CN107177519A - 粟酒裂殖酵母菌、其组合物和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株新的粟酒裂殖酵母菌，含该菌的酿酒菌剂及其在白酒酿造中的应用。本发明公开的粟酒裂殖酵母菌耐高温，耐酸，耐乙醇，具有较高的产乙醇能力，发酵生产的白酒具有高产酸类及乙偶姻等白酒风味物质，低产杂醇油，酿酒菌剂组合物应用于白酒固态发酵可提高发酵出酒率和酒品质量。

Description

粟酒裂殖酵母菌、其组合物和应用

发明所属领域：

本发明属于酿酒制造领域，具体地说，本发明涉及粟酒裂殖酵母菌、含该菌的酿酒菌剂及其在白酒酿造中的应用。

背景技术：

在白酒酿造过程中，酵母菌是酒精及白酒相关风味物质形成的主要菌种。白酒酒醅在高温堆积和入池发酵阶段具有酒醅温度高，酸度高和含一定浓度的酒精等特定，因此，具有较高的耐受能力和较强产香能力及发酵能力的酵母菌株在白酒发酵过程中起重要作用。优良酵母的筛选和应用能够提高白酒发酵效率，降低生产成本，改善原酒口感和提高白酒品质量(胡邦超等.酿酒,2017,44 (2):13-18)。李红等(中国酿造，2010，215(2)：91-93)从贵州茅台酒厂(集团)习酒有限责任公司酿酒车间分离得3株酵母菌，对其进行产酒率及发酵产香成分的测定，结果表明，3株酵母发酵除高产乙醇外，还产生丙醇、异丁醇等多种醇类物质。其中一株菌株利用糖同化碳源，发酵力和淀粉出酒率最高，分别为18.04g/100g和29.61％，是适合用于白酒强化发酵的优良酵母菌株。

酵母发酵适宜生长温度是28℃-33℃,高温会导致酵母老化和死亡，使发酵过程不能正常进行，生产效率低下。耐高温酵母不仅有利于降低生产成本，而且在夏季保证了正常生产。董永胜等(酿酒,2005,32(5)：30-33)从山东秦池酒厂酒醅中经过分离、驯化、筛选得到一株能在38℃下发酵良好的耐酸耐高温的酒精酵母菌应用于固态白酒的生产中，可提高原料投入量35％，提高酒精产量30％。汤有宏(酿酒，2012,39(5)：35-37)从古井高温曲中分离筛选得到一株耐高温酵母菌株并将其制备成曲，在高温环境中仍具有很高的发酵力。随着白酒发酵过程的进行，窖池中酒醅酸度上升(pH下降)，其中酵母菌群的生理代谢活动会逐渐受到抑制，对发酵原料的转化利用能力及乙醇的发酵生产能力也逐渐下降甚至终止。因此在白酒发酵过程中，耐酸能力较强菌株是保证发酵出酒率和原料利用率高的重要功能菌株。汤有宏(酿酒，2011,38(5)：45-47)从古井贡酒酒醅中分离筛选出一株耐酸性良好产酒酵母菌株，发酵实验产酒精达5.7％vol。葛隐等(中国酿造，2010，221(8)：130-132)分别从采集于五粮液酒厂的酒糟、窖泥等含菌原材料中筛选出耐酸性酵母菌，该菌株能在pH<3.5的环境下继续表现出较强发酵代谢能力，适合作为五粮液白酒发酵生产用的酿酒酵母菌种。

产香酵母是指能产生适当浓度的醇类、酚类、酸类、酮类和有机酸等令人愉悦的香味的功能酵母，这些成分同时是白酒中风味物质的组成成分(蒲春等，酿酒科技，2013，(3):47-53)。王旭亮等(酿酒，2012，39(4):29-33)为了提高清香型白酒的品质，以清香型发酵酒醅为筛选源，筛选出两株适合清香型白酒酿造，高产乙酸乙酯和高产乙酸菌株。为提高白酒的品质，近年来科研人员不断从酿酒环境、酿酒过程及其酿酒用料中筛选优良的菌株用于白酒酿造中。施妥辉等(食品与发酵工业,1983,(4):1)对山东兰陵美酒厂进行实验时发现，在串香白酒的香醅中添加产酯酵母后，不仅理化指标有明显的提高，而且感官品尝与对照相比，入口香浓，纯正，苦涩的杂味也较少。宋玉华等(酿酒科技，1991， (4):31)将产酯酵母应用于产清香型白酒取得了良好的效果。在清香型白酒发酵工艺中添加固体产酯酵母，乳酸乙酯可下降109.42％，这也是工艺上增加乙酸乙酯含量而减少乳酸乙酯含量的措施之一。马荣山等(中国酿造，2008，27(1)： 17-18)从麸曲酱香型白酒酒醅中分离得到5株酶活力高、发酵力强的酵母菌，将其作为酒曲发酵菌种，生产出的酒酱香味突出，酒体清亮透明，绵甜醇厚，具有明显的酱香风格。

白酒中的酸类是形成白酒口味的主要香味成分，也是生成酯类的前驱物质。白酒中的酸类以乳酸和乙酸含量最高，适量的乙酸能使白酒有爽快感(白酒生产技术全书，p769,沈怡方主编，中国轻工业出版社2013)。乙偶姻(又名3-羟基丁酮)是生成中国白酒中的重要香气化合物和白酒中健康的风味成分四甲基吡嗪的前体物质(徐岩等，酿酒科技，2011,205(7):37-40)，可由微生物代谢产生，具有奶香味，是一种重要的食品风味物质，广泛存在于玉米、葡萄、苹果等许多食品及多种发酵食品中。3-羟基丁酮是许多微生物糖代谢的中间产物，自然界可以转化糖生产3-羟基丁酮的微生物，主要包括肠杆菌属(Enterobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)等细菌(徐慧等，食品与发酵工业，2010,36(11)：137-143)，也有少数酵母菌产乙偶姻的报道(赵风琴等，食品工业科技，2016,37(11)：147-155)。

杂醇油是酿造发酵过程中酵母正常代谢的副产物，包括脂肪族酸类、脂肪族醇类、高级醇类。适宜的杂醇油含量及各种杂醇油之间的比例协调可使酒的口感柔和协调、酒体丰满圆润和味道独特，但白酒中如杂醇油含量过高，会影响白酒口感且对人体健康产生不良影响(HofiH，等.Alcoholism：Clinical and Experimental Research，2003，27(S1)：37S-41S)。在传统的酿造酒中，杂醇油含量普遍偏高的问题已经引起了业界的广泛关注。因此，为降低其杂醇油含量，使其控制在合适的范围内，生产上已采取了种种措施，但目前只有选育低产杂醇油且高产乙醇的野生酵母才是最根本的解决手段(Schcondermark-stolkSA 等.FEMS Yeast Research，2005，5(8)：757-766)。

粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)最初从非洲人饮用的粟酒中分离得到，广泛分布于甘蔗糖蜜和水果等环境中到。汪伦记等利用粟酒裂殖酵母能发酵菊芋未水解糖液高产乙醇的特点提出了以菊芋粉为原料，同步糖化发酵生产燃料乙醇的新工艺(农业工程学报，2009,25(11)：263-268)。杨子琳等(中国酿造，2016,35(6)：60-64))：为了改善液态发酵糯米酒的口感，对2种非酿酒酵母(扣囊复膜酵母属3-1Y、粟酒裂殖酵母属SP)和酿酒酵母SJ4进行了单一及混合菌种发酵研究。陈良强等(工业微生物，2013,43(3)：1-6)报道了一株低产杂醇油的粟酒裂殖酵母(S.pombe)MT-14，保藏编号为CGMCC4744。该菌具有耐高温、乙醇及酸的性能。但该菌株仍产少量异丁醇，报道的最高生长温度为40℃，其生长量仅为37℃培养时相对生长量的58.1％。该菌株发酵高粱糖化液的乙醇产量为40.1g/L,根据文章提供的实验数据计算得出其乙醇对糖的转化率为44.8％。

中国专利201210311711.1公布了一种利用粟酒裂殖酵母发酵菊芋制备乙醇的方法。中国专利20121025311.X公布了一种利用粟酒裂殖酵母同步糖化发酵生产乙醇的方法。中国专利201110122398.2公布了一株低产杂醇油的粟酒裂殖酵母菌株CGMCC4744，其乙醇对糖的转化率为39.7％。目前已报道的应用于酿酒的粟酒裂殖酵母(S.pombe)菌株存在的不足之处表现为：粟酒裂殖酵母耐高温能力和乙醇转化能力较差(工业微生物，2013,43(3)：1-6)；对粟酒裂殖酵母及其与其他酵母菌组合物在白酒发酵过程中产酸、产乙偶姻等能力缺乏研究报道。目前还没有同时具有耐高温、耐乙醇能力强，产酸、产乙偶姻能力好和乙醇转化率高的粟酒裂殖酵母菌株及其组合菌剂在白酒中的应用报道。

发明技术内容：

本发明的一个目的是提供一种新的粟酒裂殖酵母菌株，该菌株耐高温、耐酸，耐乙醇能力强，该菌株在白酒发酵条件下具有较高的产乙醇能力，发酵生产的白酒杂醇油含量低，并含有较高的乙酸及乙偶姻等白酒风味成分物质，对改善白酒口感，提高白酒品质量具有重要价值。

本发明的另一个目的是提供一种含有粟酒裂殖酵母的酿酒菌剂组合物。

本发明的再一个目的是提供粟酒裂殖酵母在白酒固态发酵中的应用。

本发明的再一个目的是提供制备酿酒菌剂组合物的方法。

本发明的再一个目的是提供酿酒菌剂组合物在在白酒酿造中的应用。

本发明公开了一株新的粟酒裂殖酵母菌，其特征在于,粟酒裂殖酵母Scc7株Schizosaccharom pombe Scc7,保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为 CCTCC NO:M2017302。保藏日期是2017年5月31日。粟酒裂殖酵母Scc7株从湖北省某白酒厂酒醅中分离经筛选获得。该菌株有如下特征：

粟酒裂殖酵母Scc7株形态特征是：在YPD固体培养基上生长1～2d，菌落较小，乳白色，奶酪状，表面光滑、较湿润，边缘整齐，在YPD液体培养基中 37℃下培养12～14h，细胞呈卵形或椭圆型，裂殖，大小为(3.0～6.0)μm×(5.0～12.0) μm。

粟酒裂殖酵母Scc7株生化特征是：可发酵利用葡萄糖，蔗糖，半乳糖，麦芽糖，棉子糖，海藻糖和可溶性淀粉。

粟酒裂殖酵母Scc7株耐高温及生长特征是：接种至YPD液体培养基，该菌株在40℃下仍能正常生长，具有很强的耐高温性。Scc7菌株耐高温能力比标准菌株CICC1056高。

粟酒裂殖酵母Scc7株耐乙醇能力特征是：37℃下，在乙醇含量为10％的YPD 培养基中，Scc7仍能生长，但其标准菌株几乎不生长。

粟酒裂殖酵母Scc7株耐酸能力特征是：37℃下，在pH为3.5的YPD培养基中仍能生长，Scc7生长到24h时OD₆₀₀为2.93，而标准菌株几乎不生长。

粟酒裂殖酵母Scc7株高温发酵产酒精能力特征是：在28℃下，Scc7在液态酒精发酵试验中，乙醇产量达48.5g/L,比标准菌株酒精产量高出18.15％，与酿酒酵母相当；Scc7产酒率较标准菌株高13.3％，与酿酒酵母产酒率相当。

对粟酒裂殖酵母Scc7株进行26S rDNA的PCR扩增与测序实验，分析显示：菌株Scc7与Schizosaccharomyces pombe strain NRRLY-12796的26S rDNA的同源性达到了99％，确定菌株Scc7为一种粟酒裂殖酵母。

本发明还公开了一种含粟酒裂殖酵母Scc7株的酿酒菌剂组合物，该酿酒菌剂组合物主要成份是粟酒裂殖酵母Scc7株及胞外产物。

优先地，本发明还公开了一种含粟酒裂殖酵母Scc7株酿酒菌剂组合物，其特征在于它含有下列组份(接种量)：

粟酒裂殖酵母 10⁸cfu/g

酿酒酵母 10⁷cfu/g

其中粟酒裂殖酵母为CCTCC NO：M2017302，酿酒酵母为CCTCC AY92003

酿酒酵母CCTCC AY92003为常用普通微生物菌种，登载于中国典型培养物保藏中心目录，处于公开状态，科学工作者可向中国典型培养物保藏中心索取。粟酒裂殖酵母CICC1056为常用微生物菌种，登载于中国工业微生物菌种保藏管理中心目录，处于公开状态，科学工作者可向该保藏中心索取。

本发明公开的酿酒菌剂组合物为液态或固态。优先的，本发明公开的酿酒菌剂组合物为固态。

本发明还公开了制备固态酿酒菌剂组合物的方法，该方法包括如下步骤：

(1)菌种活化：分别接种粟酒裂殖酵母Scc7株和酿酒酵母CCTCCAY92003 于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，30℃摇床培养18-24小时；

(2)固体培养：麸皮100％，按照料水比1:1加水后121℃，灭菌35min，将活化培养的2种酵母菌液分别按10％接种比例接种后装塑料盒或塑料袋，保持室温30℃左右，品温35℃左右，培养2天发酵完毕，每隔12h搅拌混匀一次；

(3)干燥：对发酵后的酵母固体样品在35-45℃条件下进行干燥处理，当样品含水率在12％—25％之间时停止干燥，装袋封口后保藏待用。

本发明还公开了新的粟酒裂殖酵母Scc7株在白酒固态发酵中的应用。

本发明还公开了酿酒菌剂组合物在白酒厂提高白酒出酒率和酒品质量的应用。

本发明的优点：

1、本发明提供的粟酒裂殖酵母Scc7株是一株新的菌株，该菌株具有很强的耐高温生长能力。该菌株在40℃下仍能生长良好，与37℃培养温度相比，其相对生长量达到92.2％，比标准菌株CICC1056高10.3％。

2、粟酒裂殖酵母Scc7株发酵乙醇产量及乙醇对糖的转化率较高。28℃白酒液态发酵条件下，Scc7乙醇产量达到48.5g/L，乙醇对糖的转化率达51.4％。Scc7 乙醇产量和乙醇对糖的转化率分别比标准菌株CICC1056高18.15％和13.3％。

3、粟酒裂殖酵母Scc7株产酸能力强。28℃发酵条件下，Scc7产乙酸、丙酸、丁酸能力分别比CICC1056菌株高132.9％、8.47％、42.3％，并能产异丁酸3.79mg/L, 而标准菌株CICC1056不产。

4、产酱香风味前体物质能力强：Scc7产乙偶姻的能力比标准菌株高156.5％。

5、杂醇油含量低：Scc7产正丙醇、异戊醇含量分别比CICC1056菌株低19.2％、6.5％。

6、耐乙醇和耐酸能力好:Scc7菌株可耐受10％左右的乙醇浓度，较标准菌株耐酒精能力强。Scc7菌株可耐受的pH为3.5的酸性生长环境，较标准菌株耐酸能力强。

即粟酒裂殖酵母Scc7株与标准菌株CICC1056相比具有较高的耐高温、耐乙醇、耐酸以及产乙醇、酸类物质和白酒风味成分前体物质乙偶姻的能力，并具有低产杂醇油的特性。

附图说明

图1是粟酒裂殖酵母Scc7株26S rDNA D1/D2区序列***发育树图

具体实施方式

下面结合具体的实施例来进一步阐述本发明。应当理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不能限制本发明的保护范围。

实施例

实施例1粟酒裂殖酵母Scc7菌株的分离与鉴定

1.1粟酒裂殖酵母Scc7株的分离

从湖北某白酒厂酒醅中分离获得。取10g酒醅置于装有90ml无菌水的三角瓶中，30℃，170rpm摇匀30min，然后取100μl经过一定梯度稀释后的培养液涂布到孟加拉红及MRS培养基固体平板上，分别置于30℃和37℃培养48小时后，挑取典型酵母形态的单菌落，再在相同培养基固体平板上重复划线纯化三次后， 4℃保存。通过高温培养和耐酸试验初步筛选，最后根据白酒液态发酵试验结果及模拟白酒固态发酵试验结果筛选出产酒精能力、产酸能力及乙偶姻率均较高，且产杂醇油量较低的菌株。本发明人将分离的一株新的粟酒裂殖酵母Scc7株 Schizosaccharom pombe Scc7,保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2017302，保藏日为2017年5月31日，保藏地址为中国武汉武汉大学。

1.2粟酒裂殖酵母Scc7株的鉴定

通过形态特征观察、生理生化测定及26S rDNA D1/D2区域基因序列分析结果对Scc7进行鉴定。在鉴定中，本实验选择酿酒酵母CCTCC AY92003、粟酒裂殖酵母标准菌株CICC1056作为对照菌株。酿酒酵母CCTCC AY92003和粟酒裂殖酵母标准菌株CICC1056为常用普通微生物菌种，分别来自中国典型培养物保藏中心和中国工业微生物菌种保藏管理中心，科学工作者可索取。

1.2.1粟酒裂殖酵母Scc7株形态特征观察

在YPD固体培养基上生长1～2d，菌落较小，乳白色，奶酪状，表面光滑、较湿润，边缘整齐，在YPD液体培养基中37℃下培养12～14h，细胞呈卵形或椭圆型，裂殖，大小为(3.0～6.0)μm×(5.0～12.0)μm。

1.2.2通过26S rDNA D1/D2区域序列分析进行***发育地位鉴定

以酵母菌株的基因组DNA为模板做PCR扩增反应，扩增酵母菌株26S rDNA D1/D2区域，扩增引物采用通用引物NL1(5'-GTAGTCATATGCTTGTCTC-3') 和NL4(5'-CTTCCGTCAATTCCTTTAAG-3')。

PCR反应体系(50μL)：Premix Taq(2×)25μL，引物NL1/NL4(20μmol/L) 各1μL，模板DNA 1μL，无菌三蒸水22μL。

PCR扩增条件：94℃预变性5min，94℃变性40s，50℃退火40s，72℃延伸60s，30个循环后，72℃延伸5min。所得PCR产物送上海生工生物工程纯化并测序，测序引物用上述NL1、NL4。

通过分子测序后，发现菌株Scc7与Schizosaccharomyces pombe strain NRRLY-12796的26S rDNA的同源性达到了99％，符合Kuttzman&Robnett所定的同种内不同菌株间差异不超过1％的标准，确定菌株Scc7为一株粟酒裂殖酵母。图1是根据26S rDNA D1/D2区域序列所做的***发育树。

1.2.3粟酒裂殖酵母Scc7株的生理生化实验测定结果

(1)生化特征发酵试验

Scc7菌株对糖的利用结果见表1。

表1粟酒裂殖酵母Scc7不同碳源的发酵试验结果

(2)粟酒裂殖酵母Scc7耐高温生长能力测定

将培养的两种酵母菌种子液按相同比例接种至YPD液体培养基中，分别在 37℃和40℃下170rpm摇床培养24h，测定OD₆₀₀值。检测结果见表2，结果表明Scc7菌株在40℃下仍能正常生长，具有很强的耐温性，与37℃培养的生长量相比，40℃下的相对生长量达92.2％，其耐高温能力比标准菌株CICC1056好。

表2 Scc7与标准菌株CICC1056的耐高温生长能力测定结果

实施例2Scc7菌株与标准菌株CICC1056耐酒精能力比较

将菌株Scc7和标准菌株CICC1056的种子液接入含有乙醇浓度(v/v)分别为4％、6％、8％、10％、12％的YPD液体培养基中，置于37℃、170rpm摇瓶培养24h后，测OD₆₀₀值。如表3所示，在添加了6％(v/v)乙醇的培养基中，Scc7 和CICC1056均能生长，但Scc7的耐受能力强于CICC1056，菌株Scc7的OD₆₀₀值是CICC1056的3.2倍；在添加了8％乙醇的培养基中，Scc7和CICC1056的生长能力都较弱，但Scc7的耐受能力仍强于CICC1056，菌株Scc7的OD₆₀₀是CICC1056的2.0倍。在乙醇浓度达到10％时，Scc7仍能生长，而此时CICC1056 几乎不生长。

表3粟酒裂殖酵母Scc7株与标准菌株CICC1056耐酒精能力比较

注：“—”表示不生长

实施例3粟酒裂殖酵母Scc7株与标准菌株CICC1056耐酸能力比较

将菌株Scc7和标准菌株CICC1056的种子液分别转接到pH分别为3.5、4.0、 4.5、5.0、5.5的YPD液体培养基中，置于37℃、170rpm摇瓶培养24h，稀释 10倍后测OD₆₀₀值。从表4可以看出，粟酒裂殖酵母Scc7在pH为3.5的YPD 培养基中仍能生长，而标准菌株CICC1056几乎不生长。

表4粟酒裂殖酵母Scc7株与标准菌株CICC1056耐酸能力比较

注：“—”表示不生长

实施例4.Scc7菌株发酵产乙醇能力分析

粟酒裂殖酵母Scc7株有较高的产乙醇能力。白酒液态发酵结果如表5所示，粟酒裂殖酵母Scc7株发酵乙醇产量高。28℃白酒液态发酵条件下，Scc7乙醇产量达到48.5g/L与安琪酿酒酵母相当，比标准菌株CICC1056乙醇产量高18.15％。Scc7产酒率较标准菌株高13.3％，与酿酒酵母CCTCC AY92003产酒率接近。

表5酵母菌株的白酒液态发酵实验

实施例5粟酒裂殖酵母Scc7株的发酵产风味成分能力分析

比较不同酵母菌菌株在28℃下进行白酒液态发酵实验，蒸馏酒样的风味成分气相色谱分析结果见表6。结果表明，粟酒裂殖酵母Scc7株产酸能力较强。 Scc7产乙酸、丙酸、丁酸能力分别比CICC1056菌株高132.9％、8.47％、42.3％，并能产异丁酸3.79mg/L,而标准菌株CICC1056不产。Scc7产乙酸的能力比酿酒酵母AY92003明显高。粟酒裂殖酵母Scc7还具有较强的产乙偶姻的能力，Scc7 产乙偶姻含量比标准菌株CICC1056菌株高156.5％。此外粟酒裂殖酵母Scc7杂醇油产量低：Scc7产正丙醇、异戊醇含量分别比CICC1056菌株低19.2％和6.5％。

表6酵母菌白酒液态发酵蒸馏酒样气相色谱分析结果

实施例6Scc7酿酒菌剂及其组合物的制备方法

5.1菌种活化：分别接种粟酒裂殖酵母Scc7株和酿酒酵母CCTCC AY92003于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，30℃摇床培养18-24小时；

5.2固体培养：麸皮100％，按照料水比1:1加水后装塑料盒或塑料袋，121℃灭菌35min，冷却至室温后，将活化培养的2种酵母菌液分别按10％比例接种灭菌的麸皮培养基，混合均匀，保持室温30℃左右，品温35℃左右，培养2天完毕，每隔12h搅拌混匀一次；

5.3干燥：对发酵后的酵母固体样品在35-45℃条件下进行干燥处理，当样品含水率在12％-25％之间时停止干燥。取样稀释平板测定法测得各酵母菌剂的活菌数均达到6亿/g左右。

5.4混合与包装：将含Scc7株的固体菌剂装塑料袋后封口后制成含单一菌种的酿酒菌剂；将Scc7与酿酒酵母CCTCC AY92003按活菌数比＝10:1比例混合后塑料袋后封口制成酿酒菌剂组合物。

实施例7Scc7酿酒菌剂在白酒固态发酵中的应用

采用酱香型白酒固态发酵方法，对高粱经过闷粱、蒸粱处理后，摊凉冷却至 25℃左右，水分控制在55％左右，按照高粱净重将摊凉后的高粱进行分组2500g/ 组，高温大曲按照10％(质量比)的比例进行接种，Scc7酿酒菌剂按照1×10⁶cfu/g 高粱的接种量进行接种，接种后进行高温堆积发酵，堆积结束后装瓶28℃发酵 30天后取样蒸馏。对照组为接种储存1个月大曲的样品，实验组为接种相同量的大曲同时加入按实施例5方法制备的Scc7酿酒菌剂的样品,每个实验组均做三个平行样。发酵结束后对蒸馏的样品中的醇类、酸类、酯类等成分含量进行气相色谱分析。实验结果见表7。由表7可以看出：对出酒率情况统计表明，对照组的酒精度1.64％±0.21％，含Scc7酿酒菌剂组合物活性干酵母的实验组酒精度为 2.55％±0.42％，酒醅中的酒精度比对照组提高了55.5％±0.48％。同时实验组的酒样中乙酸乙酯含量增加了43％左右，正丙醇含量降低了48.5％左右。表明大曲中接种一定量的Scc7菌剂可明显提高白酒的出酒率和白酒的品质。

表7发酵酒醅蒸馏酒样中主要成分气相分析结果

实施例8Scc7酿酒组合菌剂在提高白酒出酒率和酒品质量中的应用

8.1试验方法

将某白酒企业酿酒车间二轮蒸馏后的酒醅摊凉后按照250kg/组分堆，对照组接种储存4个月的高温大曲比例为投料量的14％，实验组接种4个月大曲比例为投料量的9.8％(减少大曲用量30％)，同时加入实施例6制备的Scc7酿酒菌剂组合物，接种比例为投料量的0.5％，替代30％大曲。接种后进行高温堆积发酵3 天，堆温达45℃后，入池发酵30d后取样蒸馏。每个处理三个平行样。发酵结束后对蒸馏的样品中的醇类、酸类、酯类等成分含量进行气相色谱分析。主要仪器：气相色谱分析仪。

8.2酒质色谱分析结果及感官品评

由表8可以看出：含Scc7酿酒菌剂组合物的实验组酒醅中酒精度可达2.5％，比对照组提高了66.7％。实验组中乙酸乙酯产量为65.4mg/L，较对照组产量了 373.9；醋嗡(乙偶姻)产量达17.5mg/L，较对照组提高了49.6％。而实验组的正丙醇和异戊醇含量分别较对照组分别降低了33％和41.9％，对改善口感作用明显。结果表明：酒醅中添加含Scc7酿酒菌剂组合物对于提高原酒出酒率和酒品质量有明显的促进作用，并可减少高温大曲用量30％。

表8发酵酒醅蒸馏酒样中各成分气相色谱分析结果

感官品评对比为：对照组酒样分数在90-95，评语是绵甜醇厚、香味较谐调、酒体较丰满；实验组酒样分数在95-100，评语为味醇优美、香味谐调、酒体丰满、回甜爽净。由于乙偶姻和乙酸乙酯等为白酒的主要香味成分含量的增加，正丙醇、异戊醇等高级醇含量的降低，表明高温大曲配合使用Scc7干酵母可以明显改善酒质，使酒中的香气更加协调，口感更佳。

Claims (8)

1.一株粟酒裂殖酵母，能用于白酒酿造，其特征在于,该菌株为粟酒裂殖酵母Scc7株Schizosaccharom pombe Scc7 ,保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2017302 。

2.一种含权利要求1中所述的粟酒裂殖酵母Scc7株的微生物菌剂，其特征在于其活性成分为粟酒裂殖酵母Scc7株菌体及其代谢产物。

3.一种含权利要求1中所述菌株的酿酒菌剂组合物。

4.根据权利要求 3中所述的酿酒菌剂组合物，其特征在于它含有下列组份（接种量）：

粟酒裂殖酵母 6x10⁸cfu/g

酿酒酵母 6x10⁷cfu/g

其中粟酒裂殖酵母为CCTCC NO:M2017302，酿酒酵母为CCTCC AY92003。

5.根据权利要求3中所述的酿酒菌剂组合物，其特征在于所述的酿酒菌剂组合物为固态菌剂。

6.制备权利要求4中所述的固态酿酒菌剂组合物的方法，包括如下步骤：

（1）菌种活化：分别接种粟酒裂殖酵母Scc7株和酿酒酵母CCTCC AY92003于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，30℃摇床培养18-24小时；

（2）固体培养：麸皮 100%，按照料水比1:1加水后装塑料盒或塑料袋，121℃灭菌35min，冷却至室温后，将活化培养的2种酵母菌液分别按10%比例接种灭菌的麸皮培养基，混合均匀，保持室温30℃左右，品温35℃左右，培养2天完毕，每隔12h搅拌混匀一次；

（3）干燥：对发酵后的酵母固体样品在35-45℃条件下进行干燥处理，当样品含水率在12%-25%之间时停止干燥，取样测定各酵母菌剂的活菌数达6x10⁸cfu/g；

（4）混合与包装：将Scc7 与酿酒酵母CCTCC AY92003按活菌数比=10:1比例混合装塑料袋后封口制成酿酒菌剂组合物。

7.权利要求1中所述的粟酒裂殖酵母Scc7株在白酒酿造中的应用。

8.权利要求3中所述的酿酒菌剂组合物在白酒酿造中的应用。