CN107158058A - 强心苷总甙的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种强心苷总甙的提取方法，包括如下步骤：（1）粗提取：以萝藦科牛角瓜属白花牛角瓜的叶、茎、根、壳、花和/或汁为原药材，将原药材干燥、粉碎成粗粉，粗粉以5‑10倍量体积浓度为50‑95%醇水溶液进行粗提取，直至提取液无色；合并提取液，减压浓缩回收溶剂，得到粗提物；（2）萃取：将粗提物分散于水中，用弱极性有机溶剂萃取，水层经过滤、冷冻干燥，得到粉末状固体；（3）分离提纯：将粉末状固体利用柱层析方法进行分离，得到强心苷总甙含量70%以上的牛角瓜提取物。本发明方法具有得到的含强心苷含量高，工艺专属性和可操作性强。步骤简单、反应收率高、原料成本低廉、适合于工业化生产等优点。

Description

强心苷总甙的提取方法
技术领域
本发明涉及一种从牛角瓜中提取强心苷总甙的方法。
背景技术
中国树棉（牛角瓜）[Calotropis gigantea (Linnaeus) WT. Aiton] 为萝藦科(Aslepiadaceae)牛角瓜属(Calotropis R. Brown)植物。树棉（牛角瓜）具有祛痰定喘咳、消炎、驱虫、解毒等功效，用于哮喘、咳嗽、皮肤病、痢疾、风湿、麻疯病、溃疡、痔疮等疾病的治疗。大量临床前和临床研究表明，树棉（牛角瓜）(C. gigantea)中的强心苷还具有广泛的抗肿瘤活性。Kiss 等以从白花牛角瓜中分离得到的活性强心苷化合物为原料通过结构改造与修饰，半人工合成得到新型强心苷UNBS1450。UNBS1450在非小细胞肺癌模型中，其药效大大强于包括紫杉醇（taxol）、伊立替康（irinotecan）和米托蒽醌（mitoxantrone）等对照药物。
同时在提取过程中取得的其他有效活性成分：甾体类化合物、三萜类化合物、黄酮苷及脂类化合物可用于哮喘咳嗽、心血管、皮肤病一类新药，可用于保健、化妆、食品添加剂。
树棉（牛角瓜）植物资源虽然用途广泛，但分布有限，主要分布在中国以及印度、印度尼西亚、老挝、马来西亚、尼泊尔、巴基斯坦、斯里兰卡、泰国、越南、非洲、南北美洲等干旱、半干旱及盐碱地区。我国主要在海南、广东、四川、云南、广西等地有零星分布。
但自2005 年以来，上海魔树生物科技有限公司胡惠民（黄惠民）等开始进行树棉（牛角瓜）的野生驯化和人工大规模种植实践。目前已经在广西等建设形成了五百亩规模的中国树棉种植科研示范基地，可逐步放大万亩或十万、百万亩人工大规模种植，为牛角瓜中提取强心苷的规模化生产和研究提供了原料和基础。
为参与《中医药“一带一路”发展规划（2016-2020年）》促进中医药原创思维与现代科技融合发展，扩大有效和中高端供给。
中国专利CN100522184A、CN101336924B、CN 101829173A和CN101336924A公开了树棉牛角瓜中的强心苷成份具有很好的抗肿瘤等药用价值，但牛角瓜中的强心苷总甙含量很少（约为0.5%-0.8%），给强心苷的提取分离和进一步研究带来了不小困难。牛角瓜中的强心苷苷元主要为卡罗托苷，并且苷元的2，3位羟基通常与4，6-二去氧-2-酮己醛糖双缩合形成二氧六环结构，如牛角瓜苷、异牛角瓜苷等。另外牛角瓜中强心苷结构中还含有一些敏感的特殊基团，使牛角瓜中强心苷的分离提取有其特殊性和专属性。
目前文献报道的牛角瓜中强心苷的提取分离，一般采用传统的强心苷提取、分离方法，这些方法在实际操作中存在提取率低、总甙含量低、成本高等问题，只适合于实验室的小规模研究，无法满足大规模的工业化批量生产。
发明内容
针对传统的强心苷总甙提取方法的上述不足，根据本发明的实施例，希望提供一种操作简便的、低成本的、适于工业化生产的从牛角瓜中提取强心苷总甙的方法。
根据实施例，本发明提供的一种强心苷总甙的提取方法，包括如下步骤：
（1）粗提取：以萝藦科牛角瓜属白花牛角瓜的叶、茎、根、壳、花和/或汁为原药材，将原药材干燥、粉碎成粗粉，粗粉以5-10倍量体积浓度为50-95%醇水溶液进行粗提取，直至提取液无色；合并提取液，减压浓缩回收溶剂，得到粗提物；
（2）萃取：将粗提物分散于水中，用弱极性有机溶剂萃取，水层经过滤、冷冻干燥，得到粉末状固体；
（3）分离提纯：将粉末状固体利用柱层析方法进行分离，得到牛角瓜提取物。
相对于现有技术，本发明所述的从牛角瓜中提取强心苷总甙的方法，是以萝藦科牛角瓜属白花牛角瓜的叶、茎、根、壳、花和汁为原药材，经粗提取、萃取、分离提纯等为基本步骤的新技术方法。
在本发明方法的粗提取步骤（1）中，是以牛角瓜的叶、茎、根、壳、花和/或汁为原药材，经干燥、粉碎成粗粉，以50-95%醇-水溶液在一定温度下进行提取，至提取液无色。合并提取液，减压浓缩回收溶剂，得到粗提物。提取方法包括浸泡法、回流提取法和渗漉法。所述的醇为甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇。提取温度为20-65℃。减压浓缩的温度控制在45℃以下。
在萃取步骤（2）中，是将粗提物分散于水中，用弱极性有机溶剂萃取，水层经过滤、冷冻干燥得到粉末状固体。所述弱极性有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正己烷、环己烷、二氯甲烷或氯仿。
在分离提纯步骤（3）中，将粉末状固体利用柱层析方法进行分离，得到牛角瓜提取物。经分析提取物中强心苷总甙含量达到70%以上。所述的柱层析方法为大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱。
相对于现有技术，随后的实施例将证明，本发明方法获得的牛角瓜提取物中强心苷总甙含量在70%以上，具有含强心苷含量高，工艺专属性和可操作性强，步骤简单，反应收率高，原料成本低廉，适合于工业化生产等优点。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修改同样落入本发明权利要求所限定的范围。
实施例1
取干燥粉碎的牛角瓜叶1kg，用8倍量的70%乙醇渗漉，将渗漉液减压浓缩回收乙醇得到提取物浓缩液。经浓缩液用水分散得到一悬浊液，用环己烷萃取该悬浊液，水层过滤、冷冻干燥得到粉末状固体。将固体用D-101大孔树脂进行柱层析，分别用水和95%乙醇洗脱。收集得到乙醇洗脱液，经减压浓缩得到牛角瓜提取物，类白色粉末固体0.52g。
经测定，类白色粉末固体中强心苷总甙含量为71.3%。
实施例2
取干燥粉碎的牛角瓜叶0.2kg，在索氏提取器中用6倍量的甲醇进行提取，至提取液无色。将提取液减压浓缩回收甲乙醇得到提取物浓缩液。经浓缩液用水分散得到一悬浊液，用环己烷萃取该悬浊液，水层过滤、冷冻干燥得到粉末状固体。将固体用D-101大孔树脂进行柱层析，分别用水和甲醇洗脱。收集得到甲醇洗脱液，经减压浓缩得到牛角瓜提取物，类白色粉末固体0.10g。
经测定，类白色粉末固体中强心苷总甙含量为70.2%。
实施例3
取干燥粉碎的牛角瓜叶1kg，用10倍量的甲醇进行加热回流提取，至提取液无色。将提取液减压浓缩回收甲乙醇得到提取物浓缩液。经浓缩液用水分散得到一悬浊液，用石油醚萃取该悬浊液，水层过滤、冷冻干燥得到粉末状固体。将固体用D-101大孔树脂进行柱层析，分别用水和甲醇洗脱。收集得到甲醇洗脱液，经减压浓缩得到牛角瓜提取物，类白色粉末固体0.46g。
经测定，类白色粉末固体中强心苷总甙含量为70.6%。
实施例4
取干燥粉碎的牛角瓜叶1kg，用8倍量的70%乙醇渗漉，将渗漉液减压浓缩回收乙醇得到提取物浓缩液。经浓缩液用水分散得到一悬浊液，用石油醚萃取该悬浊液，水层过滤、冷冻干燥得到粉末状固体。将固体用NKA-9大孔树脂进行柱层析，分别用水和95%乙醇洗脱。收集得到乙醇洗脱液，经减压浓缩得到牛角瓜提取物，类白色粉末固体0.61g。
经测定，类白色粉末固体中强心苷总甙含量为72.6%。
实施例5
取上述强心苷含量为70%以上的样品0.5g，用硅胶柱柱层析，用石油醚-乙酸乙酯进行洗脱，经减压浓缩得到纯度更高的牛角瓜提取物，类白色粉末固体0.32g。
经测定，类白色粉末固体中强心苷总甙含量为85.2%。
基于强心苷总甙含量为85.2%的提取物，进行再分离再提纯可以取得99.8%纯度的约20种强心苷单体，可用于各类肿瘤专用特效药。

Claims (7)

1.一种强心苷总甙的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）粗提取：以萝藦科牛角瓜属白花牛角瓜的叶、茎、根、壳、花和/或汁为原药材，将原药材干燥、粉碎成粗粉，粗粉以5-10倍量体积浓度为50-95%醇水溶液进行粗提取，直至提取液无色；合并提取液，减压浓缩回收溶剂，得到粗提物；
（2）萃取：将粗提物分散于水中，用弱极性有机溶剂萃取，水层经过滤、冷冻干燥，得到粉末状固体；
（3）分离提纯：将粉末状固体利用柱层析方法进行分离，得到强心苷总甙含量70%以上的牛角瓜提取物。
2.根据权利要求1所述强心苷总甙的提取方法，其特征在于，步骤（1）中的粗提取方法为浸泡法、回流提取法或渗漉法。
3.根据权利要求2所述强心苷总甙的提取方法，其特征在于，步骤（1）中所述的醇为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇。
4.根据权利要求3所述强心苷总甙的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，提取温度为20-65℃。
5.根据权利要求4所述强心苷总甙的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，减压浓缩的温度控制在45℃以下。
6.根据权利要求1-5中任一项所述强心苷总甙的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的弱极性有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正己烷、环己烷、二氯甲烷或氯仿。
7.根据权利要求1-5中任一项所述强心苷总甙的提取方法，其特征在于，步骤（3）所述的柱层析方法为大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱或反相硅胶柱色谱。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111658686A (zh) * 2020-06-10 2020-09-15 上海应用技术大学 一种提取牛角瓜中总强心苷的工艺方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101352468A (zh) * 2008-07-02 2009-01-28 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 牛角瓜及其提取物在制备抗肿瘤药物中的新用途
CN101829173A (zh) * 2010-06-01 2010-09-15 黄惠民 牛角瓜叶提取物的制备及抗肿瘤药物的应用
CN103191143A (zh) * 2013-04-11 2013-07-10 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 一种强心苷化合物的新用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101352468A (zh) * 2008-07-02 2009-01-28 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 牛角瓜及其提取物在制备抗肿瘤药物中的新用途
CN101829173A (zh) * 2010-06-01 2010-09-15 黄惠民 牛角瓜叶提取物的制备及抗肿瘤药物的应用
CN103191143A (zh) * 2013-04-11 2013-07-10 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 一种强心苷化合物的新用途

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111658686A (zh) * 2020-06-10 2020-09-15 上海应用技术大学 一种提取牛角瓜中总强心苷的工艺方法

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