CN107121507B - 一种笋壳多酚物质测定方法 - Google Patents
一种笋壳多酚物质测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107121507B CN107121507B CN201710262688.4A CN201710262688A CN107121507B CN 107121507 B CN107121507 B CN 107121507B CN 201710262688 A CN201710262688 A CN 201710262688A CN 107121507 B CN107121507 B CN 107121507B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- bamboo shoot
- polyphenol
- shoot shell
- polyphenol substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 title claims abstract description 64
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 62
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 title claims abstract description 56
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 title claims abstract description 56
- 241001330002 Bambuseae Species 0.000 title claims abstract description 56
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 title claims abstract description 56
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 title claims abstract description 56
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 12
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 4-coumaric acid Chemical compound OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 claims description 4
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 4
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 claims description 4
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 claims description 4
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 claims description 4
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 4
- JMSVCTWVEWCHDZ-UHFFFAOYSA-N syringic acid Chemical compound COC1=CC(C(O)=O)=CC(OC)=C1O JMSVCTWVEWCHDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-M 4-Hydroxycinnamate Natural products OC1=CC=C(\C=C\C([O-])=O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-M 0.000 claims description 3
- 229940090248 4-hydroxybenzoic acid Drugs 0.000 claims description 3
- DFYRUELUNQRZTB-UHFFFAOYSA-N Acetovanillone Natural products COC1=CC(C(C)=O)=CC=C1O DFYRUELUNQRZTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 claims description 3
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 claims description 2
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 claims description 2
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 claims description 2
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 claims description 2
- YIBXWXOYFGZLRU-UHFFFAOYSA-N syringic aldehyde Natural products CC12CCC(C3(CCC(=O)C(C)(C)C3CC=3)C)C=3C1(C)CCC2C1COC(C)(C)C(O)C(O)C1 YIBXWXOYFGZLRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000571 coke Substances 0.000 claims 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 61
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 7
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 6
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 6
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 6
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229930182783 neolignan Natural products 0.000 description 2
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-WYWMIBKRSA-N (-)-quinic acid Chemical compound O[C@@H]1C[C@](O)(C(O)=O)C[C@@H](O)[C@H]1O AAWZDTNXLSGCEK-WYWMIBKRSA-N 0.000 description 1
- HRGUSFBJBOKSML-UHFFFAOYSA-N 3',5'-di-O-methyltricetin Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 HRGUSFBJBOKSML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010008190 Cerebrovascular accident Diseases 0.000 description 1
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- ZUKLFFYDSALIQW-MSUKCBDUSA-N Iridoid glycoside Chemical compound [H][C@]12CC[C@H](C(O)=O)[C@@]1([H])[C@H](OC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)OC=C2 ZUKLFFYDSALIQW-MSUKCBDUSA-N 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEIZXGINFPDITQ-UHFFFAOYSA-N UNPD138008 Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1=C(OC2C(C(O)C(O)C(COC3C(C(O)C(O)C(C)O3)O)O2)O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 KEIZXGINFPDITQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical group 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 229930182489 iridoid glycoside Natural products 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIDGLYUNOUKLBM-GEBJFKNCSA-N isorhamnetin-3-O-rutinoside Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]3[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O3)O)O2)O)=C1 UIDGLYUNOUKLBM-GEBJFKNCSA-N 0.000 description 1
- BGLPQQKZNUKSAR-UHFFFAOYSA-N isorhamnetin-3-O-rutinoside Natural products COc1ccc(cc1O)C2=C(OC3OC(COCC4OC(O)C(O)C(O)C4O)C(O)C(O)C3O)C(=O)c5c(O)cc(O)cc5O2 BGLPQQKZNUKSAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 description 1
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- IEPKWJCBNGNVDF-UHFFFAOYSA-N narcissin Natural products OC1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)OC2C(C(O)C(O)C(COC3C(C(O)C(O)C(C)O3)O)O2)O)=C1 IEPKWJCBNGNVDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940079877 pyrogallol Drugs 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N rutin Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- BMCJATLPEJCACU-UHFFFAOYSA-N tricin Natural products COc1cc(OC)c(O)c(c1)C2=CC(=O)c3c(O)cc(O)cc3O2 BMCJATLPEJCACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
- G01N30/14—Preparation by elimination of some components
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种笋壳多酚物质测定方法，属于植物多酚制备检测领域。所述方法包括：(1)多酚物质提取：以笋壳干粉末为原料，超声波辅助有机溶剂浸提，获得笋壳浸提液，再经大孔树脂分离获得多酚提取液；(2)已知组分含量测定：绘制已知组分标准品浓度与超高效液相色谱峰面积之间关系的标准曲线，利用超高效液相色谱对所述多酚提取液进行分析，测得对应已知组分的峰面积，根据标准曲线计算得到已知组分的含量；(3)未知组分鉴定分析：利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱，鉴定所述多酚提取液中的其余多酚物质。本发明方法分析检测结果准确，而且操作简单、重复性好，为进一步研究植物中的多酚物质提供技术平台。
Description
技术领域
本发明涉及植物多酚制备检测领域，具体涉及一种笋壳多酚物质测定方法。
背景技术
竹子的幼茎即竹笋，因其质嫩味美，营养丰富，素有“寒土山珍”之美誉。我国作为竹子生产大国，每年有约400万吨竹笋加工，产生了大量笋壳等废弃物，除少数笋壳被加工成包装材料、中高档用纸或深加工成动物饲料外，其余都当作废料处理，既污染了环境，又造成了资源浪费。
目前涉及笋壳的研究报道较少，为了实现竹笋资源的深度转化和综合利用，首要解决的关键问题之一，就是对笋壳进行***的组分分析，探索其中最有开发利用价值的功能活性成分，进行定性和定量研究，为工艺学和功能性研究奠定基础。已有研究显示，笋壳中富含多种生物活性分子，其中以多酚、甾醇、萜类和黄酮等为主要成分，其中多酚的邻位酚羟基极易被氧化，具有很强的抗氧化活性和清除自由基的能力。研究表明多酚物质具有抗肿瘤、抗氧化、抗动脉硬化、防治冠心病与中风等心脑血管疾病以及抗菌等多种生理功能，因此其在食品、医药及化工用品方面具有极大的应用价值。
现下多酚类物质的提取方法主要包括溶剂提取、微波及超声波辅助提取、酶法提取、超临界流体萃取等。如申请公布号为CN 103585498A的专利文献公开了一种竹笋中多酚的提取和检测方法，其中利用超声波辅助有机溶剂低温提取竹笋中多酚，具体公开：取出一定量竹笋置于研钵中，加入液氮研碎，按1g竹笋加入10mL 30％丙酮进行提取，于10℃以下低温超声提取15～60min，离心取上清，即得竹笋多酚提取液；超声提取频率为40kHz，超声功率150W，提取时间为45min。
鉴于多酚易氧化的特性，合理的提取时间和温度对防止多酚结构被破坏极为关键，因此保持多酚生物活性的同时提高提取效率，建立高效、快捷、经济、实用的提取方法，并对多酚物质进行鉴定分析，为笋壳的再利用提供理论指导，是本领域技术人员需要解决的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种笋壳多酚物质测定方法，为笋壳的再利用研究提供更有效、快捷的鉴定手段。
一种笋壳多酚物质测定方法，包括：
(1)多酚物质提取：以笋壳干粉末为原料，超声波辅助有机溶剂浸提，获得笋壳浸提液，再经大孔树脂分离获得多酚提取液；
(2)已知组分含量测定：绘制已知组分标准品浓度与超高效液相色谱峰面积之间关系的标准曲线，利用超高效液相色谱对所述多酚提取液进行分析，测得对应已知组分的峰面积，根据标准曲线计算得到已知组分的含量；
(3)未知组分鉴定分析：利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱，鉴定所述多酚提取液中的其余多酚物质。
步骤(1)中，笋壳干粉末由新鲜笋壳50℃烘干后粉碎制得，为提高提取率，将粉末过280μm筛子，再加入到液料比为10～30:1的体积百分比浓度为30～70％的乙醇溶液，在30～70℃条件下超声提取10～50min，再冷却、抽滤获得多酚浸提液。
作为优选，所述有机溶剂为体积百分比为60％的乙醇溶液，与笋壳干粉末的液料比为25:1。
作为优选，浸提的温度为70℃。
作为优选，超声波辅助浸提的时间为40min。
作为优选，所述大孔树脂为大孔树脂D101。本发明研究发现，相较于其他的大孔树脂，大孔树脂D101能有效分离出浸提液中的多酚物质。
本发明根据笋壳原料中多酚物质的理化性质优化超高效液相色谱条件。作为优选，步骤(2)和(3)中，所述超高效液相色谱的梯度洗脱条件为：(1)0min，流动相A98％，流动相B 2％；(2)0.5min，流动相A 95％，流动相B 5％；(3)4min，流动相A 92％，流动相B 8％；(4)7min，流动相A 80％，流动相B 20％；(5)10min，流动相A 75％，流动相B 25％；(6)13min，流动相A 30％，流动相B 70％；(7)16min，流动相A5％，流动相B 95％；(8)17min，流动相A98％，流动相B 2％；(9)20min，流动相A98％，流动相B 2％；
其中流动相A为0.5％甲酸溶液、B相为含有0.5％甲酸的乙腈，流速0.4mL/min，柱温30℃，进样量10μL，检测器为紫外可见光，检测波长254nm。
步骤(2)中，已知组分为焦棓酸、没食子酸、绿原酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、阿魏酸、芦丁或对香豆酸中的一种或几种。
上述8种组分对应的出峰时间(min)分别为1.551、1.913、3.830、3.895、4.479、5.553、5.881、6.165。根据对应时间下的峰面积计算相应组分的含量。
步骤(3)中，质谱包括一级质谱(MS)和二级质谱(MSMS)，一级质谱条件采用负离子模式，毛细管电压-4.5kV，离子源温度550℃，喷雾器压力3.5bar，干燥气体N2压力为2.5bar，锥孔电压100V，碰撞能量10eV；二级质谱除了碰撞能量为50±20eV，其他同一级质谱；
数据采集采用全扫描模式，前体离子m/z 100-1500，产物离子m/z 50-1500。
本发明具备的有益效果：
(1)利用本发明的提取方法，可有效地从笋壳中提取到多酚物质，同时保证多酚的生物活性。
(2)利用超高效液相色谱对笋壳样品中的已知多酚组分定量，利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱对笋壳样品中其余的酚酸、黄酮和有机酸组分进行分析鉴定与推测，分析检测结果准确，而且操作简单、重复性好，为进一步研究植物中的多酚物质提供技术平台。
附图说明
图1为不同料液比对笋壳多酚提取率影响的折线图。
图2为不同乙醇体积分数对笋壳多酚提取率影响的折线图。
图3为不同提取温度对笋壳多酚提取率影响的折线图。
图4为不同超声波提取时间对笋壳多酚提取率影响的折线图。
图5为笋壳多酚的UPLC色谱图，其中(A)为笋壳多酚提取液的色谱图；(B)为标准品的色谱图。
图6为笋壳多酚的UPLC-Triple-TOF/MS质谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐释，本实施例根据发明技术方案进行实施，给出了详细的实施方式和操作步骤，但本发明的保护范围并不限于下述的实施例。
实施例1
(1)将笋壳于50℃烘干，粉碎后过0.28mm筛子。称取样品粉末，调节液料比，加入乙醇溶液，在一定温度下超声提取，冷却，抽滤。将滤液定容至50mL，静置10min，准确吸取1.0mL待测液于10mL容量瓶中，在760nm下测定吸光值，根据回归方程计算多酚质量。
本实施例中设置4个单因素实验，分别如下：
因素1：调节液料比分别为10:1、15:1、20:1、25:1、30:1，结果如图1示。
因素2：调节乙醇溶液浓度分别为30％、40％、50％、60％、70％，结果如图2示。
因素3：调节提取温度30℃、40℃、50℃、60℃、70℃，结果如图3示。
因素4：调节超声时间分别为10min、20min、30min、40min、50min，结果如图4示。
优选液料比25：1，乙醇体积分数60％，超声温度70℃，超声时间40min，笋壳多酚平均得率为8.67±0.65％。
(2)选用大孔树脂D101，准确称取1.00g预处理过的大孔树脂D101于100mL锥形瓶中，加入25mL浓度为C0(吸附前试液中多酚质量浓度)的笋壳多酚粗提液，用锡纸包裹避光密封置于振荡器中，30℃、120r/min震荡4h，充分吸附后，从上清液中取样，用福林酚法测定多酚质量浓度(C1)并计算吸附率。
将充分吸附的树脂过滤，用蒸馏水冲洗后滤于置于100mL锥形瓶中，分别加入70％的乙醇溶液25mL，在上述相同条件下解吸，从上清液中取样，用福林酚法测定多酚质量浓度(C2)并计算解吸率。
经计算其吸附量为0.397mg/g，吸附率为76.47％，解析率为15.64％。
(3)超高效液相色谱分析：色谱柱为沃特世HSS T3(1.8μm，3.0×50mm)，流动相A相为0.5％甲酸溶液、B相为含有0.5％甲酸的乙腈，流速0.4mL/min，柱温30℃，进样量10μL，检测器为紫外可见光，检测波长254nm。
色谱梯度洗脱条件：(1)0min，流动相A98％，流动相B 2％；(2)0.5min，流动相A95％，流动相B 5％；(3)4min，流动相A 92％，流动相B 8％；(4)7min，流动相A 80％，流动相B 20％；(5)10min，流动相A 75％，流动相B 25％；(6)13min，流动相A 30％，流动相B 70％；(7)16min，流动相A 5％，流动相B 95％；(8)17min，流动相A 98％，流动相B 2％；(9)20min，流动相A98％，流动相B 2％。
同时以表1中所示8种组分的标准品作超高效液相色谱分析，所述标准品的浓度已知。
UPLC分析结果如图5和表1所示。
表1笋壳多酚UPLC分析结果
(4)超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱分析
色谱条件：色谱柱为沃特世HSS T3(1.8μm，3.0×50mm)，流动相A相为0.5％甲酸溶液、B相为含有0.5％甲酸的乙腈，流速0.4mL/min，柱温30℃，进样量10μL，检测器为紫外可见光，检测波长254nm。
色谱梯度洗脱条件：(1)0min，流动相A 98％，流动相B 2％；(2)0.5min，流动相A95％，流动相B 5％；(3)4min，流动相A 92％，流动相B 8％；(4)7min，流动相A 80％，流动相B 20％；(5)10min，流动相A 75％，流动相B 25％；(6)13min，流动相A 30％，流动相B 70％；(7)16min，流动相A 5％，流动相B 95％；(8)17min，流动相A 98％，流动相B 2％；(9)20min，流动相A98％，流动相B 2％。
质谱条件：采用负离子模式检测，毛细管电压-4.5kV，离子源温度550℃，喷雾器压力3.5bar，干燥气体(N2)压力为2.5bar，锥孔电压100V，碰撞能量10eV；对于二级质谱采集模式，参数都与一级质谱相同，只除了碰撞能量为50±20eV。质谱测定数据采用全扫描模式采集，前体离子m/z 100-1500，产物离子m/z 50-1500。
UPLC-Triple-TOF/MS分析结果如图6和表2所示。
表2笋壳多酚UPLC-Triple-TOF/MS分析结果
*(P)酚酸；(F)黄酮；(O)有机酸；(N)新木脂素；(I)环烯醚萜苷
经分析，共检测出15种酚酸、7种黄酮、20种有机酸、1种新木脂素和1种环烯醚萜苷。根据保留时间和化合物碎片，与UPLC结果对比，鉴别出的酚酸有没食子酸(峰2，保留时间2.000min)、绿原酸(峰5，保留时间3.718min)、对羟基苯甲酸(峰6，保留时间3.874min)、绿原酸(峰11，保留时间4.521min)、阿魏酸(峰22，保留时间6.261min)；黄酮有对香豆酸(峰18，保留时间5.638min)、芦丁(峰21，保留时间6.001min)。此外，其余9种酚酸，其中峰3(2.96min)、峰5(3.718min)和峰7(3.293min)都在m/z为353.0882[M-H]-处显示了负离子峰，表明这三者为同分异构体；峰4(3.604min)、峰8(3.923min)、峰12(4.567min)、峰14(4.902min)、峰25(7.135min)和峰28(7.693min)都有一个去质子化的奎尼酸片段C7H11O6-(191.0561m/z)。其余5种黄酮，峰19(5.922min)在m/z 533.1331处有一个负离子峰；峰26(7.293min)在m/z547.1449[M-H]-处有一个负离子峰，且前体离子失去了C3H7O32-片段，在m/z 457.1141处形成了一个片段；峰27(7.600min)可能对应于水仙甙；峰29(7.783min)在m/z299.0563[C16H11O6]-处有一个强MS2离子，这可能来源于山奈素的功能团；峰34(11.361min)为5,7,4'-三羟基-3',5'-二甲氧基黄酮。
Claims (7)
1.一种笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，包括：
(1)多酚物质提取：以笋壳干粉末为原料，超声波辅助有机溶剂浸提，获得笋壳浸提液，再经大孔树脂分离获得多酚提取液；
(2)已知组分含量测定：绘制已知组分标准品浓度与超高效液相色谱峰面积之间关系的标准曲线，利用超高效液相色谱对所述多酚提取液进行分析，测得对应已知组分的峰面积，根据标准曲线计算得到已知组分的含量；
(3)未知组分鉴定分析：利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱，鉴定所述多酚提取液中的其余多酚物质；
所述超高效液相色谱色谱柱为沃特世HSS T3，1.8μm，3.0×50mm；梯度洗脱条件为：(1)0min，流动相A 98％，流动相B 2％；(2)0.5min，流动相A 95％，流动相B 5％；(3)4min，流动相A 92％，流动相B 8％；(4)7min，流动相A 80％，流动相B 20％；(5)10min，流动相A 75％，流动相B 25％；(6)13min，流动相A 30％，流动相B 70％；(7)16min，流动相A 5％，流动相B95％；(8)17min，流动相A 98％，流动相B 2％；(9)20min，流动相A 98％，流动相B 2％；
其中流动相A为0.5％甲酸溶液、B相为含有0.5％甲酸的乙腈，流速0.4mL/min，柱温30℃，进样量10μL，检测器为紫外可见光，检测波长254nm。
2.如权利要求1所述的笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有机溶剂为体积百分比为60％的乙醇溶液，与笋壳干粉末的液料比为25:1。
3.如权利要求1所述的笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，步骤(1)中，浸提的温度为70℃。
4.如权利要求1所述的笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，步骤(1)中，超声波辅助浸提的时间为40min。
5.如权利要求1所述的笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述大孔树脂为大孔树脂D101。
6.如权利要求1所述的笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，步骤(2)中，已知组分为焦棓酸、没食子酸、绿原酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、阿魏酸、芦丁或对香豆酸中的一种或几种。
7.如权利要求1所述的笋壳多酚物质测定方法，其特征在于，步骤(3)中，质谱包括一级质谱和二级质谱，一级质谱条件采用负离子模式，毛细管电压-4.5kV，离子源温度550℃，喷雾器压力3.5bar，干燥气体N2压力为2.5bar，锥孔电压100V，碰撞能量10eV；二级质谱除了碰撞能量为50±20eV，其他同一级质谱；
数据采集采用全扫描模式，前体离子m/z 100-1500，产物离子m/z 50-1500。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710262688.4A CN107121507B (zh) | 2017-04-20 | 2017-04-20 | 一种笋壳多酚物质测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710262688.4A CN107121507B (zh) | 2017-04-20 | 2017-04-20 | 一种笋壳多酚物质测定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107121507A CN107121507A (zh) | 2017-09-01 |
| CN107121507B true CN107121507B (zh) | 2019-08-20 |
Family
ID=59725323
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710262688.4A Active CN107121507B (zh) | 2017-04-20 | 2017-04-20 | 一种笋壳多酚物质测定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107121507B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108037195A (zh) * | 2017-11-20 | 2018-05-15 | 广西壮族自治区食品药品检验所 | 一种米粉中添加化学成分的筛查方法及*** |
| CN108982703B (zh) * | 2018-08-23 | 2021-05-14 | 中国检验检疫科学研究院 | 一种多酚类物质的液质联用检测方法 |
| CN108828111A (zh) * | 2018-10-10 | 2018-11-16 | 烟台大学 | 一种核桃仁中膳食多酚的含量测定方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103585497A (zh) * | 2013-10-23 | 2014-02-19 | 浙江农林大学 | 一种竹叶中多酚的提取和检测方法 |
| CN103585498A (zh) * | 2013-10-23 | 2014-02-19 | 浙江农林大学 | 一种竹笋中多酚的提取和检测方法 |
| CN104188007A (zh) * | 2014-06-24 | 2014-12-10 | 正安县顶箐方竹笋有限公司 | 一种竹笋饮料及其制备方法 |
| CN104792721A (zh) * | 2015-04-08 | 2015-07-22 | 国家***竹子研究开发中心 | 一种竹笋苦涩味测定方法 |
| JP2017075902A (ja) * | 2015-10-16 | 2017-04-20 | 公益財団法人科学技術交流財団 | 機器分析による残留農薬分析のための前処理方法 |
| KR20170053972A (ko) * | 2015-11-09 | 2017-05-17 | 한국식품연구원 | 영실로부터 폴리페놀 성분을 포함하는 영실 추출물을 고수율로 수득하는 방법 |
-
2017
- 2017-04-20 CN CN201710262688.4A patent/CN107121507B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103585497A (zh) * | 2013-10-23 | 2014-02-19 | 浙江农林大学 | 一种竹叶中多酚的提取和检测方法 |
| CN103585498A (zh) * | 2013-10-23 | 2014-02-19 | 浙江农林大学 | 一种竹笋中多酚的提取和检测方法 |
| CN104188007A (zh) * | 2014-06-24 | 2014-12-10 | 正安县顶箐方竹笋有限公司 | 一种竹笋饮料及其制备方法 |
| CN104792721A (zh) * | 2015-04-08 | 2015-07-22 | 国家***竹子研究开发中心 | 一种竹笋苦涩味测定方法 |
| JP2017075902A (ja) * | 2015-10-16 | 2017-04-20 | 公益財団法人科学技術交流財団 | 機器分析による残留農薬分析のための前処理方法 |
| KR20170053972A (ko) * | 2015-11-09 | 2017-05-17 | 한국식품연구원 | 영실로부터 폴리페놀 성분을 포함하는 영실 추출물을 고수율로 수득하는 방법 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| Determination of flavone C-glucosides in antioxidant of bamboo leaves (AOB) fortified foods by reversed-phase high-performance liquid chromatography with ultraviolet diode array detection;Yu Zhang等;《Journal of Chromatography A》;20051231;第1065卷;177-185 |
| HPLC-Q-TOF-MS-MS测定桑椹中多酚类物质;李辰辰等;《食品科学》;20151231;第36卷(第2期);101-104 |
| 大孔树脂分离纯化无梗五加果中的多酚类化合物;冯颖等;《保鲜与加工》;20161231;第16卷(第6期);98-102，106 |
| 大孔树脂分离纯化柚子皮多酚研究;夏昊云等;《再生资源与循环经济》;20151231;第8卷(第10期);38-40 |
| 正交实验设计优化芦笋嫩茎多酚的提取工艺;朱素英;《食品工业科技》;20131231;第34卷(第21期);224-227 |
| 神秘果种子多酚大孔树脂纯化工艺研究;马艺丹等;《食品与机械》;20160229;第32卷(第2期);139-144 |
| 超高效液相色谱法快速检测烟叶中8种多酚类化合物;史春云等;《西南农业学报》;20151231;第28卷(第3期);1322-1327 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107121507A (zh) | 2017-09-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pérez-Serradilla et al. | Microwave-assisted extraction of phenolic compounds from wine lees and spray-drying of the extract | |
| Çam et al. | Pressurised water extraction of polyphenols from pomegranate peels | |
| Liu et al. | Microwave-assisted method for simultaneous hydrolysis and extraction in obtaining ellagic acid, gallic acid and essential oil from Eucalyptus globulus leaves using Brönsted acidic ionic liquid [HO3S (CH2) 4mim] HSO4 | |
| CN103265519B (zh) | 一种分离制备杨梅叶原花色素的方法 | |
| CN107337586A (zh) | 一种从汉麻中提取纯化***二酚的方法 | |
| CN102706980B (zh) | 利用hplc测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法 | |
| CN107121507B (zh) | 一种笋壳多酚物质测定方法 | |
| CN102690208B (zh) | 一种从花椒油中提取羟基山椒素的方法 | |
| Zhang et al. | Extraction optimization by response surface methodology, purification and principal antioxidant metabolites of red pigments extracted from bayberry (Myrica rubra) pomace | |
| CN105237430A (zh) | 一种从藤椒中提取麻味物质的方法 | |
| CN105693676A (zh) | 从万寿菊中分离纯化槲皮万寿菊素的方法 | |
| CN105132172A (zh) | 一种从鸢尾根中制备烟草用鸢尾根黄酮类物质的方法 | |
| CN109730359A (zh) | 一种猪鬃草中的三萜类化合物及其制备方法与在电子烟中的应用 | |
| CN112266321A (zh) | 一种工业***中***二酚酸脱羧制备***二酚的方法 | |
| CN106645507A (zh) | 一种检测果蔬中赤霉素的快速前处理方法 | |
| CN105837546B (zh) | 一种从草豆蔻中分离纯化桤木酮、松属素、小豆蔻明、山姜素的方法 | |
| CN104163754A (zh) | 一种从花生根中提取分离高***藜芦醇的方法 | |
| CN104000935A (zh) | 一种从马铃薯皮渣中提取抗氧化酚酸的方法 | |
| CN104177460A (zh) | 一种3,5-二糖类花色苷的制备方法 | |
| CN104844550B (zh) | 一种从蛇床子中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法 | |
| CN105906687B (zh) | 一种从丹参中分离纯化多种丹参酮单体成分的方法 | |
| CN109212122A (zh) | 甜叶菊渣中四种黄酮类成分的检测方法 | |
| CN101575356A (zh) | 一种从东北红豆杉提取纯化7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的方法 | |
| CN105693675A (zh) | 一种从万寿菊中提取黄酮类化合物组分的方法 | |
| CN102942455A (zh) | 一种从桑枝中提取氧化芪三酚的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |