对新芽进行消毒处理，消毒完后用无菌水冲洗材料3次，然后按无菌操作要求取0.5～1.0mm左右大小的无菌外植体，即为无菌无毒芽；
B、在超净工作台上，将取得的无菌无毒芽接种在诱导培养基，诱导培养基为：改良MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L+Sugar30g/L+琼脂7.5g/L，PH5.8～6.0，经一个月，形成小生姜；
C、将取得的小生姜转接到增殖培养基，增殖培养基为：改良MS+6-BA1mg/L+NAA1mg/L+Sugar30g/L，PH5.8～6.0,待小生姜直接形成小苗；该步骤既可以增殖，同时又可以长根，可省去长根这一步，一步成苗直接形成小苗；
D、待小苗长到5厘米左右，移出增殖培养基进行炼苗，炼苗第一星期要求80％以上湿度，然后在一周内逐步降低直至自然状态，一个月后炼苗结束，然后再移植大田，形成种姜。
所述步骤B和C中的改良MS的配方为(单位：mg/L)：
KNO3 3800
CaCl2·2H2O 880
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 170
KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O 27.8
Na2-EDTA·2H2O 37.3
肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇 0.5
盐酸硫胺素 0.1
甘氨酸 2.0。
所述步骤A中的消毒处理使用的消毒剂为75％的酒精或30％的漂白粉，消毒处理过程在有盖的瓶子中进行，摇动瓶子进行消毒。
所述无菌水为经过高温高压灭菌的蒸馏水。
本发明的有益效果是：使用简单，无公害，极大地缩短了生产周期，降低了生产成本，效果显著。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步描述：
一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，具体步骤为：
每年春季生姜开春发芽时(即生姜发芽期)，给生姜结合种植时进行操作为好，条件不允许时，只要生姜有新芽即可。
A、从姜块切下新芽后对新芽进行消毒处理，消毒处理使用的消毒剂为75％的酒精或30％的漂白粉，消毒处理过程在有盖的瓶子中进行，摇动瓶子进行消毒，因为表面附着的气泡往往使新芽接触不到消毒剂进而成为后期的培养基中的污染源，摇动瓶子可减少气泡附着。
消毒完后用无菌水冲洗材料3次，所述无菌水为经过高温高压灭菌的蒸馏水，然后按无菌操作要求取0.5～1.0mm左右大小的无菌外植体，即为无菌无毒芽；
B、在超净工作台上，将取得的无菌无毒芽接种在诱导培养基，诱导培养基为：改良MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L+Sugar30g/L+琼脂7.5g/L，PH5.8～6.0，经一个月，形成小生姜；
C、将取得的小生姜转接到增殖培养基，增殖培养基为：改良MS+6-BA1mg/L+NAA1mg/L+Sugar30g/L，PH5.8～6.0,待小生姜直接形成小苗；该步骤既可以增殖，同时又可以长根，可省去长根这一步，一步成苗直接形成小苗，该增殖培养基不仅省去了琼脂，使用液体培养基，降低20％的生产成本，效益可观；而且使增值率增加1倍，具体为每个芽每月可以产生5个新芽，按此计算，一年十二个月，一个芽可以生产2个亿。
D、待小苗长到5厘米左右，移出增殖培养基进行炼苗，炼苗第一星期要求80％以上湿度，然后在一周内逐步降低直至自然状态，一个月后炼苗结束，然后再移植大田，形成种姜。
所述步骤B和C中的改良MS的配方为(单位：mg/L)：
KNO3 3800
CaCl2·2H2O 880
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 170
KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O 27.8
Na2-EDTA·2H2O 37.3
肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇 0.5
盐酸硫胺素 0.1
甘氨酸 2.0。
培养过程使用改良MS，并配合激素使用，不仅克服了生姜培养过程中的褐化问题，又使生姜可以一步成苗。本发明的改良MS中的KNO3和CaCl2·2H2O的量加倍，省去了NH4NO3,其他与常规的MS培养基一样。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，其特征在于，具体步骤为：
A、从姜块切下新芽后对新芽进行消毒处理，消毒完后用无菌水冲洗材料3次，然后按无菌操作要求取0.5～1.0mm左右大小的无菌外植体，即为无菌无毒芽；
B、在超净工作台上，将取得的无菌无毒芽接种在诱导培养基，诱导培养基为：改良MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L+Sugar30g/L+琼脂7.5g/L，PH5.8～6.0，经一个月，形成小生姜；
C、将取得的小生姜转接到增殖培养基，增殖培养基为：改良MS+6-BA1mg/L+NAA1mg/L+Sugar30g/L，PH5.8～6.0,待小生姜直接形成小苗；
D、待小苗长到5厘米左右，移出增殖培养基进行炼苗，炼苗第一星期要求80％以上湿度，然后在一周内逐步降低直至自然状态，一个月后炼苗结束，然后再移植大田，形成种姜。
2.如权利要求1所述一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤B和C中的改良MS的配方为(单位：mg/L)：
KNO3 3800
CaCl2·2H2O 880
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 170
KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O 27.8
Na2-EDTA·2H2O 37.3
肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇 0.5
盐酸硫胺素 0.1
甘氨酸 2.0。
3.如权利要求1或2所述一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤A中的消毒处理使用的消毒剂为75％的酒精或30％的漂白粉，消毒处理过程在有盖的瓶子中进行，摇动瓶子进行消毒。
4.如权利要求3所述一种生姜脱毒脱菌的快速繁殖方法，其特征在于，所述无菌水为经过高温高压灭菌的蒸馏水。
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***等: "姜组织培养研究进展", 《中国蔬菜》 *

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