CN107271577A - 一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法 - Google Patents
一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107271577A CN107271577A CN201610221747.9A CN201610221747A CN107271577A CN 107271577 A CN107271577 A CN 107271577A CN 201610221747 A CN201610221747 A CN 201610221747A CN 107271577 A CN107271577 A CN 107271577A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- acid
- need testing
- testing solution
- medicinal material
- glycosides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 41
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 title claims abstract description 41
- PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N Stilbene Natural products C=1C=CC=CC=1/C=C/C1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 235000021286 stilbenes Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 241001251949 Xanthium sibiricum Species 0.000 title claims abstract description 33
- PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N stilbene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C=CC1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 33
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 241001260012 Bursa Species 0.000 title claims abstract description 12
- -1 flavone compound Chemical class 0.000 claims abstract description 37
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 36
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims abstract description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 claims abstract description 9
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 claims abstract description 7
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 claims abstract description 6
- RXHIKAIVEMAPRU-JRIGQVHBSA-N sequiterpene Natural products C1=C(C)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](O)[C@@]2(O)[C@H](C)CC[C@@H](C(C)=C)[C@H]21 RXHIKAIVEMAPRU-JRIGQVHBSA-N 0.000 claims abstract description 6
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229930182493 triterpene saponin Natural products 0.000 claims abstract description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 51
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 37
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 31
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 27
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 25
- ZZAJQOPSWWVMBI-UHFFFAOYSA-N Calycosin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZZAJQOPSWWVMBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 18
- QUQPHWDTPGMPEX-UHFFFAOYSA-N Hesperidine Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1OC2=CC(OC3C(C(O)C(O)C(COC4C(C(O)C(O)C(C)O4)O)O3)O)=CC(O)=C2C(=O)C1 QUQPHWDTPGMPEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N (R)-rosmarinic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N 0.000 claims description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 15
- 235000018905 epimedium Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 15
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 13
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 claims description 12
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 12
- TZJALUIVHRYQQB-UHFFFAOYSA-N icariine Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(OC2C(C(O)C(O)C(C)O2)O)C(=O)C2=C(O)C=C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CC=C(C)C)=C2O1 TZJALUIVHRYQQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 11
- TZJALUIVHRYQQB-XLRXWWTNSA-N icariin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(O[C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O2)O)C(=O)C2=C(O)C=C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C(CC=C(C)C)=C2O1 TZJALUIVHRYQQB-XLRXWWTNSA-N 0.000 claims description 11
- 241001016310 Epimedium grandiflorum Species 0.000 claims description 10
- 244000197580 Poria cocos Species 0.000 claims description 10
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 claims description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 10
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 claims description 9
- 239000009636 Huang Qi Substances 0.000 claims description 9
- TZJALUIVHRYQQB-XFDQAQKOSA-N Icariin Natural products O(C)c1ccc(C2=C(O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O3)C(=O)c3c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)c(C/C=C(\C)/C)c3O2)cc1 TZJALUIVHRYQQB-XFDQAQKOSA-N 0.000 claims description 9
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 9
- 235000008599 Poria cocos Nutrition 0.000 claims description 9
- QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N astragaloside IV Natural products CC(C)(O)[C@@H]1CC[C@@](C)(O1)[C@H]2[C@@H](O)C[C@@]3(C)[C@@H]4C[C@H](O[C@@H]5O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]5O)[C@H]6C(C)(C)[C@H](CC[C@@]67C[C@@]47CC[C@]23C)O[C@@H]8OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]8O QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N 0.000 claims description 9
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 claims description 9
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 claims description 9
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 claims description 9
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 claims description 9
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 9
- PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N cyclosieversioside F Natural products CC(C)(O)C1COC(C)(C1)C2C(O)CC3(C)C4CC(OC5OC(CO)C(O)C(O)C5O)C6C(C)(C)C(CCC67CC47CCC23C)OC8OCC(O)C(O)C8O PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 9
- DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N rosemarinic acid Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)C=CC=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N 0.000 claims description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 9
- VLIJLDDNWRAHNU-UHFFFAOYSA-N Atractyloside A Natural products CC(C)(O)C1CCC(O)(COC2OC(CO)C(O)C(O)C2O)C3CC(=O)C(C)(O)C3C1 VLIJLDDNWRAHNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- MGJLSBDCWOSMHL-WFMNFSIZSA-N Ononin Natural products O(C)c1ccc(C=2C(=O)c3c(OC=2)cc(O[C@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O2)cc3)cc1 MGJLSBDCWOSMHL-WFMNFSIZSA-N 0.000 claims description 8
- ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N Rosmarinsaeure Natural products OC(=O)[C@H](Cc1cccc(O)c1O)OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2 ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims description 8
- QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N astragaloside IV Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N 0.000 claims description 8
- CNHOGQMRRDHYGI-NJCGARBWSA-N beta-onocerin Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CCC(C)=C2CCC1=C(C)CC[C@@H]2[C@]1(C)CC[C@H](O)C2(C)C CNHOGQMRRDHYGI-NJCGARBWSA-N 0.000 claims description 8
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 claims description 8
- MGJLSBDCWOSMHL-MIUGBVLSSA-N ononin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=CC=C2C1=O MGJLSBDCWOSMHL-MIUGBVLSSA-N 0.000 claims description 8
- MGJLSBDCWOSMHL-UHFFFAOYSA-N ononoside Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)=CC=C2C1=O MGJLSBDCWOSMHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000005412 red sage Nutrition 0.000 claims description 8
- TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N rosmarinic acid Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=Cc2ccc(O)c(O)c2)C=O TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QNBLVYVBWDIWDM-BSLJOXIBSA-N Atractyloside A Chemical compound CC(C)([C@H]1C[C@H]2[C@](C)(O)C(=O)C[C@@H]2[C@@](O)(CO)CC1)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QNBLVYVBWDIWDM-BSLJOXIBSA-N 0.000 claims description 7
- IYCPMVXIUPYNHI-UHFFFAOYSA-N Icariside I Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CC=C(C)C)=C2O1 IYCPMVXIUPYNHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Substances CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 7
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 6
- LAWPHHZXTUPSDG-UHFFFAOYSA-N Astragaloside I Natural products CC(=O)OC1C(O)COC(OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C)(CCC6(O)C7(C)CCC(O7)C(C)(C)O)C5CC(OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C4C2(C)C)C1OC(=O)C LAWPHHZXTUPSDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- KXHCYYSIAXMSPA-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-I Chemical compound CC(=O)OC1C(OC(=O)C)C(O)COC1OC1C(C)(C)C2C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)CC3C4(C)CC(O)C(C5(C)OC(CC5)C(C)(C)O)C4(C)CCC43CC42CC1 KXHCYYSIAXMSPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 claims description 5
- 241000893536 Epimedium Species 0.000 claims description 5
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 claims description 5
- HJCCJZGOBHFQSX-UHFFFAOYSA-N cyclosieversioside B Natural products CC(CCC(O)C(C)(C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2C(CC3(C)C4CC(O)C5C(C)(C)C(CCC56CC46CCC23C)OC7OCC(O)C(O)C7O)OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O HJCCJZGOBHFQSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 5
- PAFLSMZLRSPALU-MRVPVSSYSA-N (2R)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)lactic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 PAFLSMZLRSPALU-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 4
- NLVBYGTTYRFJKH-UHFFFAOYSA-N 3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-5-hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-8-(3-methylbut-2-enyl)-7-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(C)O2)O)C(=O)C2=C(O)C=C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CC=C(C)C)=C2O1 NLVBYGTTYRFJKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000010110 Astragalus glycyphyllos Nutrition 0.000 claims description 4
- PAFLSMZLRSPALU-QMMMGPOBSA-N Danshensu Natural products OC(=O)[C@@H](O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 PAFLSMZLRSPALU-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- PAFLSMZLRSPALU-UHFFFAOYSA-N Salvianic acid A Natural products OC(=O)C(O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 PAFLSMZLRSPALU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- 238000002013 hydrophilic interaction chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 4
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 4
- XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;formic acid Chemical compound CC#N.OC=O XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- FDABVSXGAMFQQH-XZWHSSHBSA-N berbamunine Chemical compound CN1CCC2=CC(OC)=C(O)C=C2[C@H]1CC1=CC=C(O)C(OC2=CC=C(C=C2)C[C@@H]2N(C)CCC=3C=C(C(=CC=32)O)OC)=C1 FDABVSXGAMFQQH-XZWHSSHBSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 3
- 229930182721 icariside Natural products 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 3
- UYCAUPASBSROMS-AWQJXPNKSA-M sodium;2,2,2-trifluoroacetate Chemical compound [Na+].[O-][13C](=O)[13C](F)(F)F UYCAUPASBSROMS-AWQJXPNKSA-M 0.000 claims description 3
- CWVRJTMFETXNAD-BMNNCGMMSA-N (1s,3r,4s,5r)-3-[(e)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)prop-2-enoyl]oxy-1,4,5-trihydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-BMNNCGMMSA-N 0.000 claims description 2
- SOXUSBQFIOBYJU-VPIXDIMLSA-N (2r)-2-[(e)-3-[2-[(e)-3-[(1r)-1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-3-oxoprop-1-en-2-yl]-3,4-dihydroxyphenyl]prop-2-enoyl]oxy-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C(=C(O)C(O)=CC=1)\C(=C/C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C(=O)O[C@H](CC=1C=C(O)C(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SOXUSBQFIOBYJU-VPIXDIMLSA-N 0.000 claims description 2
- IYCPMVXIUPYNHI-WPKKLUCLSA-N 3,5-dihydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-8-(3-methylbut-2-enyl)-7-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C(CC=C(C)C)=C2O1 IYCPMVXIUPYNHI-WPKKLUCLSA-N 0.000 claims description 2
- JLKGXASMCRAVAK-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-II Natural products CC(=O)OC1C(O)C(O)COC1OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C)(CCC6(O)C7(C)CCC(O7)C(C)(C)O)C5CC(OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C4C2(C)C JLKGXASMCRAVAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LVBLYMQWWGLBRE-UHFFFAOYSA-N Astragaloside-II Chemical compound CC(=O)OC1C(C(COC1OC2CCC34CC35CCC6(C(C(CC6(C5CC(C4C2)OC7C(C(C(C(O7)CO)O)O)O)C)O)C8(CCC(O8)C(C)(C)O)C)C)O)O LVBLYMQWWGLBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IUCNQFHEWLYECJ-FNAJZLPOSA-L Atractyloside Chemical compound [K+].[K+].O1[C@H](CO)[C@@H](OS([O-])(=O)=O)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@]2(C)[C@@H]3CC[C@@H](C(=C)[C@@H]4O)C[C@]34CC[C@@H]2[C@H](C(O)=O)C1 IUCNQFHEWLYECJ-FNAJZLPOSA-L 0.000 claims description 2
- DJHCVWLJAINILQ-UHFFFAOYSA-N Cyclosieversioside D Natural products CC(=O)OC1C(O)C(O)COC1OC2CCC34CC35CCC6(C)C(C(O)CC6(C)C5CC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O)C4C2(C)C)C8(C)CC(CO8)C(C)(C)O DJHCVWLJAINILQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NGMYNFJANBHLKA-SENBMHEBSA-N Icariside II Natural products O(C)c1ccc(C2=C(O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O3)C(=O)c3c(O)cc(O)c(C/C=C(\C)/C)c3O2)cc1 NGMYNFJANBHLKA-SENBMHEBSA-N 0.000 claims description 2
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 claims description 2
- UMPZKDHDIZUVTO-UHFFFAOYSA-N Salvianolic acid D Natural products Cc1ccc(C=CC(=O)OC(Cc2ccc(O)c(O)c2)C(=O)O)c(CC(=O)O)c1O UMPZKDHDIZUVTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KFCMFABBVSIHTB-WUTVXBCWSA-N Salvianolic acid D Chemical compound OC(=O)CC1=C(O)C(O)=CC=C1\C=C\C(=O)O[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 KFCMFABBVSIHTB-WUTVXBCWSA-N 0.000 claims description 2
- XLXWKULPMYZQSQ-UHFFFAOYSA-N Salvianolic acid E Natural products Cc1ccc(CC(OC(=O)C(=Cc2ccc(O)c(O)c2)c3c(O)c(O)ccc3C=CC(=O)OC(Cc4ccc(O)c(O)c4)C(=O)O)C(=O)O)cc1O XLXWKULPMYZQSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FYQXODZRNSCOTR-UHFFFAOYSA-N atractyloside Natural products O1C(CO)C(OS(O)(=O)=O)C(OS(O)(=O)=O)C(OC(=O)CC(C)C)C1OC1CC2(C)C3CCC(C(=C)C4O)CC34CCC2C(C(O)=O)C1 FYQXODZRNSCOTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 2
- IXUUINNBVCUODQ-UHFFFAOYSA-N hexandraside F Natural products COc1ccc(cc1)C2=C(OC3C(O)C(C)OC(O)C3OC4OC(CO)C(O)C(O)C4O)C(=O)c5c(O)cc(OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)c(CC=C(C)C)c5O2 IXUUINNBVCUODQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NGMYNFJANBHLKA-LVKFHIPRSA-N icariside II Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(O[C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O2)O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C(CC=C(C)C)=C2O1 NGMYNFJANBHLKA-LVKFHIPRSA-N 0.000 claims description 2
- KRZBCHWVBQOTNZ-DLDRDHNVSA-N isochlorogenic acid Natural products O[C@@H]1[C@H](C[C@@](O)(C[C@H]1OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)C(=O)O)OC(=O)C=Cc3ccc(O)c(O)c3 KRZBCHWVBQOTNZ-DLDRDHNVSA-N 0.000 claims description 2
- GWTUHAXUUFROTF-UHFFFAOYSA-N pseudochlorogenic acid Natural products C1C(O)C(O)C(O)CC1(C(O)=O)OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 GWTUHAXUUFROTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CWVRJTMFETXNAD-NXLLHMKUSA-N trans-5-O-caffeoyl-D-quinic acid Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)C[C@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-NXLLHMKUSA-N 0.000 claims description 2
- 240000005342 Hypericum chinense Species 0.000 claims 1
- 240000005809 Prunus persica Species 0.000 claims 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 18
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000007963 capsule composition Substances 0.000 description 12
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 11
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 description 9
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 8
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- OVSQVDMCBVZWGM-SJWGPRHPSA-N Hyperin Natural products O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-SJWGPRHPSA-N 0.000 description 6
- FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N Hyperosid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NQYPTLKGQJDGTI-FCVRJVSHSA-N hyperoside Natural products OC[C@H]1O[C@@H](OC2=C(Oc3cc(O)cc(O)c3[C@H]2O)c4ccc(O)c(O)c4)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O NQYPTLKGQJDGTI-FCVRJVSHSA-N 0.000 description 6
- BBFYUPYFXSSMNV-UHFFFAOYSA-N quercetin-7-o-galactoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(O)=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 BBFYUPYFXSSMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- OVSQVDMCBVZWGM-DTGCRPNFSA-N quercetin 3-O-beta-D-galactopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-DTGCRPNFSA-N 0.000 description 5
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 4
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010036049 Polycystic ovaries Diseases 0.000 description 3
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 description 3
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 3
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 3
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 3
- 201000010066 hyperandrogenism Diseases 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 241000133570 Berberidaceae Species 0.000 description 2
- 244000157790 Buglossoides arvense Species 0.000 description 2
- 235000004256 Buglossoides arvense Nutrition 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 2
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 2
- 235000011135 Salvia miltiorrhiza Nutrition 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 244000132619 red sage Species 0.000 description 2
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N teicoplanin aglycone Chemical compound N([C@H](C(N[C@@H](C1=CC(O)=CC(O)=C1C=1C(O)=CC=C2C=1)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)OC=1C=C3C=C(C=1O)OC1=CC=C(C=C1Cl)C[C@H](C(=O)N1)NC([C@H](N)C=4C=C(O5)C(O)=CC=4)=O)C(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3NC(=O)[C@@H]1C1=CC5=CC(O)=C1 DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 1
- 206010002659 Anovulatory cycle Diseases 0.000 description 1
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 241000045403 Astragalus propinquus Species 0.000 description 1
- 241000984231 Atractylodes chinensis Species 0.000 description 1
- 241000132011 Atractylodes lancea Species 0.000 description 1
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241001362421 Epimedium brevicornu Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000220485 Fabaceae Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 1
- 241000207923 Lamiaceae Species 0.000 description 1
- 235000001188 Peltandra virginica Nutrition 0.000 description 1
- 241001619461 Poria <basidiomycete fungus> Species 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229940107666 astragalus root Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000005243 fluidization Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 150000004674 formic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 108700029318 rat female Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009711 regulatory function Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000008130 triterpenoid saponins Chemical class 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及一种药物的有效成分分析方法，特别涉及一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法。本发明所述的方法，包括如下步骤：(1)对照溶液的制备：(2)供试品溶液的制备：(3)有效成分的解析方法：包括黄酮类化合物、酚酸类化合物、三萜皂苷类化合物、倍半萜苷类化合物、生物碱类化合物。
Description
技术领域：
本发明涉及一种药物的有效成分分析方法，，特别涉及一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法。
背景技术：
***(polycystic ovary syndrome，PCOS)是***及育龄期女性常见的妇科疾病，在育龄期妇女中的发病率大约是6％～10％。中医学认为PCOS的病机为“天癸失序、痰壅胞宫”，与脾肾功能失常有关。现代医学研究发现PCOS是由于下丘脑-垂体-卵巢轴调节功能异常，从而导致内分泌紊乱，出现以高雄激素血症、胰岛素抵抗及***障碍为主要特征，临床表现为闭经、***、肥胖、多毛的四联症。
芪苓温肾消囊方(原名补肾化痰方)是治疗PCOS的多年临床经验方，由黄芪Astragali Radix、淫羊藿Epimedii Herba、苍术Atractylodis Rhizoma、茯苓Poria、丹参Salviae Miltiorrhizae Radix 5味药材组成，具有补肾化痰、健脾祛湿、调经止痛等功效，临床随症加减使用，疗效显著。具体的处方为：黄芪30-50份、淫羊藿10-30份、苍术10-30份、茯苓30-50份、丹参10-30份。制备方法为按重量配比称取各原料药，各原料药用水煎煮，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩成55-60℃热测时相对密度为1.20-1.35的清膏，加入制剂成型的辅料或赋形剂，制剂成型，即得。
尹倩等(尹倩,侯丽辉,刘颖华,等.补肾化痰方对***患者高雄激素血症影响的临床观察[J].上海中医药杂志,2015,49(8):53-55.)利用补肾化痰方对患者进行治疗，比较内分泌指标，结果显示，治疗组疗效显著，可明显改善高雄激素血症，促进***。常惠等(常惠,匡洪影,丛晶,等.补肾化痰复方颗粒对孕期高雄激素血症大鼠雌性子代生殖内分泌的影响[J].中华中医药杂志,2011,26(12):2872-2875.)利用补肾化痰方对孕期高雄激 素血症大鼠进行治疗，发现其能降低雄激素水平，逆转卵巢的多囊改变，改善***功能。梁晨等(梁晨,丛晶,常惠,等.补肾化痰复方对***模型大鼠卵巢内胰岛素信号传导分子的调控[J].中国中西医结合杂志,2011,31(12):1639-1644.)通过实验发现补肾化痰方能改善胰岛素抵抗及糖脂代谢功能，可能与胰岛素信号传导分子蛋白表达的调控有关。
目前针对芪苓温肾消囊方的物质基础研究鲜有报道。本发明采用UPLC-ESI-IT-TOF/MS分析方法对其化学成分进行全面的研究，并对部分特征成分来源进行了指认，为其物质基础及质量标准研究提供指导。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种芪苓温肾消囊制剂有效成分的分析方法，该方法能够快速检测出芪苓温肾消囊制剂的有效成分。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种芪苓温肾消囊制剂有效成分的分析方法，包括如下步骤：
(1)对照溶液的制备：
(2)供试品溶液的制备：
(3)有效成分的解析方法：包括黄酮类化合物、酚酸类化合物、三萜皂苷类化合物、倍半萜苷类化合物、生物碱类化合物。
所述步骤(1)对照溶液的制备：称取适量的绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、金丝桃苷、迷迭香酸、紫草酸、芒柄花苷、丹酚酸A、淫羊藿苷、芒柄花素、黄芪甲苷、宝霍苷I、箭霍苷B、苍术苷A、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C对照品于同一量瓶里，加入适量甲醇超声溶解，冷却至室温，定容至刻度，即得混合对照品溶液。
所述步骤(2)中供试品溶液制备包括样品供试品溶液和单味药材供试品溶液。优选，步骤(2)供试品溶液制备，称取芪苓温肾消囊制剂，30-50％甲醇超声提取20-60min，冷却至室温，取上清液过0.22μm滤膜，即得样品供试品溶液；称取单味药材或提取物，分别用0-50％甲醇超声提取20-60min，冷却至室温，取上清液过0.22μm滤膜，即得黄芪药材供试品溶液、苍术药材供试品溶液、茯苓药材供试品溶液、丹参药材供试品溶液、淫羊藿药材供试品溶液。
所述步骤(3)中黄酮类化合物包括金丝桃苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、温哥华苷 E、淫羊藿苷A、脱水淫羊藿素-3-O-鼠李糖(1-2)-呋喃酸-7-O-葡萄糖、芒柄花素、芒柄花苷、宝霍苷Ⅱ、毛蕊异黄酮、温哥华苷F、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、脱水淫羊藿素-3-O-鼠李糖(1-2)-呋喃酸-7-O-葡萄糖、大花淫羊藿苷F、淫羊藿次苷、淫羊藿次苷Ⅰ、箭霍苷B、2”-鼠李糖淫羊藿次苷Ⅱ；所述酚酸类化合物包括丹参素、丹酚酸H或I、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、异丹酚酸B或丹酚酸E、丹酚酸A、绿原酸、异绿原酸、新绿原酸；所述三萜皂苷类化合物包括黄芪皂苷I、黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷；所述倍半萜苷类化合物包括苍术苷、生物碱类化合物包括木兰碱。
所述步骤(3)中所述的有效成分解析方法包括超高效液相色谱法、质谱法、峰归属分析法。
所述超高效液相色谱法色谱条件：
采用PDA检测器、C18或T3或HILIC色谱柱，流动相：采用0-0.5％甲酸水溶液-乙腈，体积流量0.1-0.6mL/min。优选采用C18色谱柱，流动相：采用0.1％甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱，体积流量0.4mL/min；柱温30℃；梯度洗脱条件为
所述质谱条件：采用电喷雾电离离子源(ESI)，正负离子分别检测，扫描范围m/z100～1 200，离子源温度220-350℃，毛细管电压负离子模式3.0-4.0kV，正离子模式3.5-5.0kV，雾化气体积流量1.2-2.0L/min。优选以三氟醋酸钠作校正液，雾化气为高纯氮气，碰撞气为氩气，离子源温度250℃，毛细管电压负离子模式3.5kV，正离子模式4.5kV，雾化气体积流量1.5L/min；
所述峰化合物归属法采用UPLC-ESI-IT-TOF/MS方法，通过对照品比对、图谱、质谱数据以及参考文献的分子量及碎片信息得出化合物结构，共指认出来源于黄芪、淫羊藿、苍术、丹参4味药材共36个化学成分。
本发明所述的芪苓温肾消囊方属于现有技术，其由黄芪30-50份、淫羊藿10-30份、苍术10-30份、茯苓30-50份、丹参10-30份作为原料药经过提取加工制备而成的中药复方制剂。
其方法：取各原料药，各原料药用水煎煮，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩成55-60℃热测时相对密度为1.20-1.35的清膏，干燥即可；所述各药材提取物是各原料药分别用水煎煮，过滤，滤液浓缩成55-60℃热测时相对密度为1.20-1.35的清膏，干燥即得单味药材提取物。
以上组成中，药物的重量是按重量份作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤为单位，或以吨为单位，小规模生产也可以以毫克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间的生药材重量配比的比例不变。
以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，如重症或轻症，肥胖或瘦小的病人，可以相应调整组成的量的配比，增加或减少不超过100％，药效不变。
以上组成中的单味中药，尤其是臣药和佐药，也可以被适当的具有相同药性的中药替换，替换后的中药制剂其药物作用不变。
本发明的制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、***剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。
本发明的中药制剂，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，
本发明的制剂在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每次1-20剂，如：1-20袋或粒或片。
本发明的检测方法是经过筛选获得的，筛选过程如下：
1仪器与试药
1.1仪器
超高效液相-离子阱-飞行时间串联质谱仪(日本岛津公司，包括自动进样器、二元梯度泵、柱温箱、在线脱气机、PDA检测器、LC-solution3.6色谱工作站)；电子天平(XS205，瑞士METTLER TOLEDO公司)，Milli-Q超纯水***(美国Millipore公司)，超声波清洗器(KQ-500DV，昆山市超声仪器有限公司)。
1.2药品与试剂
对照品：绿原酸(批号110753-200413)、毛蕊异黄酮葡萄糖苷(批号111920-201505)、金丝桃苷(批号111521-201205)、迷迭香酸(批号111871-201203)、淫羊藿苷(批号110737-200415)、芒柄花素(批号111703-200602)、黄芪甲苷(批号110781-201314)均购自中国食品药品检定研究院；毛蕊异黄酮(批号201304)、紫草酸(批号201309)、芒柄花苷(批号201306)、丹酚酸A(批号201307)、宝霍苷I(批号201102)、箭霍苷B(批号AW412S)、苍术苷A(批号AW413A)、朝霍定A(批号AM774E)、朝霍定B(批号AM775E)、朝霍定C(批号AM776E)购自天津一方科技有限公司；所有对照品质量分数均≥98.0％。芪苓温肾消囊方提取物(批号20150701，天士力研究院现代中药开发中心提供)。黄芪[批号20140425-01，豆科(Leguminosae)植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao的干燥根]、淫羊藿[批号20150324，小檗科(Berberidaceae)植物淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim.的干燥叶]、苍术[批号20140430-01，菊科(Compositae)植物茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.的干燥根茎]、茯苓[批号20141250，多孔菌科(Polyporaceae)真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核]、丹参[批号20141201，唇形科(Labiatae)植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎]均由天士力现代中药资源有限公司提供，药材均经过中国药科大学李萍教授鉴定。
甲醇、乙腈(色谱纯，德国Merck公司)，甲酸(色谱纯，上海润捷公司)。
2方法
2.1对照品溶液的制备
称取适量的绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、金丝桃苷、迷迭香酸、紫草酸、芒柄花苷、丹酚酸A、淫羊藿苷、芒柄花素、黄芪甲苷、宝霍苷I、箭霍苷B、苍术苷A、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C对照品于同一量瓶里，加入适量甲醇超声溶解，冷却至室温，定容至刻度，即得混合对照品溶液。
2.2提取物供试品溶液的制备
精密称取芪苓温肾消囊方提取物0.5g，置于具塞锥形瓶内，精密加入30-50％(优优选40％)甲醇10mL，称定质量，超声(功率100W，频率40kHz)20-60min(优选40min)，冷却至室温，补足减失质量，摇匀，离心，取上清液过0.22μm滤膜，即得。
2.3单味药材供试品溶液制备
称取芪苓温肾消囊方中各单味药材，按照制备工艺对各药材进行单独提取，根据处方中药材的配比及出膏率，称取适量各药材浸膏干粉，按“2.2”项方法制备，得各药材的供试品溶液。
2.4色谱条件
采用C18色谱柱，流动相：采用0-0.5％(优选0.1％)甲酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱条件为0～2min，2％B；2～10min，2％～16％B；10～12min，16％B；12～13min，16％～18％B；13～35min，18％～40％B；35～38min，40％～60％B；38～40min，60％～99％B。体积流量0.1-0.6(优选0.4)mL/min；柱温30℃；进样量2μL。
2.5质谱条件
采用电喷雾电离离子源(ESI)，正负离子分别检测，扫描范围m/z 100～1 200，以三氟醋酸钠作校正液，雾化气为高纯氮气，碰撞气为氩气，正负离子分别检测，扫描范围m/z100～1 200，离子源温度220-350℃，毛细管电压负离子模式3.0-4.0kV，正离子模式3.5-5.0kV，雾化气体积流量1.2-2.0L/min；优选离子源温度250℃，毛细管电压负离子模式3.5kV，正离子模式4.5kV，雾化气体积流量1.5L/min。
3条件摸索
3.1提取物供试品溶液提取溶剂的考察
考察不同浓度的甲醇和水的提取效果，精密称取芪苓温肾消囊方提取物 0.5g，分别用10mL的水、30％甲醇-水(v/v)、40％甲醇-水(v/v)、50％甲醇-水(v/v)、70％甲醇-水(v/v)、100％甲醇作为提取溶剂。结果表明，30-50％甲醇-水(v/v)作为提取溶剂时色谱峰峰形好且峰数多，因此选择30-50％甲醇-水(v/v)作为提取溶剂，40％甲醇-水(v/v)效果最好。结果见图1。
3.2色谱柱的考察
分别考察了ACQUITY UPLC BEH C18柱、ACQUITY UPLC HSS T3柱、ACQUITY UPLCHSS HILIC柱、ZORBOX RRHD C18柱、ZORBOX RRHT C18柱、Kinetex C18柱、Luna C18柱，结果表明，各色谱柱分离出的色谱峰数目多且分离效果均明显，均可应用于本发明。结果见图2
3.3流动相的考察
3.3.1不同洗脱条件
筛选UPLC梯度洗脱条件对图谱分离效果的影响。用乙腈-水溶液不同比例，不同洗脱程序进行筛选，不同方案如下，代表色谱图见图3。由结果可知，方案四分离出的色谱峰数目多且分离效果最明显，故选择方案三的洗脱条件。
方案一：
方案二：
方案三：
方案四
3.3.2流动相是否加甲酸：
流动相中加入甲酸之后，峰数明显增多，且峰形和分离度改善。见图4 UPLC-ESI-IT-TOF/MS分析结果
采用UPLC-ESI-IT-TOF/MS技术对芪苓温肾消囊方提取物样品溶液及各个药材溶液进行分析，混合对照品溶液负离子模式下总离子流图见图5，芪苓温肾消囊方的正负离子模式下总离子流图见图6。对处方中5味药材进行了归属研究， 色谱图见图7。根据化合物精确相对分子质量、碎片信息、对照品及参考相关文献，共指认36个化合物，具体结果见表1和表2。指认的化合物来源于黄芪、淫羊藿、苍术、丹参4味药材，包括19个黄酮类成分、11个酚酸类成分、4个三萜皂苷类成分、1个倍半萜苷类及1个生物碱类成分。对各类成分的化合物进行了特征解析。
表1芪苓温肾消囊方提取物的UPLC-ESI--IT-TOF/MS负离子模式下的数据及化合物归属
*经过对照品确证；a-黄芪b-淫羊藿c-苍术d-茯苓e-丹参，下表同
表2芪苓温肾消囊方提取物的UPLC-ESI+-IT-TOF/MS正离子模式下的数据及化合物归属
4.1黄酮类化合物解析
7号峰(tR 14.695min)的一级正负离子分别给出m/z 447[M+H]+和m/z 491[M+HCOO]-的峰，确定化合物相对分子质量446，且此峰归属于黄芪药材。与对照品比对，确定7号峰是毛蕊异黄酮葡萄糖苷。
16号峰(tR 20.267min)的一级正负离子分别给出m/z 663[M+H]+和m/z 661[M－H]-的峰，确定化合物相对分子质量662，且此峰归属于淫羊藿药材。二级质谱以m/z 663为母离子失去鼠李糖基产生m/z 517[M+H－Rha]+的碎片； 进一步失去葡萄糖基产生m/z 355[M+H－Rha－Glc]+的碎片，即苷元；苷元失去C4H8得到m/z 299的碎片离子。以m/z 661为母离子失去鼠李糖基和葡萄糖基产生m/z 353[M－H－Rha－Glc]-的碎片离子，确定16号峰是淫羊藿苷A。
4.2酚酸类化合物解析
17号峰(tR 20.932min)的一级负离子给出m/z 717[M－H]-的峰，且归属于丹参药材，推测17号峰是丹酚酸B。以m/z 717为母离子断裂失去1分子丹参素产生m/z 519，继续失去1分子丹参素形成m/z 321[13]的碎片离子。
4.3三萜皂苷类化合物解析
37号峰(tR 37.568min)和38号峰(tR 38.043min)的2个峰归属于黄芪药材，且都有m/z 891[M+Na]+峰，m/z 867[M－H]-峰和m/z 913[M+HCOO]-峰，确定相对分子质量为868，二者属于同分异构体，根据二者极性，推测37号峰为黄芪皂苷I，38号峰为异黄芪皂苷I。
4.4倍半萜苷类化合物解析
3号峰(tR 9.465min)的一级正负离子分别给出m/z 471[M+Na]+峰和m/z 493[M+HCOO]-峰，计算分子式为C21H36O10，对照各个药材紫外色谱图的保留时间，此峰归属于苍术药材。与对照品比对，确定3号峰为苍术苷A。
4.5生物碱类化合物解析
6号峰(tR 11.909min)的一级正离子给出m/z 342[M+H]+峰，它的二级碎片离子有m/z 297[M－(CH3)2NH]+和m/z 265[M－(CH3)2NH－CH3OH]+，且此峰归属于淫羊藿药材，推测6号峰为木兰碱。
本发明分别针对不同的提取溶剂和不同的流动相进行了考察，最终确定30-50％甲醇超声提取效果最好，以0～0.5％甲酸水溶液-乙腈为流动相各色谱峰峰形及分离度最好。本方中的黄酮类成分在正离子模式下响应好，丹参药材中的酚酸类成分在负离子模式下响应较好，因此采用正负离子模式同时对芪苓温肾消囊方提取物进行检测，从而获得化学成分全面的质谱信息。
中药复方一般由多味药材组成，化学成分复杂，加上对照品价格昂贵，很难 实现对复方提取物的定性定量研究。本研究采用UPLC-ESI-IT-TOF/MS方法可以获得化学成分的多级质谱碎片，从而推测其化学组成，为中药复方的化学成分分析提供了一种快速有效的方法。该方法已被广泛应用于中药复方研究的各个方面。
本研究对芪苓温肾消囊方提取物的化学成分进行全面解析，发现其所含有的主要成分与文献中报道的***相关药理活性成分具有良好的一致性，从而在一定程度上体现潜在的药效物质基础和组方的合理性。
附图说明：
图1不同提取溶剂的UPLC色谱图，其中从下到上依次为水、30％甲醇-水、40％甲醇-水、50％甲醇-水、70％甲醇-水、100％甲醇
图2不同色谱柱的UPLC色谱图，其中从下到上依次为ACQUITY UPLC BEH C18柱、ACQUITY UPLC HSS T3柱、ACQUITY UPLC HSS HILIC柱、ZORBOX RRHD C18柱、ZORBOX RRHTC18柱、Kinetex C18柱、Luna C18柱
图3不同洗脱***的UPLC色谱图。
图3从下到上依次为方案一、二、三、四
图4流动相筛选UPLC色谱图其中从上到下依次为0.5％甲酸、0.2％甲酸、0.1％甲酸、未加甲酸
3-苍术苷A 4-绿原酸 7-毛蕊异黄酮葡萄糖苷 8-金丝桃苷 12-迷迭香酸14-紫草酸 15-芒柄花苷 19-毛蕊异黄酮 20-丹酚酸A 22-朝霍定A 23-朝霍定B24-朝霍定C 25-淫羊藿苷 28-芒柄花素 31-黄芪甲苷 34-箭霍苷B 36-宝霍苷I
图5混合对照品溶液负离子模式下总离子流图
图6芪苓温肾消囊方提取物UPLC-ESI-IT-TOF/MS的负(A)、正(B)离子流图
图7芪苓温肾消囊方提取物及各个药材UPLC色谱图(254nm)
A-芪苓温肾消囊方提取物 B-黄芪提取物 C-淫羊藿提取物 D-苍术提取物E-茯苓提取物 F-丹参提取物
具体实施方式：
以下通过实施例进一步说明本发明。
实施例1
对照品溶液的制备
称取适量的绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、金丝桃苷、迷迭香酸、紫草酸、芒柄花苷、丹酚酸A、淫羊藿苷、芒柄花素、黄芪甲苷、宝霍苷I、箭霍苷B、苍术苷A、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C对照品于同一量瓶里，加入 适量甲醇超声溶解，冷却至室温，定容至刻度，即得混合对照品溶液。
供试品溶液的制备
精密称取芪苓温肾消囊方提取物0.5g，置于具塞锥形瓶内，精密加入30-50％甲醇10mL，称定质量，超声(功率100W，频率40kHz)20-60min，冷却至室温，补足减失质量，摇匀，离心，取上清液过0.22μm滤膜，即得。
步骤3，将对照品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱仪，得到色谱图，
步骤4，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量。
色谱条件
采用C18色谱柱，流动相：采用0-0.5％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱条件为0～2min，2％B；2～10min，2％～16％B；10～12min，16％B；12～13min，16％～18％B；13～35min，18％～40％B；35～38min，40％～60％B；38～40min，60％～99％B。体积流量0.1-0.6mL/min；柱温30℃；进样量2μL。
实施例2
步骤如下：
(1)对照溶液的制备：称取适量的绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、金丝桃苷、迷迭香酸、紫草酸、芒柄花苷、丹酚酸A、淫羊藿苷、芒柄花素、黄芪甲苷、宝霍苷I、箭霍苷B、苍术苷A、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C对照品于同一量瓶里，加入40％甲醇超声溶解，冷却至室温，定容至刻度，即得混合对照品溶液。所得溶液中，各种成分的浓度依次为：0.062、0.057、0.0106、0.047、0.063、0.0195、0.02、0.059、0.038、0.0201、0.0238、0.0164、0.0354、0.0182、0.075、0.09、0.084mg/ml
(2)供试品溶液的制备：
精密称取芪苓温肾消囊制剂0.5028g，粉碎后加入40％甲醇，超声20-60min，冷却至室温，摇匀，离心，取上清液过0.22μm滤膜，用40％甲醇定容到25ml，即得样品供试品溶液20.11mg/ml
步骤3，将对照品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱仪，得到色谱图，
步骤4，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量。
其中超高液相色谱条件如下：采用C18色谱柱，流动相：采用0.1％甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱，体积流量0.4mL/min；柱温30℃；
Claims (10)
1.一种芪苓温肾消囊制剂有效成分的分析方法，其特征在于包括如下步骤：
(4)对照溶液的制备：
(5)供试品溶液的制备：
(6)有效成分的解析方法：包括黄酮类化合物、酚酸类化合物、三萜皂苷类化合物、倍半萜苷类化合物、生物碱类化合物。
2.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述步骤(3)中黄酮类化合物包括金丝桃苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、温哥华苷E、淫羊藿苷A、脱水淫羊藿素-3-O-鼠李糖(1-2)-呋喃酸-7-O-葡萄糖、芒柄花素、芒柄花苷、宝霍苷Ⅱ、毛蕊异黄酮、温哥华苷F、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、脱水淫羊藿素-3-O-鼠李糖(1-2)-呋喃酸-7-O-葡萄糖、大花淫羊藿苷F、淫羊藿次苷、淫羊藿次苷Ⅰ、箭霍苷B、2”-鼠李糖淫羊藿次苷Ⅱ；所述酚酸类化合物包括丹参素、丹酚酸H或I、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、异丹酚酸B或丹酚酸E、丹酚酸A、绿原酸、异绿原酸、新绿原酸；所述三萜皂苷类化合物包括黄芪皂苷I、黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷；所述倍半萜苷类化合物包括苍术苷、生物碱类化合物包括木兰碱。
3.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述步骤(2)中供试品溶液制备包括样品供试品溶液和单味药材供试品溶液。
4.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述的有效成分解析方法包括超高效液相色谱法、质谱法、峰归属分析法。
5.如权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法色谱条件，
采用PDA检测器、C18或T3或HILIC色谱柱，流动相：采用0-0.5％甲酸水溶液-乙腈，体积流量0.1-0.6mL/min，梯度洗脱条件为
6.如权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述质谱条件：采用电喷雾电离离子源(ESI)，正负离子分别检测，扫描范围m/z 100～1 200，离子源温度220-350℃，毛细管电压负离子模式3.0-4.0kV，正离子模式3.5-5.0kV，雾化气体积流量1.2-2.0L/min。
7.如权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述峰化合物归属法采用UPLC-ESI-IT-TOF/MS方法，通过对照品比对、图谱、质谱数据以及参考文献的分子量及碎片信息得出化合物结构，共指认出来源于黄芪、淫羊藿、苍术、丹参4味药材共36个化学成分。
8.如权利要求3所述的分析方法，其特征在于：步骤(2)供试品溶液制备，称取芪苓温肾消囊制剂，30-50％甲醇超声提取20-60min，冷却至室温，取上清液过0.22μm滤膜，即得样品供试品溶液；
称取单味药材或提取物，分别用0-50％甲醇超声提取20-60min，冷却至室温，取上清液过0.22μm滤膜，即得黄芪药材供试品溶液、苍术药材供试品溶液、茯苓药材供试品溶液、丹参药材供试品溶液、淫羊藿药材供试品溶液。
9.如权利要求8所述的分析方法，其特征在于，所述的芪苓温肾消囊制剂是由重量份黄芪30-50份、淫羊藿10-30份、苍术10-30份、茯苓30-50份、丹参10-30份制成；其方法：取各原料药，各原料药用水煎煮，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩成55-60℃热测时相对密度为1.20-1.35的清膏，干燥即可；所述各药材提取物是各原料药分别用水煎煮，过滤，滤液浓缩成55-60℃热测时相对密度为1.20-1.35的清膏，干燥即得单味药材提取物。
10.如权利要求1所述的的分析方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)对照溶液的制备：称取适量的绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、金丝桃苷、迷迭香酸、紫草酸、芒柄花苷、丹酚酸A、淫羊藿苷、芒柄花素、黄芪甲苷、宝霍苷I、箭霍苷B、苍术苷A、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C对照品于同一量瓶里，加入适量甲醇超声溶解，冷却至室温，定容至刻度，即得混合对照品溶液。
(2)供试品溶液的制备：
精密称取芪苓温肾消囊方，精密加入30-50％甲醇，称定质量，超声20-60min，冷却至室温，补足减失质量，摇匀，离心，取上清液过0.22μm滤膜，即得样品供试品溶液；取芪苓温肾消囊方中各单味药材分别用水煎煮后浓缩滤过，干燥得各药材浸膏干粉，精密称取各药材浸膏干粉，加入30-50％甲醇，称定质量，超声20-60min，冷却至室温，补足减失质量，摇匀，离心，取上清液过0.22μm滤膜，即得各药材供试品溶液；
(3)有效成分的解析方法：包括超高效液相色谱法、质谱法和峰归属法
色谱条件：采用C18色谱柱，流动相：采用0.1％甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱，体积流量0.4mL/min；柱温30℃；
质谱条件：采用电喷雾电离离子源ESI，正负离子分别检测，扫描范围m/z 100～1 200，以三氟醋酸钠作校正液，雾化气为高纯氮气，碰撞气为氩气，离子源温度250℃，毛细管电压负离子模式3.5kV，正离子模式4.5kV，雾化气体积流量1.5L/min；
峰归属分析法：采用UPLC-ESI-IT-TOF/MS技术对芪苓温肾消囊方样品溶液及各个药材溶液进行分析，混合对照品溶液负离子模式下总离子，芪苓温肾消囊方的正负离子模式下总离子，对处方中5味药材色谱峰进行了归属研究，根据化合物精确相对分子质量、碎片信息、对照品及参考相关文献，共指认36个化合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610221747.9A CN107271577B (zh) | 2016-04-08 | 2016-04-08 | 一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610221747.9A CN107271577B (zh) | 2016-04-08 | 2016-04-08 | 一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107271577A true CN107271577A (zh) | 2017-10-20 |
| CN107271577B CN107271577B (zh) | 2020-10-30 |
Family
ID=60052554
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610221747.9A Active CN107271577B (zh) | 2016-04-08 | 2016-04-08 | 一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107271577B (zh) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107727772A (zh) * | 2017-11-21 | 2018-02-23 | 匡海学 | 利用电喷雾质子化裂解‑质谱多反应检测模式对中药中三萜皂苷进行定性和定量的方法 |
| CN107907619A (zh) * | 2017-10-25 | 2018-04-13 | 中山市中智药业集团有限公司 | 一种黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法 |
| CN108037197A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-05-15 | 中山市中智药业集团有限公司 | 一种鱼腥草破壁饮片非挥发类次生代谢产物化学成分定性及定量分析的方法 |
| CN108693289A (zh) * | 2018-05-28 | 2018-10-23 | 贵阳中医学院 | 一种人字果药材中木兰花碱的含量测定方法 |
| CN109342585A (zh) * | 2018-10-10 | 2019-02-15 | 泓博元生命科技（深圳）有限公司 | 淫羊藿的检测分析方法 |
| CN110095524A (zh) * | 2019-05-15 | 2019-08-06 | 山东省分析测试中心 | 一种三萜皂苷质谱结构解析方法 |
| CN110579553A (zh) * | 2019-09-29 | 2019-12-17 | 江苏省中医院 | 一种参葵通脉颗粒的质量检测方法 |
| CN111239270A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-06-05 | 江苏省中医院 | 一种参葵通脉颗粒的质量检测方法 |
| CN112014480A (zh) * | 2019-05-28 | 2020-12-01 | 黄河科技学院 | 一种uplc-ms/ms检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法 |
| CN114062525A (zh) * | 2020-08-04 | 2022-02-18 | 厦门中药厂有限公司 | 芪骨胶囊指纹图谱检测方法、对照指纹图谱和应用 |
| CN115778997A (zh) * | 2022-12-28 | 2023-03-14 | 江苏海洋大学 | 一种芪蒡颗粒的制备方法及其质量检测方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102145041A (zh) * | 2010-02-09 | 2011-08-10 | 侯凤祥 | 一种具有治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物 |
| CN103690768A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-04-02 | 山西五台山沙棘制品有限公司 | 麦冬参芪软胶囊及其制备方法 |
-
2016
- 2016-04-08 CN CN201610221747.9A patent/CN107271577B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102145041A (zh) * | 2010-02-09 | 2011-08-10 | 侯凤祥 | 一种具有治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物 |
| CN103690768A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-04-02 | 山西五台山沙棘制品有限公司 | 麦冬参芪软胶囊及其制备方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| CHU, C 等: "Characterization of novel astragaloside malonates from Radix Astragali by HPLC with ESI quadrupole TOF MS", 《JOURNAL OF SEPARATION SCIENCE》 * |
| NEGRI, G 等: "Saponins, tannins and flavonols found in hydroethanolic extract from Periandra dulcis roots", 《REVISTA BRASILEIRA DE FARMACOGNOSIA-BRAZILIAN JOURNAL OF PHARMACOGNOSY》 * |
| 朱慧明: "基于液质联用技术的芪苈强心胶囊中多组分分析与药代动力学研究", 《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
| 石冬琴: "不同种质白术的内酯含量差异分析及HPCE指纹图谱的初探", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
| 袁航 等: "RRLC-DAD-ESI-MS~2分析天平山淫羊藿中的11个化学成分", 《药物分析杂志》 * |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107907619A (zh) * | 2017-10-25 | 2018-04-13 | 中山市中智药业集团有限公司 | 一种黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法 |
| CN107727772B (zh) * | 2017-11-21 | 2020-04-10 | 匡海学 | 利用电喷雾质子化裂解-质谱多反应检测模式对中药中三萜皂苷进行定性和定量的方法 |
| CN107727772A (zh) * | 2017-11-21 | 2018-02-23 | 匡海学 | 利用电喷雾质子化裂解‑质谱多反应检测模式对中药中三萜皂苷进行定性和定量的方法 |
| CN108037197A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-05-15 | 中山市中智药业集团有限公司 | 一种鱼腥草破壁饮片非挥发类次生代谢产物化学成分定性及定量分析的方法 |
| CN108693289A (zh) * | 2018-05-28 | 2018-10-23 | 贵阳中医学院 | 一种人字果药材中木兰花碱的含量测定方法 |
| CN109342585A (zh) * | 2018-10-10 | 2019-02-15 | 泓博元生命科技（深圳）有限公司 | 淫羊藿的检测分析方法 |
| CN110095524A (zh) * | 2019-05-15 | 2019-08-06 | 山东省分析测试中心 | 一种三萜皂苷质谱结构解析方法 |
| CN112014480A (zh) * | 2019-05-28 | 2020-12-01 | 黄河科技学院 | 一种uplc-ms/ms检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法 |
| CN110579553A (zh) * | 2019-09-29 | 2019-12-17 | 江苏省中医院 | 一种参葵通脉颗粒的质量检测方法 |
| CN111239270A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-06-05 | 江苏省中医院 | 一种参葵通脉颗粒的质量检测方法 |
| CN114062525A (zh) * | 2020-08-04 | 2022-02-18 | 厦门中药厂有限公司 | 芪骨胶囊指纹图谱检测方法、对照指纹图谱和应用 |
| CN115778997A (zh) * | 2022-12-28 | 2023-03-14 | 江苏海洋大学 | 一种芪蒡颗粒的制备方法及其质量检测方法 |
| CN115778997B (zh) * | 2022-12-28 | 2023-10-27 | 江苏海洋大学 | 一种芪蒡颗粒的制备方法及其质量检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107271577B (zh) | 2020-10-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107271577A (zh) | 一种芪苓温肾消囊制剂的有效成分分析方法 | |
| Xu et al. | Analytical methods and biological activities of Panax notoginseng saponins: Recent trends | |
| Jia et al. | A review of Acanthopanax senticosus (Rupr and Maxim.) harms: From ethnopharmacological use to modern application | |
| Cai et al. | A capsule review of recent studies on the application of mass spectrometry in the analysis of Chinese medicinal herbs | |
| Li et al. | Strategies for quality control of Chinese medicines | |
| Li et al. | Applications of HPLC/MS in the analysis of traditional Chinese medicines | |
| WO2023024322A1 (zh) | 一种中药组合物的指纹图谱的测定方法 | |
| Li et al. | Chemical and bioactive comparison of flowers of Panax ginseng Meyer, Panax quinquefolius L., and Panax notoginseng Burk. | |
| CN101991661B (zh) | 含白芍、人参、丹参、青蒿、甘草、川芎和当归的中成药的检测方法 | |
| Peng-Peng et al. | Metabolomics analysis and rapid identification of changes in chemical ingredients in crude and processed Astragali Radix by UPLC-QTOF-MS combined with novel informatics UNIFI platform | |
| CN102028840B (zh) | 一种复方中成药的超高压液相检测方法 | |
| Yang et al. | Effect of Danggui Buxue Tang on immune-mediated aplastic anemia bone marrow proliferation mice | |
| Wei et al. | GUO De-An. Chemical profiling of Huashi Baidu prescription, an effective anti-COVID-19 TCM formula | |
| Zhao et al. | An improved 2D-HPLC-UF-ESI-TOF/MS approach for enrichment and comprehensive characterization of minor neuraminidase inhibitors from Flos Lonicerae Japonicae | |
| Lin-Wei et al. | Chemical profiling of Qixue Shuangbu Tincture by ultra-performance liquid chromatography with electrospray ionization quadrupole-time-of-flight high-definition mass spectrometry (UPLC-QTOF/MS) | |
| CN104758515A (zh) | 一种治疗肾病的中药组合物及其制备方法和检测方法 | |
| CN104713953B (zh) | 一种药物指纹图谱的测定方法 | |
| CN108037193A (zh) | 采用hplc-uv-elsd法检测复方丹参片的方法 | |
| Li et al. | Rapid characterization of the constituents in Jigucao capsule using ultra high performance liquid chromatography with quadrupole time‐of‐flight mass spectrometry | |
| Xiang et al. | Simultaneous determination of polysaccharides and 21 nucleosides and amino acids in different tissues of Salvia miltiorrhiza from different areas by UV–visible spectrophotometry and UHPLC with triple quadrupole MS/MS | |
| CN104614450B (zh) | 一种消渴清制剂的指纹图谱检测方法 | |
| Dong et al. | A review of the botany, ethnopharmacology, phytochemistry, analysis method and quality control, processing methods, pharmacological effects, pharmacokinetics and toxicity of codonopsis radix | |
| CN112798724B (zh) | 一种适用于人参属中药材及药材提取物的皂苷类成分色谱指纹图谱的建立方法 | |
| CN102539599B (zh) | 一种强肝药物的检测方法 | |
| CN101513461A (zh) | 一种治疗脑卒中及其后遗症的滴丸及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 300410 Tianjin city Beichen District Huaihe road and road intersection Dingjiang tianzhijiao Park forensic Center for Intellectual Property Department Applicant after: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd. Address before: 300410 Tianjin city Beichen District Huaihe road and road intersection Dingjiang tianzhijiao Park forensic Center for Intellectual Property Department Applicant before: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd. |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Wang Yu Inventor after: Zhang Xiaochuan Inventor after: Zhang Yiqian Inventor after: Huo Zhipeng Inventor after: He Yi Inventor before: Wang Yu Inventor before: Zhang Xiaochuan Inventor before: Zhang Yiqian Inventor before: Cui Zhipeng Inventor before: He Yi |
|
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240426 Address after: 300410 2 East Road Puji River, Beichen District, Tianjin (Tsun Li modern Chinese medicine city) Patentee after: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd. Country or region after: China Patentee after: Tianjin Tasly Modern TCM Resources Co.,Ltd. Address before: 300410 Tianjin Beichen District Huaihe road and Ting Jiang West Road intersection heaven proud of the park Legal Center Intellectual Property Department Patentee before: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd. Country or region before: China |